PROPOSAL PENELITIAN

EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN KARAMUNTING

(Rhodomyrtus tomentosa) TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM
URAT PADA MENCIT JANTAN PUTIH.

Oleh
YAWAN ARIANTO
181148201061

PROPOSAL USULAN PENELITIAN

Untuk memenuhi salah satu syarat ujian

guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN DIRGAHAYU SAMARINDA
2022
 LEMBAR PENGESAHAN

EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN

KARAMUNTING (Rhodomyrtus tomentosa) TERHADAP
PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARAH PADA
MENCIT JANTAN PUTIH.

Oleh
YAWAN ARIANTO
181148201051

(Program Studi Sarjana Farmasi)

Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Dirgahayu Samarinda

Menyetujui
Tim Pembimbing
Februari 2022

Pembimbing I Pembimbing II

Sister Sianturi, S.Si., M.Si. apt.Wiwi Erwina, M.P.H.,

i
ii
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkah dan
rahmatnya, penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul
“EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN KARAMUNTING (Rhodomyrtus tomentosa),
TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM URAT DARAH PADA MENCIT JANTAN
PUTIH "
Penelitian dan penulisan skripsi ini dilakukan untuk memenuhi salah satu syarat untuk
mendapatkan gelar sarjana pada jurusan Farmasi di Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Dirgahayu
Samarinda.
Pada kesempatan ini, tidak lupa penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar –
besarnya kepada:
1. Ibu Ns. Vinsensia Tetty, M.Kep. selaku Ketua Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan
Dirgahayu Samarinda
2. Ibu apt. Liniati Geografi, M.Sc. selaku Ketua Program Studi S-1 Farmasi
3. Ibu Sister Sianturi, S.Si., M.Si. dan apt.Wiwi Erwina, M.P.H., selaku Dosen
pembimbing I dan pemimbing II
4. Bapak apt. Habel Roy Sulo,M.Si selaku Pembimbing Akademik yang telah banyak
memberikan bimbingan dan arahan kepada penulis
5. Dosen Penguji yang memberikan masukan dan saran untuk perbaikan skripsi ini
6. Seluruh staf dosen, staf administrasi serta karyawan Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan
Dirgahayu Samarinda
7. Serta sahabat-sahabat angkatan 2018 yang telah memberikan inspirasi dan
kegembiraan selama penulis kuliah di Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Dirgahayu
Samarinda.
Dalam penyusunan skripsi ini masih banyak kesalahan dan kekurangan karena
pengetahuan yang masih sangat terbatas. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati
diharapkan masukan berupa kritik dan saran yang bersifat membangun untuk perbaikan di
masa yang akan datang. Penulis berharap semoga skripsi ini akan memberikan manfaat bagi
penulis sendiri dan juga bagi pihak lain yang berkepentingan.
Samarinda 12 Oktober 2022

Penulis

iii
 ABSTRAK

Hiperurisemia merupakan keadaan yang ditandai dengan peningkatan kadar

asam urat dalam darah yang melebihi batas normal yaitu di atas 7,0 mg/dl pada pria dan
di atas 6,0 mg/dl pada wanita. Hiperurisemia dapat memicu terjadinya artritis gout,
nefropati gout, dan batu ginjal. Peningkatan kadar asam urat dapat dipengaruhi oleh
usia, jenis kelamin, berat badan, konsumsi makanan tinggi purin, konsumsi alkohol,
penggunaan obat-obat tertentu, dan gangguan fungsi ginjal. Jenis makanan yang
mengandung purin tinggi, seperti jeroan (hati, ginjal, dan paru), udang, kepiting, bayam,
dan melinjo termasuk jenis makanan yang paling digemari oleh masyarakat Indonesia.
Prevalensi hiperurisemia telah mengalami peningkatan di seluruh dunia.
Pengujian aktivitas dilakukan pada ekstrak daun karamunting menggunakan
pelarut etanol dengan 3 tingkatan dosis yaitu 200, 400, dan 800 mg/kg BB.Penelitian ini
dilakukan selama 12 hari dengan hewan uji yaitu mencit putih jantan galur Balb/C
sebanyak 24 ekor yang dikondisikan mengalami hiperurisemia dengan induksi hati
ayam, melinjo, dan kalium oksonat. Hewan uji dibagi menjadi 6 kelompok yaitu kontrol
normal K(N) tanpa diberi perlakuan, kontrol negatif K(-) diberi suspensi CMC Na 1%,
kontrol positif K (+) diberi allopurinol 10 mg/kg BB, dan 3 kelompok uji yang masing-
masing diberi ekstrak etanol dau karamuntinng dengan dosis 200 mg/kg BB (P1), 400
mg/kg BB (P2), dan 800 mg/kg BB (P3). Penentuan kadar asam urat dalam darah
mencit ditentukan setelah perlakuan selama 12 hari. Pengukuran ini berdasarkan
penentuan perubahan arus yang disebabkan oleh reaksi asam urat dengan reagen pada
elektroda dari strip tersebut. Ketika sampel darah menyentuh area target sampel dari
strip, darah secara otomatis ditarik ke zona reaksi dari strip. Hasil tes akan ditampilkan
pada layar setelahh 20 detik (Bioptik technologi Inc).

Kata kunci : Daun Karamunting, Ekstrak etanol, Luka sayat, Mencit

iv
 DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... i

KATA PENGANTAR ................................................................................... ii

ABSTRAK .................................................................................................... iii

DAFTAR ISI ................................................................................................. iv

BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ........................................................................................ 1

1.2 Identifikasi Masalah ................................................................................ 3

1.3 Tujuan penelitian ......................................................................................3

1.4 Manfaat penelitian ....................................................................................3

1.5 Hipotesis .................................................................................................. 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .................................................................... 5

2.1 Landasan Teori ....................................................................................... 5

2.1.1 Daunn Karamunting( Rhodomyrtus tomentosa) ............................ 5

2.1.2 Klasifikasi daun karamunting................................................................ 5

2.1.3. Penelitian sebelumnya................................................................. 6

2.1.4 aktivitas atioksidan ....................................................................... 14

2.1.5. aktivitas antibakteri ...................................................................... 15

2.1.6. aktivitas antifungi ......................................................................... 19

2.1.7. aktivitas anti-hiplamasi ................................................................ 19

2.1.8. aktivitas antikangker .................................................................... 20

2.1.9. aktivitas afotoprotektif .................................................................. 23

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN ......................................................... 26

3.1 Waktu dan Tempat ............................................................................................ 26

v
3.2 Rancangan penelitian .........................................................................................26
 3.3 Metodologi Penelitian ....................................................................................... 26

3.3.1 Jenis Penelitian ....................................................................................... 26

3.3.2 Jumlah sampel ........................................................................................ 26

3.3.3 Prosedur kerja........................................................................................26

1.Penyiapan Alat dan bahan .......................................................... 27

2.Variabel penelitian..............................................................................28
3.pembuatan ekstrak etanol karamuntin ..............................................28

4.Uji Skrining Fitokimia ................................................................ 27

4.1 Uji Alkaloid ....................................................................... 27

4.2 Uji Flavonoid ...................................................................... 27

4.3Uji Tanin .............................................................................. 27

4.4Uji Saponin .......................................................................... 30

4.5 Uji Antrakuinon.........................................................30

4.6 Uji Steroid Libermann Burchard’s Test ...................... 30

5.Penentuan dosis ........................................................................... 31

6.pemilihan Hewan Uji .................................................................. 32

7.Pembuatan Larutan CMC Na 1% ..................................................... 33

8.Pembuatan supensi allupurinol ................................................... 33

9.Pembuatsn sedian kalium Oksanat .............................................. 33

10.pembuatan sdiaan jus hati ayam................................................ 33

11.pembuatan Sediaan Emping Melinjo.......................................34
12. Pengambilan Darah.................................................................34
13. Pelaksanaan Pengujian Aktivitas Antihiperurisemia...............34
14. Pengukuran Kadar Asam Urat ................................................36
15. Anallisis Data .........................................................................36
.

DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 38

vi
 BAB I
PENDAHULU
1.1 Latar Belakang Masalah
Asam urat disebut juga artritis gout termasuk suatu penyakit
degeneratif yang menyerang persendian dan paling sering dijumpai di
masyarakat terutama dialami oleh lanjut usia (lansia) (Syaifudin, 2015).
Asam urat termasuk salah satu bagian yang normal dari darah dan urin
melalui peroses pemecahan dan sisa-sisa pembuangan dari bahan makanan
tertentu yang diproduksi oleh tubuh. Asam urat ini dibawa ke ginjal
melalui aliran darah untuk dikeluarkan bersama urin. Jika terjadi gangguan
eliminasi asam urat melalui ginjal yang disebabkan menurunnya sekresi
asam urat kedalam tubuli ginjal menyebabkan terjadi peningkatan kadar
asam urat dalam darah yang disebut hiperurisemia (Ningtiyas &
Ramadhian, 2016).
Salah satu tanaman yang diduga berkhasiat mengatasi penyakit asam
urat dengan cara menurunkan kadar asam urat dalam darah adalah ekstrak
daun karamuting (Rhodomyrtus tomentosa). Berdasarkan pengalaman
empiris biasanya menggunakan daun karamuting sebagai antioksidan, anti
diabetes, anti inflamasi, meencegah pendarahan, mencegagah diare, dan
anti kanker.
Penelitian tentang kandungan dan aktivitas biologis buah karamunting
sudah banyak dilakukan. Beberapa hasil penelitian menunjukan bahwa
buah mengandung banyak senyawa senyawa fenolik, antara lain senyawa
senyawa antosianin dan flavonoid. Kedua kelompok senyawa ini dikenal
berperan penting dalam pencegahan dan pengobatan berbagai penyakit
degeneratif termasuk penyakit-penyakit kardiovaskuler. Ada 19 senyawa
fenolik dalam buah karamunting yang telah diidentifikasi, di antaranya
golongan stilbena dan ellagitannin sebagai senyawa fenolik utama, diikuti
oleh senyawa-senyawa turunan antosianin, turunan flavonol, dan asam
galat. Di antara senyawa senyawa fenolik tersebut, yang paling dominan
dan merupakan senyawa polifenol utama di dalam buah karamunting

1
adalah piceatannol(Sinaga Sri & Rahayu, 2019).
Selain itu penelitian pernah dilakukan oleh Zulita et al., 2018 dengan
menggunakan daun karamunting sebagai anti bakteri yaitu pada
konsentrasi 80% menghambat bakteri Shigella sp. dan Staphyllococcus
aureus.Penelitian lain yaitu sebagai analgesik antipiretik pada mencit
dengan dosis efektif 200 mg/kg bb sebagi analgetik dan antipiretik dosis
400 mg/kg bb.
Maka penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efektivitas ekstrak
etanol daun karamuting untuk menurunkan kadar asam urat darah mencit
jantan putih. Adapun dosis ekstrak etanol daun karamunting yang
digunakan dalam penelitian ini yaitu 200 mg/gr BB, 400 mg/gr BB, dan
800 mg/gr BB mengacu pada penelitian Tian Wida EHZ, dkk (2021) yang
melakukan uji efektivitas ekstrak etanol daun karamunting terhadap kadar
kolestrol tikus jantan.

1.1. Rumusan Masalah

1. Apakah ekstrak etanol daun karamuting memiliki aktivitas sebagai
antihiperurisemia pada mencit jantan putih hiperurisemia?
2. Apakah terdapat perbedaan aktivitas antihiperurisemia pada ketiga
dosis (200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB, dan 800 mg/kg BB) ekstrak daun
karamuing pada mencit jantan putih hiperurisemia?
3. Bagaimana efektivitas antihiperurisemia ekstrak etanol daun
karamuting pada mencit jantan hiperurisemia jika dibandingkan dengan
kelompok kontrol positif?

1.2. Tujuan Penelitian

1. Tujuan Umum
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada atau tidaknya aktivitas
sebagai antihiperurisemia dari ekstrak etanol daun karamuting
(Rhodomyrtus tomentosa) dalam menurunkan kadar asam urat darah
mencit jantan putih.

2
 2. Tujuan Khusus
1. Untuk mengetahui perbedaan aktivitas antihiperurisemia pada
ketiga dosis (200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB, dan 800 mg/kg BB) ekstrak
daun karamuting pada mencit jantan putih hiperurisemia,
2. Untuk mengetahui efektivitas antihiperurisemia ekstrak etanol daun
karamuting pada mencit jantan hiperurisemia jika dibandingkan dengan
kelompok kontrol positif.

1.3. Manfaat Penelitian

1. Bagi Peneliti
Penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat untuk menambah
pengetahuan dan sebagai acuan dalam penggunaan bahan
alam khususnya daun Karamunting sebagai salah satu
tumbuhan lokal yang dapat digunakan sebagai obat
menurunkan kadar asam urat, dan dapat dikembangkan
menjadi obat tradisional.
2. Bagi Masyarakat
Dengan penelitian ini diharapkan dapat menambah wawasan
masyarakat mengenai daun karamunting sebagai tumbuhan
lokal yang dapat dimanfaatkan sebagai obat menurunkan
kadar asam urat, selain obat kimia yang ada supaya dapat
dimanfaatkan dengan optimal.
3. Bagi Institusi
Hasil penelitian diharapkan dapat menjadi acuan dan referensi
serta menambah kajian farmasi khususnya di bidang bahan
alam yang dapat dikembangkan menjadi sediaan farmasi.

1.4. Hipotesis
Ekstrak etanol daun karamuting (Rhodomyrtus tomentosa)
memiliki efektivitas dalam menurunkan kadar asam urat
darah mencit jantan putih hiperurisemia.

3
 BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Landasan Teori
2.1.1 Daun Karamuting (Rhodomyrtus tomentosa)

Karamunting merupakan perdu yang tumbuh cepat, umumnya tingginya

sekitar 1-1,5 meter, namun dapat mencapai tinggi 4 meter. Daunnya
berwarna hijau, letaknya berhadapan. Helai daun berbentuk oval, tepi rata,
dan tulang daun berjumlah tiga dari pangkal. Permukaan atas daun
berwarna hijau mengkilap, bagian bawah daun berwarna hijau abu-abu dan
berbulu, Panjang daun sekitar 5-7 cm dan lebarnya 2-3 cm. Kata
tomentosa diberikan kepada spesies ini karena penampilan daunnya yang
hijau mengkilap pada permukaan atasnya dan berbulu pada permukaan
bawahnya (Langeland and Craddock- Burks, 1998). Pada Gambar 1 dan 2
ditampilkan pohon karamunting dan daun karamunting secara lebih jelas
(Sinaga Sri & Rahayu, 2019).

Gambar 1. Pohon karamunting (Rhodomyrtus tomentosa) (Sinaga Sri & Rahayu, 2019).

Bunganya merupakan bunga tunggal atau berkelompok (klaster) 2-3

bunga, berdiameter 2,5-3 cm, berwarna merah muda (pink) sampai ungu
dengan benang sari banyak dan tidak beraroma. Kelopak bunga
berlekatan, jumlah mahkota bung lima dan putik satu (Gambar 3)(Sinaga
Sri & Rahayu, 2019).

4
Gambar 2. Daun karamunting (Sinaga Sri & Rahayu, 2019).

Gambar 3. Bunga karamunting (Sinaga Sri & Rahayu, 2019).

Buah karamunting merupakan buah beri berbentuk lonjong, panjang

sekitar 1-1,5 cm dan lebarnya sekitar 1 cm, dengan calyx yang persisten.
Buah yang masih muda berwarna hijau dan rasanya kelat (getir),
sedangkan yang masak berwarna merah ungu sampai hitam dan rasanya
manis (Gambar 4). Kulit buah berbulu seperti beludru. Pada bagian atas
buah terdapat kaliks yang persisten. Bagian dalam buah memiliki empat
sampai enam ruang (pseudo-locules) yang dipisahkan oleh septa semu,
berdaging lunak dan berair, serta mengandung banyak biji kecil-kecil tipis
berukuran sekitar 1,5 mm (Gambar 5)(Sinaga Sri & Rahayu, 2019).

5
 Gambar 4. Buah karamunting (Sinaga Sri & Rahayu,
2019).

Gambar 5. Buah dan biji karamunting (Sinaga Sri &

Rahayu, 2019).

2.1.2 Klasifikasi Ilmiah Daun Karamuting

Klasifikasi ilmiah Daun Karamuting adalah sebagai berikut(Rizki &

Selaras, 2012).
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Superdivisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Subkelas : Rosidae
Ordo : Myrtales
Famili : Myrtaceae
Genus : Rhodomyrtus
Spesies : Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk.

6
 2.1.3 Penelitian Sebelumnya
Beberapa hasil penelitian sebelumnya yang menunjukan potensi dari tanaman
karamunnting yang dapat dilihat pada Tabel 2.3.
Tabel 2.3. penelitian sebelumnya terkait potensi daun karamunting
(Rhodomyrtusy)
No Aktivitas Bahan bioaktif Pustaka HASIL PENELITIAN
. biologis
Ekstrak kaya Wu et al. Menunjukkan bahwa ekstrak buah
flavonoid dari buah (2015) karamunting kaya flavonoid ini
karamunting memiliki daya antioksidan yang
kuat, hampir setara dengan asam
1 Antioksidan askorbat atau vitamin C dan dapat
meningkatkan aktivitas SOD
(sulfoksida dismutase) dan GSH-
Px (glutation), serta menurunkan
kadar MDA (malondialdehida)
dalam serum mencit.

Ekstrak metanol Maskam et Mengungkapkan bahwa ekstrak

buah karamunting al (2014) metanol buah karamunting
menunjukkan daya antioksidan
tertinggi dibandingkan dengan
ekstrak air, ekstrak kloroform, dan
ekstrak petroleum eter, baik pada
uji antioksidan menggunakan
metode DPPH, FRAP, maupun
metal chelating assay.

Antosianin yang Cui et al. Menunjukkan daya antioksidan

diekstrak dari buah (2013) yang signifikan dan menunjukkan
karamunting bahwa senyawa-senyawa
antosianin ini memiliki daya
antioksidan yang lebih kuat
dibandingkan vitamin C atau
asam askorbat.

Ekstrak aseton daun Lavanya et Membuktikan bahwa ekstrak

karamunting al. (2012) aseton daun karamunting secara
signifikan dapat menghambat
pembentukan lipid peroksidase
dengan kapasitas penghambatan
sebesar 0,93 mM asam gallat pada
100 μg/mLdan menunjukkan daya
hepatoprotektif yang kuat, yang
ditunjukkan dengan penurunan

7
 aktivitas enzim SOD (superoksida
dismutase), CAT (katalase), dan
glutation peroksidase di dalam
darah, jaringan hati dan ginjal.

Saising et Hasil penelitian lain

al. (2008); mengungkapkan bahwa
rhodomyrton sangat efektif
terhadap S. aureus, dengan MIC
2 Antibakteri Rhodomyrton sebesar 0,5 ug/ml, sangat dekat
dengan MIC dari vancomisin.

Limsuwan Rhodomyrton telah dibuktikan

et al. secara in vitro memiliki aktivitas
(2011) antibakteri yang luas terhadap
bakteri-bakteri Gram-positive,
termasuk strain yang resisten
terhadap antibiotika konvensional

Limsuwan et Menunjukkan bahwa efek

al. (2012) antibakteri rhodomyrton terhadap
bakteri pathogen S. Rhodomyrton
memiliki aktivitas anti-infeksi
yang baik sebab ia menghambat
ekspresi protein pengikat
fibronektin (fibronectin-binding
protein) dari S. pyogenes, yaitu
gliseraldehida-3-fosfat
dehydrogenase, yang
menyebabkan S. pyogenes tidak
dapat melekat pada permukaan
mukosa atau selsel mamalia.

Saising et Rhodomyrton memiliki efek yang

al. (2011); signifikan terhadap pembentukan
biofilm dan kelangsungan hidup
bakteri yang berada di dalam
biofilm tersebut. Dengan
demikian rhodomyrton juga
diperkirakan akan dapat
dikembangkan menjadi
antibiotika atau anti-infeksi untuk
pengobatan infeksi
staphylococcus yang membentuk
biofilm

Saising et Hasilnya menunjukkan bahwa

8
 al. (2012); baik ekstrak etanol karamunting
maupun rhodomyrton efektif
terhadap bakteri
Propionibacterium acnes. Karena
baik ekstrak etanol daun
karamunting maupun
rhodomyrton masing-masing
menunjukkan toksisitas yang
rendah terhadap sel-sel kulit,
maka para peneliti menyarankan
kedua bahan dan zat ini untuk
dikembangkan lebih lanjut
menjadi obat jerawat.

Leejae et Ternyata bakteri-bakteri normal

al. (2013); yang tidak diberi perlakuan
rhodomyrton memiliki
kemampuan hidup yang lebih
tinggi dibandingkan dengan yang
diberi perlakuan, sebagai akibat
berkurangnya pigmentasi setelah
bakteri dinkubasikan dengan
rhodomyrton.

Fahmi et Daya hambat ini lebih rendah

al. (2012) dibanding sediaan krim
kloromfenikol 2% yang
memberikan diameter hambatan
30 mm dan 32 mm, masingmasing
untuk Staphylococcus aureus dan
Staphylococcus epidermidis pada
kondisi yang sama.
Ekstrak etanol kasar Limsuwan Rhodomyrton telah dibuktikan
et al. secara in vitro memiliki aktivitas
(2011). antibakteri yang luas terhadap
bakteri-bakteri Gram-positive,
termasuk strain yang resisten
terhadap antibiotika konvensional

No. Aktivitas Bahan bioaktif Pustaka HASIL PENELITIAN

biologis

9
 Ekstrak etanol daun Voravuthikunchai et Menghasilkan zona
karamunting al. (2010) hambat yang besar (10,0
samai dengan 18 mm),
bahkan ekstrak dapat
menghambat
pertumbuhan sel dan
endosporanya. Ini
menunjukkan potensi
ekstrak metanol daun
karamunting sebagai
pengawet makanan.

Ekstrak metanol Limsuwan et al. Baik ekstrak metanol

daun karamunting (2012) daun karamunting
maupun zat murni
rhodomyrton
menunjukkan daya
antibakteri yang kuat
terhadap ke 47 isolat
tersebut dan 14 isolat
klinis lainnya

Ekstrak etanol daun Jeenkeawpieam et al. Mengungkapkan bahwa

3 Antifungal ekstrak etanol daun
karamunting (2012)
karamunting sebesar
200 ug/ml dapat
menghambat
pertumbuhan tiga
spesies jamur patogen,
yaitu Bipolaris setariae,
C. oryzae, dan Rhizopus
oryzae-sativa pada
tanaman padi dengan
penghambatan miselium
sebesar 50%.

Ekstrak metanol Jeong et al. (2013) ekstrak metanol daun

4 Antiinflamasi
daun karamunting karamunting dapat
menghambat
pembentukan senyawa-
senyawa mediator

10
 inflamasi atau radang,
yaitu NO and PGE2
pada sel-sel RAW264.7
yang diaktivasi dengan
lipopolisakarida dan sel-
sel makrofag peritoneal,
dan aktivitasnya
dipengaruhi oleh dosis
yang diberikan.

Hal ini mengindikasikan

bahwa rhodomyrton dapat
Rhodomyrton Chorachoo et al.(2016) menginduksi apoptosis sel-
5 Antikanker sel keratinosit tersebut.
Analisis flow cytometric
menunjukkan bahwa
persentase apoptosis sel-
sel keratinosit meningkat
setelah diberi perlakuan
rhodomyrton konsentrasi
2-32 ug/ml, masing-
masing sebesar 1,2-10%,
8,2-35,4%, dan 21,0-
77,8% dibandingkan
kontrol setelah 24, 48, dan
72 jam.
Tayeh et al.(2017); Hasil-hasil penelitian ini
menunjukkan bahwa
rhodomyrton berpotensi
untuk dikembangkan
menjadi obat kanker dan
antimetastatic agent
untuk kanker kulit pada
manusia

Tayeh et al.(2018) Hasil penelitian

menunjukkan bahwa
rhodomyrton dapat
menghambat proliferasi
sel-sel A431 dengan
IC50 sebesar 8,04±0,11
µg/ml. Rhodomyrton
juga meningkatkan
kondensasi kromatin,
fragmentasi nucleus dan
benda-benda apoptosis

11
 (apoptotic bodies) pada
sel-sel A431. Dari hasil
penelitian ini
disimpulkan bahwa
apoptosis yang diinduksi
oleh rhodomyrton
berlangsung melalui
aktivasi kaspase-7 dan
polymerase cleavage
poli (ADP-ribosa).

Tomentodione M Zou et al. (2017) Dari hasil peneitian

dapat disimpulkan
bahwa tomentodione M
dapat membalikkan
proses multi-drug
resistance (MDR) pada
sel-sel kanker dengan
jalan menekan ekspresi
P-gp melalui
penghambatan signaling
p38 MAPK

Ekstrak etil asetat Abd Hamid et al.(2017) Ekstrak etil asetat akar
akar karamunting karamunting
menunjukkan aktivitas
antiproliveratif yang
kuat terhadap berbagai
jenis sel kanker, antara
lain sel HepG2 (IC50 =
11,47±0,280 μg/mL),
MCF-7 (IC50 =
2,68±0,529 μg/mL), dan
HT29 (IC50 =
16,18±0,538 μg/mL)
setelah perlakuan
selama 72 jam.

Hasil ini menunjukkan

bahwa ekstrak buah
Ekstrak etanol buah Shiratake et al.(2015) karamunting dan
6 Fotoprotektif karamunting kandungan utamanya
piceatannol, memiliki
potensi untuk
dikembangkan lebih lanjut
menjadi bahan
fotoprotektif terhadap
kerusakan kulit yang
disebabkan oleh sinar

12
 ultra-violet.

Piceatannol Shiratake et al.(2015) Hasil ini menunjukkan

bahwa ekstrak buah
karamunting dan
kandungan utamanya
piceatannol, memiliki
potensi untuk
dikembangkan lebih
lanjut menjadi bahan
fotoprotektif terhadap
kerusakan kulit yang
disebabkan oleh sinar
ultra-violet.

2.1.4 Aktivitas Antioksidan

Buah karamunting yang mengandung banyak senyawasenyawa
flavonoid telah dibuktikan memiliki aktivitas antioksidan yang
kuat, baik secara in vitro maupun in vivo. Wu et al. (2015)
melakukan uji daya antioksidan secara in vitro dan in vivo
menggunakan ekstrak kaya flavonoid yang disiapkan secara
khusus. Serbuk buah karamunting yang sudah dikeringkan dan
dihaluskan (40 mesh) diekstraksi (refluks) dua kali masing-
masing selama 4 jam dengan etanol 95% pada 70°C.
Ekstrak yang diperoleh digabungkan lalu diuapkan hingga 46
kering dengan vacuum evaporator pada 50°C. Setelah itu ekstrak
diekstrak kembali dengan petroleum eter sebanyak dua kali, lalu
fraksi yang larut air dimurnikan dengan AB-8 macroporous resin
dan dielusi dengan etanol 40%. Fraksi hasil elusi dipekatkan lalu
dikeringkan, dan disimpan pada 5°C sebelum digunakan. Hasil
pengujian daya antioksidan secara in vitro menggunakan
berbagai metode, yaitu DPPH (1,1-diphenyl2-picryl-hydrazyl)
radical scavenging assay, Hydroxyl radicals (- OH) scavenging
assay, Superoxide radical (O2−) scavenging assay, dan FRAP

13
(Ferric-reducing antioxidant power) assay menunjukkan bahwa
ekstrak buah karamunting kaya flavonoid ini memiliki daya
antioksidan yang kuat, hampir setara dengan asam askorbat atau
vitamin C.
Nilai EC50 daya antioksidan ekstrak dengan metode DPPH
sebesar 10,97±0,18 ug/ml hanya sedikit lebih rendah
dibandingkan asam askorbat dengan nilai EC50 sebesar
8,03±0,11 ug/ml. Dalam penelitian ini juga dibuktikan bahwa
pemberian ekstrak buah karamunting kaya flavonoid dalam dosis
5, 25, 125 mg/kg bb selama tiga hari berturut-turut terhadap
mencit Kunming jantan umur 8 minggu dengan berat 20 ± 2 g,
ternyata dapat meningkatkan aktivitas SOD (sulfoksida
dismutase) dan GSH-Px (glutation), serta menurunkan kadar
MDA (malondialdehida) dalam serum mencit (Wu et al., 2015).
Maskam et al (2014) mengungkapkan bahwa ekstrak metanol
buah karamunting menunjukkan daya antioksidan tertinggi
dibandingkan dengan ekstrak air, ekstrak kloroform, dan ekstrak
petroleum eter, baik pada uji antioksidan menggunakan metode
DPPH, FRAP, maupun metal chelating assay.
Pada uji antioksidan dengan metode DPPH ekstrak metanol
menunjukkan nilai IC50 sebesar 107 μg/ml sedangkan nilai IC50
ekstrak air buah karamunting sebesar 154 ug/ml, pada uji
antioksidan dengan metode FRAP kapasitas antioksidan sebesar
0,162 nm ditunjukkan oleh ekstrak konsentrasi 500μg/ml,
sedangkan pada uji antioksidan dengan metode Metal Chelating
Assay kemampuan antioksidan 36% 47 ditunjukkan oleh ekstrak
konsentrasi 100μg/ml (Maskam et al., 2014).
Senyawa-senyawa antosianin yang diekstrak dari buah
karamunting yang sudah dikeringkan menunjukkan daya
antioksidan yang signifikan. Pengujian daya antioksidan in vitro
dengan metode DPPH, ABTS radical-scavenging activities, dan
uji kapasitas absorbans radikal oksigen atau oxygen radical

14
 absorbance capacity tests (dalam μmol trolox ekuivalen/mg)
menunjukkan bahwa senyawa-senyawa antosianin ini memiliki
daya antioksidan yang lebih kuat dibandingkan vitamin C atau
asam askorbat (Cui et al., 2013).
Ekstrak aseton daun karamunting menunjukkan daya
antioksidan, baik secara in vitro maupun in vivo. Lavanya et al.
(2012) membuktikan bahwa ekstrak aseton daun karamunting
secara signifikan dapat menghambat pembentukan lipid
peroksidase dengan kapasitas penghambatan sebesar 0,93 mM
asam gallat pada 100 μg/mL. Ekstrak aseton daun karamunting
juga menunjukkan daya antioksidan yang kuat pada pengujian
dengan metode FRAP, 2,7 kali lebih kuat dibandingkan dengan
asam gallat dan 3 kali lebih kuat dibandingkan dengan asam
ellagat. Ekstrak aseton daun karamunting juga menunjukkan
aktivitas pengkelat (chelating activity) yang baik terhadap ion
ferro secara in vitro. Pemberian ekstrak aseton daun karamunting
dosis 0,2; 0.,4; dan 0,8 g/kg bb selama 14 hari pada mencit putih
Swiss yang dihepatoksikasi dengan karbon tetraklorida
menunjukkan daya hepatoprotektif yang kuat, yang ditunjukkan
dengan penurunan aktivitas enzim SOD (superoksida dismutase),
CAT (katalase), dan glutation peroksidase di dalam darah,
jaringan hati dan ginjal (Lavanya et al., 2012).
2.1.5 Aktivitas Antibakteri
Salah satu kandungan fitokimia dalam buah, daun, dan akar
karamunting adalah rhodomyrton, sebuah senyawa
asilfloroglusinol yang merupakan antibiotika alami untuk infeksi
Staphylococcal cutaneus. Rhodomyrton telah dibuktikan secara
in vitro memiliki aktivitas antibakteri yang luas terhadap bakteri-
bakteri Gram-positive, termasuk strain yang resisten terhadap
antibiotika konvensional (Limsuwan et al., 2011).
Ekstrak etanol kasar karamunting juga menunjukkan daya
antibakteri yang kuat terhadap bakteri-bakteri Gram-positive,

15
termasuk Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Enterococcus
faecalis, Staphylococcus aureus, methicillin- resistant S. aureus,
Staphylococcus epidermidis, Streptococcus gordonii,
Streptococcus mutans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus
pyogenes, dan Streptococcus salivarius (Limsuwan et al., 2009).
Daya antibakteri rhodomyrton bahkan lebih kuat dibandingkan
dengan vancomisin. Daya hambat minimum atau minimum
inhibitory concentration (MIC) rhodomyrton 2-3 kali lebih
rendah dibandingkan dengan vancomisin, dan konsentrasi bunuh
minimum atau konsentrasi bakterisidal minimumnya 160-320
kali lebih rendah dibandingkan vancomisin. Penelitian lanjutan
yang dilakukan menunjukkan bahwa efek antibakteri
rhodomyrton terhadap bakteri pathogen S. pyogenes disebabkan
oleh penghambatan toksin S. pyogenes melalui gangguan
terhadap jalur metabolism bakteri tersebut. Rhodomyrton
memiliki aktivitas anti-infeksi yang baik sebab ia menghambat
ekspresi protein pengikat fibronektin (fibronectin-binding
protein) dari S. pyogenes, yaitu gliseraldehida-3-fosfat
dehydrogenase, yang menyebabkan S. pyogenes tidak dapat
melekat pada permukaan mukosa atau selsel mamalia
(Limsuwan, 2011).
Hasil penelitian lain mengungkapkan bahwa rhodomyrton sangat
efektif terhadap S. aureus, dengan MIC sebesar 0,5 ug/ml,
sangat dekat dengan MIC dari vancomisin (Saising et al., 2008).
Penelitian yang sama mengamati aktivitas antibakteri ekstrak
etanol R. tomentosa terhadap bakteri Staphylococcus yang
diisolasi dari jerawat, dan hasilnya menunjukkan bahwa
rhodomyrton efektif terhadap semua bakteri Staphylococcus baik
yang koagulase-positif maupun koagulase-negatif. Berdasarkan
penelitian mereka sebelumnya, kelompok peneliti ini melakukan
uji aktibakteri ekstrak etanol daun karamunting dan rhodomyrton
terhadap Propionibacterium acnes.

16
Hasilnya menunjukkan bahwa baik ekstrak etanol karamunting
maupun rhodomyrton efektif terhadap bakteri Propionibacterium
acnes. Karena baik ekstrak etanol daun karamunting maupun
rhodomyrton masing-masing menunjukkan toksisitas yang
rendah terhadap sel-sel kulit, maka para peneliti menyarankan
kedua bahan dan zat ini untuk dikembangkan lebih lanjut
menjadi obat jerawat (Saising et al., 2012).
Voravuthikunchai et al. (2010) menguji daya antibakteri ekstrak
etanol daun karamunting terhadap 65 sampel B. cereus yang
diisolasi dari makanan, dan ternyata menghasilkan zona hambat
yang besar (10,0 samai dengan 18 mm), bahkan ekstrak dapat
menghambat pertumbuhan sel dan endosporanya. Ini
menunjukkan potensi ekstrak metanol daun karamunting sebagai
pengawet makanan.
Penelitian daya antibakteri ekstrak metanol daun karamunting
dan zat murni rhodomyrton juga dilakukan terhadap 47 isolat
klinis S. pyogenes yang diperoleh dari pasien tinsilitis atau
fatingitis. Baik ekstrak metanol daun karamunting maupun zat
murni rhodomyrton menunjukkan daya antibakteri yang kuat
terhadap ke 47 isolat tersebut dan 14 isolat klinis lainnya
(Limsuwan et al., 2012).
Rhodomyrton juga menunjukkan aktivitas antibakteri yang kuat
terhadap bakteri-bakteri yang membentuk kapsul (capsulated
bacteria) dan bakteri-bakteri yang membentuk biofilm (biofilm-
forming bacteria), termasuk S. epidermidis ATCC 35984
(biofilmpositive) and Streptococcus pneumonia (capsule-
positive), dan diperkirakan rhodomyrton memiliki efek yang
signifikan terhadap pembentukan biofilm dan kelangsungan
hidup bakteri yang berada di dalam biofilm tersebut. Dengan
demikian rhodomyrton juga diperkirakan akan dapat
dikembangkan menjadi antibiotika atau anti-infeksi untuk
pengobatan infeksi staphylococcus yang membentuk biofilm

17
(Saising et al., 2011).
Rhodomyrton yang diisolasi dari ekstrak etilasetat daun
karamunting menunjukkan aktivitas antibakteri yang kuat
terhadap Escherichia coli dan S. aureus (Salni et al., 2002).
Saureus dinkubasi dengan rhodomyrton 0,5 x MIC (0,25 ug/ml)
untuk menguji kerentanan bakteri yang telah diperlakukan
dengan rhodomyrton dan yang tidak. Setelah itu bakteri diberi
perlakuan dengan senyawa oksidan (H2O2) berbagai
konsentrasi. Ternyata bakteri-bakteri normal yang tidak diberi
perlakuan rhodomyrton memiliki kemampuan hidup yang lebih
tinggi dibandingkan dengan yang diberi perlakuan, sebagai
akibat berkurangnya pigmentasi setelah bakteri dinkubasikan
dengan rhodomyrton. Para peneliti ini juga mengindikasikan
bahwa mekanisme kerja antibakteri rhodomyrton bukan melalui
pengaruhnya terhadap membran sel yang kemudian akan
mengakibatkan lisisnya sel bakteri, sebab rhodomyrton tidak
menunjukkan efek yang signifikan terhadap kedua hal tersebut
(Leejae et al., 2013).
Fahmi et al. (2012) menguji aktivitas rhodomyrton yang
diisolasi dari ekstrak daun karamunting dalam bentuk krim
sediaan topikal rhodomyrtone 2% dalam vanishing cream. Uji
secara in vitro menggunakan Staphylococcus aureus ATTC 6538
dan Staphylococcus epidermidis 12228 sebagai bakteri uji,
sedangkan secara uji secara in vivo dilakukan terhadap kulit
kelinci yang telah diinfeksi dengan Staphylococcus aureus.
Kedua uji ini menggunakan krim kloromfenikol 2% sebagai
pembanding. Krim sediaan topikal rhodomyrtone 2% dengan
basis vanishing cream memberikan diameter hambatan berturut-
turut 15 mm dan 26 mm terhadap Staphylococcus aureus dan
Staphylococcus epidermidis. Daya hambat ini lebih rendah
dibanding sediaan krim kloromfenikol 2% yang memberikan
diameter hambatan 30 mm dan 32 mm, masingmasing untuk

18
 Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis pada
kondisi yang sama. Selanjutnya uji secara in vivo menunjukkan
bahwa krim sediaan topikal rhodomyrtone 51 2% dapat
mengurangi infeksi kulit dan tidak menimbulkan iritasi pada
kelinci percobaan.
2.1.6 Aktivitas Antifungi

Jeenkeawpieam et al. (2012) mengungkapkan bahwa ekstrak

etanol daun karamunting sebesar 200 ug/ml dapat menghambat
pertumbuhan tiga spesies jamur patogen, yaitu Bipolaris
setariae, C. oryzae, dan Rhizopus oryzae-sativa pada tanaman
padi dengan penghambatan miselium sebesar 50%.
2.1.7 Aktivitas Anti-inflamasi

Ektrak metanol daun karamunting menunjukkan aktivitas

antiinflamasi yang signifikan, baik pada pengujian in vitro
maupun in vivo. Jeong et al. (2013) melaporkan bahwa ekstrak
metanol daun karamunting dapat menghambat pembentukan
senyawa-senyawa mediator inflamasi atau radang, yaitu NO
and PGE2 pada sel-sel RAW264.7 yang diaktivasi dengan
lipopolisakarida dan sel-sel makrofag peritoneal, dan
aktivitasnya dipengaruhi oleh dosis yang diberikan.
Analisis immunoblotting dan immunopresipitasi, juga
reaksi kinase dengan mRNA, menggunakan ekstrak sel dan
lisat inti sel dari sel-sel RAW264.7 dan mencit
mengungkapkan bahwa ekstrak metanol daun karamunting
dapat menghambat aktivasi baik factor kB inti sel maupun
jalur protein-1 aktivator dengan sasaran langsung pada spleen
tyrosine kinase/proto-oncogene tyrosine-protein kinase
(Syk/Src) dan interleukin-1 receptorassociated kinase
1/interleukin-1 receptor-associated kinase 4 (IRAK1/IRAK4)
(Jeong et al., 2013).

19
2.1.8 Aktivitas Antikanker
Beberapa senyawa yang sudah berhasil diisolasi dari tumbuhan
karamunting sudah dibuktikan memiliki aktivitas antikanker
yang cukup signifikan, antara lain rhodomyrton dan piceatannol.
Rhodomyrton yang diisolasi dari daun karamunting telah
dibuktikan dapat menghambat proliferasi dan menginduksi
apoptosis sel-sel keratinosit HaCaT. Persentase aktivitas
antiproliferasi rhodomyrton terhadap sel-sel HaCaT pada
konsentrasi 2-32 ug/ml setelah 24, 48, dan 72 jam berturutturut
adalah 13,62-61,61%, 50,59-80,16%, dan 61,82-85,34%. Sel-sel
keratinosit HaCaT yang diberi perlakuan rhodomyrton
menunjukkan kondensasi kromatin dan fragmentasi nucleus
ketika diberi pewarnaan Hoechst 33342. Hal ini mengindikasikan
bahwa rhodomyrton dapat menginduksi apoptosis sel-sel
keratinosit tersebut. Analisis flow cytometric menunjukkan
bahwa persentase apoptosis sel-sel keratinosit meningkat setelah
diberi perlakuan rhodomyrton konsentrasi 2-32 ug/ml, masing-
masing sebesar 1,2-10%, 8,2-35,4%, dan 21,0-77,8%
dibandingkan kontrol setelah 24, 48, dan 72 jam (Chorachoo et
al., 2016).
Tayeh et al. (2018) juga telah membuktikan efek sitotoksik dan
antiproliferatif rhodomyrton terhadap sel-sel karsinoma
epidermoid manusia A431 menggunakan metode MTT.
Perubahan morfologi sel dan sel-sel apoptotik setelah diberi
perlakuan dengan rhodomyrton diamati dengan pewarnaan
Hoechst 33342. Analisis flow cytometry dan western blotting
dilakukan untuk mendeteksi siklus sel dan induksi apoptosis.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa rhodomyrton dapat
menghambat proliferasi sel-sel A431 dengan IC50 sebesar
8,04±0,11 µg/ml. Rhodomyrton juga meningkatkan kondensasi
kromatin, fragmentasi nucleus dan benda-benda apoptosis
(apoptotic bodies) pada sel-sel A431. Dari hasil penelitian ini

20
disimpulkan bahwa apoptosis yang diinduksi oleh rhodomyrton
berlangsung melalui aktivasi kaspase-7 dan polymerase cleavage
poli (ADP-ribosa).
Analisis flow cytometri mengungkapkan bahwa rhodomyrton
menginduksi penghentian siklus sel pada fase G1. Lebih jauh
lagi dapat dibuktikan bahwa rhodomyrton pada konsentrasi non-
toksik, secara nyata menghambat migrasi sel-sel A431 dan
penghambatan bersifat dose-dependent dan time-dependent.
(Tayeh et al., 2018).
Sebelumnya, Tayeh et al. (2017) juga telah membuktikan bahwa
rhodomyrton memiliki aktivitas antimetastasis terhadap sel-sel
karsinoma epidermoid A431. Pada konsentrasi subsitotoksik,
yaitu 0,5 dan 1,5 ug/ml rhodomyrton terbukti dapat menghambat
metastasis kanker dengan jalan mereduksi migrasi sel,
kemampuan adhesif sel dan invasi sel-sel A431. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa rhodomyrton dapat menghambat FK (focal
adhesion kinase) dan fosforilasi protein kinase B (AKT), c-Raf,
extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2), dan p38
MAPK yang terlibat dalam downregulation aktivitas enzim dan
ekspresi protein dari matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) dan
MMP-9. Rhodomyrton juga dibuktikan dapat meningkatkan
ekspresi TIMP-1 dan TIMP-2, yaitu inhibitor-inhibitor MMP-9
dan MMP2.
Rhodomyrton juga menghambat ekspresi dan fosforilasi NFκB.
Dari hasil penelitian ini diperoleh kesan bahwa rhodomyrton
menghambat metastasis sel-sel A431 dengan jalan mereduksi
aktivitas dan ekspresi MMp-2 dan MMP-9 melalui
pemghambatan jalur signaling ERK1/2, p38 dan FAK/Akt via
aktivitas NF-κB. Hasil-hasil penelitian ini menunjukkan bahwa
rhodomyrton berpotensi untuk dikembangkan menjadi obat
kanker dan antimetastatic agent untuk kanker kulit pada manusia
(Tayeh et al., 2017).

21
Tomentodione M (TTM) sebuah senyawa monoterpen
terkonjugasi asam sinkarpat (syncarpic acid-conjugated
monoterpene) juga terbukti dapat membalikkan proses multidrug
resistance (MDR) pada sel-sel kanker. Sebagaimana diketahui,
MDR adalah salah satu proses dimana sel-sel kanker dapat
“beradaptasi” dengan obat-obat kanker, yang menyebabkan
gagalnya pengobatan kanker.
Zou et al. (2017) membuktikan bahwa tomentodione M dapat
meningkatkan sitotoksisitas obat-obat kemoterapetik seperti
docetaxel dan doxorubicin terhadap sel-sel kanker MCF-7/MDR
dan K562/MDR, dan efek ini bersifat dose-dependent dan time-
dependent. Tomentodione M mereduksi pembentukan koloni dan
meningkatkan apoptosis sel-sel MCF-7/MDR dan K562/MDR
yang diberi perlakuan docetasel. Tomentodione M juga
meningkatkan akumulasi intraseluler doxorubicin dan rhodamin
123 dalam sel-sel kanker dengan jalan mereduksi efflux yang
dimediasi oleh P-gp. Tomentodione M menekan ekspresi, baik
mRNA maupun protein P-gp, dengan jalan menghambat
signaling p38 MAPK. Aktivitas tomentodione M ini serupa
dengan aktivitas inhibitor p38 MAPK, SB203580, yang bekerja
membalikkan MDR dalam sel-sel kanker melalui penekanan
ekspresi P-gp. Sebaliknya, sel-sel kanker MCF-7 dan K562 yang
overexpressing p38 MAPK (p38 MAPKoverexpressing MCF-7
and K562 cells) menunjukkan ekspresi P-gp yang lebih tinggi
dibandingkan kontrol. Dari hasil peneitian dapat disimpulkan
bahwa tomentodione M dapat membalikkan proses multi-drug
resistance (MDR) pada sel-sel kanker dengan jalan menekan
ekspresi P-gp melalui penghambatan signaling p38 MAPK (Zou
et al., 2017).
Di samping senyawa-senyawa bioaktif murni yang diisolasi dari
buah dan daun karamunting, ekstrak dari berbagai bagian
tumbuhan karamunting juga telah dibuktikan memiliki aktivitas

22
 antikanker. Ekstrak etil asetat akar karamunting menunjukkan
aktivitas antiproliveratif yang kuat terhadap berbagai jenis sel
kanker, antara lain sel HepG2 (IC50 = 11,47±0,280 μg/mL),
MCF-7 (IC50 = 2,68±0,529 μg/mL), dan HT29 (IC50 =
16,18±0,538 μg/mL) setelah perlakuan selama 72 jam (Abd
Hamid et al., 2017).

2.1.9 Aktivitas fotoprotektif

Ekstrak etanol buah karamunting dan piceatannol, salah

satu komponen utama dalam buah karamunting, memiliki daya
fotoprotektif yang kuat terhadap sel-sel NHEK (normal human
epidermal keratinocytes) yang diinduksi kerusakannya dengan
sinar UVB. Dalam penelitian ini terbukti bahwa
piceatannol-4'-O-β-D-glucopyranoside tidak memiliki aktivitas
fotoprotektif. Pengujian dilakukan dengan menggunakan
metode 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium
bromide.
Baik ekstrak etanol buah karamunting maupun
piceatannol mereduksi produksi dimer pirimidin siklobutana
yang diproduksi oleh sel-sel NHEK yang dinduksi UVB, dan
meningkatkan aktivitas enzim seluler DNA polimerase pada
selsel NHEK yang diradiasi dengan UVB. Hal ini memberi
kesan bahwa kerusakan DNA yang disebabkan oleh radiasi
sinar UVB diperbaiki atau direparasi oleh enzim polimerase
tersebut. Juga tampak bahwa sekresi prostaglandin E2, suatu
mediator inflamasi, menurun dengan pemberian perlakuan.
Hasil ini menunjukkan bahwa ekstrak buah karamunting
dan kandungan utamanya piceatannol, memiliki potensi untuk
dikembangkan lebih lanjut menjadi bahan fotoprotektif
terhadap kerusakan kulit yang disebabkan oleh sinar ultra-
violet (Shiratake et al., 2015)

23
2.1.10 Aktivitas osteogenik
Senyawa glikosida antrasena yang diisolasi dari bagian di atas
tanah (aerial parts) tumbuhan karamunting dan ditentukan
strukturnya oleh Tung et al. (2009), yaitu 4,8,9,10- tetrahydroxy-
2,3,7-trimethoxyanthracene-6-O-β-Dglucopyranoside dan
2,4,7,8,9,10-hexahydroxy-3-methoxyanthracene-6-O-α-L-
rhamnopyranoside, secara signifikan dapat meningkatkan
aktivitas alkalin fosfatase, sintesis kolagen, dan mineralisasi
nodul sel-sel osteoblastik MC3T3-E1 dibandingkan dengan
control. Diferensiasi sel-sel osteoblast adalah tahap yang penting
dalam proses pembentukan tulang.

2.1.11 Manfaat Daun Karamuting

Karamunting (Rhodomyrtus tomentosa) daun karamunting

secara tradisional digunakan untuk mengobati luka, kudis, sakit
perut, diare, sakit kepala, mencegah infeksi dan pendarahan setelah
melahirkan. Buahnya digunakan sebagai antibisa dan obat diare. Sari
akarnya digunakan untuk mengobati sakit jantung, mengurangi rasa
sakit setelah melahirkan, obat diare, infeksi kulit dan untuk
perawatan bekas luka pada kornea (Juniar & Hairil Alimuddin,
2017)
Karamunting juga telah digunakan sebagai obat cacing pada
manusia dan dapat dibuat selai, yang di India disebut thaonthi.
Kayunya mengandung zat warna yang dapat menghitamkan juga
dapat digunakan untuk mengatasi biang keringat serta dapat
berpotensi sebagai pewarna pakian (Sinaga Sri & Rahayu, 2019).

2.1.12 Kandungan Kimia Daun Karamuting

Hasil penelitian menunjukan daun karamunting mengandung

senyawa golongan fenol, flavonoid, saponin, tanin, steroid dan
triterpenoid. Beberapa senyawa organik dari daun karamunting telah

24
 diisolasi antara lain senyawa golongan flavon glikosida seperti
myrisetin-3-O-α-L-rhamnoshida dan golongan ellagitannin seperti
2,3-heksahidrosksidifenilD-glukosa (Sinata & Arifin, 2016).
Batang dan rantingnya mengandung senyawa flavonoid dan
terpenoid. Senyawa flavonoid diketahui mampu menginduksi
terjadinya apoptosis. Apoptosis adalah kematian sel terprogram dan
berperan penting dalam penghambat kanker (Juniar & Hairil
Alimuddin, 2017).

2.1.13 Asam Urat

Asam urat adalah hasil akhir dari katabolisme (pemecahan)

suatu zat yang bernama purin. Zat purin adalah zat alami yang
merupakan pembentuk DNA dan RNA. Ada dua sumber utama purin
yaitu purin yang diproduksi sendiri oleh tubuh dan purin yang
didapatkan dari asupan makanan seperti tanaman atau hewan. Asam
urat sebenarnya memiliki fungsi dalam tubuh yaitu sebagai
antioksidan dan bermanfaat dalam regenerasi sel. Metabolisme tubuh
secara alami menghasilkan asam urat. (Megayanti, 2018).
Hiperurisemia merupakan gangguan eliminasi asam urat
melalui ginjal yang disebabkan menurunnya sekresi asam urat
kedalam tubuli ginjal, sehingga akan terjadi peningkatan kadar asam
urat dalam darah, (Ningtiyas & Ramadhian, 2016).
Asam urat disebut juga artritis gout termasuk suatu
penyakit yang menyerang persendian, dan paling sering dijumpai di
masyarakat terutama dialami oleh lanjut usia (lansia). Faktor risiko
yang menyebabkan orang terserang penyakit asam urat adalah
genetik/riwayat keluarga, asupan senyawa purin berlebihan,
konsumsi alkohol berlebih, kegemukan (obesitas), hipertensi,
gangguan fungsi ginjal dan obat-obatan tertentu (terutama diuretika)
(Simamora, 2018)

25
 BAB 3
METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Febuari 2023 sampai Maret 2023
Tempat penelitian adalah di Laboratorium Farmakologi Program Studi
Farmasi STIKES Dirgahayu Samarinda. Laboratorium Fitokimia untuk
pembuatan ekstrak etanol dan skrining fitokimia dau karamunting.
Determinasi daun karamunting dilakukan di “Herbarium Mulawarman”,
Laboratorium Ekologi dan Konservasi Biodeversitas Hutan Tropis
Fakultas Kehutanan Universitas Mulawarman Samarinda.

3.2 Rancangan Penelitian

Bentuk rancangan penelitian yang dipilih pada penelitian ini adalah

postest control group design. Hewan uji diukur konsentrasi asam uratnya
setelah diberi perlakuan. Secara skematis rancangan penelitian digambarkan
sebagai berikut:

3.3 Metode Penelitian

3.3.1 Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian experimental.

Penelitian eksperimental merupakan kegiatan penelitian yang bertujuan
untuk mengetahui suatu pengaruh yang timbul akibat adanya perlakuan
tertentu (Notoatmodjo, 2010). Jenis penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antihiperurisemia oleh ekstrak etanol daun
Karamuting (Rhodomyrtus tomentosa) pada mencit jantan putih.

3.3.2 Jumlah Sampel

Pada penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL)

dengan 6 kelompok perlakuan. Jumlah mencit dalam satu kelompok
perlakuan dihitung berdasarkan rumus Federer (Jusman dan Halim,

26
 2009). Berikut perhitungan yang digunakan dalam penelitian.

(t-1)(n-1) ≥ 15

(6-1)(n-1) ≥ 15

5(n-1) ≥ 15

n≥4

Keterangan : t adalah jumlah perlakuan n adalah jumlah pengulangan

untuk tiap perlakuan Berdasarkan perhitungan untuk
penelitian ini, jumlah perlakuan (t) yang digunakan adalah 6
kelompok, sehingga diperoleh nilai n ≥ 4. Hasil tersebut
menunjukkan bahwa jumlah minimal mencit yang
digunakan pada tiap kelompok perlakuan adalah 4 ekor
mencit. Besar sampel ; Besar sampel pada percobaan ini
adalah 24 ekor mencit, yang di dapat dari rumus yang di
uraikan di atas.

3.3.3 Prosedur Kerja

1. Persiapan alat dan bahan

 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kandang
mencit, Microlab 300, perkolator (Pyrex), rotary evaporator
(Heidolph), corong buchner (Pyrex), neraca analitik digital
(Ohaus), oven, cawan, blender, spatula, pinset, hot plate
(Barnstead), seperangkat alat gelas (Pyrex), jarum sonde,
spuit dengan jarum suntik (Terumo), kertas saring, pipa
kapiler hematokrit, mikrosentrifuge (eppendorf), mikropipet,
mikrotip, sentrifuge (Hermle), masker, vial, ayakan no 40,
timbang, blender, shaker,rotary vacuum evaporator, beaker
glass, erlenmeyer, petri disk, tabung reaksi, alumunium foil,
kapas, laminar flow, kaca perata dan desikator.

27
  Bahan
Bahan yang digunakan adalah daun Karamuting
(Rhodomyrtus tomentosa),CMC Na 1% (Brataco), allopurinol
(Kalbe Farma), kalium oksonat (Sigma Aldrich), hati ayam,
melinjo, dan pereaksi kit untuk pengukuran asam urat
(Fluitest® UA). Bahan untuk uji fitokimia yaitu : etanol 70%
seagai pelarut, NaOH, Pb asetat, asam asetat, reagen
Dragendroff, reagen Meyer, asam sulfat pekat, FeCl 3%,
gelatin 1%.

2. Variabel Penelitian

 Variabel Bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah

ekstrak etanol daun karamunting pada berbagai dosis yaitu
200, 400, dan 800 mg/kg BB/hari.
 Variabel Terikat Variabel terikat dalam penelitian ini adalah
kadar asam urat dalam darah mencit jantan setelah pemberian
ekstrak etanol daun karamunting.
 Variabel Terkendali Variabel terkendali dalam penelitian ini
adalah frekuensi pemberian hati ayam dan melinjo, frekuensi
pemberian ekstrak etanol daun karamunting, cara pemberian,
jenis kelamin mencit, berat badan mencit, umur mencit, dan
lamanya pengkondisian sebelum pengujian

3. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Karamuting

Daun karamunting diperoleh dari daerah Desa Melan,

Kecamatan Longmesangat Kalimantan Timur. Kriteria daun
karamunting yang digunakan adalah daun yang tidak terlalu muda dan
terlalu tua kira-kira daun ketiga dan sampai keenam dari pucuk,
berwarna hijau, segar, tidak berlubang dan lembaran daun berbulu
kelabu. (Sinaga Sri & Rahayu, 2019) Determinasi dilakukan sebelum
daun karamunting digunakan. Daun karamuting dibersihkan kemudian

28
 dicuci, diangin-anginkan pada suhu kamar dan dimasukkan ke dalam
oven pada suhu 40°C selama 24 jam sampai didapatkan daun kering.
Daun kering kemudian dihaluskan lalu diayak dengan ayakan mesh no
40 dan ditimbang. Setiap 250 g serbuk daun karamunting dimaserasi
dengan 6000 ml etanol 70% selama 5 hari. Maserat kemudian
diendapkan semalam kemudian dipisahkan dari residu dan dipekatkan
menggunakan rotary evaporator pada suhu 40oC sampai diperoleh
ekstrak kental etanol. Sebelum dilakukan percobaan hewan uji
dipuasakan selama 3 jam tetapi tetap diberi air minum.

4. Skrining Fitokimia Daun Karamunting

4.1 Uji Flavonoid

4.1.1 Uji Reagen Alkalin:
Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL pelarut, sampel
disaring, filtrat (2 mL) ditambah beberapa tetes larutan NaOH.
Apabila terbentuk warna kuning dan memudar setelah
ditambah dengan asam berarti positif mengandung flavonoid
(Tiwari et al., 2011).
4.1.2 Uji Timbal Asetat:
Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL pelarut. Sampel
disaring, filtrat (2 mL) dimasukkan dalam tabung reaksi,
ditambahkan 1 mL Pb asetat 10% dan dikocok. Apabila
terjadi perubahan warna menjadi coklat kekuningan berarti
positif mengandung flavonoid (Tiwari et al., 2011).
4.2 Uji Alkaloid
4.2.1 Uji Dragendroff:
Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL pelarut. Sampel
disaring, filtrat (2 mL) ditambah dengan 1 mL reagen
Dragendroff, Terbentuknya endapan merah menunjukkan
adanya alkaloid (Tiwari et al., 2011). Uji Mayer: Sampel
(100 mg) dilarutkan dalam 10 mL pelarut. Sampel disaring,
filtrat (2 mL) ditambah dengan 1 mL reagen Meyer.

29
 Terbentuknya endapan kuning menunjukkan adanya alkaloid
(Tiwari et al., 2011).
4.3 Uji Tanin
4.3.1 Uji Besi (III) Klorida:
Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL pelarut. Sampel
disaring, filtrat (2 mL) ditambah dengan 1 mL FeCl3 3%.
Adanya endapan hijau kehitaman menandakan adanya tanin
(Koleva, et al., 2002).
4.3.2 Uji Gelatin:
Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL pelarut. Sampel
disaring, filtrat (2 mL) ditambah dengan 2 mL larutan gelatin
1% yang mengandung NaCl. Jika terbentuk endapan putih
menunjukkan adanya tanin (Tiwari et al., 2011).
4.4 Uji Saponin
4.4.1 Metode Froth:
Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL air dan disaring.
Filtrat dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu dikocok.
Terdapatnya busa yang stabil menunjukkan adanya saponin
(Tiwari et al., 2011)

4.5 Uji Antrakuinon

Sampel (100 mg) dilarutkan dalam 10 mL akuades. Campuran
disaring, filtrat (2 mL) ditambah dengan 5 mL benzena. Hasil
ekstrak kemudian ditambah dengan amonia lalu dikocok.
Terbentuknya warna merah menunjukkan adanya antrakuinon
(Koleva, et al., 2002).
4.6 Uji Steroid Libermann Burchard’s Test:
50 mg sampel dilarutkan dengan kloroform kemudian
disaring. Filtrat ditambah asam asetat anhidrat lalu dipanaskan
dan didinginkan. Ditambahkan asam sulfat pekat melalui
dinding tabung secara perlahan-lahan, jika terbentuk cincin
coklat menandakan adanya steroid (Tiwari et al., 2011).

30
 Salkowski’s Test: 50 mg sampel diekstraksi dengan
kloroform kemudian disaring. Filtrat yang diperoleh
ditambahkan beberapa tetes asam sulfat pekat, lalu dikocok.
Jika campuran berwarna kuning menunjukkan adanya
triterpen (Tiwari et al., 2011).

5. Penentuan Dosis Bahan Uji

Penentuan dosis bahan uji dilakukan berdasarkan studi literatur dan

perhitungan, yaitu sebagai berikut:

a. Dosis allopurinol yang digunakan adalah 10 mg/kg BB dosisi

manusia, Dosis allopurinol yang diberikan pada tikus (Rattus
norvegicus L.) adalah 10 mg/kgBB atau 2 mg/200 gBB. Faktor
konversi dosis tikus putih (Rattus norvegicus L.) dengan berat badan
200 g ke mencit (galur Balb/C.) dengan berat badan 20 g adalah 0,14
(Laurence dan Bacharach, 1964 dalam Kurniawan, 2011). Perhitungan
dosis allopurinol untuk mencit (galur Balb/C) adalah sebagai berikut.
Dosis mencit = dosis tikus x faktor konversi
= 2 x 0,14
= 0,28 mg/20 gBB
b. Dosis kalium oksonat yang digunakan adalah 250 mg/kg BB dosis
pada manusia yang mengacu pada penelitian sebelumnya (Suhendi et
al., 2011).
c. Berdasarkan penelitian sebelumnya ekstrak daun karamunting
terhadap antiinflamasi, dosis 400 mg/kg BB menunjukkan aktivitas
antiinflamasi yang efektif dengan penghambatan mencapai 62,6%
(Kumar et al., 2008a). Pemilihan dosis mengacu pada dosis tersebut,
kemudian dibuat tingkatan dosis yaitu 200 mg/kg BB (di bawah dosis
optimal), 400 mg/kg BB (dosis optimal) dan 800 mg/kg BB (di atas
dosis optimal).
d. Dosis makanan tinggi purin
Berdasarkan konversi anatra perhitungan jenis hewan yaitu : konversi
dosis manusia (70kg) ke mencit (0,0026 g) maka sesuai table
konversi dosisi manusia ke mencit :

31
 Dosis Mencit = Dosis manusia x 0,0026g

= 50 gram /70kg x 0,0026 g

= 0,13 gram/70 kgBB

= 0,0000012 gram/gramBB mencit

1. Jadi jumlah melinjo yang di berikan pada mencit adalah 0,0000012

gram/gramBB mencit. (Imanuel et al., 2019). Makanan ini dibuat
dengan cara memperkecil ukuran emping melinjo dan dicampurkan
dengan pakan standar yang akan diberikan.

2. Dosis jus hati ayam yang diberikan 0,5mL/20g BB. Makanan ini
dibuat dengan cara menghaluskan hati ayam yang sudah direbus
dalam air suling dengan perbandingan 1:3 Sebanyak 2 kali sehari tiap
pagi dan sore hari dengan volume pemberian 3 mL. (Masruroh,
2016).

6. Pemilihan hewan uji

Kriteria hewan uji yang digunakan adalah mencit putih jantan

galur Balb/C kurang lebih memiliki variasi biologis yang hampir
sama yaitu mencit jantan berjumlah 24 ekor dengan umur 2-3 bulan,
berat badan 20-30 gram dengan keadaan sehat dengan ciri ciri mata
jernih bersinar, dan tingkah laku normal, bulunya bersih. Sedangkan
kriteria eksklusi merupakan kriteria dimana subjek penelitian tidak
dapat mewakili populasi karena tidak memenuhi syarat sebagian
sampel penelitian yaitu pada awal perlakuan mencit tidak terbaca
kadar asam uratnya (Masruroh, 2016).

Sampel penelitian menggunakan mencit putih jantan

galur lokal dengan berat badan 10-20 gramdan
berumur 2-3 bulan, dengan keadaan sehat dengan
cirri-ciri mata jernih bersinar, dan tingkahlaku
normal, bulunya bersih.

Mengadaptasikan hewan coba terlebih

dahulu selama 1 minggu

32
 Memberikan pakan standard dan air
.

Gambar 3.6 Tahap Persiapan Hewan Coba

7. Pembuatan Larutan CMC Na 1%

CMC Na ditimbang sebanyak 1 gram, lalu ditaburkan di

atas permukaan 20 ml air panas (20 kali berat CMC Na) sampai
mengembang. Kemudian diaduk sampai terbentuk massa yang kental
dan ditambah air sampai volume 100 ml, sehingga didapatkan CMC
Na konsentrasi 1 %.

8. Pembuatan Suspensi Allopurinol

Dosis yang diberikan pada hewan uji adalah 10 mg/kg BB

dosis pada manusia. Allopurinol digunakan sebagai kontrol positif
yang di ambil dari penelitian sebelumnya (Masruroh, 2016).
Allopurinol ditimbang sebanyak 24 mg, lalu disuspensikan dalam 10
ml larutan CMC Na 1% kemudian aduk sampai homogen.

9. Pembuatan Sediaan Kalium Oksonat

Kalium oksonat sebagai penginduksi hiperurisemia

digunakan dosis 250 mg/kg BB di ambil dari penelitian sebelumnya
(Imanuel et al., 2019).Kalium oksonat ditimbang sebanyak 0,25 gram
dan disuspensikan ke dalam larutan CMC Na 1% sampai volume 10
ml.

10. Pembuatan Sediaan Jus Hati Ayam

Dosis jus hati ayam yang diberikan secara per oral pada
hewan uji untuk menginduksi hiperurisemia adalah 0,5 ml/20kg BB.
Hati ayam ditimbang sebanyak 5 gram, kemudian dibuat jus
menggunakan air sebanyak 15 ml. Perbandingan antara berat hati
ayam dengan air adalah 1 : 3. Sebanyak 2 kali sehari tiap pagi dan

33
 sore hari dengan volume pemberian 3 mL. (Masruroh, 2016)..

11. Pembuatan Sediaan Emping Melinjo

Melinjo yang digunakan pada penelitian ini berupaemping melinjo

dan di berikan sebanyak 0,0000012 gram/gramBB mencit. Kemudian
emping melinjo mentah ditumbuk terlebih dahulu pada mortir hingga
diperoleh ukuran yang hampir sama dengan ukuran pakan standar,
kemudian ditambahkan ke dalam pakan hewan uji. Pemberian
melinjo yang mengandung tinggi purin digunakan untuk
meningkatkan kadar asam urat (Imanuel et al., 2019).

12. Pengambilan Darah

Pengambilan darah dilakukan satu jam setelah pemberian

sediaan uji atau dua jam setelah induksi hiperurisemia, Sebelum
pengambilan darah, mencit dimasukkan kedalam kandang kecil
sedemikian rupa hingga tidak dapat bergerak. Kemudian ekor mencit
dibersihkan dengan alkohol 70%. Selanjutnya ujung ekor mencit
digunting kurang lebih 0,2 cm dari ujung ekor, dilakukan pemijatan
perlahan terhadap ekor agar darah keluar. (Suhendi et al., 2011;
Muhtadi et al., 2014).

13. Pelaksanaan Pengujian Aktivitas Antihiperurisemia

Hewan uji mencit putih jantan galur Balb-C disiapkan sebanyak 24

ekor, mencit ditimbang dan diberi tanda pengenal pada bagian ekor.
Kemudian dikelompokkan menjadi 6 kelompok. Pada pengujian ini,
masing-masing kelompok terdiri dari 4 mencit.

Kelompok I (kontrol normal) : mencit tanpa diberi perlakuan apapun

tetapitetap di beripkan makan dan minum.

Kelompok II (kontrol negatif) : mencit diinduksi dengan kalium

oksanat, jus hati ayam dan emping melinjo selama 12 hari lalu
diberikan larutan suspensi CMC Na 1% secara per oral selama 12
hari.

34
Kelompok III (kontrol positif) : mencit diinduksi dengan kalium
oksanat, jus hati ayam dan emping melinjo selama 12 hari lalu
diberikan suspensi allopurinol 10 mg/kg BB secara per oral selama
12 hari.

Kelompok IV (Perlakuan 1) : mencit diinduksi dengan kalium

oksanat, jus hati ayam dan emping melinjo selama 12 hari lalu
diberikan suspensi ekstrak atanol daun karamuting 200 mg/20kg BB
secara per oral selama 12 hari.

Kelompok V (Perlakuan 2) : mencit diinduksi dengan kalium

oksanat, jus hati ayam dan emping melinjo selama 12 hari lalu
diberikan suspensi ekstrak etanol daun karamuting 400 mg/20kg BB
secara per oral selama 12 hari.

Kelompok VI (Perlakuan 3) : mencit diinduksi dengan kalium

oksanat, jus hati ayam dan emping melinjo selama 12 hari lalu
diberikan suspensi ekstrak etanol daun karamuting 800 mg/20kg BB
secara per oral selama 12 hari.

Perlakuan pada hewan uji dilakukan selama 12 hari.

Kelompok II-VI dikondisikan mengalami hiperurisemia terlebih
dahulu dengan diberi makanan tinggi purin berupa melinjo 0,0000012
gram/gramBB mencit yang ditambahkan pada pakan mencit selama 12
hari dan hati ayam 0,5 ml/g BB selama 4 hari. Pada hari ke-5
kelompok II diberi perlakuan dengan pemberian allopurinol 10
mg/kgBB sebagai kontrol positif, kelompok III diberi perlakuan
dengan pemberian CMC Na 1% sebagai kontrol negatif, dan
kelompok VI diberi perlakuan dengan pemberian masing-masing dosis
ekstrak etanol daun karamuting yaitu 200 mg/20kg BB, 400 mg/20kg
BB, dan 800 mg/20kg BB. Pada hari ke-12 dilakukan penginduksian
kalium 50 mg/20kg ][=’BB secara intraperitoneal untuk semua
kelompok perlakuan, dimana 1 jam setelahnya diberi bahan uji pada
masing-masing kelompok hewan uji. Satu jam setelah perlakuan atau
dua jam setelah penginduksian kalium oksonat dilakukan pengambilan

35
 darah untuk mengetahui penurunan masingmasing dosis ekstrak
selama perlakuan, lalu dibandingkan dengan kontrol positif dan
kontrol negative (Masruroh, 2016).
14. Pengambilan Darah

. Pengambilan darah dilakukan satu jam setelah pemberian sediaan

uji atau dua jam setelah induksi hiperurisemia (potassium oksonat
dosis 250 mg/kgBB), darah diambil lewat mata mencit dengan cara
menusuk cabang vena opthalmicus yang terletak pada saccus
medianus orbitales dengan pipa kapiler. Darah yang mengalir lewat
pipa kapiler ditampung dalam tabung ependorf, setelah darah
menggumpal disentrifus untuk mendapatkan serum.
15. Pengukuran Kadar Asam Urat
Kadar asam urat dalam darah hewan uji diukur pada jam ke 1, 2, 3,
dan 4 setelah pemberian sediaan uji. Pengambilan darah mencit
dilakukan dengan cara melukai ekor mencit. Kadar asam urat diukur
dengan metode POCT (Point of Care Testing) dengan menggunakan
alat UA Sure®. Dari data kadar asam urat darah kemudian dihitung
persentase penurunan (%P) kadar asam urat darah dengan persamaan:
𝒌𝒂𝒅𝒂𝒓(−)−𝒌𝒂𝒅𝒂𝒓(𝒑)
%𝐩 = 𝒙𝟏𝟎𝟎%
𝒌𝒂𝒅𝒂𝒓 (−)

Keterangan: Kadar (p)= kadar asam urat darah kelompok uji; Kadar
(-)= kadar asam urat darah kelompok kontrol negative. Pengukuran
ini berdasarkan penentuan perubahan arus yang disebabkan oleh
reaksi asam urat dengan reagen pada elektroda dari strip tersebut.
Ketika sampel darah menyentuh area target sampel dari strip, darah
secara otomatis ditarik ke zona reaksi dari strip. Hasil tes akan
ditampilkan pada layar setelahh 20 detik (Bioptik technologi Inc).

16. Analisis Data

Perlakuan pada masing-masing kelompok hewan uji
menghasilkan data kadar asam urat (mg/dl). Kemudian dilakukan
uji normalitas (Saphiro-Wilk) dan uji homogenitas (Lavene)
yang digunakan sebagai syarat uji One Way Anova. Data yang

36
diperoleh terdistribusi normal dan homogen, sehingga dianalisis
menggunakan uji One Way Anova dan dilanjutkan dengan uji
LSD (Least Significant Difference) untuk melihat hasil yang
berbeda signifikan. Hasil uji One Way Anova dan LSD urikase
Allantoin + H2O2 + CO2 POD 2 H2O2 + H+ + DHBSA +
Aminoantipirin Kuinondiimin + 4 H2O Asam urat + O2 + H2O
menunjukkan nilai yang signifikan bila diperoleh nilai p<0,05
dengan tingkat kepercayaan 95% (Masruroh, 2016).

37
 DAFTAR PUSTAKA

Abd Hamid, H.; Mutazah, R.; Yusoff, M.M.; Abd Karim, N.A.; Abdull Razis, A.F. Comparative
analysis of antioxidant and antiproliferative activities of Rhodomyrtus tomentosa extracts
prepared with various solvents. Food Chem. Toxicol. 2017, 108, 451–457.

Cui C, Zhang S, You L, Ren J, Luo W, Chen W, et al. Antioxidant capacity of anthocyanins from
Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) and identification of the major anthocyanins. Food Chem
2013;139(1-4):1-8.

Chorachoo, J.; Saeloh, D.; Srichana, T.; Amnuaikit, T.; Musthafa, K.S.; Sretrirutchai, S.;
Voravuthikunchai, S.P. Rhodomyrtone as a potential anti-proliferative and apoptosis inducing
agent in HaCaT keratinocyte cells. Eur. J. Pharmacol. 2016, 772, 144–151.

Fahmi R, Rullah K, Rahmat RD, Lucida H, Manjang Y, Lajis N, dan Dachriyanus. Pengembangan
potensi rhodomyrtone sebagai bahan aktif sediaan topikal. Jurnal Farmasi Indonesia Vol. 6
No.1 Januari 2012: 7-12.

Imanuel, C., Rambi, J., Queljoe, E. De, & Simbala, H. E. (2019). Uji Aktivitas Penuruna Kadar Asam
urat Tikus Putih Galur Wistar( Rattus norvegicus ). 8, 465–471.

Jeenkeawpieam J, Phongpaichit S, Rukachaisirikul V, Sakayaroj J. Antifungal activity and molecular

identification of endophytic fungi from the angiosperm Rhodomyrtus tomentosa. Afr J
Biotechnol 2012;11(75):14007-16. 59

Jeong D, Yang WS, Yang Y, Nam G, Kim JH, Yoon DH, et al. In vitro and in vivo anti-inflammatory
effect of Rhodomyrtus tomentosa methanol extract. J Ethnopharmacol 2013;146(1):205-13.
Juniar, E., & Hairil Alimuddin, A. (2017). Aktivitas Sitotoksik dan Antioksidan Ekstrak Batang
Karamunting (Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk). Jurnal Kimia Khatulistiwa, 6(2), 37–43.
https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jkkmipa/article/view/19697

Koleva, I. I., Van Beek T. A., Linssen J. P. H., Groot A. De, Evstatieva L. N. 2002. Screening of
Plant Extract for Antioxidant Activity: A Comparative Study On Three Testing Methods.

38
 Phytochemical Analysis. 13 : 8-17

Lavanya G, Voravuthikunchai SP, Towatana NH. Acetone extract from Rhodomyrtus tomentosa: A
potent natural antioxidant. Evid Based Complement Alternat Med 2012;2012:535479.

Leejae S, Hasap L, Voravuthikunchai SP. Inhibition of staphyloxanthin biosynthesis in

Staphylococcus aureus by rhodomyrtone, a novel antibiotic candidate. J Med Microbiol
2013;62(3):421-8.

Limsuwan S, Hesseling-Meinders A, Voravuthikunchai SP, Van Dijl JM, Kayser O. Potential

antibiotic and anti-infective effects of rhodomyrtone from Rhodomyrtus tomentosa (Aiton)
Hassk. on Streptococcus pyogenes as revealed by proteomics. Phytomedicine 2011;18(11):934-
40.

Limsuwan S, Kayser O, Voravuthikunchai SP. Antibacterial activity of Rhodomyrtus tomentosa

(Aiton) Hassk. leaf extract against 60 clinical isolates of Streptococcus pyogenes. Evid Based
Complement Alternat Med 2012;2012:697183.

Maskam MF, Mohamad J, Abdulla MA, Afzan A, dan Wasiman I. Antioxidant Activity of
Rhodomyrtus tomentosa (Kemunting) Fruits and Its Effect on Lipid Profile in Induced-
cholesterol New Zealand White Rabbits. Sains Malaysiana 2014; 43(11): 1673– 1684.

Masruroh, I. N. (2016). Uji Aktivitas Antihiperusemia Ekstrantaak Metanol Biji Juwet (Syzygiumi
cumini (L.) Skeels) Pada Mencit Jantan Galur Balb-C Hiperusemia.

Megayanti, N. L. S. (2018). Gambaran Kadar Asam Urat Di Desa Sobangan Kecamatan Mengwi.
Kesmas: National Public Health Journal, 5–22.

Ningtiyas, I. F., & Ramadhian, M. R. (2016). Efektivitas Ekstrak Daun Salam untuk Menurunkan
Kadar Asam Urat pada Penderita Artritis Gout. Medical Journal of Lampung University, 5(3),
105–110.

Rizki, & Selaras, G. H. (2012). Studi Morfologi Organ Vegetatif Karamunting Rhodomyrtus
tomentosa ( Ait .) Hassk. Jurnal Agricultural Sciense, 2(1), 1–6.
39
Saising J, Hiranrat A, Mahabusarakam W, Ongsakul M, Voravuthikunchai SP. Rhodomyrtone from
Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk. as a natural antibiotic for 61 staphylococcal cutaneous
infections. J Health Sci 2008;54(5):589-95.

Saising J, Ongsakul M, Voravuthikunchai SP. Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk. ethanol extract
and rhodomyrtone: A potential strategy for the treatment of biofilm-forming staphylococci. J
Med Microbiol 2011;60(12):1793-800.

Saising J, Voravuthikunchai SP. Anti Propionibacterium acnes activity of rhodomyrtone, an effective

compound from Rhodomyrtus tomentosa (Aiton) Hassk. leaves. Anaerobe 2012;18(4):400-4.

Salni D, Sargent MV, Skelton BW, Soediro I, Sutisna M, White AH, Sukandar EY, et al.
Rhodomyrtone, an antibotic from Rhodomyrtus tomentosa. Aust J Chem 2002;55(3):229-232.
Shiratake, S., Nakahara, T., Iwahashi, H., Onodera, T., Mizushina, Y."Rose myrtle (Rhodomyrtus
tomentosa) extract and its component, piceatannol, enhance the activity of DNA polymerase and
suppress the inflammatory response elicited by UVB-induced DNA damage in skin cells".
Molecular Medicine Reports 12.4 (2015): 5857-5864.

Simamora, R. H. (2018). Aplikasi Media Udiovisual Penyuluhan Kesehatan : Danpak Asam Urat T
rhadap Kesehatan Di Wilayah Desa Binaan Fakultas Keperawatan Universitas Sumatra Utara
Tahun 2018 Roymond H . Simamora Fakultas Keperawatan Universitas Sumatera Utara Jalan
Prof T Ma As.

Sinaga Sri, E., & Rahayu, E. (2019). Potensi Medisinal Karamunting (Rhodomyrtus tomentosa) (Vol.
1). www.Agrofolio.eu/db

Sinata, N., & Arifin, H. (2016). Antidiabetes dari Fraksi Air Daun Karamunting (Rhodomyrtus
tomentosa (Ait.) Hassk.) Terhadap Kadar Glukosa Darah Mencit Diabetes. Jurnal Sains Farmasi
& Klinis, 3(1), 72. https://doi.org/10.29208/jsfk.2016.3.1.102

Syaifudin. (2015). Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Herba Kaca-kaca (Peperomia pellucida (L) Khunt)
Terhadap Penurunan Kadar AsamUrat Dalam Darah Pada Mencit (Mus musculus). Ekp, 13(3),
1576–1580.
40
Tayeh, M.; Nilwarangkoon, S.; Tanunyutthawongse, C.; Mahabusarakum, W.; Watanapokasin, R.
Apoptosis and antimigration induction in human skin cancer cells by rhodomyrtone. Exp. Ther.
Med. 2018, 15, 5035–5040.

Tayeh, M.; Nilwarangoon, S.; Mahabusarakum, W.; Watanapokasin, R. Anti-metastatic effect of

rhodomyrtone from Rhodomyrtus tomentosa on human skin cancer cells. Int. J. Oncol. 2017, 50,
1035–1043.

Tiwari, Prashant., Bimlesh Kumar, Mandeep Kaur, Gurpreet Kaur, Harleen Kaur. 2011.
Phytochemical Screening and Extraction : A Review. International Pharmaceutica Scienca. 1
(1) : 98-106.

Voravuthikunchai SP, Dolah S, Charernjiratrakul W. Control of Bacillus cereus in foods by

Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk. leaf extract and its purified compound. J Food
Prot2010;73(10):1907-12.

Wu P, Ma G, Li N, Deng Q, Yin Y, Huang R. Investigation of in vitro and in vivo antioxidant

activities of flavonoids rich extract from the berries of Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk.
Food Chem 2015;173:194-202.

Zhou, X.W.; Xia, Y.Z.; Zhang, Y.L.; Luo, J.G.; Han, C.; Zhang, H.; Zhang, C.; Yang, L.; Kong, L.Y.
Tomentodione M sensitizes multidrug resistant cancer cells by decreasing P-glycoprotein via
inhibition of p38 MAPK signaling. Oncotarget 2017, 8, 101965– 101983.

41
42