LAPORAN PRAKTIKUM FISIOLOGI VETERINER

FRAGILITAS ERITROSIT

OLEH:
KELOMPOK 3
1. Arvantsa Raihan Rahman Putra 2109511088 C
2. Fidella Luthfia Qotrunnada 2109511089 C
3. Rani Adistia 2109511090 C
4. Clarissa Devina Coaniago 2109511091 C
5. Gisella Louisa 2109511092 C
6. I Gede Pande Krisnha Dharma 2109511093 C

LABORATORIUM FISIOLOGI VETERINER

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2021
 KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena atas
segala kuasa dan kebaikan-Nya, kami dapat menyelesaikan tulisan berupa
Laporan Praktikum mata kuliah Fisiologi Veteriner I dengan judul “Fragilitas
Eritrosit” dengan baik.
Tulisan ini dibuat untuk memenuhi tugas atas selesai dilakukannya
praktikum di Laboratorium Fisiologi Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan,
Universitas Udayana.
Tidak lupa juga penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada Dr. drh.
Siswanto M. Kes., selaku dosen pengampu dari praktikum mata kuliah Fisiologi
Veteriner I. Segala kritik dan saran yang membangun sangat kami harapkan demi
hasil yang baik dari tulisan ini.

Denpasar, Oktober 2021

Hormat kami,

Penulis

ii
 DAFTAR ISI
Halaman Sampul ................................................................................................... i
Kata Pengantar ...................................................................................................... ii
Daftar Isi................................................................................................................ iii
I. PENDAHULUAN ..................................................................................... 1
II. MATERI DAN METODE ........................................................................ 2
III. HASIL PRAKTIKUM .............................................................................. 3
IV. PEMBAHASAN ....................................................................................... 7
V. SIMPULAN .............................................................................................. 7
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 8

iii
 I. PENDAHULUAN

Fragilitas berasal dari kata fragile yang berarti kerapuhan atau

mudah pecahnya eritrosit. Sel darah merah/eritrosit mempunyai membran sel yang
bersifat semi permiabel terhadap lingkungan sekelilingnya yang berada diluar
eritrosit dan mempunyai batas-batas fisiologi terhadap tekanan dari luar eritrosit.
Tekanan membran eritrosit dikenal dengan tonisitas yang berhubungan dengan
tekanan osmosis membran itu sendiri.
Tes fragilitas adalah tes untuk mengetahui seberapa besar fargilitas
(kekuatan maksimum membran eritrosit dapat menahan tekanan dari luar )
eritrosit. Untuk membuat sel eritrosit pecah dapat dilakukan dengan cara
memasukkan eritrosit ke dalam larutan isotonis, larutan hipertonis, dan larutan
hipotonis. Larutan isotonis (iso = sama) yaitu suatu larutan yang mempunyai tonis
yang sama dengan tekanan permukaan dinding eritrosit. Sehingga jika eritrosit
ditempatkan pada larutan isotonis maka sel eritrosit tidak akan terpengaruh karena
tekan membrannya sama dan tidak akan terjadi proses difusi atau osmosis
(pertukaran cairan).
Larutan hipertonis yaitu larutan yang mempunyai tonis lebih tinggi
daripada tekanan permukaan dinding eritrosit. Dalam larutan ini akan terjadi
proses osmosis atau pertukanan cairan dari cairan yang konsentrasinya encer
(eritrosit) ke konsentrasi pekat (larutan hipertonis). Sehingga eritrosit akan keriput
(krenasi). Larutan hipotonis yaitu larutan yang mempunyai tonis lebih rendah
daripada tekanan permukaan dinding eritrosit. Dalam larutan ini cairan yang
berada diluar eritrosit akan masuk ke dalam eritrosit. Sehingga eritrosit akan terisi
cairan hipotonis hingga menggembung dan bila membran eritrosit tidak kuat lagi
menahan tekanan yang ada di dalam sel eritrosit itu sendiri, maka sel akan pecah,
akibatnya hemoglobin akan bebas ke dalam medium sekelilingnya.
Tujuan dari dilakukannya praktikum ini adalah untuk mempelajari dan
mengetahui ketahanan membran eritrosit terhadap penurunan tekanan osmosis
plasma (Erythrocyte Fragility Test = Tes Fragilitas Eritrosit) serta mengetahui
besarnya konsentrasi larutan yang dapat menyebabkan eritrosit pecah.

1
 II. MATERI DAN METODE
A. Alat dan Bahan
1. Darah sapi dan antikoagulan
2. NaCl fisiologis 0,9% (larutan isotonis)
3. Larutan NaCl 3% dan 5%
4. Spuit atau pipet
5. Mikroskop
6. Tabung reaksi dan raknya

B. Metode
Fragilitas:
Tekanan osmosis tegangan permukaan dinding eritrosit

C. Tata Kerja
1. Membuat seri larutan NaCl (membuat larutan dari isotonis ke hipotonis)
dengan kadar 0,8%;0,7%;0,6%;0,5%;0,4%;0,3% dengan memnggunakan 6
buah tabung.
2. Berilah nomor 1- 6 pada tabung reaksi lalu diletakkan pada rak reaksi.
Setelah diletakkan pada rak sesuai urutan lalu memasukkan larutan NaCl
5% sebanyak 0,8 ml pada tabung nomor 1 hingga nomor 6 dengan selisih
0,1 ml. Larutan diambil menggunakan pipet hisap dengan kapasitas 0,1ml.
3. Kemudian tambahkan aquades pada tabung nomor 1 hingga nomor 6. Pada
tabung nomor satu ditambahkan aquades sebanyak 4,2 ml. Hingga pada
tabung ke enam ditambahkan aquades lebih banyak dengan selisih tiap
tabung adalah 0,1 ml. Larutan aquades diambil menggunaan pipet hisap
dengan kapasitas 0,5ml. Sehingga volume pada tiap tabung menjadi 5ml.
Lalu homogenisasi larutan dengan membolak balik tabung reaksi.
Letakkan kembali ke rak tabung
4. Setelah terdapat larutan seri dengan kadar yang berbeda. Teteskan darah
sapi kedalam larutan yang sudah seri sebanyak 5 tetes. Lalu campurkan
(dibolak balik) antara darah dan larutan seri. Letakkan kembali pada rak

2
 dengan posisi vertikal. Tunggu selama minimal 1 jam agar eritrosit
bereaksi secara osmosis dengan larutan.
5. Tunggulah selama 1 jam lalu amati pada lapisan atas setiap tabung. Jika
tidak terjadi hemolisis atau pecah eritrosit maka larutan atas terlihat jernih.
Namun jika eritrosit pecah maka akan mewarnai larutan NaCl menjadi
merah. Pada tabung nomor 1 tampak 2 lapis, dimana lapis atas berwarna
jernih (ini berarti darah tidak mengalami pecah membran/tidak hemolisis).
Selanjutnya amatilah pada tabung mana yang lapis atas mulai berwarna
merah (disinilah mulai terjadinya pecah membran = titik fragilitas
eritrosit). Pada tabung nomor 6 terjadi hemolisis total yang ditandai warna
merah transparan pada semua bagian.
6. Lalu tentukan pada tabung nomor berapa yang terjadi fragilitas.

III. HASIL PRAKTIKUM

Nomor 1 2 3 4 5 6
NaCl (5%) 0,8 ml 0,7 ml 0,6ml 0,5ml 0,4ml 0,3ml
Aquades 4,2 ml 4,3 ml 4,4 ml 4,5 ml 4,6 ml 4,7ml
Total 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml

3
Titik fragilitas darah sapi setara dengan 0,5 % NaCl dan terdapat pada
tabung nomor 4. Pada tabung nomor 6 terjadi hemolisis total atau semua
eritrosit pecah.

Hasil Percobaan Dari Test Fragilitas

NO Hasil/ Kadar Nacl Hasil Dari Pengamatan

Pada cairan yang berada di atas tidak

berwarna.
1 0,8 %
Terdapat endapan berwarna merah
gelap.
Tidak terjadi hemolysis.
Pada cairan yang berada di atas tidak
berwarna.
2 0,7 %
Terdapat endapan berwarna merah
gelap. Tidak terjadi hemolysis.
Pada cairan yang berada di atas tidak
berwarna.
3 0,6 %
Terdapat endapan berwarna merah
gelap.
Tidak terjadi hemolysis.
Pada cairan yang berada di atas agak
sedikit berwarna merah.
4 0,5 %
Ada terdapat sedikit endapan.
Terdapat plasma darah.
Pada cairan yang berada di atas, sedikit
berwarna merah.
5 0,4 %
Terdapat sedikit endapan
Plasma darahnya lebih banyak dari

4
 tabung sebelummnnya.
Pada cairan yang berada di atas
berwarna merah, lebih terang dari
6 0,3 %
tabung sebelumnya.
Tidak terdapat endapan.

Penghitungan konsentrasi larutan

1. Tabung pereaksi pertama

• 0,8ml Nacl 5% + 4,2 ml aquades + 5 tetes darah
N1.V1 = N2.V2
5%.0,8 = N2. 5
4 = 5.N2
0,8 =N2
Hasil yang didapatkan, kadar Nacl sebanyak 0,8%

2. Tabung pereaksi kedua

• 0,7 ml Nacl 5% + 4,3 ml aquades + 5 tetes darah
N1.V1 = N2.V2
5%.0,7 = N2. 5
3,5 = 5.N2
0,7 =N2
Hasil yang didapatkan, kadar Nacl sebanyak 0,7 %

3. Tabung pereaksi ketiga

• 0,6 ml Nacl 5% + 4,4 ml aquades + 5 tetes darah
N1.V1 = N2.V2
5%.0,6 = N2. 5
3 = 5.N2
0,6 =N2
Hasil yang didapatkan, kadar Nacl sebanyak 0,6%

5
4. Tabung pereaksi keempat
• 0,5 ml Nacl 5% + 4,5 ml aquades + 5 tetes darah
N1.V1 = N2.V2
5%.0,5 = N2. 5
2,5 = 5.N2
0,5 =N2
Hasil yang didapatkan, kadar Nacl sebanyak 0,5%

5. Tabung pereaksi kelima

• 0,4 ml Nacl 5% + 4,6 ml aquades + 5 tetes darah
N1.V1 = N2.V2
5%.0,4 = N2. 5
2 = 5.N2
0,4 =N2
Hasil yang didapat, kadar Nacl sebanyak 0,4%

6. Tabung pereaksi keenam

• 0,3 ml Nacl 5% +4,7 ml aquades+ 2 tetes darah
N1.V1 = N2.V2
5%.0,3 = N2. 5
1,5 = 5.N2
0,3 =N2
Hasil yang didapatkan, kadar Nacl sebanyak 0,3%

6
 IV. PEMBAHASAN
Pada percobaan tes fragilitas tersebut hasil yang dapat kami amati ialah
eritrosit mengalami hemolysis dimulai dari tabung keempat yang diberi Nacl
sebanyak 0,5 ml hingga tabung keenam yang mengalami hemolysis paling
sempurna dari semua tabung dengan diberi Nacl sebanyak 0,3 ml. Pada lapisan
keenam sudah tidak terdapat endapan dan cairannya sudah berwarna merah
terang, berbeda dengan tabung – tabung sebelumnya yang masih tidak berwarna
dan ada yang berwarna merah pucat. Hal tersebut dikarenakan eritrosit yang sudah
mengalami pecah total.
Hemolisis sendiri bisa terjadi pada test ini karena adanya larutan
hipotonid, oleh karena hal tersebut eritrosit pada tabung pereaksi menjadi rapuh
lalu akan pecah, dan hemoglobinnya sendiri akan tumpah. Perbedaan endapan dan
warna pada larutan pada tabung pereaksi diatas ialah karena perbedaan
konsentrasi Nacl dan aquades pada setiap tabung. Hal-hal yang juga bisa membuat
perbedaan hasil test ialah metode dan alat yang digunakan, nutrisi yang didapat
dari hewan ternak yang kita uji, temperature dari lingkungan, serta genetik dapat
mempengaruhi tonisitas eritrosit. Hewan yang mengkonsumsi pakan yang
mengandung miyak nabati akan mempunyai fragilitas yang berbeda dengan
hewan yang mengonsumsi makanan yang tidak mengandung minyak nabati.
Hewan yang hidup di lingkungan yang bersuhu panas memiliki tingkat fragilitas
yang lebiih rendah dari hewan yang hidup di lingkungan bersuhu dingin
berdasarkan Oyewale (1991). Menyimpan darah di dalam refrigerator, serta
menggunakan antikoagulan Ethylene Diamine Tetra Aceticacid (EDTA) juga
dapat meningkatkan fragilitas eritrosit (Oyewale, 1993).

VI. SIMPULAN
Tes fragilitas pada darah sapi dilakukan dengan membuat larutan seri
(larutan yang kosentrasinya dari isotonis sampai hipotonis) yang kemudian
ditetesi darah sapi di setiap tabung yang berisi larutan yang telah dibuat. Setelah
di diamkan selama 1 jam, teramati pada tabung ke-1 dimana lapisan atas berwarna
jernih yang artinya eritrosit tidak mengalami hemolisis, pada tabung ke-4 mulai
teramati adanya warna merah di lapisan atas yang artinya eritrosit mulai

7
mengalami hemolisi. Semakin ke tabung akhir warna lapisan atasnya semakin
merah yang menandakan semakin banyak eritrosit yang mengalami hemolisis.
Hemolisis total terjadi di tabung terakhir percobaan, yaitu tabung ke-6. Hemolisis
sendiri bisa terjadi pada test ini karena adanya larutan hipotonis, oleh karena hal
tersebut eritrosit pada tabung pereaksi menjadi rapuh lalu akan pecah.
Dapat disimpulkan bahwa titik fargilitas (eritrosit mengalami hemolisis)
pada darah sapi ada di tabung ke-4 dengan kadar 0,5 % NaCl (hipotonis). Untuk
mengitung kadar setiap tabung dapat menggunakan rumus menghitung kadar
larutan, yaitu N1.V1 = N2.V2.

DAFTAR PUSTAKA
Swenson MJ. (2005). Duke’s Physiology of Domestic Animals. Los Angeles.
ComstockPub. Asso. A Division of CornellUniv. Press
Oyewale, JO. 1993. Effect of storage of blood on the osmotic fragility of
mammalian erythrocytes. Journal of Veterinary Medicine Series A40(4): 258-264.
Oyewale, JO. 1991. Osmotic Fragility of Erythrocyte of West African Dwarf Sheep and
Goats : Effect of Temperature and pH. Britist Veterinary Journal 147(2):163-170.
Oyewale, JO. 1992. Effects of temperature and pH on osmotic fragility of erythrocytes of
the domestic fowl (Gallus domesticus) and guinea fowl (Numida maleagridis). Res Vet Sci
52(1): 1-4