BioTrends Vol.10 No.

2 Tahun 2019

Teknik Kultur Sel Mamalia Tiga Dimensi (3D) dalam

Bioteknologi Kesehatan
Pekik Wiji Prasetyaningrum
dan Endah Puji Septisetyani
Pusat Penelitian Bioteknologi – LIPI
Kompleks Cibinong Science Center
Jl. Raya Jakarta Bogor KM 46, Cibinong, Kab. Bogor, Jawa Barat 16911
Tel. 021 – 8754587/ Fax. 021 8754588
Email: pekikwiji@gmail.com

diproduksi secara rutin sedangkan pada kultur 2D

Sel merupakan unit
terkecil dari makhluk hidup.
Sel, baik yang yang berasal
dari organisme uniseluler
maupun multiseluler, dapat
dikultur secara in vitro dalam
suatu medium tertentu
dengan kondisi terkontrol
yang sesuai untuk
pertumbuhan sel tersebut.
Untuk sel yang berasal dari
mamalia, teknik kultur sel
mamalia telah
dikembangkan untuk
menumbuhkan sel-sel yang
berasal dari epitel, darah,
ovarium, otak maupun
bagian organ lainnya,
termasuk sel dari jaringan
kanker. Pada umumnya,
teknik kultur sel mamalia ini
memerlukan media khusus
dengan penambahan serum,
teknik aseptis dengan
penggunaan biosafety
cabinet, serta inkubator CO2
untuk menumbuhkan sel.
Aplikasi dari kultur sel
mamalia merupakan salah
satu bagian penting dari
perkembangan ilmu
bioteknologi khususnya
dalam menghasilkan produk
biofarmasetika yang berhasil
seperti antikoagulan, suspensi, sel tersuspensi di
hormon, vaksin, antibodi dalam media kultur dan
monoklonal, dan lain-lain. tidak melekat pada
(Santosoet al.,2013). Selain permukaan culture flask atau
itu aplikasi kultur sel culture dish. Kultur suspensi
mamalia juga memiliki peran pada skala besar pada
penting dalam penemuan umumnya memerlukan
dan pengembangan obat penggoyangan dengan
baru serta kit diagnostik shaker agar sel mendapat
penyakit khususnya sebagai aerasi secara merata.
model pengujian in vitro Pada sistem kultur 2D,
pada umumnya tidak terjadi
Kultur Sel 2 Dimensi interaksi antar sel-sel dan
(2D) interaksi sel dengan
Kultur sel mamalia dapat lingkungan ekstraselular
ditumbuhkan secara yang menyerupai kondisi
konvensional pada kondisi 2 aslinya. Hal tersebut
dimensi (2D). Pada kultur sel menyebabkan terjadinya
2D ini sel dikultur sebagai beberapa perubahan seperti
kultur sel melekat (adheren) perubahan morfologi sel
seperti misalnya sel epitelia, yang dapat mempengaruhi
atau sebagai kultur sel fungsi sel seperti
suspensi seperti halnya sel kemampuan sekresi,
darah. Pemilihan signaling sel, dan struktur
penggunaan metode yang organel yang ada didalam sel
cocok disesuikan dengan itu sendiri. Selain itu, sel
karakteristik dan morfologi yang tumbuh juga akan
sel yang akan dikultur. Pada kehilangan polaritasnya
sistem kultur 2D adheren, sel sehingga akan berimbas
tumbuh membentuk satu pada beberapa fenomena
lapisan sel yang melekat seperti apoptosis sel
pada permukaan culture (Weaver et al., 2002). Sel
flask atau culture dish yang ditumbuhkan dengan
9

sistem 2D juga akan
mengalami perubahan
ekspresi gen, topologi, dan
proses biokimia. Dengan
adanya beberapa
kekurangan dari sistem
kultur 2D, maka
dikembangkanlah metode
alternatif kultur sel 3D yang
memiliki kemiripan lebih
tinggi dengan kondisi
alamiah dari sel jika
dibandingkan dengan
metode kultur sel 2D
(Kapałczyńskaet al., 2016).
Kultur Sel 3 Dimensi
(3D)
Meskipun kultur dua
dimensi (2D) lebih banyak
digunakan terutama untuk
kultur sel secara rutin, saat
ini, metode kutur sel tiga
dimensi (3D) sudah banyak
digunakan terutama untuk
pengujian in vitro. Hal ini
dikarenakan teknik kultur sel
3D lebih dapat
menggambarkan kondisi
jaringan dan mikroarsitektur
dari organ spesifik yang
sebenarnya (Huh D, 2011).
Salah satu scaffold yang
digunakan untuk kultur 3D
adalah matriks ekstraseluler.
Matriks ekstraseluler yang
digunakan ini, selain
berperan sebagai penyangga
fisik juga berperan sebagai
sinyal ekstraseluler. Dengan
demikian, selain mendukung
terbentuknya struktur 3D
yang menyerupai kondisi in
vivo-nya, matriks
ekstraseluler ini juga
berperan dalam
menciptakan lingkungan
mikro in vivo (Gambar 1).
Selain menggunakan matriks
sebagai scaffold, kultur 3D
juga dapat dilakukan tanpa
menggunakan scaffold. Pada
kondisi ini, digunakan
intervensi fisik untuk
memaksa sel membentuk
struktur 3D yang umumnya
berbentuk bola (spheroid)
(Gambar 2). Meskipun
demikian, kultur 3D dengan
menggunakan matriks
ekstraseluler lebih
menggambarkan kondisi in
vivo jika dibandingkan
dengan kultur 3D tanpa
scaffold. Kekurangan dari
kultur 3D ini adalah teknik
yang lebih rumit serta biaya
yang lebih tinggi. Secara
umum, perbedaan kultur 2D
dan 3D dapat dilihat pada
tabel I.
Contoh perbedaan hasil
pengujian ketika dilakukan
pada kondisi 2D dan 3D di
antaranya pada pengujian
sitotoksisitas senyawa
antikanker dan pengujian
migrasi sel. Uji sitotoksik
pada umumnya dilakukan
secara 2D seperti halnya uji
MTT, dengan menumbuhkan
sel secara langung pada 96-
well plate. Pada Teknik 3D,
sel yang ditanam diberi
perlakuan untuk membentuk
spheroid, baik dengan cara
melapisi permukaan kultur
dengan agar dan diikuti
dengan sentrifugasi atau
dengan menggunakan
spheroid microplate yang
sudah banyak tersedia di
pasaran. Kultur sel 2D hanya
10
BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019
akan membentuk satu
lapisan sel sehingga setiap
bagian sel akan terpapar
senyawa uji secara
homogen. Sedangkan pada
kultur sel 3D yang
membentuk bola, sel di
permukaan bola akan lebih
banyak terpapar senyawa uji
daripada sel yang berada di
lapisan bagian dalamnya. Hal
ini akan mengakibatkan efek
sitotoksik yang lebih tinggi
dari senyawa uji pada kultur
2D daripada kultur 3D.
Pengujian migrasi sel
kanker pada kultur 2D dan
3D akan memberikan
perbedaan fenotipe yang
diamati. Pada kultur 2D, sel
adheren akan bergerak pada
bidang datar secara
mesenkimal dengan
bergantung pada
lamellipodia yang
menyerupai kaki siput. Sel
tersebut akan memiliki
polaritas sel yang berbeda
pada 2 kutub, pada bagian
depan sel yang membentuk
lamellipodia, dan bagian
belakang sel yang
menyerupai ekor. Pada
kultur 3D, sel yang diselimuti
oleh matriks, akan bergerak
ke segala arah, baik secara
mesenkimal atau amoeboid,
dengan mekanisme yang
lebih kompleks karena
melibatkan interaksi dengan
matriks tersebut. Dalam hal
ini, tentu saja uji migrasi
pada kondisi 3D lebih
mewakili kondisi in vivo-nya
daripada kondisi 2D.
 BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019

Gambar 1. Korelasi antara struktur 3D dengan kondisi in vivo-nya. Sel MDA-MB-231 yang
dikultur pada 30% matrigel setelah perlakuan TGF-β dan penurunan ekspresi PIAS pada
struktur 3D menunjukkan struktur 3D yang tidak terorganisasi sedangkan sel tanpa
perlakuan menunjukkan struktur 3D membulat. Struktur tidak terorganisasi tersebut
menunjukkan sifat invasif secara in vitro yang memiliki korelasi dengan potensi metastasis
secara in vivo.

Gambar 2. Perbedaan morfologi sel pada kultur 2D monolayer dan kultur 3D spheroid dari
beberapa sel line (sumber: Ravi M et al., 2015)

TEKNIK KULTUR SEL 3D dengan menggunakan yang dapat memfasilitasi

Kultur Dengan
Menggunakan Matriks
Penyangga(Scaffold)
Sebagaimana disebutkan
pada bagian sebelumnya,
kultur sel 3D dapat dilakukan
scaffold. Scaffold merupakan
struktur penyangga atau
rangka yang diciptakan pada
media pertumbuhan sel
pada sistem kultur sel 3D
dengan memanfaatkan
matriks polimer. Scaffold
berperan sebagai penyangga
penyaluran oksigen, nutrisi
dan transpor limbah yang
merata, dengan demikian sel
akan melekat pada jaringan
penyangga, membelah serta
bermigrasi pada dan melalui
struktur jaringan penyangga
(Haycock J. W., 2011).

11

Tabel I. Perbandingan metode kultur sel 2D vs 3D (diadaptasi dari Kapałczyńska et al., 2016)
Parameter 2D
Waktu penumbuhan Menit-jam
sel dalam sistem
kultur
Kualitas kultur Kualitas performa tinggi,
keterulangan yang baik, kultur
jangka panjang, mudah di
interpretasikan, teknik lebih
sederhana
Pendekatan in vivo Tidak menggambarkan struktur
asli jaringan atau massa tumor
Interaksi antar sel Tidak ada interaksi antar sel dan
antar sel dengan lingkungan,
sehingga tidak terbentuk
lingkungan mikro in vivo
Karakteristik sel Mengubah morfologi dan
fenotipe serta polaritas sel
Mekanisme merubah ekspresi gen, mRNA,
molekular topologi dan biokimia sel
Biaya Murah karena media dan reagen Lebih mahal karena
untuk pengujian banyak tersedia membutuhkan matriks untuk
secara komersial menciptakan kondisi kultur 3D
Scaffold dapat dibedakan ekstraselular (ECM). Matriks
ke dalam dua kategori. hidrogel ini berbentuk cair
Kategori pertama adalah in ketika berada pada kondisi
vitro 3D scaffold yang biasa dingin dan akan mengeras
digunakan pada sistem membentuk gel pada suhu
kultur sel 3D untuk ruang atau suhu yang lebih
keperluan eksperimental. tinggi. Gel dapat menyimpan
Contohnya ialah hydrogels nutrisi, sitokin dan faktor
scaffold yang yaitu pertumbuhan (Ravi Met
scaffold/penyangga dengan al.,2015). Bahan hydrogel
bahan dasar gel dan dapat berasal dari
merupakan jenis penyangga biopolimer alami seperti
yang paling banyak basement membrane matrix
digunakan untuk kultur sel (matrigel) maupun sintesis
3D karena memiliki seperti halnya polietilen
kekakuan yang menyerupai glikol (PEG). Kategori kedua
jaringan dan secara yaitu biomedical engineering
sempurna meniru matriks scaffold yang digunakan
12
BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019
3D
Jam-hari
Kualitas performa dan
keterulangan yang lebih buruk,
susah untuk di interpretasikan,
teknik kultur lebih rumit
Membentuk struktur 3D yang
menyerupai kondisi in vivo
Interaksi antar sel dan sel-
lingkungan berlangsung dengan
baik, sehingga terbentuk
lingkungan mikro in vivo
Morfologi sel dipertahankan,
fenotipe dan polaritas sel lebih
beragam
Ekspresi gen, mRNA, topologi
dan biokimia sel seperti in vivo
pada tissue engineering
untuk membantu
rekonstruksi jaringan.
Scaffold jenis ini dapat
dibuat dari bahan polimer
alami seperti kolagen dan
kitosan, polimer sintetik
seperti polyglycolic acid
(PGA), logam titanium dan
tantalium, dan komposit
(campuran antara polimer
dengan keramik). Scaffold
jenis ini umumnya dapat
terdegradasi secara alami.
Kultur 3D dengan
menggunakan scaffold dapat
dilakukan menurut 3 teknik
yang berbeda, yaitu sel
 BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019

dikultur di atas scaffold, sel disebutkan terakhir inilah kemampuan proliferasi,

dikultur di bawah scaffold,
atau sel disuspensikan ke
dalam matriks penyangga
sehingga sel berada di dalam
scaffold. Dari ketiga teknik
tersebut, teknik yang
yang lebih menggambarkan migrasi-invasi dan
lingkungan mikro in vitro. differensiasi sel untuk
Metode ini sangat cocok membentuk struktur
untuk mengamati organoid.
karakteristik alamiah sel
seperti misalnya

Gambar 3. Kultur Sel 3D menggunakan scaffold, a) Interaksi sel dengan lingkungannya dalam
media kultur dengan scaffold; b) Mesenchymal stem cells (MSC) yang melekat pada fibrin
(sumber: a) Kapałczyńska et al., 2016; b) Kombe et al., 2019).

Kultur Tanpa Menggunakan metode scaffold free, waktu ini digunakan plate yang di
Scaffold yang dibutuhkan dalam lapisi oleh polimer yang
pembentukan konstruksi sel dapat menurunkan tingkat
Untuk membentuk suatu
3D lebih cepat jika adhesi antara sel dengan
kultur sel 3D, dapat pula
dibandingkan dengan culture plate, sel yang
dilakukan tanpa
menggunakan metode tersuspensi kemudian di
menggunakan bahan
dengan scaffold karena sentrifugasi, sehingga
biomaterial padat sebagai
dengan metode ini membentuk agregat
pendukung terbentuknya
proliferasi dan migrasi sel spheroid (Breslin, S., &
spheroid. Dengan teknik ini,
bukan merupakan faktor O’Driscoll, L.,2013). Kategori
spheroid dapat terbentuk
dengan cepat, namun kurang yang penting dalam yang kedua ialah metode
pembentukan struktur 3D hanging-drop, pada metode
resisten (Larson B, 2015).
sel. Namun sel yang dapat ini digunakan tray (baki)
Kelebihan metode ini
dikultur dengan metode ini yang membantu
dibandingakn dengan
adalah sel yang memiliki mempertahankan media
metode kultur dengan
kemampuan ikatan agar tetap dalam bentuk
scaffold adalah dapat
intraselular yang kuat cekung, sehingga sel akan
mengembangkan suatu
(Alghuwainem,et al.,2019) terkumpul pada bagian
jaringan hidup hanya
cekung media hingga
berdasarkan kemampuan sel Ada tiga jenis metode kultur
membentuk spheroid.
dalam membetuk matriks sel 3D tanpa menggunakan
Metode kultur spheroid
dan arsitektur jaringan. scaffold, pertama metode
banyak diterapkan untuk
Dengan menggunakan force-floating, pada metode

13

pengujian sitotoksisitas dari
kandidat senyawa
antikanker. Kategori ketiga
ialah metode berdasarkan
agitasi yang terjadi dalam
bioreaktor. Metode ini
merupakan alternatif paling
Gambar 4. Metode kultur sel 3D tanpa scaffold (sumber: Breslin, S., & O’Driscoll, L. 2013)
APLIKASI TEKNIK
KULTUR SEL 3D
Penemuan Obat ( Drug
Discovery)
Pada tahun 2011 terdapat
setidaknya 900 kandidat
obat kanker yang sudah
sampaipada tahap uji klinis
dibawah pengawasan
Federal Drug Administration
(FDA). Namun, hanya sekitar
12 senyawa saja yang dapat
diterima. Hasil tersebut
kurang efektif jika
dibandingkan dengan jumlah
biaya yang dikeluarkan yakni
sekitar ratusan milyar dolar
untuk tahap uji pre-klinis dan
uji klinik. Oleh karena itu
perlu adanya perbaikan
sederhana untuk
membentuk spheroid. Sel
akan dikultur pada suatu
bioreaktor yang terus
diaduk, sehingga sel akan
membentuk agregat dan
tidak akan menempel pada
metode pengujian pada
tahapan awal, sehingga
dapat mengeliminasi
senyawa yang tidak
berkhasiat sedini mungkin
dan dapat meningkatkan
efisiensi penggunaan dana.
Pengujian in vitro dengan
menggunakan metode kultur
sel 3D, seperti halnya uji
sitotoksik dan migrasi sel,
sangat berpotensi untuk
mengatasi permasalahan
tersebut karena seperti yang
telah dijelaskan di atas
bahwa sel yang dikultur
dengan teknik 3D akan lebih
menyerupai kondisi
pertumbuhan selsecara in
vivo (Larson B., 2015).
14
BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019
wadah (Kwlm Jet al.,2003).
Metode ini dapat
diaplikasikan untuk produksi
protein rekombinan pada sel
suspensi.
Beberapa jenis lini sel (cell
line) yang dikultur dengan
sistem 3D menunjukan
sensitivitas yang rendah
terhadap agen antikanker
jika dibandingkan sel yang
dikultur dengan sistem 2D
(Dhiman, H. K., Ray, A. R.,
Panda, A. K,. 2005). Selain
itu, terdapat suatu jenis cell
line yang menunjukan efek
yang berlawanan ketika
dikultur pada system 2D dan
3D (Howes, 2007). Meskipun
demikian, terdapat juga sel
yang menunjukkan fenotipe
yang serupa ketika dikultur
pada system 2D dan 3D.
Spheroid cell line A549 (sel
kanker paru) menunjukan
ekspresi sekresi IL-6 dan IL-8

yang konsisten jika
dibandingkan dengan sel
pada kondisi kultur
monolayernya (2D) (kultur
2D) (Bazou D, 2010).
Kultur Sel dalam Sistem
Mikrofluid (Organ-on-Chip)
Organ-on chip microfluid
adalah suatu teknologi
terbaru, dimana dilakukan
desain sistem yang
menyerupai sistem alamiah
yang ada pada organ aslinya
dalam sebuah chip. Replikasi
sistem organ dalam chip
tersebut dilakukan melalui
desain mikrostruktural,
mekanisme dinamis dan
fungsi biologi organ yang
mirip dengan organ aslinya
(Breslin, S., & O’Driscoll, L.,
2013). Penelitian dengan
sistem kultur 3D merupakan
salah satu faktor penting
karena dalam teknologi ini
dibutuhkan adanya interaksi
antar sel dan sel dengan
lingkungan yang menyerupai
Gambar 5. a) sistem mikrofluid; b) aplikasi metode mikrofluid yang menyerupai organ ginjal
(sumber: a) Breslin, S., & O’Driscoll, L., 2013; (b) Inamdar, N. K., & Borenstein, J. T., 2011).
kondisi aslinya (Inamdar &
Bronstein, 2011). Metode
kultur mikrofluid organ on
chip telah berhasil
diaplikasikan dalam
mendesain sistem kapiler
alveolus dengan
menggunakan polimer
membrane yang
memungkinkan terjadinya
perpindahan udara seperti
pada kondisi asli paru-paru
(Huh D, 2011). Metode ini
juga telah berhasil digunakan
untuk menirukan beberapa
organ seperti liver
(Domansky K, et al., 2010),
ginjal (Jang & Suh, 2010) dan
saluran pencernaan (Sung at
al., 2011) yang selanjutnya
dimanfaatkan dalam
penemuan dan pengujian
obat. Dalam aspek
penemuan dan pengujian
obat, metode ini memiliki
beberapa kelebihan
dibandingkan dengan
metode konvensional seperti
lebih cepat, mirip dengan
15
BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019
kondisi alami organ, biaya
yang dibutuhkan lebih kecil
dan meningkatkan efisiensi
pengujian (Baudoin R et al.,
2007).
Kultur mikrofluid juga
telah digunakan untuk
mendesain suatu model
penyakit yang menyerupai
kondisi in vivo nya seperti
Alzheimer (Lee & Park,
2010), dan beberapa jenis
kanker. Metode ini juga
digunakan mempelajari
kanker payudara, dimana sel
epitel payudara manusia di
kultur bersama dengan sel
fibroblast payudara manusia
untuk mempelajari transisi
sel abnormal yang muncul
pada saluran susu di
payudara yang merupakan
bentuk paling awal dari
kanker payudara (Ductal
Carcinoma in situ (DCIS))
menjadi kanker payudara
yang sudah menyebar
(invasive) (Sung et al., 2011).

Produksi Protein Obat
Rekombinan
Protein rekombinan
seperti misalnya
erythropoietin diproduksi
dengan menggunakan sel
mamalia untuk
mendapatkan profil
glikosilasi yang identik
dengan protein aslinya (Egrie
et al (2003). Terkait dengan
hal ini, sel CHO (Chinese
hamster ovary) merupakan
salah satu sel mamalia yang
banyak digunakan untuk
produksi protein
rekombinan. Sel ini
disuspensikan untuk
mendapatkan densitas sel
yang tinggi di dalam
bioreaktor untuk
meningkatkan produksi
protein rekombinan. Aplikasi
sistem 3D pada bioreaktor
adalah dengan penggunaan
microcarrier untuk
imobilisasi sel untuk
mencegah stress akibat
pengadukan (shear stress)
yang dapat menyebabkan
kematian sel (Hunter et
al.,2019).
DAFTAR PUSTAKA
Alghuwainem, A.,
Alshareeda, A. T., &
Alsowayan, B. (2019):
Scaffold-Free 3-D Cell
Sheet Technique Bridges
the Gap between 2-D Cell
Culture and Animal
Models. International
journal of molecular
sciences, 20(19), 4926.
Baudoin R, Griscom L,
Monge M, Legallais C,
Leclerc E. (2007):
Development of a renal
microchip for in vitro
distal tubule models.
Biotechnology Progress,
23:1245-1253.
Bazou, D. (2010):
Biochemical properties of
encapsulated high-density
3-D HepG2 aggregates
formed in an ultrasound
trap for application in
hepatotoxicity studies:
Biochemical responses of
encapsulated 3-D HepG2
aggregates. Cell Biol.
Toxicol., 26 (2), 127-141
Breslin, S., & O’Driscoll, L.
(2013): Three-dimensional
cell culture: the missing
link in drug
discovery. Drug discovery
today, 18(5-6), 240-249.
Dhiman, H. K.; Ray, A. R.;
Panda, A. K. (2005):
Three-dimensional
chitosan scaffold-based
MCF-7 cell culture for the
determination of the
cytotoxicity of tamoxifen.
Biomaterials, 26 (9), 979-
986
Domansky K, Inman W,
Serdy J, Dash A, Lim
MHM, Griffith LG.
(2010):Perfused multiwell
plate for 3D liver tissue
engineering. Lab on a
Chip, 10:51-58.
Edmondson, R., Broglie, J. J.,
Adcock, A. F., & Yang, L.
(2014): Three-dimensional
cell culture systems and
their applications in drug
discovery and cell-based
biosensors. Assay and
drug development
16
BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019
technologies, 12(4), 207-
218.
Egrie, J.C., Dwyer, E.,
Browne, J.K., Hitz, A.,
Lykos, M.A. (2003):
Darbepoetin alfa has a
longer circulating half-life
and greater in vivo
potency than
recombinant human
erythropoietin. Exp
Hematol, 31(4):290-299.
Haycock, J. W. (2011): 3D cell
culture: a review of
current approaches and
techniques. In 3D cell
culture (pp. 1-15).
Humana Press.
Howes, A. L., Chiang, G. G.,
Lang, E. S., Ho, C. B.,
Powis, G., Vuori, K.,
Abraham, R. T. (2007):
The phosphatidylinositol
3-kinase inhibitor, PX-866,
is a potent inhibitor of
cancer cell motility and
growth in three-
dimensional cultures.
Mol. Cancer Ther., 6 (9),
2505-2514.
Huh, D., Hamilton, G. A., &
Ingber, D. E. (2011): From
3D cell culture to organs-
on chips. Trends in cell
biology, 21(12), 745-754.
Hunter, M., Yuan, P.,
Vavilala, D., Fox, M.
(2019):Optimization of
Protein Expression in
Mammalian Cells. Current
Protocols in Protein
Science, 95,e77. doi:
10.1002/cpps.77.
Inamdar, N. K., & Borenstein,
J. T. (2011): Microfluidic
cell culture models for
tissue

engineering. Current
opinion in
biotechnology, 22(5), 681-
689.
Jang K-J, Suh K-Y (2010): A
multi-layer microfluidic
device for efficient culture
and analysis of renal
tubular cells. Lab on a
Chip, 10:36-42.
Kapałczyńska, M., Kolenda,
T., Przybyła, W.,
Zajączkowska, M.,
Teresiak, A., Filas, V., ... &
Lamperska, K. (2018): 2D
and 3D cell cultures–a
comparison of different
types of cancer cell
cultures. Archives of
medical science:
AMS, 14(4), 910.
Kelm, J. M., Timmins, N. E.,
Brown, C. J., Fussenegger,
M., & Nielsen, L. K.
(2003): Method for
generation of
homogeneous
multicellular tumor
spheroids applicable to a
wide variety of cell
types. Biotechnology and
bioengineering, 83(2),
173-180.9064-8. Santoso Adi, et al.(2013):
Knight, A. (2007): Systematic
reviews of animal
experiments demonstrate
poor human clinical and
toxicological utility. ATLA- Sung JH, Yu J, Luo D, Shuler
Altern. Lab Anim., 35 (6),
641-659
Kombe et al (2019): 3D cell
culture and application.
https://www.elveflow.co
m/organs-on-chip/3d-cell-
culture-methods-and- Weaver, V.M. et al. (2002):
applications-a-short-
review/#_ftn62)
Larson, B. (2015): 3D cell
culture: A review of
current
techniques. BioTek, 6, 1-
10.
Ravi, M., Paramesh, V.,
Kaviya, S. R., Anuradha, E.,
& Solomon, F. P. (2015):
3D cell culture systems:
17
BioTrends Vol.10 No.2 Tahun 2019
advantages and
applications. Journal of
cellular
physiology, 230(1), 16-26.
Teknis dasar kultur sel
mamalia dan aplikasi
dalam bidang
farmasi.Modul pelatihan.
ML, March JC (2011):
Microscale 3-D hydrogel
scaffold for biomimetic
gastrointestinal (GI) tract
model. Lab on a Chip,
11:389-392.
[beta]4 integrin-
dependent formation of
polarized
threedimensional
architecture confers
resistance to apoptosis in
normal and malignant
mammary epithelium.
Cancer Cell, 2, 205–216