LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM BIOPROSES

Materi :

Isolasi Enzim

Disusun oleh :

1. Brillian Talenta B. 21030119190175

2. Elan Patria N. 21030119190081
3. M. Zaki Farilla L. 21030119190155
4. Syavirly Azrana 21030119190177

Group : 2-Kamis

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2020
 LAPORAN RESMI
PRAKTIKUM BIOPROSES

Materi :

Isolasi Enzim

Disusun oleh :

1. Brillian Talenta B. 21030119190175

2. Elan Patria N. 21030119190081
3. M. Zaki Farilla L. 21030119190155
4. Syavirly Azrana 21030119190177

Group : 2-Kamis

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2020
 HALAMAN PENGESAHAN

Materi : Isolasi Enzim

Kelompok : 2-Kamis

Anggota : 1. Brillian Talenta B. 21030119190175

2. Elan Patria N. 21030119190081

3. M. Zaki Farilla Lazani 21030119190155

4. Syavirly Azrana 21030119190177

Telah disetujui dan disahkan oleh asisten pengampu dan dosen pembimbing materi
Isolasi Enzim pada:

Hari :

Tanggal :

Semarang,

Mengesahkan,

Dosen Pembimbing,
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL…………………………………………………………………..
HALAMAN PENGESAHAN

DAFTAR ISI

DAFTAR GAMBAR

DAFTAR TABEL

DAFTAR LAMPIRAN

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang…………………………………………………………….

1.2 Rumusan Masalah…………………………………………………………
1.3 Tujuan…………………………………………………………………….
1.4 Manfaat……………………………………………………………………

BAB II TINJAUAN PUSTAKA…………………………………………………….

2.1 Pengertiaan Enzim………………………………………………………...

2.2 Penggolongan Enzim……………………………………………………...

2.3 Metode Pembuatan Enzim………………………………………………..

2.4 Faktor yang Mempengaruhi Kinerja Enzim………………………………

2.5 Perhitungan Aktivitas Enzim……………………………………………..

2.6 Perhitungan Kinetika Enzim……………………………………………...

BAB III METODE PRAKTIKUM…………………………………………………..

3.1 Rancangan Praktikum……………………………………………………

3.1.1 Skema Rancangan Percobaan

3.1.2 Variabel Operasi

3.1.3 Variabel Terikat

3.2 Bahan dan Alat…………………………………………………………..

3.2.1 Bahan

3.2.2 Alat

3.3 Gambar Alat……………………………………………………………..

3.4 Prosedur Praktikum……………………………………………………..

3.4.1 Persiapan Bahan Baku

3.4.2 Pembuatan Starter

 3.4.3 Fermentasi

3.4.4 Panen

3.4.5 Uji Kadar Glukosa

3.4.6 Analisis Data

DAFTAR PUSTAKA………………………………………………………………
DAFTAR GAMBAR
DAFTAR TABEL
DAFTAR LAMPIRAN
 LAPORAN SEMENTARA
PRAKTIKUM BIOPROSES

Materi : Isolasi Enzim

Kelompok :

2-Kamis

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2020
I. TUJUAN PERCOBAAN

II. PERCOBAAN
II.1 Bahan Yang Digunakan
1. Bahan baku
2. NaOH
3. HCl
4. Aspergillus niger
5. Glukosa
6. MgSO4
7. KH2PO4
8. CaCl2
9. NaCl
10. Urea
11. Aquades
12. CMC
II.2 Alat Yang Dipakai
1. Beaker glass
2. Termometer
3. Gelas ukur
4. Pengaduk
5. Inkubator
6. Timbangan
7. Indikator pH
8. Kompor listrik
9. Buret
10. Statif & klem
11. Kuvet
12. Kertas saring
13. Corong buchner
14. Shaker
15. Pompa vakuum
 16. Erlemenyer penghisap
II.3 Cara Kerja
2.3.1 Persiapan Bahan Baku
1. Haluskan bahan baku, lalu timbang sesuai yang dibutuhkan
2. Masukkan bahan baku ke dalam larutan NaOH atau HCl normalitas dan
volume tertentu
3. Campuran dipanaskan pada suhu konstan 90℃ selama 1 jam, sambil
diaduk
4. Keringkan bahan baku menggunakan oven pada suhu 110℃ selama 1
malam
2.3.2 Pembuatan Starter
1. Media inokulum dibuat dengan menyiapkan larutan media volume
tertentu dalam erlenmeyer. Media terdiri dari 10 gr/l glukosa, 1 gr/l
NaCl, 2 gr/l KH2PO4, 0,2 gr/l CaCl2, 1,7 gr/l MgSO4. Setelah itu
tambahkan Aspergillus niger ke dalam campuran. Tutup erlenmeyer
menggunakan alumunium foil
2. Starter diinkubasi menggunakan shaker pada temperatur ruangan selama
1 malam
2.3.3 Fermentasi
1. Sampel dicampur menggunakan air dengan rasio sampel-air tertentu
untuk semua variabel, kemudian diaduk
2. Atur pH masing-masing variabel sesuai yang ditentukan
3. Tambahkan ke dalam larutan urea dan starter dengan kadar tertentu
4. Fermentasi dilakukan secara aerob selama 1 malam
2.3.4 Panen
1. Hasil dari fermentasi disentrifugasi pada kecepatan dan waktu tertentu
2. Setelah sentrifugasi, cairan disaring menggunakan pompa vakuum,
untuk diperoleh filtratnya (crude enzyme)
3. Filtrat yang diperoleh, dicampur CMC dengan perbandingan tertentu
4. Campuran diinkubasi selama waktu tertentu
5. Sebelum dan sesudah inkubasi, dilakukan uji kadar glukosa pada sampel
2.3.5 Uji Kadar Glukosa
1. Membuat larutan glukosa standar dengan melarutkan 1,25 gram glukosa
dalam 500 ml aquades. Ambil 5 ml glukosa standar, kemudian
diencerkan sampai 25 ml dan diambil 5 ml, setelah itu pH dinetralkan.
Lakukan standarisasi glukosa dengan mencampurkan 5 ml glukosa
encer, 5 ml fehling A, dan 5 fehling B. Campuran ini dipanaskan sampai
60oC, dan dititrasi dengan larutan glukosastandar sampai warna biru
hampir hilang. Tambahkan dua tetes indikator MB. Lanjutkan titrasi
sampai warna merah bata yang tidak hilang setelah pengocokan. Catat
kebutuhan titran (F).
 2. Ambil 5 ml sampel, lalu encerkan hingga 25 ml. Ambil 5 ml sampel
encer, dan dinetralkan pHnya, setelah itu tambahkan 5 ml fehling A, 5 ml
fehling B, serta 5 ml glukosa standar. Atur pH campuran hingga netral.
Kemudian lakukan pemanasan campuran sampai 60oC dan titrasi dengan
larutan glukosa standar sampai warna biru hampir hilang. Tambahkan dua
tetes indikator MB. Lanjutkan titrasi sampai warna merah bata yang tidak
hilang setelah perngocokan. Catat kebutuhan titran (M).
Vtotal Vpengenceran
( F−M )× ×
C= Vtitrasi Vdiambil x 2.5
Vtotal
Glukosa standar 2.5 gram dalam 1 liter = 2,5 mg/ml
Semua satuan volume memakai ml

II.4 Hasil Percobaan

…………….…………
ASISTEN

(………………..)
 DAFTAR PUSTAKA

Budiman, Arief. 2011. Isolasi Enzim α -Glukosidase dari Gabah (Oryza sativa var.
Ciherang). Skripsi. Depok: FMIPA Universitas Indonesia.
Indah, Mutiara. 2004. Enzim. Makalah. Fakultas Kedokteran, Universitas Sumatera
Utara.
Kurnia. 2004. Studi Aktivitas Enzim Lipase dari Aspergillus niger Sebagai Biokatalis
pada Proses Gliserolisis untuk Menghasilkan Monoasilgliserol. Tesis.
Semarang: Universitas Diponegoro.

Putra, Ganda G.P. 2009. Penentuan Kinetika Enzim Poligalakturonase (PG)

Endogenous dari Pulp Biji Kakao. Jurnal Biologi. Bali: Fakultas Teknologi
Pertanian, Universitas Udayana.

Shuler, Michael L. & Kargi Fikret. 2002. Bioprocess Engineering : Basic Concepts
Second Edition. Prentice Hall PTR, Prentice-Hall, Inc.