LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI
Pengukuran Jumlah Konsumsi Oksigen pada Ikan Komet
(Carassius auratus) dan Jangkrik (Gryllus sp.)
Abstrak— Respirasi merupakan hal penting dalam sistem
kehidupan suatu organisme. Respirasi merupakan proses
pertukaran gas O2 dan CO2 dalam tubuh mahkluk hidup.
Percobaan respirasi ini bertujuan untuk mengetahui jumlah
oksien yang digunakan dalam pernapasan ikan Carrasius
auratus dan jangkrik (Gryllus sp.). Pada ikan Carrasius auratus
yang diletakkan dalam salah satu wadah berisi air penuh dan
tertutup rapat selama 1 jam. Percobaan ini menggunakan
metode Winkler (dengan botol Winkler) dan mikro Winkler
(dengan syringe) dengan penambahan beberapa reagen kimia
dan dilakukan titrasi pada tahap akhir percobaan. Sedangkan
pengukuran konsumsi oksigen pada Gryllus sp. menggunakan
respirometer dengan mengamati pergerakan eosin pada ujung
pipa skala setiap satu menit selama 5 menit. Jumlah konsumsi
oksigen pada Carrasius auratus dan Gryllus sp. dapat
ditentukan. Hasil praktikum menunjukkan bahwa kadar
oksigen pada sampel air berisi ikan lebih rendah dibandingkan
dengan sampel air tanpa ikan serta terjadi pergerakan eosin
pada pipa skala respirometer. Dapat diperoleh kesimpulan
bahwa ikan Carrasius auratus dan jangkrik Gryllus sp.
melakukan respirasi. Hal ini diketahui dari kadar oksigen
terlarut pada sampel air berisi ikan yang lebih rendah
dibandingkan dengan kontrol dan pergerakan eosin atau laju
konsumsi oksigen serta jumlah volume udara yang dihirup oleh
jangkrik pada pipa skala respirometer.
Kata Kunci— Respirasi, Metode Winkler, Jangkrik (Gryllus
sp. ), Ikan (Carrasius auratus), Respirometer
I. RPENDAHULUAN
espirasi merupakan hal penting dalam sistem kehidupan suatu
organisme. Respirasi merupakan proses pertukaran gas O 2
dan CO2 dalam tubuh mahkluk hidup. Gas O2 dapat keluar
masuk jaringan dengan cara difusi. Pada dasarnya,
metabolisme yang normal dalam sel-sel mahkluk hidup
memerlukan oksigen dan karbondioksida. Pada hewan
vertebrata, tubuhnya telalu besar untuk dapat menyebabkan
terjadinya interaksi secara langsung antara masing-masing sel
dalam tubuh dengan lingkungan luar tubuhnya. Untuk itu
organ-organ yang bergabung dalam sistem respirasi
dikhususkan untuk melakukan pertukaran gas-gas pernapasan
bagi keperluan seluruh tubuhnya. Ada dua tahap pernapasan,
tahap pertama oksigen masuk ke dalam dan pengeluaran
karbondioksida ke luar tubuh melalui organ pernapasan yang
disebut dengan respirasi eksternal dan pengangkutan gas-gas
pernapasan ke jaringan tubuh atau sebaliknya dilakukan oleh
sistem sirkulasi. Tahap kedua adalah pertukaran O 2 dan
cairan tubuh (melalui darah) dengan CO2 dari sel-sel dalam
jaringan, disebut respirasi internal [1]
Praktikum respirasi ini menggunakan hewan vertebrata
yaitu ikan komet (Carassius auratus) sebagai organisme
akuatik yang nantinya akan diukur berapa besar kadar O 2
yang digunakan oleh ikan untuk respirasi. Pengamatan
dilakukan dengan menggunakan metode Winkler dan diukur
1
kadar oksigen terlarutnya (DO). Sedangkan untuk
mengetahui laju respirasi pada hewan invertebrata
menggunakan hewan jangkrik (Gryllus sp.). Pengamatan
dilakukan dengan menggunakan respirometer untuk
mengukur jumlah O2 yang digunakan dalam respirasi
serangga.
II.URAIAN PENELITIAN
A. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam praktikum ini antara lain:
Wadah untuk penentuan konsumsi oksigen, botol winkler,
Erlenmeyer 250 ml, Erlenmeyer 5 ml, pipet tetes, timbangan,
aluminium foil secukupnya, Syiringe10 ml, syringe 1 ml,
respirometer dan kapas secukpnya.
Bahan yang dibutuhkan pada praktikum ini adalah larutan
MnSO4, larutan iodide azide, H2SO4 pekat, larutan Na2S2O3,
larutan amilum 1%, air, ikan komet (Carassius auratus), dan
jangkrik (Gryllus sp.).
B. Cara Kerja
Penentuan Konsumsi Oksigen Ikan
Disiapkan wadah bersih (toples kaca) sebanyak 2 buah
dengan volume yang sama disiapkan kemudian diisi dengan
air dari sumber yang sama hingga penuh. Ikan yang akan
diukur konsumsi oksigennya ditimbang dan dimasukkan ke
dalam salah satu wadah, kemudian kedua wadah ditutup
rapat dan dihindari adanya gelembung udara di dalam kedua
wadah kemudian dibiarkan hingga 1 jam.
Pengambilan Sampel Air yang Akan Diukur Konsentrasi
Oksigennya dengan Metode Winkler
Botol Winkler disiapkan dan dibersihkan. Sampel air dalam
wadah tanpa ikan diambil dengan cara memasukkan seluruh
botol Winkler ke dalam wadah dan mengusahakan supaya
tidak ada gelembung udara yang masuk. Botol Winkler
ditutup di dalam air dan kemudian dibolak-balikkan sambil
mengamati ada/tidaknya gelembung udara. Kandungan
oksigen di dalam botol diukur dengan dengan metode
Winkler (dianggap sebagai t 1). Sampel air diambil dari dalam
wadah yang berisi ikan dengan cara yang sama kemudian
mengukur kandungan oksigennya (dianggap sebagai t 2).
Penggunaan oksigen oleh ikan dihitung dengan menggunakan
rumus penggunaan oksigen.
Pengukuran Kandungan Oksigen dengan Metode Makro
Winkler
Botol Winkler dibuka dan ditambahkan 1 ml MnSO 4
dengan gelas ukur secara hati-hati supaya tidak timbul
gelembung udara. Ditambahkan pula 1 ml alkali iodide
dengan cara yang sama. Botol Winkler ditutup kembali dan
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI 2

dibolak-balikkan selama 5 menit. Botol Winkler dibiarkan
selama 10 menit supaya terjadi pengikatan oksigen terlarut
dengan sempurna yang ditandai dengan timbulnya endapan di
dasar botol. Kemudian ditambahkan kembali 1 ml H 2SO4
pekat dengan cara yang sama. Botol Winkler ditutup kembali
dan dibolak-balikkan hingga endapan larut dan larutan
menjadi berwarna kuning coklat. Larutan dituangkan dari
botol Winkler ke dalam 1 buah Erlenmeyer 250 ml (duplo)
masing-masing sebanyak 150 ml. Larutan dititrasi ke dalam
kedua Erlenmeyer dengan larutan Na 2S2O3 hingga warna
kuning coklat tepat hilang serta mencatat volume larutan
Na2S2O3 yang digunakan. Kemudian menghitung kadar
oksigen pada t1 dengan menggunakan rumus:
Pengukuran Konsumsi Oksigen pada Jangkrik
Kapas dimasukkan ke dalam tabung respirometer lalu
ditetesi larutan KOH 1 ml dengan pipet tetes. Kemudian
jangkrik sebanyak 5 ekor yang telah ditimbang beratnya
menggunakan neraca analitik dimasukkan ke dalam tabung
respirometer. Selanjutnya ditutup sambungan antara tabung
respirometer dan pipa skala. Kemudian diolesi dengan
vaselin, lalu disuntikkan larutan Eosin pada ujung saluran.
Kemudian diamati pergerakan laju Eosin menuju serangga
tiap 1 menit dan dihitung laju penggunaan oksigen pada
jangkrik selama 5 menit. Kemudian menghitung penggunaan
oksigen oleh jangkrik dengan rumus:

Kadar Oksigen/DO = Penggunaan Oksigen =

Keterangan:
III. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
a = volume rata-rata larutan Na 2S2O3 yang digunakan
N = nilai normalitas sebesar 0,1 A. Tabel Perlakuan dan Hasil

Pengukuran Kandungan Oksigen dengan Metode Mikro Pengukuran Kandungan Oksigen dengan Metode Makro
Winkler Winkler
Sampel air di dalam wadah diambil dengan menggunakan
2 syringe 10 ml (tanpa jarum) hingga syringe berisi air No Perlakuan Gambar dan Hasil
dengan volume 10 ml, kemudian volume airnya dikurangi pengamatan
hingga 9,4 ml dan hindari adanya gelembung dalam syringe.
MnSO4 sebanyak 0,2 ml diambil dengan syringe 1 ml 1. Di buka botol winker (ada Telihat pengikatan
kemudian dimasukkan ke dalam syringe 10 ml. Sebelum ikan/t2 dan tidak ada oksigen dengan
memasukkan reagen ini, volume dalam syringe ditambahkan ikan/t2, ditambah 1ml timbulnya seperti
0,2 ml lagi agar reagen yang ditambahkan tidak tumpah. MnSO4 asap
Penambahan reagen dilakukan dengan hati-hati sehingga
tidak ada gelembung udara yang masuk. Alkali iodide
sebanyak 0,2 ml diambil dengan cara yang sama, dibiarkan
sejenak agar reagen dapat mengikat oksigen dengan
sempurna. Ditunggu hingga terjadi endapan. H2SO4 pekat
sebanyak 0,2 ml ditambahkan dengan cara yang sama, dan
dibiarkan hingga seluruh endapan telah hilang. Larutan 2. Ditambahkan 1ml alkali Warna larutan
dituang ke dalam Erlenmeyer 50 ml dengan hati-hati untuk iodida menjadi kuning dan
menghindari adanya gelembung. Larutan dititrasi dengan terdapat endapan
Na2S2O3 menggunakan syringe 1 ml dengan hati-hati hingga belum terlihat
warna larutan dalam Erlenmeyer berubah menjadi bening,
dicatat berapa ml larutan Na2S2O3 yang digunakan untuk
titrasi. Kadar oksigen dihitung dengan cara:
a. (nilai normalitas Na2S2O3) x 8 = α mg oksigen tiap ml
Na2S2O3
b. α/(9,4/1000) = β ppm (mg/L) oksigen tiap ml Na2S2O3
c. kadar oksigen dalam sampel setara dengan ((ml Na2S2O3
yang digunakan dalam titrasi)x β) ppm (mg/L) 3. Ditutup kembali botol Larutan bercampur
Kadar oksigen dalam wadah tanpa ikan dianggap sebagai winkler dan membolak
kadar oksigen pada waktu t1 sedangkan kadar oksigen dalam balikkan selama 5 menit
wadah dengan ikan dianggap sebagai kadar oksigen pada
waktu t2.

4. Dibiarkan botol winkler Terdapat endapan,

selama 10 menit t1 (tidak ada ikan)
warna kuning, t2 (ada
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI 3

ikan) kuning lebih ikannya.

pekat
Pengukuran Kandungan Oksigen dengan Metode Mikro
Winkler

No Perlakuan Gambar dan Hasil

pengamatan

1. Diambil sampel air baik

5. Ditambahkan 1 ml H2SO4 Endapan kuning
yang ada ikan maupun
pekat coklat
tidak ada ikan
menggunakan syringe 10
ml, kemudian volume
airnya dikurangi hingga
9,4ml
2. Diambil 0,2 ml MnSO4 Timbul reaksi
menggunakan syringe 1ml pengikatan oksigen
6. Ditutup kembali botol Larutan bercampur, kemudian di masukkan ke seperti asap
Winkler dan dibolak- didiamkan endapan dalam syringe 10ml yang
balikkan berwarna hitam berisi air sampel
7. Dituangkan larutan dari Endapan 3. Diberi 0,2ml alkali iodida Timbul endapan
botol Winkler ke dalam 1 tertinggal,tidak ikut dan dibiarkan sejenak kuning ecoklatan
buah erlenmeyer 250 ml tertuang ke keruh
erlenmeyer 4. Ditambahkan 0,2ml Endapan hilang,
H2SO4 pekat warna kuning
kecoklatan bening
5. Dituangkan larutan ke
dalam erlenmeyer 50ml
6. Dtambahkan satu tetes Warna tidak berubah
amilum kedalam
erlenmeyer menggunakan
8. Ditambahkan 5 tetes pipet tetes
amilum 1% ke dalam 7. Ditritasi menggunakan Warna larutan
kedua erlenmeyer Na2S2O3 menggunakan berubah menjadi
syringe 1ml dan dicatat bening
ml larutan Na2S2O3 yang
digunakan.
8. Dihitung kadar oksigen
(DO)

Pengukuran Konsumsi Oksigen pada Jangkrik

No Perlakuan Gambar dan Hasil
pengamatan

Warna air sebelum 1.

dititrasi berwarna Jangkrik diambil 5,
kuning. T1 : kuning ditimbang satu-satu dicari
T2 : Kuning lebih bobot yang sama atau
pekat hampir sama

9. Ditritasi dengan Na 2S2O3 Warna larutan

dan di catat volume menjadi bening
Na2S2O3 yang digunakan kembali 2.
10 Di yang hitung kadar
oksigen pada t1 di botol Jangkrik dimasukkan
kaca yang tidak ada ikan botol dan ujung ulut
dan kadar oksigen pada t2 tabung diolesi dengan
di botol kaca yang ada vaselin
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI 4

Menit ke 5

6. Dihitung penggunaan
oksigen pada jangkrik
(Gryllus sp.)

B. metode Makro Winkler

3.
direkatkan tabung Praktikum respirasi ini bertujuan untuk mengetahui jumlah
respirometer pada botol oksigen yang digunakan dalam pernapasan ikan, metode
respiro dengan vaselin yang digunakan salah satunya menggunakan metode
Winkler. Metode Winkler merupakan teknik standar untuk
penentuan oksigen terlarut dalam air tawar dan air laut.
Metode Winkler merupakan suatu cara untuk menentukan
banyaknya oksigen yang terlarut di dalam air. Dalam metode
4. Diberi eosin pada ujung ini, kadar oksigen dalam air ditentukan dengan cara titrasi.
respirometer Titrasi merupakan penambahan suatu larutan yang telah
diketahui konsentrasinya (larutan standar) ke dalam larutan
lain yang tidak diketahui konsentrasinya secara bertahap
sampai terjadi kesetimbangan. Dengan metode Wingkler,
kita dapat mengetahui banyaknya oksigen yang dikonsumsi
oleh hewan air seperti ikan [2]. Ikan yang digunakan dalam
praktikum ini adalah ikan komet (Carassius auratus).
Penggunaan ikan komet dikarenakan harganya yang tidak
terlalu mahal, mudah didapat, dan memiliki toleransi yang
5. Pergerakan eosin diamati tinggi terhadap lingkungan yang ekstrim.
setiap satu menit selama 5 Hasil praktikum menunjukkan bahwa hasil perhitungan
menit dan dicatat kadar DO pada wadah yang tidak berisi ikan (wadah kosong,
banyaknya volume udara berisi air saja) yaitu 0,932 ppm sedangkan hasil perhitungan
yang dikonsumsi kadar DO pada wadah yang berisi ikan komet yaitu 0,736
Menit ke 0
berdasarkan pergerakan ppm. Dari hasil tersebut dapat diperoleh nilai penggunaan
eosin oksigen dimana kadar DO pada wadah yang tidak berisi ikan
di kurangi dengan kadar DO yang berisi ikan kemudian
dibagi dengan waktu yang dikali dengan berat ikan, sehingga
hasil penggunaan oksigen oleh ikan komet yaitu 0,02
Menit ke 1 mg/l/jam.grm. penggunaan atau komsumsi oksigen ini untuk
mengukur laju metabolisme ikan per satuan waktu, jadi
oksigen yang digunakan ikan sebesar 0,02 mg/l/jam.gr
merupakan jumlah oksigen yang dibutuhkan ikan komet
untuk melekukan oksidasi makanan untuk menghasilkan
energi. Kemudian kadar DO yang di ukur tadi yaitu pada
Menit ke 2
wadah yang tidak berisi ikan, kadar DO nya lebih banyak
dibandingkan kadar DO pada wadah yang berisi ikan komet,
sehingga bisa disimpulkan bahwa kandungan oksigen terlarut
pada wadah yang tidak berisi ikan lebih banyak, hal ini
karena jumlah oksigen yang terdapat di dalam wadah tidak
Menit ke 3 termanfaatkan atau terpakai oleh respirasi organisme
khususnya ikan. Sedangkan pada wadah yang berisi ikan,
kadar DO nya lebih sedikit atau berkurang, hal ini
menunjukkan bahwa oksigen yang terdapat pada air di wadah
dimanfaatkan oleh ikan untuk proses respirasinya yanitu
untuk proses metabolisme dalam mengoksidasi makanan
Menit ke 4 untuk menghasilkan energi. Oksigen terlarut (Dissolved
Oxygen = DO) itu sendiri sangat dibutuhkan oleh semua
jasad hidup untuk pernapasan, proses metabolisme atau
pertukaran zat yang kemudian menghasilkan energi untuk
pertumbuhan dan pembiakan. Disamping itu, oksigen juga
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI
dibutuhkan untuk oksidasi bahan-bahan organik dan
anorganik dalam proses aerobic [3].
Hasil yang telah diperoleh diatas tidak lepas dengan
perlakuan- perlakuan yang dilakukan sebelumnya dan fungsi
setiap reagen yang digunakan. Langkah pertama yang
dilakukan dalam praktikum ini adalah menyiapkan wadah
bersih (toples kaca) sebanyak 2 buah dengan volume yang
sama disiapkan kemudian diisi dengan air dari sumber yang
sama hingga penuh. Ikan yang akan diukur konsumsi
oksigennya ditimbang untuk memudahkan perhitungan berat
badan ikan dalam perhitungan penggunaan oksigen nantinya
dan dimasukkan ke dalam salah satu wadah, kemudian kedua
wadah ditutup rapat bertujuan untuk memberikan kondisi
respirasi anaerob pada ikan mujair, sehingga oksigen di udara
bebas tidak mempengaruhi kadar oksigen di air. dan
dihindari adanya gelembung udara di dalam kedua wadah
kemudian dibiarkan hingga 1 jam. Waktu 1 jam diberikan
sebagai waktu respirasi, sehingga diharapkan ada perbedaan
kadar DO sebagai hasil respirasi. Langkah selanjutnya
pengambilan sampel air yang akan diukur konsentrasi
oksigennya. Pengambilan air menggunakan botol Winkler.
Botol Winkler yang akan digunakan dibersihkan dan
dimasukkan seluruh botol Winkler ke yang berisi air dalam
wadah air dan diusahan supaya tidak ada gelembung udara
yang masuk. Selanjutnya ditutup rapat botol Winkler dalam
air dan kemudian dibolak-balikkan botol sambil diamati ada
tau tidaknya udara (perlakuan ini dianggap t 1). Menurut[4]
sampel air digunakan untuk menentukan O2 tidak boleh
terkena udara dari lingkungan, karena besarnya perbedaan
antara jumlah O2 yang ada di udara dan air yang akan
memberikan hasil yang berlebihan yang akan mempengaruhi
validitas data percobaan, jadi dihindari adanya pengaruh
udara di lingkungan sehingga tidak menambah kadar oksigen
terlarut dalam air.
Selanjutnya dilakukan pengukuran kandungan oksigen
dengan metode Winkler yang dimulai pada t 1.Botol winkler
yang telah terisi air kemudian dibuka serta ditambahkan ke
dalamnya 1 ml larutan MnSO4 dan 1 ml larutan alkali iodida
azide (alkali iodida).Larutan MnSO4 berfungsi sebagai
pengikat oksigen dalam keadaan basa. Keadaan basa ini
terbentuk karena adanya penambahan larutan alkali iodida
azida.Selanjutnya, botol winkler ditutup kembali dan
dibolak-balikkan selama 5 menit agar tercampur secara
sempurna dan dibiarkan selama 10 menit atau sampai terjadi
endapan.Campuran berwarna kuning keruh dan setelah
diendapkan, endapan berwarna kuning kecoklatan. Reaksi
kimia yang terjadi adalah [4]:
MnSO4 + 2 KOH Mn(OH)2 + K2SO4
2 Mn(OH)2 + O2 2 MnO(OH)2
Dengan adanya O2 dalam larutan yang sangat basa
(larutan alkali iodida), maka kalium hidroksida yang ada
dalam larutan tersebut akan bereaksi dengan mangan sulfat
(larutan MnSO4) dan menghasilkan endapan putih dan
mangan hidroksida. Mangan hidroksida putih dioksidasikan
menjadi mangan oksi–hidrat (MnO(OH) 2) yang berwarna
cokelat. Jadi jumlah O2 yang kira–kira ada dapat
diperkirakan dari intensitas warna cokelat dari endapan [4].
Endapan berwarna coklat yang terbentuk merupakan
indikasi terjadinya reaksi oksidasi antara ion mangan (Mn 2+)
5
dalam garam MnSO4 menjadi mangan (II) hidroksida
(Mn(OH)2) dan jika reaksi berlanjut, terbentuklah Mn(OH)3
yang memiliki kelarutan yang sangat kecil terhadap air.
Reaksi yang terjadi adalah [4] :
MnO(OH)2 + 2 KI + H2O  Mn(OH)2 + I2 + 2 KOH
4 Mn(OH)2 (S) + O2 + 2 H2O 4 Mn(OH)3 (S)
Selanjutnya, 1 ml larutan H2SO4pekat ditambahkan ke
dalam botol winkler, ditutup dan dibolak-balik lagi agar
bereaksi dan tercampur secara sempurna hingga larutan
menjadi berwarna kuning kecoklatan. Penambahan larutan
H2SO4 pekat berfungsi sebagai pelarut yang bersifat asam
kuat, dimana untuk melarutkan endapan sehingga pada
akhirnya warna larutan menjadi kuning kecoklatan tanpa
endapan [4].
Reaksi berlanjut alkali iodida azide dalam keadaan
asam ditambah asam kuat H2SO4, menyebabkan endapan
Mn(OH)3 terlarut sempurna dalam larutan, sehingga menjadi
warna kuning kecoklatan. Reaksi kimia yang terjadi adalah [4]
MnO2 (s) + 2 KI + 4 H+ Mn2+ + 2 H2O + I2 + 2 K+
Dalam reaksi tersebut, ion Mn2+bertindak sebagai
reduktor yang mengoksidasi ion iodida menjadi iodine. Ion
hydrogen diperoleh dari hidrolisa molekul air H 2O menjadi
ion H+ dan OH-. Iodin yang dibebaskan kemudian dititrasi
dengan larutan standar natrium tiosulfat (Na 2S2O3) sehingga
warna coklat hilang [4].
Dalam media yang sangat asam, ion Mn2+dibebaskan
dan bereaksi dengan ion–ion Iod bebas (Michael, 1994).
Larutan dalam botol Winkler kemudian dituangkan dalam
Erlenmeyer 250 ml, masing-masing sebanyak 100 ml dan
dititrasi dengan larutan Na 2S2O3 hingga berwarna kuning
muda sampai warna bening (tanda titik akhir titrasi). Titrasi
menggunakan larutan Natrium tiosulfat (Na 2S2O3) berfungsi
sebagai larutan baku untuk titrasi (pentitrasi) yakni larutan
yang telah diketahui konsentrasinya dan menentukan jumlah
Iodium yang ekuivalen dengan jumlah O 2 yang ada dalam
sampel.
Reaksi yang terjadi pada titrasi tersebut adalah [4] :
I2 + 2 Na2S2O3 Na2S4O6 + 2 NaI
C.Metode Mikro Winkler
Pengukuran kadar oksigen terlarut pada sampel air tanpa
ikan menggunakan metode Winkler adalah 15,32 mg/l. Kadar
oksigen terlarut pada sampel air berisi ikan yaitu 16,17 mg/l.
Hasil di atas menunjukkan bahwa ikan melakukan respirasi
atau mengkonsumsi oksigen dalam sampel air selama satu
jam, sehingga dapat diketauhi penggunaan atau konsumsi
oksigen ikan komet (Carrasius auratus) yait -0,35 mg/l. Hal
ini tidak sesuai dengan literatur, menurut [5] kadar oksigen
terlarut pada sampel air yang berisi ikan harus lebih rendah
dibandingkan pada sampel air tanpa ikan, karena oksigen
terlarut yang terdapat pada sampel air yang ada ikan,
dimanfaatkan oleh ikan untuk proses respirasi, proses
metabolisme atau pertukaran zat agar menghasilkan energi
untuk proses pertumbuhan dan perkembangan, di samping
itu, oksigen akan di manfaatkan atau dikonsumsi untuk
oksidasi bahan-bahn organik dan anorganik dalam proses
aerobik [6]. ketidak kesesuain ini disebabkan adanya kesalahan
pada titrasi iodimetri. Dimana proses tritrasi iodimetri yang
dilakukan kurang teliti sehingga menghasilkan analisis yang
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI
kurang tepat. Menurut [7] untuk mendapatkan data oksigen
dalam air yang mempunyai ketelitian dan ketepatan analisis
yang tinggi, maka perlu diperhatikan beberapa masalah.
Masalah ini meliputi alat pengambilan contoh air, pengaruh
pereaksi kimia yang dipakai, titrasi, serta pengawetan contoh
air. Pada metode mikro Winkler digunakan Syringe dan pada
metode (makro) Winkler digunakan botol Winkler. Pereaksi
kimia yang digunakan pada percobaan harus sesuai baik
volume maupun waktu penambahannya pada sampel air.
Titrasi harus dilakukan dengan hati-hati dan waktu yang tepat
karena iod mudah menguap.
Reaksi kimia yang terjadi pada titrasi oksigen terlarut
menggunakan metode Winkler meliputi 5 reaksi yaitu
menurut [8] :
1. Langkah pertama pada titrasi DO adalah penambahan
larutan MnSO4 dan larutan alkaline iodide. Reagen tersebut
bereaksi membentuk endapan berwarna putih atau
Mn(OH)2. Hal ini sesuai dengan percobaan yang telah
dilakukan yaitu terbentuk endapan putih yang melayang
mendekati dasar botol Winkler dan Syringe. Endapan
tersebut merupakan oksigen yang terikat sempurna dengan
reagen. Secara kimia, reaksinya dapat dituliskan sebagai
berikut :
2. Setelah pembentukan endapan, oksigen terlarut
mengoksidasi sejumlah ekuivalen Mn(OH)2 menjadi
Mn(OH)2 berwarna cokelat. Pada percobaan, setelah
penambahan larutan MnSO4 dan larutan alkali iodide, botol
Winkler dan Syringe dibolak-balik selama 5 menit dan
dibiarkan selama 10 menit sehingga homogenisasi berjalan
dengan baik yaitu terdapat endapan cokelat pada wadah
sampel. Setiap molekul oksigen terlarut, 4 molekul
Mn(OH)2 diubah menjadi Mn(OH)3. Secara kimia,
reaksinya dapat dituliskan sebagai berikut:
3. Setelah endapan cokelat terbentuk, asam kuat (asam sulfat)
ditambahkan pada sampel. Asam sulfat mengubah
Mn(OH)3 menjadi Mn2(SO4)3. Sampel air tidak terpengaruh
atau berkurang pengaruhnya terhadap oksigen tambahan.
Oleh karena itu, pada percobaan ini, sampel air dituang
pada Erlenmeyer untuk melanjutkan langkah titrasi
berikutnya. Secara kimia, reaksinya dapat dituliskan
sebagai berikut :
4. Iodin pada alkalin iodida teroksidasi oleh Mn2(SO4)3
sehingga iodine bebas lepas ke air. Mn 2(SO4)3 pada reaksi
ini muncul dari reaksi antara Mn(OH) 2 dan oksigen, jumlah
iodine yang dilepaskan berbanding lurus dengan jumlah
oksigen yang ada pada sampel (air) asli. Pelepasan iodine
ditandai dengan perubahan sampel menjadi berwarna
kuning cokelat. Secara kimia, reaksinya dapat dituliskan
sebagai berikut :
5. Tahap akhir pada titrasi Winkler adalah penambahan
sodium thiosulfate. Sodium thiosulfate (Na 2S2O 2) bereaksi
dengan iodin bebas untuk memproduksi sodium iodide
(NaI). Ketika semua iodin telah diubah maka terjadi
perubahan warna sampel dari kuning cokelat menjadi
6
bening. Indikator amilum sering ditambahkan untuk
menentukan hasil akhir. Secara kimia, reaksinya dapat
dituliskan sebagai berikut :
Percobaan ini menggunakan ikan Carrasius auratus yang
dimasukkan kedalam satu wadah dan wadah yang satunya
tidak berisi ikan, hal ini bertujuan untuk mengetahui
perbandingan kadar oksigen terlarutpada sampel air berisi
ikan dan sampel air yang tidak berisi ikan. Penimbangan ikan
dilakukan untuk mengetahui ukuran atau berat badan karena
ukuran atau berat badan ikan merupakan salah satu faktor
yang mempengaruhi laju komsumsi oksigen [9]. Ikan
didiamkam satu jam di dalam wadah bertujuan supaya ikan
melakukan respirasi yang nantinya dapat diketahui kadar
oksigen terlarut pada sampel air setelah terjadi resirasi pada
ikan selama waktu satu jam tersebut. Pengambilan sampel air
dengan merendan syringe dalam sampel air supaya terhindar
adanya gelembung udara, karena kandungan oksigen dalam
udara jauh lebih banyak dibandingkan dengan oksige terlarut
dalam air, hal inilah yang menyebabkan pengambilan air
untuk analisis kadar oksigen terlarut harus dilakukan dengan
hati-hati. Tidak boleh ada udara yang terperangkap dalam
botol[10]. pembolak balikan syringe bertujuan untuk
menghomogenisasikan sampel air dan reagen atau untuk
melarutkan endapan sampai warna berubah. Larutan MnSO4
menurut [8] merupakan reagen reagen yang akan bereaksi
dengan alkalin iodide untuk membentuk endapan putih
Mn(OH2). Timbulnya Endapan ini merupakan indikator telah
terjadi pengikatan oksigen terlarut dengan sempurna
pengikatan oksigen terlarut dengan sempurna dari hasil
proses oksidasi antara sampel air dengan MnSO 4 dan alkali
iodide. Penambahan H2SO4 pekat bertujuan untuk melarutkan
endapan MnOH3 dan melepaskan ion Mn 2+. Ion Mn2+ bersifat
oksidator kuat, sehingga akan mengoksidasi ion iodide
menjadi iodide bebas. Ioidida bebas ini kemudian dititrasi
dengan Na2S2O3 (natrium tio-sulfat) [7] Jumlah iodida yang
dilepaskan berbanding lurus dengan jumlah oksigen yang ada
pada sampel (air) asli [8] sehingga dapat diketahui kadar
oksigen terlarut dan penggunaan oksigen oleh organisme
percobaan. Setelah penambahan H2SO4 pekat tersebut,
sampel air dituang pada Erlenmeyer untuk dilakukan titrasi.
Hal ini bertujuan untuk memudahkan pengamatan yaitu
perubahan warna sampel air serta karena sampel air tersebut
sudah tidak terpengaruh udara di lingkungan. Hal ini sesuai
dengan pernyataan [8] bahwa sampel air tidak terpengaruh atau
berkurang pengaruhnya terhadap oksigen tambahan. Larutan
Na2S2O3 merupakan larutan titrasi, sedangkan amilum 1%
merupakan indikator dalam percobaan ini yaitu untuk
menganalisa iodid atau oksigen terlarut. Hal ini sesuai
dengan pernyataan 12 bahwa sampel air dititrasi dengan
natrium thiosulfat/larutan Na 2S2O3 dan memakai indikator
amilum.
D.Perbandingan Metode Winkler dan Makro Winkler
Perbandingan metode makro Winkler dan mikro Winkler
terletak pada volume sampel air yang di gunakan. Metode
mikro Winkler digunakan sampel air dengan volume yang
lebih kecil sehingga menggunakan syringe untk mengabil
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI
sampel bukan menggunakan botol Winkler. Ketelitian dan
keakuratan metode mikro Winkler karena volume sampel air
yang digunakan kecil atau dengan jumlah sedikit sehingga
tingkat kesalahanyya juga lebih kecil. Metode Winkler , juga
mudah dilakukan dilaboratorium, hal ini sesuai dengan
pernyataan [11] bahwa metode winkler cocok diterapkan di
laboratorium. Selain itu, metode Winkler memberikan hasil
yang sempurna dan lebih cepat serta lebih teliti daripada
pentuan elektronik tembaga atau DO meter.
Pada percobaan ini dilakukan titrasi iodometri metode
Winkler bukan menggunakan DO meter karena pengukuran
kadar oksigen terlarut menggunakan DO meter dipengaruhi
suhu dan pH sampel air. Selain itu, faktor kalibrasi dan
kelayakan DO meter juga menentukan hasil kadar oksigen
pada sampel air. Sedangkan pada titrasi iodometri yang
dilakukan secara tepat pada semua langkah-langkahnya akan
menghasilkan pengukuran kadar oksigen yang tepat. Dapat
dikatakan bahwa keakuratan proses titrasi lebih tinggi
dibandingkan DO meter. Hal ini dikarenakan suhu dan pH
sampel yang tidak sesuai dengan DO meter akan
mempengaruhi hasil pengukuran. Sehingga kadar oksigen
yang terbaca pada DO meter bukan kadar oksigen
sebenarnya. Kesalahan pengukuran tersebut juga dapat terjadi
jika kalibrasi DO meter tidak dilakukan secara tepat. Hal ini
sesuai dengan pernyataan 13 bahwa metode titrasi iodometri
Winkler memberikan hasil-hasil yang sempurna dan lebih
cepat daripada penentuan elektronik tembaga. Metode klasik
dari Winkler adalah sebuah metode sensitif untuk
menentukan oksigen yang dilarutkan dalam air.
Menurut[12] kebutuhan oksigen mempunyai dua aspek yaitu
kebutuhan lingkungan bagi spesies tertentu dan kebutuhan
konsumtif yang bergantung pada keadaan metabolisme ikan.
Laju metabolisme biasanya diperkirakan dengan mengukur
banyaknya oksigen yang dikonsumsi makhluk hidup per
satuan waktu. Hal ini memungkinkan karena oksidasi dari
bahan makanan memerlukan oksigen (dalam jumlah yang
diketahui) untuk menghasilkan energi yang dapat diketahui
jumlahnya. Akan tetapi, laju metabolisme biasanya cukup
diekspresikan dalam bentuk laju konsumsi oksigen. Faktor
yang mempengaruhi laju konsumsi oksigen antara lain
temperatur, spesies hewan, ukuran badan, dan aktivitas [9].
Selain itu terdapt kelebihan yang dari metode WinkleR
serta kelemahannya. Kelebihannya yaitu bahwa Metode
Winkler dalam menganalisis oksigen terlarut (DO) adalah
dengan cara titrasi berdasarkan metoda Winkler lebih
analitis, teliti dan akurat. Apabila dibandingkan dengan cara
alat DO meter. Hal yang perlu di perhatikan adalah titrasi
iodometri yaitu penentuan titik akhir titrasinya, standarisasi
larutan tio dan penambahan indikator amilumnya. Dengan
mengikuti prosedur yang tepat dan standarisasi tio secara
analitis, akan diperoleh hasil penentuan oksigen terlarut yang
lebih akurat. Sedangkan cara DO meter, harus diperhatikan
suhu dan salinitas sampel yang akan diperiksa.Peranan suhu
dan salinitas ini sangat vital terhadap akurasi penentuan
oksigen terlarut dengan cara DO meter. Disamping itu,
sebagaimana lazimnya alat digital, peranan kalibrasi alat
sangat menentukan akurasi hasil penentuan. Berdasarkan
pengalaman di lapangan, penentuan oksigen terlarut dengan
cara titrasi lebih dianjurkan untuk mendapatkan hasil yang
7
lebih akurat. Alat DO meter masih dianjurkan jika sifat
penentuannya hanya bersifat kisaran. Sedangkan
kelemahannya yaitu bahwa Metode Winkler dalam
menganalisis oksigen terlarut (DO) yaitu penambahan
indikator amylum harus dilakukan pada saat mendekati titik
akhir titrasi agar amilum tidak membungkus iod karena akan
menyebabkan amilum sukar bereaksi untuk kembali ke
senyawa semula. Proses titrasi harus dilakukan sesegera
mungkin, hal ini disebabkan karena I2 mudah menguap.
Dan ada yang harus diperhatikan dari titrasi iodometri yang
sering terjadi kesalahan pada titrasi iodometri yaitu
penguapan I2, oksidasi udara dan adsorpsi I2 oleh endapan.
Oksigen terlarut (DO) pada sampel air tanpa ikan atau air
kran berdasarkan percobaan ini adalah 15,32 mg/L.
Menurut15 kandungan Dissolved Oxygen (DO) minimum
adalah 2 ppm dalam keadaan nornal dan tidak tercemar oleh
senyawa beracun (toksik) atau berdasarkan Peraturan
Pemerintah Nomor 82 Tahun 2001 tentang Pengelolaan
Kualitas Air dan Pengendalian Pencemaran Air menegaskan
bahwa kadar DO minimum yang harus ada pada air adalah
>2 mg O2/lt. Idealnya, kandungan oksigen terlarut tidak
boleh kurang dari 1,7 ppm selama waktu 8 jam dengan
sedikitnya pada tingkat kejenuhan sebesar 70% [13]
Oksigen terlarut yang diperoleh dari percobaan ini melebihi
kadar oksigen terlarut minimum pada air. Dapat dikatakan
bahwa sampel air tanpa ikan merupakan air dengan kualitas
yang baik yang dapat menunjang atau mencukupi kebutuhan
oksigen terlarut pada ikan. Hal ini sesuai dengan
pernyataan [6] bahwa semakin banyak jumlah DO (dissolved
oxygen), maka kualitas air semakin baik. Jika kadar oksigen
terlarut yang terlalu rendah akan menimbulkan bau yang
tidak sedap akibat degradasi anaerobik yang mungkin saja
terjadi.
E. Respirasi pada Jangkrik
Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui kecepatan
respirasi serangga khususnya pada jangkrik (Gryllus sp.)
yang diukur dalam suatu alat yang disebut respirometer
sederhana.Respirometer merupakan alat yang digunakan
untuk mengukur respirasi pada serangga. Respirometer
sederhana terdiri atas dua bagian yang dapat dipisahkan,
yaitu tabung spesimen (tempat hewan atau bagian tumbuhan
yang diselidiki) dan pipa kapiler berskala yang
dikaliberasikan dengan ketelitian hingga 0,01 ml. Kedua
bagian ini dapat disatukan dengan rapat hingga kedap udara
dan didudukkan pada penumpu (landasan) kayu atau logam.
Praktikum dilakukan dengan memasukkan kapas ke
dalam tabung respirometer lalu ditetesi dengan larutan KOH
1 ml dengan jarum suntik.Larutan KOH berfungsi untuk
mengikat CO2, sehingga pergerakan eosin benar-benar hanya
disebabkan oleh pergerakan oksigen.
Adapun reaksi yang terjadi antara KOH dengan CO 2
adalah sebagai berikut [2]:
KOH + CO2 → K2CO3 + H2O
Kemudian jangkrik sebanyak 5 ekor yang telah ditimbang
beratnya menggunakan neraca analitik dimasukkan ke dalam
tabung spesimen. Penggunaan jangkrik diasumsikan sebagai
serangga yang akan diukur laju respirasinya. Penimbangan
berat jangkrik bertujuan untuk mengetahui kaitan antara berat
jangkrik dengan laju penggunaan oksigennya. Dimana
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI
menurut [9] ukuran badan merupakan salah satu faktor yang
mempengaruhi laju konsumsi oksigen.Selanjutnya ditutup
pipa kapiler berskala dan diolesi dengan vaselin, lalu
disuntikkan larutan eosin pada ujung pipa kapiler berskala.
Larutan eosin berfungsi sebagai indikator, berwarna merah
yang membatu menandai pergerakan udara dalam saluran
respirometer sehingga mudah dihitung dan diamati. Vaselin
digunakan untuk menutup celah antara tabung specimen dan
pipa kapiler berskala agar respirasi yang terjadi hanya
dilakukan oleh jangkrik.Kemudian diamati pergerakan laju
eosin menuju serangga tiap 1 menit selam 5 menit dan
dihitung laju penggunaan oksigen pada jangkrik. Jumlah
ruangan pada pipa kapiler yang dilalui oleh larutan eosin
menunjukkan berapa volume udara yang dibutuhkan oleh
serangga untuk melakukan respirasi.
Pergerakan eosin menuju ke arah jangkrik (Gryllus sp.)
menunjukkan adanya proses inspirasi atau penghirupan
oksigen yang dilakukan oleh jangkrik. Hal ini disebabkan
oleh adanya isapan udara dari ujung lubang respirometer
melalui pipa kapiler berskala pada respirometer yang
dilakukan oleh Jangkrik (Gryllus sp.).
Respirasi memiliki prinsip kerja yaitu organisme
melakukan respirasi dengan mengambil oksigen dari udara
di lingkungan dan menghasilkan produk sisa respirasi
berupa karbon dioksida yang dilepaskan ke lingkungan.
Pada percobaan ini, jangkrik ditempatkan dalam ruang
tertutup yaitu tabung respirometer dan karbon dioksida
yang dilepaskan oleh jangkrik akan diikat oleh KOH,
sehingga terjadi penyusutan udara dalam respirometer yang
teramati dari pergerakan eosin mendekati tabung
respirometer. Kecepatan penyusutan udara dalam ruangan
tersebut dapat diamati melalui pipa skala yang
menunjukkan laju konsumsi oksigen. Hal ini sesuai dengan
pernyataan [14] bahwa respirometer adalah alat yang
digunakan untuk mengukur respirasi, dimana organisme
melakukan pertukaran karbon dioksida dan oksigen sebagai
bagian dari metabolismenya. Respirometer menyediakan
informasi terkait laju repirasi organisme percobaan dan
bagaimana respirasi terjadi.
Tabel 1.
Hasil skala volume udara yang dikonsumsi GRYLLUS SP.
Menit Skala Volume (ml)
1 0 – 0,22 0,22
2 0,22 – 0,32 0,10
3 0,32 – 0,39 0,07
4 0,39 – 0,48 0,09
5 0,48 – 0,56 0,08
0,56
Penggunaan oksigen oleh 5 ekor jangkrik pada tabung
respirometer adalah 14 ml/gr.jam, pada waktu 5 menit
penggunaan oksigen yang diperoleh berasal dari perhitunagna
hasil skala tabel diatas. Hal ini menunjukan bahwa jangkrik
mengkonsumsi udara atau oksige dalam respirometer
sebanyak 14 ml setiap gram tubuhnya selama 5 menit.
Jangkrik dengan berat badan yang besar akan mengkonsumsi
oksigen lebih banyak dibandingkan jangkrik dengan berat
badan yang lebih kecil. Hal ini dikarenakan ukuran badan
(berat badan) merupakan salah satu faktor yang
8
mempengaruhi konsumsi oksigen [9]. Laju metabolisme
biasanya diperkirakan dengan mengukur banyaknya oksigen
yang dikonsumsi makhluk hidup per satuan waktu. Hal ini
memungkinkan karena oksidasi dari bahan makanan
memerlukan oksigen (dalam jumlah yang diketahui) untuk
menghasilkan energi yang dapat diketahui jumlahnya. Akan
tetapi, laju metabolisme biasanya cukup diekspresikan dalam
bentuk laju konsumsi oksigen. Penggunaan oksigen dalam
proses metabolisme tubuh jangkrik (Gryllus sp.) dipengaruhi
oleh beberapa faktor antara lain temperatur, spesies hewan,
ukuran badan, dan aktivitas [9]
IV. KESIMPULAN
Dari percobaan yang telah dilakukan dapat dikesimpulkan
bahwa setiap makhluk hidup memerlukan oksigen untuk
melakukan proses respirasi sel. Proses respirasi dipengaruhi
oleh faktor temperatur, aktivitas, spesies hewan dan ukuran
badan. Respirasi pada ikan dapat diketahui melalui kadar
oksigen terlarut dalam sampel air yaitu menggunakan metode
Winkler dan metode mikro Winkler. Sedangkan, respirasi
pada jangkrik dapat diketahui melalui pergerakan eosin dan
jumlah volume udara yang dihirup pada pipa skala
respirometer. Jumlah oksigen yang diperlukan ikan sebesar
0,02 mg/l/jam.grm pada makro winkler dan -0,35
mg/l/jam.grm pada mikro winkler sedangkan penggunaan
oksigen pada jangkrik sebesar 14 ml/gr.jam.
DAFTAR PUSTAKA
[1] K. John W, Biologi Umum jilid 2.IPB: Bogor(1996)
[2] A.R, Biofagri,Respirasi.Program Studi Biologi, Sekolah Tinggi Ilmu
Hayati, ITB: Bandung( 2006)
[3] J.F.N. Abowei, Salinity, Dissolved Oxygen, pH and Surface Water
Temperature Conditions in Nkoro River, Niger Delta,
Nigeria.Department of Biological Sciences, Faculty of Science, Niger
Delta University, Wilberforce Island, Amassoma, Bayelsa State, Nigeria
(2010)
[4] P. Michael, Metode Ekologi untuk Penyelidikan Ladang dan
Labortarium.UI Press: Jakarta(1994.)
[5] Dissolved Oxygen Water Quality Test Kit, Lamotte Company, USA
[6] Department of Primary Industries and Resources of South Australia.
2003. Water Quality in Fresh A q u a c u l t u r e P o n d s . available :
http://www.pir.sa.gov.au/data/assets/pdf_file /0008/34001/watqual.pdf.
22/08/09. p3.
[7] G. Alaerts,, dan Santika Sri Simestri. Metode Penelitian Air. Surabaya :
Usaha Nasional (1984)
[8] Strickland J.D.H. dan T.R. Par-Sons. Determination of dissolved
oxygen. A practical hand book of sea water analisis. Bulletin 167.
Fisheries research boord of Canada. Ottawa (1968): 21 -27.
[9] A.J. Tobin. Asking About Life. Thomson BrooksCole, Canada (2005).
[10] H. P.Hutagalung, A. Rozak, dan I.Lutan. Beberapa Catatan Tentang
Penentuan Kadar Oksigen Dalam Air Laut Berdasarkan Metode
Winkler. Oseana, Vol. X, No. 4 : 138-149. ISNN 0216-1877. (1985).
[11] R.A.Day, JR. dan A.L. Underwood. Analisis Kimia Kuantitatif. Jakarta :
Erlangga (2002).
[12] Features and Functions of a Respirometer. Available :
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab5/features
.html
[13] Siswanto. Bahan Ajar Fisiologi. Laboratorium Fisiologi Universitas
Udayana. Denpasar (2008).
[14] What is a Respirometer. Available : http://www.wisegeek.com/what-is-
a-respirometer.htm
LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN : RESPIRASI 9

LAMPIRAN
Perhitungan pengukuran oksigen dengan metode makro
winkler Kadar DO T1
(tidak ada ikan)
Diket: T1 (tidak ada ikan) Na2S2O3 = 0,19 mL
T2 (ada ikan) Na2S2O3 = 0,15 mL α
N (nilai normalitas) = 0,1
Volume botol winkler = 330 grm
Kadar DO T2
Ditanya: kadar DO T1 dan kadar DO T2 ?? (ada ikan)
Jawab:

Kadar DO T1 =

Penggunaan
= oksigen

Perhitungan pengukuran komsumsi oksigen pada jangkrik

dengan metode respirometer
=
Menit Skala Volume (ml)
1 0 – 0,22 0,22
= 2 0,22 – 0,32 0,10
3 0,32 – 0,39 0,07
4 0,39 – 0,48 0,09
= 5 0,48 – 0,56 0,08
0,56
Kadar DO T2 = Diket : berat jangkrik

Ditanya : penggunaan oksigen pada jangkrik??

= Jawab :

= penggunaan
oksigen
Penggunaan
oksigen

Perhitungan pengukuran oksigen dengan metode mikro

winkler