Ringkasan materi HPLC

Nama : Rizkika putra

Kelas : 1KIA
NIM: 062040420440

 HPLC merupakan suatu teknik kromatografi dengan fasa gerak cairan dan fasa
diamnya berupa padat yang menggunakan tekanan tinggi untuk mengirim fase gerak
ke dalam kolom.
 Prinsip dasar dari HPLC adalah memisahkan setiap komponen dalam sample untuk
selanjutnya diidentifikasi (kualitatif) dan dihitung berapa konsentrasi dari masing-
masing komponen tersebut (kuantitatif)
 Komponen HPLC :
1. Wadah Fase Gerak merupakan tandon berisi fase gerak Mempunyai sistem
penyaring
2. Pompa merupakan sistem agar fase gerak mengalir.
3. Injektor alat untuk pemasukan sampel ke dalam sistem KCKT
4. Kolom merupakan bagian yang sangat penting, sebab pemisahan komponen-
komponen sampel akan terjadi di dalam kolom.
Jenis-jenis kolom :
Berdasarkan ukuran (panjang dan diameternya)
 Kolom konvensional
 Kolom mikrobe
 Kolom high speed
Berdasarkan jenis fase
 Kolom fase normal
 Kolom fase terbalik

5. Detektor merupakan suatu bagian integral dari sebuah peralatan analitik

kromatografi cair yang modern.
Macam-macam detektor :
 Detektor spektrofotometrik
 Detektor fluorometrik
 Detektor elektrokimia

 Kegunaan HPLC :
1. HPLC dengan prinsip kromatografi banyak digunakan pada industri farmasi dan
pestisida.
2. Zat- zat dengan kepolaran berbeda yaitu antara sedikit polar sampai polar dapat
dipisahkan
3. Dapat memisahkan asam-asam nukleat dengan kolom penukar ion yang
dikombinasikan dengan kolom butiran berlapis zat berpori.
 4. Dapat memisahkan vitamin- vitamin yang larut dalam air.
5. Digunakan untuk menentukan berat molekul polimer dan masalah-masalah
biokimia.
6. Dapat digunakan untuk memurnikan dan mengidentifikasi suatu senyawa.

 Kelebihan HPLC :
1. Mampu memisahkan molekul-molekul dari suatu campuran dengan daya
memisah yang tinggi.
2. Dapat dihindari terjadinya dekomposisi / kerusakan bahan analisis.
3. Dapat digunakan bermacam-macam detektor dengan kepekaan yang
tinggi.
4. Kolom dapat digunakan kembali.
5. Waktu analisa cukup singkat.
6. HPLC dapat digunakan untuk isolasi zat yang tidak mudah menguap dan
zat yang tidak stabil.
7. Dapat menganalisis sampel yang kecil kuantitasnya.
8. Teknik HPLC dapat dilakukan pada suhu kamar.

 Kelemahan HPLC :
1. Harga sebuah alat HPLC cukup mahal.
2. Sering ada larutan standar yang tertinggal diinjektor.
3. kolom dengan diameter rata-rata partikel fase diam dengan ukuran 5 dan
3 mikrometer sela-sela partikel lebih mudah tertutup oleh kotoran, jadi
harus seringkali dicuci dan kemurnian larutan harus dijaga.