LOGBOOK PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PERTANIAN 2021

Nama : Dafa muhammad althaf

NPM : 150510200233
Materi : ISOLASI DAN PENENTUAN POPULASI BAKTERI DAN JAMUR DARI TANAH, RIZOSFIR,
FILOSFIR DAN SPERMOSFIR
Tujuan Praktikum :
Penentuan Populasi Bakteri dan Jamur
Alat dan Bahan :
Agar media
 Bubuk agar media 5.2 g
 Stir bar
 flask 250 ml
 Deionized water 100ml
 Stir plate
 Almunium foil
 Solasti kertas

Pour plate
 70% etanol
 Busen burner
 Pipet pump
 1ml plastik pipet
 Sparker
 Petri plates
 Tape
 Sample dilution dan peptone control
 vortex

Prosedur kerja :
Agar media
1. Ambil 5,2 gram agar medai lalu masukan ke dalam gelas flask sebesar 250 ml
2. Lalu masukan stirbar krdalam gelas flask lalu masukan juga 5,2 gram bubuk agar media
3. Masukan air deozined sebanyak 75 ml kedalam flask
4. Letakan glas flask yg sudah di campur tadi kedalam stri palet lalu nyalakan
5. Pastikan untuk mematikan pemanas untuk mempertahankan agar medai selagi sedang di
aduk
6. Aduk hingga tidak ada gumpalan agar medai yg tersisa
7. Setalah semua tercampur tunggu 2 menit lalu masukan 25 ml air sisa deionized
8. Setelah itu letakan lagi flask kembali ke serve plate hingga semua gumpalan terlarut
sepenuhnya dan semua tercampur rata
9. Tutup flask dengan almunium foil lalu tekan - tekan hingga semua bagian falsk terjaga

10. Berikan juga solasi kertas diatas almunium foil untuk menutup rapat celah yang ada di
 sebagian almunium foil, agartidak ada dara yang masuk

Streak Plate / Metode Gores :

1) Panaskan ose hingga berpijar dengan Bunsen kemudian dinginkan beberapa detik.
2) Ambil satu ose bakteri yang ingin diisolasi.
3) Gores dengan metode yang diinginkan (Di video menggunakan Quadrant Streak).
4) Susun semua sample berurutan lalu beri solatip agar tertutup dengan rapat
5) Masukan sampel kedalam ingkubator dengan suhu 35o C dengan waktu 48 jam
6) buang sampel dengan benar ke dalam gelas kimia besar berisi pemutih di wastafel berlabel
7) Lalu bersihkan lab hingga kembali agar steril.

Pour plate
1) Nyalakan laminar flow hood, nyalakan 15 menit sebelum di gunakan
2) Gunakan etanol 70% untuk mensterilkan flow hood
3) Beri tanda di bagian bawah petri plate dan buat banyak sample
4) Beri salah satu semple dengan tulisan agar cotrol
5) Pastikan agar dan tempat menarunya steril agar tidak terkontaminasi
6) Ambil paetone controle dan masukan 1 ml sample di bibi tube
7) Tutup paetone control dan pindahkan cap
8) Masukan kedalam petri plates sebanyak cukup tinggi untuk masuk kedalam pipet
9) Tahan pipet dengan kemiringan 45 derajat dengan tip menyentuh bagian belakang
10) Setelah selesai pindahkan dan tutp lagi dengan penutup yang tadi telah di beri label
11) Ini adalah taeknik mentrasfer yang baik untuk mengaseptikan sample mikroba
12) Lanjutkan dengan metode tersebut ke setiap plate
13) Selalu mulai dengan peptone control, selalu mulai pemindahan dari yang paling encer
hingga paling cair, jadi kita dapat menggunakan pipet yang sama
14) Lalu masukan larutan agar media di setiap platenya
15) Putar perlahan hingga sample tercampur rata, putar dengan pola angka 8
16) Cairan yang di masukan hanya boleh molten agar
17) Dinginkan di bawah laminar flow dengan keadaan terbuka
18) Susun semua sample berurutan lalu beri solatip agar tertutup dengan rapat
19) Masukan sampel kedalam ingkubator dengan suhu 35o C dengan waktu 48 jam
20) buang sampel dengan benar ke dalam gelas kimia besar berisi pemutih di wastafel berlabel
21) Lalu bersihkan lab kembali agar steril.
Hasil Praktikum (foto plate) :
Metode Tuang (Bakteri) Metode Metrode Tuang (Jamur)

Gambar 1. Pengenceran 1 × 10-7 Gambar 2. Pengenceran 1 × 10-4

Metode Gores (Bakteri) Metode Gores (Jamur)

Gambar 3. Gambar. 4
Karakteristik Mikroba :
Nama metode : Metode Tuang
Nama media : Nutrient Agar (NA)
Jenis pengamatan :isolasi dan penutupan Populasi Total Bakteri
Jumlah koloni :± 18 koloni
Warna koloni :dormansi putih kekuningan
Bentuk Koloni : bundar / sirkular

Nama metode : metode tuang

Nama media : Potato Dxtrose Agar (PDA)
Jenis pengamatan :isolasi dan penutupan total fungi
Jumlah koloni :± 8 koloni
Warna koloni : putih kekuningan, putih keruh =, dan putih kehijauan
Bentuk Koloni :bundar sirkular
Nama metode : metode gores
Nama media : Nurtien Agar (NA)
Jenis pengamatan :isolasi dan penutupan total bakteri
Warna koloni :putih
Bentuk Koloni : bundar/ sirkular

Nama metode : metode gores

Nama media :Potato Dextrose Agar (PDA)
Jenis pengamatan :isolasi dan penutupan total fungi
Warna koloni : putih kekuningan dan putih keruh
Bentuk Koloni : bundar sirkular
Pertanyaan :
1. Apa yang dimaksud dengan isolasi mikroba?
2. Hitung total populasi mikroba (CFU/ml) pengamatan gambar 1 dan 2!
Jawaban :

1) Suatu proses mengambil bakteri dari medium atau dari lingkungan asalnya lalu
menumbuhkannya di medium buatan sehingga diperoleh biakan yang murni (Singleton &
Sainsbury, 2006). Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba agar
tidak terkontaminasi dengan mikroba lain. Hal ini dapat dilakukan dengan
menumbuhkannya dalam media padat, sel-sel mikroba akan membentuk koloni sel yang
tetap pada tempatnya.

Gambar 1 :

18 Cfu/10-7 = 1,8 x 108 Cfu/ml

Gambar 2 :

8 Cfu/10-4 = 8 x 104 Cfu/ml