Aktivitas antioksidan dianalisis menggunakan spektrofotometri yaitu metode
destruksi DPPH dengan tahapan sebagai berikut. a. Dimasukkan sampel sebanyak 1 gr ke dalam tabung reaksi. b. Dilakukan pengenceran dengan penambahan 10 mL methanol lalu divortex (5000 rpm 1 menit). c. Diinkubasi 24 jam dengan suhu ruang ditempat gelap. d. Dipipet larutan sampel sebanyak 1 mL, kemudian disaring dengan kertas whatman sambil dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 5 mL methanol dan ditambahkan 2 mL DPPH 0,1 mM. e. Dikocok kemudian ditutup dengan aluminium foil kemudian diinkubasi pada tempat gelap selama 30 menit, kemudian dilihat perubahan warna. f. Dilakukan pengenceran absorbansi pada α = 517 nm. Aktivitas antioksidan dihitung dengan rumus:
% Aktivitas Penghambatan = 1- X 100%
Pembuatan larutan blanko dilakukan memasukkan 5 mL methanol dengan cara
dipipet ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan sebanyak 2 mL DPPH 0,1 mM lalu divortex.