Materi Prof Hanifah

Preface Slide
Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan,

Fakultas Teknologi Pertanian
Pemahaman Parameter Validasi Metode

Analisis Histamin dalam Ikan dan Produknya
(ISO 19343:2017) dengan UPLC-DAD
Disampaikan pada:
Webinar Balai Besar KIPM Makassar,
BKIPM KHP, KKP RI
28 Juli 2021
Prof. Dr. Hanifah Nuryani Lioe Zoom meeting, 9.00 -13.15

28 Juli 2021
Photo Source: Cogent Chemistry
HPLC dengan deteksi UV 254 nm

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar
KAPAN VALIDASI METODE DIPERLUKAN ?
• apabila tidak terdapat metode analisis yang standar

• apabila tersedia metode analisis standar tetapi sistem berubah :
- Berubah jenis metodenya (HPLC → UPLC)

- Berubah konsentrasi analitnya
- Berubah matriks sampelnya
- Berubah SOP/prosedurnya (berbeda pereaksi, dll)

METODE STANDAR
untuk pengujian histamin pada produk perikanan
- SNI → SNI 2354.10.2016 → HPLC fluoresen dan pereaksi OPA

- ISO → ISO 19343:2017 → HPLC-UV dan pereaksi Dansyl
- AOAC → AOAC Official Method 977.13 → Fluorometer dan OPA
Dansyl chloride Dansyl – histamine
Deteksi UV 254 nm Deteksi UV 254 nm

Standar Histamin dalam Produk Perikanan
SNI 8222:2016

Standar Histamin di Uni Eropa
EC 2073/2005 → EU 1019/2013

DASAR HPLC dan UPLC

Dasar Analisis dengan HPLC
(high performance liquid chromatography)
Max 400 Bar
Ukuran
partikel
3-10 µm

Dasar Analisis dengan UPLC = UHPLC
(ultra high performance liquid chromatography)
Max 1200 Bar
Ukuran
partikel
<3 µm

HPLC vs UHPLC
Ukuran partikel
< 3 µm

Detektor HPLC dan UHPLC
Solut property detectors

• UV/Vis detector
Solute property detectors:
fixed wavelength
- Sensitif
variable wavelength (MWD) - Merespon terhadap solute
- Dapat dilakukan dengan gradien
photodiode array (DAD)
fase gerak
• Fluorescence detector

10 Juni 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Temu JLPPI-KP, BKIPM, KKP RI , Bandung
Perbandingan Detektor HPLC-UV
Detektor UV biasa vs MWD vs PDAD
Hasil detektor MWD Hasil detektor PDAD atau DAD

Intensity
deteksi 254 nm
deteksi kontinyu 200 - 400 nm
Intensity
Intensity
deteksi 214 nm
Kromatogram 2 dimensi
Kromatogram 3 dimensi: meningkatkan sensitivitas

Tujuan Derivatisasi pada Analisis HPLC atau
UHPLC
• Untuk meningkatkan detektabilitas analit (limit deteksi rendah)

• Peningkatan resolusi analit
• Meningkatkan selektifitas analat dalam matriks komplek
Derivatisasi dapat dilakukan secara

- pre-kolom → ISO 19343:2017
- post-kolom

Sistem HPLC atau UHPLC
• Reversed Phase
- Kolom: C18 atau ODS (non polar)
- Fase gerak: methanol, asetonitril, air, dsbnya (polar)
- contoh: analisis histamin
• Normal Phase
- Kolom: silica, diol, amino (polar)
- Fase gerak: heksana, toluena, dsbnya (non polar)
- contoh: analisis kolesterol

Sistem HPLC atau UHPLC
• Reversed Phase
- Kolom: C18 atau ODS (non polar)
- Fase gerak: methanol, asetonitril, air, dsbnya (polar)
- contoh: analisis histamin

Kromatogram
Hasil Analisis HPLC atau UHPLC
A
• Berupa Kromatogram
C
Respon detektor
B • 1 Puncak = 1 Senyawa
C
• Baca Waktu retensi (t menit)
B
• Baca Luas area puncak
• Luas area sebanding dengan A
konsentrasi senyawa
M
• Resolusi antara dua puncak
> 1.25
tM = Waktu
tO tRA
tRB
tRC
Kromatogram
Hasil Analisis HPLC atau UHPLC
A
• Berupa Kromatogram
100 C
Respon detektor
B • 1 Puncak = 1 Senyawa
Y = 10.034* X –0.0012 C
• Baca Waktu retensi (t menit)
80
R2 > 0.990 B
• Baca Luas area puncak
Response
Area
60
• Luas area sebanding dengan A
Luas
40
konsentrasi senyawa
M
• Resolusi antara dua puncak
20 > 1.25
tM = Waktu
tO tRA 0
0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0
tRB Concentration (mg/ml)
tRC
PARAMETER VALIDASI

Prosedur Pengujian/Prosedur Analisis
Lot/batch
SAMPLING/SUB SAMPLING
Sampel laboratorium
Metode Analisis ISO, AOAC, dll.
PREPARASI CONTOH
Sampel uji
EKSTRAKSI ANALAT
Larutan uji/ Larutan analitik

PENENTUAN ANALAT
Hasil uji

Hasil Analisis
Nilai yang sebenarnya Kesalahan
Kesalahan Kesalahan acak

sistematik (bias)
TRUENESS PRECISION
Analisis CRM atau Analisis duplo

sampel yang dispike Analisis triplo
Metode analisis harus dapat dipercaya
(reliable)
Melakukan validasi metode atau verifikasi metode
• Linearitas instrumen
• Presisi instrumen
• Limit deteksi instrumen (IDL = LOD)
• Linearitas metode
• Limit deteksi metode (MDL = LOQ)
• Akurasi metode
• Presisi metode
• Reprodusibilitas intralab
• Reprodusibilitas interlab
• Robustness
• Ketidakpastian pengukuran
Hasil Analisis Kuantitatif
n. d. = tidak terdeteksi
LOD = limit deteksi
LOQ = limit kuantifikasi
LOR = batas pelaporan data
tr = terdeteksi di bawah LOQ
Hasil analisis dilaporkan mulai dari LOQ ke atas
Source: ITP Food Safety, Ghent University

Hasil Analisis Kuantitatif
Source: ITP Food Safety, Ghent University

Sensitivitas: LOD, LOQ
LOD

Sensitivitas dan working range
Source: Eurachem

Penentuan LOD dan LOQ instrumen
• Menggunakan larutan standard konsentrasi terendah yang dapat terdeteksi
• Injeksi larutan standard dari vial yang samake HPLC, 10 kali
• Baca hasil pengujian 10 kali
• Apabila RSD lebih dari RSD Horwitz, maka konsentrasi tererndah tersebut dapat diadopsi
sebagai LOD instrumen
• Apabila RSD kurang dari RSD Horwitz, maka konsentrasi terendah tersebut dapat diadopsi
sebagai LOQ instrument
• Atau bila pembacaan blank sample memberikan hasil, maka ukur blank sample 10 kali dan
hitung
X = rata-rata konsentrasi dalam blank sample
SD = standard deviasi dari pengukuran blank sample
LOD = X + 3SD dan LOQ = X + 6SD atau LOQ = X + 10SD
2819Juli
May2021
2020 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id
hanifahlioe@apps.ipb.ac.id ITP, FATETA,
Webinar BalaiIPB Webinar
Besar KIPM Makassar
Penentuan LOD dan LOQ instrumen
• Menggunakan kurva hubungan S/N dan konsentrasi larutan

standard dari pengujian linearitas instrumen
• S/N (signal/noise) dibaca dari print out HPLC
y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/mL

S/N
S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/mL
Konsentrasi standard ng/mL

LOQ = 10/3 LOD
19 May 2020 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id

hanifahlioe@apps.ipb.ac.id ITP, FATETA, IPBBesar
Webinar
28 Juli 2021 Webinar Balai KIPM Makassar
Penentuan LOD dan LOQ metode

standard dari pengujian linearitas metode
y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/g sampel

S/N
S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/g sampel
Konsentrasi standard ng/g sampel

LOQ = 10/3 LOD
19
28May
Juli2020
Webinar IPBBesar
Balai Webinar
KIPM Makassar

y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/g sampel

S/N
S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/g sampel

LOQ = 10/3 LOD
19
28May
Juli2020
Webinar IPBBesar
Balai Webinar
KIPM Makassar

6
5
• S/N (signal/noise)
y = 4.7452xdibaca
+ 0.5542 dari print out HPLC
4
S/N = 3
S/N
2 y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/g sampel

S/N
1 LOD
0 S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/g sampel
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Spiked amount
LOQ = 10/3 LOD
19
28May
Juli2020
Webinar IPBBesar
Balai Webinar
KIPM Makassar
Penentuan LOD metode melalui uji
rekoveri
• Lakukan uji rekoveri (10x) pada konsentrasi rendah, medium dan
tinggi (minimal 3 konsentrasi spike)
• Tentukan SD dari masing-masing uji rekoveri
• Buat hubungan antara SD dan konsentrasi spike
SD=0=y = Ax + B LOD metode = x ng/g sampel

y = Ax + B
SD
LOD metode = MDL =LOQ
MDL = method detection limit = LOQ

Konsentrasi baku (ng/g sampel) LOD = LOQ*3/10
19 May
28 Juli2020
Webinar IPBBesar
Balai Webinar
KIPM Makassar
LOQ
• Limit of determination or limit of quantification

• LOQ selalu lebih besar daripada LOD
• LOQ = S/N = 10
• LOQ = 10 SD (untuk LOD = 3 SD)
• Kuantifikasi di bawah batas LOQ masih
memungkinkan tetapi tidak reliable.
19 May 2020 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id ITP, FATETA, IPB Webinar

Akurasi (Trueness) Metode Analisis Kimia
• Akurasi dengan CRM (certified reference material)

→ % Akurasi
atau
• Akurasi dengan uji rekoveri (penambahan senyawa
baku/standard) → Spike ke dalam blank sample
→ % Rekoveri
akurasi dengan spike konsentrasi rendah, medium, tinggi
atau
• Akurasi dengan uji rekoveri → Spike ke dalam sampel yang mengandung analit
(konsentrasi yang terbaca - konsentrasi sampel non spike) x 100 %
% Rekoveri = konsentrasi yang dispike

Presisi Metode Analisis Kimia
1. Repeatabilitas/Keterulangan (% RSD) SD x 100 %
2. Reprodusibilitas Intra-lab (% RSD) RSD = rata-rata = % CV
3. Reprodusibilitas Inter-lab (% RSD)
Source: Eurachem

Keberterimaan Akurasi dan Presisi (AOAC, 2012)
Unit Akurasi (%) Presisi (%)
= 2/3 RSD Horwitz
100% 98-102 1.3
10% 98-102 2.8
1% 97-103 2.7
0.10% 95-105 3.7
100 ppm 90-107 5.3
10 ppm 80-110 7.3
1 ppm 80-110 11
100 ppb 80-110 15
10 ppb 60-115 21
1 ppb 40-120 30

Keberterimaan Akurasi dan Presisi (AOAC, 2012)
Unit Akurasi (%) Presisi (%)
= 2/3 RSD Horwitz
100% 98-102 1.3
Presisi = RSD (%) = CV98-102

10% (%) 2.8
1% 97-103 2.7
0.10% = 2/3 RSD Horwitz
95-105 3.7
100 ppm
10 ppm
→ 2/3 90-107
teoritis
80-110
5.3
7.3
1 ppm → RSD Horwitz
80-110 = 2(1-0,5logC)
11
100 ppb 80-110 15
10 ppb 60-115 21
1 ppb 40-120 30

Analisis Histamin dalam Ikan:
ISO 19343:2017
Prinsip analisis: Biogenik amin diekstrak dengan larutan asam, kemudian diderivatisasi dengan
dansil klorida dalam suasana basa pada kondisi cukup panas (bereaksi dengan senyawa amina
primer/asam amino dan senyawa amina sekunder/biogenik amin, kemudian dipurifikasi (clean
up) dengan penambahan toluene, dan analit dilarutkan dalam fase gerak HPLC untuk dianalisis
dengan RP-HPLC-UV. Kuantifikasi histamin dihitung dari rasio luas area histamine terhadap
standard internal.
1 Juli
28 Juli2020
2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar
Int J Food Microbiol, 2019, 288: 97 - 101
Validasi Analisis Histamin (ISO 19343:2017)

Biogenic Amine
▪ Terbentuk dari reaksi dekarboksilasi enzimatis asam amino bebas

▪ Ditemukan pada daging terfermentasi, sayur asin, ikan, wine, keju,
produk susu
▪ Contoh : histamine, tyramine, cadaverine, putrescine, spermidine
▪ Scombrotoxicosis: histamine intoxication sesudah konsumsi ikan
scromboida (tuna, mackerel, bonito)
▪ Toxic dose tergantung sensitivitas individu
▪ Cadaverine, putrescine, sperimidine, dan spermine : tidak toksik, tetapi
dapat membentuk nitrosamin (karsinogenik) setelah bereaksi dengan
nitrit
▪ Tyramine: pada keju matang→migraine, hipertensi

Biogenic Amine
Asam Amino Bebas Biogenic Amine

Dekarboksilasi
• Histidin • Histamin
• Tirosin • Tiramin
• Lisin • Kadaverin
• Ornitin • Putresin
• 5-hidroksitriptofan • Serotonin
• Triptofan • Triptamin
• Arginin • Spermin + Spermidin

Bahan
1. Aseton (p.a.)
2. Asetonitril (HPLC grade)
3. Toluen (p.a.)
4. Air (HPLC grade atau setara: air re-distilasi)
5. Air (destilasi atau setara)
6. Gas nitrogen (N2)
7. Larutan asam perklorat 0.2 M
8. Larutan sodium karbonat jenuh (110 g/150 mL air)
9. Larutan dansil klorida 7.5 mg/mL dalam aseton (tahan 3 minggu, simpan di freezer)
10. Larutan L-prolin 100 mg/mL (tahan 3 minggu, suhu refrigerator)
11. Larutan baku stok histamin 12.5 mg/mL
12. Larutan baku stok SI (standard internal) = 1,7-diaminoheptana = 6.4 mg/mL
(tahan 3 minggu, suhu refrigerator)
Peralatan
1. Grinder/blender/mixer
2. Timbangan analitik
3. Homogenizer/Ultra-Turrax
4. Sentifus berpendingin dan tabungnya (kapasitas 25 mL)
5. Mikropipet (kapasitas 2-20 µL, 20-200 µL dan 100-1000 µL)
6. Tabung reaksi bertutup
7. Vortex
8. Waterbath 60 °C ± 1 °C dengan tutup dan temperature controller
9. Refrigerator 5 °C dan Freezer < -18 °C
10. Membran PTFE/PP 0.2 µm
11. HPLC dengan oven suhu 25 °C ± 2 °C dan detector UV 254 nm, serta siring HPLC
12. Kolom HPLC C18
13. Vial 1 mL (bila perlu digunakan insert untuk injeksi otomatis)
Preparasi sampel Analisis Histamin ISO 19343:2017
Ekstraksi
• 5 g ± 0.1 g sampel homogen + 10 mL asam perklorat + 100 µL SI (6.4 mg/mL)
• Aduk dengan Ultra-Turrax
• Centrifuge 8000 x g, 4 ºC, 5 menit
Derivatisasi
• 100 µL supernatan + 300 µL larutan sodium karbonat + 400 µL larutan dansil klorida
• Vortex, biarkan 5 menit pada ruang gelap suhu 60 ºC
• Dinginkan dengan air kran lalu + 100 µL larutan L-prolin
• Tempatkan dalam ruang gelap selama 15 menit
Pemurnian
• + 500 µL toluene, vortex, ambil lapisan atas setelah dibekukan selama 30 menit
• Uapkan toluene hingga kering dengan gas N2
• Tepatkan dengan 200 µL fase gerak (ACN + air = 6 + 4), saring 0.2 µm
RP-HPLC-UV untuk deteksi histamin
28 Juli 2021 1 Juli 2020 dalam ikan
hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar
Analisis Histamin ISO 19343:2017
Analisis Histamin pada Ikan (RP-HPLC-UV)
HPLC setting
Derivat
Dansil klorida Dansil klorida kolom : C18 (25 cm x i.d. 4.6 mm, 5 µm)
Amina
sekunder
Fase gerak : gradient air/asetonitril
Laju alir : 1.0 mL/min
Waktu : 30 menit
Biogenic Detektor : UV 254 nm

amine

Analisis HPLC Histamin ISO 19343:2017
Menit ke- A B
HPLC kondisi gradien Air Re-distilasi (%) Asetonitril (p.a.) (%)
0 40 60
Fase gerak : gradien air/asetonitril
11 25 75
11.1 5 95
Laju alir : 1 mL/min
20 5 95
Detektor : UV 254 nm 20.1 40 60
30 40 60

Berat sampel Histamin standard SI

Kurva Kalibrasi
(g) (µL) (µL)
(stok 12.5 mg/mL) (stok 6.4 mg/mL) Histamin
Standard : histamin
5.0 0 100 0 µg/g
SI : 1,7-diaminoheptana 5.0 10 100 25 µg/g
5.0 20 100 50 µg/g
Sampel : daging ikan
5.0 40 100 100 µg/g
5.0 100 100 250 µg/g
5.0 200 100 500 µg/g

Kurva kalibrasi Histamin
Berat sampel Histamin standard SI
Rasio Area Histamin/SI
(g) (µL) (µL)

y = Mx + N (stok 12.5 mg/mL) (stok 6.4 mg/mL) Histamin
5.0 0 100 0 µg/g
5.0 10 100 25 µg/g
5.0 20 100 50 µg/g
5.0 40 100 100 µg/g
5.0 100 100 250 µg/g
5.0 200 100 500 µg/g
0 100 200 500
Perhitungan dalam sampel dengan kurva kalibrasi
Histamin (µg/g ikan) metode: {(area histamine/area SI) – N} : M = µg/g ikan

Contoh penggunaan standard
internal
Senyawa target Standard internal (SI)

(analit standard)
Standard internal pada

konsentrasi yang sama,
respon sama
Standard internal diperlukan

karena ada reaksi derivatisasi
yang belum tentu sempurna
100% reaksinya terjadi

Contoh rasio area puncak digunakan untuk kuantifikasi
5.0 LINEARITAS INSTRUMEN

4.5
Rasio Area Stiren Terhadap
Atau
4.0
LINEARITAS METODE
3.5
Baku Internal
3.0
2.5 y = 1.554x + 0.056
2.0 R² = 0.996
1.5
1.0
0.5
0.0
0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 2.500 3.000 3.500
Konsentrasi stiren (mcg/ml)
Persyaratan : R2> 0.990 (AOAC 2012)

Kromatogram Histamin dalam Sampel Tuna
Int J Food Microbiol, 2019, 288: 97 - 101
trp = tryptamine
phe = phenylethylamine
put = putrescine
cad = cadaverine
hist = histamine
tyr = tyramine
spd = spermidine
spm = spermine
IS = internal standards
IS3 = 1,3-diaminopropane
Waktu retensi Waktu retensi SI IS7 = 1,7-diaminoheptane
Histamin pada pada 15 menit
13,5 menit
1 Juli
28 Juli2020
2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar
Unjuk Kerja Analisis Histamin dalam Sampel Tuna
hasil uji profisiensi (9 laboratorium)
Kriteria Hasil Keberterimaan

Rekoveri pada 25 mg/kg 96% 90 – 107%
Presisi dari 10 - 32% 27 – 90%
reprodusibilitas
Nilai HorRat 1.4 – 3.3 Mendekati 1.0
Nilai HorRat = Rasio Presisi Reprodusibilitas/RSD Horwitz

Kesimpulan
• HPLC dengan kolom C18 yang umum dipakai, diperlukan dalam analisis histamin
menurut ISO 19343:2017
• Detektor UV-Vis, VWD atau MWD, DAD dapat digunakan untuk analisis histamin
pada deteksi 254 nm setelah diderivatisasi pre-kolom
• Detektor MWD dan DAD dapat digunakan untuk analisis histamin berdasarkan ISO
tersebut dengan hasil yang lebih sensitif
• UHPLC atau UPLC dapat digunakan untuk analisis histamin apabila tidak ada HPLC
• Kuantifikasi yang akurat dengan linearitas metode
• Standard internal atau baku internal digunakan agar kuantifikasi lebih akurat dan
menghilangkan pengaruh kehilangan atau ketidaksempurnaan reaksi derivatisasi
• Standard internal (SI) ditambahkan sesaat setelah sampel baru ditimbang agar SI
mengalami semua reaksi yang dilalui oleh sampel
• SI ditambahkan dalam konsentrasi yang sama untuk setiap analisis
TERIMA KASIH

Materi Prof Hanifah

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Materi Prof Hanifah

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Preface Slide

Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan,

Pemahaman Parameter Validasi Metode

Prof. Dr. Hanifah Nuryani Lioe Zoom meeting, 9.00 -13.15

HPLC dengan deteksi UV 254 nm

• apabila tidak terdapat metode analisis yang standar

- Berubah jenis metodenya (HPLC → UPLC)

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

- SNI → SNI 2354.10.2016 → HPLC fluoresen dan pereaksi OPA

Dansyl chloride Dansyl – histamine

Deteksi UV 254 nm Deteksi UV 254 nm

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

(high performance liquid chromatography)

Max 400 Bar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

(ultra high performance liquid chromatography)

Max 1200 Bar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

Solut property detectors

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

Perbandingan Detektor HPLC-UV

Detektor UV biasa vs MWD vs PDAD

Hasil detektor MWD Hasil detektor PDAD atau DAD

Kromatogram 3 dimensi: meningkatkan sensitivitas

• Untuk meningkatkan detektabilitas analit (limit deteksi rendah)

Derivatisasi dapat dilakukan secara

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

Larutan uji/ Larutan analitik

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

Nilai yang sebenarnya Kesalahan

Kesalahan Kesalahan acak

Analisis CRM atau Analisis duplo

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

Source: ITP Food Safety, Ghent University

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

28 Juli 2021 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id Webinar Balai Besar KIPM Makassar

• Menggunakan kurva hubungan S/N dan konsentrasi larutan

y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/mL

S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/mL

Konsentrasi standard ng/mL

19 May 2020 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id

• Menggunakan kurva hubungan S/N dan konsentrasi larutan

y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/g sampel

S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/g sampel

Konsentrasi standard ng/g sampel

• Menggunakan kurva hubungan S/N dan konsentrasi larutan

y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/g sampel

S/N=10=y = Ax2 + B LOQ = x2 ng/g sampel

Konsentrasi standard ng/g sampel

• Menggunakan kurva hubungan S/N dan konsentrasi larutan

2 y = Ax + B S/N=3=y = Ax1 + B LOD = x1 ng/g sampel

SD=0=y = Ax + B LOD metode = x ng/g sampel

MDL = method detection limit = LOQ

• Limit of determination or limit of quantification

19 May 2020 hanifahlioe@apps.ipb.ac.id ITP, FATETA, IPB Webinar

• Akurasi dengan CRM (certified reference material)