Hanif Shaifa Risma
P1337434119101
D3 TLM Regeuler B
Bilirubin
Kimia Darah dan Enzimatik
Bilirubin adalah produk utama dari penguraian sel darah merah tua. Bilirubin disaring
dari darah oleh hati dan dikeluarkan pada cairan empedu. Hati semakin rusak ditandai
dengan kadar bilirubin meningkat.Penentuan in vitro bilirubin langsung dan total
dengan metode jendrassik-gróf secara fotometrik
Prinsip
Bilirubin bereaksi dengan asam sulfanilat diazotisasi untuk membentuk pewarna azo
yang berwarna merah dalam larutan netral dan biru dalam larutan basa. Bila bilirubin
glukuronida yang larut dalam air bereaksi "langsung", bilirubin "tidak langsung"
bebas hanya bereaksi dengan adanya akselerator. Bilirubin total dalam serum atau
plasma ditentukan dengan menggunakan metode Jendrassik dan Gróf dengan
menggabungkan dengan asam sulfanilat diazo setelah penambahan kafein, natrium
benzoat dan natrium asetat. Azobilirubin biru terbentuk dalam larutan alkali FehlingII.
Senyawa biru ini juga dapat ditentukan secara selektif dengan adanya produk samping
kuning (warna campuran hijau) dengan fotometri pada 578 nm. Bilirubin langsung
diukur sebagai pewarna azo merah pada 546 nm menggunakan metode Schellong dan
Wende tanpa penambahan alkali. Bilirubin tidak langsung dihitung dari perbedaan
antara bilirubin total dan direk.
Reagen
R1: Asam sulfanilat, HCl
R2: Natrium nitrit
R3: Kafein, Natrium benzoate, Natrium asetat
R4: Solusi Fehling II: Kalium natrium tartrat, Natrium hidroksida
Reagen stabil hingga 1 bulan jika disimpan pada suhu 15 – 25 °C, terhindar dari dan
kontaminasi.
Prosedur
Bilirubin total
Panjang gelombang: 578 nm
Perhitungan :
[mg/dL] = A x 10,5
[µmol/L] = A x 180
Bilirubin direk
Panjang gelombang: 546 nm
Perhitungan :
[mg/dL] = A x 14,0
[µmol/L] = A x 240
Nilai normal
Bilirubin total : 0,1 – 1,2 mg / dL
Bilirubin direk : 0,2 mg/dL