UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL 96%

LIMBAH KULIT PISANG AMBON ( Musa Paradisiaca L.)

TERHADAP BAKTERI PENYEBAB JERAWAT
(Propionibacterium Acne )

Proposal

OLEH :

Leli Rahmadani
NIM : 1751081

PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI

INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA
LUBUK PAKAM
2021
 KATA PENGANTAR

Alhamdulillah Puji syukur penulis ucapkan atas kehadiran Allah SWT karena

berkat rahmat dan ridho-Nya lah penulis dapat menyelesaikan penyusunan

proposal skripsi dengan judul “UJI AKTIVITAS ANTI BAKTERI EKSTRAK

ETANOL96% LIMBAH KULIT PISANG AMBON ( Musa Paradisiaca L.)

TERHADAP BAKTERI PENYEBAB JERAWAT (Propionibacterium Acne

)”. Sholawat dan salam semoga senantiasa tetap tercurahkan buat junjungan alam

yakni besar Muhammad SAW serta kelurga dan para sahabat ,aamiin. Penulisan

proposal skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat untuk

mengerjakan skripsi pada program Strata-1 di jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi,

Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam. Penulis menyadari dalam penyusunan

proposal skripsi ini tidak akan selesai tanpa bantuan dari berbagai pihak. Karena

itu pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:

1. Dr. Johannes Sembiring, M.Pd., M.Kes, selaku Ketua Yayasan Institut

Kesehatan Medistra Lubuk Pakam.

2. Ns.Rahmad Gurusinga,Skep,M.kep Selaku Rektor Institut Kesehatan

Medistra Lubuk Pakam.

3. Romauli Anna Teresia Marbun, S.Farm., M.Si., Apt, Selaku Dekan

Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam.

4. Ahmad Syukur Hasibuan, S.Farm., M.Farm., Apt, selaku Ketua Program

Studi Farmasi Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra Lubuk

Pakam.
5. apt. Fahma Shufyani.,M.farm Selaku Dosen Pembimbing yang sabar dan

tulus serta banyak memberikan perhatian , dukungan, pengertian, dan

pengarahan.

6. Seleruh Staf Dosen Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam yang telah

mengajarkan banyak hal tentang ilmu pengetahuan yang bermanfaat

sekaligus mendidik peneliti untuk menjadi pribadi yang berkualitas selama

pendidikan.

7. Ucapan terimaksih yang tulus dan ikhlas penulis sampaikan kepada

Ayahanda tercinta Alm, azrai dan Ibunda tercinta Harirohma yang selalu

mendoakan serta memberikan semangat dan dukunganya.

8. Ucapan terimaksih yang tulus juga penulis ucapkan kepada teman-teman

yang telah membantu penulis dalam menyusun proposal ini.

 DAFTAR ISI
KATA
PENGHANTAR…………………………………………………………………………………...i
DAFTAR ISI……………………………………………………………………………………………………………………………..ii

BAB 1.............................................................................................................................................7
PENDAHULUAN..........................................................................................................................7
1.1 Latar Belakang..............................................................................................................7
1.2 Rumusan masalah.......................................................................................................10
1.3 Tujuan Penelitian.........................................................................................................10
1.3.1 Tujuan Umum.......................................................................................................10
1.3.2 Tujuan Khusus.....................................................................................................10
1.4 Manfaat Penelitian......................................................................................................11
1.4.1 Bagi Institusi........................................................................................................11
1.4.2 Bagi Peneliti..........................................................................................................11
1.4.3 Bagi Masyarakat....................................................................................................12
BAB II..........................................................................................................................................13
TINJAUAN PUSTAKA...............................................................................................................13
2.1 Pisang Ambon (Musa paradisiaca)............................................................................13
2.1.1. Taksonomi Pisang Ambon..........................................................................................13
2.1.2 Morfologi Pisang Ambon......................................................................................14
2.2 Ekstrak.........................................................................................................................19
2.2.1 Pengertian ekstraksi...............................................................................................19
2.2.2 Ekstraksi Cara Dingin...........................................................................................20
2.2.3 Ekstraksi Cara Panas.............................................................................................21
2.2.2 Tujuan ekstraksi....................................................................................................22
2.3 Pelarut..........................................................................................................................22
2.3.1 Alkohol.................................................................................................................23
2.4 Vacum Rotary Evaporation........................................................................................23
2.5 Bakteri..........................................................................................................................24
2.5.1 Penggunaan Istilah Nomenklatur...........................................................................24
2.5.2 Bentuk Bakteri......................................................................................................24
2.5.3 Struktur Tubuh Bakteri..........................................................................................26
 2.5.4 Ukuran Bakteri......................................................................................................26
2.5.5 Susunan Kimia Bakteri..........................................................................................26
2.5.6 Cara Memperbanyak Diri Bakteri.........................................................................27
2.5.7 Fase Pertumbuhan Bakteri.....................................................................................27
2.5.8 Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif................................................................29
2.6 Jerawat.........................................................................................................................30
2.6.1 Jenis-jenis Jerawat.................................................................................................30
2.6.2 Etiologi jerawat.....................................................................................................32
2.6.3 Bakteri Penyebab Jerawat......................................................................................32
2.6.4 Klasifikasi Bakteri penyebab jerawat....................................................................33
2.6.5 Morfologi Bakteri Propionibacterium acnes..........................................................33
2.6.6 Bakteri Propionibacterium acne............................................................................34
2.6.7 Habitat...................................................................................................................36
2.6.8 Penentuan Aktivitas Antimikroba.............................................................................37
2.6.9 Pengukuran Zona Hambat.........................................................................................38
2.7 Kerangka Teori Penelitian.........................................................................................40
2.8 Kerangka Konsep Penelitian......................................................................................41
2.9 Hipotesis Penelitian..........................................................................................................41
BAB III.........................................................................................................................................42
METODE PENELITIAN..............................................................................................................42
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian.....................................................................................42
3.2.1 Lokasi Penelitian...................................................................................................42
3.2.2 Waktu Penelitian...................................................................................................43
3.3 Alat dan Bahan............................................................................................................43
3.2.1 Alat........................................................................................................................43
3.2.2 Sampel Tumbuhan.................................................................................................44
3.2.3 Bahan kimia.................................................................................................................44
3.2.4 Bakteri..........................................................................................................................44
3.4 Metode Penelitian........................................................................................................45
3.4.1 Penyiapan Sampel.................................................................................................45
3.4.2 Ekstraksi Limbah Kulit Pisang Ambon (Musa Paradisiaca L)...............................46
3.4.3 Karakterisasi Ekstrak.............................................................................................46
3.4.4 Skrining Fitokimia.................................................................................................46
 3.5 Uji Aktivitas Antimikroba..........................................................................................48
3.5.1 Sterilisasi Alat..............................................................................................................48
3.5.2 Proses Peremajaan Bakteri....................................................................................48
3.5.3 Identifikasi Bakteri dengan Pewarnaan Gram.......................................................49
3.5.4 Pembuatan Kurva Pertumbuhan............................................................................50
3.5.5 Pembuatan Suspensi Bakteri Uji...........................................................................50
3.5.6 Pelaksanaan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Limbah Kulit Pisang Ambon
(Musa Paradisia.....................................................................................................................51
DAFTAR PUSTAKA………………………………………..………………….…………....45
 BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Pisang merupakan buah yang banyak tumbuh di Indonesia selain

itu pisang salah satu yang di gemari oleh sebagian besar penduduk dunia.

Rasa enak, kandungan gizi sangat tinggi, dan harganya relatif murah. Produksi

pisang di Indonesia mencapai lebih dari 7 ton pada tahun 2016. Pisang-pisang

ini sebagianbesar dikonsumsi di dalam Negeri. Tingginya angka

konsumsi tersebut mengindikasikan bahwa kebutuhan masyarakat

Indonesia akan buah pisang sangat tinggi. Dengan kata lain, hal ini

menimbulkan dampak baru yaitu limbah kulit pisang yang juga sangat

tinggi (Herliati dkk, 2018).

Pisang bisa dikatakan sebagai buah kehidupan dan sudah dikonsumsi sejak

zaman dahulu. Bahkan pisang juga dapat bermanfaat sebagai pengganti makanan

pokok. Indonesia juga menjadi salah satu penghasil pisang terbesar karena sekitar

50 persen produksi pisang di Asia berasal dari Indonesia dengan lebih dari 230

jenis pisang, salah satunya pisang ambon, dan kelompok pisang yang enak setelah

diolah salah satunya adalah pisang ambon. Terdapat senyawa yang mampu

menghambat pertumbuhan bakteri, salah satunya yaitu flavonoid dan tannin.

( Depkes RI 2019).

Pemanfaatan buah pisang menyisahkan limbah kulit pisang, yang belum

dimanfaatkan secara optimal. Salah satu produk olahan pisang adalah keripik

pisang dan pisang goreng ,  produk samping pedagang keripik pisang dan pisang
goreng adalah limbah kulit pisang. Tanaman pisang memiliki banyak kandungan

senyawa aktif metabolit sekunder. Yang berperan sebagai senyawa antimikroba

dan terapi. Komponen fitokimia dari kulit pisang adalah tannin dan flavonoid

yang memiliki aktivitas sebagai antibakteri. Komponen lainnya yaitu alkaloid,

flavonoid dan saponin. 

Limbah merupakan bahan sisa yang dihasilkan dari suatu kegiatan dan

proses produksi, baik dari skala rumah tangga, industri, pertanian. Limbah

pertanian adalah sisa dari kegiatan pertanian, tak heran jika Indonesia

menghasilkan berbagai produksi dari limbah sampah seperti ampas padi, jerami,

dan serbuk gergaji dari sektor pertanian dan sektor perkebunan dapat

menghasilkan tempurung kelapa sawit, biji alpukat, dan kulit buah pisang.

Kulit buah pisang merupakan bagian dari pisang yang umumnya di anggap

tidak bermanfaat dan biasanya kulit buah pisang dibuang setelah buahnya

dimakan. Bagian dari kulit pisang tersebut mengandung kalium dan protein,

dimana digunakan untuk melembutkan kulit wajah (Haq M.R dkk, 2014)

Kulit buah pisang masak yang berwarna kuning mengandung senyawa

flavonoid dan senyawa fenolik, kulit buah pisang mengandung karbohidrat

mineral seperti kalium dan natrium, serta selulosa. Flavonoid dan senyawa fenolik

merupakan senyawa bioaktif yang menunjukkan berbagai aktivitas yang berguna,

seperti antioksidan, antidermatosis, antikanker . Senyawa flavonoid dan senyawa

fenolik lainnya yang ada pada kulit pisang perlu diidentifikasi dan diuji lagi

aktivitas antibakteri, sehingga dapat meningkatkan pemanfaatan limbah kulit buah

pisang (Sri, 2007). 

 Pada masyarakat Indonesia, kulit pisang sering digunakan sebagai masker. 

Masyarakat percaya bahwa masker kulit pisang dapat melembutkan mencegah

jerawat dan mengencangkan kulit banyak artikel kecantikan yang membuat

tentang informasi manfaat kulit pisang bagi kecantikan salah satunya yaitu

sebagai anti jerawat (Dewi, 2009).

Antibakteri adalah bahan yang dapat menghambat maupun membunuh

aktivitas suatu mikroorganisme. Senyawa antibakteri berdasarkan mekanisme

daya kerja hingga tujuan penggunaan. Mekanisme kerja antibakteri yaitu dengan

merusak dinding sel, penghambatan sintesis protein sehingga mengganggu proses

translasi dan transkripsi, rusaknya membran plasma yang mengakibatkan

terhambatnya pertumbuhan sel atau matinya sel, adanya penghambatan sintesis

asam nukleat dan menghambat aktivitas enzim (Depkes RI 2019).

Propionibacterium acnes (P.acnes) merupakan bakteri flora normal pada

kulit yang pada umumnya terdapat pada folikel sebasea. Saat bayi lahir, pada kulit

bayi sudah ditemukan coloni P.acnes namun dalam jumlah yang sedikit dan akan

bertambah pada saat masa remaja seiring dengan meningkatnya produksi sebum

pada folikel sebasea.

P.acnes lebih banyak ditemukan pada bagian wajah dan kulit kepala bila

dibandingkan dengan lengan dan kaki pada kulit manusia. P.acnes dapat juga

diisolasi dari rongga mulut, saluran pernafasan bagian atas, saluran telinga

eksternal, konjungtiva, usus besar, uretra dan vagina, namun folikel sebasea pada

kulit merupakan habitat utama dari P.acnes yang dapat menyebabkan acne

vulgaris (Oprica, 2006).

1.2 Rumusan masalah

Berdasarkan latar belakang yang diuraikan di atas, maka perumusan

masalah pada penelitian ini adalah:

1. Apakah ekstrak etanol 96% limbah kulit pisang Ambon ( Musa paradisiaca

L.) efektif sebagai daya hambat bakteri penyabab jerawat.

2. Bagaimana pengaruh ekstrak etanol 96% limbah kulit pisang ambon

(Musa paradisiaca L.) terhadap pertumbuhan Propionibacterium acne

3. Berapakah konsentrasi paling efektif ekstrak etanol limbah kulit pisang

ambon (Musa paradisiaca L.) terhadap pertumbuhan Propionibacterium

acne

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

1. Untuk menjelaskan efektifitas ekstrak etanol 96% limbah kulit pisang

Ambon (Musa paradisiaca l.) sebagai daya hambat bakteri penyebab

jerawat (Propionibacterium acne)

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol 96% limbah kulit pisang

terhadap pertumbuhan bakteri penyebab jerawat (Propionibacterium

acne)

2. Untuk mendeskripsikan rata rata diameter daya hambat ekstrak etanol

96% limbah kulit pisang Ambon (Musa paradisiaca l.) terhadap bakteri

penyebab jerawat (Propionibacterium acne) pada konsentrasi

2.5%,5,10%.
1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Bagi Institusi

Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberi manfaat dan menambah

wawasan tentang pentingnya kulit pisang ambon sebagai antibakteri pada jerawat

bagi mahasiswa/mahasiswi dilingkungan Institut Kesehatan Medistra Lubuk

Pakam.

1.4.2 Bagi Peneliti

Sebagai wawasan tambahan dan ilmu pengetahuan serta sumber alternatif

sebagai antibakteri pada jerawat yang terdapat pada kulit pisang ambon yang baru

serta dapat dikembangkan khususnya dalam bidang farmasi. Menjadi dasar

penelitian selanjutnya dalam pembuatan sediaan kulit pisang ambon Menambah

informasi dan literatur bahwa ekstrak etanol kulit pisang ambon mempunyai

aktivitas antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acne dengan konsentrasi

5%, 10%, 15% dan 20% yang paling efektif.

1.4.3 Bagi Masyarakat

Memberi informasi kepada masyarakat tentang uji aktivitas antibakteri

ekstrak etanol 96% limbah kulit pisang ambon (Musa Paradisiaca L.) Terhadap

bakteri penyebab jerawat (Propionibacterium acne).Memberi informasi kepada

masyarakat agar dapat memanfaatkan limbah kulit ambon tersebut.

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Pisang Ambon (Musa paradisiaca)

2.1.1 Taksonomi Pisang Ambon

Nama lain :Pisang Ambon

Kingdom : Plantae (Tumbuhan)

Divisi :Tracheophyta

Kelas :Magnoliopsida

Ordo :Zingibiralles

Famili :Musaceae

Genus :Musa L. (Pisang)

Spesies :Musa paradisiaca var.

sapientum (L.) Kunt.

(Itis, 2018)

Gambar 2.1 Buah Pisang

2.1.2 Morfologi Pisang Ambon

Pisang ambon merupakan tanaman perdu dengan tinggi kurang lebih lima

meter. Dengan batang tegak, lunak, bulat, hijau kekuningan. Batang pohon
terbentuk dari perkembangan dan pertumbuhan pelepah yang mengelilingi poros

lunak panjang. Batang pisang yang sesungguhnya terdapat pada bonggol yang

tersembunyi dalam tanah. Pisang Ambon memiliki daun tunggal, lonjong, panjang

1,5-2 meter dengan lebar 30-50 cm, ujung tumpul, pangkal meruncing, ibu tulang

bulat berlekuk, hijau. Pisang ambon memiliki bunga majemuk, bentuk tandan,

berkelamin dua, terletak diujung batang, tangkai silindris, panjang kurang lebih 50

cm, kelopak segi tiga, benang sari silindris, kepala sari bulat dan kuning (Steenis,

2008).

Tumbuhan pisang ambon memiliki banyak kandungan senyawa metabolit

sekunder yang bermanfaat. Pada bagian buahnya diketahui memiliki kandungan

saponin, glikosida, tannin, alkaloid, dan flavonoid Selain kaya akan metabolit

sekunder, (Fatmawati dkk, 2017)

Kandungan Gizi Jumlah Kadar

Air 68,9 %
Pati 18,5 %
Lemak 2,11 %
Protein 0,32 %
Kalsium (mg/100 g) 715 mg
Fosfor (mg/100 g) 117 mg
Besi (mg/100 g) 1,60 mg
Vitamin B (mg/100 g) 0,12 mg 0,12 mg
Vitamin C (mg/100 g) 17,5 mg
Sumber : Hikmah (2016)

Kandungan Kimia Akar mengandung serotonin, norepinefrin, tanin,

hidroksitriptamin, dopamin, vitamin A, B dan C. Buah mengandung flavonoid,

glukosa, fruktosa, sukrosa, tepung, protein, lemak, minyak menguap, kaya akan

vitamin (A, B, C, dan E), mineral (kalium, kalsium, fosfor, Fe), pektin, serotonin,

5-hidroksi triptamin, dopamin dan noradrenalin (Setiawan, D. 2007). Kemampuan

menghambat pertumbuhan bakteri disebabkan karena adanya senyawa aktif yang

terkandung di dalam kulit buah muda pisang ambon (Musa paradisiaca var.

sapientum) yaitu tannin, flavanoid, saponin, glikosida, terpenoid, dan alkaloid

(Ighodaro, 2012). Musa paradisiaca var sapientum mengandung triterpenoid dan

gallokatekin (Someya S. dkk, 2002). Memiliki kandungan pigmen karotenoid dari

golongan zeantin, xantofil dan β-karoten (Suparmi dan Prasetya, 2010).

Komposisi kulit pisang yaitu air 68,90%, karbohidrat 18,50%, lemak 2,11%,

protein 0,32% dan komposisi kandungan kimia seperti pektin (Senny, W. 2012)

Kandungan Kimia Pisang Ambon sebagai Antibakteri

Tabel 2.2 Perbandingan Kandungan Antibakteri pada Pisang Ambon

Kandungan Kulit Buah Bonggo Tandan Batang Akar

l
Tanin + + + + + -
Kuinon + - - - - -
Saponin + + + + + -
Flavonoid + + + + + -
Alkaloid + - - + - -

Berdasarkan pada tabel 2.1, dapat disimpulkan bahwa tanaman pisang

ambon (Musa paradisisaca) yang terdapat pada bagian kulit pisang yang memiliki

kandungan antibakteri seperti tanin, kuinon, saponin, flavonoid dan alkaloid bila

dibandingkan dengan buah, bonggol, tandan, batang dan akar tanaman pisang

ambon. Kulit pisang ambon bila diekstraksi dengan etanol 96% yang memiliki

kandungan flavonoid 1035mg/100g, tanin 850mg/100gram, saponin 563mg/100g,

alkaloid 24mg/100g dan kuinon 4,5mg/100g (Nagarajaiah dan Prakash, 2011,

Adeolu dan Enesi, 2013). Mekanisme kerja dari kelima kandungan antibakteri

sebagai berikut:

a. Tanin

Adanya tanin sebagai antibakteri akan mengganggu sintesa peptidoglikan

sehingga pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna. Keadaan ini

akan menyebabkan sel bakteri menjadi lisis karena tekanan osmotik maupun

fisik sehingga sel bakteri menjadi mati (Sari dan Sari, 2011). Tanin bersifat

sebagai bakterisidal (Cavalieri dkk, 2005).

b. Kuinon

Kuinon adalah senyawa berwarna dan mempunyai kromofor dasar. Warna

pigmen kuinon dialam beragam mulai dari kuning pucat sampai hampir

kehitaman. Kuinon mampu menginaktivasi protein sehingga membuat protein

kehilangan fungsi pada dinding sel sehingga membuat bakteri menjadi lisis

(Marshall, 2006). Kuinon bersifat sebagai bakterisidal (Cavalieri dkk, 2005).

c. Saponin

Saponin adalah jenis glikosida yang banyak ditemukan dalam tumbuhan.

Saponin terdapat pada berbagai spesies tanaman, baik tanaman liar maupun

tanaman budidaya. Pada tanaman budidaya, saponin triterpenoid merupakan

jenis yang utama, sedangkan saponin steroid pada umumnya terdapat pada

tanaman yang digunakan sebagai tanaman obat (Suparjo, 2008). Saponin

bersifat ampifatik (mengandung bagian hidrofilik dan hidrofobik) yang dapat

melarutkan protein membran. Hidrofobik saponin berikatan pada region

hidrofobik protein membran sitoplasma dengan menggeser sebagian besar 8

 unsur lipid yang terikat pada membran sehingga sel bakteri menjadi lisis

(Davidson, 2005). Saponin bersifat sebagai bakterisidal (Cavalieri dkk, 2005).

(Jyothirmayi dan Rao, 2010) Gambar 2.2 Struktur saponin Pada gambar 2.2,

steroid memiliki kerangka dasar berupa cincin siklopentana

perhidrofenantrena. Triterpenoid memiliki kerangka senyawa karbon yang

berasal dari enam satuan isoprene dan secara biosintesis diturunkan dari

hidrokarbon C30 asiklik yaitu skualena (Wal, dkk. 2013).

d. Flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol yang terbesar ditemukan di

alam. Senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu, biru dan sebagian

kuning yang ditemukan dalam tumbuh-tumbuhan (Lenny, 2006). Zat flavonoid

mempunyai mekanisme kerja menghambat sintesis asam nukleat, menghambat

fungsi membran sitoplasma dan dapat menghambat metabolisme energi dari

bakteri (Cushnie, 2005). Flavonoid bersifat sebagai bakterisidal (Cavalieri dkk,

2005).

e. Alkaloid Menurut Gunawan dalam Rinawati (2011) dalam senyawa alkaloid

terdapat gugus basa yang menggandung nitrogen akan bereaksi dengan

senyawa asam amino yang menyusun dinding sel bakteri dan DNA bakteri.

Reaksi ini 9 mengakibatkan terjadinya perubahan struktur dan susunan asam

amino. Sehingga akan menimbulkan perubahan keseimbangan genetik pada

rantai DNA sehingga akan mengalami kerusakan akan mendorong terjadinya

lisis sel bakteri yang akan menyebabkan kematian sel pada bakteri. Menurut

Juliantina dalam Rinawati (2011) senyawa alkaloid memiliki mekanisme

penghambatan dengan cara mengganggu komponen penyusun peptidoglikan

 pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan

menyebabkan bakteri lisis. Alkaloid bersifat sebagai bakterisidal (Cavalieri

dkk, 2005)

2.2 Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi zat

aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menhhunakan pelarut yang

sesuai, kemudian semua atau semua pelarut dan masa atau serbuk yang tersisa

diperlukan sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Soesilo, 1995).

2.2.1 Pengertian ekstraksi

Ekstraksi adalah pemisahan bahan aktif dari jaringan tumbuhan ataupun

hewan menggunakan pelarut yang sesuai melalui prosedur yang twlah ditetapkan.

(Tiwari et al.,2011).selama proses ekstraksi, pelarut akan berdifusi sampai ke

material padat dari tumbuhan dan akan berdifusi sampai ke material padat dsri

tumbuhan tergantung pada :

 Bahan bahan tumbuhan yang diperoleh

 Keaslian dari tumbuhan yang digunakan

 Proses ekstraksi

 Ukuran partikel

(Tiwari, et al,. 2011)

Macam macam perbedaan metode ekstraksi yang akan mempengaruhi

kuantitas dan kandungan metabolit sekunder dari ekstraks , antara lain (Tiwari, et

al.,)
 a. Tipe ekstraksi

b. Waktu ekstraksi

c. Suhu ekstrksi

d. Konsentrasi pelarut

e. Polaritas pelarut

Beberapa metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut dibagi menjadi

dua cara, yaitu cara panas dan cara dingin (Ditjen POM,2000)

2.2.2 Ekstraksi Cara Dingin

a. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakkan simplisia dengan menggunakan

pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur

kamar (Ditjen POM, 2000).

Keuntungan ekstraksi dengan cara maserasi adalah pengerjaan dan

peralatan yang digunakan sederhana, sedangkan kerugiaan cara pengerjaan

yang lama, membutuhkan pelarut yang banyak dan penyaringan kurang

sempurna dalam maserasi (untuk ekstrak cairan ), serbuk halus atau kasar

dari tumbuhan obat kontak dengan pelarut disimpan dalam wadah tertutup

untuk periode tertentu dengan pengadukan yang sering sampai zat tertentu

dapat terlarut. Metode ini paling cocok digunakan untuk senyawa yang

termolabik (Tiwari et al., 2011)

b. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu sampai pada

penyaringan sempurna (exhaustive exraction) yang umumnya dilakukan

 pada temperatur ruang. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan,

tahap meserasi antara tahap perkolasi sebenarnya (penetasan/penampungan

ekstrak), terus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali

dari bahan (Ditjen POM, 2000).

Proses perkolasi terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap perendaman,

tahap perkolasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penampungan ekstrak) secara

terus menerus sampai diperoleh esktrak (perkolat) Untuk menentukan akhir dari

pada perkolasi dapat dilakukan pemeriksaan zat secara kualitatif pada perkolat

akhir. Ini adalah prosedur yang paling sering digunakan untuk mengekstrak bahan

aktif dalam penyusunan tincure dan esktrak cairan (Ditjen POM 2000).

2.2.3 Ekstraksi Cara Panas

a. Sokletasi

Sokletasi adalah ekstraksi mengunakan pelarut yang selalu baru. dengan

menggunakan alat soklet sehingga terjadi ekstraksi kontinyu dengan jumlah

pelarut relative konstan dengan adanya pendingin balik (Ditjen POM, 2000).

b. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut pada temperatur titik

didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif

konstan dengan adanya pendingin balik (DitjenPOM, 2000).

c. Infusa

Infusa adalah musuh pada suhu udara 90°C selama 15 menit. Infusa adalah

ekstraksi menggunakan pelarut Temperatur udara pada temperatur udara pada

temperatur yang sama penangas air mendidih, temperatur yang digunakan (96-
 98°C) selama waktu tertentu (15-20 menit) (Ditjen POM, 2000). Cara ini

menghasilkan larutan encer dari komponen yang mudah larut dari Simplisia

(Tiwari dan al.. 2011).

d. Dekok

Dekok adalah ongkos yang pada waktu waktu yang yang lama (230 uslu)

dan temperatus-nya berhasil didih air (Ditjen POM. Tahun 2000). Dekok

adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90°C selama 30 menit.

Metode ini digunakan untuk ekstraksi konstituen yang larut dalam air dan

konstituen yang stabil terhadap panas dengan cara direbus dalam air selama 15

menit (Tiwari et al. 2011).

e. Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik pada temperatur lebih tinggi dari temperatur

suhu kamar, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50°C (Ditjen

POM, 2000). Digesti adalah maserasi dengan pengadukan kontinyu pada

temperatur lebih tinggi dari temperatur ruang (umumnya 25-30°C), Ini adalah

jenis ekstraksi maserasi dimana suhu sedang digunakan selama proses ekstraksi

(Tiwari et al., 2011)

2.2.4 Tujuan ekstraksi

Tujuan ekstraksi dimaksud agar zat berkhasiat yang terdapat dalam

simplisia masih berada dalam kadar yang tinggi sehingga memudahkan untuk

mengatur konsentrasi zat berkhasiat karena dalam sediian ekstrak dapat di

standarisasikan kadar zat berkhasiat (arief 2008 )

2.3 Pelarut

Pelarut adalah zat yang digunakan sebagai media untuk melarutkan zat lain.

Kesuksesan penentuan senyawa biologis aktif dari bahan tumbuhan sangat

tergantung pada jenis pelarut yang digunakan dalam prosedur ekstraksi (Ncube et

al., 2008). Sifat pelarut yang baik untuk ekstraksi yaitu toksisitas dari pelarut yang

rendah, mudah menguap pada suhu yang rendah, dapat mengekstraksi komponen

senyawa dengan cepat, dapat mengawetkan dan tidak menyebabkan ekstrak

terdisosiasi (Tiwari et al., 2011).

Pemilihan pelarut juga akan tergantung pada senyawa yang ditargetkan.

Faktor-faktor yang mempengaruhi pemilihan pelarut adalah jumlah senyawa yang

akan diekstraksi, laju ekstraksi, keragaman senyawa yang akan diekstraksi,

kemudahan dalam penanganan ekstrak untuk perlakuan berikutnya, toksisitas

pelarut dalam proses bioassay, potensial bahaya kesehatan dari pelarut (Tiwari et

al., 2011)

2.3.1 Alkohol

Pelarut etanol memiliki sifat yang dapat melarutkan seluruh bahan aktif

yang terkandung dalam bahan alami, baik bahan aktif yang bersifar polar,

semipolar maupun non polar (Tiwari et al.. 2011).

2.4 Vacum Rotary Evaporation

Vacum rotary evaporator adalah alat yang berfungsi untuk memisahkan

suatu larutan dari pelarutnya sehingga dihasilkan ekstrak dengan kandungan kimia

tertentu sesuai yang diinginkan. Cairan yang ingin diuapkan biasanya ditempatkan

dalam suatu labu yang kemudian dipanaskan dengan bantuan penangas, dan
diputar. Uap cairan yang dihasilkan didinginkan oleh suatu pendingin (kondensor)

dan ditampung pada suatu tempat (receiver flask). Pelarut diuapkan, kemudian

akan dihasilkan ekstrak yang dapat berbentuk padatan atau cairan (Nugroho, et al.

1999).

Kelebihan dari alat ini adalah diperolehnya kembali pelarut yang diuapkan.

Penggunaan rotary evaporator meningkatkan presentase air yang terevaporasi

dibandingkan dengan menggunakan waterbath. Prinsip kerja alat ini didasarkan

pada titik didih pelarut dan adanya tekanan yang menyebabkan uap dari pelarut

terkumpul di atas, serta adanya kondensor (suhu dingin) yang menyebabkan uap

ini mengembun dan akhirnya jatuh ke tabung penerima (receiver flask) (Mutairi &

Jasser. 2012).

2.5 Bakteri

2.5.1 Penggunaan Istilah Nomenklatur

Istilah bakteri berasal dari kata "bakterion" (bahasa Yunani) yang berarti

tongkat atau batang. Istilah bakteri ini sekarang banyak dipakai untuk setiap

mikroba yang bersel satu. Banyak negara di dunia belum sepakat dalam klasifikasi

spesies bakteri, demikian pula penggunan istilah dalam mikrobiologi (Diah,

2004).

2.5.2 Bentuk Bakteri

Bentuk morfologi bakteri dapat dibagi menjadi 5 jenis (Adam, 1992):

a. Bentuk Basil (Basilus)

Basil berbentuk seperti tongkat pendek, agak silindris. Bentuk basil

meliputi sebagia besar bakteri (Adam, 1992)

 b. Bentuk Coccus (Bulat)

Coccus adalah bentuk bakteri seperti bola-bola kecil. Golongannya

tidak sebanyak basil. Baik berupa basil maupun bentuk coccus, secara

kelompok dapat berupa (Adam, 1992):

1) Seperti rantai bergandegan panjang: streotobasil atau streptococcus

2) Berdua-dua bergandengan : diplobasil atau diplococcus

3) Mengelompok berempat : tetracoccus

4) Bergerombol seperti anggur: staphylococcus

5) Berkelompok seperti kubus : sarcina

c. Bentuk Spiral

Bentuk spiral adalah bakteri yang berbentuk seperti spiral, atau

panjang berbengkok-bengkok. Golongan ini tidak banyak bila

dibandingkan dengan basil dan coccus (Adam, 1992).

d. Bentuk Vibrio (Koma)

Vibrio adalah bentuk seperti batang bengkok, seperti berupa

tandakoma (Adam, 1992).

e. Bentuk Spirocheta (Spirochet)

Spirocheta adalah bentuk seperti batang berbelit-belit panjang dan

banyak belitannya (Adam,1992).

2.5.3 Struktur Tubuh Bakteri

Bakteri adalah makhluk hidup bersel tunggal, meskipun bakteri dapat

berpasang-pasangan dan tiap sel hidup sendiri-sendiri. Sel tersebut merupakan

sitoplasma yang nampak berdinding tegas, akan tetapi inti selnya tidak nampak
jelas. Bakteri terlalu kecil untuk dapat mengatur inti sel, bila dibandingkan dengan

protozoa. Pada beberapa bakteri terlihat butir-butir kecil yang tersebar di dalam

sitoplasma (Adam, 1992)

2.5.4 Ukuran Bakteri

Ukuran bakteri bermacam-macam, diantaranya (Adam, 1992):

a. Bentuk basil : lebar 0,3-1um, panjang 1,5-4 um, kadang kadang

sampai 8um.

b. Bentuk coccus : ukuran tengahnya (diameter) rata-rata 1um.

c. Bentuk spiril : lebar 0,5-1 um, panjang 2-5um, kadang kadang

sampai 10 um.

d. Bentuk vibrio : lebar 0,5 um panjang sampai 3 um.

e. Bentuk spirochete : lebar 0,2-0,7um, panjang 5-10 um.

2.5.5 Susunan Kimia Bakteri

Susunan kimia bakteri terdiri dari (Adam, 1992):

a. 85% ain

b. Zat hidrat arang

c. Protein

d. Lemak

e. Garam-garaman : Na, K, Ca, Mg, Fe, Zn, P, dan sebagainya.

f. Enzim atau fermen

g. Vitamin
2.5.6 Cara Memperbanyak Diri Bakteri

Telah dikemukakan bahwa bakteri umumnya memperbanyak diri

(berkembang) dengan jalan membagi diri. Di dalam suasana yang cukup baik,

misalnya dalam media pembenihan, bakteri memperbanyak diri degan cepat.

Telah dapat diperhitungkan bahwa dalam waktu 10 jam, dari satu bakteri bisa

menjadi berjuta-juta jumlahnya (Adam, 1992).

2.5.7 Fase Pertumbuhan Bakteri

Bakteri memiliki permukaan yang luas sesuai dengan perbandingan volume

tubuhnya. Bakteri akan cepat memperoleh makanan dari lingkungannya, baik

secara difusi maupun melalui mekanisme transpor aktif. Kondisi yang cocok

dengan bakteri akan membuat bakteri tumbuh dengan cepat (Sudjaji et al. 2006).

Ada beberapa faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri. Faktor-

faktor tersebut adalah suhu, ketersediaan nutrisi, pH, konsentrasi ionik, serta

oksigen, khususnya untuk bakteri aerob obligat (Sudjaji et al., 2006).

Pertumbuhan bakteri berlangsung sangat cepat. Dalam kondisi normal,

bakteri membelah diri menjadi dua setiap 20 menit. Catatan waktu demikian

dikenal sebagai waktu generasi. Jadi, dalam waktu 40 menit bakteri membelah

baik terhadap lingkungan pertumbuhannya sehingga mempunyai waktu

penggandaan (doubling time) yang lebih singkat dibanding fase sebelumnya

(Sudjaji et al., 2006).

a. Fase Lag:

Fase lag merupakan fase bakteri beradaptasi terhadap lingkungannya yang

baru. Pada fase ini bakteri belum mencapai pertumbuhan maksimum. Panjang
fase lag tergantung pada jenis bakteri dan kondisi pertumbuhannya, misalnya

komposisi medium, faktor ligkungan, dan sebagainya (Sudjaji et al., 2006).

b. Fase Log (logaritma):

Fase log merupakan fase pertumbuhan mencapai maksimum.Pada fase ini

terjadi peningkatan jumlah. Fase log disebut juga fase eksponensial. Dalam

fase ini, bakteri sudah dapat beradaptasi dengan.

c. Fase Stasioner:

Fase stasioner merupakan fase pertumbuhan mencapai titik nol. Pada fase

ini tidak terjadi penambahan jumlah sel bakteri. Dalam fase ini jumlah sel yang

hidup seimbang dengan jumlah sel yang mati sehingga grafiknya terlihat

mendatar. Jika fase ini diteruskan maka jumlah sel yang mati akan menjadi

lebih besar dibandingkan jumlah sel yang hidup sehingga sel akan memasuki

fase kematian (Sudjaji et al. 2006)

d. Fase Penurunan:

Fase penuruan disebut juga fase kematian. Pada fase ini, sel berhenti

memperbanyak diri dan rata-rata kematian meningkat (Sudjaji et al., 2006).

 Gambar 2.2 kurva pertumbuhan mikroba (sudjaji Et al ., 2006)

2.5.8 Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif

Bakteri gram positif adalah bakteri yang memiliki dinding sel dengan

lapisan peptidoglikan yang tebal. Bakteri ini akan berwarna ungu jika diwarnai

dengan pewarnaan Gram, contohnya Neisseria gonorrhoeae, Bacillus subtilis

Vibrio cholerae, Staphylococcus epidermidis,Staphylococcus aureus,

Propionibacterium acne dan Troponema pallidum (Diah, 2004).

Beberapa bakteri Gram positif membentuk endospora. Endospora dibentuk

ketika lingkungan kekurangan zat makanan. Sel induk pecah dan endospora

dilepaskan. Endospora dapat bertahan dalam keadaan lingkungan yang ekstrim,

misalnya suhu tinggi, suhu rendah, atau kekeringan. Pada kondisi lingkungan

yang membaik, endospora menjadi aktif dan mermbelah diri, membentuk sel-sel

seperti induknya (Diah, 2004).

Bakteri Gram positif yang dapat membentuk endospora adalah Bacillus dan

Clostridium, contoh lain bakteri Gram positif adalah kelompok Actynomycetes

dan Mycoplasma. Actinomycetes berbentuk filamen bercabang yang menyerupai

jamur. Actinomycetes yang tidak membentuk spora berkembang biak dengan cara

memutuskan ujung filamen dalam bentuk bulat atau batang, selanjutnya filamen

tersebut membelah diri (Diah, 2004)

Bakteri Gram negatif adalah bakteri yang memiliki dinding sel dengan

lapisan peptidoglikan yang tipis. Bakteri ini akan berwarna merah muda atau
merah, jika diwarnai dengan pewarnaan Gram, contohnya Streptococcusmutans

dan Escherchia coli (Diah, 2004)

2.6 Jerawat

Jerawat adalah suatu keadaan dimana pori-pori kulit tersumbat hingga

menimbulkan kantung nanah yang meradang. Jerawat juga merupakan penyakit

kulit yang cukup besar jumlah penderitanya. Jerawat tidak hanya tumbuh diwajah

saja, namun bisa juga tumbuh di punggung, dada, lengan, kaki, dan lain-lain

(Maharani, 2015).

2.6.1 Jenis-jenis Jerawat

Jenis-jenis Jerawat Jerawat terbagi menjadi beberapa jenis diantaranya

adalah (Maharani, 2015) :

1. Jerawat Biasa

Jerawat ini mudah dikenal, tonjolan kecil berwarna pink atau kemerahan.

Terjadi karena pori-pori yang tersumbat dan terinfeksi oleh bakteri

Proponibacterium acnes. Bakteri ini biasanya hidup disaluran kelenjar sebaceus

yang tersumbat, yaitu daerah tempat beradanya asam lemak pada kantung

kelenjar sebaceous yang tersembunyi di dalam pori-pori kulit. Diberi nama

Propionibacterium karena mampu memproduksi asam propionik (Propionik

acid). Bakteri ini jenis anaerob sehingga dapat hidup tanpa butuh oksigen, dan

mempunyai ciri-ciri aerotoleran yang menimbulkan iritasi pada daerah

sekitarnya. Bakteri ini bisa 23 menginfeksi dari kuas makeup, jari tangan, juga

telepon. Stres, hormon dan udara yang lembap dapat memperbesar

kemungkinan terbentuknya jerawat.

 2. Jerawat Radang

Jerawat radang adalah penyakit kulit yang diikuti dengan komedo, benjolan,

dan abses. Kondisi ini bisa terjadi pada usia 18 sampai 30 tahun dan biasanya

berlangsung cukup lama. Penyebab jerawat ini tidak begitu diketahui, tetapi

berhubungan dengan hormon testosterone dan penggunaan steroid

3. Jerawat dada dan punggung

Disebut jerawat dada dan punggung karena tumbuhnya di daerah sekitar

dada dan punggung kita. Jenis jerawat ini umumnya ditimbulkan karena

hormone testoteron dalam darah.

4. Jerawat medicametosa

Jenis jerawat ini terjadi karena efek samping dari obat-obatan. Ada beberapa

jenis obat-obatan yang bisa menyebabkan jerawat. Obat sejenis antibiotik dan

penstabil mood juga bisa menyebabkan terjadinya jerawat.

2.6.2 Etiologi Jerawat

Etiologi jerawat Faktor penyebab jerawat cukup banyak (multifaktorial),

antara lain: Genetik. Jerawat merupakan penyakit genetik akibat adanya

peningkatan kepekaan unit pilosebasea terhadap kadar androgen yang normal.

Faktor genetik ini berperan dalam menentukan bentuk, gambaran klinis,

penyebaran lesi dan durasi penyakit. Pada lebih dari 80% penderita mempunyai

minimal seorang saudara kandung yang menderita jerawat dan pada lebih dari
60% penderita mempunyai minimal salah satu orangtua dengan jerawat juga

(Efendi, 2003). Apabila kedua orangtua pernah menderita jerawat berat, anak-

anmereka akan memiliki kecenderungan serupa (Ramdani, dkk, 2016)

2.6.3 Bakteri Penyebab Jerawat

Mikroorganisme penyebab jerawat diantaranya Propionibacterium acnes,

Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus yang merupakan flora

normal kulit adalah membentuk enzim lipase yang dapat memecah trigliserida

menjadi asam lemak bebas yang bersifat komedogen.Berdasarkan hipotesis ada 4

faktor yang berhubungan dengan terjadinya acne vulgaris yaitu meningkatnya

produksi sebum, hiperkeratinisasi dari duktus pilosebaseous, proliferasi mikrobial

(Propionibacterium acnes) dan danya proses inflamasi (Bruggemenn, 2010).

2.6.4 Klasifikasi Bakteri penyebab jerawat

Kingdom : Bacteria

Phylum : Actinobacteria

Class : Actinobacteridae

Order : Actinomycetales

Family : Propionibacteriaceae

Genus : Propionibacterium

Spesies : Propionibacterium acne (Bruggeman, 2010)

2.6.5 Morfologi Bakteri Propionibacterium acnes

Morfologi Bakteri P.acnes adalah bakteri gram positif yang memiliki bentuk

sel batang, panjang bervariasi antara 1-1,5 µm, nonmotil, tidak membentuk spora

dan dapat tumbuh di udara dan memerlukan oksigen mulai dari aerob atau
anaerob fakultatif sampai ke anaerob. Bakteri ini mampu melakukan fermentasi

glukosa sehingga menghasilkan asam propionat dan asetat dalam jumlah yang

banyak (Narulita, 2017).

Propionibacterium acnes mempunyai aktivitas kemotaktik yang menarik

leukosit polimorfonuklear ke dalam lumen komedo. Jika leukosit

polimorfonuklear memfagosit Propionibacterium acnes dan mengeluarkan enzim

hidrolisis, maka akan menimbulkan kerusakan dinding folikuler dan

menyebabkan ruptur sehingga isi folikel (lipid dan komponen keratin) masuk

dalam dermis dan mengakibatkan terjadinya proses inflamasi (Fox, dkk, 2016)

Gambar 2.3 Hasil Pengamatan Mikroskop Skrening Elektron (MES)

Propionibacterium acnes (Science Direct, 2016)

2.6.6 Bakteri Propionibacterium acnes

Propionibacterium acnes merupakan kelompok bakteri Corynebacteria.

Propionibacterium acne merupakan difteroid anaerob toleran udara yang biasanya

menetap pada kulit normal. Bakteri ini ikut serta dalam patogenesis jerawat

dengan menghasilkan lipase, yang memecahkan asam lemak bebas dari lipid kulit.

Asam lemak ini dapat menimbulkan radang jaringan dan ikut menyebabkan akne,

karena Propionibacterium acne merupakan bagian flora kulit normal, kadang-

kadang bakteri ini muncul dalam biakan darah dan harus dibedakan sebagai suatu

pencemar biakan atau penyebab sebenarnya dari penyakit. Propionibacterium acne

kadang-kadang menyebabkan infeksi katub jantung prostetik dan lintas cairan

serebrospinal (Brooks dkk, 2005).

Propionibacterium acne termasuk bakteri yang tumbuh relatif lambat.

Propionibacterium acne merupakan tipikal bakteri anaerob Gram positif yang

toleran terhadap udara. Ciri-ciri penting dari Propionibacterium acne adalah

berbentuk batang yang tidak teratur dan terlihat pada pewarnaan gram positif.

Bakteri ini dapat berbentuk filamen bercabang atau campuran

antarabatang/filamen dengan bentuk kokoid. Meskipun bakteri Propionibacterium

acnes memerlukan oksigen, namun hanya toleran terhadap sedikit udaha atau

sering disebut mikroerofilik. Beberapa bersifat patogen untuk hewan dan tanaman

(Bruggemenn, 2010).

Mekanisme terjadinya jerawat adalah propioni bacterium acne merusak

strartumcornoum dan stratum germinat dengan cara mensekresi bahan kimia yang

menghancurkan dindingpori .kondisi ini dapat menyebabkan inflamasi. Asam

lemak dan minyak kulit tersumbat kemudian mengeras , jika jerawat disentuh

maka akan inflamasi akan meluas sehingga padatan asam lemak dan minyak kulit

yang mengeras akan membesar . (Sugita, 2010).

Propionibacterium acnes adalah reaksi dari penyumbatan pori-pori kulit

disertai peradangan yang bermuara pada saluran kelenjar minyak kulit. Sekresi

minyak kulit menjadi tersumbat, membesar dan akhirnya mengering menjadi akne

vulgaris . Acne vulgaris adalah penyakit peradangan kelenjar sebasea yang sering
dijumpai dan berkaitan dengan folikel rambut (disebut unit polisebasea). Terdapat

dua jenis akne yaitu meradang dan tidak meradang. Kedua jenis akne tersebut

ditandai oleh pembentukan sebum yang berlebihan. Sebum yang berlebihan

tersebut tertimbun di folikel sehingga folikel membengkak. P.acnes merupakan

bakteri gram positif yang secara morfologi dan susunannya termasuk dalam

kelompok bakteri corynebacteria, tetapi tidak bersifat toksigenik. Bakteri ini

termasuk flora normal pada kulit, P.acnes merupakan bakteri yang memiliki

peranan yang penting dalam patogenesis akne vulgaris dengan menghasilkan

lipase yang memecah asam lemak bebas dari lipid kulit. Asam lemak ini dapat

mengakibatkan inflamasi jaringan ketika berhubungan dengan sistem imun dan

mendukung terjadinya akne vulgaris. P.acnes termasuk bakteri yang tumbuh

lambat. Bakteri ini tipikal bakteri anaerob gram positif yang toleran terhadap

udara (Putri, 2018).

2.6.7 Habitat

P.acnes merupakan flora normal yang ada di beberapa bagian tubuh

manusia. Bakteri ini sudah ada sejak bayi dengan jumlah sedikit dan bertambah

banyak saat memasuki usia pubertas berkaitan dengan meningkatnya produksi

sebum pada folikel sebasea. Kulit merupakan habitat utama dari P.acnes, namun

juga dapat ditemukan di rongga mulut, usus besar, konjungtiva dan saluran telinga

luar (Mollerup, et al., 2016).

Daya Tahan Bakteri P.acnes dapat tumbuh dengan baik di musim dingin dan

kurang tahan pada musim panas. Sinar ultraviolet mampu membunuh bakteri ini

pada permukaan kulit dan mampu menembus epidermis bagian bawah dan bagian
atas dermis sehingga berpengaruh pada bakteri yang berada di bagian bawah

glandula sebasea (Narulita, 2017).

2.6.8 Penentuan Aktivitas Antimikroba

Potensi dari suatu antimikroba diperkirakan dengan membandingkan zona

hambat pertumbuhan terhadap mikroorganisme yang sensitif dari hasil

penghambatan suatu konsentrasi larutan uji dibandingkan dengan antibiotik

(Anonim, 2001).

Penentuan aktivitas antimikroba dapat dilakukan dengan dua metode, yaitu

metode difusi dan metode dilusi. Pada metode difusi termasuk didalamnya

metode disk diffision (tes Kirby & Baur), E-test, ditch-plate technique,

cup-plate technique. Sedangkan pada metode dilusi termasuk didalamnya

metode dilusi cair dan dilusi padat (Pratiwi, 2008).

a. Metode difusi menurut Pratiwi (2008) diantaranya:

1) Metode disk diffusion (tes Kirby & Baur) menggunakan piringan

yang berisi agen antimikroba, kemudian diletakkan pada media

agar yang sebelumnya telah ditanami mikroorganisme sehingga

agen antimikroba dapat berdifusi pada media agar tersebut.

AreaUIN Syarif Hidayatullah Jakarta 25 jernih mengindikasikan

adanya hambatan pertumbuhan mikroorganisme oleh agen

antimikroba pada permukaan media agar

2) Metode E-test digunakan untuk mengestimasi Kadar Hambat

Minimum (KHM), yaitu konsentrasi minimal suatu agen

untukantimikroba untuk dapatmenghambatpertumbuhan

 mikroorganisme. Pada metode ini digunakan strip plastik yang

mengandung agen antimikroba dari kadar terendah sampai

tertinggi dan diletakkan pada permukaan media agar yang telah

ditanami mikroorganisme sebelumnya. Pengamatan dilakukan pada

area jernih yang ditimbulkan yang menunjukan kadar agen

antimikroba yang menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada

media agar

3) Ditch-plate technique. Pada metode ini sampel uji berupa agen

antimikroba yang diletakka pada parit yang dibuat dengan cara

memotong media agar dalam cawan petri pada bagian tengah

secara membujur dan mikroba uji (maksimum 6 macam)

digoreskan kearah parit yang bersi agen antimikroba tersebut.

4) Cup-plate technique. Metode ini serupa dengan disk diffusion,

dimana dibuat sumur pada media agar yang telah ditanami dengan

mikroorganisme dan pada sumur tersebut diberi agen antimikroba

yang akan diuji

2.6.9 Pengukuran Zona Hambat

Aktivitas antibakteri dinyatakan positif apabila terbentuk zona hambat

berupa zona bening disekeliling kertas cakram. Bagian yang dihitung dengan

jangka sorong adalah diameter dari zona hambat yang terbentuk (Pratiwi, 2008).

Diameter zona hambat dideskripsikan dengan gambar dibawah ini:

 Gambar 2.4 Perhitungan diameter zona hambat antibakteri (Pratiwi,
2008).

Keterangan :
a. Diameter kertas cakram (6 mm)
b. Diameter zona hambat yang terbentuk (mm)
c. Daerah yang ditumbuhi bakteri
Menurut Suryawiria (1978) dalam Pradana (2013), berdasarkan zona

hambat yang terbentuk maka aktivitas antibakteri dapat digolongkan menjadi

beberapa golongan yaitu antibakteri yang tergolong lemah (zona hambat < 5 mm),

sedang (zona hambat antara 5-10 mm), kuat (zona hambat antara 10-20 mm), dan

tergolong sangat kuat (zona hambat > 20 mm).

 2.7 Kerangka Teori Penelitian

- Di timbang berat basah 5 kg

Kulit Pisang Ambon - Di cuci air mengalir lalu tiriskan
- Di Rajang kecil-kecil
- Di keringkan di suhu ruangan
- Di timbang berat kering
- Di blender sampai menjadi
Simplisia Kering halus,lalu di timbang
l

-Di ayak

Ekstraksi Maserasi dengan

Etanol 96%

-Di tambahkan etanol 96% Estrak

-Dipekatkan dalam rotary evavorator kental
Etanol
pada suhu 45ºC
96%
Skrining
Fitokimia
Karakteristik
ekstrak Uji
Variasi konsentrasi
Alkaloid
 2.5%
 5%
Uji
 10%
Flavonoid
Ekstrak kulit pisang ambon
Uji
Saponin

Efektivitas daya hambat terhadap

bakteri Propianibackterium acne Uji
Tannin
Gambar 2.5 Kerangka Teori
2.8 Kerangka Konsep Penelitian

Variabel Independen variabel dependen Parameter

Bakteri Propiani Diameter zona

Ekstrak kulit pisang hambat pertumbuhan
backterium acne
ambon bakteri
Propianibackterium
acne
Gambar 2.6 Kerangka konsep

2.9 Hipotesis Penelitian

Hipotesis penelitian ini adalah :

a. Ekstrak kulit pisang ambon (Musa paradisiaca L.) efektif sebagai daya

hambat terhadap bakteri penyebab jerawat (Propianibackterium acne)

b. Ekstrak kulit pisang ambon (Musa paradisiaca L.) tidak efektif sebagai

daya hambat terhadap bakteri penyebab jerawat (Propianibackterium

acne)
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Lokasi dan Waktu Penelitian

3.1.1 Lokasi Penelitian

Penelitian dilakukan di laboratorium biologi pada proses maserasi dan

pembuatan ekstraksi dengan etanol 96% dilakukan di Laboratorium kimia

organik. Untuk Sterilisasi alat dan uji antimikroba dilakukan di Laboratorium

Steril. Program Studi Farmasi, Fakultas Farmasi Institut kesehatan Medistra

Lubuk pakam.

3.1.2 Waktu Penelitian

Bulan
Uraian
Desember Januari Februari Maret
kegiat A
2020 2021 2020 2020
an
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
1 Pengaj
uan
judul
2 Penyus
unan
propos
al
3 Persent
asi dan
Semina
r
propos
al
4 Perbaik
an
Propos
al
5 Pengu
mpulan
data
 6 Analisa
Data
7 Sidang
Skripsi
8 Pengu
mpulan

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1 Alat

Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain : seperangkat alat

destilasi (Brandstead), labu destilasi (Iwaki), beacker glass (achott duran ) ,

Erlenmeyer (Schott duran), Erlenmeyer (schott duran), gelas akur 10 mL (Pyrex),

gelas ukur 1000 mL (Herma), pipet tetes, hot plate (Are Heating), batang

pengaduk, corong, kaca arloji, tabung reaksi (Pyrex), labu ukur ( Pyrex), cawan

petri (Normax), botol meserasi, ose, kertas wattman 52, vacum rotary evaporator (

Eyela CCA-1111), spatula, pinset, thermometer, alcoholmeter, incubator (France

Etuves ), shaker ( Advantec TKB202DA), refrigerator, oven (Memmert),

sentrifuge, autoklaf (Allamarican), tali kasur,

3.2.2 Sampel Tumbuhan

Sampel tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah limbah kulit

pisang ambon (Musa paradisiaca L.) yang diperoleh dari salah satu pedagang

pisang di Kota Lubuk Pakam, Sumatera Utara.

3.2.3 Bahan kimia

Bahan kimia yang digunakan pada penelitian ini adalah etanol 96%

(pelarut), aquades, Fecl, Alkohol 70 %, pereaksi dragendroff. HCl pekat,

kloroform, spirtus, pereaksi mayer, serbuk Mg, antibiotic sebagai control positif

(klindamicin), larutan NaCl (0,9%) fisiologis , pewarna bakteri (pewarna gentian

violet , pewarna lugol dan pewarna safranin) dan media agar (Nutriet Agar

sebagai media media padat dan Nutrien broth sebagai media cair).

3.2.4 Bakteri

Bakteri yang digunakan pada penelitian ini bakteri penyebab jerawat yang

digunakan adalah Propionibacterium acne yang diperoleh dari Labolatorium

Mikrobiologi klinis , Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam.

3.3 Metode Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode eksperimental murni dengan tahapan

penelitian yaitu pengumpulan sampel, identifikasi, pembuatan simplisia,

pemeriksaan karakteristik simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak dan

pembuatan larutan uji ekstrak kulit pisang ambon. dengan berbagai konsentrasi

dan pengujian aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol kulit pisang ambon terhadap

bakteri bakteri gram positif adalah bakteri propioniacnebacterium Pengujian

aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar yang

menggunakan kertas cakram (Uji Kirby-Bauer). Parameter yang diamati yaitu

besarnya diameter daerah hambat pertumbuhan bakteri.

3.3.1 Penyiapan Sampel

Limbah Kulit Pisang Ambon (Musa Paradisiaca L) diperoleh dari seorang

pedagang bolu pisang di daerah lubuk pakam. limbah kulit pisang ambon dipilih

yang sudah matang semua atau sudah menguning kulitnya. limbah kulit pisang

Ambon di cuci bersih (terlihat dari fisik), kemudian di keringkan dengan di angin
anginkan sampai tiris airnya. Limbah kulit pisang yang sudah bersih di Rajang

kecil-kecil untuk mempermudah proses pengeringan, baru setelah itu ditimbang

beratnya. Berat awal limbah kulit pisang ambon yang sudah dirajang adalah ±5

kg. pengeringan sampel Seberat ±1 kg. Serbuk hasil pengeringan sudah siap

untuk dimaserasi.

3.3.2 Ekstraksi Limbah Kulit Pisang Ambon (Musa Paradisiaca L)

Serbuk kering limbah kulit pisang ambon ditimbang sebanyak 500 gram,

kemudian dimaserasi dengan 2 liter etanol 96%. Maserasi dilakukan sampai

semua senyawa tertarik sempurna (2-3 hari), terlindung dari sinar matahari

langsung, dan berada pada suhu ruang, dengan beberapa kal pengadukan. Proses

maserasi selesai setelah 3 hari, kemudian disaring dengan kapas, dianggap sebagai

penyaringan tahap satu. Penyaringan tahap kedua, disaring menggunakan kertas

saring (kertas wattman no.52) sehingga diperoleh maserat dan ditampung dalam

wadah penampungan yang tertutup dan terhindar dari cahaya matahari langsung.

Maserasi dilakukan sampai warna maserat yang diperoleh jernih atau mendekati

jernih. Seluruh maserat yang diperoleh dipekatkan dengan vacum rotary

evaporator pada suhu 45°C hingga diperoleh ekstrak kental etanol 96%

(Noorhamdani, 2012).

3.3.3 Karakterisasi Ekstrak

A. Pemeriksaan Organoleptis Ekstrak

Ekstrak yang telah diperoleh, kemudian diidentifikasi secara organoleptis.

Pemeriksaan organoleptis meliputi bentuk, warna, bau, dan rasa (Permawati,

2008).
3.3.4 Skrining Fitokimia

1. Uji Alkaloid

Ekstrak ditimbang 0,5 gram, dimasukkan ke dalam tabung reaksi,

dilarutkan dalam HCI, kemudian ditmbahkan 2-3 tetes pereaksi Dragendorff

(larutan potasium bismut iodida), jika terdapat endapan merah maka positif

adanya alkaloid, namun jika ditambahkan dengan 2-3 tetes pereaksi Mayer

(larutan potasium merkuri iodida) menghasilkan endapan kuning maka positif

mengandung senyawa alkaloid (Tiwari et al..2011).

2. Uji Flavonoid

Ekstrak ditimbang sebanyak 0,5 gram ditambahkan dengan etanol 70%,

kemudian ditambahkan 5-6 tetes HCI pekat, membentuk warna merah yang

menunjukkan adanya flavonoid dan pembentukan warna orange menandakan

adanya senyawa flavon (Tiwari et al., 2011).

3. Uji Saponin

Ditimbang 0,5 gram ekstrak, lalu ditambahkan dengan 2 mL air sampai

semua bagian ekstrak terendam dan kemudian dikocok kuat-kuat Terdapat

busa setelah pengocokan, busa ditunggu selama 10 menit tetap konstan maka

ekstrak positif mengandung senyawa saponin (Tiwari et al., 2011),

4. Uji Tanin

Esktrak sebanyak 0,5 gram ditambahkan 3 mL air hangat. Ekstrak diujikan

dengan 1-2 tetes FeCI, 1%, terbentuk warna biru tua atau hijau kehitaman

menunjukan adanya senyawa golongan tanin (Markham,1988).

 5. Uji Kuinon

Ekstrak 0,5 gram ditambahkan dengan 1 mL air hangat. Ekstrak diuji

dengan 1-2 tetes pereaksi NaOH 1 N, terbentuk warna merah maka

menunjukan adanya senyawa golongan kuinon (Markham. 1988).

3.4 Uji Aktivitas Antimikroba

3.4.1 Sterilisasi Alat

Alat-alat yang akan disterilkan terlebih dahulu dicuci bersih dan

dikeringkan. Cawan petri dibungkus dengan kertas perkamen. Untuk alat alat

gelas (tabung reaksi, gelas beker, erlenmeyer) ditutup mulutnya dengan kapas

steril yang dibalut dengan kain kasa steril, kemudian dibungkus dengan kertas

perkamen, disterilkan dalam oven pada suhu 150°C, selama 2 jam. Kasa, kapas,

tali, gelas ukur, pipet tetes dan kaca objek juga di bungkus dengan kertas

perkamen dan disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121° C dengan tekanan latm

selama 15 menit. Untuk alat seperti ose, batang L (untuk metode spread plate) dan

pinset disterilkan dengan metode Flamber, yaitu direndam dengan alkohol 70%

selama 5 menit kemudian dipijarkan dengan api bunsen. Alat yang terbuat dari

karet seperti karet pipet, disterilkan dengan merendamnya didalam alkohol 70%

selama 5 menit. Laminar air flow disterilkan dengan menyalakan lampu UV

selama 2 jam, dibersihkan dari debu, disemprot dengan alkohol 70%, dibiarkan

selama 15 menit (Raihana, 2011).

3.4.2 Proses Peremajaan Bakteri

Bakteri uji ditumbuhkan pada medium Nutrient Agar (NA) dengan cara

menggoreskan bakteri dari biakan murni menggunakan jarum ose pada permukaan

agar miring. Bakteri yang sudah digoreskan pada media kemudian diinkubasi

pada suhu 37°C selama 48 jam untuk Propionibacterium acnes sedangkan untuk

Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis pada suhu 37°C selama

24 jam (Aziz, 2010).

3.4.3 Identifikasi Bakteri dengan Pewarnaan Gram

Pada identifikasi bakteri, tahap awal yang dilakukan adalah dengan

membuat apusan bakteri uji. NaCI fisiologis, diambil 2 loop dengan menggunakan

ose, kemudian ditempatkan di atas object glass. Ose yang telah digunakan untuk

mengambil NaCı fisiologis dipijarkan terlebih dahulu, kemudian didinginkan.

Dengan menggunakan ose yang sama.diambil 1 koloni bakteri dari hasil

peremajaan bakteri, ditempatkan di atas NaCI fisiologis yang sudah ada di atas

kaca objek. Suspensi diratakan cawan petri dengan membentuk area apusan.

Suspensi dikeringkan pada suhu ruang untuk beberapa menit. Suspensi dilewatkan

di atas api bunsen untuk fiksasi apusan (Damayanti, 2014).

Apusan bakteri yang telah dibuat, ditetesi dengan zat warna (Gentian Violet)

diteteskan ke atas area apusan, dibiarkan selama 60 detik. Hasil pewarnaan

dengan gentian violet, dicuci perlahan dengan menggunakan aquades, kemudian

dibiarkan 2 detik. Apusan bakteri kemudian ditetesi dengan pewarna lugol, lalu

didiamkan selama 60 detik. Hasil pewarnaan dengan lugol dicuci dengan alcohol

96%, hingga larutan yang mengalir sudah tidak berwarna (sekitar 10 detik dan 20
detik). Dilakukan pencucian lagi dengan menggunakan aquades secara perlahan,

didiamkan selama 2 menit. Terakhir, ditetesi dengan zat warna II (Safranin),

kemudian didiamkan selama 20 detik. Hasil pewarnaan dengan safranin dicuci

perlahan dengan menggunakan aquades, lalu didiamkan kembali selama 2 menit.

Dikeringkan di suhu ruang, setelah mengering ditetesi dengan minyak imersi.

Objek diamati di atas mikroskop dengan perbesar 100 kali (Damayanti, 2014).

3.4.4 Pembuatan Kurva Pertumbuhan

Stok bakteri murni yang akan diujikan (Propionibacterium acne)

diremajakan dengan dipindahkan 1 ose kedalam NA agar miring lalu diinkubasi

selama 24 jam. Peremajaan bakteri diakukan dengan tujuan untuk memperoleh

stok bakteri yang masih baru, jadi kemungkinan terkontaminasi cukup kecil.

Bakteri yang telah diremajakan diambil 5 ose, kemudian diinokulasikan ke dalam

50 mL Nutrient Broth, lalu diinkubasi pada suhu 37°C (suhu optimum untuk

pertumbuhan bakteri) sambil dilakukan agitasi 120 rpm, tujuan dilakukan agitasi

adalah untuk mempercepat bakteri dalam membelah diri. Pertumbuhan biakan

diamati dengan mengukur densitas optic (Optical Density,OD) dengan

menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 660 nm, dengan selang

waktu 60 menit hingga memasuki fase stasioner (Khodijah et al., 2006)

3.4.5 Pembuatan Suspensi Bakteri Uji

Pada kawat ose yang di pakai sejumlah 2 ose untuk bakteri uji hasil

peremajaan, yang disuspensikan dalam 2 ml NaCI fisiologis dalam tabung reaksi

steril dan dihomogenkan dengan vortex selama 15 detik, kemudian kekeruhannya

dilihat dengan membandingkan kekeruhan standar 0,5 Mc Farland (setara dengan

3x10 f CFU/ml) (Raihana, 2011).

3.4.6 Pelaksanaan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Limbah Kulit Pisang

Ambon (Musa Paradisiac)

A. Pembuatan Media Uji

Sebanyak 8 gram media Nutrient Agar (NA) dilarutkan dalam 400 ml

aquades steril. Media dipasnaskan sampai mendidih. Dilakukan pengadukan

dengan menggunakan magnetic stirer untuk memastikan media tersuspensi

sempurna. Setelah media tersuspensi sempurna, kemudian di autoklaf pada

suhu 1210C selama 15 menit, lalu ditunggu sampai suhu hangat (40 0C-

450C). Nutrient Agar yang sudah siap. kemudian dituangkan sekitar 8 ml

kedalam cawan petri steril dengan tingkat permukaan horizontal untuk

memberikan ke dalaman seragam 0,5cm. Media didiamkan sampai memadat

(Ngajow,2013).

B. Pembuatan Konsentrasi Larutan Uji

Pada pengujian aktivitas antibakteri ekstrak limbah kulit pisang ambon,

konsentrasi Ekstrak dibuat larutan uji dengan konsentrasi

5%,10%,15%.20%.

C. Proses Uji Aktivitas Antibakteri

Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan Metode Difusi Kertas

Cakram (Jawetz et al., 2005).Hasil daya uji antibakteri didasarkan pada

pengukuran Diameter Daerah Hambat (DDH) pertumbuhan bakteri yang

terbentuk di sekeliling kertas cakram. Pada masing-masing ekstrak dengan

konsentrasi yang berbeda, yaitu 5%,10%,15%,20%. Diambil sebanyak 20

uL dan diteteskan pada kertas cakram steril, lalu ditunggu sampai menjadi

jenuh(Ningsih, 2013).

Suspensi bakteri uji diambil sebanyak 100 uL, dituang secara merata

pada medium Nutrient Agar (NA) menggunakan metode spread plate(Aziz,

2010).Ditunggu beberapa saat sampai mengering, lalu diletakkan kertas

cakram yang telah dijenuhkan dengan 20 uL ekstrak etanol 96% limbah

kulit pisang ambon dengan konsentrasi yang telah ditentukan Kontrol

negatif (blangko) yang digunakan adalah etanol 96% sebanyak 10 uL yang

dijenuhkan pada cakram steril. Media yang sudah berisi bakteri uji, kontrol

negatif,dan cakram yang telah dijenuhkan dengan larutan uji, diinkubasi

pada suhu 37°C selama 24-48 jam. Diameter Daerah Hambat (DDH) yang

terbentuk di sekitar cakram setelah 24 - 48 jam, diamati dengan

menggunakan jangka sorong. Uji dilakukan dengan tiga kali pengulangan

(Ningsih, 2013).
 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

4.1.1 h
 DAFTAR PUSTAKA

Adam, Syamsuri. 1992. Dasar-dasar Mikrobiologi dan Parasitologi. Jakarta

:Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Anonim. 2001. British Pharmacopeia. Published on The Recomendation of The
Medicine Commision. The Stasioner Office. London.
Bouman, R.W., 2007, Microbiology with diseases by taxonomy, Pearson
Benjamin cummings, San Fransisco.
Brooks, G.F. Butel, J.S., dan Morse, S.A., 2005. Mikrobiologi
Kedokteran.Jakarta: Salemba Medika.
Diah Aryulina, Ph.D., Choirul Muslimin, Ph.D., dkk. 2004. Biologi Jilid I
Jakarta: Penerbit Erlangga.
Ditjen POM. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:
Departemen Kesehatan RI.
Tiwari, P. Kumar, B. Kaur, M. Kaur, G. Kaur, H. 2011. Phytochemical screening
and Extraction: A Review. Internationale Pharmaceutica Sciencia. Vol.
1
Sugita, T.; Miyamoto, M.; Tsuboi R; Takatori, K.; Ikeda, R. & Nishikawa, A.
(2010). In Vitro Activities of Azole Antifungal Agents againts
Propionibacterium acnes Isolated from Patients with Acne Vulgaris.
Biol Pharm Bull. 33(1): 125-127
Sudjaji, Drs. Bagod, M.Ed., Dra. Siti Laila, M.Pd. 2006. BIOLOGI Sains dalam
Kehidupan. Penerbit Yudhistira.
Soesilo, Slamet, Drs. 1995. Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta: Departemen
kesehatan Republik Indonesia.
Pratiwi S.T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Penerbit Erlangga. Jakarta.
Nugroho, B. W., Dadang, & Prijono, D. 1999. "Pengembangan dan Pemanfaatan
Insektisida Alami". Pusat Kajian Pengendalian Hama Terpadu, IPB.
Bogor
Arief, M. 2008. Pengantar Metodologi Penelitian untuk Ilmu
Kesehatan.Surakarta: UNS press.
Hikma 2016 activities of Azole Antifungal Agents againts Propionibacterium
acnes Isolated from Patients with Acne Vulgaris. Biol Pharm Bull.
33(1): 125-127
Senny, W.2012 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Edisi Revisi. Binarupan
Aksara, Jakarta.
Cavalieri, S.J. dkk. 2005. Manual of Antimicrobial Susceptibility Testing
American Society for Microbiology: USA
Bagan Pembuatan ekstrak kulit Pisang Ambon

Kulit Pisang Ambon (Musa

Paradisiaca L)

limbah kulit pisang Ambon di cuci

bersih (terlihat dari fisik)

kemudian di keringkan dengan di angin

anginkan sampai tiris airnya

kulit pisang yang sudah bersih di Rajang kecil-

kecil untuk mempermudah proses pengeringan,

Ditimbang berat kulit pisang ambon yang sudah

dirajang adalah ±5 kg. pengeringan sampel,
dilakukan di Laboratorium Kimia organik.

Kulit pisang yang sudah kering di blender

kering tanpa air

Lalu di ayak mengunakan saringan

Dan di dapat simplisia kering (serbuk)
Uji Aktivitas Antimikroba

Sterilisasi alat

Pembuatan Standar
Turbiditas Mc. Farland

Peremajaan Bakteri

Identifikasi Bakteri

Pembuatan Suspensi
Bakteri UJi

Pembuatan Media Agar, Uji

Aktivitas Antimikroba