MAKALAH PEMERIKSAAN LABORATORIUM IMUNOHEMATOLOGI

IMUNOHEMATOLOGI

Nama : Khusnul Khotimah

NIM : 1711304021

Kelas :A

Instruktur : Dhewinta Anggita Sari, S.ST

PRODI D4 TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ‘AISYIYAH YOGYAKARTA

YOGYAKARTA

2018
 KATA PENGANTAR

Dengan menyebut nama Allah SWT yang Maha Pengasih lagi Maha Panyayang, saya
panjatkan puja dan puji syukur atas kehadirat-Nya, yang telah melimpahkan rahmat, hidayah,
dan inayahNya kepada saya, sehingga kami dapat menyelesaikan makalah Pemeriksaan
Laboratorium Imunohematologi mengenai “Imunohematologi”

Makalah ini telah saya susun dengan maksimal dan mendapatkan bantuan dari
berbagai pihak sehingga dapat memperlancar pembuatan makalah ini. Untuk itu saya
menyampaikan banyak terima kasih kepada semua pihak yang telah berkontribusi dalam
pembuatan makalah ini. Terlepas dari semua itu, saya menyadari sepenuhnya bahwa masih
ada kekurangan baik dari segi susunan kalimat maupun tata bahasanya. Oleh karena itu
dengan tangan terbuka saya menerima segala saran dan kritik dari pembaca agar saya dapat
memperbaiki makalah ini. Akhir kata saya berharap semoga makalah tentang
Imunohematologi ini dapat memberikan manfaat maupun inpirasi terhadap pembaca.

Yogyakarta, Desember 2018

Penyusun
DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................................................ 2

BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................................... 4
A. LATAR BELAKANG ................................................................................................. 4
B. TUJUAN...................................................................................................................... 5
C. RUMUSAN MASALAH ............................................................................................ 5
D. MANFAAT ................................................................................................................. 5
BAB II PEMBAHASAN ....................................................................................................... 6
A. PENGERTIAN ............................................................................................................ 6
B. MACAM-MACAM PEMERIKSAAN ....................................................................... 8
C. METODE PEMERIKSAAN ..................................................................................... 12
BAB III PENUTUP .............................................................................................................. 14
A. KESIMPULAN ......................................................................................................... 14
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................... 15
 BAB I

PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG

Risiko transfusi darah umumnya dikategorikan sebagai infeksi dan tidak

menular. Risiko infeksi terkait dengan kemungkinan untuk mendapatkan penyakit
menular transfusi yang ditularkan (TTID) dicegah dalam dua langkah. Awalnya,
donor darah prospektif disaring dengan kuesioner predonasi, dan individu yang
diidentifikasi berisiko TTID ditangguhkan dari donor darah. Jika tidak ada risiko
TTID diidentifikasi dalam fase penyaringan ini, individu diterima untuk sumbangan.
Darah yang disumbangkan kemudian diuji untuk TTID utama dan juga untuk
pengetikan ABO / Rh. Pengujian untuk TTID yang diketahui dilakukan dalam dua
langkah penyaringan dan tes konfirmasi. Skrining untuk TTID mayor seperti hepatitis
B dan C, HIV-1 dan -2, HTLV-I dan -II, Treponema pallidum, Trypanosoma cruzi,
dan West Nile virus secara rutin dilakukan. Jika positif dalam fase skrining, tes
konfirmasi dilakukan, tetapi terlepas dari hasilnya, status donor ditangguhkan dan
darah dibuang. Jika hasil tes skrining negatif, darah dilepaskan untuk transfusi lebih
lanjut. Risiko tidak menular dari transfusi darah dikaitkan dengan reaksi yang
merugikan yang terjadi setelah pemberian produk darah. Beberapa reaksi merugikan
akut (reaksi hemolitik akut transfusi, kontaminasi bakteri atau sepsis, dan cedera paru
terkait transfusi) dan penyakit graftversus-host akut terkait transfusi, efek samping
yang tertunda dari transfusi, berpotensi fatal Immunomodulation terkait transfusi,
efek samping transfusi darah yang tertunda, telah dikaitkan dengan hasil klinis yang
lebih buruk pada pasien transfusi dibandingkan dengan yang tidak ditransfusi. Untuk
alasan ini, pencegahan risiko transfusi dimulai dengan memastikan tidak ada
transfuse dilakukan kecuali diperlukan, langkah dalam keseluruhan proses transfusi
yang melibatkan pemesanan. Memesan tes obat transfusi atau produk darah dimulai,
 seperti dalam kasus sebagian besar tes dimulai, oleh seorang dokter. Sebagian besar
pesanan rutin adalah "golongan darah," "jenis dan layar" (T & S), dan "ketik dan
silang" (T & C). Golongan darah dilakukan untuk menentukan ABO / Rh (D)
mengetik pasien. T & S dipesan biasanya ketika transfusi darah mungkin, tetapi tidak
pasti, dan termasuk ABO / Rh (D) mengetik dan layar antibodi yang dilakukan pada
sampel darah penerima. T & C order menunjukkan bahwa transfusi sudah dekat,
sehingga tes pra-transfusi lengkap, termasuk ABO / Rh (D) mengetik, layar antibodi,
dan crossmatch, dilakukan untuk jumlah unit yang diminta.

B. TUJUAN
1. Agar mengetahui pengertian Imunohematologi
2. Agar mengetahui macm-macam pemeriksaan Imunohematologi
3. Agar mengetahui perbedaan atau perbandingan metode pemeriksaan

C. RUMUSAN MASALAH
1. Apa saja pengertian Imunohematologi
2. Apa saja macm-macam pemeriksaan Imunohematologi
3. Apa saja perbedaan atau perbandingan metode pemeriksaan

D. MANFAAT
1. Untuk mengetahui pengertian Imunohematologi
2. Untuk mengetahui macm-macam pemeriksaan Imunohematologi
3. Untuk mengetahui perbedaan atau perbandingan metode pemeriksaan
 BAB II

PEMBAHASAN

A. PENGERTIAN

Immunohematology adalah studi tentang antigen RBC dan antibodi yang terkait
dengan transfusi darah. Ada lebih dari 230 jenis antigen yang ada di permukaan sel
darah merah yang, berdasarkan struktur kimianya, dapat dikelompokkan menjadi dua
kategori utama - karbohidrat dan polipeptida. Pembentukan antigen RBC dikodekan
oleh gen spesifik yang diwariskan dari orang tua dan dikategorikan dalam sistem
kelompok darah jika gen diketahui dan ditemukan di loci yang terletak dekat dan
dalam koleksi kelompok darah jika gen yang bertanggung jawab untuk
pembentukannya belum ditemukan. Sistem golongan darah ABO adalah yang
pertama ditemukan pada awal abad ke-20, dan masih dianggap sebagai sistem antigen
yang paling penting terutama karena ketidakcocokan ABO berpotensi fatal. Sistem
kelompok darah utama lainnya adalah Rh, Kell, Kidd, Duffy, Lutheran, dan MNS.
Kehadiran atau ketiadaan pada permukaan RBC antigen spesifik memberikan profil
antigenik individu atau fenotip RBC. Untuk transfusi rutin, darah hanya diketik untuk
sistem golongan darah ABO dan Rh. "Rh typing" adalah keliru karena tidak
melibatkan fenotipe untuk semua antigen utama yang termasuk dalam sistem Rh,
tetapi, lebih tepatnya, hanya untuk antigen D, yang paling imunogenik dari semuanya.
Oleh karena itu, Rh-positif atau Rh-negatif harus dibaca sebagai D-positif atau D-
negatif, masing-masing. Penentuan profil antigenik RBC penuh (RBC fenotipe) tidak
secara rutin dilakukan, tetapi diperlukan untuk pemilihan yang benar dari produk
darah dalam situasi tertentu di mana antibodi diidentifikasi dalam plasma penerima.
Transfusi darah ABO-kompatibel diperlukan setiap saat karena sistem golongan
darah ABO memiliki antibodi preformed mampu menyebabkan hemolisis dengan
pelepasan hemoglobin bebas dan komponen intraseluler lainnya ke dalam plasma
sirkulasi, yang menyebabkan gagal ginjal, aktivasi sistem koagulasi, dan berpotensi
kematian. Antibodi preformed lainnya, juga disebut "alami" atau non-RBC
dirangsang, dibentuk terhadap antigen RBC milik kelompok karbohidrat. Antibodi
ini tidak dianggap signifikan secara klinis karena mereka biasanya tidak bereaksi pada
suhu tubuh. Tidak seperti antibodi terhadap antigen RBC milik kelompok
karbohidrat, antibodi terhadap antigen polypeptide RBC tidak preformed tetapi
membutuhkan paparan RBC sebelumnya (sensitisasi) melalui transfusi sebelumnya
atau kehamilan untuk pembentukan mereka. Paparan kedua terhadap hasil antigen
RBC yang sama dalam pelapisan RBC dengan antibodi dan / atau fraksi pelengkap,
memperpendek rentang hidup RBC dengan hemolisis.
Prinsip dari kebanyakan tes imunohematologi adalah reaksi antigen antibodi yang
menyebabkan aglutinasi RBC atau hemolisis. Jika ini terjadi, reaksi harus ditafsirkan
sebagai positif. Hemolisis dianggap sebagai reaksi positif terkuat yang dapat terjadi
dan menunjukkan adanya potensi, antibodi pengikat komplemen, tetapi tidak sering
terlihat. Aglutinasi RBC paling sering dilihat sebagai tanda reaksi positif dalam tes
obat transfusi. Aglutinasi RBC terjadi dalam dua fase. Pada fase pertama, juga dikenal
sebagai sensitisasi RBC, reaksi reversibel terjadi antara paratope dan epitop yang
disatukan oleh atraksi nonkovalen, sedangkan pada fase kedua, sel darah merah
dengan antibodi terikat membentuk kisi stabil melalui antigen. Antibodi jembatan
terikat ke sel darah merah yang berbeda. Pembentukan kisi ini secara alami dicegah
dengan muatan negatif bersih dari membran RBC yang dibuat oleh asam sialic. Jika
tersuspensi dalam medium ionik, perbedaan muatan atau bentuk potensial listrik
antara kation terdekat dengan membran RBC dan kation luar yang bergerak lebih
bebas dalam larutan. Ini disebut potensi,, dan bertanggung jawab untuk menjaga sel
darah merah dalam larutan sekitar 25 nm terpisah. Faktor yang mempengaruhi
aglutinasi RBC meliputi karakteristik yang melekat pada antigen spesifik dan antibodi
yang terlibat, kepadatan dan aksesibilitas antigen spesifik pada membran RBC,
isotipe antibodi dan konsentrasi, serta parameter fisik dan / atau kimia dari lingkungan
reaksi (suhu , waktu inkubasi, dan kekuatan ionik dari larutan). Dampak kepadatan
 antigen RBC diilustrasikan oleh kemudahan reaksi yang terjadi dengan antigen A atau
B, yang hadir dalam ratusan ribu hingga jutaan molekul per RBC. Contoh lain
diilustrasikan dengan apa yang disebut "efek dosis", yang berarti reaksi antibodi yang
lebih kuat dengan sel darah merah yang homozigot daripada dengan sel darah merah
heterozigot untuk antigen tertentu karena sel darah merah homozigot
mengekspresikan dua kali jumlah molekul antigen per sel. Dampak dari isotipe
antibodi sebagian besar disebabkan oleh perbedaan ukuran berbagai kelas
imunoglobulin. Misalnya, karena mereka adalah molekul besar (35 nm), antibodi IgM
dapat dengan mudah mencapai dua sel darah merah yang berdekatan dalam larutan;
oleh karena itu, mereka memiliki kemampuan aglutinin intrinsik dan dengan
demikian disebut sebagai agglutinins langsung. Sebaliknya, sebagian besar antibodi
IgG lebih kecil (14 nm) dan tidak mampu menginduksi aglutinasi tanpa peningkatan
reaksi, yang mengapa mereka disebut sebagai agglutinins tidak langsung. Dalam
kasus reaksi imunohematologi negatif, langkah kontrol kualitas ekstra dilakukan
dengan menggunakan sel darah merah reagen yang dikenal untuk memberikan reaksi
positif (juga disebut "sel periksa"). Sel-sel periksa adalah sel darah merah reagen yang
tersedia secara komersial yang dikenal memberikan reaksi positif dan diuji persis
seperti RBC pasien. Hasil tes positif dengan sel-sel cek memvalidasi hasil tes negatif
pasien. Jika sel-sel cek tidak memberikan reaksi positif, seperti yang diharapkan, hasil
pasien tidak dapat dianggap benar-benar negatif, dan tes harus diulang.

B. MACAM-MACAM PEMERIKSAAN

Transfusi darah merupakan ilmu tentang golongan darah manusia dalam

hubungannya dengan proses pemindahan darah / komponen-komponen darah dari
donor kepada resipien. Dalam bab ini akan dibahas tentang pemeriksaan
Imunohematologi atau yang lebih dikenal sebagai pemeriksaan pre-transfusi,
diantaranya pemeriksaan golongan darah ABO & Rhesus, Crossmatch, Coomb’s
Test, skrining dan identifikasi antibodi. Tujuan pemeriksaan pretransfusi adalah
memilih darah atau komponen darah yang kompatibel, sehingga dapat
menyelamatkan jiwa seseorang dengan tidak merusak darah pasien atau merugikan
pasien.
1. Pemeriksaan Golongan Darah ABO dan Rhesus
a. Cell grouping/typing => memeriksa antigen sel darah merah dengan cara
menambahkan anti-A, anti-Bdan anti-D
b. Serum grouping/typing => memeriksa antibodi dalam serum/plasma
dengan cara mereaksikannya dengan sel golongan A,B,dan O.
c. Auto Kontrol => memeriksa antibodi dalam serum dengan cara
mereaksikannya dengan sel darah merahnya sendiri.
2. Pemeriksaan Uji Silang Serasi (Crossmatch)
Pemeriksaan reaksi silang (Cross Match) diperlukan sebelum melakukan
transfusi darah untuk melihat apakah darah pasien / resipien sesuai dengan
darah donor. Pemeriksaan Cross Match ini sangat perlu untuk mencegah
reaksi transfuse dengan memastikan penderita tidak mengandung antibody
yang reaktif terhadap antigen pada sel darah merah donor dan bermanfaat bagi
pasien.
Pada reaksi silang mayor (Mayor Cross Match) adalah memeriksa
ketidakcocokan oleh karena adanya antibody dalam serum pasien terhadap
antigen sel darah merah donor.
Pada uji silang serasi minor (Minor Cross Match) adalah untuk
memastikan ketidakcocokan oleh karena adanya antibody dalam serum donor
terhadap antigen sel darah merah pasien.
Pada pemeriksaan auto adalah mereaksikan antara sel darah merah pasien
dengan serumnya untuk mengetahui apakah terdapat autoantibodi atau tidak
untuk melihat reaksi autoimun.
Uji silang serasi dilakukan dalam fase dan medium yang berbeda karena
jenis antibody golongan darah mempunyai karakter yang berbeda.
 a. Fase I : fase suhu kamar (20⁰C – 25⁰C) dalam medium saline,
mendeteksi antibody komplet yang bersifat IgM (cold antibody)
b. Fase II : fase inkubasi pada suhu 37⁰C dalam medium bovine albumin,
pada fase ini antibody inkomplet dapat mengikat sel darah merah
c. Fase III : fase antiglobulin test, semua antibody inkomplet yang telah
diikat pada sel darah merah (pada fase II) akan beraglutinasi (positif)
dengan baik setelah penambahan Coombs serum.
Untuk validasi hasil pemeriksaan maka sample tersebut setelah fase 3
direaksikan dengan Coombs Control Cell (CCC) bila hasilnya di fase III
negatif maka ditambah dengan CCC hasilnya positif.
3. Pemeriksaan Coomb’s Test
Percobaan Coombs mencari adanya antiglobulin. Jika semacam antibodi
melekat pada eritrosit yang mengandung antigen, maka antibodi yang spesifik
terhadap antigen itu mungkin menyebabkan eritrosit-eritrosit bergumpal
(aglutinasi). Globulin merupakan antibodi penghalang (blocking antibodies)
atau antibodi tak lengkap (incomplete antibodies). Pada konsentrasi tinggi
antibodi ini melapisi eritrosit tetapi tidak dapat mengaglutinasikannya dalam
larutan salin.

Anti human globulin akan bereaksi dengan setiap globulin manusia.

Karena itu penting bahwa semua globulin bebas harus dibuang dari sel darah
merah dengan pencucian yang bersih sebelum penambahan anti human
globulin. Sisa globulin serum dalam larutan akan bergabung dengan anti
human globulin mengakibatkan anti human globulin tidak mampu lagi
mengaglutinasi sel yang telah disensitisasi, dan menyebabkan suatu tes
Coombs negatif yang salah (false negative).

Tes Coombs langsung (Direct Coombs Test / DCT) digunakan untuk

mendeteksi antibodi atau komplemen pada permukaan sel darah merah
dimana sensitisasi telah terjadi secara invivo. Reagen anti human globulin
 ditambahkan pada sel darah merah yang telah dicuci dan aglutinasi
menunjukkan tes positif.

Tes Coombs tidak langsung (Indirect Coombs Test / ICT) digunakan

untuk mencari adanya antibodi irregular (inkomplit) dalam serum. Terlebih
dahulu dilakukan pelapisan eritrosit-eritrosit normal bergolongan O (atau
eritrosit-eritrosit yang golongannya sesuai dengan serum yang diperiksa)
dengan serum yang diketahui atau tersangka mengandung antibodi
penghalang. Langkah berikutnya ialah membuktikan adanya antibodi tersebut
dengan menggunakan Serum Coombs.

4. Pemeriksaan Skrining dan Identifikasi Antibodi

Pada beberapa penyakit, seperti thalasemia, anemia sickle cell, aplastik
anemia, haemoglobinophaties, transfusi sel darah merah merupakan
pengobatan utama, oleh karena itu transfusi darah untuk pasien ini sering
dilakukan pada pasien yang mendapatkan darah transfusi berulang,
kemungkinan timbulnya alloantibodi sangat besar. Hal ini disebabkan karena
antigen sel darah merah donor memicu timbulnya antibodi pada darah pasien.
Sampai saai ini diketahui ada 270 antigen permukaan sel darah merah,
tetapi hanya 26 sistem penggolongan darah yang dapat menimbulkan reaksi
tranfusi. Berikut ini adalah sistem penggolongan darah yang dapat
menimbulkan alloantibodi pada pasien multiple transfusi.
Pemeriksaan skrining dan identifikasi antibodi bertujuan untuk
mengetahui adatidaknya antibodi di dalam plasma yang diperiksa
(pasien/donor), baik yang alamiah maupunimun. Plasma pasien ataupun donor
yang akan diperiksa direaksikan dengan sel darah merah golongan O yang
telah diketahui antigen permukaannya atau susunan antigen golongan
darahnya yang disebut sel panel.
C. METODE PEMERIKSAAN

1. Metode Pemeriksaan Golongan Darah ABO dan Rhesus

Metode pemeriksaan golongan darah abo dan rhesus, antara lain :
a. Metode slide card
Untuk menetapkan ada/tidaknya antigen pada sel darah merah
(cell grouping).
b. Metode bioplate
Untuk menetapkan ada/tidaknya antigen pada sel darah merah
(cell grouping) dan untuk menetapkan ada/tidaknya antibodi dalm
serum/plasma (serum grouping).
c. Metode tabung
Untuk menetapkan ada/tidaknya antigen pada sel darah merah
(cell grouping) dan untuk menetapkan ada/tidaknya antibodi dalm
serum/plasma (serum grouping).
d. Pemeriksaan WEAK D (jika hasil pemeriksaan rhesus tabung negatif)
Untuk menemukan adanya antigen (antigen D atau Rh) di dalam
sel darah merah (eritrosit).
2. Pemeriksaan Uji Silang Serasi (Crossmatch)
Untuk mengetahui apakah sel darah merah donor bisa hidup didalam
tubuh pasien dan untuk mengetahui ada tidaknya antibody komplet (tipe IgM)
maupun antibody inkomplet (tipe IgG) dalam serum pasien (mayor) maupun
dalam serum donor yang melawan sel pasien (minor).
3. Pemeriksaan Coomb’s Test
Untuk mendeteksi antibodi yang coated (melekat / menyelimuti) pada
eritrosit pasien dan terjadi secara invivo (di dalam tubuh).
4. Pemeriksaan Skrining dan Identifikasi Antibodi
Untuk mengetahui adatidaknya antibodi di dalam plasma yang
diperiksa (pasien/donor), baik yang alamiah maupunimun. Plasma pasien
ataupun donor yang akan diperiksa direaksikan dengan sel darah merah
golongan O yang telah diketahui antigen permukaannya atau susunan antigen
golongan darahnya yang disebut sel panel.
 BAB III

PENUTUP

A. KESIMPULAN

Reaktivitas yang terdeteksi dalam pengujian bank darah dapat dihasilkan dari
berbagai penyebab. Diskriminasi alloantibodi yang signifikan secara klinis sangat
penting untuk mengeluarkan jenis sel darah merah yang tepat dan mencegah reaksi
hemolitik transfusi. Kesalahan administrasi dan teknis, hasil palsu, dan reaksi positif-
palsu dan negatif palsu dapat dilihat setelah mempertimbangkan dengan cermat
seluruh kasus, termasuk riwayat klinis dan bank darah pasien, jenis tes, kondisi reaksi,
dan teknologi yang digunakan. Selama proses ini, skenario klinis yang khas harus
dipertimbangkan. Ringkasan proses transfusi dasar, tes rutin, dan studi kasus khas
disajikan dalam bab ini dengan tujuan membantu pengenalan cepat dari beberapa
gangguan yang paling umum ditemui dalam pengobatan transfusi.
 DAFTAR PUSTAKA

Harmening D. Modern blood banking & transfusion practices. 5th ed. Philadelphia: F. A.
Davis; 2005.

Roback JD, Combs MR, Grossman BJ, Hillyer CD. Technical manual and standards for
blood banks and transfusion services on CD-ROM. 17th ed. Bethesda, MD: American
Association of Blood Banks; 2011.

Simon TL, Dzik WH, Snyder EL, Rossi EC, Stowell CP, Strauss RG. Rossi’s principles of
transfusion medicine. 3rd ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins; 2002.

Quinley ED. Immunohematology: principles and Practice. 3rd ed. Philadelphia: Lippincott
Williams & Wilkins; 2010.