UNIVERSITAS NEGERI MEDAN

TINGKAT TOKSISITAS (LC50-24 JAM) EKSTRAK DAUN

KEMANGI (Ocimum sanctum L.) TERHADAP LARVA
NYAMUK Culex sp

PROPOSAL PENELITIAN

Diajukan untuk Seminar Proposal Penelitan dalam Rangka

Penyusunan Tugas Akhir Skripsi

Oleh :

Gracia Anzani Tambunan

NIM 4173220008
Program Studi Biologi

JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI MEDAN
MEDAN
2020
i
 DAFTAR ISI
Lembar Pengesahan...............................................................................................i

DAFTAR ISI..........................................................................................................ii
DAFTAR GAMBAR.............................................................................................iv

DAFTAR TABEL..................................................................................................v

BAB I PENDAHULUAN.......................................................................................1
1.1. Latar Belakang..........................................................................................1

1.2. Identifikasi Masalah..................................................................................5

1.3. Ruang Lingkup..........................................................................................6

1.4. Rumusan Masalah.....................................................................................6

1.5. Batasan Masalah........................................................................................6

1.6. Tujuan Penelitian.......................................................................................6

1.7. Manfaat Penelitian.....................................................................................7

1.8. Defenisi Operasional.................................................................................7

BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................9

2.1. Tanaman Kemangi (Ocimum sanctum L.)................................................9

2.1.1. Klasifikasi Ilmiah...............................................................................9

2.1.2. Morfologi Kemangi (Ocimum sanctum L.)......................................10

2.1.3. Asal, Persebaran dan Habitat Kemangi............................................11

2.1.4. Kandungan Kemangi (Ocimum sanctum L.)....................................11

2.1.5. Manfaat Kemangi (Ocimum sanctum L.).........................................12

2.1.6. Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum sanctum L.)................................13

2.2. Uji Toksisitas LC50..................................................................................14

2.2.1. Definisi Uji Toksisitas.....................................................................14

2.2.2. Metode Uji Lethal Concentration (LC50).........................................15

2.2.3. Standar Hewan Uji...........................................................................17

ii
 2.3. Nyamuk Culex sp....................................................................................17

2.3.1. Klasifikasi Ilmiah.............................................................................17

2.3.2. Morfologi dan Siklus Hidup............................................................18

2.3.3. Habitat..............................................................................................21

2.3.4. Perilaku............................................................................................21

2.4. Kerangka Berfikir....................................................................................22

2.5. Hipotesis..................................................................................................23

BAB III METODE PENELITIAN.....................................................................24

3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian...................................................................24

3.2. Jenis Penelitian........................................................................................24

3.3. Populasi dan Sampel...............................................................................24

3.3.1. Populasi............................................................................................24

3.3.2. Sampel..............................................................................................24

3.4. Desain dan Variabel Penelitian...............................................................25

3.4.1. Desain Penelitian..............................................................................25

3.4.2. Variabel Penelitian...........................................................................26

3.5. Teknik Pengumpulan Data......................................................................27

3.7.2. Jenis dan Sumber Data.....................................................................27

3.7.3. Metode Pengambilan Data...............................................................27

3.6. Instrumen Penelitian................................................................................28

3.6.1. Alat...................................................................................................28

3.6.2. Bahan...............................................................................................29

3.7. Prosedur Penelitian..................................................................................30

3.7.1. Pembuatan Ekstrak Daun Kemangi.................................................30

3.7.2. Preparasi Sampel Larva...................................................................31

3.7.3. Pembuatan Larutan Perlakuan.........................................................32

iii
 3.7.4. Penentuan Konsentrasi.....................................................................33

3.7.5. Uji LC50 24 Jam................................................................................33

3.7.6. Data Mortalitas.................................................................................34

3.8. Analisis Data...........................................................................................35

3.9. Jadwal Penelitian.....................................................................................35

DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................36

iv
 DAFTAR GAMBAR

Hal
Gambar 2.1.Tanaman Kemangi (Ocimum sanctum)............................................10
Gambar 2.2. Telur Nyamuk Culex sp..................................................................18
Gambar 2.3.Perbedaan Larva InstarI, II, III dan IV.............................................19
Gambar 2.4.Morfologi Pupa Nyamuk Culex sp...................................................20
Gambar 2.5. Morfologi Culex sp Dewasa............................................................20
Gambar 2.6. Perbedaan Nyamuk Culex, Anopheles dan Aedes...........................21
Gambar 2.7. Skema kerangka berfikir dalam penelitian......................................22
Gambar 3.1. Skema Prosedur Uji Pendahuluan...................................................25
Gambar 3.2. Skema Prosedru Uji Sesungguhnya................................................26
Gambar 3.3. Skema Pembuatan Ekstrak Daun Kemangi ...................................30

iv
 DAFTAR TABEL

Hal
Tabel 3.1.Alat yang digunakan dalam penelitian.................................................28
Tabel 3.2.Bahan yang digunakan dalam penelitan...............................................29
Tabel 3.3. Jadwal Penelitian.................................................................................35

v
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Lingkungan mempunyai pengaruh serta kepentingan yang relatif besar

dalam hal peranannya sebagai salah satu faktor yang mempengaruhi derajat
kesehatan masyarakat. Kesehatan masyarakat yang optimal dipengaruhi oleh 4
faktor, yaitu faktor lingkungan, faktor perilaku, faktor pelayanan kesehatan dan
faktor keturunan. Indonesia merupakan salah satu negara tropis di dunia. Iklim
tropis menjadi penyebab berbagai penyakit tropis yang disebabkan oleh nyamuk,
seperti malaria, filaria, demam berdarah, dan kaki gajah, bahkan menimbulkan
epidemi yang berlangsung dalam spektrum yang luas dalam masyarakat
(Kadarohman, 2010).
Keberadaan nyamuk yang berdekatan dengan kehidupan manusia dan
hewan menimbulkan masalah yang cukup serius dikarenakan nyamuk bertindak
sebagai vektor beberapa penyakit yang sangat penting dengan tingginya tingkat
kesakitan dan kematian yang ditimbulkannya. Aedes, Anopheles dan Culex
merupakan nyamuk yang lebih mendapat perhatian karena berpotensi sebagai
vektor penyakit. Berbagai jenis virus dan cacing filaria ditularkan oleh jenis-jenis
dari ketiga marga tersebut (Suwito, 2008). Nyamuk genus Culex merupakan
nyamuk yang banyak di sekitar kita. Nyamuk ini termasuk serangga yang
beberapa spesiesnya sudah dibuktikan sebagai vektor penyakit, disamping dapat
mengganggu kehidupan manusia karena gigitannya. Di Indonesia ada 23 spesies
nyamuk dari genus Anopheles, Aedes, Culex dan Mansonia sebagai vektor
penyakit filariasis diantaranya Culex quinquesfasciatus dan Culex
bitaeniorrhynchus (Zulkarnain,2004).
Beberapa daerah di Indonesia telah ditemukan beberapa jenis spesies
nyamuk Culex. Di Timor Barat ditemukan Cx. quinquefasciatus, Cx.
bitaeniorrhynychus, Cx. gelidus, Cx. pseudovishnui, Cx. sitens, Cx. vishnui. Di
daerah Bengkalis Riau ditemukan Cx. quinquefasciatus, Cx. fuscocephalus, Cx.
hutchinson, Cx. gelidus yang diduga sebagai vektor penyakit Japanese

1
Enceohalitis. Di Bogor ditemukan tiga jenis spesies yang merupakan vektor
penyakit filariasis pada anjing (Dirofilaria

2
 2

immitis) yaitu : Cx. quinquefasciatus, Cx. tritaeniorrhynchus, Cx.

bitaeniorrhynchus. Di Jakarta hampir 100% ditemukan jenis Cx.
quinquefasciattus yang menggigit pada malam hari (In door dan bersifat
anthrozoofagik). Di Palembang ditemukan Cx. quinquefasciatus, Cx.
bitaeniorrhynchus, Cx. gelidus dan Cx. fuscocephalus.(Zulkarnain, 2004). Di
Kabupaten Sumbawa Nusa Tenggara Barat ditemukan Cx. annulus, Cx.
bitaeniorhynchus, Cx. cinctellus, Cx. fragilis, Cx. gelidus, Cx. pallidothorax, Cx.
pseudovishnui, Cx. quinquefasciatus, Cx. raptor, Cx. sitiens, Cx.
tritaeniorhynchus. (Soekirna, 2006)
Filariasis atau penyakit kaki gajah merupakan penyakit menular yang
disebabkan oleh cacing Filaria sp. Ada 3 tiga spesies cacing filaria yaitu
Wucheria banrofti, Brugia malayi dan Brugia timori dan ditularkan oleh nyamuk
Culex, Anopheles, Armigeres dan Mansonia. Penyakit ini dapat menyerang
kelenjar dan saluran getah bening yang dapat merusak limfe, menimbulkan
pembengkakan pada tangan, kaki, glandula mammae dan scrotum. Pada stadium
lanjut dapat menimbulkan cacat menetap berupa pembesaran kaki, lengan,
payudara dan alat kelamin. Sampai saat ini di Indonesia dilaporkan terdapat lebih
dari 14.932 penderita kasus kronis yang tersebar di 418 kabupaten/kota di 34
provinsi. Filarisasi tersebar di seluruh Indonesia terutama di daerah endemis
seperti di Sumatera, Jawa, Kalimantan, Sulawesi, NTT. Maluku dan Irian Jaya.
(Anindita, 2016).
Pada tahun 2018, terdapat 10.681 kasus filariasis yang tersebar di 34
provinsi. Angka ini menurun dibandingkan tahun sebelumnya 12.677 kasus. Hal
ini dikarenakan, beberapa kasus dilaporkan meninggal dunia dan adanya
perubahan diagnosis sesudah dilakukan konfirmasi kasus klinis kronis yang
dilaporkan tahun sebelumnnya. Lima provinsi dengan kasus terbanyak adalah
Papua, Nusa tenggara Timur, Jawa Barat, Papua baray dan Aceh sedankan pada
sumatera utara berada pada peringkat 14 (Kemenkes, 2019). Pada masa pandemi
Covid-19 program eliminasi filariasis tetap dilaksanakan untuk mencapai keadaan
dimana penularan filarasis sedemikian rendahnya sehingga penyakit ini tidak
menjadi masalah kesehatan masyarakat. WHO menetapkan kesepakatan global
sebagai upaya untuk mengeliminasi filaiasus pada tahun 2020 (WHO, 2019).
 3

Selain filariasis limfatik ada beberapa penyakit lain yang disebabkan oleh
Culex sp yaitu Japanese Encephalitis, St. Louis Encephalitis dan West Nile Virus.
Japanese Encephalitis merupakan penyakit radang otak menuar bersifat zoonis,
menyerang hewan dan manusia yang ditandai denga demam, gejala saraf,
gangguan motorik, perilaku dan kelainan reproduksi. Penyakit ini disebarkan
melalui gigitan nyamuk dengan perantaraan hewan lain. Babi sebagai salah satu
hewan pejamu terbaiak dalam perkembangan virus JE dan virus JE dapat
ditularkan dari gigitan nyamuk yang terinfeksi. Di indonesia JE dapat ditemukan
sepanjang tahun pada semua usia tetapi sebagian besar pada usia 2-10 tahun.
Sedangkan St. Louis Encephalitis dan West Nile Virus merupakan penyakit
endemi yang ditemukan di luar Indonesia seperti negara Afrika, India, Israe,
Prancis, Rumania, dan Asia Barat. Penyakit ini menyerang saraf pusat yang
disebabkan virus. Manusia tertular penyakit ini melalui gigitan nyamuk yang telah
terifeksi virus yang dimana sebelumnya telah menggigit burung yang terinfeksi
virus. Penyakit ini dapat terjadi tanpa gejala hingga gejala kesakitan parah seperti
kerusakan sistem saraf pusat permanen hingga kematian (Zumrotus, 2009).
Untuk pencegahan penyakit, institusi kesehatan perlu menambah informasi
tentang filariasis dan pencegahannya kepada masyarakat. Salah satunya adalah
dengan melakukan pengendalian vektor filaria melalui pemberantasan sarang
nyamuk serta peningkatan penemuan dini filariasin melalui screening darah jari
(Dheo, 2019). Tindakan membunuh nyamuk dewasa tidak efisien sehingga lebih
dianjurkan untuk membunuh larva nyamuk dengan larvisida atau mencegah
cucukan. Pengunaan larvasida untuk membunuh larva nyamuk paling efektif pada
larva instar I karena merupakan masa larva paling sensitif, aktif bergerak dan
makan. (Djojosumarto, 2008).
Penggunaan larvasida merupakan cara yang paling umum digunakan oleh
masyarakat untuk mengendalikan pertumbuhan vektor tersebut (Aradilla, 2009).
Larvasida yang sering ditemui di lapangan adalah abate berbahan aktif temefos.
Pada tahun 1980, temefos 1% (abate) ditetapkan sebagai bagian dari program
pemberantasan massal larva nyamuk di Indonesia, tetapi penggunaan larvasida
kimia menimbulakan dampak negatif seperti peningkatan resistensi nyamuk,
 4

pencemaran lingkungan, keracunan, dan kematian makhluk bukan residu.

(Ismatullah, 2008).
Banyaknya jenis insektisida dan larvasida berbahan kimia menyebabkan
terjadinya resistensi terhadap serangga dan toksik bagi manusia. Oleh karena itu
dibutuhkan agen yang aman terhadap lingkungan, hemat biaya dan lebih mudah
tersedia secara lokal dengan memanfaatkan tumbuhan untuk pengendalian vektor
nyamuk. Tumbuhan dapat menjadi alternatif sebagai pengendali nyamuk karena
banyak mengandung senyawa bioaktif seperti flavonoid, saponin, tanin, eugenol
yang memiliki efek larvasida (Wijayani, 2014). Larvasida alami merupakan
contoh pengendalian hama alternatif yang layak dikembangkan karena senyawa
larvasida dari tumbuhan mudah terurai di lingkungan, tidak meninggalkan residu
di udara, air, dan tanah serta relatif lebih aman (Astuti dkk., 2011). Efek larvasida
yang efektif adalah Lethal Concentration 50% (LC50), semakin kecil nilai LC50
semakin beracun insektisida tersebut (Kemenkes RI, 2012).
Salah satu tanaman yang berpotensi sebagai larvasida alami adalah daun
kemangi (Ocimum sanctum). Berdasarkan penelitian-penelitian pada genus
Ocimum, tanaman ini mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tannin, saponin,
triterpenoid, dan minyak atsiri (Ginting, 2004). Aktifitas larvasida diduga oleh
senyawa flavonoid, saponin, dan eugenol. Flavonoid berfungsi sebagai racun
pernafasan, saponin diduga sebagai racun perut dan racun kontak, serta eugenol
yang berperan dalam denaturasi protein sitoplasmik dan nekrosis jaringan
(Sudarsono, 2002).
Secara keseluruhan tanaman kemangi mengandung tanin dan saponin
(Sudarsono dkk., 2002). zat saponin memiliki sifat sebagai larvasida. Saponin
merupakan senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan beberapa spesies
tanaman, terutama tanaman dikotil dan berperan sebagai bagian dari sistem
pertahanan tanaman. Ternyata saponin tanpa dicampur dengan apapun dapat
berfungsi sebagai insektisida. Cara kerja saponin dalam meracuni serangga belum
sepenuhnya diketahui dengan jelas. Pengaruh saponin terlihat pada gangguan fisik
pada tubuh luar serangga (kutikula), yakni mencuci lapisan lilin yang melindungi
tubuh serangga dan menyebabkan kematian, karena serangga akan kehilangan
banyak cairan tubuh. Beberapa kasus menunjukkan bahwa saponin dapat masuk
 5

melalui organ pernafasan dan menyebabkan kerusakan membran sel atau

mengganggu proses metabolisme (Novizan, 2002). Saponin juga mengandung
steroid yang dapat menurunkan tegangan permukaan selaput mukosa traktus
digestivus larva sehingga dinding traktus digestivus larva menjadi korosif (Shashi
et al., 1991).
Sedangkan minyak atsiri dalam daun kemangi (Ocimum sanctum)
mengandung aldehid, alkaloid, asam askorbat, beta carotene, carvacrol, cineole,
eugenol, eugenol-metil-eter, glikosida, linalol, metil chavicol, limatrol, caryofilin,
asam ursolat, n-triacontanol dan fenol. Kandungan kimia lainnya dari daun
kemangi ungu yang bersifat larvasida adalah eugenol dan metil chavicol (Duke,
2009).
Eugenol merupakan anggota dari kelas alilbenzena bentuknya cairan
berminyak yang diekstraksi dari tanaman tertentu, salah satunya dari Ocimum
sanctum. Eugenol memiliki kemampuan sebagai agen larvasida almi, yang bekerja
dengan cara mempengaruhi sistem saraf pada serangga (Taher, 2015). Eugenol
juga dapat menghambat reseptor perasa pada mulut larva dan menggangu
pencernaan larva (Gunawan,2011). Metil eugenol juga digunakan sebagai atraktan
karena mirip dengan feromon dan memberikan pengaruh langsung terhadap
sistem syaraf pusat individu (Harison, 2007).
Berdasarkan paparan diatas tentang penyakit filariasis dan manfaat dari
daun kemangi (Ocimum sanctum) sebagai larvasida alami maka perlu dilakukan
penelitian lebih mendalam apakah benar ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum)
memiliki efek larvasida terhadap larva Culex sp dan menentukan tingkat toksisitas
(LC50) dalam 24 jam yang tepat dalam memutus mata rantai pertumbuhan larva
nyamuk Culex sp. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui
tingkat toksisitas (LC50-24) ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)sebagai
larvasida alami terhadap larva nyamuk Culex sp.

1.2. Identifikasi Masalah

Masalah yang teridentifikasi dalam latar belakang antara lain :

 6

1. Perlunya pencegahan penyakit malaria dengan menggunakan larvasida

alami dari daun kemangi (Ocium sanctum L) untuk mengurangi populasi
larva nyamuk Culex sp dengan memutus mata rantai pertumbuhannya

2. Kurangnya kajian larvasida dari bahan alami yang yang bermanfaat

memutus mata rantai pertumbuhan larva nyamuk Culex sp. untuk digunakan
dalam pengendalian wabah penyakit filariasis
3. Masih minimnya identifikasi yang akurat dari nilai LC50-24 Jam dari ekstrak
daun kemangi yang tepat untuk digunakan sebagai larvasida alami pada
larva nyamuk Culex sp

1.3. Ruang Lingkup

Ruang lingkup masalah dalam penelitian ini adalah penentuan tingkat

toksisitas ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum) terhadap larva nyamuk Culex
sp instar I dengan Lethal Concentration 50% dalam waktu 24 jam (LC50-24).

1.4. Rumusan Masalah

Berdasarkan uraian latar belakang masalah di atas, dapat dirumuskan

pertanyaan sebagai berikut :
1. Apakah ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) memiliki potensi
toksik terhadap larva nyamuk Culex sp ?
2. Berapakah nilai LC50 dalam 24 jam ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum L.) yang paling efektif terhadap larva nyamuk Culex sp ?
3. Bagaimana efek sublethal ekstrak daun kemangi (Oscimum sanctum L)
terhadap larva Culex sp instar I ?

1.5. Batasan Masalah

Mengingat luasnya permasalahan yang diungkapkan dalam identifikasi

masalah, maka penelitian ini dibatasi antara lain:
1. Pemanfaatan bahan alami yaitu daun kemangi (Ocimum sanctum L.) untuk
digunakan sebagai larvasida alami
2. Nilai LC50 dalam 24 jam pada larva nyamuk Culex sp instar I setelah
pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
 7

3. Tingkat toksisitas dan efek sublethal dari ekstrak daun kemangi dalam
membunuh larva nyamuk Culex sp instar I sebagai vektor dari penyakit
Filariasis

1.6. Tujuan Penelitian

Berdasarkan rumusan masalah diatas, tujuan dari penelitian ini adalah :

1. Untuk mengetahui apakah ekstrak daun kemangi (Ocium sanctum L) dapat
dijadikan sebagai larvasida alami dalam memutus mata rantai pertumbuhan
larva nyamuk Culex sp sebagai vektor penyakit filariasis
2. Untuk mengetahui nilai LC50 dalam 24 jam yang paling efektif terhadap
larva nyamuk Culex sp setelah pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum L.)
3. Untuk mengetahui tingkat toksisitas dan efek sublethal ekstrak daun
kemangi terhadap larva nyamuk Culex sp.

1.7. Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan memiliki manfaat sebagai berikut :

1. Manfaat penelitian ini yaitu sebagai ilmu pengetahuan bidang toksikologi
dan Menambah data khusus nilai LC50 dalam 24 jam dari larvasida alami
ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) terhadap larva Culex sp,
dengan adanya bukti-bukti empiris dalam penelitian
2. Menambah referensi pada masyarakat umum tentang media alami yang
dapat digunakan sebagai larvasida yang ramah lingkungan dan efektif
terhadap larva Culex sp dalam pengendalian wabah malaria

1.8. Defenisi Operasional

untuk menghindari perbedaan persepsi dari istilah-istilah yang digunakan,

berikut ini adalah definisi operasional yang dipakai pada penelitian ini :
1. Toksisitas merupakan suatu sifat relatif zat kimia dan sejauh menyangkut
diri manusia secara langsung maupun tidak langsung yang menyebabkan
interaksi kimia di dalam tubuh secara fisiologis dan mengakibatkan efek
toksik (racun) (Yulianto dan Nurul, 2017)
 8

2. LC50-24 (Lethal Concentration 50-24) adalah nilai konsentrasi yang

menyebabkan kematian pada 50% hewan percobaan dalam waktu 24 jam.
3. Ekstrak adalah zat yang dihasilkan dari ekstraksi bahan mentah secara
kimiawi. Senyawa yang di ekstra meliputi senyawa aromatik, minyak
atsiri, ester dan sebagainya yang kemudian digunakan menjadi bahan baku
industri ataupun digunakan secara langsung oleh masyarakat.
4. Culex merupakan salah satu genus nyamuk yang berperan sebagai vektor
penyakit Filariasis Japanese Enchepalitis, West Nile Virus St. Louis
enchepalitis.
5. Instar I merupakan masa pada saat telur baru menetas menjadi larva dan
fase pertumbuhan pertama larva yang disertai pergantian kulit tahap
pertama pada saat 2 hari setelah menetas dan merupakan fase tersensitif
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tanaman Kemangi (Ocimum sanctum L.)

Kemangi (Ocimum sanctum) merupakan tanaman tahunan yang tumbuh liar
di tepi jalan dan tepi kebun. Tanaman ini tumbuh di tempat tanah terbuka maupun
agak teduh dan tidak tahan terhadap kekeringan. Tumbuh kurang lebih 300 m
diatas permukaa laut (Zainal et al., 2016). Tanaman kemangi (Ocimum sanctum
L.) merupakan tanaman yang mudah didapatkan, tanaman kemangi adalah sejenis
tanaman hermafrodit yang tumbuh di daerah tropis tanaman initermasuk family
lamiaceaea yang banyak tumbuh di Indonesia. Seiring dengan meningkatnya ilmu
pengetahuan dan teknologi, masyarakat telah memanfaatkan tanaman kemangi
sebagai hasil alam yang menjadi nilai ekonomi tinggi, biasanya masyarakat
menjadikan kemangi sebagai pelengkap masakan dan lalapan (Safwan et al.,
2016).
Manfaat kemangi selain itu dapat digunakan sebagai obat, pestisida nabati,
penghasil minyak atsiri, sayuran dan minuman penyegar. Menurut Hasan (2016)
hasil dari penelitian fitokimia pada tanaman kemangi telah membuktikan adanya
flavonoid, glikosit, asam gallic dan esternya, asam cafeic, dan minyak atsiri yang
mengandung eugenol (70,5%) sebagai komponen utama. Daun kemangi juga
memiliki banyak kandungan senyawa kima (saponin, tanin) yang memiliki
kemampuan dalam menghambat pertumbuhan bakteri (Maylia, 2014)
2.1.1. Klasifikasi Ilmiah
Secara taksonomi tanaman kemangi memiliki klasifikasi sebagai berikut :
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Divisi : Spermatophyta
Subdivisi : Angiospermae
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Lamiales
Famili : Lamiaceae
Genus : Ocimum

9
Spesies : Ocimum sanctum Linn. (Verma, 2016)

10
 10

2.1.2. Morfologi Kemangi (Ocimum sanctum L.)

Tanaman kemangi (Ocimum sanctum) memiliki morfologi tajuk membulat,
herba tegak atau semak, sangat harum, bercabang banyak, dengan tinggi 0,3-1,5
cm batang pokoknya tidak jelas, daun berwarna hijau keunguan, dan berambut
maupun tidak, daun berhadapan tunggal, tersusun dari bawah keatas. Memiliki
panjang tangkai daun 0,25-3 cm dan setiap helaian daun berbentuk elips hingga
bulat telur, memanjang, ujung tumpul atau meruncing. Pangkal daun pasak hingga
membulat, kedua permukaan berambut halus, bergelombang, tepi bergerigi lemah
atau rata. Bunga tersusun pada tangkai bunga berbentuk menega. Jenis bunga
hermafrodit, berwarna putih dan berbau wangi. Bunga majemuk dan di ketiak
daun ujung terdapat daun pelindung berbentuk bulat telur atau elips, dengan
panjang 0,5-1 cm. Kelopak bunga berbentuk bibir, sisi luar berambut memiliki
kelenjar, berwarna hijau atau ungu, dan ikut menyusun buah, mahkota bunga
berwarna putih dengan benang sari tersisip di dasar mahkota, kepala putik
bercabang dua namun tidak sama (Kusuma, 2010).
Memiliki buah dengan bentuk kotak berwarna coklat tua, tegak, dan
tertekan, ujung berbentuk kait melingkar. Panjang kelopak buah 6-9 mm. Biji
berukuran kecil berwarna cokelat tua, bbertipe kertas, dan waktu diambil segera
membengkak, tiap buah terdiri dari empat biji. Akar tunggang dan berwarna putih.
Daun berbentuk lonjong, memanjang, bulat telur memanjang, ujug meruncing,
pangkal daun runcing tumpul sampai membulat, tulang-tulang daun menyirip, tepi
bergerigi dangkal atau rata, dan bergelombang, daging daun tipis, permukaan
berambut halus panjang daun 2,5 cm sampai 7,5 cm, lebar 1 cm sampai 2,5cm,
tangkai daun berpenampang bundar, panjang 1-2 cm berambut (Kusuma, 2010).

hghsg
G
 11

Gambar 2.1. Tanaman Kemangi (Ocimum santum) (A. Tanaman kemangi utuh, B. Bunga
Kemngi, C. Daun Kemangi) (Sumber: Gunarto, 2011)
2.1.3. Asal, Persebaran dan Habitat Kemangi
Tanaman ini berasal dari daerah tropis Asia dan kepulauan di daerah
Pasifik. Pertama kali ditemukan dan diplah di India. Kini tanaman ini tersebar luas
di Asia, Afrika, Amerika Tengah, dan Selatan. Seara komersial banyak
dibudidayakan di Eropa bagian Selatan, Mesir, Maroko, Indonesia, dan
California. Di Indonesia tanaman kemangi banyak ditemukan di daerah Sumatera,
Jawa, dan Maluku. Namun dibudidayakan di daerah Jawa barat untuk dicari
kandungan minyak atsirinya. Kemangi adalah tumbuhan liar dan berbau harum.
Tanaman ini tumbuh dengan baik di dataran rendah hingga tinggi, sensitif
terhadap iklim dingin dan untuk perbanyakan tanaman kemangi dapat
diperbanyak dengan biji (Kurniasih, 2014).
Di Indonesia kemangi banyak terdapat di daerah Jawa dan Madura. Banyak
ditemukan di sekitar pinggiran ladang, sawah kering, juga di taman dan di pinggir
jala, hutan terbuka, padang rumput, tumbuh liar di jalanan, dan kadang-kadang
juga dibudidayakan. Tanaman ini dapat tumbuh pada dataran rendah hingga
ketinggian 1100 meter di atas permukaan laut. Ocimum sanctum biasanya tumbuh
antara pertengahan Februari sampai akhir September dan berbunga sekitar bulan
April (Sudarsono et al., 2002)
2.1.4. Kandungan Kemangi (Ocimum sanctum L.)
Kandungan kemangi yang terdapat di dalam Ocimum sanctum L. yaitu
minyak atsiri, karbohidrat, fitosterol, alkaloid, fenolik, tanin, lignin, pati saponin,
flavonoid, terpenoid, antrakuinon, minyak volatil termasuk metil sinamat, metil
heptenon, metil nonilkeon, kamfor, dan sitral (Dhale et al., 2012; Sarma, 2011).
Bahan kimia yang terkandung dalam kemangi antara lain 3,7-dimetil-1,6-
oktadien-3ol (linalool 3,94 mg/g), 4-alil-2alil-2-metoksifenol (eugenol 0,896
mg/g) dan 1,8-sineol (0,288 mg/g) yang diidentifikasi melalui metode GC/MS
(Larasati, 2016).
Kandungan bahan kimia yang terdapat pada seluruh bagian tanaman
kemangi adalah 1,8 sineol, anethol, apigenin, stigmaasterol, triptofan, tanin,
sterol, dan boron (Gunawan, 2011). Selain itu, Daun kemangi kaya akan mineral
 12

makro yaitu kalsium, fosfor, dan magnesium, juga mengandung betakaroten dan
vitmnin C. Pada skrining fitokimia daun kemangi positif mengandung senyawa
kimia metabolit sekunder alkaloid, saponin, steroid, flavonoid, dan tanin
(Sopianti, 2018). Daun kemangi juga mengandung komponen non gizi antara lain
senyawa flavonoid, eugenol, boron, anetol, arginin, dan minyak atsiri. Komposisi
yang terkandung didalam kemangi antara lain grotenoid 19,77  0,01%, total
phenolic 2,09  0,10% dan total flavonoid 1,87  0,02% (Bhattacharya et al.,
2014).
Kandungan kimia dari daun kemangi yang bersifat larvasida adalah eugenol,
flavonoid, saponin, tanin, dan triterpenoid. Flavonoid dan saponin dapat
digunakan sebagai insektisida dan larvasida. Senyawa saponin dapat bersifat
larvasida dengan menurunkan tegangan permukaan selaput mukosa traktus
digestivus larva sehingga dinding traktus menjadi korosif, sedangkan flavonoid
merupakan senyawa yang bersifat toksik terhadap serangga (Juwitawati, 2007).
2.1.5. Manfaat Kemangi (Ocimum sanctum L.)
Manfaat daun kemangi salah satunya dapat dijadikan sebagai larvasida
alami. Daun kemangi dapat bersifat larvasida pada nyamuk Anopheles maculatus
dan Aedes aegypti (Lestari, 2010). Manfaat sebagai larvasida berasal dari
kandungan senyawa yang terkandung dalam tumbuhan dan diduga berfungsi
sebagai larvasida. Diantaranya adalah golongan sianida saponin, tanin, flavonoid,
alkaloid, minyak atsiri dan steroid dan salah satu tumbuhan yang memiliki
kandungan senyawa tersebut adalah daun kemangi (Kardinan, 2003).
Berikut ini adalah cara kerja senyawa tersebut yaitu Eugenol dengan
bertindak sebagai racun perut yang membunuh larva dengan masuk ke dalam
tubuh larva, maka alat pencernaannya akan terganggu. Selain itu, senyawa ini
menghambat reseptor perasa pada mulut larva. Hal ini mengakibatkan larva gagal
mendapatkan stimulus rasa sehingga tidak mampu mengenali makanannya.
Akibatnya larva mati kelaparan, selain itu eugenol juga dapat mempengaruhi
susunan sistem saraf pada serangga sehingga dapat digunakan sebagai insektisida
(Damar, 2008).
 13

Flavonoid merupakan komponen fenol yaitu bioaktif yang dapat merubah

reaksi tubuh terhadap senyawa lain seperti virus, alergen, zat pengerat dan
lainnya. Oleh sebab itu flavonoid memiliki kemampuan sebagai antivirus,
antiperadangan, antioksidan, antialergi, antikarinogenik dan menghambat
kolesterol (Wirakukusumah, 2007). Flavonoid dalam insektisida dan larvasida
berfungsi sebagai racun pernafasan yang dapat merusak sistem pernafasan pada
serangga dan akhirnya mati. Posisi tubuh larva yang berubah dari normal
disebabkan oleh senyawa flavonoid akibat cara masuknya yang melalui siphon
sehingga mengakibatkan kerusakan sehingga larva harus mensejajarkan posisinya
dengan permukaan air untuk mempermudah mengambil oksigen (Cania et al,
2013).
Saponin merupakan salah satu jenis glikosida yang sering ditemukan pada
tumbuhan dan memiliki ciri khas jika dikocok akan menimbulkan buih umumya
digunakan sebagai bahan sabun. Saponin bertindak sebagai racun perut yang dapat
mempengaruhi larva, sehingga mengakibatkan kematian larva. Saponin sebagai
racun perut bekerja dengan cara merusak traktus digestivus. Saponin dapat
menurunkan tegangan permukaan traktus digestivus larva, sehingga menakibatkan
dinding traktus digestivus menjadi korosif (Farida, 2006).
Tanin merupakan senyawa polifenol yang menyebabkan rasa sepat pada bua
atau bagian tanaman lain disebabkan karena tanin dapat mengendapkan protein,
sehingga jika tanin kontak dengan lidah akan terjadi pengendapan protein. Tanin
dapat menurunkan kemampuan mencerna makanan pada serangga dengan cara
menurunkan aktivitas enzim pencernaan. Tanin juga mampu mengganggu
aktivitas penyerapan protein pada dinding usus. Respon larva terhadap senyawa
ini adalah menurunnya laju pertumbuhan dan gangguan nutrisi (Dinata, 2008).
Triterpenoid merupakan insektisida alami yang bekerja dengan cara menghambat
proses pertumbuhan serangga, menghambat proses ganti kulit pada serangga,
sebagai penolak makanan, dan dapat mengakibatkan abnormalitas pada anatomi
yang dapat mengakibatkan kematian pada serangga (Dinata, 2008).
2.1.6. Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum sanctum L.)
Ekstrak daun kemangi merupakan zat aktif dari sari daun kemangi yang
didapatkan dari hasil proses ekstraksi dari tanaman kemangi pada bagian daunnya
 14

dengan menggunakan metode ekstraksi yang sesuai (Annes, 2008). Terdapat

beberapa metode yang dapat dilakukan dengan cara dingin dan panas. Metode
ekstraksi cara dingin terdiri dari maserasi dan perkolasi, sedangkan metode
ekstraksi dengan cara panas terdiri dari refluks, soxhlet, digesti, infusa, dan dekok
(DepKes RI, 2001).
Dalam pembuatan ekstrak daun kemangi digunakan metode maserasi yaitu
metode ekstraksi dengan sistem tanpa pemanasan (maserasi dingin), dengan cara
perendaman bahan dengan pelarut yang sesuai dengan senyawa aktif yang akan
diambil. Keunggulan dari metode ini adalah dapat digunakan untuk senis senyawa
tidak tahan panas dan tahan panas, selain itu tidak membutuhkan alat yang
spesifik. Kekurangannya adalah membutuhkan waktu yang lama dan juga
membutuhkan pelarut dalam jumlah yang banyak (Chairunnisa, 2019).
Pada proses pembuatan ekstrak daun Kemangi menggunakan metode
maserasi. Daun kemangi akan ditimbang terlebih dahulu sebanyak yang
dibutuhkan lalu dikeringkan tanpa paparan sinar mmatahari langsung. Setelah itu
daunkemangi kering akan dihaluskan hingga berbentuk bubuk. Kemudian bubuk
daunkemangi kering dilarutkan menggunakan etanol 96% hingga bubuk terendam
dibotol. Selama proses perendaman dilakukan pengadukan dengan batang
pengaduk. Proses perendaman dilakukan selama 72 jam tanpa paparan sinar
matahari. Selanjutnya hasil berupa filtrat diambil dengan cara penyaringan dan
larutan di maserasi kembali dengan cara yang sama sampai diperoleh larutan yang
jernih. Kemudian ekstrak diuapkan menggunakan rotary evaporator pada suhu
berkisar 30 - 40oC hingga diperoleh ekstrak yang kental.

2.2. Uji Toksisitas LC50

2.2.1. Definisi Uji Toksisitas

Uji toksisitas adalah suatu uji untuk menentukan potenisal suatu senyawa
sebagai racun, mengenali kondisi biologis/lingkungan munculnya efek toksis, dan
mengkarakterisasi aksi/efek (Wirasuta, 2007). Toksisitas merupakan sifat relatif
dari suatu zat kimia, dalam kemampuannya menimbulkan efek berbahaya atau
penyimpangan mekanisme biologi pada suatu organisme, istilah ini relatif yang
 15

biasa dipergunakan untuk memperbandingkan dengan zat kimia lainnya. Dalam

uji toksisitas terdapat beberapa asas dalam pengujian, asas-asas tersebut adalah:
1. Zat kimia harus kontak dengan target sel/jaringan biologi untuk
menimbulkan efek.
2. Terdapat kisaran daerah antara NOEL no observed effect level dengan
konsentrasi secara signifikan memberi efek atas segala sistem biologi.
3. Sel-sel biologi dalam berbagai macam spesies memiliki fungsi serupa
dan juga jalur metabolik yang serupa, pada umumnya dengan cara serupa
akan dipengaruhi oleh zat kimia
4. Perubahan kecil yang terjadi pada struktur suatu zat kimia mungkin akan
sangat mempengaruhi aksi biologi yang ditimbulkan (Rahayu, 2018).
Pada uji in-vivo dalan uji toksisitas terdapat tes spesial yang meliputi: uji
potensi menetukan potensiasi zat uji bila dicampur dengan zat lain, uji
teratogenik, uji reproduksi, uji mutagenik, uji tumorgenisitas dan
karsinogenisitas, uji iritasi/sensitivitas pada kulit dan mata, neurotoxicity,
metabolisme dan farmakodinamik, dan uji prilaku. Sedangkan padauji invitro
seperti mutagenesus prokariot dan eukaryot, penyimpangan kromosom (Wirasuta,
2007).
Uji toksisitas akut terdiri atas pemberian suatu senyawa kepada hewan uji
pada suatu saat. Maksud uji tersebut ialah menentukan suatu gejala sebagai akibat
pemberian suatu senyawa dan untuk menentukan peringkat letalitas senyawa itu.
Prosedur awalnya ialah untuk mendapatkan suatu seri kisaran dosis dari suatu
senyawa pada suatu spesies tunggal. Untuk keperluan ini dituntut adanya
pemilihan jalur pemberian, penyiapan senyawa dalam suatu senyawa dalam
bentuk sediaan yang sesuai untuk dibei melalui jalur yang telah dipilih, dan
pemilihan spesis hewan yang cocok. Telah dinyatakan sebelumnya bahwa
penggunaan suatu senyawa seperti yang dikehendaki meberi petunjuk tentang
pemberian apa yang paling sesuai untuk uji awal. Meskipun demikian, sekalipun
penggunaan yang diharakn dari suatu senyawa parenteral, sekurang-kurangnya
oral digunakan sebagai jalur tambahan pada jalur-jalur lain dengan maksud
pembanding dengan senyawa-senyawa lainnya yang berikatan, dan untuk
 16

mengestimasi penggunaan jalur oral ini pada studi toksisitas subkronis yang lebih
ekstensif berikutnya (Loomis, 1978).
2.2.2. Metode Uji Lethal Concentration (LC50)
Lethal Concentration 50 (LC50) yaitu konsentrasi yang menyebabkan
kematian sebanyak 50% dari organisme uji yang dapat diestimasi dengan grafik
dan perhitungan pada suatu waktu penagamatan tertentu, misalnya LC 50 48 jam,
LC50 96 jam sampai waktu hidup hewan uji. Lethal Concentration 50 atau biasa
disingkat LC50 adalah suatu perhitungan untuk menentukan keaktifan dari suatu
ekstrak atau senyawa. misalnya larva Artemia salina. Suatu konsentrasi
mematikan (Lethal Concentration) adalah analisa secara statistik yang
menggunakan uji Whole Effluent Toxiity (WET) untuk menaksir lethalitas sampel
effluent. Tingkat toksisitas dari ekstrak tanaman dapat ditentukan dengan melihat
harga LC50-nya. Apabila harga LC50 lebih kecil dari 1000 µ/ml dikatakan toksik,
sebaliknya apabila harga LC50 lebih besar dari 1000 µ/ml dikatakan tidak toksik.
Tingkat toksisitas tersebut memberi makna terhadap potensi aktivitasnya sebagai
antitumor (Yulianto, 2017).
Uji Lethal Concentration 50 (LC50) merupakan uji hayati yang menentukan
tingkat toksisitas dari suatu zat atau bahan pencemar dan digunakan juga untuk
pemantauan rutin suatu limbah. Ada dua tahapan dalam penelitian uji LC50 yaitu :
1. Uji pendahuluan yaitu untuk menentukan batas kritis konsentrasi, yaitu
konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian terbesar mendekati 50% dan
kematian terkecil mendekati 50%
2. Uji lanjutan yaitu setelah diketahui batas kritis, selanjutnya ditentukan
konsentrasi akut berdasarkan seri logaritma konsentrasi yang dimodifikasi
(Yulianto, 2017).

Dalam uji LC50 dosis toksisitas ditentukan dengan cara menentukan nilai
ambang atas dan ambang bawah. Nilai ambang batas berfungsi menentukan
konsentrasi perlakuan pada uji toksisitas subletal dilakukan dengan menggunakan
Rancangan Acak Lengkap (RAL). Konsentrasi perlakuan uji toksisitas subletal
ditenukan dengan perhitungan Busvine yaitu :
 17

log ( Nn )=K log ( an )… … . ( 1 )

a b c d e f
= = = = = … … ..(2)
n a b c d e
Keterangan :
N = Konsentrasi ambang atas (ml/L)
n = Konsentrasi ambang bawah (ml/L)
K = Jumlah interval konsentrasi
a,b,c,d,e,f,g = konsentrasi yang diuji dengan a sebagai konsentrasi terkecil
dan dengan menggunakan rumus (1) dan (2) maka didapatkan nilai uji toksisitas
sublethal (LC50 24 jam) dengan KI sebagai kontrol dan KII-KVI sebagai kelompok
perlakuan dengan dosis ekstrak yang meningkat dengan interval yang sama
hingga mencapai konsentrasi ambang atas (Tanbiyaskur, 2019).

2.2.3. Standar Hewan Uji

Pada umumnya segala uji toksisitas dilakukan pada hewan yang mudah
didapatkan. Pemilihan hewan yang digunakan untuk uji toksisitas harus
mempertimbangkan beberapa faktor seperti sensitifitas, cara metabolisme sediaan
uji, kecepatan tumbuh serta mudah tidaknya cara panganan sewaktu dilakukan
percobaan. Uji toksisitas terdiri atas pemberian suatu senyawa pada hewan uji
pada suatu saat dan pengamatan efek yang terjadi pada hewan uji (Loomis, 1978).
Hewan uji yang digunakan haruslah sehat, pada usia aktif dan sensitif.
Biasanya digunakan hewan muda. Pengujian laboratorium dapat dilakukan
terhadap sampel vektor atau binatang pembawa penyakit maupun terhadap bahan
pengendali (pestisida). Pengujian laboratorium terhadap sampel dilakukan untuk
megetahui status kevektoran, status resistensi, dan kebutuhan penguji lainnya.
Pengujian laboratorium terhadap bahan pestisida dilakukan untuk mengetahui
kandungan bahan aktif, toksisitas, dan efikasi (KemenKes, 2017).

2.3. Nyamuk Culex sp

2.3.1. Klasifikasi Ilmiah

Secara taksonomi menurut Roomoser (1998), Culex sp terklasifikasi dalam:
Kingdom : Animalia
 18

Filum : Arthropoda
Kelas : Insecta
Subkelas : Pteryota
Ordo : Diptera
Subordo : Nematocera
Famili : Cullicidae
Subfamili : Cullicinae
Genus : Culex
Spesies : Culex sp

2.3.2. Morfologi dan Siklus Hidup

Daur hidup nyamuk Culex sp terdiri dari telur, larva, pupa, dan nyamuk
dewasa berikut ini uraian morfologi nyamuk Anopheles mulai telur hingga imago.
Nyamuk Culex sp termasuk dalam hewan yang bermetamorfosis sempurna
1) Telur
Nyamuk Culex sp dapat bertelur 100-400 butir yang akan menetas 24-30
jam setelah diletakkan diatas air. Nyamuk Culex sp bertelur di air tawar yang
relatif kotor, seperti pada genangan air, got salura air, dan tempat pembuangan air
limbah rumah tangga. Telur Culex sp berbentuk seperti ampul obat dengan ukuran
0,4-0,6µ, bagian bawah (posterior) mempunyai benjilan kecil (corolla) dan saling
melekat satu dengan lainnya dengan zat semen membentuk seperti rakit dengan
panjang sekitar 1,8 cm dengan lebar sekitar 0,6 cm. Pada saat nyamuk Culex sp
baru meletakkan telurnya, telur tersebut berwarna putih, setelah beberapa menit
berubah warna menjadi abu-abu, dan kurang dari 20 menit kemudian, telur
tersebut akan berubah menjadi berwarna hitam. (Prianto, 2000)

Gambar 2.2. Telur Nyamuk Culex sp (Sumber : Gani, 2011)

 19

2) Larva
Dalam waktu 2-3 hari telur akan menetas menjad larva yang disebut dengan
larva instar I. Selanjutnya akan berembang menjadi larva instar II, III, dan IV
dalam waktu sekitar 6-8 hari. Sesuai dengan temperatur dan ketersediaan makanan
yang ada pada lingkungannya. Setiap akhir instar, larva akan melakukan
pergantian kulit (moulting). Morfologi larva terdiri dari caput yang ditumbuhi
rambut, abdomen dengan 10 segmen atau ruas. Pada ruas ke 9 bermodifikasi
menjadi siphon yang memiliki cirikhas bentuknya panjang menyerupai tabung
yang dilengkapi 3 bundel bulu-bulu dan ruas ke 10 menjadi ekor (anal-gills). Ciri
khas larva Culex sp ada pada siphon yang panjangnya 4 kali lebih panjang
daripada lava nyamuk lainnya. Sifon (corong nafas) digantungkan pada
permukaan air, sehingga dengan demikian larva dapat mengambil makanannya.
Sesuai dengan perkembangannya larva nyamuk dibagi menjadi empat tahap instar
yaiu instar I, II, III, dan IV.
 Instar I yaitu tahap pada hari ke 1-2 setelah telur menetas dengan
ukuran 1-2 mm. Cirinya duri (spine) pada dada dan siphon belum
jelas
 Instar II yaitu pada hari ke 2-3 setelah telur menetas dengan ukuran
2,5-3,5 mm. Dengan duri-duri belum jelas dan siphon mulai
menghitam
 Instar III yaitu pada hari ke 3-4 setelah telur menetas dengan uuran
4-5 mm. Dengan ciri duri-duri dada mulai jelas, siphon mulai
menghitam dan corong kepala berwarna cokelat kehitaman
 Instar IV yaitu pada hari ke 4-6 setelah telur menetas dengan ukuran
5-6 mm. Dengan warna kepala terlihat gelap siphon tampak jelas
(Hoedojo, 2000). Gambaran perbedaan morfologi dapat dilihat pada
gambar 2.3
 20

Gambar 2.3. Perbedaan larva instar I, II, III, dan IV (Sumber : Gani, 2011)
3) Pupa
Waktu yang dibutuhkan dari seekor larva untuk menjadi pupa adalah pada
hari ke 5-8 setelah menetas. Pada fase pupa untuk menjadi nyamuk berlangsung
selama 1-3 hari. Pada saat menjadi pupa, bagian kepala dan dada bergabung
menjadi cephalothoraks dengan perut melengkung sehingga terlihat seperti bentuk
koma dan pada fase ini tidak makan dan tidak aktif, biasanya mengapung di
permukaan air dengan membentuk sudut 45o, dan bernafas dengan alat corong
pernafasan (trumpets) dan jika diganggu pupa akan bergerak kebawah air dan
akan kembali ke permukaan (Stephanie, 2013).

Gambar 2.4. Morfologi Pupa nyamuk Culex sp (Sumber : Beach, 2016)

4) Nyamuk Dewasa (Imago)
Setelah 1-3 hari pupa akan menjadi nyamuk dewasa dengan merobek kulit
pada bagian thoraks. Setelah menjadi imago nyamuk betin akan mencari darah
untu pembentukan telurnya sedangkan jantan akan mencari betina untuk
berkopulasi. Morfologi nyamuk Culex sp dewasa berwarna hitam kecokelatan
yang terdiri dai bagian kepala, thoraks dan abdomen. Pada bagian kepala terdapat
sepasang mata, antena yang terdiri dari 15 ruas, dimana antena jantan lebih lebat
dari nyamuk betina karena berfungsi untuk mencari nyamuk betina dengan cara
 21

mendeteksi melalui bau nyamuk betina, palpus yang terdiri dari 5 ruas yang
berfungsi sebagai pendeteksi tingkat kelembapan lingkungan, dan proboscis yang
digunakan unutk menghisap makanan. Pada nyamuk jantan palpus lebih panjang
atau sama dengan proboscis sayap berbentuk sempit panjang dengan ujung
runcing dan kaki yang berwarna lebih gelap dari tubuhnya. Nyamuk jantan hanya
hidup selama sekitar 10 hari sedangkan betina dapat mencapai 2 bulan
(Manimegalai, 2014).

Gambar 2.5. Morfologi Nyamuk Culex sp Dewasa (Sumber : Beach, 2016)

Di Indonesia terdapat berbagai jenis nyamuk diantaranya yang sering
menjadi vektor penyakit adalah nyamuk Anopheles, Aedes, dan Culex. Perbedaan
dari ketiga jenis nyamuk tersebut dapat dilihat mulai dari telur, larva, pupa, dan
imagonya. Perbedaan Culex dari jenis Aedes dan Anopheles yang paling jelas pada
fase telur yang diletakkan saling menempel satu sama lain. Dan juga ukuran
siphonnya yang lebih panjang dari Aedes. Selain itu daat dilihat juga perbedaan
pada tabung pernafasannya. (Safar, 2010).

Gambar 2.6. Perbedaan Nyamuk Culex Anopheles dan Aedes (Sumber: WHO, 1982)
 22

2.3.3. Habitat

Biasanya tempat perindukan yang disenangi nyamuk Culex adalah tempat

air yang kotor (polluted-water), ditumbuhi rumput-rumputan dan terlindungi dari
angin dan sedikit teduh. Seluruh tipe tempat atau wadah seperti genangan air di
tanah, selokan, parit yang airnya tidak mengalir, rawa-rawa atau tempat buatan
manusia seperti kaleng bekas, pecahan piring-canngkir, pot bunga, tong air,
palung bak, kolam renang yang tidak terpakai dan tempat minuman burung.
Nyamuk betina meletakkan telurnya di atas permukaan air sepanjang malam pada
malam ke-3 setelah menghisap darah. Pada musim panas bulan Juni sampai denga
awal musim hujan bulan September/Oktober akan terjadi peningkatan frekuensi
nisbi dari 14% sampai dengan 24% (Hill, 2013).

2.3.4. Perilaku

Nyamuk Culex sp biasa hidup di genangan air yang kotor dan keruh seperti
di got rumah ataupun genangan air kotor. Nyamuk jantan dan betina dewasa
biasanya memakan netar dari tumbuh-tumbuhan. Nektar akan menjadi sumber
energi pada saat nyamuk terbang. Selain itu nyamuk Culex sp betina juga
menghisap darah hewan dan manusia pada malam hari untuk pematanga telur.
Nyamuk Culex sp dikenal sebagai nocturnal mosquito yang sering masuk ke
dalam rumah-rumah terutama pada tengah malam. Dan pada siang hari akan
istirahat. Nyamuk ini bersifat endofagik (hidup berada di dalam rumah) juga
eksofagik (hidup berada di luar rumah). Culex sp lebih sering menghisap darah
manusia pada malam hari beberapa jam sebeluum matahari terbit dengan puncak
waktunya 01.00-02.00. setelah menghisap darah nyamuk betina akan istirahat
selama 2-3 hari lagi untu menunggu telurnya matang. Nyamuk-nyamuk itu lebih
sering berisitirahat di rumah sehingga disebut nyamuk rumahan (Brown, 1998).

2.4. Kerangka Berfikir

Untuk menghubungkan variabel penelitian maka dapat disusun kerangka

berfikir sebagai berikut :

Ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum)

sanctum)

Flavonoid: memengaruhi Saponin, Tanin: bersifat Eugenol: memengaruhi

p Pernafasan korosif dan memengaruhi pencernaan dan merusak
pencernaan sistem saraf
 23

Vektor Filariasis (Culex sp) larva nyamuk

Tingkat toksisitas

Kematian Larva populasi 50% (LC50-24)

Perilaku Larva

Gambar 2.7. Skema Kerangka Berfikir dalam Penelitian

Kerangka berfikir untuk menentukan tingkat toksisitas ekstrak daun
kemangi (Ocimum sanctum L.) terhadap larva nyamuk Culex sp instar I ini yaitu
ekstrak daun kemangi diketahui memiliki beberapa kandungan bahan yang
berpotensi sebagai larvasida yaitu flavonoid yang berpengaruh pada sistem
pernafasan, saponin yang mempengaruhi sistem pencernaan dan juga eugenol
yang dapat merusak sistem saraf dan pencernaan pada larva. Ekstrak yang
dihasilkan dari daun kemangi akan digunakan pada larva nyamuk Culex sp yang
dikenal sebagai vektor penyakit Filariasis. Dalam penelitian variabel yang dapat
dikendalikan atau ditentukan yaitu dosis ekstrak daun kemangi, kualitas air
sebagai media, volume air dan populasi lava dalam satu kelompok perlakuan.
Sedangkan variabel yang tidak dapat dikendalikan adalah kesehatan larva yang
dijadikan sebagai bahan uji. Setelah uji pendahuluan dan uji sesungguhnya
dilakukan sesuai dengan kelompok perlakuan yang sudah ditentukan, maka akan
ditemukan nilai konsentrasi yang paling optimal untuk mendapatkan presentasi
kematian 50% dari populasi yang ada. Pengamatan dilakukan dengan mengamati
perilaku larva sekali setiap jam dengan meliahat perubahan dalam keaktifan dan
kelincahan larva dalam bergerak.
 24

2.5. Hipotesis

Ha : Tingkat toksisitas LC50 dalam 24 jam ekstrak daun kemangi (Ocimum

sanctum) dapat memutus mata rantai pertumbuhan larva nyamuk Culex sp.
H0 : Tingkat toksisitas LC50 dalam 24 jam ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum) tidak dapat memutus mata rantai pertumbuhan larva nyamuk Culex sp
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian

Penelitian ini akan dilaksanakan di Laboratorium Biologi, Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Medan pada bulan
Februari-Maret 2021.

3.2. Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini digunakan merupakan penelitian eksperimental dengan

rancangan sederhana (The Post Test only Control Group Design) dan rancangan
acak lengkap (RAL) yang bertujuan untuk mengetahui tingkat toksisitas LC 50-24
ekstrak daun kemangi sebagai biolarvasida terhadap larva nyamuk Culex sp.
Dimana digunakan 5 perlakuan pada uji toksisitas letal dan 6 perlakuan pada uji
toksisitas subletal.

3.3. Populasi dan Sampel

3.3.1. Populasi
Populasi yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah nyamuk Culex sp
dan stadium nyamuk yang dipakai pada penelitian ini adalah stadium larva instar
1 yang diperoleh dengan menetaskan telur Culex sp yang didapat dari genangan
air dengan kondisi cukup keruh dan kotor di sekitaran Pancing, Medan Tembung
dan Perjuangan, Sumatera utara.
3.3.2. Sampel
Besar pengambilan sampel pada penelitian ini berdasarkan standar World
Health Orgnitatiton Guidelines For Effacacy Testing of Household Insecticide
Products, untuk penelitian laboratorium pada sampel nyamuk adalah 10 ekor
untuk tiap perlakuan dan dilakukan tiga kali pengulangan (WHO, 2009). Sampel
pada penelitian ini terdiri dari 6 kelompok perlakuan dan dibagi ke dalam lima
kelompok perlakukan dengan satu kelompok kontrol. Dan tiap kelompok
perlakukan berjumlah 10 ekor larva dengan tiga kali pengulangan pada uji
sesungguhnya

24
 25

3.4. Desain dan Variabel Penelitian

3.4.1. Desain Penelitian

Adapun desain penelitian tingkat toksisitas LC50-24 ekstrak daun kemangi

sebagai biolarvasida terhadap nyamuk Culex sp dapat dilihat di bawah ini :
 26

3.4.1.1. Uji Pendahuluan

10 10 10 10 10 10
Larva Larva Larva Larva Larva Larva
 27

24 jam
Uji analisisKelom
probit untukKelom
menentukanKelom
berapa konsentrasi
Kelom Kelom ekstrakKelom
pok daun kemangi
pok 2 yangpokakan dipakai
pok 4 pada pok
penelitian uji
1 3 5 pok 6
sesungguhnya
Kontrol Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak
0% daun daun daun daun daun
(hanya kemangi kemangi kemangi kemangi kemangi
aquades) 0,5% 1,5% 2,5% 3,5% 4,5%

Σ Larva Σ Larva Σ Larva Σ Larva Σ Larva

Σ Larva
Mati Mati Mati Mati Mati
(24jam)
(24jam) (24jam) (24jam) (24jam) (24jam)

Gambar 3.1. Skema Prosedur Uji Pendahuluan

 28

3.1.1.2. Uji Sesungguhnya

10 10 10 10 10 10
Larva Larva Larva Larva Larva Larva
 29

Kelom Kelom Kelom Kelom Kelom Kelom

pok 1 pok 2 pok 3 pok 4 pok 5 pok 6
Kontrol Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak
0% daun daun daun daun daun
(hanya kemangi kemangi kemangi kemangi kemangi
aquades) X% X% X% X% X%

Σ Larva Σ Larva Σ Larva Σ Larva Σ Larva Σ Larva

3 kali pengulangan
Dalam mati Mati Mati Mati Mati
24 jam (24jam) (24jam) (24jam) (24jam) (24jam)
One Way ANOVA Uji Analisis Probit

LSD
*Catatan: X% = konsentrasi yang didapatkan dari analisis probit uji pendahuluan
Gambar 3.2 Skema Prosedur Uji Sesungguhnya

3.4.2. Variabel Penelitian

3.4.2.1. Variabel Bebas

variabel bebas adalah variabel yang mempengaruhi atau menjadi sebab
perubahannya atau timbulnya variabel dependen (terikat) (Sugiyono, 2010).
Variabel bebas pada penelitian ini adalah berbagai nilai konsentrasi ekstrak daun
kemangi (Ocimum sanctum) yang ditentukan yaitu dengan konsentrasi 0,5%,
1,5%, 2,5%, 3,5%, dan 4,5% pada uji pendahuluan dan konsentrasi uji yang
sesungguhnya yang akan ditentukan berdasarkan hasil analisis uji probit pada uji
pendahuluan.
3.4.2.2. Variabel Terikat
Variabel terikat merupakan variabel yang dipengaruhi atau menjadi akibat,
karena adanya variabel bebas (Sugiyono, 2010). Variabel terikat pada penelitian
ini adalah kematian larva nyamuk Culex sp yang terjadi akibat ekstrak daun
 30

kemangi pada konsentrasi yang berbeda untuk menentukan nilai LC 50-24. Dan
kematian larva ditandai dengan tidak adanya respon gerakan larva pada saat
disentuh.
3.4.2.3. Variabel Terkendali
Variabel terkendali pada penelitian ini adalah jumlah larva nyamuk Culex
sp instar I dalam satu kelompok perlakuan, konsentrasi ekstrak daun kemangi,
volume air, kualitas air dan suhu.

3.5. Teknik Pengumpulan Data

3.7.2. Jenis dan Sumber Data

Jenis data yang diperoleh dalam penelitian ini adalah kuantitatif. Data
kuantitatif adalah data yang diperoleh berupa angka-angka yang berasal dari hasil
berupa konsentrasi ekstrak daun kemangi yang tepat untuk membunuh 50% larva
nyamuk Culex sp instar I dari tiap kelompok perlakuan dalam waktu 24 jam (nilai
LC50-24).

3.7.3. Metode Pengambilan Data

Metode yang digunakan untuk pengambilan data dalam penelitian ini

adalah penelitian eksperimental dengan menggunakan metode rancangan acak
lengkap (RAL). Metode rancangan acak lengkap merupakan rancangan percobaan
yang diterapkan jika ingin meperlajari perlakuan menggunakan satuan percobaan
(Vincent, 1991). Percobaan menggunakan enam konsentrasi pada uji pendahuluan
yaitu konsentrasi 0% (sebagai kontrol), 0,5%, 1,5%, 2,5%, 3,5% dan 4,5% dan
konsentrasi yang digunakan pada uji yang sesungguhnya akan ditentukan dari
hasil uji pendahuluan yang dilakukan dan dianalisis dengan probit.

3.6. Instrumen Penelitian

3.6.1. Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini disajikan pada tabel berikut ini :
Tabel 3.1. Alat yang digunakan dalam penelitian
No Nama Alat Spesifikasi Fungsi
1 Cawan Ukuran medium Sebagai wadah untuk
Petridish (100x200mm) Terbuat mengamati jentik pada tiap
 31

dari kaca berjumlah 6

kelompok perlakuan
buah
Ukuran 100 ml terbuat
Sebagai wadah ukur aquades
2 Gelas ukur dari kaca dan berjumlah 2
dan ekstrak daun kemangi
buah
Sebagai alat untuk
Ukuran 10 ml terbuat dari
3 Pipet ukur mengukur volume ekstrak
kaca berjumlah 1 buah
daun kemangi
Terbuat dari kaca Sebagai alat pengaduk
Batang
4 berukuran 15 cm dan larutan ekstrak daun
Pengaduk
berjumlah 1 buah kemangi dan aquades
Terbuat dari plastik dan Digunakan dalam
5 Lup kaca dengan ukuran 6 cm mengamati morfologi larva
merk Joy-Art Culex sp
Terbuat dari besi dengan
Tempat untuk mengeringkan
6 Oven merk Memmert UN 55
daun kemangi
53L
Alat untuk menghaluskan
7 Blender Merk Miyako BL-152 GF
daun kemangi kering
Rotary Evaporator merek
Rotary Alat untuk membuat ekstrak
8 B-ONE model RE 1000
Evaporator etanol daun kemangi
VN
Sebagai penanda atau
Ukuran 3,5x3,7 cm
9 Kertas Label memberi nama pada tiap
berjumlah
kelompok perlakuan
Pulpen dengan merk
Sebagai alat tulis dalam
Dong-A fine tech ukuran
10 Alat Tulis mencatat hasil pengamatan
mata pupen 0,3 mm
dan perhitungan konsentrasi
berjumlah 1 buah
Sebagai alat dalam
Merk Lenovo G40
menggunakan aplikasi SPSS
11 Laptop berwarna hitam Berjumlah
20 dan pengolahan data hasil
1 buah
penelitian
Menyaring hasil ekstrak dan
Berukuran 10 cm
12 Kertas saring memisahkan dari simplisia
berbentuk lingkaran
setelah perendaman
Merk Xiaomi dengan tipe Mendokumentasikan
13 Handphone
redmi 5A penelitian
Patahan dari sapu lidi Menyentuh larva untuk
14 Lidi
ukuran 8-10 cm mengetahui respon hidup
Mengamati morfologi telur
15 Mikroskop Mikroskop binokuler
dan larva nyamuk Culex sp
3.6.2. Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini disajikan dalam tabel berikut :
Tabel 3.2. Bahan yang digunakan dalam penelitian
 32

No Nama Bahan Spesifikasi Fungsi

Daun Daun kemangi yang Bahan untuk membuat
Kemangi digunakan berwarna hijau esktraksi dan diberikan pada
1 (Ocimum dan terdapat pada duduk hewan uji sebagi larvasida
sanctum) daun ke 3 sampai ke 6, alami
berjumlah 5 kg
Etanol Etanol dengan konsentrasi Pelarut ekstrak daun
2
96% kemangi (Ocimum sanctum)
Aquades Air suling dengan volume Sebagai media penelitian
3 2000 ml
CMC Carbomethyl cellucose Sebagai pengental dan
4 sebanyak 5 gram pelarut pasta kemangi
 33

3.7. Prosedur Penelitian

3.7.1. Pembuatan Ekstrak Daun Kemangi

Memilih dan membersihkan

daun kemangi

Mengeringkan daun kemangi

menghaluskan dan
menimbang daun kemangi

merendam serbuk daun

kemangi dlam 96% etanol
selama 72 jam

menyaring ekstrak daun

kemangi

ekstrak daun kemangi

diuapkan dengan rotary
evaporator pada suhu 30-40oC

Ekstrak daun kemangi siap

Gambar 3.3. Skema Pembuatan Ekstrak Daun Kemangi

Daun kemangi dipilih daun yang tidak terlalu muda dan tidak terlalu tua
yaitu yang berada pada duduk daun ke 3 sampai ke 6 karena daun yang tidak
terlalu muda dan tidak terlalu tua memiliki vakuola yang dapat menyimpan hasil
 34

metabolit sekunder yang lebih banyak dari daun yang lebih muda atau lebih tua.
Kemudian daun kemangi dicuci bersih dengan air mengalir untuk menghilangkan
kotoran yang menempel. Daun kemangi selanjutkan dikeringkan dengan
menggunakan oven untuk memperoleh simplisia.
Proses pembuatan ekstrak daun Kemangi dilakukan dengan metode
maserasi. Simplisia daun kemangi yang dihasilkan ditimbang terlebih dahulu
sebanyak 200 gram. Simplisia sebanyak 200 gram dimasukkan ke dalam toples
kaca dan dilarutkan menggunakan etanol 96% dengan perbandingan 1:10 (100
gram dilarutkan dengan 1000 ml etanol) setelah itu diaduk dengan batang
pengaduk. Selama proses perendaman dilakukan pengadukan dengan batang
pengaduk setiap 8 jam sekali. Proses perendaman dilakukan selama 72 jam tanpa
paparan sinar matahari. Selanjutnya hasil berupa filtrat diambil dengan cara
penyaringan dan larutan di maserasi kembali dengan cara yang sama sampai
diperoleh larutan yang jernih. Kemudian ekstrak diuapkan menggunakan rotary
evaporator pada suhu 40oC hingga diperoleh ekstrak yang kental ( 20 ml).
Setelah itu untuk memperoleh ekstrak dalam bentuk pasta. Hasil ekstrak yang
sudah diuapkan dipidahkan ke dalam wadah dan dimasukkan ke dalam oven
dengan suhu 40oC dan ditunggu hingga hasil berbentuk pasta.
3.7.2. Preparasi Sampel Larva
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah larva nyamuk Culex
sp pada tahap instar I yang diperoleh dengan mencari telur nyamuk Culex sp di
parit dan selokan dengan air yang tenang di sekitar perumahan medan perjuangan.
Dan memasang perangkap dengan memancing agar nyamuk bertelur didalam
suatu wadah dengan cara melarutkan air cucian beras, ragih kue dengan air dan
meletakkan wadah tersebut tempat yang terdapat banyak nyamuk di sekitar
pemukiman warga di pancing, Medan perjuangan. Setelah itu mengamati apakah
telur dalam wadah tersebut termasuk jenis Culex sp. Setelah itu menunggu 1-2
hari hingga telur menetas menjadi larva Culex sp instar I. Setelah itu sebelum
dilakukan penelitian uji pendahuluan dan uji sesungguhnya larva yang diperoleh
tersebut akan diaklimatsasi di dalam aquades selama 1 jam.
 35

3.7.3. Pembuatan Larutan Perlakuan

Pada tahap ini selama pembuatan berbagai macam konsentrasi yang
diperlukan dapat digunakan rumus V1 . M1 = V2 . M2
Keterangan : V1 = Volume Awal V2 = Volume Akhir (Sesudah diencerkan)
M1 = Konsentrasi Awal M2 = Konsentrasi sesudah di encerkan.
Contoh : Konsentrasi ekstrak daun kemangi 4,5% didapatkan dengan cara
melarutkan 47,75 ml aquades dengan ekstrak daun kemangi 2,25 ml (100%)
sehingga volume akhir menjadi 50 ml
V1 . M1 = V2 . M2
V1 . 5% = 50 ml . 4,5%
V1 = 45 ml
Jadi pada K1 dengan konsentrasi 0% (sebagai kontrol) hanya terdiri dari
aquades. Karena hasil ekstrak yang diperoleh mengandung minyak sehingga
ekstrak sulit larut dalam aquade, maka akan ditambahkan CMC (Cerboxy Methyl
cellulosa) 0,5% untuk tiap konsentrasi. Tiap pembuatan konsentrasi diawali
dengan melarutkan 0,5 gram CMC dalam 100 mL aquades hangat (CMC 0,5%).
Selanjutnya ekstrak dengan konsentrasi 5% dibuat dengan cara menimbang 5
gram ekstrak kemudian ditmbahkan larutan CMC 0,5% sedikit demi sedikit.
Untuk mempermudah menghomogenkan larutan sambil diaduk dengan batang
pengaduk. Pada perlakuan K2 dengan konsentrasi 0,5% terdiri dari 5 ml ekstrak
daun kemangi (5%) ditambahkan 45 ml aquades, perlakuan K3 yaitu 1,5% yang
didapatkan dengan melarutkan 15 ml ekstrak daun kemangi (5%) dan 35 ml
aquades, perlakuan K4 dengan konsentrasi 2,5% didapat dengan cara melarutkan
25 ml aquades dengan 25 ml ekstrak daun kemangi (0,5%), sedangkan pada
perlakuan K5 dengan konsentrasi 3,5% didapatkan dengan melarutkan 15 ml
aquades dan 35 ml ekstrak daun kemangi (5%). Dan perlakuan K6 dengan
konsentrasi 4,5% didapatkan dengan melarutkan 45 ml ekstrak daun kemangi
(5%) dan 5 ml aquades dan konsentrasi yang digunakan pada uji yang
sesungguhnya akan ditentukan dari hasil uji pendahuluan yang dilakukan dan
dianalisis dengan probit.
 36

3.7.4. Penentuan Konsentrasi

Penentuan konsentrasi toksisitas dilakukan dengan menentukan nilai
ambang atas dan ambang bawah. Penentuan konsentrasi dimulai dengan
mempersiapkan alat dan bahan uji ambang batas dan berbagai konsentrasi
perlakuan ekstrak daun kemangi yang dilarutkan dengan air pada wadah tempat
larva. Setelah itu akan diamati, larva yang mati dalam waktu 24 jam sampai
mendapat konsentrasi ambang batas. Konsentrasi ambang batas atas yaitu
konsentrasi yang mampu membunuh 50% larva nyamuk dalam waktu 24 jam dan
konsentrasi ambang batas bawah dimana kematian larva nyamuk Culex sp 0%
dengan tujuan untuk menentukan nilai LC50.
3.7.5. Uji LC50 24 Jam
Uji LC50 24 jam yaitu uji hayati yang dilakukan untuk menentukan
konsentrasi yang menyebabkan kematian sebanyak 50% dari organisme uji dalam
waktu 24 jam. Dosis LC50 diperoleh dari uji ambang batas yang berfungsi
menentukan konsentrasi perlakuan pada uji toksisitas subletal. Uji toksisitas
subletal dilakukan dengan menggunaan rancangan acak lengkap (RAL) yang
terdiri dari 6 perlakuan berbeda dan 3 kali pengulangan. Konsentrasi perlakuan uji
toksisitas subletal ditentukan dengan menggunakan perhitungan busevine (1971)
yaitu :
N a
log ( )
n
=K log
n ()
… … . (1)

a b c d e
= = = = … ..(2)
n a b c d
Keterangan :
N = Konsentrasi ambang atas (ml/L)
n = Konsentrasi ambang bawah (ml/L)
K = Jumlah interval konsentrasi
a,b,c,d,e merupakan konsentrasi yang diuji dengan a sebagai konsentrasi
terkecil dengan menggunakan rumus 1 dan 2 maka didapatkan uji toksisitas sub
letal (LC50 24 jam) sebagai berikut :
K0 = kontrol (tanpa penambahan ekstrak daun kemangi)
K1 = konsentrasi ekstrak daun kemangi a
 37

K2 = Konsentrasi ekstrak daun kemangi b

K3 = Konsentrasi ekstrak daun kemangi c
K4 = konsentrasi ekstrak daun kemangi d
K5 = Konsentrasi ekstrak daun kemangi e
Pada uji toksisitas dilakukan dalam tiga tahapan yaitu uji pendahuluan, uji
sesungguhnya dan pengulangan. Pada uji pendahuluan ini dilakukan untuk
menentukan nilai ambang batas konsentrasi ekstrak daun kemangi yang akan
digunakan dalam penelitian uji sesungguhnya. Pada tahap uji pendahuluan ini
dilakukan 6 kelompok dengan K0 sebagai kontrol (hanya aquades), dan 5
kelompok perlakuan dengan konsentrasi yang berbeda-beda. Pada uji ini ekstrak
daun kemangi dengan konsentrasi 100% akan diencerkan dulu sesuai rumus
hingga memiliki konsentrasi 5% supaya mudah diambil menggunakan pipet ukur
pada saat uji pendahuluan dan uji sesungguhnya. Selanjutnya ekstrak daun
kemangi 5% diambil dengan pipet ukur dengan volume sesuai konsentrasi yang
telah ditentukan lalu dimasukkan ke gelas ukur kemudian ditambahkan aquades
hingga volume 50 ml. Selanjutnya setelah hasil data uji pendahuluan yang
didapatkan, kemudian dianalisis dengan menggunakan analisis probit untuk
menentukan nilai konsentrasi ekstrak daun kemangi masing-masing kelompok
yang akan digunakan dalam uji sesungguhnya. Setelah itu pada uji sesungguh nya
akan dilakukan. setelah itu dilakukan uji pengulangan sebanyak 3 kali sesuai
dengan standar WHO.
3.7.6. Data Mortalitas
Pengamatan mortalitas dilakukan pada jam ke-4, 8, 12, 16, 20 dan 24.
Penentuan mortalitas dilakukan dengan cara menghitung jumlah larva nyamuk
pada awal pemeliharaan lalu dikurangi jumlah larva nyamuk akhir pada akhir
pemeliharaan kemudian dibagikan dengan jumlah larva nyamuk pada awal
pemeliharaan yaitu dengan rumus.
No−Nt
M= × 100 %
No
Keterangan :
M = mortalitas (%)
Nt = Jumlah larva nyamuk pada akhir pemeliharaan (ekor)
 38

No = jumlah larva nyamuk pada awal pemeliharaan (ekor)

3.8. Analisis Data
Data yang diperoleh dari penelitian ini dianalisis secara statistik
menggunakan :
1. Analisis varians (Analysis of Variance/ ANOVA)
Dilakukan pengujian untuk mengetahui apakah ada perbedaan jumlah
kematian larva nyamuk Anopheles sp antar kelompok uji.
2. Least Significance Difference (LSD)
Dilanjutkan dengan pengujian pengujian LSD untuk mengetahui pasangan
nilai mean yang perbedaannya signifikan
3. Dianalisis seberapa besar tingkat tosisitas ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum) terhadap larva nyamuk Anopheles sp yang dinyatakan dengan
LC (Lethal Concentration) yaitu LC50 (Lethal Concentration 50%) dengan
uji probit. Analisis data tersebut akan menggunakan program SPSS 21.

3.9. Jadwal Penelitian

Jadwal yang akan dilakukan pada penelitian ini disajikan pada tabel
berikut:
Tabel 3.3. Jadwal Penelitian
Bulan/Minggu Ke-
No Kegiatan Penelitian Februari Maret
1 2 3 4 1 2 3 4
Persiapan Penelitian
- Pembuatan ekstrak daun kemangi X x
1 x
- Pengumpulan larva instar I
x
Anopheles sp dan aklimatisasi
Penelitian
- Pembuatan larutan perlakuan x
x
- Uji pendahuluan
x
- Analisis probit uji pendahuluam x
2 x x
- Uji Sesungguhnya
x
- Uji Pengulangan x
- Pengolahan dan analisis data
Interpretasi data
 DAFTAR PUSTAKA

Anindita, Mutiara H. 2016. Filariasis : Pencegahan Terait Faktor Risiko. Jurnal

Kesehatan UNILA. Vol. 1 No. 2; 393-398
Annes, A.M. 2008. Larvicidal Activity of Ocimum santum Linn. (Labiatae)
Against Aedes aegypti (L.) and Culex quinquefasciatus (Say). Parasitol
Res. 103 :1451-1453
Aradilla A.S. 2009. Uji Efektifitas Larvasida Ekstrak Ethanol Daun Mimba
(Azadirachta indica) terhadap Larva Nyamuk Anopheles sp. Skirpsi.
Semarang : Universitas Diponegoro
Astuti, E.P., A. Riyandhi, dan N.R. Ahmadi. 2011. Efektifitas Minyak Jarak Pagar
Sebagai Larvasida, Anti-Oviposisi dan Ovisida Terhadap Larva Nyamuk
Aedes aegypti. Buletin Littro Loka Litbangkes PPBB. 22(1):44-53
Beach, Vero. 2016. Culex salinarus. http://fmel.ifas.ufl.edu/fmel---mosquito-
key/genera-and-species/genus-culex/culex-salinarus/. (30 Maret 2021)
Bhattacharya, A. et all. 2014. Evaluation of Some Anti Oxidativ Constituent of
Three Species of Ocimum. International Journal of Life Sciences. Vol 8 (5)
: 14-17
Brown W.H., Gandahusada, Illahude, Pribadi, W. 1998. Nyamuk Vektor Penyakit:
Parasitologi Kedokteran. Edisi III, 220, Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia, Jakarta
Cania, B.E., Setyanungrum, E. 2013. Uji Efektifitas Larvasida Ekstrak Daun
Legundi (Vitex trifolia) Terhadap Larva Aedes aegypti. Medical Journal of
Lampung University. Vol 2(4):52-60
Chairunnisa. 2019. Uji Aktifitas Antibakteri Daun Sembung Rambat (Plimeria
acuminata W.T. Ait) terhadap Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas
aeruginosa. Skripsi. Farmasi : STIK Siti Khadijah Palembang
Damar, T. 2008. Mata Kuliah Pengendalian Vektor Nomenklatur, klasifikasi
dan Toxonomi Nyamuk. Semarang: Pasca Sarjana Undip
Depkes RI. 2001, Pedoman Ekologi dan Aspek Peilaku Vektor. Jakarta: Direktorat
Jendral Pemberantasan Penyakit Menular dan Penyehatan Lingkungan
Pemukiman (DITJEN PPM dan PLP)

36
 37

Dinata. 2008. Basmi Lalat Dengan Jeruk Manis. Semarang Retrived from
http://ardastrudentsblog.undip.ac.id/2008
Farida. I.F. 2006. Pengeruh Granul Ekstrak daun Babadotan dalam Menghambat
Pertumbuhan Larva Nyamuk Aedes aegypti L. Karya Ilmiah. Malang:
Universitas Brawijaya
Gani, Yogi, Ismail. 2011. Efek Residu Bacillus thuringinensisi israelensis
terhadap Aedes albopictus dan Culex quinquiquefasciatus Di Dalam Bak
Fiber Glass, Kerami, dan Semen. Depok; Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia.
Ismatullah, A., Kurniawan B., Wintoko R., Setianingrum. 2014. Uji Efektifiitas
Larvasida Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) Terhadap
Larva Aedes agypti Instar III. Jurnal Medical Faculty of Lampung
University
Dhale, D., Birari, A., Dhulgande, S., 2012. Preliminary Screening of
Antibacterial and Phytochemical Studies of Ocimum Americanum Linn.
Journal of Ecobiotechnology, 2, pp. 11-13.
Djojosumarto, P. 2008. Panduan Lengkap Pestisida & Aplikasinya. Agromedia ;
Jakarta
Duke, J. Phytochemical and Ethnobotanical Databases (Ocimum sanctum).
http://sun.ars-grin.gov:8080/npgspub/xsql/duke/plantdisp.xsql?taxon=2021
(28 september 2020)
Ginting, S. 2004. Pengaruh Lama Penyulingan Terhadap Rendemen dan Mutu
Minyak Atsiri Daun Sereh Wangi. Skripsi. Medan: Universitas Sumatera
Utara.
Gunarto. 2011. Khasiat Tanaman Kemangi. http://artikel.us/art05-06.html
Dipublikasikan (21 September 2020)
Gunawan, E. 2011. Efek Potensiasi Larvasida Kombinasi Ekstrak Daun Kemangi
(Ocimum sanctum L.) dan Biji Jarak (Ricinus communis L.) Terhadap
Aedes aegypti. Skripsi.Surakarta: Universitas Sebelas Maret
Harison K. 2007. Eugenol:cloves. http://3dchem.com/molecules.asp?ID=333. (30
Oktober 2020)
 38

Hasan, H. 2016. Pengaruh Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.)

terhadap Daya Tetas Telur Ikan Lele Dumbo (Clarias gariepinus) yang
Diinfeksi Jamur Saprolegnia sp. Jurnal Ruaya. Vol 4 (1) Larva Aedes
aegupti Intisar III. Skripsi. Lampung : Fakultas Kedokteran UNILA
Hill, S., and Connely, R. 2013. Culex quinquefasciatus Say. http://entnemdept.ufl.
Edu/creatures/aquatic/southern_house_mosquito.htm
Hoedojo, R. 2000. Morfologi Daur Hidup dan Perilaku Nyamuk dalam
Gandahusada, S., Ilahude, H.D., Pribadi, W, Parasitologi Kedokteran.
Edisi III, 220, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta
Juwitawati V.D. 2007. Uji Toksisitas Minya Atsiri Dari Daun Kemangi (Ocimim
sanctum L.) terhadap Larva Aedes aegypti, KTI, Jurusan Pendidikan
Dokter Fakultas Kedokteran. Universitas Gajah Mada
Kadarohman, Lailatul K.L., Eko R. 2010. Efektivitas Biolarvasida Ekstrak Etanol
Limbah Penyulingan Minyak Akar Wangi (Vetiveria zizanoides) terhadap
Larva Nyamuk Aedes aegypti, Culex sp, dan Anopheles sundaicus, Jurnal
Sains dan Teknologi Kimia, 1 (1), 59-65
Kardinan, A. 2003. Tanaman Pengusir dan Pembasmi Nyamuk, Jakarta;
Agromedia
KemenKes. 2017. Pedoman Pengumpulan Data Vektor (Nyamuk) di Lapangan
Riset Khusus Vektor dan Resevoir Penyakit di Indonesia. Jakarta: Badan
Penelitian Pengembangan dan Kesehatan Kementrian Kesehatan RI
Kementrian Kesehatan. 2019. Profil Kesehatan Indonesia 2018. Jakarta :
Kementrian Kesehatan
Kurniasih. 2014. Khasiat Dahsyat Kemangi. Yogyakarta: Pustaka Baru Press
Kusuma, 2010. Efek Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum sanctum) Terhadap
Kerusakan Hepatosit Menci Akibat Minyak Sawit Dengan Pemanasan
Berulang. Skripsi. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.
Surakarta
Larasati D.A., Apriliana E. 2016. Efek Potensial Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum
basilicum L.) sebagai Pemanfaatan Hand Sanitizer. Lampung ; Fakultas
Kedoteran. 5(5)
 39

Lestari, E. 2010. 2010. Efektifitas Ekstrak Daun Kemangi Terhadap Larva Instar
III Anopheles maculatus, Skripsi, Jurusan Pendidikan Dokter, Fakultas
Kedokteran; Universitas Islam Indonesia
Loomis, T.A. 1978. Toksikologi Dasar. Semarang; IKIP Semarang Press
Maylia, Novita. 2014. Daun Kemangi (Ocimum annum) Sebagai Bahan Alternatif
Pembuatan Hand Sanitizer. 9(2): 136-142
Novizan, 2002. Membuat dan Memanfaatan Pestisida Ramah Lingkungan.
Jakarta ; Agromedia Pustaka
Manimegalai K., Sukaya S. 2014. Biology of the Filarial Vector, Culex
quinquefasciatuss (Diptera:Culicidae). Int. Journal .Curr. Microbiol. App.
Sci 3(4); 73-81
Prianto J., Tjahaya., Darwanto. 2008. Atlas Parasitologi Kedokteran. Jakarta :
Gramedia Pustaka Utama
Rahayu, M., dan Solihat, M.F. 2018. Toksikologi Klinik. Jakarta: Kementrian
Kesehatan Republik Indonesia
Roomoser, W.S., Stoffolano, J.G. 1998. The Science of Entomology (Fourth
Edition). McGraww Hill Company; Singapore
Safar, R. 2010. Parasitologi Kedokteran Protozoologi, Helmintologi, Entomologi.
Bandung: Yrama Widya
Safwan. 2016. Pengaruh Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum sanctum L.) Terhadap
Motilitas dan Konsetrasi Spermatozoa Mencit Jantan (Mus musculus).
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(2); 173-181.
Sarma, D. Sai Koteswar., Babu, A. 2011. Pharmacognostic and phytochemical
studies of Ocimum americanum. Journal of Chemical and Pharmaceutical
Research, 3(3)
Shashi, B.M., & K.N., Ashooke. 1991. Tripenoid Saponons Discovered between
1987 and 1989. Phytochemistry, 30 (5): 57-58
Soekirno, Mardjan, Ariati, Yusniar, Mardiana. 2006. Jenis-jenis Nyamuk yang
Ditemukan Di Kabupaten Sumbawa, Provinsi Nusa Tenggara Barat;
Jurnal Ekologi Kesehatan. Vol 5 No. 1; 356-360
Sopianti, D.S., Dede, W.S. 2018. Skrining Fitokimia dan Profil KLT Metabolit
Sekunder dari Daun Ruku-ruku (Ocimum tenulflorum L.) dan Daun
 40

Kemangi (Ocimum sanctum L.). Jurnal Farmasi dan Kesehatan. 8(1):44-

52
Stephnie H. Dan Roxanne C. 2013. Southern House Mosquito Culex
quinquefasciatus Say. US: Institute of Food and Agricultural Sciences,
University oh Florida.
Sudarsono, Gunawan, D., Wahyuono, S., Donatus, I.A., Purnomo. 2002.
Tumbuhan Obat II (Hasil Penelitian, Sifat-sifat, dan Penggunaan).
Yogyakarta: Pusat Studi Tradisional Universitas Gajah Mada
Sugiyono. 2010. Metode Penelitian Pendidikan. Jakarta: Alfabeta
Suwito, A. 2008. Nyamuk (Diptera: Culicidae) Taman Nasional Boganinani
Warta Bone, Sulawesi Utara; Keragaman, Status, dan Habitatnya Bidang
Zoologi, Pusat Penelitian Biologi LIPI http://digilib.biologi.lipi.go.id/zoo
%20indonesia/files/zi1720082734.pdf
Taher, D. M., dan Papuangan, N. 2015. Potensi Cengkeh (Syzygium aromaticum)
varietas Afo sebagai Larvasida Alami Nyamuk Aedes aegypti,
Biodiversitas Indonesia, 1(6), 1478-1482
Tanbiyaskur., Yulisman, Danang Y. 2019 Uji LC 50 Ekstrak Akar Tuba Dan
Pengaruhnya Terhadap Status Kesehatan Ikan Nila (Oreochromis
niloticus), Journal of Aquaculture and Fish Health, 8(3), 129-138
Verma, 2016. Chemical Constituents and Pharmacological Action of Ocimum
sanctum (Indian holy Basil-Tulsi). Journal of Phytopharmacoogy. 5(5) :
205-207
Vincent, Gasprez, 1991, Metode Perancangan Percobaan, Bandung: CV. Armico
WHO. 1982. Manual On Envirinmental Management For Mosquito Control With
Special Emphasis on Malaria Vectors. World Health Organization:
Geneva.
WHO. 2019. Lymphatic Filariasis. Diakses pada situs https://www.who.intnews-
room/fact-sheets/detail/lymphatic-filariasis tanggal 25 Juli 2019
Wijayani, L.A., Isti’anah S. 2014. Efek Larvasidal Ekstrak Etanol Daun Kemangi
(Ocimum sanctum Linn) Terhadap Larva Instar III Culex
quinquwfasciatus. Jurna Biomedika. Vol 6, No.2; 5-7
 41

Wirakusumah Emma S., 2007. Jus Buah & Sayuran untuk Menjaga Kesehatan &
Kebugaran Anda, Depok: Penebar Swadaya
Wirasuta, I.M.A.G., dan Rasmaya, N. 2007. Toksikologi Umum. Denpasar:
UDAYANA Press
Yulianto, dan Nurul, A. 2017. TOKSIKOLOGI LINGKUNGAN. Jakarta:
KEMENKES RI
Zainal, B., Aini, F., Lestari, W. 2016. Aktivitas Antifungi Ekstrak Daun Kemangi
(Ocinum americanum L.) Terhadap Fungi F. oxysorum Schlecht. Jurnal
Biota, 2(1);99-103
Zulkarnain. 2004. Culex spesies di Kecamatan Sako Kota Palembang; Jurnal
Kedokteran dan Kesehatan, Vol; 36, No 4
Zumrotus S. 2009. Ancaman Dari Nyamuk Culex sp yang Terabaikan. Serba serbi
Vektor. BALABA. Vol. 5, No. 01; 21-23