Pembahasan Kurva Standar
Pembahasan Kurva Standar
Kurva standar merupakan standar dari sampel yang dapat digunakan sebagai
acuan untuk sampel tersebut pada percobaan. Pembuatan kurva standar bertujuan
mengetahui hubungan antara konsentrasi larutan dengan nilai absorbansinya sehingga
konsentrasi sampel dapat diketahui. Terdapat dua metode untuk membuat kurva
standar yaitu metode grafik dan metode least square (Day dan Underwood 2002).
Pada praktikum kali ini kami membuat kurva standar yang disajikan dalam grafik
hubungan antara larutan maltose sebagai sumbu x dan absorbansi sebagai sumbu y.
Konsentrasi larutan telah ditentukan kadarnya sedangkan absorbansi dihitung dengan
alat spektrofotometer.
Spektrofotometer adalah suatu alat atau instrument untuk mengukur transmisi
atau absorben suatu sampel sebagai fungsi dari suatu panjang gelombang (Chairns
2009). Sedangkan spektrofotometri merupakan salah satu metode dalam kimia
analisis yang umum digunakan dalam menentukan komposisi suatu sampel secara
kuantitatif dan kualitatif yang didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya.
Spektrofotometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang
tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditrasmisikan atau
yang diadsorpsi.
Dalam praktikum kali ini digunakan maltose sebagai sampel dengan berbagai
konsentrasi. Lalu blanko juga dibuat untuk mengetahui nilai kosong suatu media
ataeu vessel sebelum dilakukan analisa sampel, dan nantinya dalam metode analisa
sampel hasilnya akan dikurangi dengan nilai blanko (Basset 1994).
Kurva standar yang diperoleh mempunyai persamaan y = 2.721x - 0.056
dengan koefisien korelasi 0,991. Hal tersebut didasarkan pada hasil percobaan yang
dilakukan dengan panjang gelombang absorbansi maksimum larutan maltose sebesar
540 nm, yang mana panjang gelombang tersebut digunakan untuk mengukur
absorbansi untuk membuat kurva standar.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Setelah dikurangi Blanko
Absorbansi (Kelompok A, C, E) Absorbansi (Kelompok B, D, F) Absorbansi Rata-rata
0.000 0.000 0
0.048 0.052 0.05
0.128 0.120 0.124
0.279 0.254 0.2665
0.353 0.341 0.347
0.571 0.547 0.559
0.875 0.875 0.875
0.929 0.896 0.9125
1.035 1.037 1.036
Semakin banyak jumlah zat terlarut dalam larutan maka akan mengakibatkan
konsentrasi dan absorbansinya semakin besar hal ini dapat dilihat dalam tabel hasil
pengamatan diatas. Penentuan konsentrasi dapat dilakukan melalui fungsi absorbansi
dan persamaan kurva standar.
Prinsip gula reduksi dan larutan DNS
Pada percobaan ini dapat disimpulkan bahwa semakin besar konsentrasi dari
larutan maka semakin besar pula intensitas warna yang dihasilkan, dan semakin
banyak pula gula reduksi yang mengalami oksidasi.
Penentuan panjang gelombang
Alat yang digunakan adalah spektrofotometer, yaitu suatu alat yang digunakan
untuk menentukan suatu senyawa baik secara kuantitatif maupun kualitatif dengan
mengukur transmitan ataupun absorban dari suatu cuplikan sebagai fungsi dari
konsentrasi. Spektrometer menghasilkan sinar dari spectrum dengan panjang
gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang
ditransmisikan atau diabsorbsi.
Cahaya terdiri dari bermacam-macam warna, hal ini dapat dibuktikan dengan
piringan Newton (Newton’s Disc) yang terdiri dari 7 macam warna yaitu : merah,
jingga, kuning, hijau, biru, nila dan ungu. Suatu larutan berwarna dapat menyerap
sinar pada panjang gelombang tampak (Khopkar, S.M, 2008). Intensitas yang diserap
mempunyai hubungan tertentu dengan konsentrasi.
Cahaya yang diserap oleh suatu zat berbeda dengan cahaya yang ditangkap
oleh mata manusia. Cahaya yang tampak atau cahaya yang dilihat dalam kehidupan
sehari-hari disebut warna komplementer. Misalnya suatu zat akan berwarna orange
bila menyerap warna biru dari spektrum sinar tampak dan suatu zat akan berwarna
hitam bila menyerap semua warna yang terdapat pada spektrum sinar tampak. Untuk
lebih jelasnya perhatikan tabel berikut.