Jurnal Mikrobiologi Vol. 5 No.

14 Desember 2019
ISSN 2443-1230

Isolasi, Pemurnian dan Daya Aktivitas Antimikroba Ekstrak Rimpang Lengkuas

dan Amoxcillin terhadap Pertumbuhan Jamur Aspergillus sp

Oleh:

Nurul Hasana Akmar, Nur Amalia, Regita Dwi Cahyani, Bikra Ali Akbar
Program Studi Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Halu Oleo
Jl. H.E.A. Mokodompit Kendari, Sulawesi Tenggara, 93232, Indonesia
*email: nurulhasanaakmar@gmail.com

Abstrak
Banyak jenis roti yang beredar di pasaran, salah satunya adalah roti tawar tepung
terigu yang menjadi bahan dasar dalam pembuatan roti tawar mengandung pati dalam
jumlah yang relatif tinggi. Pati pada bahan dasar pembuatan roti dihidrolisis menjadi gula
sederhana oleh mikroorganisme jamur karena gula sederhana merupakan sumber nutrisi
utama bagi mikroorganisme jamur. Jamur yang terdapat pada roti basi adalah jamur
Aspergillus sp, kemungkinan besar banyak jenis Aspergillus sp juga dapat hidup pada roti
tawar. Aspergillus sp bersifat saprofit atau jamur pengurai. Sehingga diperlukan suatu zat
yang dapat menghambat pertumbuhan dari jamur Aspergillus sp salah satunya adalah
ekstrak rimpang rimpang lengkuas. Rimpang rimpang lengkuas mengandung senyawa
golongan flavonoid, fenol dan terpenoid. Amoksisilin merupakan antimikroba β-lactam
yang berspektrum luas dan sering digunakan untuk mengobati berbagai penyakit infeksi
yang disebabkan oleh bakteri dan jamuantimikroba dilakukan dengan teknik inkubasi.
Metode isolasi pemurnian dan Isolasi jamur dari roti tawar dapat dilakukan pada media
PDA dengan metode sebar dan metode tabur. Jenis jamur yang tumbuh pada roti tawar
adalah Aspergillus sp. Uji aktivitas antimikroba ekstrak rimpang rimpang rimpang
lengkuas tidak dapat menghambat pertumbuhan jamur karena tidak terbentuk zona bening
disekitar daerah sumur

Kata Kunci: Antimikroba, Rimpang lengkuas, Amoxicillin, Jamur, Aspergillus sp.

PENDAHULUAN
Pangan yang cukup banyak
dikonsumsi masyarakat sebagai
makanan kudapan sekarang adalah roti.
Roti digemari karena rasanya yang lezat
disamping nilai gizinya yang baik.
Banyak jenis roti yang beredar di
pasaran, salah satunya adalah roti tawar
yang sering digunakan sebagai menu
sarapan pagi sebagian masyarakat
Indonesia. Menurut Kusuma (2008),
tepung terigu yang menjadi bahan dasar
dalam pembuatan roti tawar
mengandung pati dalam jumlah yang
relatif tinggi. Pati pada bahan dasar
pembuatan roti dihidrolisis menjadi gula
sederhana oleh mikroorganisme jamur
karena gula sederhana merupakan
sumber nutrisi utama bagi
mikroorganisme jamur.
Jamur merupakan organisme
eukariotik yang digolongkan ke dalam
kelompok cendawan sejati. Dinding sel
fungi terdiri atas kitin, sel fungi tidak
mengandung klorofil. Fungi mendapat
makanan secara heterotrof dengan
mengambil makanan dari bahan organik.
Bahan organik di sekitar tumbuhnya
diubah menjadi molekul sederhana dan
diserap langsung oleh hifa (Hapsari,
2014). Jamur yang terdapat pada roti
basi adalah jamur Rhizopus stolonifer,
Penicillium sp, Mucor sp dan
Geotrichum sp serta Aspergillus spsp,
kemungkinan besar banyak jenis

Univeritas Halu Oleo, Kendari, Desember 2019 1

Jurnal Mikrobiologi Vol. 5 No. 14 Desember 2019
Aspergillus spjuga dapat hidup pada roti
tawar.
Aspergillus sp memiliki daerah
penyebaran paling luas serta berlimpah
di alam, selain itu jenis kapang ini juga
merupakan kontaminan umum pada
berbagai substrat di daerah tropis
maupun subtropis (Mizana dkk., 2016).
Oleh karena itu, kemungkinan banyak
jenis jamur Aspergillus sp juga dapat
hidup pada roti tawar yang dapat
mengakibatkan pembusukan pada roti
tawar karena Aspergillus sp bersifat
saprofit atau jamur pengurai. Sehingga
diperlukan suatu zat yang dapat
menghambat pertumbuhan dari jamur
Aspergillus sp salah satunya adalah
ekstrak rimpang lengkuas.
Rimpang lengkuas mengandung
senyawa golongan flavonoid, fenol dan
terpenoid. Rimpang lengkuas
mengandung kurang lebih 1% minyak
atsiri berwarna kuning kehijauan yang
terutama terdiri atas 48% metil sinamat,
20-30% sineol, eugenol, 1% kamfer,
seskuiterpen, dan galangin (Yulia dkk.,
2015). Minyak atsiri dari rimpang
rimpang lengkuas dapat menghambat
pertumbuhan jamur. Selain antimikroba
dari ekstrak dapat pula diperoleh dari
hasil sintesis salah satunya adalah
Amoxicillin
Gambar 1. Struktur Amoxcillin (Kaur
dkk., 2011).
Antimikroba Amoxcillin sebagai
jenis antibiotik golongan Beta Laktam
(β- Lactam) yang mempunyai
mekanisme kerja yaitu dengan
menghambat sintesis dinding sel bakteri
dengan cara mengikat satu atau lebih
sehingga menyebabkan penghambatan
pada tahapan akhir transpeptidase
sintesis peptidoglikan dalam dinding sel
bakteri yang mengakibatkan biosintesis
Univeritas Halu Oleo, Kendari, Desember 2019
ISSN 2443-1230
dinding sel terhambat dan sel bakteri
menjadi pecah (Suheri dkk., 2012).
METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada
bulan September-Desember 2019,
bertempat di Laboratorium Biokimia
dan Bioteknologi, Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam,
Universitas Halu Oleo, Kendari,
Sulawesi Tenggara.
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam
praktikum ini adalah erlenmeyer, gelas
ukur, gelas kimia, autoclav, cawan petri,
pinset, pipet mikro, pipet tetes, kawat
ose, bunsen, hotplate, oven, timbangan
analitik, Vortex, lemari pendingin,
valkon, sentrifugator, botol vial dan
botol gelap.
2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan
pada praktikum ini adalah roti tawar,
PDA (Potato Dextrosa Agar) padat,
PDA semi padat, PDB (Potato Dextrose
Brought), akuades (H2O), natrium
klorida (NaCl) 0,9%, alkohol, spiritus,
rimpang rimpang lengkuas, ampisilin
(C16H19N3O4S), aluminium foil, tisu,
plastic wrap, kapas, kertas label dan
kasa.
C. Prosedur Kerja
1. Preparasi Sampel
Sampel roti tawar disimpan
hingga berjamur. Setelah berjamur
dilakukan proses isolasi.
2. Isolasi Jamur Roti
Teknik atau metode isolasi
terdiri atas beberapa metode yakni
metode tabur (spread plate) sebagai
teknik menanam dengan menyebarkan
suspensi di permukaan agar diperoleh
kultur murni, metode tuang (pour plate)
memerlukan agar yang belum padat (>
45oC) untuk dituang bersama suspense
mikroba ke dalam cawan petri lalu
dihomogenkan dan dibiarkan memadat
dan metode gores (streak) dimana
penggoresan yang sempurna akan
menghasilkan koloni yang terpisah.
2
Jurnal Mikrobiologi Vol. 5 No. 14 Desember 2019
Metode isolasi yang digunakan
pada praktikum ini adalah metode tabur
karena isolasi mikroba yang digunakan
berasal dari substrat padat.
Metode tubur (spread plate)
dilakukan dengan cara roti yang telah
berjamur diambil sedikit sebanyak 0,5
gram kemudian dimasukkan dalam
cawan petri kosong kemudian cawan
petri ditambahkan medium Potato
Dextrosa Agar (PDA) sebanyak 15 mL
diaduk hingga homogen, memadat dan
diinkubasi selama dua kali 24 jam.
Koloni jamur yang tumbuh
teridentifikasi sebagai jamur Aspergillus
sp.
3. Permurnian Jamur
Pemurnian jamur dilalukan
dengan metode miring, dengan cara
media PDA (Potato Dextro Agar) padat
dipanaskan, dimasukkan 5 mL dalam
tabung reaksi yang sudah disterilisasi
sampai memadat, setelah itu diambil 1
koloni jamur (satu ose) dari inokulum
dan dimasukkan dalam media miring
secara zig zag, ditutup dengan sumbat
yang telah dibuat dan di inkubasi
4. Pembuatan larutan Antimikroba
a. Ekstraksi Rimpang Lengkuas
Rimpang lengkuas yang sudah
dicuci bersih dipotong-potong kecil.
Sebanyak 200 gram rimpang lengkuas
kemudian ditambah dengan akuades
sebanyak 250 mL, kemudian dipanaskan
di atas penangas air sampai volume
menjadi 100 mL. Ekstrak disaring
dengan kertas saring, dibuat larutan
ekstrak rimpang lengkuas dengan
konsentrasi 100%, 75%, 50% dan 25%
disimpan dalam masing-masing botol
vial.
b. Pembuatan Larutan Ampisilin
10%
Kontrol positif yang digunakan
adalah ampisilin 10% yang dibuat
dengan melarutkan 5 gram ampisilin
dalam 50 mL akuades.
5. Uji Aktivitas Antijamur
Pengujian aktivitas antijamur
dilakukan dengan metode difusi agar
menggunakan metode lubang sumuran
(Kirby bauer). Memasukkan sebanyak
Univeritas Halu Oleo, Kendari, Desember 2019
ISSN 2443-1230
15 mL media PDA padat dalam masing-
masing cawan petri sebagai base layer,
dibuat lubang sumuran menggunakan
pencadang dengan diamter 8,81 mm,
dengan cara disusun dalam media PDA
padat yang berisi base layer, pada
cawan petri pertama dususun 2 sumuran
sebagai tempat kontrol positif
(amoxcillin) dan negatif (akuades) dan
dibiarkan sampai memadat. Serta cawan
perti kedua berisi empat sumuran untuk
masing-masing ekstrak dan diberi label.
Selanjutnya 900 µ NaCl
dimasukkan dalam tabung pengencer
dan ditambahkan isolat sebanyak 1 ose
kedalam tabung dan difortex untuk
membuat suspensi jamur, kemudian
sebanyak 200 µ suspensi jamur
dimasukkan dalam media semi padat,
dituang pada masing-masing cawan petri
yang berisi media PDA base layer
sampai mengeras dan cabut
sumurannya. Cawan petri pertama
sebanyak satu tetes kontrol positif
(amoxcillin) dan negatif (akuades)
dimasukkan pada cawan petri serta
cawan pertri kedua sebanyak satu tetes
ekstrak rimpang rimpang rimpang
lengkuas konsentrasi 100%, 75%, 50%
dan 25%. Diinkubasi selama 48 jam.
Setelah 24 jam diukur jarak
diameter zona hambat, yaitu zona
bening yang terbentuk di sekitar jamur
menggunakan penggaris sentimeter.
Pengukuran zona hambat dilakukan
menggunakan penggaris dengan cara
membalik cawan petri dan mengukur
diameter daerah jernih. Terdapat daerah
jernih di sekeliling media pertumbuhan
bakteri uji yang tidak ditumbuhi bakteri.
Diameter zona hambat diukur dalam
satuan millimeter.
Zona Hambat = Diameter zona bening
– Diameter sumuran atau koloni/
Diameter sumuran atau koloni.
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Isolasi Jamur Aspergillus sp
Sampel roti tawar pada
praktikum ini diperoleh di pasar
Anduonohu, Kendari. Isolasi jamur
dilakukan melalui penanaman jamur
untuk mendapat isolat jamur. Hasil
3
Jurnal Mikrobiologi Vol. 5 No. 14 Desember 2019
ISSN 2443-1230

praktikum menunjukkan bahwa jamur adalah zona bening atau zona hambat.
dari roti tawar dapat tumbuh pada media Zona bening merupakan zona hambatan
PDA setalah inkubasi selama 48 jam. pada kepekaan jamur, dimana semaki n
Jamur yang tumbuh pada media luas zona bening semakin bagus daya
disimpulkan sebagai jamur Aspirgellus antijamur. Faktor lain yang
sp. mempengaruhi perbedaan zona hambat
yaitu temperatur inkubasi, waktu
pemasangan dan jarak sumuran
antimikroba (Firdaus dkk., 2017).
Menurut Puthera dkk (2007),
respon hambatan pertumbuhan jamur
diklasifikasikan menjadi:
Diameter Zona Respon hambatan
bening pertumbuhan
> 2 cm Sangat kuat
1,6 – 2 cm Kuat
1 – 1,5 cm Sedang
< 1 cm Lemah
Tabel 1 Respon hambatan pertumbuhan
Gambar 2 Koloni Jamur pada inokulum jamur.
Gambar diatas merupakan koloni-koloni
jamur yang terbentuk pada media
inokulum dari hasil isolasi roti tawar
dengan metode tabur.
Pertumbuhan jamur pada media
karena tercukupinya sumber nutrien
berupa karbohidrat dan nitrogen yang
tinggi yang digunakan jamur sebagai
konstituen kimia penyusun sel. Isolat
jamur digunakan untuk uji antimikroba
dan uji lainnya.
2. Pemurnian Jamur Aspergillus sp
Pemurnian atau peremajaan
jamur dilakukan dengan media agar Gambar 3. Zona Bening Ekstrak
miring dengan tujuan untuk rimpang lengkuas dan Masing-masing
menginokulasi jamur Aspirgellus sp kontrol.
dengan cara menggoreskan pada Berdasarkan praktikum yang
permukaan media agar miring. Alat telah dilakukan pada ekstrak rimpang
pengambilan satu koloni jamur lengkuas, Amoxcillin dan akuades
menggunakan kawat ose (satu ose) terhadap pertumbuhan jamur
jamur dimasukkan dalam media miring Aspergillus sp, maka diperoleh hasil
dan setelah diinkubasi terbentuklah sesuai tabel berikut :
jamur berwarna hijau kuning Jarak Zona Daya
kecoklatan. Antimikroba Bening Hambat
3. Uji Efektivitas Antijamur (cm)
Parameter yang digunakan Amoxcillin 4,1 cm 3,1
dalam praktikum ini adalah daya hambat Akuades 0 0
pertumbuhan jamur Aspergillus sp. dari Lengkuas 1,1 0,1
roti tawar pada inokulum yang diberikan 100%
beberapa antimikroba seperti kontrol Lengkuas 0 0
positif (Amoxcillin) dan kontrol negatif 75%
(akuades) serta ekstrak rimpang Lengkuas 0 0
lengkuas. Praktikum ini yang diamati 50%

Univeritas Halu Oleo, Kendari, Desember 2019 4

Jurnal Mikrobiologi Vol. 5 No. 14 Desember 2019
ISSN 2443-1230

Lengkuas 0 0 pertumbuhan jamur Aspergillus spsp

25% tersebut.
Tabel 1 Jarak zona bening dan daya KESIMPULAN
hambat jamur Aspergillu sp 1. Isolasi jamur dari roti tawar dapat
Hasil yang diperoleh pada dilakukan pada media PDA dengan
praktikum ini pada cawan petri satu metode sebar dan metode tabur. Jenis
yang diuji menggunakan kontrol positif jamur yang tumbuh pada roti tawar
dalam uji ini adalah amoxcillin 10% adalah Aspergillus spsp.
yang dapat membentuk zona bening 2. Uji aktivitas antimikroba ekstrak
paling lebar yakni 4,1 cm dengan daya rimpang rimpang rimpang lengkuas
hambat 3,1 dibanding semua perlakuan. tidak dapat menghambat
Sedangkan akuades sebagai kontrol pertumbuhan jamur karena tidak
negatif tidak terlihat adanya zona bening terbentuk zona bening disekitar
karena akuades tidak mengandung daerah sumur
senyawa yang dapat menghambat UCAPAN TERIMAKASI
pertumbuhan jamur Aspergillus sp. Penulis mengucapkan terimakasih
Penggunaan ekstrak rimpang kepada orangtua atas dukungan dan
lengkuas pada praktikum ini terbentuk semangatnya serta kepada pihak
zoba bening pada ekstrak rimpang laboratorium Kimia Fakultas
lengkuas 100% sebesar 1,1 cm dan daya Matematika dan Ilmu Pengetahuan
hambat sebesar 0,1 sedangkan pada Alam yang telah mendukung proses
konsentrasi 75%, 50% dan 25% tidak penyusunan jurnal ini.
terbentuk zona bening disetiap DAFTAR PUSTAKA
konsentrasi dikarenakan konsentrasi Firdaus, M.I., Siti R.H. dan Diah S.,
ekstrak kurang pekat sehingga ekstrak 2017, Perbedaan Efektivitas
rimpang lengkuas kurang mampu Perasan dan Rebusan Daun
menghambat pertumbuhan jamur Ageratum Conyzoides L.
Aspirgellus tersebut. Berdasarkan tabel Terhadap Pertumbuhan Jamur
satu (1) dapat diketahui bahwa Trichophyton Rubrum, Bioshell,
Amoxcillin sangat kuat menghalau 6(01).
pertumbuhan jamur Aspergilus Handajani, S. dan Purwoko, 2008,
sedangkan ekstrak lengkuas juga mampu Aktivitas Ekstrak Rimpang
menghalau pertumbuhan jamur Lengkuas (Alpinia Galanga)
Aspergilus tersebut walaupun tidak kuat, terhadap Pertumbuhan Jamur
hal inilah yang menyebabkan ekstrak Aspergillus Sp. Penghasil
lengkuas dengan konsentrasi rendah Aflatoksin dan Fusarium
tidak terbentuk zona bening. Moniliforme, Biodiversitas, 9( 3).
Menurut penelitian Handajani Hapsari, A., 2014, Isolasi dan
dan Purwoko (2008) Ekstrak rimpang Identifikasi Fungi pada Ikan
rimpang rimpang lengkuas (Alpinia Maskokidi Bursa Ikan Hias
galanga) memiliki aktivitas antijamur Gunung Sari Surabaya Jawa
terhadap jamur filamentus, meskipun Timur, (Skripsi), Surabaya:
tidak kuat. Konsentrasi penghambatan Universitas Airlangga.
pertumbuhan minimum ekstrak rimpang Kaur, S.P., Rekha R. dan Sanju N.,
rimpang rimpang lengkuas terhadap 2011, Amoxcillin: A Board
pertumbuhan A. flavus, F. moniliforme, Spectrum Antibiotic,
dan A. niger masing-masing sebesar International Journal of
816, 1.682 dan 3.366 mg/L. Oleh karena Pharmacy and Pharmaceutical
itu ekstrak rimpang rimpang rimpang Sciences, 3(3).
lengkuas dengan konsentrasi 25%,50% Kusuma R. 2008, Pengaruh Penggunaan
dan 75% tidak dapat menghambat Cengkeh (Syzygium Aromaticum)
dan Kayu Manis (Cinnamomum)

Univeritas Halu Oleo, Kendari, Desember 2019 5

Jurnal Mikrobiologi Vol. 5 No. 14 Desember 2019
ISSN 2443-1230

Sebagai Pengawet Alami terhadap

Daya Simpan Roti Manis
(Skripsi), Bogor: Institut
Pertanian Bogor.
Mizana, D.K., Netty S. dan Arni A.,
2016, Identifikasi Pertumbuhan
Jamur Aspergillus Sp pada Roti
Tawar yang Dijual di Kota
Padang Berdasarkan Suhu dan
Lama Penyimpanan, Jurnal
Kesehatan Andalas, 5(2).
Puthera, A., Agung G.N. dan Duniaji
A.S., 2007, Mempelajari
Pengaruh Konsentrasi Ekstrak
Rimpang Lengkuas (Alpinia
galanga) terhadap Pertumbuhan
Aspergillus Flavus pada Kacang
Tanah (Arachis hypogaea L.),
4(2).
Suheri, F.L., Zulkarnain A. dan Ivony
F., 2012, Perbandingan Uji
Resistensi Bakteri Staphylococcus
Aureus terhadap Obat
Antimikroba Ampisilin dan
Tetrasiklin, Andalas Dental
Journal.
Yulia, E., Tarkus S., Fitri W. dan
Rangga I.P., 2015, Uji
Keefektifan Antijamur Ekstrak
Air Rimpang Rimpang rimpang
lengkuas ( Alpinia galanga [L]
Willd.) sebagai Perlakuan
Pratanam untuk Mengendalikan
Colletotrichum spp. pada Kedelai
( Glycine max L.), Jurnal
Agrikultura, 26(2).

Univeritas Halu Oleo, Kendari, Desember 2019 6