- 1487 -
Bahan partikulat <751> Memenuhi syarat seperti
tertera pada Injeksi Volume Kecil.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>
Larutan dapar fosfat, Fase gerak, Campuran
pelarut, Larutan baku, Larutan resolusi dan Sistem
kromotografi Lakukan seperti tertera pada Penetapan
kadar dalam Rifampisin.
Larutan uji 1 (Menggunakan wadah dosis tunggal);
Konstitusikan Rifampisin untuk injeksi dengan jumlah
volume air yang diukur saksama, setara dengan
volume pengencer yang tertera pada etiket. [Catatan
Gunakan larutan ini dalam waktu 2 jam setelah
pembuatan]. Keluarkan seluruh isi, menggunakan
jarum suntik hipodermik yang sesuai, pindahkan ke
dalam labu tentukur yang sesuai dan encerkan dengan
asetonitril P hingga kadar 6 mg rifampisin per mL.
[Catatan Gunakan larutan induk ini dalam waktu 5
jam setelah pembuatan]. Encerkan sejumlah volume
larutan induk yang diukur saksama secara kuantitatif
dan bertahap dengan Campuran pelarut hingga
diperoleh kadar lebih kurang 0,02 mg per mL [Catatan
Siapkan larutan ini segera sebelum disuntikkan ke
dalam kromatograf].
Larutan uji 2 (pada etiket dinyatakan jumlah
Rifampisin dalam sejumlah tertentu volume larutan
konsitusi); rekonstitusi Rifampisin untuk injeksi dalam
sejumlah volume air yang diukur saksama, sesuai
dengan volume pengencer yang tertera pada etiket.
[Catatan Gunakan larutan ini dalam waktu 2 jam
setelah pembuatan]. Encerkan sejumlah volume yang
diukur saksama dengan asetonitril P hingga kadar
lebih kurang 0,2 mg per mL. [Catatan Gunakan
larutan induk ini dalam waktu 5 jam setelah
pembuatan]. Pipet 10 mL larutan induk ke dalam labu
tentukur 100-mL, encerkan dengan Campuran pelarut
sampai tanda dan campur. [Catatan Siapkan larutan
ini segera sebelum disuntikkan ke dalam
kromatograf].
Prosedur Lakukan Prosedur seperti tertera pada
Penetapan kadar dalam Rifampisin. Hitung jumlah
dalam mg rifampisin, C43H58N4O12 yang dikeluarkan
dari wadah atau dalam larutan konstitusi yang
digunakan dengan rumus:
𝑟𝑈 𝐿
( )( )𝐶
𝑟𝑆 𝐷
rU dan rS berturut-turut adalah respons puncak Larutan
uji 1 atau Larutan uji 2 dan Larutan baku; L adalah
jumlah rifampisin yang tertera pada etiket dalam mg,
dalam wadah atau dalam volume larutan konstitusi
yang digunakan; D adalah kadar dalam mg per mL
rifampisin dalam Larutan uji 1 atau Larutan uji 2; C
adalah kadar Rifampisin BPFI dalam mg per mL
Larutan baku dihitung terhadap zat yang telah
dikeringkan.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah untuk
Padatan steril seperti tertera pada Injeksi.
KAPSUL RIFAMPISIN DAN ISONIAZID
Rifamycin and Isoniazid Capsules
Kapsul Rifampisin dan Isoniazid mengandung
C43H58N4O12 , tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih
dari 130,0% dan mengandung C6H7N3O tidak kurang
dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah
yang tertera pada etiket. [Catatan Jika Kapsul
Rifampisin dan Isoniazid dituliskan dalam resep tanpa
keterangan jumlah Rifampisin dan Isoniazid, maka
sediaan mengandung 300 mg Rifampisin dan 150 mg
Isoniazid].
Baku pembanding Rifampisin BPFI; tidak boleh
dikeringkan. Hindari paparan oksigen. Simpan dalam
wadah tertutup rapat, terlindung cahaya dan
kelembapan, dalam lemari pendingin. Isoniazid
BPFI; keringkan pada suhu 105 selama 4 jam
sebelum digunakan. Simpan dalam wadah tertutup
rapat dan terlindung cahaya.
Identifikasi
A. Lakukan penetapan seperti tertera pada Uji
Identifikasi Kromatografi Lapis Tipis <281>.
Larutan uji Masukkan sejumlah isi kapsul setara
dengan lebih kurang 120 mg rifampisin ke dalam
labu yang sesuai, tambahkan 20 mL metanol P dan
kocok beberapa menit. Saring suspensi melalui
penyaring dengan porositas 1 m atau lebih halus,
buang beberapa mL filtrat pertama. Encerkan filtrat
dengan aseton P volume sama dan campur.
Larutan baku Larutkan sejumlah Rifampisin BPFI
dalam metanol P hingga kadar 6 mg per mL.
Tambahkan aseton P volume sama dan campur.
Larutkan sejumlah Isoniazid BPFI dalam metanol P
hingga kadar 2,5 mg per mL. Tambahkan aseton P
volume sama dan campur.
Volume penotolan 2 µL.
Fase gerak Buat campuran aseton P-asam asetat
glasial P ( 100:1).
B. Waktu retensi puncak utama rifampisin dan
isoniazid dalam kromatogram Larutan uji sesuai
dengan Larutan baku yang diperoleh pada Penetapan
kadar.
Disolusi <1231>
Media disolusi: 900 mL asam hidroklorida 0,1 N.
Alat tipe 1: 100 rpm.
Waktu: 45 menit.
Lakukan penetapan jumlah rifampisin,
C43H58N4O12 terlarut dengan cara spektrofotometri
seperti tertera pada Spektrofotometri dan Hamburan
Cahaya <1191>.
Dapar fosfat Larutkan 15,3 g kalium fosfat dibasa P
dan 80,0 g kalium fosfat monobasa P dalam lebih
 - 1488 -
kurang 500 mL air, diencerkan dengan air hingga 1000
mL.
Larutan baku isoniazid Timbang saksama lebih
kurang 66 mg Isoniazid BPFI, masukkan ke dalam
labu tentukur 100-mL. Larutkan dan encerkan dengan
asam hidroklorida 0,1 N sampai tanda.
Larutan baku persediaan Timbang saksama lebih
kurang 66 mg Rifampisin BPFI, masukkan ke dalam
labu tentukur 200-mL, larutkan dalam 10 mL asam
hidroklorida 0,1 N dan campur. Tambahkan 50,0 mL
Larutan baku isoniazid encerkan dengan asam
hidroklorida 0,1 N sampai tanda. [Catatan Siapkan
larutan segera sebelum penetapan, dan tempatkan
dalam tangas disolusi pada awal penetapan].
Larutan baku Pada akhir penetapan, pipet 5 mL
alikot Larutan baku persediaan dan 10 mL Larutan
dapar fosfat ke dalam labu tentukur 50-mL. Encerkan
dengan air sampai tanda. [Catatan Jika mungkin
larutan segera dianalisa, jika tidak dalam waktu 3 jam
setelah pengenceran akhir.]
Larutan uji Pada akhir penetapan, pipet 25 mL
alikot dan saring, buang 10 mL filtrat pertama. Biarkan
dingin selama lebih kurang 10 menit, dan pipet 5 mL
filtrat dan 10 mL Dapar fosfat ke dalam labu tentukur
50-mL. Encerkan dengan air sampai tanda. [Catatan
Jika mungkin larutan segera dianalisa, jika tidak
dalam waktu 3 jam setelah pengenceran akhir].
Lakukan penetapan jumlah rifampisin,
C43H58N4O12 yang terlarut dengan mengukur Larutan
baku dan Larutan uji pada panjang gelombang serapan
maksimum lebih kurang 475 nm.
Lakukan penetapan jumlah jumlah isoniazid
(C6H7N3O) terlarut dengan cara Kromatografi cair
kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi
<931>.
Fase gerak Buat campuran air-Dapar fosfat-
metanol P (850:100:50), saring dan awaudarakan. Jika
perlu lakukan penyesuaian menurut Kesesuaian sistem
seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Sistem Kromatografi Kromatograf cair kinerja
tinggi dilengkapi dengan detektor 254 nm dan kolom
4,0 mm x 30 cm berisi bahan pengisi L1, ukuran
partikel 10 m. Laju alir lebih kurang 1,5 mL per
menit.
Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah
volume sama (lebih kurang 50 µL) Larutan uji dan
Larutan baku ke dalam kromatograf, rekam
kromatogram dan ukur respons puncak isoniazid.
Toleransi Dalam waktu 45 menit harus larut tidak
kurang dari 75% (Q) rifampisin, C43H58N4O12 dan
tidak kurang dari 80% (Q) isoniazid, C6H7N3O dari
jumlah yang tertera pada etiket.
Susut Pengeringan <1121> Tidak lebih dari 3,0%,
lakukan pengeringan dalam botol bersumbat kapiler
dalam hampa udara, pada suhu 60 selama 3 jam
menggunakan lebih kurang 100 mg isi kapsul.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
Dapar Larutkan 1,4 g natrium fosfat dibasa P dalam
1 liter air, atur pH hingga 6,8 dengan penambahan asam
fosfat P.
Larutan A Buat campuran asetonitril P-Dapar
(4:96), saring dan awaudarakan.
Larutan B Buat campuran asetonitril P-Dapar
(55:45) saring dan awaudarakan.
Fase gerak Gunakan variasi campuran Larutan A
dan Larutan B seperti tertera pada Sistem
kromatografi.
Larutan baku Timbang saksama sejumlah
Rifampisin BPFI dan Isoniazid BPFI dalam campuran
Dapar dan metanol P (96:4) hingga kadar masing-
masing lebih kurang 0,16 dan 0,08 mg per mL.
[Catatan Gunakan larutan ini dalam waktu 10 menit].
Larutan uji Timbang saksama isi tidak kurang dari
10 kapsul. Timbang saksama sejumlah isi kapsul yang
setara dengan lebih kurang 8 mg isoniazid, masukkan
ke dalam labu tentukur 100-mL dan tambahkan lebih
kurang 90 mL Dapar. Sonikasi selama lebih kurang 10
menit, biarkan hingga suhu ruang, encerkan dengan
Dapar sampai tanda. [Catatan Gunakan larutan ini
dalam waktu 2 jam].
Sistem kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 238 nm dan kolom 4,6 mm
x 25 cm yang berisi bahan pengisi L1 yang
dideaktivasi dengan basa dengan ukuran partikel 5
m. Laju alir lebih kurang 1,5 mL per menit.
Kromatograf diprogram sebagai berikut:
Waktu Larutan A Larutan B Eluasi
(menit) (%) (%)
0 100 0 keseimbangan
0-5 100 0 isokratik
5-6 100→0 0→100 gradien linier
6-15 0 100 isokratik
Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku, rekam
kromatogram dan ukur respons puncak seperti tertera
pada Prosedur; waktu retensi relatif rifampisin dan
isoniazid berturut-turut lebih kurang 2,6 dan 1,0;
efisiensi kolom rifampisin dan isoniazid berturut-turut
tidak kurang dari 50.000 dan 6.000 lempeng teoritik,
faktor ikutan tidak lebih dari 2,0 dan simpangan baku
relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%.
Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah
volume sama (lebih kurang 20 µL) Larutan baku dan
Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam
kromatogram dan ukur respons puncak utama. Hitung
jumlah dalam mg rifampisin, (C43H58N4O12), dan
isoniazid, (C6H7N3O), dalam isi kapsul yang
digunakan dengan rumus :
𝑟𝑈
( ) 100𝐶
𝑟𝑆
 - 1489 -
rU dan rS berturut-turut adalah respons puncak Larutan
uji dan Larutan baku; C adalah kadar Rifampisin BPFI
atau Isoniazid BPFI dalam mg per mL Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup
rapat, tidak tembus cahaya, dan hindari paparan panas
yang berlebihan.
TABLET RIFAMPISIN, ISONIAZID, DAN
PIRAZINAMIDA
Rifamycin, Isoniazid and Pyrazinamide Tablets
Tablet Rifampisin, Isoniazid dan Pirazinamida
mengandung rifampisin C43H58N4012, isoniazid
C6H7N30, dan pirazinamida C5H5N30 tidak kurang dari
90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang
tertera pada etiket.
Baku pembanding Rifampisin BPFI; tidak boleh
dikeringkan. Hindari paparan oksigen. Simpan dalam
wadah tertutup rapat, terlindung cahaya dan
kelembapan, dalam lemari pendingin. Isoniazid BPFI;
lakukan pengeringan pada suhu 105º selama 4 jam
sebelum digunakan. Simpan dalam wadah tertutup
rapat, terlindung cahaya. Pirazinamida BPFI; lakukan
pengeringan diatas silika gel P selama 18 jam sebelum
digunakan. Simpan dalam wadah tertutup rapat.
Identifikasi
A. Lakukan penetapan seperti tertera pada Uji
Identifikasi secara Kromatografi Lapis Tipis <281>.
Larutan uji Timbang saksama sejumlah serbuk
tablet setara dengan lebih kurang 120 mg rifampisin
masukkan ke dalam wadah yang sesuai, tambahkan 20
mL metanol P dan kocok beberapa menit. Saring
suspensi melalui penyaring dengan porositas 1 µm
atau lebih halus, buang beberapa mL filtrat pertama.
Encerkan filtrat dengan aseton P dalam volume sama,
campur.
Larutan baku Larutkan sejumlah Rifampisin BPFI
dalam metanol P hingga kadar 6 mg per mL.
Tambahkan aseton P dalam volume sama, dan
campur. Larutkan sejumlah Isoniazid BPFI dalam
metanol P hingga kadar 2,5 mg per mL. Tambahkan
aseton P dalam jumlah sama, dan campur. Larutkan
sejumlah Pirazinamida BPFI dalam metanol P hingga
kadar 15 mg per mL. Tambahkan aseton P dalam
volume sama, dan campur.
Volume Penotolan 2 µL.
Fase gerak Buat campuran aseton P-asam asetat
glasial P (100:1).
B. Waktu retensi puncak utama rifampisin,
isoniazid, dan pirazinamida pada kromatogram
Larutan uji sesuai dengan Larutan baku yang
diperoleh pada Penetapan kadar.
Disolusi <1231>
Media disolusi: 900 mL cairan lambung buatan LP
tanpa pepsin.
Alat tipe 1: 100 rpm.
Waktu : 30 menit.
Lakukan penetapan jumlah C43H58N4012 terlarut
dengan cara spektrofotometri seperti tertera pada
Spektrofotometri dan Hamburan Cahaya <1191>.
Larutan baku persediaan Buat larutan Isoniazid BPFI
dan Pirazinamida BPFI dalam Media disolusi dengan
kadar berturut-turut lebih kurang 0,22 mg dan 1,3 mg per
mL. Gunakan larutan ini pada hari yang sama.
Larutan baku antara Timbang saksama lebih
kurang 27 mg Rifampisin BPFI, masukan ke dalam
labu tentukur 200-mL, tambahkan 50,0 mL Larutan
baku persediaan, dan goyang sampai larut. Encerkan
dengan Media disolusi sampai tanda. Masukkan labu
ke dalam tangas disolusi segera sebelum dilakukan
disolusi tablet. Angkat labu dari tangas bersamaan
dengan dilakukannya pengambilan larutan.
Larutan baku Pipet 10 mL Larutan baku antara ke
dalam labu tentukur 50-mL, encerkan dengan Media
disolusi sampai tanda.
Larutan uji Pipet 10 mL filtrat alikot ke dalam labu
tentukur 50-mL, encerkan dengan Media disolusi
sampai tanda.
Prosedur Lakukan penetapan jumlah rifampisin
C43H58N4012 terlarut dengan mengukur serapan
Larutan baku dan Larutan uji pada panjang
gelombang serapan maksimum lebih kurang 475 nm.
Gunakan Media disolusi sebagai blangko. Hitung
jumlah dalam mg rifampisin, C43H58N4012, yang
terlarut dengan rumus:
𝐴𝑈
( ) 4500𝐶
𝐴𝑆
Au dan As berturut-turut adalah serapan Larutan uji
dan Larutan baku; C adalah kadar Rifampisin BPFI
dalam mg per mL Larutan baku.
Toleransi Dalam waktu 30 menit harus larut tidak
kurang dan 80% (Q) rifampisin, C43H58N4012 dari
jumlah yang tertera pada etiket.
Lakukan penetapan jumlah jumlah isoniazid
C6H7N30 dan pirazinamida C5H5N30 terlarut dengan
cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera
pada Kromatografi <931>.
Fase gerak Buat campuran air-kalium fosfat
monobasa 1 M-asetonitril P (860:100:40). Saring dan
awaudarakan. Jika perlu lakukan penyesuaian menurut
Kesesuaian sistem seperti tertera pada Kromatografi
<931>.
Larutan kesesuaian sistem Buat larutan asam
isonikotinat P dengan kadar lebih kurang 0,125 mg per
mL dalam Media disolusi. Pipet 10 mL larutan ini
dan 4 mL Larutan baku persediaan ke dalam labu
tentukur 100-mL yang berisi 15 mL kalium fosfat
dibasa 1 M dan 30 mL Fase gerak. Encerkan dengan
Fase gerak sampai tanda.
Larutan baku Pipet 15 mL Larutan baku antara ke
dalam labu tentukur 100-mL yang berisi 15 mL kalium