M. Kalaiyarasi dkk.

/ Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 1

Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 32 (2020) 2134–214 1

Daftar isi tersedia arabSainsDirec t

Jurnal Universitas Raja Saud – Sains

beranda jurnal: www.sciencedirect.com

Artikel asli

Antibiotik produksi yang ditingkatkan menggunakan media kulit gram hijau oleh
Streptomyces sp. SD1 menggunakan metodologi permukaan respons
Mani Kalaiyarasi a, Parvaiz Ahmad b, Ponnuswamy Vijayaraghavan a,⇑
Divisi Teknik Bioprosesing, Smykon Biotech Pvt. LtD, Nagercoil, Distrik Kanyakumari, Tamilnadu, India b Departemen Botani dan
Mikrobiologi, Sekolah Tinggi Sains, Universitas King Saud, Riyadh 11451, Arab Saudi

article info Farmakologis. Streptomyces sp. menghasilkan berbagai antibiotik untuk mengobati berbagai penyakit.
Kemampuan Streptomyces sp. SD1 untuk mensintesis antibiotik menggunakan berbagai limbah agroindustri
sebagai substrat padat dievaluasi. Limbah agro yang digunakan adalah kulit nanas, dedak gandum, pomace
Sejarah artikel:
Diterima 20 November 2019 apel, dedak padi, bubuk tapioka, kulit jeruk dan sekam gram hijau untuk produksi antibiotik. Media kultur
Direvisi 25 Januari 2020 dioptimalkan dengan menggunakan berbagai karbon, nitrogen, ion, dan mineral. Untuk meningkatkan produksi
Diterima 8 Februari 2020 Tersedia metabolit maksimum, fermentasi Streptomyces sp. SD1 dioptimalkan melalui metodologi permukaan respons.
online 19 Februari 2020 RSM juga digunakan untuk menganalisis interaksi di antara faktor-faktor dan menyaring komponen medium
kultur. Streptomyces sp. SD1 memiliki kemampuan untuk menghasilkan antibiotik pada tingkat tertinggi dengan
sekam gram hijau sebagai substrat. Di antara sumber karbon, pati, dan maltosa meningkatkan produksi
Kata kunci: antibiotik. Namun, sumber yang dipilih seperti, sukrosa dan glukosa dipengaruhi secara negatif pada produksi
Streptomices sp.
antibiotik. Ekstrak daging sapi, pepton dan ekstrak ragi dipengaruhi secara positif pada produksi antibiotik.
Agro-residu
Namun, penambahan kasein dan tepung gandum menghambat produksi antibiotik. Di antara ion divalen,
Fermentasi solid state
kalsium klorida, magnesium sulfat dan mangan klorida meningkatkan produksi antibiotik, namun suplementasi
Metodologi permukaan respons
kobalt klorida dan merkuri klorida mempengaruhi produksi antibiotik. Semua sumber mineral yang dipilih
abstract
meningkatkan produksi antibiotik dan hasilnya lebih tinggi daripada kontrol. Grafik permukaan respons 3D
menunjukkan hasil maksimum antibiotik pada konsentrasi sumber nutrisi yang dipilih lebih tinggi. Produksi
antibiotik ditingkatkan 2,9 kali lipat oleh Streptomyces sp. SD1 dalam media yang dioptimalkan daripada media
yang tidak optimal. Di antara isolat, Streptomyces sp. SD1 menunjukkan aktivitas antimikroba yang tinggi.
Penemuan berbagai antibiotik
Actinomycetes yang dipilih menggunakan sekam gram hijau untuk produksi antibiotik. Juga penambahan
dari genus Streptomyces
sumber nutrisi merangsang produksi antibiotik. Sekam gram hijau sangat berguna untuk produksi antibiotik
mendapatkan perhatian yang
dalam skala besar.
baik dari Industrialis dan
2020 Para Penulis. Diterbitkan oleh Elsevier B.V. atas nama King Saud University. Ini adalah artikel akses
terbuka di bawah lisensi CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
1. Pendahuluan dua jenis substrat padat yang digunakan dalam
SSF, ini adalah substrat padat lembam yang
Fermentasi solid-state (SSF) menjelaskan kepada
dilengkapi dengan berbagai sumber nutrisi dan
substrat padat fermentasi menggunakan
substrat padat yang tersedia secara alami seperti,
mikroorganisme dengan air lebih sedikit atau
limbah agroindustri. Ini termasuk, residu tanaman
tanpa air bebas (Al-Dhabi dkk., 2016). Dalam SSF,
seperti, gandum dan beras, limbah pengolahan
⇑
buah, termasuk, nanas, anggur, wortel dll. (Al-
Penulis yang sesuai. Dhabi dkk., 2019a). Substrat ini bertindak
Alamat e-mail: venzymes@gmail.com (P. Vijayaraghavan).
Tinjauan sejawat di bawah tanggung jawab Universitas King Saud.
sebagai sumber nutrisi penting dan
mikroorganisme mengeluarkan enzim
ekstraseluler untuk memodifikasi dan memecah
substrat padat ini. Dalam kasus bahan padat
1018-3647/ 2020 Penulis. Diterbitkan oleh Elsevier B.V. atas nama King Saud University.
https://doi.org/10.1016/j.jksus.2020.02.014
Ini adalah artikel akses terbuka di bawah lisensi CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 2

lembam sintetis diperlukan sumber nutrisi diganti terutama tergantung pada kondisi kultur dan
dengan pertumbuhan dan pembentukan produk konsentrasi nutrisi (Kirk et al., 2000). Oleh karena
mikroorganisme (Al-Dhabi dkk., 2019b). Dalam itu, pemilihan dan studi komposisi medium kultur
SSF, limbah agroindustri tidak hanya memberikan yang sesuai sangat berguna untuk memastikan
nutrisi yang dibutuhkan untuk organisme, tetapi biaya rendah dan produktivitas tinggi dari proses
juga menambatkan pertumbuhan dan produksi produksi metabolit sekunder.
biomolekul (Vijayaraghavan dan Vincent, 2012; Al-
Streptomyces memanfaatkan molekul
Dhabi dkk., 2020). Umumnya, antibiotik telah
kompleks dan sederhana sebagai sumber energi
sering diproduksi oleh kultur cair dan dalam
dan nutrisi (Al-Dhabi et al., 2019d) Genus
beberapa tahun terakhir, SSF digunakan untuk
Streptomyces menghasilkan berbagai metabolit
produksi antibiotik. SSF memiliki banyak
sekunder bioaktif (Arasu et al., 2013a; Al-Dhabi
keunggulan dibandingkan fermentasi terendam.
dkk., 2014; Arasu et al., 2017). Organisme ini
SSF sangat mudah dilakukan, memiliki
memiliki banyak potensi biosintesis yang tetap
produktivitas tinggi, membutuhkan investasi
tak tertandingi tanpa pesaing yang valid di
modal yang sangat minim, membutuhkan energi
antara kelompok organisme lainnya. Banyak
yang sangat rendah, media kultur sederhana, dan
spesies Streptomyces disaring untuk produksi
aplikasi air yang lebih sedikit dan menghasilkan
metabolit sekunder dari berbagai sumber (Liu
lebih sedikit air limbah dan pengolahan hilir yang
et al., 2015; Manivasagan et al., 2013; Arasu
sederhana (Vijayaraghavan dan Vincent, 2014; Al-
dkk., 2019; Arasu et al., 2015). Sebanyak 500
Dhabi dkk., 2019c). Dalam bioproses,
strain Streptomyces berkontribusi sekitar 70-
pembentukan produk dipengaruhi oleh media
80% dari total produksi antibiotik (Arasu et al.,
kultur dan kondisi kultur yang diterapkan.
2013b). Genera lain seperti Actinoplanes,
Hubungan yang baik antara sekresi metabolit dan
Micromonospora, Amycolatopsis dan
komposisi media kultur telah diselidiki
Saccharopolyspora berkontribusi sangat sedikit
sebelumnya. Di Streptomices sp. sekresi metabolit
(Azman et al., 2015; Arokiyaraj dkk., 2015;
terutama didasarkan pada komponen media dan
Balachandran et al., 2015). Alasan penting
kondisi kultur. Konsentrasi dan komponen nutrisi
untuk penemuan antibiotik baru adalah untuk
dalam media kultur dipengaruhi pada produksi
memecahkan masalah kebal penyakit, yang
metabolit (Elibol, 2004; Al-Dhabi dkk., 2018a).
tidak lagi efektif melawan beberapa organisme
Dalam SSF, kebutuhan nutrisi bervariasi dari
patogen. Penemuan berbagai antibiotik dari
organisme ke organisme, oleh karena itu, variabel
genus ini mendapat perhatian yang baik dari
fermentasi penting, media kultur yang sesuai dan
Industrialis dan Farmakologis. SSF juga berguna
komponennya dan berbagai parameter proses
untuk produksi agen antimikroba (Rajkumaria
lainnya diperlukan untuk mengidentifikasi dan
et al., 2019; Valsalam dkk., 2019a). S.
mengoptimalkan (Singh dkk., 2017; Al-Dhabi dkk.,
clavuligerus telah dikultur di bawah kondisi
2018b). Di Streptomices sp. berbagai metabolit
kultur SSF dalam media yang dioptimalkan
sekunder dapat disintesis oleh organisme yang
untuk meningkatkan produksi sefalosporin C.
sama di berbagai lingkungan pH dan optimalisasi
Dalam penelitian lain, S. rimosus dipekerjakan
faktor sangat penting untuk mencapai antibiotik
untuk produksi oxytetracycline di bawah SSF
yang diinginkan. Streptomices adalah organisme
(Yang dan Swei, 1996). Agen antimikroba,
serbaguna, menghasilkan berbagai tingkat
polieterin A, juga disebut Nigericin, adalah
produksi metabolit sekunder. Dalam organisme
polieteriklik yang disekresikan oleh berbagai
ini, mekanisme intraseluler secara efektif
strain dari genus Streptomyces. Ini
mengontrol akumulasi metabolisme, yang
menunjukkan aktivitas yang sangat kuat sebagai
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141
aktivitas antijamur, antibakteri dan antimalaria
(Taechowisan et al., 2013; Gumila et al., 1997;
Valsalam dkk., 2019b). Industri termasuk
sayuran, buah-buahan, daging, susu, unggas,
tempat pembuatan bir, pengolahan laut dan
biji-bijian yang menghasilkan sejumlah besar
residu limbah. Industri-industri ini membuang
sumber nutrisi yang tersedia secara alami ini
sebagai bahan limbah. Organisasi Pangan dan
Pertanian memperkirakan bahwa, dalam setiap
tahun lebih dari 1,3 miliar ton bahan pangan
terbuang percuma. Limbah ini termasuk, 35%
makanan laut, 20% produk susu, 30% sereal
dan 20% daging. Residu agro banyak digunakan
sebagai substrat untuk produksi berbagai novel
Antibiotik
Dedak padi mengandung kaya protein, serat
dan minyak nabati dan telah sering digunakan
untuk produksi berbagai biomolekul (Zhang et
al., 2012). Dalam SSF, komponen media pada
awalnya disaring untuk produksi produk dan
dioptimalkan lebih lanjut untuk meningkatkan
hasil produk dengan pendekatan statistik.
Dalam produksi antibiotik, komponen nutrisi
dan kondisi fisik adalah faktor pembatas.
Merancang eksperimen dengan metode
statistik adalah alat yang efisien untuk
merancang percobaan dengan rata-rata
statistik dengan jumlah eksperimen yang relatif
kecil dan upaya minimum. Tujuan dari
penelitian ini adalah untuk mengoptimalkan
variabel bioproses dengan metodologi
permukaan respons.
2. Bahan dan metode
2.1. Isolasi spesies actinomycetes
Pengambilan sampel dan isolasi actinomycetes
Sebanyak 10 sampel mangrove dikumpulkan dari
mangrove Manakudy di tiga stasiun berbeda
menggunakan wadah plastik berlabel pre
menggunakan spatula dan tertutup rapat. Sampel
3
yang dikumpulkan disimpan dalam kotak es dan
dipindahkan ke laboratorium. Dalam penelitian
ini, sifat fisiko-kimia sampel tanah dari tiga lokasi
pengambilan sampel dianalisis untuk mempelajari
sifat tanah. Sifat-sifat seperti, tekstur, warna,
salinitas, nitrogen, kandungan fosfor, pH,
magnesium, klorida dan kandungan kalsium
dianalisis. Actinomycetes awalnya diisolasi dari
sampel menggunakan metode pelat sebar
menggunakan actinomycetes isolation agar (g/ L)
(natrium kaseinat-2, L-Asparagine-0.1, natrium
propionat-4, dipotassium fosfat-0.5, magnesium
sulfat-0.001 dan agar15) dan pati kasein agar (g/L)
pati larut -10, kasein-0.3, kalium nitrat-2,
magnesium sulfat- 0,05, di-kalium hidrogenfosfat-
2, natrium klorida-2, besi sulfat-0,01 dan agar-18),
dan diinkubasi selama 14 hingga 21 hari pada 28
C. Media kultur dilengkapi dengan nistatin (50
mg/ml) dan gentamycin sulfat (25 mg/ml) untuk
mengurangi kontaminasi jamur dan bakteri,
masing-masing. Setelah 28 hari inkubasi, budaya
dimurnikan dengan metode standar (Hayakawa
dan Nonomura, 1987; Crawford et al., 1993; Yu
dkk., 2013).
2.2. Skrining utama actinomycetes untuk produksi antibiotik
Aktivitas antibakteri diuji terhadap
Staphylococcus aureus MTCC96, Bacillus subtilis
MTCC 441 dan Escherichia MTCC 64.
Actinomycetes yang terisolasi disaring untuk
aktivitas antagonis dengan menginokulasi garis
satu garis actinomycetes di tengah lempeng petri.
Kemudian lempeng-lempeng tersebut diinkubasi
selama 6 hari pada suhu 28 C dan diunggulkan
dengan berbagai strain bakteri dengan satu garis
dan lempeng-lempeng tersebut selanjutnya
diinkubasi pada suhu 28 C selama 1-2 hari.
Aktivitas antagonis kemudian ditentukan sebagai
zona penghambatan (mm) (Wu, 1984). Strain
Streptomyces yang menunjukkan aktivitas yang
baik terhadap bakteri uji diuji lebih lanjut dengan
metode agar-agar baik.
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141
2.3. Penyaringan sekunder
Actinomycetes terisolasi yang menunjukkan
aktivitas ampuh terhadap B. subtilis MTCC 441
diinokulasi ke dalam media budaya Actinomycetes
dan diinkubasi selama 2 minggu pada 175 rpm
(Madigan et al., 1997). Setelah 2 minggu,
metabolit sekunder diekstraksi menggunakan
pelarut seperti, metanol, etanol, etil asetat,
heksana dan aseton. Pelarut diuapkan dan uji
antibakteri dilakukan dengan metode Kirby-Bauer.
Fraksi etil asetat dimuat pada cakram 6 mm steril,
dikeringkan dan ditempatkan pada pelat kultur B.
subtilis MTCC 441. Untuk disk kontrol, etil asetat
dimuat dan dikeringkan. Zona diameter diperoleh
dan ukuran zona penghambatan dianggap sebagai
titer antibiotik seperti yang dijelaskan oleh
Maxwell et al. (1994).
2.4. Karakterisasi morfologis dan pengurutan 16S rDNA
Antibiotik maksimum yang menghasilkan strain
Streptomyces ditanam pada media ISP dan kultur
diidentifikasi berdasarkan karakter morfologis,
termasuk produksi pigmen, morfologi spora dan
hifa udara. Actinomycete ampuh yang terisolasi
ditanam actinomycetes isolasi agar medium.
Pengurutan gen 16S rDNA dilakukan dengan
metode standar. DNA genomik dari Streptomyces
sp. yang kuat dilakukan dengan menggunakan kit
pemurnian DNA (Qiagen, USA). Gen 16S rRNA
diperkuat dengan menggunakan forward (5 0-
GTTGGATCCAGAGTTTGATCMTGGCT-3 0) dan
reverse (50- GTTGGATCCACGGYTACCTTGTTA CG-
30), primer (Sambrook et al., 1989).
2.5. Limbah agroindustri untuk produksi antibiotik
Kulit nanas, dedak gandum, pomace apel, dedak
padi, bubuk tapioka, sekam gram hijau dan kulit
jeruk dikeringkan pada suhu 60 C untuk
semalaman. Semua residu agro digiling dengan
baik dan dilewatkan menggunakan mesh standar
(saringan 30 mesh). Semua substrat langsung
digunakan tanpa pretreatment.
4
2.6. Produksi antibiotik dengan fermentasi solid-state (SSF)
Sekitar 5 g substrat (kulit nanas, dedak gandum,
pomace apel, dedak padi, bubuk tapioka, sekam
gram hijau dan kulit jeruk) diambil dan kadar air
disesuaikan hingga 65%. Labu disterilkan dan
inokulum 0,5 ml diperkenalkan. Budaya ini sering
dicampur dan diinkubasi selama 8 hari pada 30 ±
2 C. Setelah 8 hari, metabolit sekunder kasar
diekstraksi, disaring, disentrifugasi dan digunakan
sebagai antibiotik kasar.
2.7. Penyaringan variabel dengan metode tradisional
Produksi antibiotik dilakukan dengan
menggunakan sekam gram hijau sebagai substrat
padat sampai dinyatakan lain. Parameter proses
seperti, sumber karbon, sumber nitrogen, ion
divalen dan mineral dievaluasi. Komponen
medium yang dipilih dimasukkan ke dalam labu
Erlenmeyer yang mengandung sekam gram hijau
sebagai media nutrisi utama. Setelah sterilisasi,
mendinginkan media kultur, 0,5 ml inokulum
(10%, v / w) diinokulasi dalam labu Erlenmeyer.
Produksi antibiotik Streptomyces sp.
diukur setelah 8 hari inkubasi pada 28 ± 2 C.
2.8. Optimalisasi komponen sedang
CCD dan Response Surface Methodology (RSM)
digunakan untuk menyaring maltosa, CaCl 2 dan
NaH2PO4 untuk meningkatkan produksi antibiotik
berdasarkan kegiatan yang diperoleh dari metode
optimasi tradisional. Komponen medium yang
dipilih dipelajari untuk menentukan nilai optimal.
Percobaan ini dilakukan dalam 20 uji coba
percobaan yang berbeda dengan analisis
eksperimen rangkap tiga. Untuk perhitungan
model statistik, matriks dirancang berdasarkan
persamaan berikut 1.
X0
xdan 1/4 Xdan ; dan 1/40; 1;
2; 3;...; n; dXdan
di mana xi – menunjukkan variabel independen
yang dipilih untuk nilai yang dikodekan, Xi –
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 5

nilai asli dari variabel yang dipilih, X0 – nilai titik dipilih terhadap Staphylococcus aureus
tengah dari nilai aktual variabel independen, MTCC96, Bacillus subtilis MTCC 441 dan
dan –nilai perubahan langkah Xi. Escherichia MTCC 64. Sekitar 59% dari isolat
menunjukkan sifat antimikroba dan sebagian
Central compositedesigndan responsesurface
besar sampel ditemukan efektif terhadap
methodologywas digunakan untuk Bacillus subtilis MTCC 441. Di antara
mengoptimalkan variabel proses. Persamaan actinomycetes, Streptomyces sp. SD1
model kuadrat berguna untuk menganalisis menunjukkan produksi hiper; oleh karena itu ini
dipertahankan untuk meningkatkan produksi
perilaku persamaan kuadrat. Y 1/4b0 þRbiXi þRbijXi X
agen antimikroba. Karakter morfologis
iXj þRbiiX2i
mengungkapkan bahwa ia berada di bawah
di mana Y = prediksi respons, b0 = istilah Streptomyces sp. Isolat yang dipilih
intersep, bi = koefisien linier, bij = koefisien diidentifikasi dengan pendekatan molekuler.
kuadrat, b = koefisien interaksi, XiXi = variabel Karakteristik pertumbuhan Streptomyces sp.
independen. yang dipilih dilakukan pada berbagai tingkat pH
dan suhu. Temuan saat ini mengungkapkan
Analisis varians (ANOVA) digunakan untuk bahwa isolat ini mampu tumbuh dengan baik
memverifikasi model yang dirancang. antara 22 dan 37 C dan pada pH berkisar antara
Signifikansi model yang dirancang ditentukan 6,5 hingga 8,0. Pertumbuhan maksimum
menggunakan uji-F dan nilai-p < 0,05 dianggap diperoleh pada 28 C dan pH 7,2. Isolat ini positif
sebagai model CCD yang dirancang signifikan. untuk tes kitinase, katalase dan oksidase,
Dalam percobaan ini, respons yang diprediksi hidrolisis pati, dan menunjukkan hasil negatif
divalidasi oleh eksperimen rangkap tiga. untuk tes indole dan positif untuk
3. Hasil dan diskusi Tabel 1
Parameter fisiko-kimia sampel tanah dikumpulkan dari tiga lokasi pengambilan

3.1. Antibiotik yang memproduksi actinomycete sampel yang berbeda di hutan mangrove Manakudy .

Secara keseluruhan, 36 aktinomiceta bakau Sifat tanah Situs

Stasiun 1 Stasiun 2 Stasiun 3
disaring dari tiga lokasi terpilih di hutan bakau pengambilan
Tekstur Tanah liat Sandy tanah liat liat Sandy tanah
sampel
berpasir
Manakudy, India Selatan (Gbr. 1). Parameter liat
fisiko-kimia dari ketiga situs ini sangat bervariasi Warna Hitam Hitam Hitam
Salinitas (ppt) 17.2 10.3 28.3
dan hasilnya ditabulasikan pada Tabel 1. Jumlah Nitrogen (g/kg) 57 87 65
Fosfor (g/kg) 65 53 49
actinomycetes terisolasi bervariasi di antara Ph 7.6 7.2 7.3
stasiun. Di antara semua situs yang dipilih, situs Magnesium (g/kg) 0.41 0.26 0.18

3 menunjukkan 71% actinomycetes. Ekstrak etil

asetat dari isolat ini secara efektif menghambat
pertumbuhan patogen bakteri. Actinomycetes
yang diisolasi dari sedimen tanah bakau
menunjukkan bentuk, warna, dan tekstur koloni
yang beragam . Awalnya, skrining aktivitas
antimikroba dievaluasi dari Actinomycetes yang

Gambar 1. Stasiun pengambilan sampel tanah hutan mangrove Manakudy. Sampel dikumpulkan dari ketiga stasiun ini di 10 tempat. Warna tanahnya hitam dan dikumpulkan
menggunakan spatula steril.
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141
Klorida (mg/kg) 1.3 0.93
Kalsium (mg/kg) 1.6 0.91
Ara. 2a. Aktivitas antibakteri Streptomyces sp. SD1 terhadap B. subtilis MTCC
441. Strain ini dikultur dalam berbagai limbah agroindustri dalam keadaan padat
fermentasi dan aktivitas antibakteri diuji (WB – dedak gandum; AP – Kulit apel;
RB – Dedak padi; GGH – Sekam gram hijau; OP – Kulit jeruk; TP – Bubuk Topioca
dan PAP – Kulit apel pinus). Sekitar 20 ml sampel dimuat dan diinkubasi selama
24 jam.
produksi melanin. Actinomyces telah digunakan
untuk menghasilkan berbagai molekul timbal
antimikroba. Ancaman berbagai organisme
resisten obat ganda menjadi perhatian serius di
berbagai negara (Hamers et al., 2012). Studi
yang disoroti pada isolasi dan skrining
Streptomyces dari mangrove yang berasal dari
tiga lokasi disaring untuk antimikroba yang
kuat. Actinomycetes yang terisolasi terutama
dari genus Streptomyces sp. menunjukkan
berbagai sifat biologis. Sebelumnya, banyak
Streptomyces sp. disaring untuk antimikroba
yang diisolasi dari lingkungan akuatik (Bruntner
et al., 2005; Rao et al., 2012). Berdasarkan
temuan saat ini, Streptomyces sp. SD1 dipilih
untuk produksi antibiotik yang dioptimalkan
dalam SSF. SSF efektif untuk mensintesis
spektrum luas agen antimikroba dengan sifat
baru, karena kondisi prosesnya sangat mirip
dengan habitat alami Streptomyces sp.
daripada fermentasi terendam.
6
1.42 3.2. Residu dan antibiotik agroindustri
2.2
Faktor penting untuk pertumbuhan bakteri dan
produksi berbagai biomolekul adalah ukuran
partikel, jenis substrat, dan kapasitas
penampungan kelembaban medium dan nilai
nutrisi bahan baku dalam SSF. Bahan substrat
kecil menyediakan area permukaan yang sangat
besar untuk penahan sel mikroba. Pada saat yang
sama, substrat tepung yang sangat kecil dapat
sangat mengganggu respirasi sel mikroba, dan
dengan demikian menyebabkan pertumbuhan
yang buruk (Vijayaraghavan dan Vincent, 2012;
Pandey, 1991). Aktivitas antibakteri ekstrak kasar
dari Streptomyces sp. SD1 yang dikultur di
berbagai substrat diuji terhadap B. subtilis MTCC
441 dan zona penghambatan ditentukan (Gbr.
2a). Dalam studi ini, sekam gram hijau
merangsang produksi antibiotik daripada substrat
pilihan lainnya (212 ± 8 substrat U/g) (Gbr. 2b).
Dalam Streptomyces sp. strain MAR01, dedak
gandum mendukung produksi Meroparamycin
daripada substrat seperti, quaker, roti dan jagung
giling (El-Naggar et al., 2009). Sebelumnya,
banyak Streptomyces sp. telah digunakan untuk
produksi agen antimikroba menggunakan kulit
kacang tanah, tongkol jagung, kulit singkong dan
pomace jagung. Di antara substrat yang dipilih,
kacang tanah meningkatkan produksi tetrasiklin
(Asagbra et al., 2005).
Ara. 3a. Aktivitas antibakteri Streptomyces sp. SD1 terhadap B. subtilis MTCC 441.
Strain ini dikultur dalam media sekam gram hijau yang mengandung berbagai
sumber karbon dalam SSF dan aktivitas antibakteri diuji (ST – Pati; MA – Maltosa; GL
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 7

– Glukosa; XY – Xylose dan SU – Sukrosa). Sekitar 20 ml sampel dimuat dan zona penghambatan diukur.

Ara. 2b. Efek residu agroindustri untuk produksi antibiotik. Streptomyces sp. SD1 ditanam pada limbah ini dan aktivitas antibiotik diuji.

Ara. 3b. Pengaruh sumber karbon (1%) terhadap produksi antibiotik dari sekam gram hijau dengan menggunakan Streptomyces sp. SD1 pada SSF.

maltosa memaksimalkan produksi antibiotik,

namun, sukrosa dan glukosa dipengaruhi secara
negatif pada produksi antibiotik. Zona
penghambatan terhadap strain bakteri yang diuji
dijelaskan pada Gambar 3a dan hasil enzim total
dijelaskan pada Gambar 3b. Efek stimulasi dari
berbagai sumber nitrogen pada tingkat 1% (b/b)
pada sintesis antibiotik dianalisis. Di antara
sumber nitrogen, ekstrak daging sapi, pepton dan
ekstrak ragi secara positif dipengaruhi pada
produksi antibiotik. Zona penghambatan
metabolit sekunder terhadap bakteri indikator
dijelaskan pada Gambar 4a. Hasil antibiotik sangat
Ara. 4a. Aktivitas antibakteri Streptomyces sp. SD1 terhadap B. subtilis MTCC 441. bervariasi berdasarkan sumber nitrogen yang
Strain ini dikultur dalam media sekam gram hijau yang mengandung berbagai
sumber nitrogen dalam SSF dan aktivitas antibakteri diuji (BE – Ekstrak daging sapi; digunakan dalam SSF (Gbr. 4b). Si
YE – Ekstrak ragi; PE – Peptone; CA – Kasein dan OM – Tepung oat). Sekitar 20 ml
sampel dimuat dan zona penghambatan diukur.

3.3. Skrining faktor nutrisi dengan pendekatan satu variabel pada satu
waktu

Sumber karbon dipengaruhi pada produksi

antibiotik dan hasilnya dianalisis. Pati, dan
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 8

Ara. 5a. Aktivitas antibakteri Streptomyces sp. SD1 terhadap B. subtilis MTCC 441.
Strain ini dikultur dalam media sekam gram hijau yang mengandung berbagai
sumber ionik dalam SSF dan aktivitas antibakteri diuji. Ion divalen, Co2+, Ca2+, Mg2+,
Hg2+ dan Mn2+ digabungkan dengan media kultur. Sekitar 20 ml sampel dimuat dan
zona penghambatan diukur.

Std A:Maltosa B:CaCl2 C: no2PO4 Aktivitas antibiotik (U/g)

1 0.10 1.50 1.00 479
2 0.30 0.90 0.55 990
3 0.30 0.90 0.55 976
4 0.50 1.50 0.10 872
5 0.30 0.90 0.55 908
6 0.30 0.11 0.55 1.00 375 900
7 0.50 0.30
8 0.30 0.90 1.31 919
Ara. 4b. Pengaruh sumber nitrogen (1%) untuk produksi antibiotik dari sekam
9 0.30 0.90 0.55 976
gram hijau dengan menggunakan Streptomyces sp. SD1 dalam SSF. 10 0.10 0.30 1.00 513
penghambatan dijelaskan pada Gambar 5a. Ion, 11 0.30 0.90 0.21 1459 1047
12 0.50 0.30
seperti, kalsium klorida, magnesium sulfat dan 0.10
13 0.64 0.90 0.55 745
mangan klorida meningkatkan produksi 14 0.04 0.90 0.55 475
antibiotik, namun suplementasi kobalt klorida 15 0.30 1.91 0.55 246

dan merkuri klorida mempengaruhi produksi 16 0.50 1.50 1.00 430

17 0.10 0.30 0.10 600
antibiotik 18 0.30 0.90 0.55 987
19 0.10 1.50 0.10 945
20 0.30 0.90 0.55 976
Tabel 2a

Tabel 2b desain
eksperimental.
Analisis varians untuk produksi antibiotik menggunakan komposit Sentral
Sumber Jumlah dari Df Berarti Nilai-F p-nilai
Kotak Lapangan

Pola 1.667E +06 9 1.852E +05 167.79 <0.0001 penting

A-Maltosa 99565.54 1 99565.54 90.19 <0.0001

B-CaCl2 22226.74 1 22226.74 20.13 0.0012

C-NaH2PO4 3.078E +05 1 3.078E +05 278.79 <0.0001

OFF 1.142E +05 1 1.142E +05 103.48 <0.0001

DAN 162.00 1 162.00 0.1467 0.7097

SM 56784.50 1 56784.50 51.44 <0.0001

SEBUAH2 2.049E +05 1 2.049E +05 185.57 <0.0001

B2 7.303E +05 1 7.303E +05 661.56 <0.0001

C2 1.053E +05 1 1.053E +05 95.38 <0.0001

Sisa 11039.54 10 1103.95

Kurang Fit 6406.71 5 1281.34 1.38 0.3654 tidak

signifikan
Kesalahan Murni 4632.83 5 926.57

Total Warna 1.678E +06 19

 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 9

Desain komposit pusat untuk produksi antibiotik dalam fermentasi solid state menggunakan Streptomyces sp. SD1.

Ara. 5b. Pengaruh sumber ionik (1%) untuk produksi antibiotik dari sekam gram hijau dengan menggunakan Streptomyces sp. SD1 dalam SSF.

Ara. 5c. Aktivitas antibakteri Streptomyces sp. SD1 terhadap B. subtilis MTCC 441. Strain ini dikultur dalam media sekam gram hijau yang mengandung berbagai sumber mineral

(Na2H – disodium hidrogen fosfat; K2H – dipotassium hidrogen fosfat; KH2P – kalium dihidrogen fosfat; NaH – natrium dihidrogen fosfat; C – kontrol). Sekitar 20 ml sampel
dimuat dan zona penghambatan diukur.

media kulit gram hijau dilengkapi dengan ion dan mineral divalen, secara individual untuk mengevaluasi
efek stimulasi pada produksi antibiotik. Efek suplementasi berbagai ion divalen pada konsentrasi 0,1%
(b/b) diuji dan zona

Ara. 5d. Pengaruh mineral (1%) untuk produksi antibiotik menggunakan sekam gram hijau oleh Streptomyces sp. SD1 pada SSF.

(Gbr. 5b). Produksi antibiotik sangat ditingkatkan

dengan suplementasi berbagai sumber karbon
sebagai suplemen nutrisi dalam media fermentasi
(Mahalaxmi et al., 2010). Semua sumber mineral
yang dipilih, meningkatkan produksi antibiotik dan
hasilnya lebih tinggi daripada kontrol dan zona
penghambatan
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 10

dihitung (Gbr. 5c). Produksi metabolit sekunder

maksimum dalam media kultur yang mengandung
natrium dihidrogen fosfat, diikuti oleh kalium
dihidrogen fosfat (Gbr. 5d). Dalam Streptomyces
fradiae NCIM 2418, produksi neomisin
ditingkatkan oleh tembaga sulfat dan seng sulfat
dengan coco-

Gambar 6. a–c. Plot permukaan respons yang menjelaskan efek individu dan interaktif dari faktor-faktor pada aktivitas antimikroba Streptomyces sp. SD1.

kue minyak kacang (Vastrad dan Neelagund, 2014). Juga, natrium nitrat dan amonium klorida secara
positif dipengaruhi pada produksi neomisin, namun, sumber karbon, glukosa, sukrosa, maltosa, pati,
besi sulfat menunjukkan dampak yang lebih kecil pada produksi neomisin. Dalam S. aureofaciens,
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 11

produksi tetrasiklin dipengaruhi secara kritis ketika 10% pati larut diperkaya dengan residu ubi jalar
(Yang dan Ling, 1989). Dalam Streptomyces rimosus, suplementasi 1% (b/b) CaCO 3, meningkatkan
produksi tracycline di SSF ketika tongkol jagung digunakan sebagai media padat (Yang dan Swei,
1996).
3.4. Desain komposit pusat dan metodologi permukaan respons

Faktor nutrisi yang dipilih meningkatkan produksi antibiotik dan hasilnya bervariasi dari 246 U/g
hingga 1459 U/g. Matriks yang dirancang dan respons CCD ditabulasikan (Tabel 2a). Fvalue dari
desain kuadrat yang dipasang adalah 167,79 menyiratkan model kuadrat yang dirancang signifikan
secara statistik. Dalam model yang dirancang ini semua faktor dan efek interaktif secara statistik
signifikan. Nilai R 2 yang diprediksi adalah 0,9663 dan nilai R2 yang disesuaikan adalah 0,987.
Kurangnya nilai fit adalah 0,3654 dan secara statistik tidak signifikan (Tabel 2b). Seperti yang
dijelaskan dalam hasil, RSM adalah alat utama untuk mengidentifikasi dan menentukan konsentrasi
nutrisi untuk produksi antibiotik. Grafik 3D menggambarkan interaksi antara Maltosa dan CaCl 2,
Maltosa dan NaH2PO4, Maltosa dan NaH2PO4. Ketiga grafik permukaan respons 3D menunjukkan
hasil maksimum antibiotik pada konsentrasi sumber nutrisi yang lebih tinggi (Gbr. 6a–c). Respons
yang diprediksi adalah 1468 U/g dan ini hampir mirip dengan nilai eksperimental (1473 U/g)
memvalidasi model yang dirancang. Dalam penelitian ini, produksi antibiotik meningkat 2,9 kali lipat
oleh Streptomyces sp. SD1 dalam media yang dioptimalkan daripada media yang tidak dioptimalkan.
Dalam beberapa tahun terakhir, RSM telah banyak digunakan untuk produksi berbagai antibiotik.
RSM digunakan untuk sintesis neomisin (Vastrad dan Neelagund, 2014), enzim fibrinolitik
(Vijayaraghavan et al., 2016) dan streptomisin (Saval et al., 1993).

4. Kesimpulan

Tiga puluh enam strain actinomycete yang berbeda secara morfologis diisolasi dari sedimen tanah
bakau. Di antara isolat, Streptomyces sp. SD1 menunjukkan aktivitas antimikroba yang tinggi
terhadap patogen bakteri Gram positif. Streptomyces sp. SD1 yang dipilih menggunakan sekam
gram hijau sebagai substrat murah untuk produksi antibiotik. Juga penambahan sumber karbon,
nitrogen dan ionik merangsang produksi antibiotik. RSM dioptimalkan sedang meningkatkan
produksi antibiotik 2,9 kali lipat.
Deklarasi Kepentingan bersaing

Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki kepentingan keuangan yang bersaing atau
hubungan pribadi yang dapat tampaknya mempengaruhi pekerjaan yang dilaporkan dalam makalah
ini.
Pengakuan

Para penulis menyampaikan apresiasinya kepada The Researchers Supporting Project Number (RSP-
2019/116) King Saud University, Riyadh, Arab Saudi.

Referensi Gumila, C., Ancelin, M.L., Delort, A.M., Jeminet, G., Vialj, H., 1997. Karakterisasi
aktivitas in vitro yang ampuh dan antimalaria in vivo dari senyawa
ionofor.
Antimikrob. Agen Kemoterapi. 41, 523–529.
Al-Dhabi, N.A., Duraipandiyan, V., Arasu, M.V., Ponmurugan, K., Ignacimuthu, S.,
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 12

Hamers, R.L., Kityo, C., Lange, J.M.A., Rinke-deWit, T.F., Mugyenyi, P., 2012.

Global 2014. Metabolit antijamur dari spons terkait Streptomyces sp laut. ancaman dari HIV resisten obat di Afrika sub Sahara. Med Inggris. J. J. 344, e4159.
strain (ERIMA-01). J. Murni Appl. Microbiol. 8 (2), 115–128.
Hayakawa, M., Nonomura, H., 1987. Agar-agar asam-vitamin humat,
media baru untuk
Al-Dhabi, N.A., Esmail, G.A., Duraipandiyan, V., Valan Arasu, M., Salem-Bekhit, M.M., isolasi selektif aktinomiceta tanah. J. Ferment. Technol. 65 (5), 501– 2016. Isolasi,
identifikasi, dan skrining termofilik antimikroba
509.
Streptomyces sp. Al-Dhabi-1 terisolasi dari pemandian air panas Tharban, Arab Saudi.
Kirk, S., Avogmpme-Rossa, C.A., Bushell, M.E., 2000. Pertumbuhan

membatasi substrat Extremophiles 20, 79–90. mempengaruhi produksi antibiotik dan cerobong metabolisme terkait di Streptomyces
Al-Dhabi, N.A., Esmail, G.A., Ghilan, A.K.M., Arasu, M.V., Duraipandiyan, V. , clavuligerus. Bioteknologi. Lett. 22, 1803–1809.
Ponmurugan, K., 2020. Optimalisasi karakterisasi dan fermentasi
Liu, D., Lin, H., Proksch, P., Tang, X., Shao, Z., Lin, W., 2015. Mikrobakteri A
dan B,
protease alkali stabil termo baru dari Streptomyces sp. Al-Dhabi-82 dari peptaibol baru dari laut dalam actinomycete Microbacterium sediminis sp.
lingkungan Arab Saudi untuk aplikasi ramah lingkungan dan industri. J. november. YLB-01(T). Org. Lett. 17, 1220–1223.
Raja Saud Univ. – Sci. 32 (1), 1258–1264.
Madigan,M.T.,Martiko,J.M., Parker,J ., 1997. Antibiotik:
isolasi dan
Al-Dhabi, N.A., Ghilan, A.K.M., Esmail, G.A., Arasu, M.V., Duraipandiyan, V., karakterisasi, dalam Brock Biology of Microorganisms, 8th Edn., ed M. T.
Ponmurugan, K., 2019. Penilaian bioaktivitas Laut Arab Saudi
Madigan (New Jersey: Prentice-Hall International Inc., 440–442.
Streptomyces sp. Al-Dhabi-90, profiling metabolik dan penghambatan in vitro-nya
Mahalaxmi, Y., Sathish, T., Subba Rao, C.H., Prakasham, R.S., 2010. Kulit
jagung sebagai
properti terhadap substrat novel beta-laktamase yang tahan multidrug dan spektrum luas untuk produksi rifamycin B oleh Amycolatopsis sp yang terisolasi.
patogen bakteri klinis, J. Infeksi Kesehatan Masyarakat 549–556.
RSP 3 di bawah SSF. Proses Biokimia 45, 47–53.
Al-Dhabi, N.A., Ghilan, A.-K.M., Arasu, M.V., 2018b. Karakterisasi perak
Manivasagan,P ., Venkatesan,J ., Sivakumar,K ., Kim,S.K .,

2013. Marine
nanomaterial yang berasal dari Streptomyces sp laut. Al-Dhabi-87 dan metabolit aktininobacterialnya: status saat ini dan perspektif masa depan. Mikrobiol.
aplikasi in vitro terhadap beta multidrug resistant dan extended-spectrum-
Tidak ada. 168, 311–332.
laktamase. Clin. Patogen. Nanomater. 8 (5).
Maxwell, P.W., Chen, G., Webster, J.M., Dunphy, G.B., 1994. Stabilitas dan
kegiatan
Al-Dhabi, N.A., Ghilan, A.K.M., Arasu, M.V., Duraipandiyan, V., 2018a. Green antibiotik yang diproduksi selama infeksi serangga Galleria mellonella oleh dua
biosintesis nanopartikel perak yang dihasilkan dari Streptomyces sp laut. isolat Xenorhabdus nematophilus. Mikrobiol. 60, 715–721.
Al-Dhabi-89 dan aplikasi potensial mereka terhadap infeksi luka dan obat-obatan
Pandey, A., 1991. Pengaruh ukuran partikel substrat terhadap produksi
enzim padatan-
patogen klinis resisten. J. Photochem. Fotobiol., B 189, 176–184. fermentasi negara. Bioresour( dalam bahasa Inggris). Teknol. 37, 169–172.
Al-Dhabi, N.A., Esmail, G.A., Duraipandiyan, V., Valan Arasu, M., 2019a. Kimia
Rajkumaria, J., Magdalane, M., Siddhardh, B., Madhavan, J., Ramalingam,
G., Al-

profiling of Streptomyces sp.Al-Dhabi-2 pulih dari ekstrem e

Dhabi, N.A., Arasu, M.V., Ghilan, A.K.M., Duraipandiayan, V.,
Kaviyarasu, K.,
lingkungan di Arab Saudi sebagai sumber obat baru untuk medis and
2019. Sintesis nanopartikel titanium oksida menggunakan pabrik Aloe
barbadensis dan
aplikasi industri. Saudi. J. Biol. Sci. 26, 758–766. evaluasi potensi antibiofilm terhadap Pseudomonas aeruginosa PAO1. J.
Al-Dhabi, N.A., Esmail, G.A., Ghilan, A.K.M., Arasu, M.V., 2019b. Isolasi dan
Fotokimia. Fotobiol. B: Biol. 111667.
skrining Streptomyces sp. Al-Dhabi-49 dari lingkungan Saudi
Rao,R.K.V., Sivakumar,K ., Bhaskar,D.B ., Rao,R.T.,2012.
Isolasi and
Arab dengan produksi bersamaan lipase dan protease dalam karakterisasi aktininobacteria antagonistik yang terendam dari tanah bakau. J. J.
Fermentasi. Saudi. J. Biol. Sci. https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2019.11.011.
Biokimia. Technol ( dalam bahasa Inggris). 3, 361–365.
Al-Dhabi, N.A., Ghilan, A.K.M., Arasu, M.V., Duraipandiyan, V., Ponmurugan, K.,
Sambrook, J., Fritsch, E.F., Maniatis, T., 1989. Kloning Molekuler:
Laboratorium
2019c. Sintesis nanomaterial perak yang ramah lingkungan dari
Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Woodbury, NY.
menjanjikan Streptomyces parvus strain Al-Dhabi-91 pulih dari Saudi
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 13

Saval, S., Pablos, L., Sanchez, S., 1993. Optimalisasi media kultur untuk

wilayah laut Arab untuk sifat antimikroba dan antioksidan. J. J. produksi streptomisin menggunakan metodologi response-surface. Bioresour( dalam bahasa Inggris).
Fotokimia. Fotobiol., B: Biol. 197, 111529.

Technol ( dalam bahasa Inggris). 43, 19–25.

Arasu, M.V., Al-Dhabi, N.A., Saritha, V., Duraipandiyan, V., Muthukumar, C., Kim, S.-
Singh, V., Haque, S., Niwas, R., Srivastava, A., Pasupuleti, M., Tripathi, C.K.,

2017. J., 2013a. Bioaktivitas antifeedan, larvicidal dan penghambatan pertumbuhan novel
Strategi untuk optimasi media fermentasi : tinjauan mendalam.
Depan.
poliketida metabolitdiisolasi dari m Streptomices sp.AP-123 lagit
Mikrobiol. 7, 2087.
Helicoverpa armigera dan Spodoptera litura. BMC Mikrobiol. 13 (1), 105.
Taechowisan, T., Chanaphat, S., Ruensamran, W., Phutdhawong, W.S.,

2013. Arasu, M.V., Duraipandiyan, V., Ignacimuthu, S., 2013b. Antibakteri dan antijamur

Aktivitas antibakteri 1-metil ester-

nigericin dari from Streptomycxes
kegiatan metabolit poliketida dari Streptomices laut sp. AP-123 dan hygroscopicus BR10: Endofit di Alpinia galanga. J. Appl. Pharm.
efek sitotoksik. Kemosfer 90 (2), 479–487.
104–109.
Arasu,M.V.,Al-Dhabi,N.A ., Choi,K.I ., 2015. Identifikasi novel quinine
Valsalam, S., Agastian, P., Esmail, G.A., Ghilan, A.K.M., Al-Dhabi, N.A.,
Arasu, M.V.,
metabolit dari aktinomiceta laut dengan bio antijamur dan antikanker-
2019b. Biosintesis nanopartikel perak dan emas menggunakan Musa
acuminata
Calon. Lingkungan Fresenius. Sapi. 24 (10a), 3281–3287. bunga colla dan aktivitas farmasinya terhadap bakteri dan antikanker
Arasu, M.V., Thirumamagal, R., Srinivasan, M.P., Al-Dhabi, N.A., Ayeshamariam, A., kemanjuran. Fotokimia. Fotobiol., B 111670.
Saravana Kumar, D., Punithavel, N., Jayachandran, M., 2017. Bahan kimia hijau
Valsalam, S., Agastian, P., Arasu, M.V., Al-Dhabi, N.A., Ghilan, A.K.M.,
Kaviyarasu, K.,
pendekatan terhadap sintesis CeO2 yang didoping dengan kerang dan bakterinya
Ravindran, B., Chang, S.W., Arokiyaraj, S., 2019a. Biosintesis cepat dan
aplikasi menengahi dengan ekstrak buah. J. Photochem. Fotobiol., B 172, karakterisasi nanopartikel perak dari ekstrak daun Tropaeolum 50-60. majus L. dan ditingkatkan
in-vitro antibakteri, antijamur, antioksidan dan
Arasu, M.V., Arokiyaraj, S., Viayaraghavan, P., Kumar, T.S.J., Duraipandiyan, V., Alantikanker properti. Fotokimia. Fotobiol., B 191, 65–74.
Dhabi, N.A., Kaviyarasu, K., 2019. Satu langkah sintesis hijau larvicidal, dan azo
Vastrad, B.M., Neelagund, S.E., 2014. Optimalisasi komposisi sedang untuk
pewarna yang mendegradasi nanopartikel antibakteri dengan metodologi permukaan respons. J. produksi neomisin oleh Streptomyces fradiae NCIM 2418 dalam keadaan

padat Photochem. Fotobiol., B 190, 154–162. Fermentasi. Bioteknologi. Res. Int., 11 ID Artikel 674286.
Arokiyaraj,S ., Saravanan,M ., Badathala,V ., 2015. Sintesis hijausilve r
Vijayaraghavan,P ., Prakash Vincent,S.G ., 2014. Optimalisasi
statistik
nanopartikel menggunakan ekstrak berair Taraxacum officinale dan itus produksi enzim fibrinolitik oleh Pseudoalteromonas sp. IND11 menggunakan sapi
aktivitas antimikroba. India Selatan J. Bio. Sci. 2, 115–118. substrat kotoran dengan metodologi permukaan respons. SpringerPlus, 2014, 3, 60.
Asagbra, A., Sanni, A., Oyewole, O., 2005. Produksi fermentasi solid-state
Vijayaraghavan, P., Vincent, S.G.P., 2012. Kotoran sapi sebagai novel,
murah
tetrasiklin by Streptomices strain menggunakan beberapa limbah pertanian substrat s untuk produksi protease alkali yang toleran terhadap halo by
Substrat. Dunia J. Microbiol. Bioteknologi. 21, 107–114.
Halomonas sp. PV1 untuk aplikasi ramah lingkungan. Biokimia. Eng. J.
69, 57–60.
Azman, A.S., Othman, I., Velu, S.S., Cha, K.G., Lee, L.H., 2015. Mangrove langka
Vijayaraghavan, P., Arun, A., Vincent, S.G.P., Arasu, M.V., Al-Dhabi, N.A.,
2016. Sapi
actinobacteria: taksonomi, senyawa alami, dan penemuan bioaktivitas. kotoran adalah bahan baku baru untuk produksi enzim fibrinolitik dari Front baru. Mikrobiol. 6. 856.
terisolasi Bacillus sp. IND7 dan penerapannya dalam lisis gumpalan In Vitro. Depan.
Balachandran, C., Duraipandiyan, V., Emi, N., Ignacimuthu, S., 2015. Antimikroba
Mikrobiol. 7. 361.
dan sifat sitotoksik dari Streptomyces sp. (ERINLG-51) terisolasi dari m
Wu, R.Y., 1984. Studi tentang Streptomyces SC4. II Taksonomi dan biologis

Ghats Barat Selatan. India Selatan J. Biol. Sci. 1, 7–14. karakteristik Streptomyces strain SC4. Bot. Sapi. Acad. Sin. 25, 111–123.
Bruntner, C., Binder, T., Pathom-aree, W., Goodfellow, M., Banteng, A.T., Potterat, O.,
Yang, S.S., Ling, M.Y., 1989. Produksi tetrasiklin dengan residu ubi jalar oleh
dkk., 2005. Frigocyclinone, antibiotik angucyclinone baru yang diproduksi oleh fermentasi solid-state. Bioteknologi. Bioeng. 33, 1021–1028.
Streptomyces griseus strain dari Antartika J. Antibiot. 58, 346–349.
Yang, S.S., Swei, WJ, 1996. Kondisi budaya dan produksi oxytetracycline
oleh Crawford, D.L., Lynch, J.M., Whipps, J.M., Ousley, M.A., 1993. Isolasi and
Streptomyces rimosus dalam keadaan padat fermentasi tongkol
jagung. Dunia J. Microbiol.
 M. Kalaiyarasi dkk. / Jurnal Universitas King Saud – Sains 32 (2020) 2134–2141 14

karakterisasi antagonis actinomycete dari patogen akar jamur. Appl( dalam bahasa Inggris).
Bioteknologi. 12, 43–46.
Kira-kira. Mikrobiol 59 (11), 3899–3905.
Yu, X., Doroghazi, J.R., Janga, S.C., dkk., 2013. Keberagaman dan
kelimpahan
Elibol, M., 2004. Optimalisasi komposisi sedang untuk produksi aktinorhodin gen biosintesis fosfatat di alam.
oleh Streptomyces coelicolor A3(2) dengan metodologi permukaan respons. Proses
20759–20764.
Biokimia 39, 1057–1062.
Zhang, HJ, Zhang, H., Wang, L., Guo, X.N., 2012. Persiapan dan fungsional
El-Naggar, Moustafa, Y., El-Assar, S.A., Abdul-Gawad, S.A., 2009. Sifat solid-state protein dedak padi dari dedak padi defatted yang distabilkan dengan panas. Makanan
fermentasi untuk produksi meroparamycin oleh Streptomyces sp. strain
Res. Int. 47,
359–363. MARET01. J. Mikrobiol. Bioteknologi 19, 468–473.