Subscribe to DeepL Pro to translate larger documents.
Visit
Martinez-Garcia dan van der Maarel AMB Expr www.DeepL.com/pro
(2016) 6:71
Gbr. 4 Kandungan floridosida pada G. sulphuraria yang diberi tekanan
dengan konsentrasi NaCl yang berbeda. Nilai mewakili rata-rata dari
tiga pengukuran independen ± standar deviasi
Akhirnya, kami menguji pengaruh berbagai parameter
terhadap akumulasi floridosida oleh G. sulphuraria,
seperti sumber karbon yang digunakan untuk
pertumbuhan sel, jenis senyawa yang menyebabkan
tekanan osmotik, suhu inkubasi dan cara penerapan
tekanan osmotik. Sel yang ditumbuhkan dengan gliserol
sebagai sumber karbon mengakumulasi sekitar 2,5 kali
lebih banyak floridosida ketika mengalami tekanan
osmotik dibandingkan dengan sel yang ditumbuhkan
dengan galaktosa atau glukosa (Gbr. 5a). Penggunaan
sorbitol (sebagai contoh zat terlarut non-ionik) dan KCl
sebagai agen osmotik menghasilkan hasil floridosida
yang tidak berbeda secara signifikan (p > 0,05) dengan
yang diperoleh dengan NaCl (Gbr. 5b). CaCl2 memiliki
pengaruh negatif terhadap akumulasi floridosida,
dengan kandungan setidaknya 2,5 kali lebih rendah
dibandingkan dengan jenis zat terlarut lainnya.
Penambahan agen osmotik ke dalam kultur sekaligus
atau secara bertahap dan suhu inkubasi selama stres
osmotik tidak menyebabkan perbedaan yang luar biasa
dalam hasil floridosida (Gbr. 5c, d), meskipun sel yang
diinkubasi pada suhu 50 ° C mengakumulasi jumlah
gliko yang lebih rendah. Kultur yang diinkubasi pada
suhu 60 dan 70 ° C selama stres osmotik menghasilkan
jumlah floridosida yang sangat rendah (data tidak
ditampilkan).
Diskusi
Floridoside adalah zat terlarut yang kompatibel yang
diketahui diakumulasi oleh rumput laut merah laut
(Kirst 1980; Reed dkk. 1980; Ekman dkk. 1995) yang
telah menarik banyak perhatian karena potensi
antifouling dan sifat terapeutiknya (Hellio dkk. 2004;
Courtois dkk. 2008; Kim dkk. 2013; Ryu dkk. 2015).
Namun, aplikasi industri untuk floridosida belum
dikembangkan karena
for more information. Halaman 5
dari 8
untuk ketersediaan senyawa yang terbatas. Proses
produksi yang menghasilkan glikosida dalam jumlah
besar akan memfasilitasi tugas ini. Dengan pemikiran
ini, kami menganalisis produksi floridosida oleh
mikroalga merah termoasidofilik G. sulphuraria di
bawah kondisi yang berbeda untuk menilai potensinya
sebagai produsen industri untuk glikosida ini.
Meskipun spesies mikroalga ini tidak menghuni
lingkungan laut, namun dilaporkan toleran terhadap
konsentrasi tinggi zat terlarut dalam medium (Schmidt
et al. 2005), termasuk NaCl (Gross et al. 2002), dan
mengakumulasi floridosida sebagai zat terlarut yang
dapat dikompatibelkan (De Luca dan Moretti 1983;
Pade et al. 2015). Oleh karena itu, kami menemukan
bahwa pertumbuhan G. sulphuraria tidak terhambat
oleh NaCl, meskipun pertumbuhannya sangat lambat.
Oleh karena itu, kami menyelidiki kemungkinan
memperpendek proses produksi floridosida dengan
menginduksi akumulasinya pada sel eksponensial akhir
yang ditumbuhkan pada medium tanpa garam. Dengan
strategi ini, kultur mencapai kepadatan sel yang lebih
tinggi dalam waktu yang lebih singkat dan sel
mengakumulasi sejumlah besar glikogen. Glukan yang
tersimpan merupakan cadangan glukosa intraseluler
yang mudah diakses dari mana prekursor flori-dosida
(UDP-galaktosa dan gliserol-3-fosfat) dapat disintesis
(Hagemann 2016). Spesies alga merah lainnya telah
dilaporkan mensintesis floridosida dalam kondisi
hiperosmotik dari karbon yang diperoleh melalui deg-
radasi glukan penyimpanan intraseluler dan bukan dari
karbon yang baru diasimilasi (Reed 1985; Ekman dkk.
1995; Simon-Colin dkk. 2004; Bondu dkk. 2009). Selain
itu, kami mengamati bahwa G. sulphuraria telah
mengakumulasi glikogen pada tahap awal kurva
pertumbuhan, berbeda dengan mikroorganisme lain di
mana akumulasi glikogen dipicu oleh keterbatasan
makronutrien (Lillie dan Pringle 1980; Preiss 1984). G.
sulphuraria juga memproduksi floridosida dalam
tingkat yang dapat diukur sebelum diberi tekanan
osmotik, yang sesuai dengan fakta bahwa glikosida ini
tidak hanya merupakan solut yang kompatibel tetapi
juga merupakan cadangan karbon sementara (Li et al.
2001). Peran ganda floridosida ini dapat bertanggung
jawab atas perbedaan dramatis dalam kandungan
glikosida antara sel yang tumbuh di bawah tekanan
osmotik dan sel yang tertekan hanya setelah mencapai
fase eksponensial akhir dalam medium tanpa garam.
Selama inkubasi yang berkepanjangan (≥96 jam) di
bawah tekanan osmotik tinggi, senyawa lain yang
diketahui disintesis oleh G. sulphuraria di bawah
tekanan garam [misalnya betaine (Schönknecht et al.
2013)] dapat mengambil alih peran zat terlarut yang
sesuai, memungkinkan floridosida berfungsi sebagai
reservoir karbon dan terdegradasi untuk menopang
pertumbuhan sel secara eksponensial. Untuk sel yang
mengalami tekanan osmotik setelah tumbuh terlebih
dahulu dalam medium tanpa garam, waktu inkubasi
Martinez-Garcia dan van der Maarel AMB Expr (2016) 6:71 Halaman 6
dari 8

yang lebih pendek dengan garam (hanya 24 jam) dapat

menghasilkan akumulasi floridosida yang lebih disukai
daripada osmolit lainnya.
Martinez-Garcia dan van der Maarel AMB Expr (2016) 6:71 Halaman 7
dari 8

Gbr. 5 Pengaruh parameter yang berbeda terhadap kandungan floridosida pada G. sulphuraria. a Sumber karbon yang digunakan untuk pertumbuhan
sel. b Jenis senyawa yang menyebabkan stres osmotik. c Penambahan agen osmotik secara bertahap. d Temperatur selama aplikasi stres osmotik.
Kolom mewakili nilai rata-rata dari tiga pengukuran independen ditambah dengan standar deviasi error bar. Dalam semua kasus, sel ditumbuhkan
sebelumnya pada gliserol [kecuali pada (a)] dan diberi tekanan osmotik dengan 1 M zat terlarut selama 24 jam. Untuk tujuan perbandingan,
kolom batas putus-putus yang disertakan dalam (b-d) mewakili kandungan floridosida dalam sel yang diberi tekanan osmotik dengan NaCl yang
ditambahkan dalam satu langkah pada suhu 40 ° C

Akumulasi floridosida setelah guncangan osmotik
adalah respons yang cepat. 70% dari hasil floridosida
maksimal dicapai dalam 8 jam pertama, tingkat yang
sama dengan yang diamati untuk rumput laut merah
laut Porphyra purpurea (Reed et al. 1980). Penurunan
kandungan glikogen tidak sepenuhnya mencerminkan
peningkatan floridosida, menunjukkan bahwa sel
mungkin menggunakan glikogen sebagai substrat untuk
produksi floridosida hanya selama jam-jam pertama
stres osmotik. Setelah itu, senyawa yang dilepaskan dari
sel-sel sekarat di sekitarnya mungkin merupakan
sumber utama prekursor untuk sintesis floridosida, oleh
karena itu menghilangkan kebutuhan untuk
mendegradasi glikogen. Hal ini tampaknya masuk akal
jika kita mempertimbangkan bahwa G. sulphuraria
memiliki sejumlah besar transporter gula membran
untuk mengasimilasi berbagai macam substrat
(Schönknecht et al. 2013).
Akumulasi floridosida dalam sel G. sulphuraria yang
diberi tekanan osmotik selama 24 jam terutama
bergantung pada sumber karbon yang digunakan untuk
pertumbuhan sel, dengan glikosida yang menginduksi
akumulasi tertinggi. Semua osmotik
Agen penyebab stres, terlepas dari garam ionik atau zat
terlarut non-ionik, menginduksi produksi floridosida
yang serupa, menunjukkan bahwa sintesis floridosida
dalam G. sulphuraria tidak secara langsung diatur oleh
ion tertentu tetapi bergantung pada tekanan osmotik
eksternal, seperti yang dijelaskan oleh Reed dkk. (1980)
untuk makroalga merah P. purpurea. Independensi
temperatur akumulasi floridosida akan menjadi
keuntungan ketika mempertimbangkan G. sulphuraria
sebagai produsen industri potensial untuk floridosida
karena langkah tekanan osmotik dapat dilakukan tanpa
pasokan panas, sehingga mengurangi biaya proses.
Sebagai kesimpulan, dalam penelitian ini kami telah
menjelaskan kondisi budidaya yang mendorong
akumulasi floridosida tertinggi pada G. sulphuraria.
Optimalisasi lebih lanjut dari kondisi budidaya dan
proses ekstraksi untuk meningkatkan biomassa dan
hasil floridosida dapat mengubah G. sulphuraria
menjadi produsen industri yang efisien dari floridosida,
sebuah senyawa antifouling dan terapeutik yang
menjanjikan.
Martinez-Garcia dan van der Maarel AMB Expr (2016) 6:71 Halaman 8
dari 8

Kontribusi penulis Kasrten U, Barrow KD, King RJ. Floridosida, L-isofloridosida dan D-isofloridosida
MMG dan MM merancang eksperimen, menganalisis hasil dan menulis dalam alga merah Porphyra columbina-efek musiman dan osmotik. Plant
naskah; MMG melakukan eksperimen. Kedua penulis membaca dan Physiol. 1993;103:485-91.
menyetujui naskah akhir. Kerjean V, Morel B, Stiger V, Bessières MA, Simon-Colin C, Magné C, Deslandes
E. Optimalisasi produksi floridosida pada alga merah Mastocarpus
Ucapan Terima Kasih stellatus: pra-kondisi, ekstraksi dan variasi musim. Bot Mar. 2007;50:59-
Lubbert Dijkhuizen (Fisiologi Mikroba, Universitas Groningen) yang telah 64.
mengizinkan kami untuk menggunakan peralatan HPAEC-PAD dan dr. Hans Kim MJ, Li YX, Dewapriya P, Ryu BM, Kim SK. Floridoside menekan respons pro-
Leemhuis yang telah membaca naskah ini secara kritis. inflamasi dengan memblokir pensinyalan MAPK di mikroglia yang
diaktifkan. BMB Rep. 2013; 46: 398-403.
Kepentingan yang bersaing Kirst GO, Bisson MA. Regulasi tekanan turgor pada ganggang laut: ion
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki kepentingan yang dan senyawa organik dengan berat molekul rendah. Aust J Plant
bersaing. Physiol. 1979;6:539-56.
Kirst GO. Karbohidrat dan ion MW rendah pada Rhodophyceae:
Pendanaan pengukuran kuantitatif floridosida dan digeneasida. Fitokimia.
Karya ini didukung secara finansial oleh Avebe (Veendam, Belanda). 1980;19:1107-10.
Li SY, Lellouche JP, Shabtai Y, Arad SM. Partisi karbon tetap dalam mikroalga
Diterima: 15 Agustus 2016 D i t e r i m a : 7 September 2016 merah Porphyridium (Rhodophyta). J Phycol. 2001;37:289-97.
Li SY, Shabtai Y, Arad SM. Floridosida sebagai prekursor karbon untuk
sintesis polisakarida dinding sel pada mikroalga merah Porphyridium
(Rhodophyta). J Phycol. 2002;38:931-8.
Lillie SH, Pringle JR. Metabolisme karbohidrat cadangan dalam Saccha-
romyces cervisiae: respons terhadap keterbatasan nutrisi. J Bacteriol.
Referensi
1980;143:1384-94.
Allen MB. Studi dengan Cyanidium caldarium, klorofil berpigmen anomali. Arc
Martinez-Garcia M, Stuart MCA, van der Maarel MJEC. Karakterisasi glikogen
Microbiol. 1959;32:270-7.
bercabang tinggi dari mikroalga merah termoasidofilik Galdieria
Bondu S, Kervarec N, Deslandes E, Pichon R. Pemisahan floridosida dan iso-
sulphuraria dan perbandingannya dengan glikogen lain. Int J Biol
floridosida dengan HPLC dan penilaian spektrum1H dan13C NMR
Macromolec. 2016;89:12-8.
lengkap untuk D-isofloridosida. Carbohydr Res. 2007; 342: 2470-3.
Meng J, Srivastava LM. Variasi kandungan floridosida dan aktivitas sintase
Bondu S, Cerantola S, Kervarec N, Deslandes E. Dampak stres garam pada fluks
fosfat floridosida dalam Porphyria perforate (Rhodophyta). J Phycol.
karbon fotosintesis dan13 distribusi label-C dalam floridosida dan
1993;29:82-4.
digeneasida di Solieria chordalis. Phytochem. 2009;70:173-4.
Minoda A, Sawada H, Suzuki S, Miyasita S, Inagaki K, Yamamoto T, Tsuzuki M.
Callow ME, Callow JA. Biofouling laut: masalah yang lengket. Ahli biologi.
Pemulihan unsur tanah jarang dari alga merah sulfotermofilik Galdieria
2002;49:1-5.
sulphuraria menggunakan asam berair. Appl Microbiol Biotechnol.
Courtois A, Simon-Colin Boisset C, Berthou C, Deslandes E, Guézennec J,
2015;99:1513-9.
Bordron A. Floridoside yang diekstrak dari ganggang merah
Pade N, Linka N, Ruth W, Weber APM, Hagemann M. Floridoside dan
Mastocarpus stellatus adalah aktivator kuat dari jalur komplemen klasik.
isoflorido-sisi disintesis oleh enzim mirip trehalosa 6-fosfat sintase
Mar Drugs. 2008;6:407-17.
dalam alga merah Galdieria sulphuraria. New Phytol. 2015;205:1227-38.
da Costa MS, Santos H, Galinski EA. Tinjauan umum tentang peran dan
Preiss J. Sintesis glikogen bakteri dan regulasinya. Ann Rev Microbiol.
keanekaragaman zat terlarut yang kompatibel pada Bakteri dan
1984;38:419-58.
Archaea. Dalam: Antranikian G, editor. Bioteknologi ekstremofil. 1st ed.
Reed RH, Collins JC, Russel G. Pengaruh salinitas terhadap kandungan
Berlin: Springer; 1998. p. 117-53.
galaktosil-gliserol dan konsentrasi alga merah laut Porphyra purpurea
De Luca P, Moretti A. Floridosida dalam Cyanidium caldarium, Cyanidioschyzon
(Roth) C.Ag. J Exp Bot. 1980;31:1539-54.
merolae dan Galdieria sulphuraria (Rhodophyta, Cyanidiophyceae). J
Reed RH. Osmoaklimasi pada Bangia atropurpurea (Rhodophyta, Bangiales):
Phycol. 1983;19:368-9.
peran osmotik floridosida. Br Phycol J. 1985;20:211-8.
Ekman P, Yu S, Pedersen M. Pengaruh perubahan salinitas, kegelapan dan
Roberts MF. Zat terlarut organik yang kompatibel dengan organisme mikro
status nutrisi alga terhadap kandungan floridosida dan pati, aktivitas
halotoleran dan halofilik. Saline Syst. 2005;1:1.
α-galaktosidase dan hasil agar dari Gracilaria sordida yang
doi:10.1186/1746‑1448‑1‑5.
dibudidayakan. Br Phycol J. 1995;26:123-31.
Ryu BM, Li YX, Kang KH, Kim SK, Kim DG. Floridoside dari Laurencia undulata
Goedl C, Sawangwan T, Mueller M, Schwarz Nidetzky B. Proses biokatalitik
mempromosikan diferensiasi osteogenik pada sel mesenkim sumsum
dengan hasil tinggi untuk produksi 2-O-(α-D-glikopiranosil) -sn-gliserol, osmolit
tulang murin. J Funct Foods. 2015;19:505-11.
alami dan bahan pelembab yang bermanfaat. Angew Chem.
Sawangwan T, Goedl C, Nidetzky B. Glikosilgliserol dan glukosilgliserat sebagai
2008;47:10086-9.
penstabil enzim . Bioteknologi J. 2010;5:187-91.
Gross W, Oesterhelt C, Tischendorf G, Lederer F. Karakterisasi strain non-
Schmidt RA, Wiebe MG, Eriksen NT. Kultur batch fed-batch heterotrofik dengan
termofilik dari genus alga merah Galdieria yang diisolasi dari Soos (Republik
kepadatan sel tinggi dari alga merah penghasil fikosianin Galdieria
Ceko). Eur J Phycol. 2002;37:477-82.
sulphuraria.
Gross W, Schnarrenberger C. Pertumbuhan heterotrofik dari dua strain alga
Bioteknologi Bioeng. 2005;90:77-84.
merah termofilik Galdieria sulphuraria. Plant Cell Physiol. 1995;36:633-8.
Schönknecht G, Chen WH, Ternes CM, Barbier GG, Shrestha RP, Stanke M, Bräu-
Hagemann M, Pade N. Zat terlarut yang kompatibel dengan heterosida yang
tigam A, Baker BJ, Banfield JF, Garavito RM, Carr K, Wilkerson C, Rensing
terdapat pada fototrof prokari- otik dan eukariotik. Plant Biol.
SA, Gagneul D, Dickenson NE, Oesterhelt C, Lercher MJ, Weber APM.
2015;17:927-34.
Transfer gen dari bakteri dan archaea memfasilitasi evolusi eukariota
Hagemann M. Mengatasi aspek molekuler salinitas tinggi dan variabel dari
yang ekstrem. Sains. 2013;339:1207-9.
akumulasi zat terlarut yang kompatibel. Dalam: Borowitzka, dkk., editor.
Scigelova M, Singh S, Crout DHG. Glikosidase-sebuah alat sintetis yang hebat. J Mol
Fisiologi ologi mikroalga. 1st ed. Berlin: Springer; 2016. p. 359-72.
Hellio C, Simon-Colin C, Clare A, Deslandes E. Asam isetonat dan floridosida
diisolasi dari alga merah Grateloupia turuturu menghambat Catal B. 1999;6:483-94. 1 13
penyelesaian
Simon-Colin C, Kervarec N, Pichon R, Deslandes E. Penetapan spesifikasi H
Larva kripid Balanus Amphitrite. Biofouling. 2004;20:139-45.
dan C secara lengkap dari floridosida. Carbohydr Res. 2002; 337: 179-
Jeong JW, Seo DH, Jung JH, Park JH, Baek NI, Kim MJ, Park CS. Biosintesis
280.
glukosilgliserol, zat terlarut yang kompatibel, menggunakan aktivitas
Simon-Colin C, Kervarec N, Deslandes E. NMR13 Pengayaan isotop C untuk
transglikosilasi transglikosilasi antarmolekul amilosukrase dari
mempelajari partisi karbon menjadi zat terlarut organik pada alga
Methylobacillus flagellatus KT. Appl Biochem Biotechnol. 2014;173:904-17.
merah Grateloupia doryphore. Plant Physiol Biochem. 2004;42:21-6.
Martinez-Garcia dan van der Maarel AMB Expr (2016) 6:71 Halaman 9
dari 8

Takenaka F, Uchiyama H. Sintesis α-glukosilgliserol oleh α-glukosidase dan Weïwer Sherwood T, Linhardt RJ. Sintesis floridosida. J Karbohidrat Kimia.
beberapa karakteristiknya. Biosci Bioteknologi Biokimia. 2008;27:420-7.
2000;64:1321-6. Yoon HS, Müller KM, Sheath RG, Ott FF, Bhattacharya. Mendefinisikan garis
Thiem J, Scheel O, Schneider G (1997) Sediaan kosmetik dengan jumlah keturunan utama ganggang merah (Rhodophyta). J Phycol. 2006;42:482.
glikosilgliserida yang efektif sebagai pelembab kulit. EP 0 770378, Jerman.
Wei W, Qi D, Zhao HZ, Lu ZX, Fengxia LV, Bie X. Sintesis dan karakterisasi
galaktosilgliserol dengan hidrolisis balik galaktosa dan gliserol yang
dikatalisis oleh β-galaktosidase. Kimia Pangan. 2013;141:3085-92.