6.B. Isolasi Bakteri Periodontopatogen
6.B. Isolasi Bakteri Periodontopatogen
TUJUAN :
- Dapat melakukan kultivasi bakteri periodontopatogen pada medium biakan secara
sederhana.
- Membuat dan mengetahui gambaran morfologis bakteri periodontopatogen dengan
pengecatan sederhana Gram
KEGIATAN :
Mahasiswa melakukan penanaman dan pengecatan sampel dari poket gigi yang telah
ditanam pada media Cooked meat.
MEDIUM PERTUMBUHAN :
- Cooked meat (medium untuk pengambilan sampel/ media transport)
- Blood agar (medium untuk menumbuhkan koloni bakteri Porphyromonas
gingivalis)
- Media Luria Berthani (LB) atau media Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Growth Medium (AAGM) , untuk menumbuhkan bakteri Actinobacillus
actinomycetemcomitans / Aggregatibacter actinomycetemcomitans
(A.actinomycetemcomitans)
SAMPEL : Plak yang diambil dari poket penderita infeksi jaringan periodontal
CARA KERJA :
Menumbuhkan koloni bakteri Periodontopatogen
1. Sampel berupa plak diambil dari poket penderita dengan infeksi jaringan periodontal.
Pengambilan sampel dengan menggunakan paper point atau dengan probe / excavator
ukuran kecil yang steril.
2. Plak dimasukkan dalam medium Cooked meat dalam tabung yang ditutup dengan
penutup karet yang dilapisi parafin (supaya tetap dalam keadaan anaerob)
3. Medium diinkubasikan pada jar dalam keadaan anaerob, dan setelah tumbuh ditanam
pada blood agar
4. Blood agar yang telah ditanam kultur bakteri, diinkubasikan lagi pada jar. dalam keadaan
anaerob (anaerobic jar).
Membuat pengecatan Gram
1. Sampel diambil dari kultur bakteri (dari media cooked meat) yang telah diinkubasi
2. Dioleskan pada obyek glass steril untuk dilakukan pengecatan Gram
PEMBACAAN HASIL
Bakteri yang diharapkan tumbuh : Black pigmented anaerob bacteria (Poryphyromonas
sp.,Provetella sp.,Bacteroides), A. actinomycetemcomitans
A. actinomycetemcomitans
Gambaran umum : Gram negative, batang, kecil, facultatif anaerob, non motile.
Koloni : circular convex, Ø 1,0 mm, tepi koloni yang sedikit iregular.
Gambaran koloni pertama : translucent, mengkilat, pada struktur lebih dalam tampak
seperti bintang dan melekat sangat kuat pada agar
Ukuran sel : 1,0 – 1,5 x 0,4-0,5 µm, singly, berpasangan atau small clump