TUGAS KELOMPOK 5

REVIEW JURNAL TENTANG PERHITUNGAN JUMLAH BAKTERI DI LABORATORIUM

MIKROBIOLOGI MENGGUNAKAN PENGEMBANGAN METODE
SPEKTROFOTOMETRI

Disusun Untuk Memenuhi Salah Satu Tugas Kelompok Mata Kuliah Bakteriologi

Kelompok 5
Hasna Nafisah – 5220001
Siti Rodiyah – 5220005
Hedi Kosam Erawan- 5220007
Noval Pahrul Nurhidayat – 5220014
Sabrina Ramadhani – 5220042

PROGRAM ALIH JENJANG D4

INSTITUT ILMU KESEHATAN RAJAWALI
JURUSAN TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK
BANDUNG
2021
 BAB I

PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG
Perhitungan jumlah bakteri merupakan salah satu cara yang dilakukan untuk bisa
mengetahui berapa banyak koloni bakteri yang terdapat pada suatu media, baik itu koloni
sel yang hidup maupun koloni sel bakteri yang mati. Metode yang digunakan adalah
perhitungan secara langsung dan perhitungan secara tidak langsung. Perhitungan jumlah
bakteri secara langsung digunakan untuk menentukan jumlah bakteri keseluruhan baik
yang mati maupun yang hidup. Sedangkan perhitungan bakteri secara tidak langsung
digunakan untuk menentukan jumlah bakteri yang hidup saja.
Standar kekeruhan McFarland digunakan sebagai standar acuan untuk
memperkirakan jumlah mikroba sel dalam suspensi cair. Salah satu kegunaan paling
awal dari kekeruhan untuk estimasi populasi bakteri
Skala McFarland merupakan konsentrasi bakteri/ml Meskipun awalnya dirancang
digunakan untuk memperkirakan konsentrasi bakteri gram negatif seperti E.coli yang
ukurannya jauh lebih kecil dan sulit dihitung dengan metode hemositometer, sekarang
McFarland skala standar digunakan secara luas terhadap bakteri gram positif untuk
membuat inokulum dengan konsentrasi seragam bakteri dalam protokol anti kerentanan
In vitro.
Setiap perhitungan jumlah bakteri baik secara langsung maupun tidak langsung
memiliki kelemahan masing-masing. Jumlah bakteri masih belum mendekati hasil
maksimal dikarenakan perhitungan yang melibatkan sel hidup maupun sel mati bakteri,
keterbatasan alat dan bahan saat perhitungan, keperluan persiapan alat dan bahan yang
cukup panjang, ketelitian penelitian oleh peneliti dan lain-lain.
Perhitungan bakteri secara Turbidimetri (kekeruhan) dengan memakai alat
spektrofotometer adalah contoh perhitungan jumlah bakteri secara tidak langsung. Fungsi
alat Spektrofotometer dalam laboratorium adalah mengukur transmitan atau absorbans
suatu contoh yang dinyatakan dalam fungsi panjang gelombang. Oleh karena itu perlu
dilakukan pengembangan metode spektrofotometer yang digunakan untuk perhitungan
jumlah bakteri di laboratorium mikrobiologi.
 Metode turbidimetri merupakan cara yang cepat untuk menghitung jumlah bakteri
dalam suatu larutan dengan menggunakan alat spektrofotometer. Digunakan untuk uji
antibakteri, dimana jumlah bakteri nya dihitung dengan membandingkan kekeruhan
suspensi bakteri dengan menggunakan larutan standar McFarland. Larutan McFarland
standar digunakan sebagai referensi untuk menyesuaikan kekeruhan bakteri suspensi
sehingga jumlah bakteri dalam kisaran yang diberikan untuk membakukan mikroba
pengujian. Contoh pengujian tersebut adalah antibiotik kerentanan pengujian oleh
pengukuran konsentrasi penghambatan minimum yang secara rutin digunakan dalam
medis mikrobiologi dan penelitian. Jika suspensi yang digunakan terlalu pekat atau
terlalu encer, hasil yang salah (tahan palsu atau palsu rentan) untuk setiap agen
antimikroba yang diberikan bisa terjadi.
Keakuratan jumlah bakteri standar McFarland dapat dilakukan dengan metode
hitungan cawan. Metode ini termasuk metode perhitungan bakteri secara tidak
langsung. Prinsip metode hitungan cawan adalah jika sel mikroba yang masih hidup
ditumbuhkan pada medium agar, maka sel mikroba tersebut akan
berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dengan
mata tanpa menggunakan mikroskop. Metode hitungan cawan merupakan cara yang
paling sensitif untuk menghitung jumlah mikroba karena hanya sel yang masih
hidup yang dihitung dan beberapa jenis mikroba dapat dihitung sekaligus. Metode
hitungan cawan memiliki kelemahan yaitu membutuhkan persiapan dan
waktu inkubasi beberapa hari untuk menghitung pertumbuhan koloni bakteri. Oleh
karena itu, mahasiswa penelitian kebanyakan menggunakan metode turbidity saja
untuk menentukan jumlah bakteri dalam suspensi bakteri uji yang akan digunakan.
Untuk membuktikan bahwa metode spektrofotometri (turbidity) memberikan hasil yang
valid maka perlu pengujian akurasi metode yang dibandingkan dengan metode
hitungan cawan. Pada penelitian ini menggunakan bakteri EscherichIA coli dan bakteri
StAphylococcus Aureus sebagai bakteri uji yang sering digunakan dalam uji
aktivitas antibakteri dan konsentrasi hambat minimum.
Pada penelitian ini dilakukan pembuatan McFarland standard untuk mendapatkan
keakuratannya sama dengan McFarland standard kit sebagai pengganti di laboratorium,
sehingga mudah di dapat dan nilai nya lebih ekonomis. Untuk itu dilakukan pembacaan
 nilai absorban kultur bakteri yang kekeruhan nya sama dengan McFarland standard
menunjukan jumlah bakteri yang sama dengan McFarland standard. Penentuan jumlah
bakteri yang nilai absorban nya sama dengan larutan standar McFarland 0,5 dengan
menggunakan metode hitungan cawan.
B. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, maka didapatkan rumusan masalah
penelitian yaitu “Bagaimana cara perhitungan jumlah bakteri di laboratorium mikrobiologi
menggunakan pengembangan metode spektrofotometri”.

C. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan jumlah bakteri uji yang nilai absorban
nya sama dengan larutan standar McFarland 0,5 dengan menggunakan metode hitungan
cawan
D. Manfaat Penelitian

1. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan data dalam

pengembangan ilmu pengetahuan tentang cara perhitungan jumlah bakteri di
laboratorium mikrobiologi menggunakan pengembangan metode
spektrofotometri.
2. Sebagai media informasi kepada tenaga medis terutama tenaga medis
laboratorium mengenai cara perhitungan jumlah bakteri di laboratorium mikrobiologi
menggunakan pengembangan metode spektrofotometri.
3. Menjadi data acuan untuk penelitian yang lebih lanjut.
 BAB II
REVIEW TEORI

A. Pengertian Perhitungan Jumlah Bakteri

Perhitungan jumlah bakteri merupakan salah satu cara yang dilakukan untuk bisa
mengetahui berapa banyak koloni bakteri yang terdapat pada suatu media, baik itu koloni
sel yang hidup maupun koloni sel bakteri yang mati. Metode yang digunakan adalah
perhitungan secara langsung dan perhitungan secara tidak langsung. Perhitungan jumlah
bakteri secara langsung digunakan untuk menentukan jumlah bakteri keseluruhan baik
yang mati maupun yang hidup. Sedangkan perhitungan bakteri secara tidak langsung
digunakan untuk menentukan jumlah bakteri yang hidup saja.
Setiap perhitungan jumlah bakteri baik secara langsung maupun tidak langsung
memiliki kelemahan masing-masing. Jumlah bakteri masih belum mendekati hasil
maksimal dikarenakan perhitungan yang melibatkan sel hidup maupun sel mati bakteri,
keterbatasan alat dan bahan saat perhitungan, keperluan persiapan alat dan bahan yang
cukup panjang, ketelitian penelitian oleh peneliti dan lain-lain
B. METODE SPEKTROFOTOMETRI
Perhitungan bakteri secara Turbidimetri (kekeruhan) dengan memakai alat
spektrofotometer adalah contoh perhitungan jumlah bakteri secara tidak langsung. Fungsi
alat Spektrofotometer dalam laboratorium adalah mengukur transmitan atau absorbans
suatu contoh yang dinyatakan dalam fungsi panjang gelombang. Oleh karena itu perlu
dilakukan pengembangan metode spektrofotometer yang digunakan untuk perhitungan
jumlah bakteri di laboratorium mikrobiologi.
Metode turbidimetri merupakan cara yang cepat untuk menghitung jumlah bakteri
dalam suatu larutan dengan menggunakan alat spektrofotometer. Digunakan untuk uji
antibakteri, dimana jumlah bakteri nya dihitung dengan membandingkan kekeruhan
suspensi bakteri dengan menggunakan larutan standar McFarland. Larutan McFarland
standar digunakan sebagai referensi untuk menyesuaikan kekeruhan bakteri suspensi
sehingga jumlah bakteri dalam kisaran yang diberikan untuk membakukan mikroba
 pengujian. Contoh pengujian tersebut adalah antibiotik kerentanan pengujian oleh
pengukuran konsentrasi penghambatan minimum yang secara rutin digunakan dalam
medis mikrobiologi dan penelitian. Jika suspensi yang digunakan terlalu pekat atau
terlalu encer, hasil yang salah (tahan palsu atau palsu rentan) untuk setiap agen
antimikroba yang diberikan bisa terjadi
C. STANDAR MCFARLAND
Keakuratan jumlah bakteri standar McFarland dapat dilakukan dengan metode
hitungan cawan. Metode ini termasuk metode perhitungan bakteri secara tidak
langsung. Prinsip metode hitungan cawan adalah jika sel mikroba yang masih hidup
ditumbuhkan pada medium agar, maka sel mikroba tersebut akan berkembang biak dan
membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dengan mata tanpa
menggunakan mikroskop. Metode hitungan cawan merupakan cara yang paling sensitif
untuk menghitung jumlah mikroba karena hanya sel yang masih hidup yang
dihitung dan beberapa jenis mikroba dapat dihitung sekaligus. Metode hitungan
cawan memiliki kelemahan yaitu membutuhkan persiapan dan waktu inkubasi
beberapa hari untuk menghitung pertumbuhan koloni bakteri. Oleh karena itu,
mahasiswa penelitian kebanyakan menggunakan metode turbidity saja untuk
menentukan jumlah bakteri dalam suspensi bakteri uji yang akan digunakan
Pada penelitian ini dilakukan pembuatan McFarland standard untuk mendapatkan
keakuratannya sama dengan McFarland standard kit sebagai pengganti di laboratorium,
sehingga mudah di dapat dan nilai nya lebih ekonomis. Untuk itu dilakukan pembacaan
nilai absorban kultur bakteri yang kekeruhan nya sama dengan McFarland standard
menunjukan jumlah bakteri yang sama dengan McFarland standard. Penentuan jumlah
bakteri yang nilai absorban nya sama dengan larutan standar McFarland 0,5 dengan
menggunakan metode hitungan cawan
 BAB III
REVIEW JURNAL

A. Judul Jurnal
Perhitungan jumlah bakteri di laboratorium mikrobiologi menggunakan pengembangan
metode spektrofotometri
B. Nama Jurnal
http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/article/view/564

C. Penerbit
Jurnal Penelitian Sains
D. Volume dan Halaman
Vol. 22 (2) Hlm. 76-86
B. Tahun
31 Mei 2020
C. Penulis
Rosmania, Fitri Yanti
D. Tanggal Riview
2 Maret 2021
E. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan jumlah bakteri uji yang nilai absorban nya
sama dengan larutan standar McFarland 0,5 dengan menggunakan metode hitungan
cawan..

F. Metode penelitian
Metode penelitian yang digunakan terdiri dari beberapa tahapan, yaitu pembuatan
media, sterilisasi, pemurnian bakteri uji, peremajaan bakteri uji, pembuatan larutan
standar McFarland 0,5, pembuatan kurva standar bakteri, pembuatan kurva
pertumbuhan bakteri, pembuatan suspensi bakteri uji, pengukuran jumlah bakteri
secara metode turbidity, dan pengukuran jumlah bakteri secara metode hitungan
 cawan.

G. Sampel Penelitian
Pada penelitian ini menggunakan bakteri Escherichia coli dan bakteri Staphylococcus
Aureus sebagai bakteri uji yang sering digunakan dalam uji aktivitas antibakteri
dan konsentrasi hambat minimum. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini
yaitu hasil dari pemurnian bakteri uji, peremajaan bakteri uji.

H. Populasi penelitian

Populasi dari penelitian ini adalah hasil dari pemurnian dan peremajaan Escherichia
coli dan bakteri Staphylococcus Aureus sebagai bakteri uji .

I. Pencuplikan sampel

Pencupikan sampel menggunakan metode analitik secara laboratoris dimana pada

penelitian ini menggunakan bakteri hasil dari pemurnian dan peremajaan Escherichia
coli dan bakteri Staphylococcus Aureus sebagai bakteri uji.

J. Pengumpulan Data

Pengumpulan data dilakukan dengan cara analitik secara laboratoris. dengan

mengunakan variable tunggal yaitu Perhitungan jumlah bakteri di laboratorium
mikrobiologi menggunakan pengembangan metode spektrofotometri.
K. Instrument penelitian

Instrument yang digunakan dalam penelitian adalah hasil observasi dari bakteri
Escherichia coli dan bakteri Staphylococcus Aureus sebagai bakteri uji yang sering
digunakan dalam uji aktivitas antibakteri dan konsentrasi hambat minimum.

L. Hasil Penelitian

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa nilai larutan standar McFarland 0,5 yang
dibuat sesuai dengan nilai larutan standar McFarland kit (Himedia) yaitu sekitar 0,08-
0,1. Sehingga lebih ekonomis dan mudah didapat Hasil perhitungan jumlah sel
 Escherichia coli yaitu 1,3 x 107 CFU/ml, jumlah sel Staphilococcus aureus yaitu 1,1 x
107 CFU/ml.

M. Kesimpulan Penelitian

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, dapat diperoleh kesimpulan sebagai

berikut:

1. Mendapatkan hasil pembacaan nilai absorban larutan standar McFarland yang

dibuat sesuai dengan nilai larutan standar McFarland kit (Himedia) yaitu
0,083. sehingga lebih ekonomis dan mudah didapat.
2. Jumlah Escherichia coli adalah 1,3 x 107 CFU/ml dan jumlah sel
Staphilococcus Aureus adalah 1,1 x 107 CFU/ml.
3. Metode spektrofotometri ini lebih mudah dikerjakan dan cepat dalam
penentuan jumlah bakteri pada kurva pertumbuhan bakteri.
4. Kinerja alat spektrofotometer bagus kinerja nya, dengan memberikan hasil
pembacaan nilai Absorban McFarland standar kit (Himedia) yaitu 0,08.

N. Kekuatan Penelitian

1. Pada abstrak sudah dipaparkan secara rinci dan mendalam mengenai topik
yang akan dibahas mulai dari permasalahan, tujuan, metode, dan hasil
penelitian.
2. Pada latar belakang sudah tersampaikan secara mendetail pokok
permasalahan yang terjadi. Hal ini ditunjukkan uraian alasan penulis untuk
meneliti penelitian ini yang dikuatkan pada hasil penelitian-penelitian
sebelumnya.
3. Metode penelitian dijelaskan secara rinci dengan memuat tempat dan
 prosedur penelitian berupa cara kerja untuk menjawab hasil dan pembahasan.
4. Penelitian ini menghasilkan analisis dan pembahasan secara jelas dan
mendalam sesuai dengan permasalahan pada latar belakang. Selain itu,
pembahasan penelitian ini juga mengunakan gambar dan tabel dari hasil
penelitian.

O. Kelemahan Penelitian

1. Tidak adanya penjelasan secara detail tentang prosedur kerja dan jenis
spektofotometer apa yang dipakai.
2. Biaya yg harus di keluarkan oleh peneliti terbilang cukup banyak dikarenakan
banyaknya alur dan prosedur yang harus di tempuh untuk mendapatkan hasil
penelitian yang maksimal.
 BAB IV
PENUTUP

A. Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, dapat diperoleh kesimpulan sebagai berikut:

1. Mendapatkan hasil pembacaan nilai absorban larutan standar McFarland yang

dibuat sesuai dengan nilai larutan standar McFarland kit (Himedia) yaitu 0,083.
sehingga lebih ekonomis dan mudah didapat.
2. Jumlah Escherichia coli adalah 1,3 x 107 CFU/ml dan jumlah sel Staphilococcus
Aureus adalah 1,1 x 107 CFU/ml.
3. Metode spektrofotometri ini lebih mudah dikerjakan dan cepat dalam penentuan
jumlah bakteri pada kurva pertumbuhan bakteri.
4. Kinerja alat spektrofotometer bagus kinerja nya, dengan memberikan hasil
pembacaan nilai Absorban McFarland standar kit (Himedia) yaitu 0,08.
 BAB V
DAFTAR PUSTAKA

http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/article/view/564
Rosmania, Fitri Yanti (31 Mei 2020). Perhitungan jumlah bakteri di laboratorium mikrobiologi
menggunakan pengembangan metode spektrofotometri. Vol. 22 (2) Hlm. 76-86

E. Gayathiri et al. STUDY OF THE ENUMERATION OF TWELVE CLINICAL IMPORTANT

BACTERIAL POPULATIONS AT 0.5 MCFARLAND STANDARD. Intternational Journal of Creative
Research Thoughts (IJCRT). Vol. 6. 2 April 2018.