Three-Dimensional Cell Culture Systems

and Their Applications in Drug Discovery

and Cell-Based Biosensors

RATNA AZIZAH 0402515087

ARININGTYAS DWI M
0402515089

PENDAHULUAN
PENEMUAN OBAT .. PENGUJIAN OBAT

3D cultur
Sebuah

kultur sel 3D adalah sebuah

lingkungan artifisial yang dibuat di mana
sel-sel biologis diizinkan untuk tumbuh atau
berinteraksi dengan lingkungan sekitar
dalam
tiga
dimensi.
Tidak
seperti
lingkungan 2D (misalnya petri dish ), kultur
sel 3D memungkinkan sel in vitro untuk
tumbuh ke segala arah, mirip dengan
bagaimana mereka akan tumbuh secara in
vivo. Kultur tiga dimensi biasanya tumbuh
di bioreaktor, kapsul kecil di mana sel
dapat tumbuh menjadi spheroids, atau
koloni sel 3D.

PEMBAHASAN

Fig. 1. Schematic diagrams of the traditional two-dimensional (2D)

monolayer cell culture (A) and three typical three-dimensional (3D) cell
culture systems: cell spheroids/aggregates grown on matrix (B), cells
embedded within matrix (C), or scaffold-free cell spheroids in
suspension (D).

KARAKTERISTIK SELULER DAN PROSES DALAM SISTEM

KULTUR 2D DAN 3D

Keuntungan Kultur 3D
Lingkungan yang sesuai bagi sel-sel

tumor di dalam tubuh

Morfologi dan struktur jaringan yang
komplek
Differensiasi,polarisasi, perilaku sel dan
interaksi antar sel normal
Biologi sel lebih realistis dan berfungsi
Lebih prediksi dari penyakit dan respon
obat

Mekanisme pemodelan lebih

akurat dari jaringan target

Waktu produksi lebih pendek
Biaya lebih hemat
Jumlah sel kurang
Sederhana untuk
mengotomatisasi

3D cell culture techniques

3D cell culture techniques

1. Spontaneous cell aggregation
Sel-sel ganas (malignant) memiliki
kemampuan untuk mengikuti sel sejenis
(homotypic aggregation) and sel yang
berlainan ( heterotypic aggregation)
Sel-sel ganas membentuk agegrat
multiseluler
Spheroids mirip dengan nodul avaskular
tumor

 2. Liquid overlay cultures

Kekuatan perekat antara sel jauh lebih tinggi
daripada sel indiviual

3D cell culture techniques

Sel tidak tumbuh di dasar tapi tumbuh di atas
substrat non perekat
Substrat yang digunakan: agar/agarose, polyhydroxymethyl methaacrylate atau Matrigel
3. Hanging drop method

3D cell culture techniques

4. Spinner flask culture
Sel ditumbuhkan dalam media kultur
Sel dikultur dalam kecepatan yang tinggi
dengan tangki bioreaktor berpengaduk
Tidak ada lampiran untuk substrat
Gerakan cairan membantu dalam massa
transport nutrisi dan limbah dari
spheroids

3D cell culture techniques

5. Gyratory shakers and roller
tubes
Cell suspension is placed in
Erlenmeyer flask containing
specific amount of medium
Flask is then rotated in a
gyratory rotation
Spheroids of required size are
produced

14

6.

Microcarrier beads

This technique uses a microcarrier bead

surface to culture cancer cells
The primary advantage of microcarrier
beads is that they support the
aggregation of attachment dependent
cells and cell lines which do not
spontaneously aggregate.

Microcarrier beads
Promote the culture of normally difficult to grow or

more sensitive cell lines(e.g.endothelial cells,

haemopoietic cells)
Co-culturing different cell types is possible
Microcarrier beads differs in their coatings (e.g.
positivelycharged
DEAE,
trimethyl-2hydroxyaminopropyl groups, collagen coated, etc.),
sizes (95210m) and composite material (e.g.
dextran).
Exihibit cellcell or cellsubstratum interactions.
Can be used for mass cultivation
Cell differentiation and maturation, metabolic studies

3D cell culture techniques

7. Scaffold based cultures

Memberikan kekuatan mekanik untuk mendukung

adhesi sel dan pertumbuhan dalam bentuk 3D.

Mungkin dari biologi (misalnya kolagen, laminin,
alginat, chitosan) dan sintetis (mis. Poli (laktidacoglycolide), PEG) polimer
Baru-baru ini, biodegradable 3D, perancah yang
direkayasa menunjukkan metode peningkatan simulasi
ECM (baru baru ini metode ini mengalami
peningkatan untuk simulasi ECM )
Sel mengikuti serat dan berkembang biak ke dalam
ruang interstitial antara serat
17

3D cell culture techniques

8. Rotary cell culture system
Very low shear stress forces
Minimal contact with vessel wall
Simulated zero gravity
Quick production of spheroids
Culture multiple cell types
Produce more differentiated complex
epithelial shape
The cylindrical vessel of the bioreactor is
completely filled with cell suspension, and is
then continuously rotated to maintain cells in
a free fall state
18

Speroid
Koloni sel yang merupakan hasil dari
kultur 3D
Struktur spheroids 3D.

Kultur Sel 3D untuk

pengujian Obat
Kultur sel 3D dapat juga digunakan untuk pengujian obat.
Sejumlah

penelitian telah menemukan bahwa sel-sel

dikultur dalam model 3D lebih tahan terhadap obat
antikanker dari pada kultur 2D.
Aspek-aspek
spasial dan fisik dalam kultur 3D
mempengaruhi transduksi sinyal dari luar ke dalam sel,
dan akhirnya mempengaruhi ekspresi gen dan perilaku
selular.
Misalnya pada ovarium, kelangsungan hidup sel kanker
dan proliferasi dalam kultur 3D setelah pengobatan
paclitaxel berkurang sebesar 40% atau 60% di spheroids
sel 3D, sementara perlakuan yang sama menyebabkan
viabilitas sel berkurang 80% dalam monolayer sel 2D.

Aspek Perbedaan respon kultur 2D

dan 3D
1. Perbedaan sifat fisik dan physiological

antara kultur 3D dan

2D
2. Perbedaan dalam ekspresi dan
organisasi spasial reseptor permukaan
dalam kultur 3D dan 2D
3. Perbedaan tingkat ekspresi gen kanker
4. Perbedaan dalam tahap sel
5. Perbedaan dalam aksesibilitas obat
untuk sel-sel dan pH lokal.

Kutur sel 3D Berbasis Sel Biosensor

Sel berbasis biosensor telah menjadi pilar

penting dari proses penemuan obat dengan

alternatif sederhana, cepat, dan biaya-efektif
untuk skala besar dan biaya-intensif
pengujian hewan
Pertumbuhan sel dalam kultur 3D dapat
dimasukkan ke dalam biosensor dengan baik
langsung ke permukaan substrat biotik atau
abiotik atau secara tidak langsung melalui
bio-polimer biokompatibel
Pilihan substrat tergantung pada kedua sel
line dan aplikasi sensor; biosensor
menggunakan permukaan silikon, kaca, atau