Nama : Ayu Nazila Selasa, 30 Maret 2021

NIM : 1908109010015
Kelas : Farmasi A

Tugas Rangkuman Jurnal Bioteknologi

1. Journal of Tissues Engineering: Strategies, Stem Cells and Scaffold

Rekayasa jaringan merupakan bidang interdisipliner yang menerapkan prinsip-prinsip
teknik dan ilmu biologi dalam mengganti jaringan yang rusak dengan jaringan baru guna
memulihkan, mempertahankan, dan meningkatkan fungsi jaringan atau organ tubuh. Dalam
hal ini penggunaan matriks perancah bertujuan untuk mengisis kekosongan jaringan,
memberi dukungan structural untuk menunjang pertumbuhan sel yang akan membentuk
jaringan baru tubuh setelah proses transplantasi.

 Terdapat 2 pendekatan utama digunakan dalam rekayasa jaringan untuk

menghasilkan jaringan yang direkayasa, yaitu:
1) perancah dapat digunakan sebagai perangkat pendukung sel di mana sel diunggulkan
secara in vitro; sel kemudian didorong untuk meletakkan matriks untuk menghasilkan
fondasi jaringan untuk transplantasi.
2) melibatkan penggunaan perancah sebagai faktor pertumbuhan/perangkat pengiriman
obat.
Strategi ini melibatkan perancah yang digabungkan dengan faktor pertumbuhan,
sehingga sel-sel implantasi dari tubuh direkrut ke situs perancah dan membentuk
jaringan di atas dan di seluruh matriks. Kedua pendekatan ini tidak saling eksklusif dan
dapat dengan mudah digabungkan.

 Terdapat 3 sumber sel yang digunakan dalam rekayasa jaringan, yaitu:

1) Sel induk embrionik
Sel induk embrionik dapat memungkinkan produksi jaringan yang cocok untuk setiap
pasien, baik melalui penyimpanan sel induk atau dengan menggunakan kloning
terapeutik. Sel ES memiliki kemampuan untuk dipertahankan untuk periode kultur yang
lama (secara teoritis tidak terbatas), oleh karena itu berpotensi menyediakan sejumlah
besar sel untuk jaringan yang tidak dapat diturunkan secara langsung dari 67 sumber
jaringan. Bukti sifat berpotensi majemuk sebenarnya dari sel ES adalah pembentukan
teratoma. Sifat ini mendemonstrasikan kemampuan sel punca untuk merekayasa jaringan
 beberapa jenis jaringan tetapi juga menyoroti pentingnya menggunakan stok sel yang
terdiferensiasi secara terminal tanpa sifat seperti sel punca laten. Oleh karena itu,
penggunaan sel punca akan membutuhkan metode untuk memastikan diferensiasi, baik
dengan demonstrasi pemilihan hanya sel non-punca atau dengan pengangkatan semua sel
punca dan dengan in vivo demonstrasi tidak adanya pembentukan teratoma.
2) Sel induk mesenkim yang diturunkan dari sumsum tulang
Jenis sel induk untuk perbaikan tulang dan tulang rawan adalah BM-MSC dewasa;
sel-sel ini telah terbukti mampu untuk berdiferensiasi dari populasi sel sumsum generik
ke garis keturunan osteogenik dan telah digunakan untuk meningkatkan perbaikan
tulang. Populasi sel MSC dapat diisolasi sebagai fraksi dari unit pembentuk koloni
sumsum tulang yang melekat – fibroblastic.
3) Sel punca mesenkim turunan
Sel ini berasal dari tali pusat, yaitu ditemukan sejak adanya penelitian yang
mengatakan bahwa darah tali pusat mengandung MSC yang dapat mengalami diferensiasi
multi-garis. Analisis profil ekspresi gen mereka mengungkapkan kesamaan dengan BM-
MSCs, dengan kemampuan untuk berdiferensiasi menjadi adiposit, hepatosit dan mirip
neuron sel.

 Terdapat 5 model desain dan strategi perancah, yaitu:

1) Bahan suntik untuk rekayasa jaringan / pengobatan regenerative
Perancah yang dikembangkan untuk penggunaan ortopedi adalah 'Injectabone', sistem
perancah baru yang dapat terurai secara hayati, partikulat, yang dapat disuntikkan ke
lokasi trauma tulang. Bentuk perancah melalui penggunaan dua jenis mikropartikel
PLGA. Tipe 1 adalah komposit PLGA / polietilen glikol (PEG) peka suhu yang bertindak
sebagai perekat untuk partikel PLGA tipe II. Dinamika jenis perancah ini memungkinkan
injeksi pada suhu kamar dan pemadatan pada suhu tubuh memungkinkan sistem
pengiriman non-invasif untuk pengobatan cacat tulang non-union.
2) Penggabungan faktor pertumbuhan ke dalam perancah
Perancah pertumbuhan dapat secara bersamaan digunakan sebagai agen untuk
pengiriman obat. Secara teori, perancah dapat digunakan untuk mengantarkan faktor
pertumbuhan / obat ke lokasi perbaikan, sehingga mempercepat proses pemulihan.
Karena kinetika dan kompleksitas pelepasan faktor pertumbuhan biologis, proses tersebut
memerlukan penyelidikan ekstensif. Fungsi penggabungan faktor pertumbuhan dapat
lebih ditingkatkan dengan zonasi, menawarkan cara yang menarik untuk mengontrol
integrasi dan perkembangan jaringan, yang berpotensi memungkinkan pelepasan protein
regional untuk bertindak pada populasi sel tertentu atau memulai proses fisiologis, yaitu
angiogenesis, di lokasi tertentu di seluruh penjuru. perancah. Sistem ini telah dibuktikan
oleh Suciati et al. 2006, di mana mikropartikel PLA / PEG diisi dengan protein seperti
peroksidase lobak, tripsin atau BMP-2. Partikel-partikel ini kemudian disinter untuk
membentuk lapisan yang berbeda. Perancah ini dapat mempertahankan pelepasan selama
periode hingga 30 hari, dengan partikel bermuatan BMP-2 mampu memulai diferensiasi
osteogenik zona dari sel C2C12 yang responsif secara in vitro.
3) Pemrosesan polimer karbondioksida superkritis
Desain ini memerlukan pelarut organik dan metode untuk menyediakan pori-pori,
seperti penyertaan butiran garam, yang kemudian dihilangkan dengan pencucian, atau
dengan penambahan bahan peniup atau pembusa CO2 superkritis membentuk fasa antara
cairan dan gas yang mampu menembus banyak polimer dan membuatnya menjadi
plastis. Penguapan menghasilkan pemadatan polimer dan dapat dikontrol untuk
memadukan titik nukleasi gelembung yang terpisah, menghasilkan perancah retikulasi
dan saling terhubung dengan rasio kekuatan terhadap berat yang tinggi CO2 superkritis
juga dapat digabungkan dengan obat peptida dengan kerusakan minimal, jika terpapar
sebentar itu cukup inert untuk memasukkan sel-sel hidup dengan plastisisasi perancah di
sekitar sel. Penggunaan CO2 memiliki batasan tertentu untuk menghasilkan perancah
yang baik. struktur yang dihasilkan secara arsitektural sangat kuat dan kemampuan
dengan mudah untuk memasukkan obat peptida yang sensitif merupakan keuntungan
utama.
4) Modifikasi plasma pada permukaan perancah
Modifikasi kimia permukaan perancah dengan deposisi polimerisasi plasma gas
bermuatan, dimungkinkan untuk memanipulasi daerah di mana sel akan menempel dan
tumbuh. Deposisi alil amina terpolimerisasi plasma (ppAm) memungkinkan pelekatan sel
yang lebih kuat ke permukaan yang dilapisi; sebaliknya, deposisi heksana terpolimerisasi
plasma (ppHex) sangat menolak adhesi sel. Karena plasma dengan mudah menembus
struktur 3D seperti perancah rekayasa jaringan, mengubah properti perancah untuk
perlekatan sel dimungkinkan dengan menghasilkan gradien kimia permukaan dengan
melapisi zona adhesi sel rendah hingga tinggi.
5) Produksi perancah khusus
Perancah diproduksi untuk individu melalui pencetakan tiga dimensi (3D) khusus
menggunakan teknik litografi stereo laser. Prosesnya mirip dengan prosedur pembuatan
 prototipe cepat dimana lapisan partikel disinter secara selektif menggunakan laser terarah;
Partikel yang menyatu ini selanjutnya dilapisi dan disinter hingga beberapa hingga
beberapa ratus lapisan telah diikat bersama, menghasilkan perancah 3D kustom. Perancah
juga dapat dicetak untuk memasukkan sel menggunakan sistem seperti gel sekering dan
sistem manik sel. Jaringan tertentu, seperti otot, mungkin memerlukan sifat material yang
berbeda karena jaringan ini membutuhkan kelenturan sebagai bagian fundamental dari
cara kerjanya.

2. Journal of Tissue Engineering: The Use of Stem Cells in Regenerative

Medicine
Pengobatan regeneratif adalah bidang multidisiplin yang mencakup rekayasa jaringan.
Tujuan utamanya adalah untuk mengusulkan cara-cara inovatif untuk menjaga jaringan dan
organ tubuh bekerja dengan baik, meningkatkan kesehatan, terutama ketika beberapa jenis
gangguan terjadi di dalamnya . Contohnya adalah kehilangan jaringan setelah kecelakaan,
yang membutuhkan bantuan untuk mencapai regenerasi jaringan untuk mendapatkan kembali
fungsi normalnya. Rekayasa jaringan menawarkan alternatif dengan membuat struktur yang
meniru jaringan normal. Rekayasa jaringan tidak hanya meregenerasi jaringan yang terluka
atau sakit tetapi juga berkontribusi pada faktor-faktor yang dapat menentukan nasib sel dan
mencari teknologi diagnosis baru. Empat komponen yang harus diperhatikan dalam rekayasa
genetika adalah sel, media kultur, matriks berpori, dan bioreaktor. Dalam jurnal ini, yang
difokuskan adalah penggunaan sel punca dalam pengobatan regenerative.
Sel punca atau stem cell merupakan sel dasar yang dapat berdiferensiasi menjadi
bermacam-macam sel. Menurut sumbernya, sel punca dibagi menjadi sel punca embrio dan
sel punca dewasa.
 Sel punca embrio (ESC) dapat berdiferensiasi menjadi sel dari ektoderm, endoderm, atau
mesoderm karena bersifat pluripoten. Sel punca embrio dapat berasal dari tipe sel yang
berbeda di bawah stimulasi tertentu. Sampel sel punca embrio manusia yang sama dapat
dirangsang untuk berdiferensiasi menjadi jaringan saraf, tulang rawan, hati, dan pembuluh
darah. Kondisi yang menentukan nasib sel yang berbeda dapat berupa struktur perancah
tiga dimensi yang berbeda. Massa sel dalam (ICM) adalah sumber ESC yang berpotensi
majemuk. Untuk mendapatkan ESC diperlukan pembuahan oosit manusia dengan sperma
manusia, dibudidayakan hingga mencapai tahap blastokista, kemudian perkembangan
manusia perlu diinterupsi untuk mendapatkan ESC dari ICM.
 Sel punca dewasa (ASC) menggunakan alternatif ASCs dalam penggunaannya karena
isolasi sel punca dewasa tidak memerlukan penghancuran embrio. ASC dapat ditemukan
di jaringan berbeda yang ada di tubuh orang dewasa. Peran utama sel punca dewasa adalah
untuk menjaga kondisi jaringan jika terjadi cedera atau kerusakan yang disebabkan oleh
penyakit, mendorong perbaikan jaringan. ASC mudah dibudidayakan secara in vitro dan
memiliki tingkat perkembangbiakan yang tinggi. Namun ASC memiliki perbedaan
dengan ESC. Misalnya, ASC adalah multipoten sedangkan ESC adalah pluripotensi. Itu
membatasi penerapan ASC karena diferensiasi sel-sel ini sudah dilakukan pada baris sel
tertentu. Misalnya, hematopoietik SC (ASC pertama yang dipelajari dapat ditemukan di
sumsum tulang, tali pusat, dan darah plasenta, dan berasal dari semua sel darah tetapi
bukan neuron.
 iPSCs merupakan sebuah teknik penting untuk mengubah sel normal menjadi SC untuk
menghasilkan SCs pluripoten terinduksi. iPSCs juga dapat diperoleh dari orang dewasa,
tetapi ini membutuhkan pemrograman ulang dari sel yang berdiferensiasi umum ke
keadaan seperti ESC.

Isolasi dan Diferensiasi Sel Punca meliputi:

 Isolasi Sel Punca Turunan Adiposa
Isolasi SC yang diturunkan dari adiposa dapat dilakukan dengan menggunakan bahan awal
jaringan adiposa yang diangkat selama operasi plastik dengan sedot lemak aspirasi.
Protokol ini digunakan oleh Bunnell dan rekan kerja dan harus dilakukan maksimal 24 jam
setelah mendapatkan jaringan adiposa.
 Diferensiasi Osteogenik
Direkomendasikan bahwa SC yang diturunkan dari adiposa berada dalam kultur bagian 3
untuk digunakan. Seed 5 10 6 ASCs dalam perancah 3 mm 3 mm 3 mm hidroksiapatit
(HA) / b-trikalsium fosfat (b-TCP): 60% HA dan 40% b-TCP dengan ukuran pori rata-rata
200e800 mm. Mediumnya harus osteogenik, mengandung 50mg / mL asam askorbat 2-
fosfat (Sigma, USA), 10 mM b-gliserofosfat dan 0,1 mM deksametason . Inkubasi
perancah berbiji dalam media oste ogenik pada 37 C dan 5% CO2 selama 21 hari.

Pemeliharaan dan Karakterisasi Sel meliputi:

 Sel Punca: Turunan adiposa yang diturunkan dari adiposa yang diisolasi dari jaringan
adiposa dapat diidentifikasi dengan beberapa karakteristik seperti kepatuhan pada pelat
kultur sel setelah isolasi, kemampuan sel untuk berdiferensiasi menjadi berbagai garis
 keturunan, dan ekspresi penanda tertentu. Ekspresi yang diberikan oleh SC turunan
adipose adalah penanda tingkat tinggi CD49d, CD105, CD13, dan CD7 dan dapat
mempertahankan ekspresi yang tinggi ini setidaknya selama 3 bulan dan tujuh bagian
kultur in vitro. SC yang diturunkan adiposa dapat distimulasi untuk berdiferensiasi,
misalnya, menjadi jenis sel adipogenik, osteogenik jenis sel, dan jenis sel kondrogenik.
 Sel Tulang yang Dihasilkan Sel: Tulang yang dihasilkan di dalam perancah dapat
memiliki karakterisasi yang dilakukan secara in vitro dan fungsinya diakses secara in vivo.
Di antara analisis yang dapat dilakukan untuk mengkarakterisasi sel tulang dari sampel in
vitro atau in vivo adalah penentuan konsentrasi osteopontin, aktivitas alkalin fosfatase,
kandungan kalsium, profil ekspresi gen, dan pemeriksaan histologis.