LEMBAR PENILAIAN KETERAMPILAN UNJUK KERJA

“TEKNIK KULTUR BAKTERI DAN PEWARNAAN GRAM”

Satuan Pendidikan : SMA Bintang Mulia

Mata Pelajaran : Biologi
Kelas : 10 IPA

Kompetensi dasar
3.5. Mengidentifikasi struktur, cara hidup, reproduksi dan peran bakteri dalam kehidupan
Indikator
3.5.3. Menjelakan cara mengisolasi bakteri.
3.5.4. Menjelaskan cara perkembangbiakan bakteri.
4.5 Menyajikan data tentang ciri-ciri dan peran bakteri dalam kehidupan
Indikator
4.5.1 Membuat charta perkembangbiakan bakteri.

PRAKTIKUM 1: KULTUR BAKTERI

Tujuan:
- Sebagai tempat perkembangbiakan bakteri
- Dapat membuat biakan murni
- Dapat melihat bentuk koloni dari setiap jenis bakteri.

Alat dan Bahan:

a) Gelas ukur 500 ml j) Pipet tetes
b) Labu erlenmeyer 500 ml k) Lumpang dan alu
c) Spatula l) Aquades
d) Cawan petri m) Alkohol 70%
e) Beaker glass 500 ml n) Tepung agar-agar 1 bungkus
f) Bunsen o) Gula pasir
g) Kaki tiga p) Air kaldu
h) Kertas bekas q) Sample makanan, susu basi, udara
i) Inkubator sederhana bebas, tanah, dan air kolam

Prosedur Kerja:
1. Siapkan semua alat dan bahan di atas meja kerja, panaskan air kaldu di atas bunsen.
2. Tambahkan tepung agar-agar dan gula, panaskan hingga mendidih dan media agar-agar sudah
bisa digunakan.
3. Pembagian Kelompok:
• Kelompok 1/5: Sample makanan dan udara bebas di dalam lab Biologi
• Kelompok 2/6: Sample susu basi dan udara bebas di toilet siswi
• Kelompok 3/7: Sample tanah dan udara bebas di luar lab Biologi
• Kelompok 4/8: Sample air kolam dan udara bebas di toilet siswa
4. Lakukan pengambilan sample:
a) Untuk sampel bahan makanan: campurkan makanan dan aquades ke dalam lumpang dan
haluskan dengan alu. Ambil sampel 1 ml teteskan ke dalam cawan petri kemudian
 tambahkan media agar-agar cair hingga 2/3 bagian cawan petri. Tutup dan tunggu hingga
membeku.
b) Untuk sampel susu basi: ambil sampel 1 ml teteskan ke dalam cawan petri kemudian
tambahkan media agar-agar cair hingga 2/3 bagian cawan petri. Tutup dan tunggu hingga
membeku.
c) Untuk sampel udara bebas: tuangkan media agar-agar hingga 2/3 bagian cawan petri.
Tutup dan diamkan membeku, kemudian pilih lokasi yang akan dijadikan lokasi sampel
buku tutup cawan petri dan simpan selama 15-20 menit dan tutup kembali cawan petri.
d) Untuk sampel tanah: ambil setengah sendok makan sampel tanah kemudian larutkan
dengan aquades di dalam lumpang dan haluskan dengan alu. Ambil sampel 1 ml teteskan
ke dalam cawan petri kemudian tambahkan media agar-agar cair hingga 2/3 bagian cawan
petri. Tutup dan tunggu hingga membeku.
e) Untuk sampel air kolam: ambil sampel air kolam sebanyak 1 ml teteskan ke dalam cawan
petri kemudian tambahkan media agar-agar cair hingga 2/3 bagian cawan petri. Tutup dan
tunggu hingga membeku.
5. Setiap cawan petri yang sudah berisi medium dan samplel, bungkus dengan kertas bekas dan
simpan di dalam inkubator dan diamkan selama 48 jam.
6. Amati bentuk koloni dan hitung jumlah koloni yang tumbuh pada medium.

TABEL 1. PENGAMATAN KOLONI BAKTERI

Jumlah
No. Sample Karakteristik koloni Foto
koloni

PRAKTIKUM 2: PEWARNAAN GRAM

Tujuan:
- Dapat membedakan bakteri Gram positif dan Gram negatif
- Untuk mengidentifikasi bentuk bakteri.

Alat dan bahan:

a. Kultur muda bakteri yang diisolasi g. Minyak imersi
b. Larutan kristal violet h. Kaca objek dan cover glass
c. Larutan lugol i. Jarum ose
d. Alkohol 95 %. j. Bunsen
e. Larutan fucshin k. Aquades
f. NaCI fisiologis l. Mikroskop
Prosedur Kerja:
1. Bersihkan kaca objek dengan kapas dan alkohol 70%.
2. Panaskan kawat ose pada api bunsen (jarum pentul) agar steril.
3. Ambil bakteri dari biakan murni letakkan di kaca objek, suspensi dengan NaCl 0.9%,
4. Teteskan alkohol 95% (10-20s), kemudian cuci dengan aquades dan kering anginkan
5. Teteskan 2-3 tetes kristal violet (+1 menit), kemudian cuci dengan aquades dan fiksasi diatas
bunsen
6. Teteskan Lugol (+1 menit). cuci dengan aquades dan fiksasi diatas bunsen
7. Tetaskan 2-3 tetes karbol fucshin (10-20 detik), cuci dengan aquades dan kering anginkan (bias
dengan tissue)
8. Teteskan minyak imersi pada objek.
9. Amati objek menggunakan mikroskop (dari perb. 40x – 1000x)

TABEL 2. PEWARNAAN GRAM

No. Gambar Pewarnaan Gram Keterangan
1. Bentuk bakteri:
Gram : +/-
Perb:
2. Bentuk bakteri:
Gram : +/-
Perb:
3. Bentuk bakteri:
Gram : +/-
Perb:
4. Bentuk bakteri:
Gram : +/-
Perb:

SOAL!
1. Tuliskan 3 komposisi media biakan bakteri yang digunakan dalam teknik pembiakan bakteri dan
jelaskan fungsinya!
2. Tuliskan 3 media agar differensial dan tujuan dibuatnya media agar tersebut!
3. Tuliskan 2 perbedaan bakteri gram positif dan bakteri gram negatif!
4. Tuliskan fungsi larutan berikut:
a. Larutan lugol;
b. Larutan karbol fucshin;
c. Larutan karbol violet;
d. Alkohol 96%;
e. Minyak imersi