Karakteristik klasik tahap gastrula di Metazoan pembangunan didirikan oleh Haeckel

(1874, 1875) dan sejak itu kemudian telah terus-menerus digunakan oleh ahli embriologi.
Jenis yang berbeda gastrulae telah diakui pada kelompok hewan dan fenomena invaginasi,
yang mengarah ke embrio dua lapis, dianggap lebih primitif dibandingkan proses gastrulasi
lainnya (Denis, 1997). Pada awal abad ke-20, sebagian besar di bawah pengaruh Studi
Spemann dan bersamaan dengan tahap pembelahan awal, gastrula Amfibi menjadi model
yang berlaku untuk embriolog eksperimental (Gbr. 1). Hal ini menyebabkan penemuan
pengorganisasian pusat oleh Spemann dan Mangold (1924), di mana edisi terbaru dari jurnal
ini telah dikhususkan. Induksi saraf selama gastrulasi harus diselidiki selama beberapa
dekade. Induksi mesoderm pada tahap pregastrula ditandai kemudian (Nieuwkoop, 1969)

1. Menggambarkan Gastrula Amfibi:Bagaimana Bentuknya dan Bagaimana

Perubahannya Gastrula

yang tidak disebutkan namanya Beberapa penulis menggambarkan

perkembangan embrio Amfibi selama haif pertama abad ke-19. Mereka dengan
cepat menyadari bahwa belahan putih bagian bawah dari "telur" secara bertahap
ditutupi dengan wilayah berpigmen yang meluas dari belahan atas. Rusconi (1826)
dengan demikian secara akurat menggambarkan tahap perkembangan awal telur
katak hijau (Rana esculenta?) dan khususnya penampilan luar dari celah blastoporal
yang masih belum disebutkan namanya, yang memunculkan sebuah lubang yang
dianggap sebagai masa depan. dubur. Pada saat yang sama, Dutrochet (1826)
mengusulkan interpretasi yang sangat mirip, meskipun ia masih percaya bahwa
embrio yang terbentuk sebelumnya dalam sel telur ovarium dalam bentuk polip.
Pemupukan seharusnya diperlukan untuk membangun embrio simetri bilateral dari
bentuk polip ini melalui proses epigenetik. Untuk waktu yang lama, penyelidik
kemudian menggunakan istilah "anus Rusconi" untuk menunjuk blastopore.
Korespondensi antara lubang ini dan ujung posterior embrio disebutkan secara
singkat oleh von Baer (1836), mengikuti uraiannya tentang perkembangan awal
katak coklat Rana temporaria (1834), di mana hanya tahap pembelahan dan biastula
yang dipertimbangkan. Namun, von Baer (1837) tidak menerima pandangan bahwa
anus itu sendiri terbentuk begitu awal. Dalam balasan artikel von Baer tahun 1834,
Rusconi (1836) menekankan evolusi "pembukaan anal" pada embrio kadal. Dia
menggambar bagian dari tahap colokan kuning telur, termasuk rongga usus
berbentuk bulan sabit yang baru terbentuk, yang tidak dia interpretasikan seperti itu,
meskipun dia menghubungkan aspek-aspek ini dengan perubahan dalam organisasi
kuning telur. Di sisi lain, ia menyebutkan bahwa saluran usus adalah organ terakhir
yang ditata. Rusconi juga menegaskan bahwa pada Amfibi, kuning telur dan
embrio merupakan sistem kesatuan yang menyatu, sehingga berbeda dengan telur
burung.
GAMBAR EP-cadherin mRNA dalam oosit Xeinopus menyebabkan hilangnya adhesi antara
blastomer dan obliterasi blastoceel. (A) Kontrol embrio. (B) Embrio yang kekurangan EP-
cadherin. (Dari Heasman et al. 1994b, milik J. Heasman.)

Blastocoel amfibi memiliki dua fungsi utama. Pertama, memungkinkan migrasi sel
selama gastrulasi; dan kedua, ia mencegah sel-sel di bawahnya berinteraksi secara dini
dengan sel-sel di atasnya. Ketika Nieuwkoop (1973) mengambil sel embrionik kadal dari
atap blastocoel di hemisfer hewan (wilayah yang sering disebut animal cap) dan
menempatkannya di sebelah sel vegetal kuning telur dari dasar blastocoel, sel penutup hewan
membedakan ed ke dalam jaringan mesodermal bukan ektoderm. Dengan demikian,
blastocoel mencegah kontak sel-sel vegetal yang ditakdirkan untuk menjadi endoderm
dengan sel-sel di ektoderm yang ditakdirkan untuk menghasilkan kulit dan saraf. Banyak
molekul adhesi sel menjaga blastomer yang membelah bersama-sama. Salah satu yang
terpenting adalah EP-cadherm. MRNA untuk protein ini disuplai dalam sitoplasma oosit.
Jika pesan ini dihancurkan oleh oligonukleotida anti-indra sehingga tidak ada EP-cadherin
yang dibuat, adhesi antara blastomer secara dramatis berkurang, mengakibatkan pemusnahan
blastocoel (Gambar 7.4; Heasman et al. 1994a,b).

Transisi mid-blastula: Mempersiapkan gastrulasi

Prakondisi penting untuk gastrulasi adalah aktivasi genom. Dalam organisme model
Xenopus laevis (katak cakar Afrika), hanya beberapa gen yang tampak ditranskripsi selama
pembelahan awal. Untuk sebagian besar, gen nuklir tidak diaktifkan siklus sel kedua belas
(Newport dan Kirschner 1982a,b; Yang et al. 2002). Pada saat itu, embrio mengalami transisi
mid-blastula (MBT; lihat Bab 5 dan 6); gen yang berbeda mulai ditranskripsi dalam sel yang
berbeda, siklus sel memperoleh fase celah, dan blastomer memperoleh kapasitas untuk
menjadi motil. Diperkirakan bahwa beberapa faktor dalam telur diserap oleh kromatin yang
baru dibuat karena (seperti pada Drosophila) waktu transisi ini dapat diubah secara
eksperimental dengan mengubah rasio kromatin terhadap sitoplasma dalam sel (Newport dan
Kirschner 1982a,b).

Beberapa peristiwa yang memicu transisi mid-blastula melibatkan modifikasi

kromatin. Pertama, promotor tertentu didemetilasi, memungkinkan transkripsi gen ini.
Dalam Xenopus (tidak seperti mamalia), tingkat tinggi DNA termetilasi terlihat pada
kromosom yang diturunkan dari ayah dan ibu. Namun, selama tahap blastula akhir, ada
hilangnya metilasi pada promotor gen yang diaktifkan di MBT. Demetilasi ini tidak terlihat
pada promotor yang tidak diaktifkan di MBT, juga tidak diamati di daerah pengkodean gen
yang diaktifkan MBT. Metilasi lisin-4 pada histon H3 (membentuk lisin trimetilasi yang
terkait dengan transkripsi) juga terlihat pada ujung 5' dari banyak gen selama MBT.
Tampaknya, modifikasi promotor tertentu dan nukleosom terkaitnya mungkin memainkan
peran penting dalam mengatur waktu ekspresi gen pada transisi midblastula (Stancheva et al.
2002; Akkers et al. 2009).

Diperkirakan bahwa begitu kromatin pada promotor telah diubah modelnya, berbagai
faktor transkripsi (seperti protein VegT, yang dibentuk dalam sitoplasma vegetal dari MRNA
naternal yang terlokalisasi) berikatan dengan promotor dan memulai transkripsi baru.
Misalnya, sel-sel vegetal (di bawah arahan protein VegT) menjadi endoderm dan mulai
mensekresikan faktor-faktor yang menginduksi sel-sel di atasnya menjadi mesoderm.

Gastrulasi Amfibi

GAMBAR 7.5 memetakan eksterior Xenapus laevis blastula (A) dan interior (B).
Sebagian besar turunan mesodermal terbentuk dari sel-sel interior. Penempatan
mesoderm ventral masih kontroversial (lihat Kumano dan Smith 2002; Lane and
Sheets 2006). (Setelah Lane dan Smith 1999; Newman dan Kreig 1999.)
 Studi tentang gastrulasi amfibi adalah salah satu yang paling baru dan salah satu
bidang embriology (lihat Beetschen 2001; Braukmarn dan Gilbert 2005). Meskipun
gastrulasi amfibi telah dipelajari secara ekstensif selama abad yang lalu, sebagian besar teori
kami mengenai mekanismenya telah direvisi selama dekade terakhir. Studi tentang gerakan
perkembangan ini telah diperumit oleh fakta bahwa tidak ada satu cara amfibi bergastrula;
spesies yang berbeda menggunakan cara yang berbeda untuk mencapai tujuan yang sama.
Dalam beberapa tahun terakhir, penyelidikan paling intensif difokuskan pada Xenopus laevis,
jadi kami akan berkonsentrasi pada mekanisme gastrulasi pada spesies itu.

Rotasi vegetal dan invaginasi sel botol Blastula amfibi dihadapkan pada tugas yang
sama seperti blastula invertebrata yang kita ikuti di Bab 5 dan 6– yaitu, untuk membawa ke
dalam einbryo area yang ditakdirkan untuk membentuk organ endodermal; mengelilingi
embrio dengan sel-sel yang mampu membentuk ektoderm; dan untuk menempatkan sel-sel
mesodermal pada posisi yang tepat di antara mereka. Pemetaan nasib oleh Løvtrup (1975;
Landstrom dan Løvtrup 1979) dan oleh Keller (1975, 1976) telah menunjukkan bahwa sel-sel
Xenopus blastulae memiliki nasib yang berbeda, tergantung pada apakah mereka terletak di
lapisan dalam atau superfisial dari embrvo ( Gambar 7.5). Pada Xenopus, prekursor
mesodermal sebagian besar ada di lapisan dalam sel, sedangkan ektoderm dan endoderm
muncul dari lapisan superfisial di permukaan embrio. Sebagian besar prekursor untuk
notochord dan jaringan mesodermal lainnya terletak di bawah permukaan di daerah ekuator
(marginal) embrio.

Gerakan gastrulasi pada embrio katak bertindak untuk memposisikan mesoderm

antara ektoderm luar dan endoderm bagian dalam. Gerakan-gerakan ini dimulai di sisi
punggung masa depan embrio, tepat di bawah ekuator, di wilayah bulan sabit abu-abu
(Gambar 7.6)—wilayah yang berlawanan dengan titik masuknya sperma. Di sini sel-sel
berinvaginasi membentuk blastopori seperti celah (Gambar 7.7). Sel-sel ini mengubah
bentuk secara dramatis. Tubuh utama setiap sel dipindahkan ke bagian dalam einbryo sambil
mempertahankan kontak dengan permukaan luar melalui leher yang ramping. Sel-sel botol
ini melapisi arkenteron (usus primitif) saat terbentuk, dan seperti pada bulu babi yang
mengalami gastrulasi, invaginasi sel memulai pembentukan arkenteron. Namun, tidak seperti
bulu babi, gastrulasi pada katak tidak dimulai di daerah yang paling vegetal tetapi di zona
marjinal-daerah sekitar ekuator blastula, di mana belahan hewan dan vegetal bertemu (lihat
Gambar 7.6B). Di sini sel-sel endodermal tidak sebesar kuning telur blastomer vegetal.
 Bekerja dengan Xenopus, Ray Keller dan murid-muridnya menunjukkan bahwa
perubahan bentuk aneh dari sel botol diperlukan untuk memulai gastrulasi; itu adalah
penyempitan sel-sel ini yang membentuk pori blasto. Namun, begitu sel marginal bawah
permukaan bersentuhan dengan daerah basal dari blastomer permukaan, sel-sel tersebut mulai
berinvolusi pada matriks ekstraseluler yang disekresikan ke daerah basal sel-sel ini. Ketika
gerakan involusi seperti itu sedang berlangsung, sel botol tidak lagi penting. Ketika sel-sel
botol dikeluarkan setelah pembentukannya, involusi dan pembentukan dan penutupan
blastopore berlanjut (Keller 1981; Hardin dan Keller 1988). Jadi, pada Xenopus, faktor
utama dalam pergerakan sel ke dalam embrio tampaknya adalah involusi sel-sel bawah
permukaan daripada sel-sel marginal superfisial.

Tetapi involusi sel adalah peristiwa pasif. Setidaknya 2 jam sebelum sel botol
terbentuk, penataan ulang sel internal mendorong sel-sel dasar ke arah dorsal blastocoel.

GAMBAR 7.6 Pergerakan sel selama gastrulasi katak.

Gambar menunjukkan bagian meridional dipotong melalui bagian tengah embrio dan
diposisikan sedemikian rupa sehingga kutub vegetal dimiringkan ke arah pengamat dan
sedikit ke kiri. Pergerakan sel utama ditunjukkan oleh panah, dan sel hemisfer hewan
superfisial diwarnai sehingga gerakannya dapat diikuti. Di bawah gambar adalah mikrograf
yang sesuai yang dicitrakan dengan mikroskop pencitraan permukaan (lihat Ewald et al.
2002). (A,B) Gasirulasi dini. Sel-sel botol dari margin bergerak ke dalam untuk membentuk
bibir dorsal blastopori, dan prekursor mesodermal berinvolusi di bawah atap blastocoel. AP
menandai posisi kutub hewan, yang akan berubah saat gastrulasi berlanjut. (C,D)
Pertengahan gastrulasi. Archenteron membentuk dan menggantikan blastocoel,
memindahkan bibir ventral blastopore ke dalam embrio. Sel-sel belahan hewan bermigrasi
ke bawah menuju daerah vegetal, memindahkan blastopore ke daerah dekat kutub vegetal.
(E,F) Menjelang akhir gastrulasi, blastocoel dilenyapkan, embrio menjadi dikelilingi oleh
ektoderm, endoderm telah diinternalisasi, dan sel-sel mesodermal telah diposisikan antara
(Gambar setelah Keller 1986; mikrograf milik Andrew Ewald dan Scott Fraser.)

NVOLUSI BLASTOPORE LIP

Fase berikutnya dari gastrulasi melibatkan involusi sel zona marginal sementara sel
hewan mengalami epiboly dan berkumpul di blastopore. Ketika sel-sel marginal yang
bermigrasi mencapai (dan menjadi) bibir dorsal blastopori, mereka berbelok ke dalam dan
berjalan di sepanjang permukaan bagian dalam sel-sel hemisfer hewan luar (yaitu, atap
blastocoel). Dengan demikian, sel-sel yang membentuk bibir blastopori terus berubah.
Urutan perjalanan ke dalam embrio ditentukan oleh rotasi vegetal yang berbatasan dengan
endoderm faring prospektif terhadap bagian dalam jaringan tutup aninal. Sel pertama yang
menyusun bibir blastopore dorsal dan masuk ke dalam embrio adalah calon endoderm faring
usus depan (termasuk sel botol). Saat sel-sel pertama ini masuk ke bagian dalam embrio,
bibir blastopori dorsal menjadi sel-sel tersusun yang berinvolusi ke dalam embrio untuk
menjadi lempeng prekordal (prekursor mesoderm kepala). Sel-sel berikutnya yang
berinvolusi ke dalam embrio melalui bibir blastopori dorsal adalah sel-sel chordamesoderm.
Sel-sel ini akan membentuk notochord, batang mesodermal sementara yang berperan penting
dalam menginduksi dan membentuk sistem saraf. Jadi sel-sel yang membentuk bibir
blastopore dorsal terus berubah ketika sel-sel asli bermigrasi ke dalam embrio dan digantikan
oleh sel-sel yang bermigrasi ke bawah, ke dalam, dan ke atas. Saat sel-sel baru memasuki
embrio, blastocoel dipindahkan ke sisi yang berlawanan dengan bibir dorsal blastopore.
Sementara itu, bibir mengembang ke lateral dan ventral saat proses pembentukan dan
involusi sel botol berlanjut di sekitar blastopore. Pelebaran blastopore "sabit"
mengembangkan bibir lateral dan akhirnya bibir ventral di mana sel-sel prekursor
mesodermal dan endodermal tambahan lewat. Dengan pembentukan bibir ventral, blastopore
telah membentuk cincin di sekitar endodermal besar.

GAMBAR 7.8 gerakan lambat Xenopus gastrulabon. Oranye mewakili endodermtas faring prospektif
yang dijelaskan oleh ekspresi ceberus, Oranye gelap mewakili prospek heacl mesodem (ekspresi 400
detik). dan chordameso. Dderm (ekspresi Xbra) berwarna merah LAI Pada awal gastulasi,membentuk
zona marginal UMZ. (Rotasi Bi Vegezal Karows) mendorong calon endoderm faring ke samping Dari
blastocoel (C,D) Gerakan endoderm vegetal mendorong endoderm faring ke depan, mendorong
mesoderm pasif Ke dalam embrio dan menuju kutub hewan Ctoderm biru) mulai epiboly. (Alter
Winklbauer dan Schorfeld 1999)

GAMBAR 7.9 Epiboli ektoderm. (A) Perubahan di daerah sekitar blastopore saat bibir dorsal, lateral,
dan ventral terbentuk secara berurutan. Ketika bibir ventral melengkapi lingkaran, endoderm menjadi
semakin terinternalisasi. Angka ii—v sesuai dengan Gambar 7.6 BE, masing-masing. (B) Ringkasan
epiboly ektoderm dan involusi sel-sel mesodermal bermigrasi ke dalam blastopore dan kemudian di
bawah permukaan. Endoderm di bawah bibir blastopore (sumbat kuning telur) tidak bergerak dan
tertutup oleh gerakan-gerakan ini. (A dari Balinsky 1975, milik BI Balinsky.)

PERLUASAN KONVERGEN MESODERM DORSAL

Involusi dimulai ke arah dorsal, dipimpin oleh endoderm faring dan mesoderm
kepala. Jaringan-jaringan ini akan bermigrasi paling anterior di bawah permukaan ektoderm.
Sementara itu, ketika bibir blastopori mengembang untuk memiliki calon jantung, ginjal, dan
sel-sel prekursor mesodermal ventral dorsolateral, lateral, dan ventral masuk ke dalam
embrio. Gambar 7.10 menggambarkan perilaku sel zona marjinal yang melibatkan pada
tahap berturut-turut gastrulasi Xenopus (Keller dan Schoenwolf 1977, Hardın dan Keller
1988). IMZ awalnya lapisan tebal. Sesaat sebelum involusi mereka melalui bibir blastopore,
beberapa lapisan sel IMZ dalam berinterkalasi secara radial untuk membentuk satu lapisan
tipis dan lebar.

GAMBAR 7.10 Gastrulasi Xenopus berlanjut. (AJ Sel-sel margin dalam berada, dan sel yang
sebelumnya supericial membentuk dinding Archenteron. (B) Interkalasi radial, melihat ke bawah pada
bibir blastopore dorsal dari permukaan dorsal Di zona marginal nonmvoluting (NIMZ) dan bagian
atas dari IMZ, sel-sel dalam (mesodermal) yang interkalasi radial untuk membuat pita tipis Selk
Mattened.Penipisan beberapa lapisan ini menjadi beberapa penyebabekstensi konvergen (panah putih)
menuju ip blastopore.Tepat di atas bibir, interkalasi sel mediolateral menghasilkan: siresse yang
menarik IMZ melewati ip. Setelah involusi di atas bibir, interkalasi mediolateral berlanjut,
memanjang dan menyempitkan mesoderm aksial. (Setelah Wilson dan Keller 1991: Winklbauer dan
Scbirfeld 1999)

Sehingga secara umum, Pada saat yang sama, sel-sel superfisial menyebar dengan
membelah dan menyanjung. Ketika sel-sel dalam mencapai bibir blastopori, mereka
berinvolusi ke dalam embrio dan memulai jenis interkalasi kedua. Interealation ini
merupakan perpanjangan konvergen sepanjang sumbu mediolateral yang mengintegrasikan
beberapa aliran mesodermal untuk membentuk pita sempit yang panjang. Gerakan ini
mengingatkan pada lalu lintas di jalan raya ketika beberapa jalur harus menyatu untuk
membentuk satu jalur (atau dalam hal ini, gerakan sel dari bulu babi archenteron). Bagian
anterior pita ini bermigrasi ke arah animal cap Dengan demikian, aliran mesodermal terus
bermigrasi ke arah animal pole, dan lapisan di atasnya dari sel-sel superfisial (termasuk sel
botol) secara pasif ditarik ke arah animal pole, sehingga membentuk animal pole. atap
endodermal archenteron. Interkalasi radial dan mediolateral dari lapisan dalam sel
tampaknya bertanggung jawab atas pergerakan lanjutan mesoderm ke dalam embrio.
Beberapa kekuatan muncul untuk mendorong konvergensi ekstensi. Gaya pertama adalah
kohesi sel terpolarisasi, di mana sel-sel mesodermal yang terlibat mengirimkan tonjolan
untuk kontak satu sama lain. Ini "menjangkau" tidak acak, tetapi terjadi ke arah garis tengah
embrio dan membutuhkan matriks fibronektin ekstraseluler (Goto et al. 2005. Davidson et al.
2006).

faktor kedua adalah kohesi sel diferensial. Selama gastrulasi, gen yang mengkode
protein adhesi protocadherin paraksial dan protocadherin aksial diekspresikan secara spesifik
dalam mesoderm paraksial (pembentuk somit) dan notochord. Bentuk negatif eksperimental
dominan dari protocadherin aksial mencegah sel notochord dugaan dari memilah dari
mesoderm paraksial dan menghalangi pembentukan sumbu normal.

Faktor ketiga yaitu ekstensi adalah kalsium fluks. Wallingford dkk (2001) menemukan
bahwa gelombang dramatis ion kalsium melonjak melintasi jaringan dorsal mengalami
ekstensi konvergen, menyebabkan kontraksi gelombang di dalam jaringan Ion kalsium
dilepaskan dari simpanan intraseluler dan diperlukan untuk ekstensi konvergen Jika
pelepasan ion kalsium diblokir, spesifikasi sel nonnal masih terjadi, tetapi mesoderm dorsal
tidak saling menyatu yang dianggap mengatur kontraksi mikrofilamen aktin. Hal ini dapat
membantu menjelaskan mengapa daerah kepala tidak mengalami ekstensi konregen. Gen
Otx2 adalah homolog vertebrata dari gen urtodentikel Drosaphila dan mengkodekan faktor
transkripsi yang diekspresikan dalam embrio regio paling anterior. Protein Otx2 sangat
penting dalam pembentukan kepala, mengaktifkan gen-gen yang terlibat dalam pembentukan
otak depan.
 Protocadherin ekspresi memisahkan mesoderm aksial dan paraksial.

Perubahan perekat yang mendorong ekstensi konvergen tampaknya diarahkan oleh dua
sel molekul adhesi, protocadherin paraksial dan protocadherin aksial ditemukan di seluruh
mesoderm dorsal, tetapi kemudian dimatikan di prekursor notochord. Pada saat itu,
protocadherin aksial menjadi diekspresikan dalam jaringan notochordal.

A. Pola ekspresi proto cadherin paraksial selama gastrulasi akhir (area gelap)
menunjukkan penurunan regulasi yang berbeda di notochord dan tidak adanya
ekspresi di wilayah kepala.
B. Penampang melintang bernoda ganda melalui Xenopus gastrula akhir menunjukkan
pemisahan notochord (pewarnaan coklat kemerahan untuk chordin) dan mesoderm
paraksial (pewarnaan biru tengah malam untuk protocadherin paraksial).

Bentuk negatif dominan eksperimental dari paraksial protocadherin (yang disekresi

bukannya diikat ke sel membran) mencegah ekstensi konvergen. Selain itu, domain ekspresi
protocadherin paraksial memisahkan batang tubuh sel mesodermal, yang mengalami ekstensi
konvergen, dari kepala sel mesodermal.

Migrasi Mesoderm Involusi

Saat gerakan mesodermal berlangsung, ekstensi konvergen terus menyempit dan

memperpanjang zona marginal yang melibatkan IMZ berisi atap endodermal prospektif dari
archenteron di lapisan superfisialnya (IMZS) dan sel-sel mesodermal prospektif, termasuk
yang notochord, di wilayah dalamnya (IMZD).
 Selama sepertiga tengah gastrulasi, lembaran mesoderm yang meluas menyatu
menuju garis tengah embrio.Proses ini didorong oleh interkalasi sel mediolateral lanjutan di
sepanjang sumbu anterior-posterior, sehingga semakin mempersempit pita. Pada akhir
gastrulasi, notochord yang terletak di pusat memisahkan dari mesoderm somit di kedua
sisinya, dan sel notochord memanjang secara terpisah. Ini mungkin sebagian merupakan
konsekuensi dari perbedaan protocadherin di mesoderm aksial dan paraksial. Mesoderm
tampak otonom, karena pergerakan sel-sel ini terjadi bahkan jika daerah embrio ini secara
eksperimental diisolasi dari sisa embrio.

Selama gastrulasi, sel penutup hewan dan zona non-involusi marginal (NIMZ)
berkembang secara epiboly untuk menutupi seluruh embrio. Bagian dorsal NIMZ lebih
memanjang menuju blastopore daripada bagian ventral yang cepat, sehingga menyebabkan
bibir blastopore bergerak ke arah sisi ventral, sedangkan sel-sel mesodermal masuk melalui
bibir dorsal blastopore menimbulkan mesoderm aksial dorsal (notochord dan somit), sisa
mesoderm tubuh (yang membentuk jantung, ginjal, darah, tulang, dan bagian dari beberapa
organ lain) masuk melalui bibir blastopore ventral dan lateral untuk membuat mantel
mesodermal endoderm berasal dari sel IMZS yang membentuk lapisan atap archenteron dan
dari sel vegetal subblastoporal yang menjadi lantai arkenteron.

Fibronektin Dan Jalur Untuk Migrasi Mesodermal

Pada salamander, tampak bahwa prekursor mesodermal yang terlibat bermigrasi ke arah
kutub hewan pada kisi fibronektin yang disekresikan oleh sel-sel atap blastocoel. Gastrulasi,
ektoderm dugaan dari atap blastocoel mengeluarkan matriks ekstraseluler yang mengandung
fibril fibronectin.
 Mesoderm involuting tampaknya berjalan di sepanjang serat fibronektin ini. Hipotesis
ini diperoleh dengan mensintesis secara kimiawi fibronektin "palsu" yang dapat bersaing
dengan fibronektin asli dari matriks ekstraseluler. Sel mengikat ke wilayah fibronectin
protein yang mengandung urutan tiga asam amino.

Salah satu peneliti bernama Boucaut dan rekan kerja menyuntikkan sejumlah besar
peptida kecil yang mengandung urutan ini ke dalam blastocoel embrio salamander sesaat
sebelum gastrulasi dimulai.Jika fibronektin penting untuk migrasi sel, maka sel-sel yang
mengikat fragmen peptida terlarut ini alih-alih fibronektin ekstraseluler yang sebenarnya
harus berhenti bermigrasi Tidak dapat menemukan "jalan" mereka, sel-sel mesodermal harus
menghentikan involusinya.Itulah yang terjadi.

Tidak ada sel yang bermigrasi terlihat di sepanjang bagian bawah ektoderm dalam
embrio eksperimental. Sebaliknya, prekursor mesodermal tetap berada di luar embrio,
membentuk massa sel yang berbelit-belit.Peptida sintetis kecil lainnya (termasuk fragmen
lain dari molekul fibronektin) tidak menghalangi migrasi.

Sel-sel mesodermal diperkirakan melekat pada fibronektin melalui protein integrin

vβ1. Migrasi mesodermal juga dapat dihentikan dengan mikroinjeksi antibodi terhadap
fibronektin atau subunit integrin yang berfungsi sebagai bagian dari reseptor fibronektin telah
menunjukkan bahwa subunit v integrin muncul pada sel mesodermal sesaat sebelum
gastrulasi, bertahan pada permukaannya selama gastrulasi, dan menghilang ketika gastrulasi
berakhir. Maka, tampaknya sintesis reseptor fibronektin ini dapat menandakan waktu untuk
mesoderm untuk memulai, melanjutkan, dan hentikan migrasi.

Selain memungkinkan perlekatan sel mesodermal, matriks ekstraseluler yang

mengandung fibronektin tampaknya memberikan petunjuk untuk arah migrasi sel.Shi dan
rekan (1989) menunjukkan bahwa sel salamander IMZ akan bermigrasi ke arah yang salah
jika kisi fibronektin ekstra ditempatkan di jalurnya. Dalam Xenopus, ekstensi konvergen
mendorong sel-sel yang bermigrasi ke atas menuju kutub hewan. Fibronektin tampaknya
menggambarkan batas-batas di mana gerakan ini dapat terjadi.Fibril fibronektin diperlukan
untuk sel-sel mesodermal kepala untuk meratakan dan untuk memperluas proses luas
(lamelliform) ke arah migrasi.

Pentingnya fibril fibronektin ini juga terlihat pada hibrida interspesifik yang tidak
dapat bertahan. Delarue dan rekan (1985) telah menunjukkan bahwa hibrida tertentu yang
tidak dapat hidup antara dua spesies kodok berhenti selama gastrulasi karena mereka tidak
mensekresikan fibril fibronektin ini. Matriks ekstraseluler dari atap blastocoel, dan khususnya
komponen fibronektinnya, penting dalam migrasi sel mesodermal selama gastrulasi amfibi.

Epiboli Ectoderm

Epiboli ektoderm dilakukan dengan pembelahan sel dan interkalasi. (A,B) Pembelahan sel di
ektoderm dugaan. Pembelahan sel ditunjukkan dengan pewarnaan phosphorylated histone 3,
penanda mitosis. Inti yang diwarnai tampak hitam. Pada gastrulae awal (A; tahap 10.5),
sebagian besar pembelahan sel terjadi pada ektoderm dugaan hemisfer hewan. Pada gastrula
akhir (B; stadium 12), pembelahan sel dapat dilihat di seluruh lapisan ektoder mal.
(Menariknya, mesoderm dorsal tidak menunjukkan pembelahan sel). (C) Memindai
mikrograf elektron atap blastocoel Xenopus, menunjukkan perubahan bentuk dan susunan
sel. Tahap 8 dan 9 adalah blastula; tahap 10-11.5 mewakili gastrulae yang lebih lambat.
 Sementara involusi terjadi pada bibir blastopore, prekursor ektodermal meluas ke
seluruh embrio. Keller (1980) dan Keller dan Schoenwolf (1977) telah menggunakan
mikroskop elektron pemindaian untuk mengamati perubahan pada sel superfisial dan sel
dalam dari hewan dan daerah marjinal. Mekanisme utama epiboly dalam gastrulasi Xenopus
tampaknya menjadi peningkatan jumlah sel (melalui pembelahan) ditambah dengan integrasi
bersamaan dari beberapa lapisan dalam menjadi satu.

Penentu Progesif Sumbu Amfibi

Sumbu vertebrata tidak terbentuk dari determinan lokal di berbagai blastomer, seperti
di Drosophila. Sebaliknya, sumbu vertebrata muncul secara progresif melalui urutan interaksi
antara sel-sel tetangga.

Pembentukan sumbu amfibi adalah contoh perkembangan regulatif. Dalam membahas

konsep perkembangan regulatif, yaitu :

1. Blastomere yang terisolasi memiliki potensi yang lebih besar daripada nasib
embrio normalnya, dan
2. Nasib sel ditentukan oleh interaksi. antara sel tetangga. Interaksi semacam itu
disebut induksi.
 Bahwa interaksi induktif seperti itu bertanggung jawab atas penentuan sumbu amfibi
ditunjukkan oleh laboratorium Hans Spemann di Universitas Freiburg. Eksperimen Spemann
dan murid-muridnya membingkai pertanyaan yang diajukan oleh ahli embriologi
eksperimental pada sebagian besar abad kedua puluh, dan mereka menghasilkan Nobel
Hadiah untuk Spemann pada tahun 1935. Baru-baru ini, penemuan molekul yang terkait
dengan proses induktif ini telah memberikan beberapa momen paling menarik dalam sains
kontemporer.

Eksperimen yang memulai program penelitian ini dilakukan pada tahun 1903, ketika
Spemann mendemonstrasikan bahwa blastomer kadal air awal memiliki inti yang identik,
masing-masing mampu menghasilkan seluruh larva. Prosedurnya sangat cerdik: Tak lama
setelah membuahi telur kadal air. Spemann menggunakan rambut bayi yang diambil dari
putrinya untuk mengelas zigot di bidang pembelahan pertama. Dia kemudian menyempitkan
sebagian telur, menyebabkan semua pembelahan inti tetap berada di satu sisi penyempitan.
Akhirnya, seringkali sampai tahap 16-sel, nukleus akan lolos melintasi penyempitan ke sisi
yang tidak berinti. Pembelahan kemudian dimulai di sisi ini juga, di mana Spemann
mengencangkan laso sampai dua bagian benar-benar terpisah Larva kembar berkembang,
yang satu sedikit lebih tua dari yang lain.

Spemann menyimpulkan dari percobaan ini bahwa inti amfibi carly secara genetik.
identik dan bahwa setiap sel mampu memunculkan seluruh organisme.

Namun, ketika Spemann melakukan percobaan serupa dengan penyempitan yang

masih membujur, tetapi tegak lurus terhadap bidang pembelahan pertama (memisahkan
daerah punggung dan perut yang akan datang daripada sisi kanan dan kiri), ia memperoleh
hasil yang berbeda sama sekali. Inti terus membelah di kedua sisi penyempitan, tetapi hanya
satu sisi—sisi punggung masa depan embrio—yang memunculkan larva normal.
 Sisi lain menghasilkan massa jaringan sel ventral yang tidak terorganisir, yang oleh
Spemann disebut Bauchstück-bagian perut. Massa jaringan ini adalah bola sel epidermis
(ektoderm) yang mengandung darah dan mesenkim (mesoderm) dan sel usus (endoderm),
tetapi tidak ada struktur punggung seperti sistem saraf, notochord, atau somit

Satu kemungkinan adalah bahwa ketika telur itu dibagi tegak lurus ke bidang
pembelahan pertama, beberapa zat sitoplasma tidak terdistribusi secara merata ke dalam dua
bagian. Untungnya, telur salamander adalah tempat yang baik untuk menguji hipotesis itu.
Ada gerakan dramatis dalam sitoplasma setelah pembuahan telur amfibi, dan pada beberapa
amfibi gerakan ini memperlihatkan warna abu-abu. daerah sitoplasma berbentuk bulan sabit
di daerah yang berhadapan langsung dengan titik masuk sperma. Daerah ini telah disebut
bulan sabit abu-abu. Selain itu, bidang pembelahan pertama biasanya membagi bulan sabit
abu-abu secara merata menjadi dua blastomer.

Jika sel-sel ini kemudian dipisahkan, dua larva lengkap berkembang. Namun, jika
bidang pembelahan ini menyimpang (baik dalam hal yang jarang terjadi: peristiwa alam atau
dalam percobaan), bahan sabit abu-abu hanya masuk ke salah satu dari dua blastomer.
Spemann menemukan bahwa ketika keduanya blastomer dipisahkan, hanya blastomer yang
mengandung bulan sabit abu-abu yang berkembang secara normal.

Pada tahun 1918, Spemann menunjukkan bahwa perubahan besar dalam potensi sel
memang terjadi selama gastrulasi. Dia menemukan bahwa sel-sel gastrula awal tidak terikat,
tetapi nasib sel-sel gastrula akhir ditentukan. Spemann mendemonstrasikan hal ini dengan
bertukar jaringan antara gastrula dari dua spesies kadal air yang embrionya memiliki pigmen
yang berbeda. Ketika suatu daerah calon sel epidermis dari gastrula awal ditransplantasikan
ke daerah di gastrula awal lain di mana jaringan saraf biasanya terbentuk, sel-sel yang
ditransplantasikan memunculkan jaringan saraf. Ketika calon jaringan saraf dari gastrulae
awal ditransplantasikan ke daerah yang ditakdirkan untuk menjadi kulit perut, jaringan saraf
menjadi epidermis.

Dengan demikian, sel-sel gastrula kadal awal ini belum terikat pada nasib tertentu.
Sel-sel tersebut dikatakan menunjukkan perkembangan bersyarat (yaitu, regulatif atau
dependen) karena nasib akhir mereka bergantung pada lokasi mereka di dalam embrio.
Namun, ketika eksperimen transplantasi antarspesies yang sama dilakukan pada gastrulae
akhir, Spemann memperoleh hasil yang sama sekali berbeda. Alih-alih membedakan sesuai
dengan lokasi baru mereka, sel-sel yang ditransplantasikan menunjukkan perkembangan
otonom (atau independen, atau mosaik).

Secara khusus, sel saraf prospektif sekarang berkembang menjadi jaringan otak
bahkan ketika ditempatkan di daerah epidermis prospektif, dan epidermis prospektif
membentuk kulit bahkan di wilayah tabung saraf prospektif. Dalam waktu memisahkan
gastrulasi awal dan akhir, potensi kelompok sel ini menjadi terbatas pada jalur diferensiasi
akhirnya. Sesuatu menyebabkan mereka menjadi bertekad untuk nasib epidermal dan saraf.