PROPOSAL PENELITIAN

EFIKASI EKSTRAK ETANOL DAUN PEPAYA

(Carica papaya L.) TERHADAP MORTALITAS LARVA
INSTAR III NYAMUK Aedes aegypti

Oleh

CHOIRUL OKTAVIAN SETIYADIN NAYIRON

NIM 061911133031

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2023
 HALAMAN PENGESAHAN

EFIKASI EKSTRAK ETANOL DAUN PEPAYA (Carica papaya L.)

TERHADAP MORTALITAS LARVA INSTAR III NYAMUK Aedes aegypti

Proposal penelitian
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
pada
Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga

Oleh

CHOIRUL OKTAVIAN SETIYADIN NAYIRON

NIM. 061911133031

Menyetujui
Komisi Pembimbing,

(Prof. Dr. Poedji Hastutik, drh., M.Si) (Prof. Dr. Dewa Ketut Meles, drh., M. Kes.)
Pembimbing utama Pembimbing serta

ii
 DAFTAR ISI

DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. v

SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG ............................................................... vi
BAB 1 PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ......................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .................................................................................... 4
1.3 Landasan Teori ......................................................................................... 4
1.4 Tujuan Penelitian ...................................................................................... 6
1.5 Manfaat Penelitian .................................................................................... 6
1.5.1 Manfaat teoritis ................................................................................. 6
1.5.2 Manfaat praktis.................................................................................. 6
1.6 Hipotesis ................................................................................................... 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 7
2.1 Nyamuk Aedes aegypti ............................................................................. 7
2.1.1 Klasifikasi nyamuk Ae.aegypti.......................................................... 7
2.1.2 Morfologi nyamuk Ae. aegypti ......................................................... 7
2.1.3 Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti ...................................................... 9
2.2 Buah Pepaya ........................................................................................... 15
2.2.1 Klasifikasi Pepaya (Carica papaya L.) ........................................... 15
2.2.2 Morfologi pepaya ............................................................................ 16
2.2.3 Kandungan kimia daun pepaya ....................................................... 17
2.3 Ekstraksi ................................................................................................. 20
BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 22
3.1 Rancangan Penelitian ............................................................................. 22
3.2 Sampel dan Besar Sampel ...................................................................... 22
3.3 Variabel Penelitian ................................................................................. 23
3.3.1 Variabel bebas ................................................................................. 23
3.3.2 Variabel terikat ................................................................................ 23
3.3.3 Variabel Kontrol.............................................................................. 24
3.4 Definisi Operasional Variabel ................................................................ 24
3.5 Tempat dan Waktu Penelitian ................................................................ 25

iii
 3.6 Bahan dan Materi Penelitian .................................................................. 25
3.6.1 Bahan penelitian .............................................................................. 25
3.6.2 Alat penelitian ................................................................................. 25
3.7 Prosedur Penelitian ................................................................................. 26
3.7.1 Pembuatan simplisia ....................................................................... 26
3.7.2 Pembuatan ekstrak daun pepaya (Carica papaya L.) ..................... 26
3.7.3 Persiapan dan pengelompokkan larva Ae. aegypti .......................... 26
3.7.4 Pembuatan media ............................................................................ 27
3.7.5 Uji aktivitas ekstrak......................................................................... 27
3.8 Analisis Data .......................................................................................... 28
3.9 Skema Alur Penelitian ............................................................................ 29
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 30

iv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Struktur kepala nyamuk Ae. aegypti ........................................ 8

Gambar 2.2 Morfologi Nyamuk Ae. aegypti ............................................... 9

Gambar 2.3 Siklus hidup Nyamuk Ae. aegypti .......................................... 10

Gambar 2.4 Telur Nyamuk Ae. aegypti ...................................................... 11

Gambar 2.5 Larva Nyamuk Ae. aegypti ..................................................... 13

Gambar 2.6 Pupa Nyamuk Ae. aegypti ...................................................... 14

Gambar 2.7 Nyamuk dewasa Ae. aegypti................................................... 15

Gambar 2.8 Pohon Buah Pepaya ................................................................ 17

Gambar 2.9 Struktur kimia Flavonoid ........................................................ 18

Gambar 2.10 Struktur kimia Alkaloid .......................................................... 19

Gambar 2.11 Struktur Kimia Tanin .............................................................. 20

v
 SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG

et al. = Et Alii

ppm = Part per Milion

rpm = Rotary per Minute

vi
 BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Penyakit yang sampai sekarang masih menjadi perhatian khusus adalah

penyakit Demam Berdarah Dengue (DBD). Demam berdarah dengue (DBD)

merupakan penyakit yang banyak ditemukan di sebagian besar wilayah tropis dan

subtropis, terutama Asia Tenggara, Amerika Tengah, Amerika dan Karibia

(Holomoan dan Suwandi, 2017). Di Indonesia demam berdarah dengue muncul

sebagai Kejadian Luar Biasa (KLB). Angka kejadian demam berdarah terus

meningkat sehingga mengakibatkan kepanikan di masyarakat karena berisiko

meyebabkan kematian serta penyebarannya sangat cepat. Menurut Dinas Kesehatan

Provinsi Jawa Timur tahun 2017, Angka kejadian demam berdarah terus meningkat

dari 21.092 (tahun 2015) menjadi 25.336 orang.

Demam Berdarah Dengue telah tersebar di 436 kabupaten/kota pada 33 provinsi

di Indonesia. Jumlah kematian akibat penyakit DBD sebanyak 1.071 orang dengan

total penderita 129.650 orang pada tahun 2015 dengan nilai Incidens Rate (IR)

sebesar 50,75% dan Case Fatality Rate (CFR) sebesar 0,83%. Jumlah kasus tercatat

tahun 2014 sebanyak 100.347 orang dengan IR sebesar 39,80% dan CFR 0,83%

(Kemenkes RI, 2016).

Berbagai penyakit seperti filaria, malaria dan Demam Berdarah Dengue

ditularkan melakui vektor nyamuk yang ditemukan di seluruh dunia pada daerah

tropis juga sub-tropis. Aedes aegypti (Ae. aegypti) merupakan vektor utama

penyakit DBD (CDC, 2012).

1
 Upaya yang dilakukan dalam menanggulangi ancaman DBD salah satunya

adalah dengan cara mengendalikan perkembangbiakan vektor. Umumnya dalam

pengendalian Ae. aegypti dilakukan dengan menggunakan larvasida kimia.

Pemberian larvasida berupa butiran pasir temefos 1% terbukti ampuh untuk

memberantas jentik nyamuk Ae. aegypti selama 8-12 minggu. Butiran pasir temefos

1% dikenal dengan nama abate, dan pemberian abate itu sendiri disebut abatisasi

(WHO., 2005). Penggunaan abate telah direkomendasikan oleh WHO sejak 1970,

dan di Indonesia pada tahun 1976. Penggunaan abate ditetapkan sebagai bagian dari

program pemberantasan larva nyamuk Ae. aegypti.

Penggunaan abate secara rutin dalam waktu yang lama dapat mengakibatkan

resistensi, sehingga pengendalian vektor menjadi tidak efektif. Akhir-akhir ini telah

banyak ditemui laporan terkait resistensi larva Ae. aegypti terhadap abate,

diakibatkan penggunaannya dilakukan secara terus menerus dengan jangka waktu

relatif cukup lama dan frekuensi tinggi serta tidak menggunakan dosis yang tepat

dapat mendorong terjadi resistensi pada larva Ae. aegypti terhadap insektisida

tersebut. (Felix., 2008).

Penggunaan larvasida kimiawi konvensional yang digunakan untuk mengontrol

Ae. aegypti telah menimbulkan populasi yang resistensi sehingga dibutuhkan dosis

yang lebih tinggi yang tentu memiliki efek toksik bagi manusia, hewan, serta

lingkungan. Uji coba yang dilakukan di Martinique (French West Indies)

menunjukkan telah terjadi resistensi terhadap insektisida Pyrethroid sehingga

terjadi penurunan efikasi. Temepos adalah larvasida yang digunakan secara luas

2
sebagai pengendali vektor dengue di Martinique yang telah menunjukkan resistensi

di Asia Tenggara, Amerika Selatan, dan Karibia (Ramayanti dan Febriani, 2016)

Tanamam pepaya atau dalam nama latin dikenal sebagai Carica papaya L.

merupakan salah satu tanaman tropis yang mudah berkembang di daerah tropis,

termasuk Indonesia. Menurut data dari Badan Pusat Statistik tahun 2021

menunjukkan bahwa produksi Pepaya di Jawa Timur mencapai 253.700 Ton.

Banyaknya jumlah produksi tersebut sebanding dengan limbah alami yang

dihasilkan, salah satunya adalah limbah daun.

Menurut penelitian yang dilakukan oleh Mahatriny dkk tahun 2014

menunjukkan bahwa daun pepaya mengandung senyawa alkaloid, flavonoid,

glikosida dan tanin. Senyawa tersebut menimbulkan reaksi didalam tubuh larva

nyamuk Ae. aegypti.

Penelitian tentang penggunaan ekstrak daun pepaya terhadap mortalitas larva

Ae. aegypti sudah pernah dilaksanakan sebelumnya. Penelitian yang dilakukan oleh

Tyas dkk (2014), menunjukkan bahwa besar konsentrasi LC50 ekstrak daun pepaya

(Carica papaya L.) terhadap mortalitas larva nyamuk Ae. aegypti dengan masa

dedah 12 jam, 24 jam, 36 jam dan 48 jam berturut-turut adalah 885,80 ppm, 736,89

ppm, 618,09 ppm dan 545,92 ppm. Sedangkan LT50 dengan serial konsentrasi 200

ppm, 400 ppm, 600 ppm, 800 ppm dan 1000 ppm berturut-turut adalah 72,48 jam,

58,59 jam, 39,98 jam, 26,38 jam dan 14,95 jam.

Penelitian ini bertujuan untuk menguji efikasi ekstrak etanol daun pepaya

dengan konsentrasi tertentu terhadap mortalitas larva instar III nyamuk Ae. aegypti

dalam dosis tertentu.

3
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang masalah diatas maka dapat dirumuskan masalah

sebagai berikut :

1) Apakah ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.) efektif

terhadap mortalitas Larva instar III Nyamuk Aedes aegypti ?

2) Berapakah konsentrasi ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.)

yang dibutuhkan untuk mencapai LC50?

3) Berapakah lama waktu dan besarnya konsentrasi ekstrak etanol daun

pepaya yang dibutuhkan untuk membunuh larva Aedes aegypti?

1.3 Landasan Teori

Daun pepaya (Carica papaya L.) mengandung bahan aktif, seperti enzim

papain,saponin, flavonoid, alkaloid dan tanin (Mahatriny,2014). Ekstrak dari

daun pepaya (C. papaya L.) memiliki sifat sebagai larvasida, ovisida dan

repellan, karena di dalam daun pepaya memiliki berbagai zat aktif yang diduga

beguna berguna sebagai larvasida. Zat metabolit aktif yang terkandung antara

lain alkaloid, tanin, phenolic, saponin, flavonoid dan steroid (Bamisaye et al.,

2013).

Flavonoid dan saponin dapat digunakan sebagai insektisida dan larvasida.

Senyawa saponin dapat bersifat larvasida yaitu dapat menurunkan tegangan

pada permukaan selaput mukosa traktus digestivus larva sehingga dinding

saluran pencernaan menjadi rusak, sedangkan flavonoid merupakan senyawa

yang bersifat toksik terhadap larva (Wahyuni, 2015). Senyawa aktif flavonoid

menyebabkan kematian dengan cara mempengaruhi kerja sistem saluran

4
pernafasan larva, senyawa masuk melalui siphon larva yang berada di

permukaan air menimbulkan kelemahan saraf dan kerusakan saraf yang

menyebabkan kematian larva (Arismawati dkk., 2017).

Senyawa saponin merupakan senyawa aktif permukaan yang paling kuat

dan menimbulkan busa jika diaduk dengan air dan pada konsentrasi tertentu,

sering menyebabkan hemolisis darah. Mekanisme kerja saponin sebagai

larvasida yaitu dengan cara mendenaturasi protein dan enzim di dalam sel.

Saponin dapat berdifusi melalui membran luar dan dinding sel yang rentan

kemudian mengikat membran sitoplasma sehingga mengganggu dan

mengurangi kestabilan membran sel (Taufiq dkk., 2015).

Senyawa flavonoid masuk ke dalam tubuh larva melalui siphon ada di

permukaan air dan menyebabkan layunya saraf, serta menyebabkan kerusakan

pada siphon akibatnya larva tidak bisa bernafas dan akhirnya mati. Flavonoid

berfungsi sebagai inhibitor pernafasan sehingga menghambat system

pernafasan nyamuk yang dapat mengakibatkan nyamuk Ae. Aegypti mati

(Gautam et al., 2013).

Tanin adalah polifenol tanaman yang larut dalam air dan dapat

menggumpalkan protein. Apabila tanin terkena lidah maka akan terjadi reaksi

pengendapan protein ditandai dengan rasa sepat atau astrigen. Respon jentik

terhadap senyawa ini yaitu menurunnya laju perkembangan dan gangguan

nutrisi (Gautam et al,2013).

5
1.4 Tujuan Penelitian
1) Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol daun pepaya (Carica

papaya L.) dapat membunuh larva Ae. aegypti.

2) Mengetahui konsentrasi 50% atau LC50 ekstrak daun pepaya terhadap

kematian larva Aedes aegypti.

3) Mengetahui lama waktu dan besarnya konsentrasi yang efektif untuk

membunuh larva Ae. aegypti.

1.5 Manfaat Penelitian

1.5.1 Manfaat teoritis

Manfaat dari hasil penelitian ini yaitu dapat memberikan informasi ilmiah

mengenai pemberian ekstrak daun pepaya (Carica papaya L.) efektif mengurangi

populasi nyamuk Ae. aegypti.

1.5.2 Manfaat praktis

Manfaat hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai salah satu

alternatif pengendalian Ae. aegypti sebagai antilarvasida dari ekstrak daun pepaya

(Carica papaya L.) yang aman bagi lingkungan dan masyarakat.

1.6 Hipotesis
1) Pemberian ekstrak etanol daun pepaya dapat membunuh larva instar III

Ae. aegypti.

2) Terdapat besar konsentrasi efektif ekstrak etanol daun pepaya serta

waktu yang dibutuhkan untuk mencapai LC50.

6
 BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Nyamuk Aedes aegypti

2.1.1 Klasifikasi nyamuk Ae.aegypti

Menurut Irvan (2017), Taksonomi nyamuk Aedes aegypti diklasifikasikan

sebagai berikut:

Kingdom : Animalia
Filum : Arthropoda
Kelas : Insekta atau Hexapoda
Ordo : Diptera
Familia : Culicidae
Genus : Aedes
Spesies : Ae. aegypti

2.1.2 Morfologi nyamuk Ae. aegypti

Secara umum Ae. aegypti dewasa berukuran lebih kecil jika

dibandingkan dengan ukuran nyamuk rumah (Culex quinquefasciatus).

Nyamuk Ae. aegypti dewasa memiliki warna dasar hitam dengan bitnik-

bintik putih pada bagian badannya terutama pada kaki nyamuk dan dikenal

memiliki bentuk morfologi yang khas sebagai nyamuk yang mempunyai

gambaran lira (lyre-form) yang putih pada punggung (mesonotum), yaitu

adanya dua garis melengkung vertkal di bagian kiri dan kanan

(Djakaria,2000).

7
 Perbean morfologi jantan dan betina terdapat pada ukuran tubuh dan

antena, nyamuk jantan dewasa memiliki ukuran tubuh yang lebih kecil dari

betina dan antenanya banyak bulu, sedangkan nyamuk betina dewasa hanya

memiliki sedikit bulu pada antenanya (Santi, 2011). Gambaran perbedaan

antara nyamuk Ae. aegypti jantan dan betina seperti tertera pada Gambar 2.1

Gambar 2.1 Struktur kepala nyamuk Ae. aegypti A) betina dan B) jantan
Sumber : Borror (1996)

Nyamuk Ae. aegypti memiliki dua garis pada toraknya. Sayap

nyamuk ini panjang dan tips, mempunyai vena yang permukaannya ditutupi

sisik sayap. Bagian abdomen dari tubuh nyamuk terdiri dari 10 segmen, 2

segmen berakhir berubah menjadi kelamin. Ujung abdomen nyamuk

Ae. aegypti disebut pointed (Sucipto,2011). Berikut merupakan gambaran

morfologi dari nyamuk Ae. aegypti yang tertera pada Gambar 2.2

8
 Gambar 2. 2 Morfologi Nyamuk Ae. aegypti
Sumber : CDC (2015)

2.1.3 Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti

Nyamuk Ae. aegypti pada dasarnya mengalami metamorfosa

sempurna, yaitu dari bentuk telur,larva,pupa dan nyamuk dewasa. Untuk

stadium telur,larva dan pupa hidup di dalam air (aquatik), sedangkan

nyamuk dewasa hidup secara terrestrial (di udara bebas). Nyamuk betina

meletakkan telur di atas permukaan air dalam keadaan menempel pada

dinding media bertelur nyamuk.

Nyamuk Ae. aegypti betina setiap kali bertelur dapat mengeluarkan

sebanyak 100 butir telur. Telur nyamuk Ae. aegypti menetas menjadi larva

dalam suhu air 20-40oC dalam waktu 1-2 hari. Kecepatan pertumbuhan

menjadi larva dipengaruhi beberapa faktor, yaitu temperatur,

tempat,keadaaan air, dan kandungan zat makanan yang ada di dalam tempat

perindukkan. Pada kondisi optimum, larva berkembang menjadi pupa dalam

9
waktu 5-7 hari, lalu pupa berkembang menjadi nyamuk dewasa dalam

waktu 1-2 hari. Jadi pertumbuhan dan perkembangan telur,larva,pupa

sampai nyamuk dewasa memerlukan waktu kurang lebih 7-10 hari

(Soegijanto, 2006). Berikut merupakan siklus hidup nyamuk Ae. Aegypti

seperti pada Gambar 2.3

Gambar 2. 3 Siklus hidup Nyamuk Ae. aegypti

Sumber : Sigit dkk., (2006)

Nyamuk Ae. aegypti betina dewasa rata-rata dapat menghasilkan

100 butir telur setiap kali bertelur dan menetas menjadi larva dalam kurun

waktu satu sampai dua hari dalam keadaan telur terendam air. Telur nyamuk

Ae. aegypti berbentuk elips atau oval memanjang, berwarna hitam, memiliki

ukuran 0,5-0,8 mm dengan permukaan polygonal serta tidak memiliki alat

pelampung. Telur dapat bertahan berbulan-bulan pada suhu 20oC sampai

42oC dalam keadaan kering. Telur ini menetas jika kelembapan terlalu

rendah dalam waktu 4-5 hari (Depkes, 2007)

10
 Pada umumnya nyamuk Ae. aegypti akan meletakkan telurnya pada

suhu sekitar 20oC sampai 30oC. Pada suhu 30oC telur akan menetas dalam

waktu satu sampai tiga hari dan pada suhu 16oC telur akan menetas dalam

waktu tujuh hari. Dalam kondisi normal, telur nyamuk Ae. aegypti yang

direndam di dalam air akan menetas sebanyak 80% pada hari pertama dan

95% pada hari kedua. Faktor-faktor yang mempengaruhi daya tetas telur

adalah suhu, pH air perindukan, cahaya, kelembaban dan fertilitas telur itu

sendiri (Azwat,2003). Berikut merupakan contoh telur nyamuk Ae. aegypti

seperti pada Gambar 2.4

Gambar 2. 4 Telur Nyamuk Ae. aegypti

Sumber : Mundim-Pombo et al., (2021)

2.1.3.1 Stadium larva nyamuk Ae. aegypti

Ciri-ciri larva Ae. aegypti adalah bagian kepala terdapat sepasang

antenna tanpa duri dengan mulut tipe mengunyah (chrewing). Bagian toraks

tampak paling besar dan terdapat bulu-bulu yang simetris. Abdomen larva

tersusun atas 8 ruas. Ruas ke-8 terdapat alat untuk bernafas yang disebut

corong pernafasan (siphon). Corong pernafasan (siphon) memiliki ciri tidak

memiliki duri, berwarna hitam dan ada seberkas bulu-bulu (brush) di bagian

sentral dan gigi-gigi sisir (comb scale) yang berjumlah 15-19 gigi yang

11
tersusun dalam satu baris. Larva Ae. aegypti bertubuh kecil,bergerak sangat

cepat, dan pada posisi istirahat membentuk sudut hampir tegak lurus

terhadap permukaan air (Soegijanto,2006). Lamanya perkembangan larva

akan bergantung pada suhu, ketersediaan makanan, dan kepadatan larva

pada sarang (WHO, 2005).

Larva nyamuk Ae. aegypti tampak muncul ke permukaan selama 6-

7 jam. Kehidupan larva akan lebih baik pada pH air mendekati normal yaitu

berdasarkan Achmadi (2009) berkisar 4 sampai 9, suhu berdasarkan Depkes

RI tahun 2001 pada umumnya nyamuk pembawa demam berdarah hidup

pada suhu kisaran antara 25oC-27oC dan larva akan mati ketika berada pada

suhu dibawah 10oC dan diatas 40oC (Ariyanti dan Tukiran., 2012).

Larva nyamuk Ae. aegypti tubuhnya memanjang tanpa kaki dengan

bulu-bulu sederhana yang tersusun bilateral simetris. Larva ini dalam

pertumbuhan dan perkembangannya mengalami 4 kali pergantian kulit dan

larva yang terbentuk berturut-turut disebut larva instar I, II, III, dan IV

(Soegijanto, 2006).

Larva instar I, tubuhnya sangat kecil, warna transparan, panjang 1-

2 mm, duri-duri (spinae) pada dada (thorax) belum begitu jelas, dan corong

pernapasan (siphon) belum menghitam. Larva instar II bertambah besar,

ukuran 2,5-3,9 mm, duri dada belum jelas, dan corong pernapasan sudah

berwarna hitam. Larva instar III berukuran 4-5 mm, duri-duri dada mulai

jelas dan corong pernapasan berwarna coklat kehitaman. Larva instar IV

berukuran paling besar yaitu 5-6 mm, telah lengkap struktur anatominya dan

12
 jelas tubuh dapat dibagi menjadi bagian kepala (caput), dada (thorax), dan

perut (abdomen) (Hoedojo, 2008). Gambaran larva dari nyamuk Ae. aegypti

seperti pada Gambar 2.5

Gambar 2.5 A) Larva Instar I Ae. aegypti B) Larva Instar II

Ae. aegypti C) Larva Instar III Ae. aegypti D) Larva Instar
IV Ae. aegypti Sumber : Gama dkk. (2010)

2.1.3.2 Stadium pupa nyamuk Ae. aegypti

Pupa nyamuk Ae. aegypti bentuk tubuhnya bengkok, dengan bagian

kepala dada (cephalotorax) lebih besar bila dibandingkan dengan bagian

perutnya, sehingga tampak seperti tanda baca “koma”. Pupa adalah bentuk

tidak makan, waktu istirahat posisi pupa sejajar dengan bidang permukaan

air (Kurniawan, 2011).

Pada pupa terdapat kantong udara yang terletak diantara bakal sayap

nyamuk dewasa dan terdapat sepasang sayap pengayuh yang saling

menutupi sehingga memungkinkan pupa untuk menyelam cepat dan

melakukan serangkaian refleks berputar sebagai reaksi terhadap rangsang.

13
 Bentuk nyamuk dewasa timbul setelah sobeknya selongsong pupa oleh

gelembung udara karena pergerakan aktif pupa. Pupa bernafas pada

permukaan air melalui sepasang struktur seperti terompet yang kecil pada

toraks (Aradilla,2009). Gambaran pupa dari nyamuk Ae. aegypti seperti

pada Gambar 2.6

Gambar 2.6 Pupa Nyamuk Ae. aegypti

Sumber : Rao (2019)

2.1.3.3 Stadium dewasa nyamuk Ae. aegypti

Nyamuk Ae. aegypti dewasa dikenal sebagai sebutan black white

mosquito atau tiger mosquito karena tubuhnya memiliki ciri yang khas,

yaitu dengan adanya garis-garis dan bercak-bercak putih di atas dasar warna

hitam. Ciri khas utama dari nyamuk Ae. aegypti adalah memiliki dua garis

lengkung yang berwarna putih di kedua sisi lateral dan dua buah garis

lengkung sejajar di garis median dari punggung nyamuk yang berwarna

14
 hitam (lyre shaped marking) (Soegijanto,2006). Gambaran mengenai

nyamuk dewasa nyamuk Ae. aegypti seperti pada Gambar 2.7

Gambar 2.7 Nyamuk dewasa Ae. aegypti

Sumber : Zettel dan Kaufman (2009)

2.2 Buah Pepaya

2.2.1 Klasifikasi Pepaya (Carica papaya L.)

Urutan taksonomi menurut Nugrahani (2015) tanaman pepaya dapat

diklasifikasikan sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Super Divisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Ordo : Viovales

Famili : Caricaceae

Genus : Carica

Spesies : Carica papaya L.

15
2.2.2 Morfologi pepaya

Pepaya (Carica papaya L.) adalah tanaman yang dapat tumbuh

dengan baik di daerah yang beriklim tropis. Menurut Warisno (2003),

tanaman pepaya sangat mudah tumbuh di berbagai cuaca. Bentuk batang

pada tanaman pepaya yaitu berbentuk bulat, Arah tumbuh batang yaitu

tegak lurus ke atas. Permukaan batangntanaman pepaya yaitu licin.

Batangnya berongga, umumnya tidak bercabang atau bercabang sedikit, dan

tingginya dapat mencapai 5-10 m (Tyas, 2008).

Daun pepaya merupakan daun tunggal, berukuran besar dan

bercanggap. Daun pepaya bertulang menjari (Palminervus) dengan warna

permukaan atas hijau tua, sedangkan warna permukaan bagian bawah hijau

muda (Kalie, 2008). Bunga pepaya terdiri dari tiga jenis, yaitu bunga jantan,

bunga betina, dan bunga sempuma. Buah pepaya termasuk buah buni Sejati,

artinya buah terbentuk dari bakal buah saja. Bentuknya bulat atau bulat

memanjang, berkulit tipis, berdaging tebal, dan memiliki rongga dibagian

tengah. Meskipun tipis, kulit buah pepaya tak mudah lepas dari daging

buahnya. Daging buah berasal dari karpela yang menebal. Warna daging

buah kekuningan hingga merah jingga setelah masak, tergantung

16
 varietasnya (Hamzah, 2014). Gambaran dari pohon pepaya seperti pada

Gambar 2.8

Gambar 2.8 Pohon Buah Pepaya

Sumber : Ardahidayani (2019)

2.2.3 Kandungan kimia daun pepaya

Daun pepaya memiliki kandungan senyawa aktif, yaitu

alkaloid,flavonoid,tanin serta glikosida (Mahatriny,2014). Daun pepaya

mengandung kandungan aktif seperti alkaloid, tanin, flavonoid,

papain,karpain,pseudo-karpain,saponin dekstrosa dan levulosa (Ningsi dkk.

2016). Menurut Gautam et al (2013), kandungan yang berpotensi sebagai

larvasida yaitu alkaloid, flavonoid dan tanin.

Menurut studi yang dilakukan Cania dan Setyaningrum (2013),

flavonoid dapat mengakibatkan larva tidak dapat bernapas serta mati dengan

cara masuk ke dalam tubuh larva melalui sistem respirasi,kemudian

mengakibatkan kelayuan pada saraf dan kerusakan pada sistem respirasi.

17
Flavonoid juga dapat merubah posisi tubuh larva menjadi tidak normal

dengan masuk melalui siphon yang menyebabkan kerusakan

. Flavonoid memiliki beberapa kegunaan, antara lain: (1) Terhadap

tumbuhan, yaitu sebagai pengatur fotosintesis, aktivitas sebagai antimikroba

dan antivirus; (2) terhadap manusia, yaitu sebagai antibiotik terhadap

penyakit kanker dan ginjal, menghambat perdarahan; (3) kegunaan lainnya

adalah sebagai bahan aktif dalam pembuatan insektisida nabati. Flavonoid

memiliki sifat yang khas,yaitu baunya yang sangat tajam, memiliki rasa

yang pahit, dapat larut dalam air dan pelarut organik, serta mudah terurai

pada temperature tinggi (Suyanto, 2009). Gambaran struktur kimia dari

flavonoid seperti pada Gambar 2.9

Gambar 2. 9 Struktur kimia Flavonoid

Sumber : Tian Yang et al., (2018)

Alkaloid, merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak

ditemukan di dalam jaringan tumbuhan. Secara kimia alkaloid termasuk

basa organik yang mengandung satu atau lebih atom nitrogen. Alkaloid

bebas dapat larut dalam pelarut organik. Alkaloid bersifat alkalis yang

18
terdapat pada beberapa golongan tanaman, terasa pahit, dan sebagai zat

penolak ataupun penarik serangga (Sukorini, 2006).

Studi yang dilakukan Tagari (2016) menyebutkan bahwa, alkaloid

diduga menghambat kerja enzim AchE yang mengakibatkan terjadinya

penumpukan asetilkolin sehingga menyebabkan kekacauan pada sistem

penghantar impuls ke sel-sel otot. Hal ini mengakibatkan larva mengalami

kekejangan secara terus menerus dan akhirnya terjadi kelumpuhan dan jika

kondisi ini berlanjut maka akan menyebabkan kematian pada larva.

Gambaran mengenai struktur kimia alkaloid yang terdapat pada pepaya

seperti pada Gambar 2.10

Gambar 2. 10 Struktur kimia Alkaloid

Sumber : Julianti et al., (2014)

Tanin merupakan komponen zat organik yang sangat kompleks,

terdiri dari senyawa fenolik yang sukar dipisahkan dan sukar mengkristal,

mengendapkan protein dari larutannya dan bersenyawa dengan protein

tersebut (Desmiaty dkk., 2008). Tanin merupakan senyawa metabolit

sekunder yang terdapat pada beberapa tanaman. Tanin mampu mengikat

19
 protein, sehingga protein pada tanaman dapat resisten terhadap degradasi

oleh enzim protease di dalam silo ataupun rumen (Kondo et al., 2004). Tanin

akan menyebabkan penurunan aktivitas enzim protease dalam mengubah

asam-asam amino (Tandi, 2010). Pada penelitian sebelumnya, tanin dapat

menyebabkan gangguan pertumbuhan pada larva karena tanin memiliki rasa

yang sepat yang mengakibatkan larva nyamuk tidak mau makan (Yunita

dkk., 2009). Gambaran mengenai struktur kimia tanin yang ada di daun

pepaya seperti pada Gambar 2.11

Gambar 2.11 Struktur Kimia Tanin

Sumber : Hidjrawan (2008)

2.3 Ekstraksi

Ekstraksi merupakan kegiatan mengeluarkan senyawa-senyawa

kimia terlarut sehingga terpisah dari zat-zat yang tidak larut dalam cairan

pelarut. Pemindahan sediaan kental diperoleh dengan mengekstraksi

senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani dengan

menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau sebagian besar

20
pelarut diuapkan dari massa atau bubuk.Selebihnya ditangani dengan cara

yang memenuhi standar yang berlaku (Mutiara et al.,2009).

Pada umumnya ekstraksi akan semakin baik hasilnya apabila

permukaan serbuk simplisia yang bersentuhan dengan pelarut semakin luas,

oleh karena itu semakin halus serbuk simplisia maka akan semakin baik

hasil ekstraksinya. Ekstraksi juga dipengaruhi oleh sifat fisik dan kimia

simplisia yang bersangkutan (Ditjen POM, 2000).

Metode ekstraksi dapat dibedakan menjadi dua, yaitu cara dingin

dan cara panas. Definisi metode ekstraksi cara dingin adalah proses ektraksi

yang dilakukan tanpa proses pemanasan. Proses ekstraksi secara dingin ini

dilakukan bertujuan agar senyawa yang diinginkan tidak rusak selama

proses ekstraksi berlangsung. Metode ekstraksi cara dingin adalah maserasi

dan perkolasi.

Maserasi dilakukan dengan pengekstrakan simplisia menggunakan

pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada suhu

ruangan. Dilakukan dengan pengadukan yang kontinu (terus-menerus)

dengan proses remaserasi (pengulangan) dengan penambahan pelarut

setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya. Sedangkan

metode ekstraksi cara panas adalah metode yang melibatkan proses

pemanasan saat ekstraksi dilakukan. Maserasi adalah perendaman bahan

dalam suatu pelarut, metode ini dapat menghasilkan ekstrak dalam jumlah

banyak serta terhindar dari perubahan senyawa kimia tertentu akibat

pemanasan (Pratiwi, 2009).

21
 BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian

Penelitian ini menggunakan penelitian eksperimental laboratoris

untuk mengetahui efektifitas ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya

L.) terhadap tingkat mortalitas larva nyamuk Ae. aegypti. Rancangan

penelitian ini adalah Post test Only Control Group Design. Dalam

penelitian ini terdapat lima kelompok perlakuan yang masing-masing

dipilih secara acak (randomization), kelompok-kelompok tersebut

dianggap sama sebelum perlakuan. Desain penelitian ini mengukur

pengaruh perlakuan pada eksperimen dengan cara membandingkan

kelompok tersebut dengan kontrol.

3.2 Sampel dan Besar Sampel

Penelitian ini menggunakan larva instar III Ae. aegypti sebagai

hewan coba dengan pengulangan sebanyak enam kali dan lima macam

perlakuan, pada masing-masing konsentrasi dan sampel yang digunakan

dalam pengujian aktivitas biolarvasida adalah sekitar 20 ekor larva instar

III Ae. aegypti yang masih hidup dalam 100 ml media air (WHO, 2005).

Alasan peneliti menggunakan 20 ekor larva selain standar dari WHO,

yaitu agar kondisi media tidak terlalu padat. Karena media diisi lebih dari

25 ekor larva, maka kematian larva bisa karena faktor kepadatan media

(Nurhaifah dkk., 2015).

22
 Menurut Federer (1963) penentuan jumlah ulangan dengan

menggunakan rumus dengan perhitungan sebagai berikut

t (𝑛 − 1) ≥ 15

Keterangan :
t = Jumlah perlakuan
n = Jumlah pengulangan
t (𝑛 − 1) ≥ 15
5 (𝑛 − 1) ≥ 15
5n − 5 ≥ 15
5n ≥ 20
n ≥ 4 (minimal)
Maka perhitungan jumlah keseluruhan larva yang dibutuhkan adalah

Jumlah larva per perlakuan x jumlah kelompok yang digunakan x jumlah

pengulangan sehingga dihasilkan 20 x 5 x 6 = 600 ekor larva

3.3 Variabel Penelitian

3.3.1 Variabel bebas

Dalam penelitian ini variabel bebas yang digunakan dalam

penelitian ini adalah konsentrasi ekstrak etanol daun pepaya (Carica

papaya L.) sebesar 4%, 6% serta 8%.

3.3.2 Variabel terikat

Dalam penelitian ini variabel terikat yaitu presentasi mortalitas

larva instar III nyamuk Ae. aegypti pada masing-masing perlakuan dan

kontrol.

23
3.3.3 Variabel Kontrol

Dalam penelitian ini variabel kontrol yaitu larva instar III nyamuk

Ae. aegypti, aquadest, abate (temephos), suhu, kelembapan, dan DMSO

2%.

3.4 Definisi Operasional Variabel

1) Ekstrak Daun Pepaya (Carica papaya L.)

Hasil ekstraksi dari metode maserasi digunakan pelarut polar etanol teknis

96% yang di evaporasi pada suhu 40-50oC kecepatan 100 rpm sampai etanol

menguap. Ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.) dengan berbagai

konsentrasi tertentu dipaparkan pada larva instar III nyamuk Ae. aegypti.

2) Larva Ae. aegypti

Pada penelitian ini digunakan larva instar III nyamuk Ae. aegypti yang

diberi paparan ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.) dengan

berbagai macam konsentrasi. Alasan peneliti memilih mengguakan larva

instar III karena larva pada fase tersebut ukurannya sudah cukup besar

sehingga mudah untuk diidentifikasi (Nurhaifah dkk.,2015). Selain itu,

system pertahanan larva instar III lebih kuat dibandingkan larva instar I dan

II, maka diasumsikan bahwa konsentrasi yang mampu membunuj larva

instar III turut membunuh larva instar I dan II (Ahdiyah dkk., 2005).

3) Mortalitas larva Ae. aegypti

Persentase mortalitas larva yang mati dengan indicator yaitu larva diam di

dasar air, tidak mampu naik ke permukaan atau tidak menunjukkan reaksi

menyelam kedasar air, larva yang digerakkan tidak menunjukkan

24
 pergerakan lagi dan tidak merespon ketika ada rangsangan cahaya

(WHO, 2005).

3.5 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Entomologi Institute

of Tropical Disease (ITD) Universitas Airlangga, sedangkan pembuatan

ekstrak daun pepaya dilakukan di Laboratorium Farmakologi Fakultas

Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Pembuatan ekstraksi dan

penelitian dilaksanakan pada bulan Maret hingga Mei 2023.

3.6 Bahan dan Materi Penelitian

3.6.1 Bahan penelitian

Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun pepaya

(Carica papaya L.), larva instar III nyamuk Ae. aegypti, etanol teknis 96%,

dimetil sulfoksida (DMSO) 2%, aquadest, abate (temephos).

3.6.2 Alat penelitian

Alat yang digunakan untuk penelitian ini yaitu neraca analitik,

blender, toples, baskom, saringan, gelas ukur 500 ml, peralatan maserasi,

rotatory evaporator, nampan plastik, gelas plastik, pipet plastik, batang

pengaduk, kertas label, cover glass, mikroskop, cawan petri, jam, senter,

kamera dokumentasi, serta lembar pencatatan.

25
3.7 Prosedur Penelitian
3.7.1 Pembuatan simplisia

Daun pepaya dikoleksi kemudian diidentifikasi. Kemudian daun

pepaya yang telah diseleksi kemudian diangin-anginkan selama kurang

lebih 5-6 hari kemudian digiling hingga berupa serbuk halus.

3.7.2 Pembuatan ekstrak daun pepaya (Carica papaya L.)

Serbuk halus dari daun pepaya (Carica papaya L.) dimaserasi

dengan cara menimbang satu kilogram serbuk dan ditambahkan dua liter

pelarut dengan etanol teknis 96%, kemudian larutan didiamkan selama dua

hari pada wadah yang tertutup rapat dengan pengadukan setiap empat jam

sekali selama lima menit. Setelah itu disaring dan dipekatkan menggunakan

rotary evaporator pada suhu 40oC – 50oC hingga didapatkan ekstrak kental.

3.7.3 Persiapan dan pengelompokkan larva Ae. aegypti

Telur nyamuk Ae. aegypti sejumlah 1000 butir yang dilakukan

proses rearing menjadi larva. Stadium larva instar III biasanya berumur tiga

sampai empat hari setelah menetas. Proses identifikasi larva dengan

menggunakan mikroskop pada lensa 10x dan 40x untuk memastikan larva

Ae. aegypti instar III dengan melihat ciri morfologi larva instar III yaitu

larva berukuran 4-5mm, duri-duri (spinae) bagian toraks mulai jelas dan

corong pernafasan (siphon) berwarna coklat kehitaman (Hoedojo, 2008).

Jika telah dipastikan larva instar III Ae. aegypti, maka larva dimas ukkan ke

dalam beaker glass 500 ml yang berisi air bersih. Larva instar III sejumlah

600 ekor untuk enam kali pengulangan dan lima macam perlakuan. Tiap

26
pengulangan membutuhkan 100 ekor larva per media perlakuan, kemudian

diberi label pada wadah plastic sesuai dengan kelompok perlakuan yang

terdiri dari P1,P2,P3 dan kelompok kontrol yang terdiri dari (K+) dan (K-)

sebagai pembanding hasil aktivitas ekstrak etanol daun pepaya (Carica

papaya L.).

3.7.4 Pembuatan media

Media yang digunakan sebagai media hidup kelompok perlakuan

adalah dimetil sulfoksida (DMSO) 2% dan aquadest. Pemberian

konsentrasi ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.) secara

bertingkat antara lain 4% sebagai (P1), 6% sebagai (P2), 8% sebagai (P3)

dan kelompok kontrol yang digunakan sebagai pembanding berupa 100 ml

aquadest dan DMSO 2% sebagai (K-) dan 100 ml aquadest dengan abate

(temephos) sebagai (K+).

3.7.5 Uji aktivitas ekstrak

Pada uji aktivitas ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.),

pengujian dilakukan dengan cara memasukkan larva instar III Ae. aegypti

dengan menggunakan pipet plastik sekitar 20 ekor larva per media yang

sudah diberi larutan ekstrak etanol daun pepaya (Carica papaya L.) dengan

perlakuan satu (P1) konsentrasi 4%, perlakuan duan (P2) 6%, perlakuan tiga

(P3) 8% dan media untuk kontrol positif (K+) berisi abate (temephos) serta

kontrol negatif (K-) berisi aquadest dan DMSO 2%. Setelah dilakukan

pengamatan selama 24 jam dan apabila setelah 24 jam 50% larva uji belum

27
 ada yang mati, maka peneliti akan menambah waktu pengamatan sampai 48

jam (Nurhaifah dkk., 2015)

3.8 Analisis Data

Data yang telah diperoleh dari percobaan tersebut dilakukan

dengan jumlah larva yang mati dalam percobaan dicatat dan dianalisis

menggunakan metode analisis varian One Way (ANOVA) yang

kemudian dilanjutkan dengan Uji Pos-Hoc Games-Howel untuk melihat

perbedaan rata-rata dari setiap perlakuan menggunakan program SPSS

statistic IBM versi 25.

28
 3.9 Skema Alur Penelitian

Koleksi daun pepaya (Carica papaya L.) Koleksi telur Ae. aegypti

Pembuatan Simplisia Proses Rearing telur menjadi larva

Pembuatan Ekstrak daun pepaya Identifikasi larva instar III Ae. aegypti

Persiapan Media

Kelompok Perlakuan Kelompok Kontrol

(P1) (P2) (P3) (K-) (K+)

20 larva x 6 20 larva x 6 20 larva x 6 20 larva x 6 20 larva x 6

Pengamatan mortalitas larva

selama 24 jam

Pencatatan dan pengumpulan data

presentase mortalitas larva

Analisis Data

29
 DAFTAR PUSTAKA

A’yun, Q. dan Ainun N., L., 2015, Analisis Fitokimia Daun Pepaya (Carica papaya
L.) Di Balai Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi, Kendalpayak,
Malang, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang, 137.
Aradilla AS. 2009. Uji Efektivitas Larvasida Ekstrak Ethanol Daun Mimba
(Azadirachta indica) Terhadap Larva Ae. aegypti. [Skripsi]. Semarang:
Universitas Diponegoro Semarang.
Arismawati, Sawarudin, L.O.M. dan Sudrajat., H.W. 2017. Efek Larvasida Ekstrak
Biji Buah Pepaya (Carica papaya L) terhadap Larva Instar III Ae. aegypti
L.Medula, 4(2): 332-343.
Ariyanti dan Tukiran. Biolarvasida dari Tumbuhan Bakau Minyak (Rhizopora
acipulata). Unesa Journal of Chemistry. Vol.1(1); 10.2012
Azwat, A., 2003. Pengantar Epidemiologi. Edisi Revisi. Jakarta. Bina Rupa Aksara
Bamisaye, F.A., Ajani E.O., Minari, J..B. 2013. Prospect of Ethnobotanical Uses of
PawPaw (Carica papaya). 1(4): 171-177
Centers for Disease Control (CDC). 2012. Dengue Epidemiology.
http://www.cdc.gov/dengue/epidemiology/index.html. [20 November
2022]
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2005. Pencegahan dan Pemberantasan
Demam Berdarah Dengue di Indonesia. Dirjen Pengendalian Penyakit dan
Penyehatan Lingkungan. Jakarta.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2007. Ekologi dan Aspek Perilaku
Vektor, Ditjen PP & PL, Jakarta
Desmiaty, Y., Ratih, H., Dewi, M.A. dan Agustin, R. 2008. Penentuan Jumlah
Tanin Total pada Daun Jati Belanda (Guazuma ulmifolia Lamk) dan Daun
Sambang Darah (Excoecaria bicolor Hassk.) Secara Kolorimetri dengan
Pereaksi Biru Prusia. Ortocarpus.106-109
Dinkesprov Jawa Timur. 2017. Profil kesehatan Provinsi Jawa Timur tahun 2016.
Dinas Kesehatan Provinsi Jawa Timur. Surabaya. 55-56.

30
Djakaria, 2000.Vektor penyakit virus, riketsia, spiroketa dan bakteri. Dalam: Srisasi
G, Herry DI, Wita P, penyunting. Parasitologi Kedokteran. Edisi Ketiga.
Balai Penerbit FKUI, Jakarata. 235-237
Eka, C. ES. 2013. Uji efektivitas larvasida ekstrak daun legundi (Vitex trifolia)
terhadap larva Ae. aegypti. Med J Lampung Univ. 2(4):52–60.
Felix. 2008. Ketika Larva dan Nyamuk Dewasa Sudah Kebal Terhadap Insektisida.
FARMACIA, 7(7)
Gautam, K., Kumar, P. and Poonia, S. 2013. Larvicidal activity and GC-MS
analysis of flavonoids of Vitex negundo and Andrographis paniculate
against two vector mosquitoes Anopheles stephensi and Ae. aegypti. J
Vector Borne 50 (9): 171-178
Hamzah, A. 2014. 9 Jurus Sukses Bertanam Pepaya California. PT. Agromedia
Pustaka. Jakarta. 138
Hapsari A.O., Suwondo. dan Febrita, E. 2012. Efektivitas Ekstrak Buah Belimbing
Wuluh (Avverhoa bilimbi L.) Terhadap Mortalitas Larva Nyamuk Ae.
aegypti. Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan
Pendidikan Universitas Riau. Riau.
Hidjrawan, Y., 2018. Identifikasi Senyawa Tanin Pada Daun Belimbing Wuluh
(Averrhoa bilimbi L.). Jurnal Optimalisasi Vol. 4, No. 2.
Hoedojo, R. 2008. Morfologi, Daur Hidup, dan Perilaku Nyamuk: Parasitologi
Fakultas Kedokteran. Universitas Indonesia. 1 (4).
Halomoan, J. T. Suwandi, J F. 2017. Pengendalian Vektor Virus Dengue dengan
Metode Release of Insect Carrying Dominant Lethal (RIDL). Medical
Journal of Lampung University Vol. 6 No. 1
Irvan, J. 2017. Uji Efektifitas Serbuk Alang-Alang (Imperta cylindrical) sebagai
Anti Nyamuk Elektrik Terhadap Nyamuk Ae. aegypti [Skripsi]. Jurusan
Kesehatan Masyarakat. Fakultas Kedokteran dan Kesehatan.UIN Alauddin
Makassar.
Julianti, T., Oufir, M. and Hamburger, M. 2014. Quantification of the
Antiplasmodial Alkaloid Carpaine in Papaya (Carica papaya) Leaves.
Planta Medica, 80(13),
Kalie.M.B. 2008. Bertanam Pepaya (Edisi Revisi). Penebar Swadaya, Jakarta.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 2017. Profil Kesehatan Indonesia
Tahun 2016, Ditjen PP & PL, Jakarta. Hlm 179-181

31
Kurniawan. 2011. Uji Efektifitas Larvasida Ekstrak Daun Binahong (Anredera
cordifolia (Ten.) Steenis) terhadap Larva Ae. aegypti Instar III. [Skripsi].
Universitas Negeri Lampung
Kondo, M., Naoki, N., Kazumi, K. and Yokota, H. 2004. Enhanced lactic acid
fermentation of silage by the addition of green tea waste. J. Sci. Food
Agric. 84(7):728-734.
Mahatriny, N. N., Payani, N. P. S., Oka, I. B. M. dan Astuti, K. W. 2014. Skrining
Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Pepaya (Carica Papaya L.) Yang Diperoleh
Dari Daerah Ubud, Kabupaten Gianyar, Bali. Jurnal Farmasi Udayana.
3(1).
Mundim-Pombo,A.P.M.,Carvalho,H.J.C. and Ribeiro,R.R. 2021. Aedes aegypti :
egg morphology and embryonic development. Parasites Vectors 14:(531)
Ningsi, E. W., Yuniar, N. dan Fachlevy, A. F., 2016. Efektivitas Uji Daya Bunuh
Ekstrak Daun Pepaya (Carica Papaya L.) Terhadap Larva Nyamuk
Anopheles aconitus donits Dalam Upaya Pencegahan Penyakit Malaria Di
Daerah Persawahan Desa Lalonggombu Kecamatan Andoolo Kabupaten
Konawe Selatan. JIMKESMAS. Vol. 1 No. 3
Nugrahani, N.L. 2015. Pengaruh Komposisi Media Tanam terhadap Bibit dan
Pertumbuhan Awal Pepaya (Carica papaya L.) Tipe Bangkok dan
California. [Skripsi] Fakultas Pertanian. Institut Pertanian Bogor.
Nurhaifah, D. dan Suksesi, T. W., 2015. Efektivitas Air Perasan Kulit Jeruk Manis
sebagai Larvasida Nyamuk Ae. aegypti. Jurnal Kesehatan Masyarakat
Nasional. 9(3). 207-213
Pratiwi, I. 2009. Uji Antibakteri Ekstrak Kasar Daun Acalypha indica terhadap
Bakteri Salmonella choleraesuis dan Salmonella typhimurium [Skripsi].
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Negeri Surakarta. Surakarta.
Ramayanti, I. dan Febriani, R., 2016. Syifa Medika. Uji Efektivitas Larvasida
Ekstrak Daun Pepaya (Carica Papaya Linn) Terhadap Larva Ae. aegypti. 6
(2). 79-88.
Rao, M. R. K. (2020). Lethal efficacy of phytochemicals formulations derived from
the leaf extracts of Indian medicinal plants control Dengue and Zika vector.
International Research Journal of Environmental Sciences. 9(3). 44-54.
Santi, L. Y. 2011. Efektifitas Ekstrak Kulit Durian (Durio Zibethinus Murr) sebagai
Pengendali Nyamuk Aedes spp Tahun 2010 [Skripsi]. Bagian Kesehatan
Masyarakat Sumatra Utara. Medan.

32
Sigit, S. H., Koesharto, F. X., Upik, K. H., Dwi, J. G., Susi, S., Indrosancoyo, A.
W., Musphyanto, C., Mohammad, R., Swastiko, P., Sulaeman, Y. dan
Sanoto, U. 2006. Hama Permukiman Indonesia: Pengenalan, Biologi, dan
Pengendalian. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Soegijanto, S. 2006. Demam Berdarah Dengue Edisi Kedua. Surabaya: Airlangga
University Press. Hlm 27-33
Sucipto, C. D. 2011. Vektor Penyakit Tropis. Gosyen Publishing. Jakarta hlm. 8
Sukorini, H. 2006. Pengaruh Pestisida Organik dan Interval Penyemprotan
Terhadap Hama Plutellaxylostella Pada Budidaya Tanaman Kubis Organik.
Jurnal Gamma. 2(1):11-16.
Suyanto, F. 2009. Efek Larvasida Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia
mangostana L.) Terhadap Larva Ae. aegypti L. [Skripsi]. Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret. Surakarta
Tagari,R. 2016. Uji Efektifitas Larvasida Ekstrak Daun Pepaya (Carica papaya
Linn) Terhadap Larva Ae. aegypti. [Skripsi] Universitas Muhammadiyah
Palembang. Palembang
Tandi, E.K. 2010. Pengaruh Tanin Terhadap Aktivitas Enzim Protease. Seminar
Nasional : Teknologi Peternakan dan Veteriner, Makassar.
Taufiq, Yuniarni, dan Hazar. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji
Buah Pepaya (Carica papaya L.) Terhadap Escheriachia coli dan Salmonella
typhi. SPeSIA Unisba. 2(1): 654-661
Tian-yang., W., Qing Li. and Kai-shun Bi. 2018. Bioactive flavonoids In Medicinal
Plants: Structure. Activity And Biological Fateasian. Journal Of
Pharmaceutical Sciences. 13(1): 12–23
Tyas, W.S. 2008. Evaluasi Keragaman Pepaya (Carica papaya L.) di enam lokasi
di Boyolali. [Skripsi]. Institut Pertanian Bogor.
Tyas, D.W., Wahyuni, D., dan Hariyadi, S. 2014. Perbedaan Toksisitas Ekstrak,
Rebus, dan Rendaman Daun Pepaya (Carica Papaya Linn) Terhadap
Mortalitas Larva Nyamuk Aedes aegypti L. Jumal Pancaran 3(1): 59-68
Wahyuni, D. (2015). New bioinsecticide granules toxin from ectract of papaya
(Carica papaya) seed and leaf modified against Aedes aegypti larvae.
Procedia Environmental Sciences, 23, 323-328.
Wandini, E. 2017. Analisis Strategi Pengembangan Usaha Budidaya Pepaya
California dalam Meningkatkan Kesejahteraan Ekonomi Petani Perspektif
Ekonomi Islam. [Skripsi], Fakultas Ekonomi Bisnis Islam, Universitas
Islam Negeri Raden Intan. Lampung

33
Warisno. 2003. Budidaya Pepaya. Kanisius. Yogyakarta. Hlm 114-135
World Health Organization (WHO). 2005. Dengue Hemorrhagic Fever : Diagnosis,
Treatment and Control. WHO.
Widawati, M. dan Almierza, L. 2012. Analisis Pengaruh Ekstraksi Non-Polar
Batang Pohon Tanjung (Mimusops Elengi L) terhadap Larva Ae. aegypti.
Lokalitbang P2B2 Ciamis. ASPIRATOR Vol. 4(2); 59-63.
Yunita, E. A. Suprapti, N.H., Hidayat, J.W. 2009. Pengaruh ekstrak daun teklan
(Eupatorium ripartum) terhadap mortalitas dan perkembangan larva Ae.
aegypti. Bioma. 11(1): 11-17.

34