Mikrobiologi Umum September 2019

ISOLASI, PEMURNIAN DAN IDENTITAS MORFOLOGI JAMUR DARI

KENTANG (Solanum tuberosum L.)

Zulkifli Abdul Malik1, Iis Afrisa Hamid2, Rahmau Udita Surya Aradea Putri3,
Safatilu4, Yolanda Liambo Tamallun5.

Program Studi Kimia

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Halu Oleo
Jl. H.E.A. Mokodompit Kendari, Sulawesi Tenggara, 93232, Indonesia
*email: zulkifliabdulmalik@gmail.com

Abstrak
Telah dilakukan isolasi, identifikasi dan pemurnian jamur dari kentang.
Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui jamur endofit yang terdapat pada
kentang. Kentang yang telah didiamkan beberapa hari hingga ditumbuhi jamur
diisolasi dan diidentifikasi di Laboratorium Biokimia dan Mikrobiologi, Jurusan
Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Halu Oleo,
Kendari. Pengamatan secara morfologis baik secara makroskopis maupun secara
mikroskopis dilakukan untuk mengidentifikasi dan mengetahui karakter yang
dimiliki isolat jamur yang diperoleh. Metode yang digunakan dalam penelitian ini
yakni metode eksplorasi dan eksperimen. Eksplorasi jamur pada kentang yang di
ambil dari beberapa produsen atau penjual sayur keliling di sekitar kampus UHO.
Eksperimen meliputi isolasi jamur yang diperoleh dari kentang yang telah
didiamkan beberapa hari pada media PDA.
Kata Kunci: Kentang, Jamur, Phytophthora infestans,

PENDAHULUAN
Kentang merupakan bahan
pangan utama keempat di dunia,
setelah gandum, jagung dan padi. Di
Indonesia, kentang (Solanum
tuberosum L.) termasuk salah satu
bahan pangan alternatif yang mulai
dikembangkan pada bidang pertanian
dan banyak digunakan sebagai bahan
baku dalam industri olahan makanan
(Rubatzky dan Yamaguci, 1998;
Fuglie, 2000; Samadi, 2007). Umbi
kentang bisa dijadikan bahan pangan
karena mengandung karbohidrat,
mineral, kalori dan vitamin cukup
tinggi yang dapat menggantikan
bahan pangan karbohidrat yang
berasal dari beras, gandum atau
jagung untuk memenuhi kebutuhan
pangan yang sudah populer di dunia
(Cahyono, 1996).
Peningkatan permintaan akan
kentang ini tidak diimbangi dengan
produksinya. Menurut Badan Pusat
Statistika (2013), dalam kurun waktu
dari tahun 2009-2011 produksi
kentang di Indonesia mengalami
penurunan baik dari produksi dan
produktivitasnya. Hal ini disebabkan
oleh beberapa faktor diantaranya
cuaca kurang mendukung, mutu benih
yang rendah, teknik budidaya yang
tidak sesuai serta organisme
pengganggu tanaman (OPT). Dari
beberapa faktor kendala, faktor
organisme pengganggu tanaman yang
paling berpengaruh menurunnya
 September 2019
produksi tanaman khususnya penyakit
tanaman.
Jamur adalah organisme yang
dapat bertahan hidup pada berbagai
lingkungan dengan media yang
berbeda-beda, serta memperoleh
makanannya dari media tempat jamur
tersebut tumbuh. Jamur juga dapat
hidup pada sisa tumbuhan atau hidup
melekat pada organisme lain. Jamur
memiliki kemampuan dan fungsi
yang berbeda-beda sesuai dengan
lingkungan yang ditinggalinya. Jamur
merupakan organisme eukariotik yang
digolongkan ke dalam kelompok
cendawan sejati. Dinding sel fungi
terdiri atas kitin, sel fungi tidak
mengandung klorofil. Fungi
mendapat makanan secara heterotrof
dengan mengambil makanan dari
bahan organik. Bahan organik di
sekitar tumbuhnya diubah menjadi
molekul sederhana dan diserap
langsung oleh hifa (Hapsari, 2014).
Faktor yang mempengaruhi
tumbuhnya jamur pada umbi kentang
diantaranya adalah suhu. Suhu
optimum untuk pertumbuhan jamur
berkisar antara 20-280C. Phytopthora
infestans mempunyai suhu tumbuh
10-25°C dan suhu optimum 18-20°C.
Jamur Fusarium oxysporum
mempunyai suhu tumbuh 21-33°C
dengan suhu optimum 28°C. Jamur
Aspergillus niger tumbuh pada suhu
optimum 35-37°C, minimum 6-8°C
dan maksimum 45-57°C. Jamur
Alternaria solani Sor. mempunyai
suhu tumbuh optimum 26,1°C dengan
suhu maksimum 34,5°C (Rahayu
dkk., 2015)
METODE PENELITIAN
Mikrobiologi Umum 2
A. Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan
pada bulan September - Desember
2019, bertempat di Laboratorium
Biokimia dan Bioteknologi, Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam, Universitas Halu Oleo,
Kendari, Sulawesi Tenggara. .
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Alat-alat yang digunakan pada
penelitian ini yaitu : cawan petri,
jarum inokulasi (ose), pipet tetes,
mikropipet, gelas erlenmeyer, gelas
ukur, timbangan analitik, batang
pengaduk, batang penyebar, autoklaf,
tabung reaksi, rak tabung reaksi,
hotplate, inkubator, lampu bunsen,
sentrifuse, tip, kaca objek, kaca
penutup, mikroskop, kamera digital,
tissu, plastik wrap, aluminium foil,
kertas saring whatman, botol gelap,
botol vial kecil, kain kasa, kapas
pembersih, lap halus, koloni conter
dan alat tulis.
2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan
pada praktikum ini adalah jamur pada
kentang, susu ultra milk low fat, PDA
(Potato Dextrosa Agar) padat, PDA
semi padat, PDB (Potato Dextrose
Brought), akuades (H2O), natrium
klorida (NaCl) 0,9%, alkohol,
spiritus, kertas label dan kasa.
C. Prosedur Kerja
1. Preparasi Sampel
Sampel kentang dikupas
kulitnya dan disimpan hingga
berjamur. Setelah berjamur dilakukan
proses isolasi.
2. Pembuatan Media
 September 2019
Kentang yang telah disortir dan
dikupas, dipotong berbentuk dadu dan
dipanaskan hingga diperoleh ekstrak
kentang. Ekstrak tersebut diambil
sebanyak 250 mL kemudian
ditambahkan 20 gram gula dan 6,25
gram agar-agar. Dipanaskan di atas
hot plate hingga larut. Selanjutnya
media ditutup dengan sumbat dan
disterilkan menggunakan autoclave
dengan suhu 121oC. Ditunggu hingga
hangat. Media kemudian dituang
kedalam cawan petri steril sebanyak
15 mL dan dipadatkan /didinginkan.
3. Isolasi dan Pemurnian Jamur
Isolasi jamur dilakukan dengan
cara kentang yang telah dikupas
dibungkus menggunakan aluminium
foil kemudian diamkan hingga
berjamur. Setelah itu kentang yang
talah berjamur akan ditumbuhkan
pada media PDA yang berada dalam
cawan petri dan di inkubasi pada suhu
ruang.
4. Pemurnian Jamur Kentang
Pemurnian jamur dilakukan
dengan agar miring, dengan cara
media PDA (Potato Dextro Agar)
padat dipanaskan hingga mencair,
dimasukkan 5 mL dalam tabung
reaksi yang sudah disterilisasi sampai
memadat, setelah itu diambil 1 koloni
jamur (satu ose) dari inokulum dan
dimasukkan dalam media miring
secara zig zag, ditutup dengan sumbat
yang telah dibuat dan di inkubasi
6. Uji Morfologi
Pengamatan morfologi
dilakukan setelah mendapatkan
biakan murni. Pengamatan
makroskopis meliputi bentuk, warna
Mikrobiologi Umum 3
dan tepian jamur. Permukaan
morfologi dapat dilihat dari samping,
dan tepi morflogi dapat dilihat dari
atas cawan.
Kaca objek yang digunakan
untuk pewarnaan Gram disterilkan
dengan alkohol 70%. Satu isolat
jamur diambil dan dioleskan di atas
kaca objek, kemudian difiksasi
beberapa kali pada api bunsen. Isolat
jamur ditetesi dua tetes kristal violet
dan dibiarkan selama satu menit.
Isolat jamur dicuci dengan akuades
dan dikeringkan. Kemudian isolat
ditetesi iodin, dibiarkan selama satu
menit, kemudian dicuci dengan
akuades dan dikeringkan. Isolat jamur
ditetesi alkohol 95% secara perlahan-
lahan selama 30 detik, kemudian
dicuci dengan akuades dan
dikeringkan. Isolat ditetesi methyl
oranye secara perlahan-lahan selama
30 detik dan dicuci dengan akuades
lalu dikeringkan. Isolat bakteri yang
telah diwarnai, selanjutnya diamati
dengan menggunakan mikroskop
pada pembesaran 100x. Pengamatan
meliputi warna dan bentuk sel bakteri.
Bakteri positif ditandai dengan warna
ungu karena mampu mengikat kristal
violet. Bakteri Gram negatif ditandai
dengan terbentuknya warna merah
muda karena tidak mampu mengikat
warna kristal violet dan hanya
terwarnai oleh methyl oranye.
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Hasil Isolasi dan Pemurnian
Jamur Dari Kentang
Jamur pada kentang diisolasi dan
hasil dari isolasi jamur dari kentang
dapat dilihat pada gambar cawan petri
tempat biakan jamur terbaik dari
 September 2019
beberapa cawan petri lainnya yang
dijadikan sebagai tempat biakan
jamur di bawah ini.
Gambar 1 Hasil isolasi jamur pada
kentang
Pertumbuhan jamur pada media
karena tercukupinya sumber nutrien
berupa karbohidrat dan nitrogen yang
tinggi yang digunakan jamur sebagai
konstituen kimia penyusun sel.
3.Hasil Uji Morfologi dari Jamur
Kentang
Jamur hasil biakan pada media
miring hasil peremajaan berhasil
tumbuh dengan baik pada media
PDA. Morfologi yang diamati pada
penelitian ini adalah morfologi koloni
dan morfologi sel. Morfologi koloni
diamati secara makroskopik meliputi
bentuk, tepian dan warna. Morfologi
sel diamati secara mikroskopik
meliputi bentuk sel dan pewarnaan.
Karakterisasi dapat dilakukan
berdasarkan sifat morfologi koloni,
morfologi sel dan biokimia (Purwoko,
2007). Hasil morfologi yang dapat
dilihat pada Gambar 2.
Mikrobiologi Umum 4
Gambar 2. Hasil Uji Morfologi
Berdasarkan Gambar 2 hasil dari
pengamatan mikroskop yang
diperoleh menunjukkan bahwa isolat
jamur memiliki morfologi yang agak
sulit terlihat, namun dapat terlihat
beberapa bentuk morfologi yang
terdapat pada gambar seperti garis-
garis tipis dan terlihat seperti adanya
koloni berwarna abu-abu kecoklatan.
KESIMPULAN
1. Hasil biakan jamur dilakukan
dengan pemvariasian proses
pengenceran, dimana sebagai hasil
akurat diambil tiga perwakilan
hasil pengenceran yakni pada
pengenceran 10-1, 10-3 dan 10-5
yang telah diinkubasi selama 24
jam
2. Isolasi jamur dari kentang dapat
dilakukan pada media PDA dengan
metode sebar dan metode tabur.
3. hasil dari pengamatan mikroskop
yang diperoleh menunjukkan
bahwa isolat jamur memiliki
morfologi yang agak sulit terlihat,
namun dapat terlihat beberapa
bentuk morfologi yang terdapat
pada gambar seperti garis-garis
tipis dan terlihat seperti adanya
koloni berwarna abu-abu
kecoklatan.
4. Disarankan agar proses isolasi
jamur dilakukan dengan hati-hati
dan sesuai prosedur untuk
menghasilkan jamur yang murni
dan sesuai dengan keinginan. Saat
proses isolasi, disarankan
praktikan dalam keadaan steril
untuk menghindari kontaminasi
dengan mikroorganisme.
 September 2019 Mikrobiologi Umum 5

UCAPAN TERIMAKASIH Rubatsky V. E., dan Yamaguchi.

Penulis mengucapkan terima 1998. Sayuran Dunia 2. Prinsip,
kasih kepada orang tua atas Produksi dan Gizi. Bogor :
dukungan, doa, perjuangan dan Institut Pertanian Bogor.
semangatnya, kemudian kepada para
sahabat dan kawan sekelompok
penulis dalam praktikum
Mikrobiologi Umum ini yang telah
banyak membantu dan mengerti
keadaan penulis serta kepada pihak
laboratorium Kimia Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam yang telah mendukung proses
penyusunan jurnal ini. Penulis juga
mengucapkan terima kasih yang
sebesar-besarnya kepada sahabat
penulis atas nama Irham yang telah
menemani penulis selama satu malam
penuh dalam menyelesaikan jurnal
ini. Tanpa bantuan dari berbagai
pihak, penulis tentunya tidak akan
dapat menyelesaikan jurnal ini
dengan baik.
DAFTAR PUSTAKA
Cahyono B., 1996. Budidaya Intensif
Tanaman Kentang. CV Aneka.
Solo
Hapsari, W. E. 2014. Pertumbuhan
dan Produktivitas Jamur Tiram
Putih (Pleurotus ostreatus) pada
Media Serbuk Gergaji Kayu Jati
(Tectona grandis L) dengan
Penambahan Sekam Padi (Oryza
sativa). Skripsi Sarjana
Pendidikan Biologi. Fakultas
Keguruan dan Ilmu Pendidikan,
Universitas Muhammadiyah
Surakarta. Surakarta.
Purwoko T. 2007. Fisiologi Mikroba.
Bumi Aksara. Jakarta.
Rahayu S., Fitri N., dan Yuliana P.
2015. Jamur Kontaminan Pada
Umbi Kentang. Jurnal Ilmiah
Biologi. 3(1).