LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

TEKNIK ISOLASI MIKROORGANISME

Disusun Oleh :
Nama : Devy Arum Sari

NPM : A1D017029

Kelompok : 4 (Empat)

Dosen Pengampu : 1. Dra. Kasrina, M.Si

2. Dewi Jumiarni, M.Si

Asisten Praktikum : 1. Oktaria silviani (A1D016010)

2. Vira Liza Putri P (A1D016011)
3. Silvia Rani (A1D016018)

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS BENGKULU
2020
 Metode Goresan (Streak Plate) Sebagai Salah Satu Teknik Isolasi Mikroorganisme
Untuk Mendapatkan Kultur Murni

Devy Arum Sari

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Univeristas Bengkulu
devyarum24@gmail.com

Abstrak
Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lain yang
berasal dari campuran bermacam-macam mikroba. Biakan murni diperlukan dalam berbagai
metode mikrobiologis, antara lain digunakan dalam mengidentifikasi mikroba. Dikenal
beberapa cara atau metode untuk memperoleh biakan murni dari suatu biakan campuran.
Dua diantaranya yang paling sering digunakan adalah metode cawan gores dan metode
cawan tuang. Metode goresan ini sekarang banyak digunakan, karena tidak begitu memakan
waktu, tapi dengan cara ini maka bakteri anaerob tidak dapat tumbuh. Hasil yang didapat
dari praktikum ini hanya satu kelompok yang berhasil dalam isolasi mikroorganisme ini,
yaitu pada medium NA dengan sumber bakteri dari jari tangan. Mikroorganisme yang
terlihat pun tidak terlalu jelas sehingga susah untuk diamati dan tidak dapat diamati ciri-ciri
maupun sifat-sifanya. Kemungkinan hal ini bisa disebabkan oleh beberapa faktor, misalnya
pada saat penggoresan jarum ose ke medium. Pada proses isolasi bakteri dengan metode
penggoresan diperlukan keahlian dalam menggores media agar didapatkan biakan murni
bakteri yang diinginkan, karena penggoresan yang semakin melemah pada setiap
kuadrannya akan menyaring atau mengisolasi secara tidak langsung pada jenis bakteri
tertentu sehingga metode ini akan memperoleh biakan murni pada satu titik pada kuadran
empat.
Kata kunci: Isolasi, Kultur Murni, Metode Goresan (Streak Plate).

Abstract
The principle of microbial isolation is to separate one type of microbe with other microbes
that come from a mixture of various microbes. Pure culture is needed in various
microbiological methods, including being used in identifying microbes. Several methods are
known or methods for obtaining pure culture from a mixed culture. Two of the most
frequently used are the scratch cup method and the pour cup method. This scratch method
is now widely used, because it is not very time consuming, but in this way the anaerobic
bacteria cannot grow. The results obtained from this practicum are only one group that
succeeded in isolating these microorganisms, namely the NA medium with a source of
bacteria from the fingers. Even the microorganisms that are visible are not so clear that it is
difficult to observe and cannot observe their characteristics or characteristics. This might be
caused by several factors, for example when scraping an ose needle into the medium. In the
process of isolating bacteria with the method of scratching, expertise in scratching media is
needed to obtain the pure culture of the desired bacteria, because the weakening of the
scratches in each quadrant will filter or isolate indirectly in certain types of bacteria so that
this method will obtain pure culture at one point in quadrant four.
Keywords: Isolation, Pure Culture, Streak Plate Method.
PENDAHULUAN
Populasi mikroba di alam tidak terpisah
sendiri menurut jenisnya, tetapi terdiri
dari campuran berbagai macam sel.
Populasi bakteri ini di dalam laboratorium
dapat di isolasi menjadi kultur murni yang
terdiri dari satu jenis yang dapat dipelajari
morfologinya, sifat dan kemampuan
biokimiawinya.
Pengamatan sifat-sifat seperti bentuk,
susunan, permukaan, pengkilatan dan
sebagainya dapat dilakukan dengan
pandangan biasa tanpa menggunakkan
mikroskop, pengamatan ini disebut
pengamatan makroskopi. Supaya sifat-
sifat tersebut tampak jelas, bakteri perlu
dibiakkan pada medium padat yaitu
dengan cara isolasi bakteri. Isolasi adalah
mengambil mikroorganisme yang terdapat
di alam dan menumbuhkannya dalam
suatu medium buatan. Cara isolasi bakteri
dilakukan dengan metode tuang (pour
plate), metode goresan (streak plate),
metode miring (slant culture), dan metode
tegak (stab culture).
Prinsip dari isolasi mikroba adalah
memisahkan satu jenis mikroba dengan
mikroba lain yang berasal dari campuran
bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat
dilakukan dengan menumbuhkannya
dalam media padat, sel-sel mikroba akan
membentuk koloni sel yang tetap pada
tempatnya (Ibrahim, dkk, 2015).
NA (Nutrien Agar) adalah medium yang
digunakan sebagai media pertumbuhan
bakteri. NA dibuat dengan komposisi agar-
agar yang sudah dipadatkan sehingga NA
juga bisa disebut sebagai nutrisi padat
yang digunakan untuk menumbuhkan
bakteri. Fungsi agar-agar hanya sebagai
pengental namun bukan zat makanan
pada bakteri, agar dapat mudah menjadi
padat pada suhu tertentu. Medium
Nutrien Agar adalah salah satu medium
padat yang memiliki komposisi yaitu agar-
agar yang telah dipanaskan dan mencair
dengan suhu 95°C (Rossita, dkk, 2017).
Biakan murni diperlukan dalam berbagai
metode mikrobiologis, antara lain
digunakan dalam mengidentifikasi
mikroba. Untuk mengamati ciri-ciri
kultural morfologi, fisiologi dan serologi
dibutuhkan mikroba yang berasal dari
satu spesies (Mahdiyah, 2015).
Dikenal beberapa cara atau metode untuk
memperoleh biakan murni dari suatu
biakan campuran. Dua diantaranya yang
paling sering digunakan adalah metode
cawan gores dan metode cawan tuang.
Yang didasarkan pada prinsip
pengenceran dengan maksud untuk
memperoleh spesies individu. Dengan
anggapan bahwa setiap koloni dapat
terpisah dari satu jenis sel yang dapat
diamati (Afrianto, 2004).
Metode goresan (streak plate) ini
sekarang banyak digunakan, karena tidak
begitu memakan waktu, tapi dengan cara
ini maka bakteri anaerob tidak dapat
tumbuh. Jika ujung kawat inokulasi
dibengkokkan, kemudian ujung itu setelah
disentuhkan suatu koloni lalu digesekkan
pada permukaan medium padat, maka
beberapa waktu kemudian daripada itu
(kurang lebih setelah 12 jam) akan
tampaklah koloni-koloni yang letaknya
tersebat di permukaan medium
(Dwidjoseputro, 2005).
Sifat-sifat koloni pada agar-agar miring.
Sifat ini berkisar pada bentuk dan tepi
koloni dan sifat itu dinyatakan dengan
kata-kata seperti : serupa pedang, serupa
duri, serupa tasbih, serupa titik-titik,
serupa batang dan serupa akar (Asri &
Zulaika, 2016).
Untuk menumbuhkan suatu biakan
bakteri dalam media steril sejumlah sel-sel
(inokulum) dipindahkan (diinokulasi) ke
dalam media dengan perlakuan khusus
untuk mempertahankan kemurnian dari
biakan . Dalam waktu inokulasi harus
dipijarkan di atas api segera sebelum dan
sesudah melakukan pemindahan.
Pemanasan ini menghancurkan setiap
bentuk kehidupan yang ada pada
permukaan jarum atau alat pemindah .
Bagian jarum yang dipanaskan tidak
terbatas pada bagian ujungnya saja tetapi
termasuk pula bagian bawahnya
(Mulyono, 1992).
METODE
Waktu dan Tempat
Praktikum ini dilakukan pada hari Kamis, 5
Maret 2020 pukul 13.00 – 14.40 WIB di
Laboratorium Biologi FKIP, Universitas
Bengkulu.
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada praktikum ini
diantaranya bunsen, jarum ose, dan
cawan petri. Sedangkan untuk bahan yang
HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1 : Hasil Pengamatan Mikroorganisme
menggunakan Teknik Isolasi
Sumber
No Medium Gambar
Bakteri
Jari
1 NA
tangan
Dalam praktikum isolasi ini digunakan
medium yang telah digunakan pada
praktikum-praktikum sebelumnya, yaitu
digunakan diantaranya alkohol 70%,
medium NA (Nutrien Agar) dan medum
PDA (Potato Dextrose Agar).
Cara Kerja
Metode yang digunakan dalam praktikum
ini adalah metode goresan (streak plate).
Pertama-tama disiapkan cawan petri yang
telah berisi kultur campuran bakteri (dari
percobaan sebelumnya). Disiapkan dua
cawan petri yang berisi medium NA.
Dibagi dasar petri menjadi 4 sektor.
Kemudian dipilih dua koloni yang akan
dimurnikan dan secara aseptis, pindahkan
satu koloni yang dipisahkan ke medium
NA baru yang telah disiapkan
menggunakan jarum ose menurut pola
sepert zigzag. Lalu di inkubasi selama 72
jam.
Setelah di inkubasi, pindahkan satu koloni
yang telah terpisah ke medium yang baru.
Lakukan berulang-ulang hingga diperoleh
kultur yang benar-benar murni. Di
inokulasikan kultur murni yang telah
diperoleh ke dalam medium miring
menggunakan metode gores. Kemudian
difoto proses pemurnian, dan dicatat hasil
pengamatan.
NA (Nutrien Agar). Medium yang
digunakan ini merupakan medium yang
telah berisi koloni bakteri yang
sebelumnya telah dilakukan pada
praktikum karakteristik morfologi bakteri.
Digunakannya medium NA ini karena
komposisinya yang berupa agar-agar dan
digunakan untuk menumbuhkan bakteri.
Sesuai dengan pernyataan Rossita, dkk
(2017) tentang NA dibuat dengan
komposisi agar-agar yang sudah
dipadatkan sehingga NA juga bisa disebut
sebagai nutrisi padat yang digunakan
untuk menumbuhkan bakteri. Fungsi agar-
agar hanya sebagai pengental namun
bukan zat makanan pada bakteri, agar
dapat mudah menjadi padat pada suhu
tertentu.
Karena tujuan dari praktikum ini adalah
untuk mendapatkan kultur murni dari
medium yang telah berisi koloni bakteri
tadi, maka digunakan teknik isolasi
dengan menggunakan metode goresan
(streak plate). Menurut Ibrahim, dkk
(2015) Prinsip dari isolasi mikroba adalah
memisahkan satu jenis mikroba dengan
mikroba lain yang berasal dari campuran
bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat
dilakukan dengan menumbuhkannya
dalam media padat, sel-sel mikroba akan
membentuk koloni sel yang tetap pada
tempatnya. Jadi fungsi dari isolasi ini
adalah untuk mendapatkan kultur murni
dari suatu koloni mikroorganisme agar
mudah dilakukan pengamatan sifat-sifat
setiap mikroorganisme yang ada pada
medium tadi. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Mahdiyah (2015) yaitu, Biakan
murni diperlukan dalam berbagai metode
mikrobiologis, antara lain digunakan
dalam mengidentifikasi mikroba. Untuk
mengamati ciri-ciri kultural morfologi,
fisiologi dan serologi dibutuhkan mikroba
yang berasal dari satu spesies.
Dalam praktikum isolasi mikroorganisme
ini terdapat beberapa teknik yang dapat
digunakan, diantaranya yang sering
digunakan yaitu teknik/metode goresan
(streak plate). Menurut Afrianto (2004),
Dikenal beberapa cara atau metode untuk
memperoleh biakan murni dari suatu
biakan campuran. Dua diantaranya yang
paling sering digunakan adalah metode
cawan gores dan metode cawan tuang.
Metode goresan ini menggunakan jarum
ose yang kemudian langsung digoreskan
secara zigzag ke medium yang berisi
koloni mikroorganisme untuk diambil
salah satu mikroorganisme yang dapat
dijadikan kultur murni dan dapat diamati.
Serta metode goresan ini juga tidak
memakan banyak waktu namun untuk
mikroorganisme anaerob tidak dapat
tumbuh. Sesuai dengan pernyataan
Dwidjoseputro (2005), Metode goresan
(streak plate) ini sekarang banyak
digunakan, karena tidak begitu memakan
waktu, tapi dengan cara ini maka bakteri
anaerob tidak dapat tumbuh.
Hasil yang didapat dari praktikum ini
hanya satu kelompok yang berhasil dalam
isolasi mikroorganisme ini, yaitu pada
medium NA dengan sumber bakteri dari
jari tangan. Mikroorganisme yang terlihat
pun tidak terlalu jelas sehingga susah
untuk diamati dan tidak dapat diamati ciri-
ciri maupun sifat-sifanya. Kemungkinan
hal ini bisa disebabkan oleh beberapa
faktor, misalnya pada saat penggoresan
jarum ose ke medium. Penggoresan media
yang baik dan benar akan menghasilkan
biakan murni bakteri pada satu titik koloni
pada kuadran ke empat. Karena disini
medium pada cawan petri sudah dibagi
menjadi 4 sektor, sehingga seharusnya
terdapat koloni murni yang terlihat jelas
dan dapat diamati.
PENUTUP
Simpulan
Teknik pemisahan dari suatu koloni
mikroorganisme untuk mendapatkan
kultur murni disebut teknik isolasi. Isolasi
adalah mengambil mikroorganisme yang
terdapat di alam dan menumbuhkannya
dalam suatu medium buatan. Cara isolasi
bakteri dilakukan dengan metode tuang
(pour plate), metode goresan (streak
plate), metode miring (slant culture), dan
metode tegak (stab culture). Prinsip dari
isolasi mikroba adalah memisahkan satu
jenis mikroba dengan mikroba lain yang L.). Jurnal Ilmiah
berasal dari campuran bermacam-macam Manuntung, 1(2), 159-163.
mikroba.
Pada proses isolasi bakteri dengan Mahdiyah, D. (2019). Isolasi Bakteri dari
metode penggoresan diperlukan keahlian tanah Gambut penghasil Enzim
dalam menggores media agar didapatkan protease. Jurnal
biakan murni bakteri yang diinginkan, Pharmascience, 2(2), 71-79.
karena penggoresan yang semakin
melemah pada setiap kuadrannya akan Mulyono, J. 1992. Teknologi Fermentasi.
menyaring atau mengisolasi secara tidak Bogor: ITB
langsung pada jenis bakteri tertentu
sehingga metode ini akan memperoleh Rossita, A.S., K. Munandar., S.
biakan murni pada satu titik pada kuadran Komarayanti. 2017. Komparasi
empat. media NA pabrikan dengan NA
modifikasi untuk media
Saran pertumbuhan bakteri. Jurnal
Dalam pelaksanaan praktikum, sebaiknya Biologi, 4(1), 71-76
lebih memperhatikan dan lebih teliti lagi
dalam setiap metode yang dilakukan,
supaya hasilnya bisa sesuai dengan yang
diharapkan. Pada setiap metode yang
digunakan juga harus selalu
memperhatikan kesterilan lingkungan,
media, dan alat agar tidak terjadi
kontaminasi dari luar (udara).

DAFTAR PUSTAKA
Afrianto, L. 2004. Menghitung Mikroba
Pada Bahan Makanan,
Cakrawala (Suplemen Pikiran
Rakyat Untuk Iptek). Bandung:
Farmasi FMIPA ITB
Asri, A. C., & Zulaika, E. (2016). Sinergisme
antar isolat Azotobacter yang
dikonsorsiumkan. Jurnal Sains
dan Seni ITS, 5(2).

Dwidjoseputro. 2005. Dasar-Dasar

Mikrobiologi. Yogjakarta:
Djambatan.

Ibrahim, A., Fridayanti, A., & Delvia, F.

(2017). Isolasi dan identifikasi
bakteri asam laktat (BAL) dari
buah mangga (Mangifera indica
 LAMPIRAN

GAMBAR DAN KETERANGAN

Pemindahan Media kecawan Petri

Pencairan Media

Proses menggores Media

Proses finishing dan siap diinkubasi