LAPORAN PENELITIAN

ANALISIS SIFAT DAN EFEKTIVITAS ANTI-MIKROBA

MINYAK ATSIRI BIJI PALA (MYRISTICA FRAGRANS)
UNTUK PEMURNIAN KUALITAS UDARA PADA RUANGAN
MIKROBIOLOGI

Disusun Oleh:
Verawati (2018430079)

FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH JAKARTA
2021
 LEMBAR PENGESAHAN PEMBIMBING DAN KETUA JURUSAN

JUDUL PENELITIAN : ANALISIS SIFAT DAN EFEKTIVITAS ANTI-

MIKROBA MINYAK ATSIRI BIJI PALA
(Myristica Fragrans) UNTUK PEMURNIAN
KUALITAS UDARA PADA RUANGAN
MIKROBIOLOGI
NAMA : VERAWATI
NIM : 2018430079

TELAH DIPERIKSA DAN DISAHKAN OLEH:

JAKARTA, ……………

Ika Kurniaty, ST., MT Dr. Ir. Tri Yuni Hendrawati, M.Si,IPM, ASEAN. ENG.

NIDN: 0315108604 NIDN: 0311066902

LEMBAR PERSETUJUAN DOSEN PENGUJI

i
JUDUL PENELITIAN : ANALISIS SIFAT DAN EFEKTIVITAS ANTI-
MIKROBA MINYAK ATSIRI BIJI PALA
(Myristica Fragrans) UNTUK PEMURNIAN
KUALITAS UDARA PADA RUANGAN
MIKROBIOLOGI
NAMA : VERAWATI
NIM : 2018430079

TELAH DIPERIKSA DAN DISETUJUI OLEH:

JAKARTA, ….

Dosen Penguji I, Dosen Penguji II,

NIDN: NIDN:

ABSTRAK

Kata kunci:

ii
 KATA PENGANTAR

Puji Syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT, atas segala anugerah,
rahmat dan hidayah-Nya yang telah diberikan sehingga penulis dapat
menyelesaikan penyusunan Laporan Penelitian ini.

iii
Laporan Penelitian ini mengambil judul “ANALISIS SIFAT DAN
EFEKTIVITAS ANTI-MIKROBA MINYAK ATSIRI BIJI PALA (Myristica
Fragrans) UNTUK PEMURNIAN KUALITAS UDARA PADA RUANGAN
MIKROBIOLOGI”. Laporan ini merupakan salah satu persyaratan yang harus
dipenuhi untuk kelulusan mata kuliah Penelitian Laboratorium (TA I).
Bersama ini penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya
kepada:
1. Ibu Ika Kurniaty, ST., MT. selaku Ketua Jurusan Teknik Kimia Universitas
Muhammadiyah Jakarta.
2. Ibu Alvika Meta Sari, ST., MChemEng. selaku koordinator penelitian Jurusan
Teknik Kimia.
3. Ibu Dr. Ir. Tri Yuni Hendrawati, M.Si,IPM, ASEAN. ENG. selaku dosen
pembimbing penelitian.
4. Orang tua, dan seluruh keluarga atas doa dan dukungan yang telah diberikan
kepada penulis.
5. Dinda Ayu Lestari atas bantuannya dalam penelitian ini.
Penulis mengharapkan laporan ini dapat memberikan pengetahuan
terutama bagi penulis dan pembaca. Penulis menyadari bahwa laporan ini masih
memiliki kekurangan, masukan-masukan berupa kritik konstruktif dan saran dari
pembaca sangat diharapkan sebagai bahan pertimbangan untuk perbaikan kualitas
laporan ini. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih.

Jakarta, Desember 2021

Penulis

DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN PEMBIMBING DAN KETUA JURUSAN................i

LEMBAR PERSETUJUAN DOSEN PENGUJI.....................................................ii
ABSTRAK..............................................................................................................iii
KATA PENGANTAR............................................................................................iv

iv
DAFTAR ISI............................................................................................................v
DAFTAR TABEL..................................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR............................................................................................viii
DAFTAR LAMPIRAN...........................................................................................ix
BAB I.......................................................................................................................1
PENDAHULUAN...................................................................................................1
1.1 Latar Belakang Masalah................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah.........................................................................................1
1.3 Tujuan............................................................................................................2
1.4 Luaran Penelitian...........................................................................................2
1.5 Manfaat Penelitian.........................................................................................2
BAB II......................................................................................................................3
TINJAUAN PUSTAKA..........................................................................................3
2.1 Bahan Baku ..................................................................................................3
2.1.1 Mentimun.................................................................................................3
2.2 Produk............................................................................................................5
2.2.1 Serbuk mentimun...................................................................................5
2.3 Proses.............................................................................................................6
2.3.1 Pengeringan............................................................................................6
2.4 Penelitian Terdahulu....................................................................................10
2.5 Pemilihan Metodologi.................................................................................14
2.6 Metode Analisa Hasil..................................................................................14
2.6.1 Perhitungan Kadar Air Basis Kering.....................................................14
2.6.2 Uji Proksimat.........................................................................................14
2.7 Metode Analisa Data...................................................................................15
2.8 Hipotesa.......................................................................................................16
BAB III..................................................................................................................17
METODOLOGI PENELITIAN.............................................................................17
3.1 Tempat dan Waktu......................................................................................17
3.1.1 Tempat.................................................................................................17
3.1.2 Waktu...................................................................................................17
3.2 Bahan dan Alat............................................................................................17

v
 3.2.1 Bahan...................................................................................................17
3.2.2 Alat.......................................................................................................17
3.3 Metode Penelitian........................................................................................17
3.3.1. Serbuk Mentimun dan Perolehan Kadar Air Basis Kering..................17
3.3.2. Uji Proksimat Serbuk Mentimun.........................................................18
3.4 Metode Analisa Hasil..................................................................................18
3.4.1. Kadar Air Basis Kering........................................................................18
3.4.2. Analisa Uji Proksimat Serbuk Mentimun............................................18
3.5 Diagram Alir................................................................................................19
BAB IV..................................................................................................................21
HASIL DAN PEMBAHASAN..............................................................................21
4.1 Hasil Penelitian............................................................................................21
4.1.1. Hasil Analisa Rendemen .....................................................................21
4.1.1. Hasil Pengeringan Kadar Air Basis Kering Serbuk Mentimun...........21
4.1.2. Hasil Pengujian Proksimat...................................................................23
4.2 Pembahasan.................................................................................................23
BAB V....................................................................................................................24
KESIMPULAN DAN SARAN..............................................................................24
5.1 Kesimpulan..................................................................................................24
5.2 Saran............................................................................................................24
DAFTAR PUSTAKA..............................................................................................x
LAMPIRAN...........................................................................................................xii

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Kandungan Gizi Buah Mentimun tiap 100 gram Bahan Mentah........... 4
Tabel 2.2 Penelitian Terdahulu............................................................................... 9

vi
Tabel 4.1 Hasil Analisa Rendemen....................................................................... 21
Tabel 4.2 Hasil Kadar Air Basis Kering............................................................... 21
Tabel 4.3 Hasil Pengujian Proksimat Serbuk Mentimun Hasil Analisa............... 23

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Mentimun............................................................................................ 3

Gambar 3.1 Diagram Alir Pembuatan Serbuk Mentimun.................................... 19
Gambar 4.1 Grafik Hubungan Waktu Pengeringan dan Kadar Air...................... 21

vii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Perhitungan............................................................................. xii

Lampiran 2. Hasil pengujian............................................................................... xiii
Lampiran 3. Dokumentasi.................................................................................... xiv

viii
ix
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Tanaman pala (Myristica fragrans) adalah rempah asli Indonesia yang
sebagian besar berasal dari Maluku. Pala dikenal sebagai tanaman rempah
yang memiliki nilai ekonomi dan multiguna karena setiap bagian tanaman
dapat dimanfaatkan dalam berbagai industri. Menurut Rismunandar (1990)
biji pala, fuli, dan minyak pala merupakan komoditas ekspor serta banyak
digunakan dalam industri makanan dan minuman sedangkan minyak atsiri
yang berasal dari biji, daun dan fulinya digunakan untuk bahan industri obat-
obatan, parfum, dan kosmetik.
Buah pala terdiri atas daging buah sebesar 77,8% ; fuli 4% ; tempurung
5,1% ; dan biji 13,1%. Salah satu nilai ekonomis dari tanaman pala terletak
pada bagian biji. Biji pala segar dapat menghasilkan 5-15% minyak atsiri
(Aini,Siti Sofiatul,2019). Komposisi senyawa yang terdapat pada minyak
atsiri biji pala diantaranya β-pinena, α-pinena, Safrol, Myristicin, α-terpineol,
Eugenol, Limonena, dan lain-lain (Tiara dkk., 2018). Salah satu kandungan
dari minyak atsiri biji pala yang memiliki potensi sebagai anti-mikroba adalah
adanya senyawa 4-terpineol. Senyawa ini dapat diperoleh dengan cara
ekstraksi minyak atsiri dari biji pala. Penelitian tentang minyak atsiri saat ini
banyak diarahkan untuk pemanfaatannya sebagai anti-mikroba penyakit yang
disebabkan oleh bakteri atau virus.
Saat ini kepedulian tehadap kesehatan lingkungan sangat penting. Menurut
WHO 1998 gaya hidup yaitu gaya hidup individu, yang dicirikan dengan pola
perilaku individu, akan memberi dampak pada kesehatan individu dan
selanjutnya pada kesehatan orang lain. Kesehatan lingkungan kerja sangat
penting untuk diperhatikan mengingat tempat kerja merupakan tempat yang
hampir setiap hari didatangi. Begitu pula bagi analis mikrobiologi yang setiap
hari terpapar mikroba yang tak kasat mata di udara. Sanitasi lingkungan kerja
merupakan hal yang sangat penting untuk keakuratan hasil analisa maupun
kesehatan analis laboratorium. Oleh karena itu ruangan harus selalu dalam
kondisi bersih dengan melakukan sanitasi secara teratur. Biasanya sanitasi
dalam ruangan laboratorium yaitu menggunakan desinfektan.
Disinfeksi didefinisikan sebagai penggunaan bahan-bahan kimia yang dapat
membunuh kuman/mikroba (bakteri, fungi, dan virus) yang terdapat di
permukaan benda mati (non-biologis, seperti pakaian, lantai, dinding).
Disinfektan yang memiliki toksitisas yang tinggi bagi lingkungan dan
manusia yang terhirup atau terpapar langsung dengan disinfektan. Maka dari

1
 itu sebaiknya mengganti cairan disinfetan dengan cairan sanitasi lainnya yang
mempunyai toksitisas yang rendah namun tetap mempunyai fungsi yang
sama.
Essential oil yang memiliki sifat anti-bakteri dapat dimanfaatkan untuk
membunuh mikroba di lingkungan dengan cara dihubungkan dengan difusser.
Sehingga dapat meningkatkan efektivitas pemurnian udara di lingkungan
kerja khusunya laboratorium mikrobiologi. Ekstraksi biji pala menghasilkan
minyak atsiri yang mengandung banyak senyawa salah satunya 4-terpineol
yang berfungsi sebagai anti-mikroba. Minyak atsiri tersebut di kemas dalam
essential oil sehingga dapat diaplikasikan ke alat diffuser untuk pemurnian
udara di lingkungan laboratorium mikrobiologi.
Selain digunakan dalam laboratorium, essential oil ini juga dapat digunakan
di rumah untuk membersihkan udara ruangan dan meningkatkan kualitas
udara dibandingkan dengan menggunakan desinfektan yang umumnya
berbahan dasar senyawa-senyawa kimia yang memiliki tingkat toksisitas yang
dapat membahayakan orang jika digunakan dalam jangka waktu yang lama.
Essentai ini juga mempunyai funsi lain yaitu dapat membuat kenyamanan dan
relaksasi pada ttubuuh manusia yang terhirup. Dengan memanfaatkan
essential oil dari minyak biji pala yang diaplikasikan pada diffuser dapat
membantu menekan pertumbuhan virus dan bakteri di udara sehingga kualitas
udara menjadi lebih bersih, sehat, serta aman bagi tubuh.
Penilitian ini dilakukan di Laboratorium mikrobiologi yang dapat
diklasifikasikan sebagai ruangan bersih ISO Class 8 yang telah memenuhi
beberapa parameter. Pemurnian udara dilakukan untuk menjaga kesterilan
dari ruangan uji yang juga bertujuan untuk meningkatkan akurasi dan proses
pengujian.

1.2 Rumusan Masalah

1. Apakah minyak atsiri biji pala (Myristica Fragrans) efektif dalam
menghambat pertumbuhan bakeri di udara?
2. Bagaimana pengaruh konsentrasi minyak atsiri terhadap efektivitas
penurunan jumlah bakteri di udara?
3. Apakah laboratorium yang sudah disanitasi dengan minyak atsiri biji pala
dapat memenuhi standar pemurnian udara menurut ISO, USP, dan EU
GMP?

1.3 Tujuan
1. Mengetahui keefektifan anti-mikroba minyak atsiri biji pala (Myristica
Fragrans)

2
 2. Mengetahui pengaruh konsentrasi minyak atsiri biji pala terhadap
efektivitas penurunan jumlah bakteri di udara
3. Mengetahui apakah laboratorium yang telah disanitasi memenuhi standar
ISO 44464-1, USP <1116> dan EU GMP Annex 1.

1.4 Luaran Penelitian

1. Laporan Akhir
2. Essential Oil biji pala
3. Artikel ilmiah “Analisis sifat dan efektivitas anti-mikroba minyak atsiri
biji pala (Myristica Frafrans) untuk pemurnian kualitas udara pada
ruangan Mikrobiologi”

1.5 Manfaat Penelitian

1. Menambah nilai jual ekonomi untuk essential oil biji pala.
2. Menambah ilmu pengetahuan dalam segi sanitasi ruangan.
3. Mendapatkan konsentrasi optimum essential oil yang digunakan untuk
pemurnian udara.

3
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Bahan Baku

2.1.1 Tanaman Pala

Gambar 2.1. Tanaman Pala

Taksonomi Pala (Myristica fragrans Houtt)

Kingdom Plantae
Filum Tracheophyta
Divisi Magnoliophyta
Kelas Magnoliopsida
Ordo Magnoliales
Famili Myristicaceae
Genus Myristica
Spesies Myristica fragrans
Tabel 2.1. Taksonomi Tanaman Pala
(Phulsagar et al, 2014).

Morfologi Tanaman Pala

Tanaman berbentuk pohon yang tingginya mencapai 20 m
dengan diameter batang 30-45 cm berbentuk bulat tegak dan bergetah
merah muda. Daun tunggal, lonjong, panjang 8-10 cm, permukaan
daun berwarna hijau mengilap. Bunga majemuk berbentuk malai
diketiak daun, berwarna kuning. Buah bulat bundar menggantung,
terbagi memanjang menjadi dua alur, dengan daging buah yang tebal,
keras, banyak getah encer dan sepat. Biji hitam kecoklatan dan fuli

4
 yang berbentuk lonjong dengan warna kuning hingga merah (Hidayat
dan Napitupulu, 2015). Buah pala terdiri atas daging buah (77,8%),
fuli (4%), tempurung (5,1%), dan biji (13,1%) (Rismunandar, 1990).
Menurut Nurdjannah (2007) di Indonesia dikenal beberapa jenis
pala, yaitu:
1. Myristica fragrans Houtt, yang merupakan jenis utama dan
mendominasi jenis lain dalam segi mutu maupun produktivitas.
Tanaman ini merupakan tanaman asli pulau Banda.
2. M. argenta Warb, lebih dikenal dengan nama Papuanoot alias pala
Papua Barat, asli Papua Barat, khususnya di daerah kepala burung.
Tumbuh di hutan-hutan, mutunya di bawah pala Banda.
3. M. scheffert Warb. terdapat di hutan-hutan Papua.
4. M. speciosa, terdapat di pulau Bacan. Jenis ini tidak mempunyai
nilai ekonomi.
5. M. succeanea, terdapat di pulau Halmahera. Jenis ini tidak
mempunyai nilai ekonomi.
Menurut Sipahelut dan Telussa (2011), beberapa senyawa kimia
yang terkandung dalam biji pala di antaranya α-thujene, α-pinene,
Camphene, β-pinene, β-myrcene, αphellandrene, Linalool, α-terpineol,
Safrole, dan Myristicin. Di mana αterpineol merupakan zat yang
diyakini bersifat sebagai anti-mikroba.

Gambar 2.2. Struktur kimia α-terpineol

2.2 Produk
2.2.1. Essential Oil Biji Pala
Minyak asiri, atau dikenal juga sebagai minyak eterik (aetheric
oil), minyak esensial (essential oil), minyak terbang (volatile oil),
serta minyak aromatik (aromatic oil), adalah kelompok besar minyak
nabati yang berwujud cairan kental pada suhu ruang namun mudah
menguap sehingga memberikan aroma yang khas. Minyak asiri

5
 merupakan bahan dasar dari wangi-wangian atau minyak gosok (untuk
pengobatan) alami. Di dalam perdagangan, hasil sulingan (distilasi)
minyak atsiri dikenal sebagai bibit minyak wangi.

2.3 Proses
2.3.1 Destilasi

2.3.2 Environmental Monitoring

Environmental monitoring (EM) atau pemantauan lingkungan adalah sistem
pengawasan yang dirancang untuk pemantauan kontaminasi mikroba
terhadap ruangan dan lingkungan pemroresan tertutup lainnya. EM adalah
prosedur yang memberikan pemantauan, pengujian, dan tanggapan terhadap
konsentrasi mikroba di lingkungan proses aseptik. EM merupakan suatu
prosedur dan tindakan yang perlu dilakukan untuk mengkarakterisasi, dan
menilai kualitas lingkungan, mendeteksi perubahan jumlah mikroba dan
pertumbuhan mikroba dalam ruang bersih atau lingkungan yang terkendali
(Ashour, Mansy, & Eissa, 2011).
Tujuan utama EM adalah untuk mengatur jumlah partikel viable dan non-
viable yang hidup di udara dalam batas yang ditentukan, memprediksi
resiko terhadap lingkungan dan memperkirakan efikasi proses
pembersihandan desinfektan yang digunakan di area steril seperti area
pengisian, formulasi, pencampuran, pengemasan, dan area lain yang terkait
(Mehdi, et al., 2018). Hasil yang diperoleh perlu memberikan informasi
mengenai konstruksi fisik ruangan, kinerja sistem heating ventilation and air
conditioning (HVAC), kebersihan personel, cara berpakaian, peralatan, dan
operasi pembersihan (Ashour, Mansy, & Eissa, 2011)
Setiap pemantauan kebersihan lingkungan ruangan bersih dilakukan
metode berikut :
a. Total Partikel
b. Total Bakteri dan Jamur secara Settle Plate (Cawan Papar)
c. Total Bakteri dan Jamur secara Contact plate (Cawan Kontak)

6
Pengambilan sampel udara dimaksudkan untuk menilai kinerja kontrol
teknik/desain sebagaimana dimaksudkan untuk membersihkan kontaminasi
udara dan memenuhi persyaratan klasifikasi untuk partikel total per meter
kubik dan praktik teknik aseptik dan kebersihan personel. Pengambilan
sampel permukaan terutama ditujukan untuk menilai efektivitas
pembersihan dan sanitasi permukaan serta praktik teknik aseptik dan
kebersihan personel. Semua metode ini didasarkan pada kemampuan
mikroba yang diperoleh untuk dihitung dalam media nutrisi dalam kondisi
aerobik dan suhu inkubasi mesofilik.

Saat ini, hampir semua metode ini bergantung pada pertumbuhan

mikroorganisme. Kurangnya keakuratan dan ketepatan metode ini
menunjukkan bahwa pemantauan kebersihan secara mikrobiologi tidak
mampu memberikan informasi kuantitatif langsung tentang jaminan
sterilitas. Semua metode yang diketahui hanya mengambil sampel pada
satu titik waktu, oleh karena itu akan memerlukan pengambilan sampel
berulang untuk menilai kisaran hitungan. Di sisi lain, efisiensi pemantauan
kebersihan secara mikrobiologi tidak diragukan lagi dipengaruhi oleh
banyak faktor. Tidak adanya pertumbuhan dapat memberikan kesan yang
salah bahwa udara atau permukaan sampel “bersih” jika sebagian besar
mikroorganisme tidak dapat dibudidayakan atau tidak dapat hidup (tidak
dapat berkembang biak), mungkin memiliki kebutuhan nutrisi khusus,
atau tumbuh lambat di antara yang lain. Faktanya, tidak adanya
pertumbuhan tidak berarti lokasi sampel bebas dari mikroorganisme dan
demikian juga dengan ekskursi titik sampel tunggal tidak menunjukkan
bahwa area tersebut tidak dalam keadaan kontrol mikroba. Tidak ada
rencana pengambilan sampel mikrobiologi yang dapat 100%
membuktikan tidak adanya kontaminasi mikroba, bahkan ketika tidak ada
kontaminasi.

a. Total Bakteri dan Jamur secara Settle Plate (Cawan Papar)

Pengambilan sampel secara settle plate adalah metode
langsung untuk menilai kemungkinan jumlah mikroorganisme yang
mengendap ke produk atau permukaan dalam waktu tertentu. Ini
didasarkan pada fakta, bahwa dengan tidak adanya pengaruh apa pun,
mikroorganisme di udara biasanya menempel pada partikel yang

7
 lebih besar, dan akan mengendap ke settle plate yang terbuka. Rata-
rata partikel mikroba akan mengendap oleh gravitasi ke permukaan
dengan kecepatan kira-kira 1 cm/s.

Gambar 2.9. Settle plate

Dalam pengambilan sampel settle plate, cawan petri yang
berisi media agar dibuka untuk jangka waktu tertentu (menurut USP

<1116>, selama 4 jam) sehingga memungkinkan partikel yang

mengandung mikroba mengendap di media agar. Cawan petri dengan
diameter 90 mm (perkiraan area internal 64 cm 2) adalah cawan yang
paling sering digunakan. Jumlah partikel mikroba yang mengendap
ke permukaan agar selama periode pemaparan kemudian diinkubasi
pada suhu mesofilik (30-35 °C) selama 5 hari. Jumlah koloni mikroba
yang tumbuh dihitung dalam CFU/4 jam, atau yang lebih dikenal
dengan Colony Form Unit.

b. Total Bakteri dan Jamur secara Contact plate (Cawan Kontak)

Permukaan dapat terkontaminasi dengan beberapa cara,
misalnya mikroorganisme yang keluar dari lingkungan atau dari
sentuhan langsung oleh operator. Salah satu tujuan pengambilan
sampel permukaan adalah untuk menentukan efisiensi prosedur
pembersihan rutin dalam menghilangkan kontaminasi. Oleh karena
itu, pengambilan sampel harus dilakukan sebelum dan sesudah
pembersihan untuk menentukan efektivitas prosedur pembersihan.
Standard Contact Plate (RODAC: Replicate Organism
Detection And Counting) harus berisi agar media pertumbuhan yang

8
cukup untuk membuat permukaan media yang terangkat (cembung).
Agar cembung memungkinkan aplikasi langsung untuk menguji
permukaan (misalnya: dinding, lantai, dan peralatan) untuk
pengendalian kebersihan.

Gambar 2.11. Contact plate testing

Media yang digunakan mungkin mengandung zat yang
dapat menetralkan dan menonaktifkan disinfektan sisa di permukaan
uji, contohnya Tryptic Soy Agar with Polysorbate 80 and Lecithin.
Sebab ada kemungkinan perbedaan hasil sebelum dan sesudah
pembersihan. Contact plate paling baik digunakan untuk mendeteksi
mikroorganisme yang mungkin ada pada permukaan datar dalam
jumlah yang relatif sedikit.

9
 2.4 Penelitian Terdahulu

Tabel 2.2 Penelitian Terdahulu

Tahu
No. Nama Pengarang Judul Metode Analisa Hasil
n
Komponen senyawa yang
PENGARUH WAKTU teridentifikasi adalah sebagai
DISTILASI MINYAK BIJI berikut :Sabinene (22%) Benzodioxole
PALA (Myristica fragrans) Isolasi Minyak Biji (20,50); Limonene
DENGAN METODE Pala dengan Uji minyak atsiri (19,71);Terppertiineol-4(15,14%); γ-
1. RINI ASTUTI 2019 DISTILASI UAP DAN Metode Destilasi Uap Terpinene(4,22%);α-pinene(3,10%); β-
IDENTIFIKASI KOMPONEN
meggunakan GC-MS Pinene (1,6%) ; Myrcene (1,87%) ; α-
KIMIAWI Phellandrene (1,22%);
Cyclohexane(1,60%); Benzena (1,39%)
; α -Terpinolene (0,95%) ; Piperifone
(0,28%) ; dan Myristicin (0,95%)
2 NUR HIDAYATI, 2019 PENYULINGAN Ekstraksi minyak atsiri Pengujian Sifat fisis densitas dipengaruhi
HANIFIA MINYAK BIJI PALA : dengan metode menggunakan ukuran bahan dan
ILMAWATI, PENGARUH UKURAN destilasi densitas, indeks penyulingan,sedangkan tekanan
EFANI SARA BAHAN, WAKTU, DAN bias, GCMS agilent tidak berpengaruh. Indeks bias
TEKANAN tidak dipengarui oleh variable
PENYULINGAN penelitian.
TERHADAP KUALITAS Komponen kimia biji pala
DAN RENDEMEN dipengaruhi oleh variable proses.

9
 MINYAK
Efek Biologis
1. Aktivitas antimikroba
2. Efek hipolipidemik dan
Angka Lempeng Total,
Jaiswal P, Kumar Biological effects of Analisa hipokolesterolemia
3 2009 Angka Kapang dan 3. Aktivitas antidepresan
P, Singh VK, Myristica fragrans mikrobiologi 4. Aktivitas antidiabetes
Khamir, dll.
Singh DK. 5. Aktivitas afrodisiak
6. Sitotoksisitas

10
2.5 Pemilihan Metodologi

2.6 Metode Analisa Hasil

1.6.1 Perhitungan

1.6.2 Perhitungan
Rendemen adalah perbandingan jumlah (kuantitas) bobot
sebelum dan sesudah pengeringan. Semakin tinggi nilai rendemen yang
dihasilkan menandakan nilai rendemen yang dihasilkan semakin
banyak.

Rendemen =Bobot sebelum pengeringan - Bobot setelah pengeringan

1.6.3 Uji

2.7 Metode Analisa Data

2.8 Hipotesa

13
 BAB III
METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Tempat dan Waktu

3.1.1 Tempat
Penelitian dilakukan di Laboratorium PT. AIM Skincare
Manufacturing Indonesia.

3.1.2 Waktu
Penelitian dilakukan selama 3 bulan mulai dari bulan Oktober-
Desember 2021.

3.2 Bahan dan Alat

Pada penelitian ini bahan dan alat yang diperlukan untuk membantu
keberlangsungannya penelitian, diantaranya adalah:

3.2.1 Bahan
1. Biji Pala
2. Air
3. Etanol 96%
4. Media Tryptic Soy Agar (TSA)
5. Media Tryptic Soy Agar with Polysorbate 80 and Lecithin (TSA-L)

3.2.2 Alat
1. Neraca
2. Piala gelas
3. Blender
4. Soxhlet
5. Refraktometer

14
 6. Polarimeter
7. Piknometer
8. GC-MS
9. Cawan Petri
10. Hot plate
11. Autoklaf
12. Particle Counter
13. Microbiological Air Sampler
14. Contact Plate
15. Inkubator

3.3 Metode Penelitian

3.3.1. Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan pada penelitian ini merupakan biji pala yang
diperoleh dari pusat perbelanjaan di Cibitung, Provinsi Jawa Barat.
3.3.2. Uji Proksimat Serbuk mentimun
Sampel biji pala dicuci bersih dengan air yang mengalir, kemudian
dicuci dengan aquadest. Setelah itu biji pala diblender hingga halus,
sehingga diperoleh serbuk. Biji pala yang sudah menjadi serbuk
kemudian dikeringkan di bawah sinar matahari selama ± 3-5 hari.
3.3.3. Proses Esktraksi
Serbuk biji pala yang sudah kering diekstraksi dengan metode
soxhletasi. Digunakan pelarut non-polar, yaitu ethanol 96% untuk
melarutkan senyawa α-terpineol di dalam biji pala. Senyawa-senyawa
lain yang terdapat dalam biji pala tertinggal sebagai residu, sehingga
diperoleh larutan α-terpineol dalam etanol. Larutan tersebut
kemudian diuapkan pada suhu ±60 °C sehingga etanol akan menguap
terlebih dahulu dan meninggalkan α-terpineol sebagai residu. α-
terpineol belum menguap karena memiliki titik didih sebesar 219 °C.
Residu ditimbang dan diperoleh sebagai α-terpineol murni.
3.3.4. Analisis Keadaan Fisik
Residu hasil ekstraksi dan destilasi diamati kondisi
fisiknya. Ada dua parameter yang termasuk ke dalam syarat fisik

15
 minyak atsiri biji pala, yaitu warna dan bau. Pengecekan warna
dilakukan dengan mata telanjang. Sedangkan pengecekan bau
dilakukan dengan cara dihirup. Hasil yang diperoleh dicatat untuk
dibandingkan dengan standar acuan.

3.3.5. Analisis Berat Jenis dengan Piknometer

Piknometer dikeringkan di dalam oven untuk
menghilangkan air yang tersisa, setelah itu ditimbang dan diperoleh
bobot piknometer kosong. Selanjutnya piknometer diisi dengan
pembanding (air) sampai penuh. Pastikan suhu yang tercatat pada
termometer 20°C. Setelah itu, piknometer ditimbang sehingga
diperoleh bobot piknometer + pembanding (air). Kemudian
piknometer diisi dengan sampel hingga penuh. Pastikan suhu yang
tercatat pada termometer 20°C. Setelah itu piknometer ditimbang
sehingga diperoleh bobot piknometer + sampel. Berat jenis dapat
dihitung dengan membandingkan massa jenis sampel dengan massa
jenis pembanding (air). Berat jenis sampel dapat dituliskan dengan
persamaan:
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑖𝑟 = (𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. + 𝑎𝑖𝑟) − 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. 𝑘𝑜𝑠𝑜𝑛𝑔
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 = (𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. + 𝑠𝑎𝑚𝑝. ) − 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. 𝑘𝑜𝑠𝑜𝑛𝑔

bobot air bobot sampel

𝜌 𝑎𝑖𝑟 = 𝜌 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 =
volume air volume sampel

ρ sampel
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑗𝑒𝑛𝑖𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 =
ρ air

3.3.6. Analisis Zat Sisa Penguapan

Cawan uap dikeringkan di dalam oven untuk
menghilangkan air yang tersisa, setelah itu ditimbang dan diperoleh
bobot cawan kosong. Selanjutnya ditimbang ± 2 gram sampel pada
cawan. Selanjutnya cawan diuapkan di atas hotplate pada suhu ±
200°C selama 4 jam. Setelah 4 jam, cawan dimasukkan ke dalam
desikator hingga dingin. Lalu ditimbang sehingga diperoleh bobot

16
 cawan setelah penguapan. Kadar residu (zat sisa penguapan) dapat
dituliskan dengan persamaan:

𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢 = b𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑠𝑒𝑡. 𝑢𝑎𝑝 − 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑘𝑜𝑠𝑜𝑛𝑔

bobot residu
%𝑅𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢 = × 100%
bobot sampel

3.3.7. Analisis Kandungan Sampel dengan GC-MS

Residu yang diperoleh diambil kemudian dianalisis secara
kromatografi dengan GC-MS. Residu harus dipersiapkan terlebih
dahulu dengan cara diambil sebanyak 1 ml kemudian dilarutkan ke
dalam 10 ml Methylene cloride. Setelah sampel siap, sampel
dimasukkan ke dalam vial kemudian dibaca pada alat GC-MS.
Spektrum MS akan menunjukkan hasil kandungan senyawa yang
terkandung dalam sampel tersebut (α-terpineol).

3.3.8. Aplikasi pada Diffuser untuk Pemurnian Udara

Sampel hasil ekstraksi digunakan untuk pemurnian udara
pada ruangan Laboratorium Mikrobiologi. Untuk mengetahui
efektivitas zat anti-mikroba dari α-terpineol, maka dibuat 3
konsentrasi pengujian. Ketiga sampel dengan konsentrasi berbeda
dimasukkan ke dalam diffuser, lalu diffuser dinyalakan selama 2
jam. Setelah 4 jam ruangan didiamkan, dilakukan pemantauan
kebersihan lingkungan ruangan tersebut secara bergantian.
3.3.9. Pembuatan Settle Plate
Ditimbang 40 gram media Tryptic Soy Agar (TSA), lalu
dilarutkan dalam 1 liter air. Dicek pH media harus sesuai dengan
yang tertera pada kemasan (pH 7,3±0,2). Media yang telah
dilarutkan dipanaskan dengan hot plate hingga mendidih dan larut
sempurna. Setelah itu media disterilisasi di autoklaf pada suhu 121
°C dan tekanan 15 Psi. Media steril dituang ke cawan petri pada
suhu 45 °C. Setelah didiamkan hingga padat, settle plate dapat
digunakan untuk pemantauan kebersihan lingkungan.

17
 Tabel 3.1. Komposisi Media Tryptic Soy Agar (TSA)
Komposisi
Nama Media Merek Kuantitas
Formula
(gram/liter)
Merck Peptone from casein 15

Tryptic Soy BD Peptone from soymeal 5

Agar (TSA) Sodium chloride 5
Oxoid
Agar-agar 15

Tabel 3.2. Komposisi Media Sabouraud Dextrose Agar (SDA)

Komposisi
Nama Media Merek Kuantitas
Formula
(gram/liter)
Merck Dextrose (Glucose) 40
Sabouraud Peptone 10
Dextrose Agar BD
Agar 15
(SDA)
Oxoid

3.3.10. Pembuatan Contact Plate

Ditimbang 45,7 gram media Tryptic Soy Agar with Polysorbate 80
and Lecithin (TSA-L), lalu dilarutkan dalam 1 liter air. Dicek pH
media harus sesuai dengan yang tertera pada kemasan (pH 7,3±0,2).
Media yang telah dilarutkan dipanaskan dengan hot plate hingga
mendidih dan larut sempurna. Setelah itu media disterilisasi di
autoklaf pada suhu 121 °C dan tekanan 15 Psi. Media steril dituang
ke contact plate pada suhu 45 °C. Setelah media padat, contact
plate dapat digunakan untuk pemantauan kebersihan lingkungan.
Tabel 3.2. Komposisi Media Tryptic Soy Agar with Polysorbate 80
and Lecithin (TSA-L)
Komposisi
Nama Media Merek Kuantitas
Formula
(gram/liter)
Tryptic soy agar Merck Peptone from casein 15
with polysorbate Peptone from 5
80 and lecithin soymeal

18
 Sodium Chloride 15
Agar-agar 15
Polysorbate 80 5
Lecithin 0,07

3.3.11. Pemantauan Total Bakteri dan Jamur secara Settle Plate

Ruangan yang telah diaplikasikan dengan diffuser dicek
total bakteri dan jamurnya dengan metode settle plate. Cawan petri
yang berisi agar TSA dibuka dan diletakkan pada dua titik sampling
di setiap ruangan. Pengecekan dilakukan selama 4 jam. Setelah
pengecekan, settle plate diinkubasi pada suhu 30-35 °C selama 5
hari.
Pertumbuhan dicatat dan dilaporkan dalam CFU/4 jam.

3.3.12. Pemantauan Total Bakteri dan Jamur secara Contact Plate

Ruangan yang telah diaplikasikan dengan diffuser dicek total
bakteri dan jamurnya yang berada pada permukaan ruangan.
Contact plate yang berisi agar TSA-L, ditempelkan pada dinding
dan lantai ruangan. Setelah pengecekan, contact plate berisi agar
diinkubasi pada suhu 30-35 °C selama 5 hari. Pertumbuhan dicatat
dan dilaporkan dalam CFU/plate.

16 Metode Analisa Hasil

3.4.1. Perhitungan Kadar Minyak Atsiri
Bobot ekstrak
%Rendemen= x 100 %
Bobot Sampel
3.4.2. Perhitungan Berat Jenis Minyak Atsiri
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑖𝑟 = (𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. + 𝑎𝑖𝑟) − 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. 𝑘𝑜𝑠𝑜𝑛𝑔
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 = (𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. + 𝑠𝑎𝑚𝑝. ) − 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑖𝑘𝑛𝑜. 𝑘𝑜𝑠𝑜𝑛𝑔

bobot air
𝜌 𝑎𝑖𝑟 =
volume air

bobot sampel
𝜌 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 =
volume sampel

ρ sampel
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑗𝑒𝑛𝑖𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 =
ρ air

19
 3.4.3. Perhitungan Zat Sisa Penguapan
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢 = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑠𝑒𝑡. 𝑢𝑎𝑝 − 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑘𝑜𝑠𝑜𝑛𝑔
bobot residu
%𝑅𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢 = × 100%
bobot sampel

Diagram Alir

Biji Pala yang sudah bersih

Penghalusan dengan blender, lalu

dikeringkan dengan sinar matahari
selama 5 hari

Serbuk Biji Pala

Proses ekstraksi dengan metode

Etanol 96% soxhletasi Uap
Suhu penguapan : 60 oC

Minyak Atsiri Biji Pala

Analisa :
Warna, bau, bentuk, massa jenis, Zat
Sisa penguapan, GC-MS
Uji efektifitas :
Pemantauan Total Bakteri dan Jamur
metode Settle Plate, Pemantauan
total bakteri dan jamur metode 20
Contact Plate
 Gambar 3.1 Diagram Alir Pengujian Minyak Atsiri Biji Pala

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

4.1.1. Hasil Analisa Rendemen
Dari hasil ekstraksi didapatkan minyak yang berwarna kuning sedikit
kemerahan dan berbau khas. Bau khas ini menunjukkan karakteristik
dari minyak atsiri biji pala. Terdapat banyak jenis biji pala yang
tersebar di Indonesia, contohnya di daerah Jawa Barat, Kepulauan
Maluku, Sulawesi Utara, Papua, Sumatera Barat, dan Nanggroe Aceh
Darussalam (Nurfitriana, 2013). Seluruh jenis biji pala umumnya
memiliki bau yang sama, karena istilah esensial atau minyak yang
berbau harum dipakai karena minyak atsiri mewakili bau dari
tanaman penghasilnya, yaitu biji pala. Minyak atsiri dari hasil
ekstraksi kemudian diuji berdasarkan standar yang berlaku serta
diidentifikasi komponen yang terkandung di dalamnya.

Hasil ekstraksi-destilasi minyak atsiri biji pala dengan metode

soxhletasi bila dibandingkan dengan SNI 06-2388-2006, disajikan
pada tabel berikut:

Tabel 4.1. Hasil analisis jika dibandingkan dengan SNI 06-2388-2006

Standar SNI 06-2388
No. Parameter Uji Hasil
Tahun 2006
1 Keadaan
Tidak berwarna- Kuning sedikit
a. Warna
kuning pucat kemerahan
b. Bau Khas minyak pala Khas minyak

21
 pala
Berat jenis
2 0,880 – 0,910 0,94484
(20°C/20°C) (g/cm3)
3 Indeks bias (nD20) 1,470 – 1,497 1,4914
Kelarutan dalam
1:3 Jernih,
4 ethanol 90% pada Jernih
seterusnya jernih
suhu 20°C ±3°C
5 Putaran Optik (°) (+)8° – (+)25° (+)8,32°
6 Sisa Penguapan (%) Maksimum 2% 1,94 %

4.1.1.1. Keadaan fisik

Dari hasil penyulingan, didapatkan minyak atsiri biji pala yang

berwarna kuning sedikit kemerahan, sedangkan berdasarkan
SNI 06-2388-2006 umumnya minyak atsiri biji pala berwarna
kuning pucat. Hal ini dapat dipengaruhi oleh pemilihan bahan
baku biji pala yang digunakan. Karakteristik biji pala yang
digunakan berwarna merah kecokelatan sehingga dapat
berpengaruh pada minyak yang dihasilkan. Selain itu suhu yang
terlalu tinggi juga dapat mempengaruhi karakteristik minyak
yang dihasilkan. Dikarenakan metode yang digunakan pada
kedua tahapnya melalui proses pemanasan, di mana media
pemanasnya berupa heating mantle sehingga panas yang
diberikan oleh pemanas mengalami kontak langsung dengan
labu didih yang berisikan hasil ekstraksi. Berbeda dengan
metode yang umumnya dipakai dalam penyulingan minyak
atsiri biji pala yaitu dengan destilasi uap di mana media
pemanasnya berupa uap air sehingga tipe pemanasannya
indirect atau pemanasan tidak langsung.

4.1.1.2. Penentuan Berat Jenis

Berat jenis adalah perbandingan massa jenis zat dengan massa

jenis pembanding (air) pada suhu tertentu. Untuk mengetahui
nilai berat jenis dari suatu zat, maka diperlukan data massa jenis
zat dan pembandingnya (dalam penelitian ini menggunakan
air). Massa jenis adalah perbandingan massa zat dengan volume

22
 zat pada temperatur tertentu. Dengan alat piknometer, diperoleh
massa jenis minyak atsiri biji pala pada suhu 20 0C sebesar
0,93739 g/cm3. Lalu untuk pembandingnya (air) diperoleh
massa jenis pada suhu 20 0C sebesar 0,99212 g/cm3. Ketika
dimasukkan ke dalam perhitungan, diperoleh berat jenis minyak
atsiri biji pala sebesar 0,94484 g/cm3. Bila dibandingkan
dengan SNI 06-2388-2006, hasil yang diperoleh berada di atas
standar persyaratan (0,880 – 0,910 g/cm3). Hal ini bisa
disebabkan karena destilasi yang belum sempurna, sehingga
akan ada sedikit sisa etanol yang dapat memengaruhi nilai berat
jenis. Selain itu faktor pengukuran yang kurang teliti juga bisa
menjadi penyebab kesalahan dalam pengecekan berat jenis
seperti penimbangan yang kurang teliti, pembacaan suhu yang
kurang tepat, atau hal lainnya. Adanya perbedaan suhu dapat
memengaruhi nilai berat jenis yang diukur.

4.1.1.3. Penentuan Zat Sisa Penguapan

Di dalam minyak atsiri terdapat zat yang menguap, dan ada
juga zat yang tidak menguap (residu). Residu ini dapat berupa
zat-zat lain yang tertinggal atau tersisa, dapat berupa
kontaminan atau pengotor yang tidak menguap karena adanya
pemanasan. Untuk minyak atsiri biji pala perlu dilakukan
pengecekan terhadap sisa penguapan sesuai dengan SNI 06-
2388-2006, yang membatasi residu maksimal 2%. Setelah
dilakukan pengecekan, diperoleh hasil sebesar 1,94%. Hasil
yang diperoleh mendekati batas standar namun masih
memenuhi persyaratan. Hal ini membuktikan kualitas minyak
atsiri dari ekstraksi biji pala sudah baik. Jika penguapan
dilakukan dengan benar dan dilakukan sampai memperoleh
bobot tetap, maka dapat dipastikan semua zat yang dapat
menguap seluruhnya menguap dan hanya tersisa residu.

23
4.1.2. Hasil Pengujian Kadar Minyak Atsiri Biji Pala
Menurut Ayunani dkk. (2018) minyak atsiri biji pala hasil destilasi
fraksinasi pengurangan tekanan mengandung 5 senyawa dominan,
yaitu αpinene, sabinene, 2-β-pinene, terpineol dan myristicin. Hasil
pengujian komponen yang dominan terkandung pada minyak atsiri
biji pala dengan menggunakan metode destilasi soxhletasi disajikan
pada tabel berikut:

Tabel 4.2. Komponen utama hasil ekstraksi minyak atsiri biji pala
Waktu Retensi % Area Nama Senyawa
17,485 menit 20,65% Myristicin
9,206 menit 20,02% β-Pinene
8,275 menit 17,21% α-Pinene
10,093 menit 8,74% o-Cymene
12,789 menit 6,31% 4-Terpineol
14,404 menit 3,31% Safrole
12,992 menit 1,93% α-Terpineol
Umumnya senyawa yang terkandung dalam hasil ekstraksi
mengandung senyawa yang merupakan golongan terpen seperti (α-
Pinene, βPinene, o-Cymene, α-Terpineol, 4-Terpineol). Senyawa
terpena merupakan senyawa yang menyusun sebagian besar minyak
atsiri yang berasal dari tumbuhan. Senyawa ini juga memiliki
karakteristik memiliki aroma yang khas sehingga banyak digunakan
untuk wewangian dan aroma terapi.

Senyawa golongan terpineol dan safrole merupakan senyawa yang

berperan aktif sebagai anti-mikroba.

24
 Gambar 4.1. Spektrum massa GC-MS

4.3. Hasil Pengujian Efektivitas Mikrobiologi

Minyak atsiri yang dihasilkan diaplikasikan pada alat diffuser
dengan ditambahkan pada sejumlah air. Pada penelitian ini digunakan
konsentrasi 0,1%; 0,5%; dan 1,0%. Konsentrasi ini dipilih dengan
mempertimbangkan pemakaian essential oil untuk diffuser pada umumnya
serta kuatnya aroma yang ditimbulkan dari minyak atsiri biji pala tersebut
sehingga tidak digunakan konsentrasi yang lebih tinggi. Diffuser
memanfaatkan gelombang listrik untuk mencampurkan minyak ke tangki
air pada alat ini. Gelombang listrik menghasilkan getaran ultra-sonik yang
dapat memecah campuran minyak dan air menjadi uap air halus yang
menyerupai kabut untuk disebarkan di udara lalu dicek kondisi udara
sebelum dan setelah menggunakan diffuser.

Berdasarkan analisis efektivitas anti-mikroba minyak atsiri biji

pala yang telah dilakukan selama kurang lebih satu minggu di laboratorium
mikrobiologi PT AIM Skin Manufacturing Indonesia, dilakukan pengujian
terhadap 3 konsentrasi larutan yaitu (0,1%; 0,5%; dan 1,0%).

4.3.2. Settle Plate

Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui jumlah bakteri di
udara secara pasif. Menggunakan media agar yang dibiarkan di
udara terbuka selama 4 jam lalu hasilnya diinkubasi pada suhu 30-
35 0C selama 5 hari.

Tabel 4.6. Hasil Pengukuran Total Mikroba secara Settle Plate

Titik Titik USP <1116>/
Konsentrasi Rerata
Sampling 1 Sampling 2 EU GMP A.1
(%) (CFU/4 jam)
(CFU/4 jam) (CFU/4 jam) (CFU/4 jam)
Blanko 37 28 35
0,1 48 32 40 Maks. 100
0,5 30 27 29

25
 1,0 21 25 23

Total Aerobic Microbial (CFU/4

Settle Plate (Passive Air Sampling)
55
50
45
40

hours)
35
30
25
20
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Konsentrasi (%)

Rata-Rata

Gambar 4.4. Grafik Settle Plate (Passive Air Sampling)

Berdasarkan tabel 4.6, total mikroba yang diperoleh dengan

metode Settle Plate/Passive Air Sampling dari konsentrasi 0%
dalam satuan Colony Form Unit (CFU) diperoleh hasil rerata
sebesar 51 CFU/4 jam. Bila dibandingkan dengan total bakteri pada
konsentrasi 0,1%; 0,3%; dan 0,5%, ketiganya memiliki nilai total
mikroba yang cenderung menurun. Untuk konsentrasi 0,1%,
diperoleh rerata sebesar 40 CFU/4 jam. Untuk konsentrasi 0,3%,
diperoleh rerata sebesar 29 CFU/4 jam. Sementara untuk
konsentrasi 0,5%, diperoleh rerata sebesar 23 CFU/4 jam. Seperti
yang terlihat di gambar 4.4, semakin tinggi konsentrasi maka
semakin sedikit pertumbuhan bakteri pada media agar. Hal ini
membuktikan bahwa adanya penurunan total mikroba sesuai dengan
jumlah konsentrasi minyak atsiri yang ditambahkan ke dalam
campuran cairan diffuser.

4.3.4. Contact Plate

Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui jumlah bakteri

dan jamurnya yang menempel di permukaan ruangan sekitar.
Dengan menggunakan media agar yang ditempelkan di dinding atau

26
 lantai ruangan kemudian diinkubasi pada suhu 30-35 0C selama 5
hari.
Tabel 4.8. Hasil Pengukuran Total Mikroba secara Contact Plate (dinding)
Titik Titik USP <1116>/
Konsentrasi Rerata
Sampling 1 Sampling 2 EU GMP A.1
(%) (CFU/plate)
(CFU/plate) (CFU/plate) (CFU/plate)
Blanko 3 1 2
0,1 0 3 2
Maks. 25
0,5 0 1 1
1,0 0 0 0
Total Aerobic Microbial

Contact Plate (Wall)

2
CFU/plate
)

1
(

0
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Konsentrasi (%)

Rata-Rata

Gambar 4.6. Grafik Contact Plate (dinding)

Berdasarkan tabel 4.8, total mikroba yang diperoleh dengan
metode Contact Plate pada dinding ruangan dari konsentrasi 0%
(blanko) diperoleh hasil pada titik 1 sebesar 3 CFU/plate dan 1
CFU/plate pada titik 2 sehingga diperoleh rerata sebesar 2
CFU/plate. Hasil ini masih berada di atas total bakteri dari
konsentrasi 0,1% ; 0,3% ; dan 0,5% yang semuanya memiliki nilai
total mikroba di bawah blanko dan cenderung menurun. Untuk
konsentrasi 0,1%, diperoleh hasil pada titik 1 sebesar 0 CFU/plate
dan 3 CFU/plate pada titik 2 sehingga diperoleh rerata sebesar 2
CFU/plate. Untuk konsentrasi 0,3%, diperoleh hasil pada titik 1
sebesar 0 CFU/plate dan 1 CFU/plate pada titik 2 sehingga
diperoleh rerata sebesar 1 CFU/plate. Sementara untuk konsentrasi
0,5%, tidak terdapat pertumbuhan bakteri baik pada titik 1 dan titik
2, sehingga diperoleh rerata sebesar 0 CFU/plate. Seperti yang

27
 terlihat di gambar 4.6, semakin besar konsentrasi maka semakin
sedikit pertumbuhan bakteri pada media agar. Hal ini membuktikan
bahwa adanya penurunan total bakteri ketika konsentrasi minyak
atsiri yang digunakan ditambahkan ke dalam campuran cairan
diffuser.

Dari hasil pengecekan mikroba dengan 2 metode jumlah

bakteri cenderung menurun yang artinya minyak yang dihasilkan
memang efektif dalam mengurangi total bakteri namun terlihat
penurunan yang tidak signifikan. .

Seperti yang sudah terlihat pada grafik, dari setiap metode yang
menggunakan media agar dan didasarkan pada pertumbuhan jumlah
mikroba, terlihat ada kesamaan pada setiap metode.

4.2 Pembahasan

28
 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
Pada penelitian ini dapat disimpulkan sebagai berikut:
1. Proses pengeringan mentimun pada suhu 60 ℃ pada variabel waktu 1
jam, 2 jam, 3 jam, 4 jam, dan 5 jam telah mendapatkan waktu terbaik 5
jam dengan serbuk mentimun pada kadar air konstan 11.27 % (dasar
kering).
2. Rendemen terbaik pada proses pengeringan ini yaitu 11.27 %.
3. Hasil pengujian proksimat pada serbuk mentimun dengan waktu 5 jam
dan suhu 60 ℃ yaitu Kadar protein yaitu 21.13 %, Kadar abu 12.84 %,
Energi dari lemak 19.67 kcal/100g, Lemak total 2.19 %, Kadar air 10.34
%, Energi total 318.23 kcal/100g dan Karbohidrat 53.51 %.

5.2 Saran
1. Penelitian ini dapat dikembangkan dengan mengganti suhu atau waktu
pengeringan yang dilakukan.
2. Penelitian ini dapat dilakukan pengujian lebih lanjut dengan bahan baku
lainnya yang berpotensi dalam bahan baku body scrub.

29
 DAFTAR PUSTAKA

Agustinisari, I., Purwani, E. Y., Harimurti, N., & Yuliani, S. (2017). Aktivitas
Antimikroba Nanoemulsi Minyak Biji Pala (Antimicrobial Activity of Nutmeg
Oil Nanoemulsion). Jurnal Penelitian Pascapanen Pertanian, 11(1), 1-8.

Ayunani, T. D., Hastuti, I. T., Ansory, H. M., & Nilawati, A. (2018). Pemisahan
Senyawa 1, 4-terpineol dan Safrol dari Minyak Atsiri Biji Pala (Myristica
Fragrans Houtt) dan Uji Aktivitas Antibakteri Terhadap Shigella dysenteriae.
Jurnal Farmasi Indonesia, 15(1), 88-100.

BUSTAMAN, S. (2015). Prospek dan strategi pengembangan pala di Maluku.

Perspektif, 6(2), 68-74.

Guidance for Industry – Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing -

Current Good Manufacturing Practice, U.S. Food and Drug Administration,
2004.

Hidayati, N., Ilmawati, H., & Sara, E. (2015). Penyulingan Minyak Biji Pala:
Pengaruh Ukuran Bahan, Waktu dan Tekanan Penyulingan Terhadap Kualitas
Dan Rendemen Minyak.

ISO International Standard 14644 Part 1, International Organization for

Standardization, May 2015.

Jaiswal P, Kumar P, Singh VK, Singh DK. (2009). Biological effects of

Myristica fragrans. Annu Rev Biomed Sci. 11:21–29.

Kaseke, H., & Silaban, D. P. (2017). Identifikasi Sifat Fisiko Kimia Minyak Pala
D aratan dan Kepulauan di Sulawesi Utara. Jurnal Penelitian Teknologi
Industri, 6(2), 55-62.

“Manufacture of Sterile Medicinal Products” In EudraLex – The Rules

Governing Medicinal Products in the European Union, Volume 4 EU Guidelines
to Good Manufacturing Practice – Medicinal Products for Human and
Veterinary Use – Annex 1: Manufacture of Sterile Medicinal Products, European
Commission, 2020.

Nurdjannah, N. (2007). Teknologi Pengolahan Pala. Badan Penelitian dan

Pengembangan Pertanian, Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pasca
Panen Pertanian.

x
Nurfitriana, Siti. (2013). Pala: si Kecil Kaya Manfaat.
https://www.kompasiana.com/sitinurfitriana/551b96d8813311263d9de176 /pala-
si-kecil-kaya-manfaat diakses pada 7 November 2020 pukul 22.01
WIB.

Refiadi, G., & Usmadi, T. (2016). Perancangan dan Otomasi Parameter Clean
Room untuk Industri Farmasi. Jurnal Otomasi, Kontrol, dan Instrumentasi, 8(1),
93.

Sagala, Y. (2015, Juni). Penentuan Bobot Jenis Dan Kelarutan Dalam Etanol
Serta Sisa Penguapan Dari Minyak Buah Pala (Myristica Fragrans H.). TUGAS
AKHIR, Universitas Sumatera Utara, Medan.

SAKA. (2020). Polarimeter dalam Analisis Kemurnian Minyak Atsiri (Essential

Oil). http://www.saka.co.id/news-detail/polarimeter-dalam-analisis kemurnian-
minyak-atsiri diakses pada 7 November 2020 pukul 10.17 WIB.

Sipahelut, S. G., Patty, J. A., Patty, Z., Kastanja, A. Y., & Lekahena, V. N. J.
(2019). The antibacterial and antifungal activity of essential oil derived from the
flesh of nutmeg fruit. EurAsian Journal of BioSciences, 13(1), 93-98.

USP, “USP <1116> Microbiological Control and Monitoring of Aseptic

Processing Environments,” USP 35 vol. 1 2012a, 2012: pp. 697-707.

Wikipedia. (2020). Cleanroom. https://en.wikipedia.org/wiki/Cleanroom diakses

pada 8 November 2020 pukul 15.26 WIB.

LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Perhitungan

1. Perhitungan Analisa Rendemen

Perbandinga Bobot Bobot Bobot Bobot cawan Rendemen

n waktu cawan timun cawan + setelah (g)

xi
 pengeringan
(Jam) cosong (g) (g) sampel (g)
(g)
7.1433
1 41.7156 6.5000 48.2156 41.0723

2 43.7258 6.5000 50.2258 44.0061 6.1648

3 38.8991 6.5000 45.3991 39.8421 5.5570

4 39.7178 6.5000 46.2178 40.7266 5.4912
5 38.7253 6.5000 45.2253 40.1291 5.0962

Rendemen :
Bobot cawan sebelum pengeringan – bobot cawan setelah pengeringan

a. Perbandingan waktu 1 jam

48.2156 – 41.0723 = 7.1433
b. Perbandingan waktu 2 jam
50.2258 – 44.0061 = 6.1648
c. Perbandingan waktu 3 jam
45.3991 – 39.8421 = 5.5570
d. Perbandingan waktu 4 jam
46.2178 – 40.7266 = 5.4912
e. Perbandingan waktu 5 jam
45.2253 – 40.1291 = 5.0962

2. Kadar Air Basis Kering

Perbandinga Bobot Bobot Bobot cawan
Bobot Kadar air basis
n waktu cawan cawan + setelah
timun (g) kering (%)
(Jam) cosong (g) sampel (g) pengeringan (g)
1 41.7156 6.5000 48.2156 41.0723 17.39

2 43.7258 6.5000 50.2258 44.0061 14.01

xii
 3 38.8991 6.5000 45.3991 39.8421 13.95
4 39.7178 6.5000 46.2178 40.7266 13.48
5 38.7253 6.5000 45.2253 40.1291 12.70

a. Perbandingan waktu 1 jam

( 48.2156−41.0723 ) g
x 100 % = 14.82 %
41.0723 g
b. Perbandingan waktu 2 jam
( 50.2258−44.0061) g
x 100 % = 12.38 %
40.0661 g
c. Perbandingan waktu 3 jam
(45.3991−39.8421) g
x 100 % = 12.24 %
39.8421 g
d. Perbandingan waktu 4 jam
( 46.2178−40.7266 ) g
x 100 % = 11.88 %
40.7266 g
e. Perbandingan waktu 5 jam
( 45.2253−40.1291 ) g
x 100 % = 11.27 %
40.1291 g

Lampiran 2. Hasil pengujian

1. Hasil Identifikasi senyawa Minyak Biji Pala dengan GC-MS

Lampiran 3. Dokumentasi

xiii
1. Destilasi Minyak Atsiri

2. Sampel Minyak Atsiri Biji Pala

3. Pengujian efektivitas mikrobiologi

Blanko Settle Plate ALT

xiv
Blanko Settle Plate AKK

Blanko Contact Plate ALT

Blanko Contact Plate AKK

ALT Settle Plate (Konsentrasi 0.1%)

AKK Settle Plate (Konsentrasi 0.1%)

ALT Contact Plate (Konsentrasi 0.1%)

AKK Contact Plate (Konsentrasi 0.1%)

xv
ALT Settle Plate (Konsentrasi 0.5%)

AKK Settle Plate (Konsentrasi 0.5%)

ALT Contact Plate (Konsentrasi 0.5%)

AKK Contact Plate (Konsentrasi 0.5%)

ALT Setle Plate (Konsentrasi 1.0%)

xvi
AKK Seatle Plate (Konsentrasi 1.0%)

ALT Contact Plate (Konsentrasi 1.0%)

AKK Contact Plate (Konsentrasi 1.0%)

xvii