Spore -forming and non-spore forming

gram positive bacteria

 Spore-forming gram positive bacilli: Bacillus & Clsotridium

● Bacilli terdapat melimpah di berbagai lingkungan

● Bacilli → spora → bertahan di lingkungan dalam waktu lama (tahunan)
● Bacillus → aerob; Clostridium→ anaerob
● Sebagian kecil Bacillus menyebabkan penyakit
○ B. anthracis → penyakit antraks
○ B. cereus → food poisoning, eye infection
● Clostridium → patogen pada manusia:
❏ Clostridium tetani → tetanus
❏ C. botulinum → botulisme
❏ C. perfringens → gas gangrene
❏ C. difficile → diare dan pseudomembrano colitis
 Spesies Bacillus

1. Aerobik
2. Gram positif
3. Berbentuk batang (rod)
4. Fenotip dan patogenitas beragam
5. Spesies patogen → plasmid virulen
6. Saprofit → tanah, air, udara dan tumbuhan
7. Beberapa bersifat patogen ke serangga
8. Dapat menghasilkan endospora
9. Terdapat melimpah di alam
 Morphology and Identification

1. Typical organism
● Ukuran: 1 × 3–4 μm
● Bagian ujung berbentuk kotak pada rantai panjang
● Spora terletak di bagian tengah sel
2. Culture (morfologi saat dikulturkan)
● B. anthracis → bulat, mengkilap (cut glass) saat terkena cahaya, non-hemolitik,
mampu tumbuh di gelatin
● B. cereus dan bacillus saprofit → hemolosis sel darah merah
3. Growth characteristic
● saprophytic bacilli → sumber N dan C sederhana untuk pertumbuhan dan energi
● Spora resisten terhadap perubahan lingkungan (suhu, kekeringan, kimia)
● Spora bertahan tahunan pada kondisi kekeringan
 Bacillus anthracis
1. Patogenesis
❏ Antraks → herbivora : domba, kambing, sapi, kuda,
dsb.
❏ Hewan → spora pada rumput→ mulut dan saluran
pencernaan
❏ Manusia→ kontak/ konsumsi produk hewan
terinfeksi (spora) → luka kulit, membran mukosa,
terhirup
❏ Bacilli menyebar melalui limfa dan aliran darah→
berkembang → kematian hewan ternak
❏ virulensi→ poly-γ-d-glutamic acid capsule
(antifagositosis)--> gen ada di plasmid
❏ Anthrax toxins : protective
❏ Penyusun anthrax toxin: antigen (PA), edema factor
(EF), and lethal factor (LF)
Bacillus anthracis
Patologi
● Rentan: bacillus berkembang pada
bagian terinfeksi dg kapsul utuh →
diselubung cairan protein dg sedikit
leukosit → bakteri masuk ke aliran
darah
● Resisten : bakteri berkembang
dalam beberapa jam→ akumulasi
leukosit pada host→ kapsul hancur
dan hilang → bakteri terlokalisasi
Clinical findings
● Manusia: 95% of ( cutaneous anthrax) and 5%
(inhalation)
● cutaneous → kaki & tangan → wajah & leher
⇒ Papula prulitis : 1-7 hari after infection
⇒ Papula prulitis → vesikel menyatu → koreng hitam
(d= 1-3 cm)--> bengkak
⇒ Lymphangitis, lymphadenopathy, gejala sistemik,
demam, sakit kepala
⇒ Beberapa kasus→ meningitis dan kematian (20%)
● Inhalation: periode inkubasi 6 minggu
⇒ gejala: nekrosis hemoragik dan bengkak di
mediastinum
⇒ Hemorrhagic pleural effusions (cairan di paru)-->
sepsis/komplikasi→ penyebaran ke saluran cerna atau
selaput otak
 Bacillus anthracis
Diagnostic laboratory test
● Spesimen: cairan/nanah dari luka lokal, darah,
cairan pleural, cairan serebrospinal
● Smear staining→ chains of large Gram-positive
rods
● Identifikasi : dried smears by
Immunofluorescence staining
● blood agar plates → nonhemolytic gray to white,
koloni kasar, mengkilap
● Kapsul → bicarbonate-containing medium in
5–7% carbon dioxide
● Nonmotil in semisolid medium
● Deteksi: lisis dengan anthrax γ-bacteriophage,
kapsul dg antibodi fluoresens, PCR, ELISA
Treatment
● Pengobatan dilakukan sedini mungkin
● Antibiotik: Ciprofloxacin, penicillin G,
doxycycline, erythromycin, and
vancomycin
● Vaksin: AVA BioThrax
● Raxibacumab (recombinant human
monoclonal antibody) → pengobatan dan
profilaksis th 2012
● Anthrax immune globulin intravenous
(AIGIV)--> human polyclonal antiserum
● Raxibacumab & AIGIV→ dikombinasi dg
antibiotik
 Clostridium species
● Anaerob Morphology and
● Gram positif identification
● Berbentuk batang Typical organism
● Motil ● Diameter spora >
● Mampu mengurai protein ukuran sel
dan menghasilkan toksin ● Posisi spora: centrally,
● Habitat: tanah, sedimen subterminally, or
laut, limbah, saluran terminally
cerna hewan dan ● Motil dengan tipe:
manusia peritrichous flagella
 Morphology and identification

Culture Colony form Growth characteristic

● Tumbuh pada kondisi
anaerob
● Aerotoleran, hidup di
udara ambien
● blood-enriched media
● other media used to grow
anaerobes
● Koloni besar (C. prefingens)
● Koloni kecil (C. tetani)
● Tumbuh menyebar di atas
media
● Menghasilkan zona
β-hemolysis di blood agar.
● Sacharolytic dan proteolytic
● Various enzymes are
produced by different species
● Clostridium memperoduksi
lebih banyak toksin
Clostridium botulinum
Toksin
● Dikelurakan selama pertumbuhan
dan autolisis
● Serotipe: A,B, C, D, E, F, G
● A,B,E,F → penyebab sakit di manusia
● C→ lImberneck pada burung
● D→ botulisme di mamalia
● G→ tidak toksik
● Botulinum toxin→ diserap usus dan
menyebar ke aliran darah, berikatan
reseptor membran presipnatik
(sistem saraf)
● Tidak menembus blood brain barrier
● Botulinum toxin→ proteolisis: SNARE
protein→ menghambat produk
acetylcholine pada sinapsis→
kelumpuhanhe
● lethal dose: 1–2 μg/kg.
● Toksik rusak pada 20 minutes at 100°C
● Toksin A,B,F → botulisme pada anak
 Clostridium botulinum
Patogenesis
● Makanan kaleng, & vakum
terkontaminasi C. botulinum→
botulisme
● Spora tertelan (makanan kemasan)
→ tumbuh pada anaerob→
produksi toksin
● Madu terkontaminasi → anak2 →
Spora berkembang di saluran
cerna→ neurotoksin→ aliran
darah→ botulisme
● Penyuntikan obat→ spora masuk
ke jaringan → wound botulisme
Clostridium botulinum
Clinical finding
● Gejala muncul: 18-24 jam setelah toksin
tertelan
● Gejala: gangguan penglihatan, kesulitan
menelan, kesulitan bicara, kelumpuhan
dan kematian
● Tingkat kematian tinggi karena
botulisme
● Infant botulism → salah satu penyebab
kematian bayi secara tiba2
● C. botulinum dan toksin botulinum
ditemukan di feses bukan di serum
Diagnostic Laboratory Test
● Deteksi toksin bukan bakterinya →
diagnosis definitif
● Toksin dideteksi: serum, cairan lambung,
sisa makanan
● Clinical swab atau spesimen pasien
dikirim ke lab secara anaerob
● Infant botulism→ patogen dan toksin
dideteksi dari saluran cerna bukan di
serum
● Deteksi: ELISA atau PCR (gen penyandi
toksin)
Aerobic Non–Spore-Forming
Gram-Positive Bacilli
 Corynebacterium Diphtheriae

Morphology and Identification

1. Ukuran: diameter 0.5–1 μm
2. Bentuk: irregular swellings di salah satu
sisi → club shaped
3. pewarnaan : aniline dyes
(metachromatic granules) → bentuk
seperti manik-manik
4. Blood agar→ koloni kecil granular,
warna abu-abu, tepi tidak beraturan
5. agar containing potassium tellurite →
coklat-hitam atau terbentuk hallo
berwarna hitam (mereduksi tellurite)
Corynebacterium Diphtheriae

Patogenesis:

● Toksin: gravis, mitis, intermedius, dan

belfanti
● Produksi toksin tergantung konsentrasi
Fe, tekanan osmotis, konsentrasi asam
amino, pH, sumber C dan N
● respiratory or cutaneous diphtheria
● Infeksi: luka, saluran pernafasan, kulit
orang yang terinfeksi/carrier
● Penularan: droplet dan kontak dg
penderita
● Toksin difteri → membran mukosa→ merusak
epitelium→ inflamasi di permukaan kulit→
lapisan putih/abu-abu (tonsil, faring, laring)
● Limfa leher membesar → pembengkakan
● Kerusakan parekimatis, fatty infiltration,
nekrosis di otot jantung, hati, ginjal, kelenjar
adrenal
Wound diphteria

● Banyak menyerang negara tropis

● Psedomembran terbentuk pada luka
yang belum sembuh
● Toksin → kulit → antibodi antitoksin
● C. diphtheriae virulen ditandai:
membangun infeksi, tumbuh secara
cepat, mengahsilkan toksin yang
mudah diserap sel inang
● Tidak menyerang jaringan yang lebih
dalam dan tidak masuk ke aliran darah
 Treatment:
Lab diagnostic:
● Antitoksin: kondisi parah
● Swab dari hidung, tenggorokan dan
● Injeksi antitoksin: 20.000 -120.000 unit
bagian lain yang menunjukkan
muscularly/intravena tergantung lama
membran
gejala dan keparahan
● Pengkulturan: blood agar, tellurite
● Antitoksin dihasilkan: horses, sheep,
plate (eg, cystine-tellurite blood
goats, and rabbits
agar [CTBA] or modified Tinsdale’s
● Intravena → kondisi parah
medium (24-48 jam )
● Intramuscular → mild case
● cystine tellurite agar → black with a
● Antitoksin hanya menetralkan toksin yg
brown halo
tidak berikatan dg jaringan
● Uji toksisitas →
● Antibiotik: penicillin, macrolides
immunoprecipitation method, PCR,
Enzyme-linked immunosorbent dan
immunochromatographic strip assay
Listeria Monocytogenes

● Penyebab sakit pada hewan dan

manusia→ listeriosis
● Dapat bertahan di berbagai
kondisi lingkungan (pH rendah,
suhu rendah, kosentrasi garam
tinggi)
● Sering mencemari makanan yang Morphology and Identification
diawetkan Bentuk batang pendek, gram positif, tidak
● Sering menyebabkan wabah menghasilkan spora, motil: 22-28°C
5% sheep blood agar → small zone hemolisis
Fakultatif anaerob, katalse positif, motil
 Listeria Monocytogenes
Patogenesis
● L. monocytogenes → kontaminasi
pangan → saluran gastrointestinal
● Protein adesin (Ami, Fbp A, and
flagellin)--> penempelan sel inang
● Internallin A dan B ( dinding sel
bakteri) ><E-cadherin → fagositosis→
enclosed Phagolyosome → pH rendah
→ produksi listeriolysin O →
phagolyosome dilisis→ bakteri masuk
ke sitoplasma → bakteri berkembang