Journal Reading

Comparison of Platelet Count by Automated and

Manual Methode in Thrombocytopenia Patients

Oleh:

Lis Awang Sega Ayu, S.Ked 23360107

Pembimbing:
dr. Hery Aprijadi, Sp. PD-KHOM

BAGIAN ILMU PENYAKIT DALAM

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MALAHAYATI
RSUD JENDRAL AHMAD YANI METRO
2023

i
 HALAMAN PENGESAHAN

Judul Jurnal:
Comparison of Platelet Count by Automated and
Manual Methode in Thrombocytopenia Patients
Oleh:

Lis Awang Sega Ayu, S.Ked 23360107

Telah diterima dan disetujui sebagai salah satu syarat dalam mengikuti ujian
kepaniteraan klinik di Bagian Penyakit Dalam Fakultas Kedokteran Universitas
Malahayati Periode 2023.

Metro, Desember 2023

dr. Hery Aprijadi, Sp. PD-KHOM

i
 KATA PENGANTAR

Dengan menyebut nama Allah SWT yang Maha Pengasihlagi Maha

Penyayang, Kami panjatkan syukur atas kehadirat-Nya, yang telah melimpahkan
rahmat dan hidayah-Nya kepada kami, sehingga kami dapat menyelesaikan
telaahkritis jurnal ini dengan baik.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada dr. Hery Aprijadi, Sp. PD-
KHOM selaku pembimbing yang telah memberikan bimbingan selama
penyusunan telaah kritis jurnal ini, serta semua pihak yang telah membantu
hingga selesainya telaah kritis jurnal ini
Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penyusunan laporan
telaah kritis jurnal ini disebabkan keterbatasan kemampuan penulis. Oleh karena
itu, kritik dan saran yang membangun dari berbagai pihak sangat penulis harapkan
demi perbaikan di masa yang akan datang. Semoga telaah kritis jurnal ini dapat
memberi manfaat bagi yang membacanya.

Metro, Desember 2023

Penulis
Lis Awang Sega Ayu

i
 PENELITIAN ASLI
Comparison of Platelet Count by Automated and
Manual Methode in Thrombocytopenia Patients

Pendahuluan

Trombosit adalah sel berbentuk cakram tanpa inti yang berdiameter 1-3um. Disintesis
oleh fragmentasi sitoplasma salah satu megakariosit sel induk hematopoietik. Hampir 1000-
3000 trombosit terbentuk dari satu megakariosit. Trombosit tipikal mempunyai umur 7-12
hari sebelum menjadi makrofag di limpa. Dalam pembekuan darah trombosit berkontribusi
pada fungsi struktural dan molekuler. Terlibat dalam trombosis, henatosis, dan perbaikan
luka. Trombosit yang khas hitungan untuk orang dewasa adalah 150-400 10 9/L. Keakuratan
jumlah trombosit penting pada beberapa pasien kritis.

Trombositopenia dapat disebabkan oleh berbagai macam penyakit, antara lain demam
berdarah, malaria, keganasan, sepsis berat, DIC, dll. Untuk penatalaksanaan trombositopenia
dalam perawatan klinis, penghitungan jumlah trombosit yang tepat waktu dan tepat
sangatlah penting. Di laboratorium hematologi terdapat banyak metode untuk menghitung
trombosit. Hal ini dapat dilakukan melalui penganalisis hematologi otomatis atau secara
manual di bawah mikroskop dengan melihat apusan darah tepi atau melalui ruang neubauer.
Beberapa dekade terakhir, alat analisa hematologi otomatis telah mencapai kemajuan
signifikan dalam deteksi dan karakterisasi sel darah.

Di sisi lain, pendekatan manual secara bertahap kehilangan kegunaanya di laboratorium

untuk mengurangi beban manusia, dan sumber daya keuangan, serta meminimalkan waktu
penyelesaian. Meskipun alat analisa hematologi biasanya menghasilkan jumlah trombosit
yang akurat, keakuratannya dipertanyakan ketika menghitung jumlah trombosit rendah,
kelainan trombosit, atau gangguan fragmen mirip trombosit. Saat ini, sebagian besar
penganalisis hematologi otomatis menghitung trombosit menggunakan konsep kepadatan
optik dan impedansi elektronik. Baru-baru ini, alat analisa dibuat dengan kemampuan
menghitung trombosit menggunakan flow cytometry. Hasilnya, alat analisa ini mampu
menghitung jumlah trombosit menggunakan teknik optik, imunologi, dan impedansi.

Metode imunologi dengan flow cytometry bersama dengan penghitung impedansi

semi-otomatis dengan bukaan saluran tunggal telah direkomendasikan sebagai metode
rujukan untuk menghitung trombosit oleh international council of laboratory hematology
hingga tahun 2001. Meskipun metode ini banyak digunakan, verifikasi masih dilakukan
4
secara manual. Jumlah trombosit tetap menjadi “Gold Standard”, meskipun hal ini mungkin
memakan waktu.

Sebagian besar penghitungan jumlah trombosit dilakukan dengan alat penganalisis

otomatis, namun sama seperti mesin lainnya, alat ini juga memiliki kekurangan, terutama
saat menganalisis penurunan jumlah trombosit. Mesin tersebut memberikan tanda untuk
gumpalan trombosit, sel darah merah yang berfragmentasi, trombosit raksasa, dan sel darah
merah kecil yang dapat mengganggu jumlah trombosit, sehingga tidak dapat menghasilkan
penghitungan yang akurat. Dalam kasus seperti ini, verifikasi manual jumlah trombosit
sangat penting untuk perawatan kritis dan ecaluasi pasien trombositopenik yang dapat
menyebabkan pendarahan yang mengancam jiwa. Pemeriksaan darah tepi sangat berguna
dalam diagnosis pseudo-trombositopenia yang tidak diketahui penyebabnya dan juga dalam
memantau respons terapeutik. Dapat digunakan sebagai kendali mutu verifikasi hasil yang
dihasilkan oleh instrumen otomatis.

Metode

Penelitian ini adalah menggunakan studi komparatif cross-sectional, yang dilakukan di King
Edward Medical University, Lahore dari Januari 2022 hingga Juni 2022. Kriteria inklusi adalah
semua sampel yang dipresentasikan di Mayo hospital laboratory, yang memikiki trombositopenia
dengan jumlah trombosit kurang dari 100.000/uL pada penghitungan darah otomatis. Sampel yang
dikecualikan adalah sampel yang mengalami hemolisi atau bekuan. Dengan metode aseptik, 3ml
darah lengkap EDTA dikumpulkan dari semua pasien. Setelah pengambilan darah lengkap, sampel
dianalisis dengan menggunakan alat penghitung darah lengkap berdasarkan metode fluorescence.
Apusan darah tepi untuk setiap sampel disiapkan mengikuti SOPS dan diwarnai dengan
pewarnaan giemsa rutin. Penghitungan trombosit dilakukan secara manual oleh dua orang ahli
yang memeriksa apusan yang sama, untuk meminimalkan perbedaan antar pengamat. Rata-rata
diambil jika tidak ada perbedaan signifikan dalam jumlah trombosit. Trombosit di hitung pada
slide dibawah minyak lensa imersi (100X) dalam bidang dan dilakukan dengan 15.000 untuk
mendapatkan perkiraan jumlah trombosit. Data analisis menggunakan SPSS versi 2.6. Variabel
kualitatif digambarkan sebagai frekuensi, dan variabel kuantitatif di ukur sebagai mean dan standar
deviasi dan menjaga interval kepercayaan 95% dan nilai P < 0,05. Uji-T di terapakan untuk
membandingkan rata-rata jumlah trombosit yang diperoleh dengan kedua metode.

Hasil

Penelitian ini melibatkan 60 pasien dewasa termasuk 31 perempuan dan 29 laki-laki dengan
rasio laki-laki-perempuan 1:1. Usia rata-rata adalah 43,7 tahun, jumlah trombosit rata-rata
pada alat analisa otomatis adalah 58 ± 28x109/L sedangkan jumlah trombosit yang
5
diverifikasi pada apusan tepi adalah 117±13x109/L dengan nilai p signifikan <0.001. ( grafik
1 dan 2) dari 60 pasien, 58 % mengalami trombositopenia sejati sedangkan 52% mengalami
trombositopenia semu. Namun bila diperiksa pada pemeriksaan darah tepi ternayata jumlah
trombosit sebenarnya lebih tinggi. Penyebab trombositopenia semu ketika dikonfirmasi para
pemeriksaan perifer adalah sebagai berikut : 42% pasien mengalami gumpalan trombosit,
39% diantara pasien mempunyai trombosit raksasa, dan 19% pasien mempunyai trombosit
raksasa dan gumpalan trombosit. (Grafik 3)

6
 Diskusi

Selama beberapa dekade terakhir, perbaikan signifikan telah dilakukan pada alat analisis
hematologi otomatis, yang digunakan untuk tujuan analisis dan deskripsi sel darah utuh. Prosedur
manual di laboratorium hematologi sacara bertahap kehilangan kepentingannya dalam pengujian
rutin karenanya. Meskipun alat analisis hematologi seringkali menghasilkan jumlah trombosit
yang tepat, keakuratannya diragukan saat menghitung jumlah trombosit yang rendah, dalam
konteks anomali trombosit, atau ketika terlihat adanya intrusi dari fragmen yang mirip dengan
trombosit. Ketika jumlah trombosit otomatis rendah atau ditandai, penghitungan jumlah trombosit
dari penghitungan metode manual dengan memeriksa apusan darah harus menjadi standar utama,
karena tidak ada mesin, tidak peduli seberapa mahal atau efektif, yang dapat sepenuhnya
menggantikan penilaian manusia.
Namun hasil penelitian ini menunjukan rasia pria-wanita adalah 1:1 dalam penelitian lain
yang dilakukan Berkman N terdapat rasio terbalik sebesar 2,1:1 antara laki-laki dan perempuan.
Dalam penelitian ini, untuk sampel yang menunjukkan trombositopenia, jumlah trombosit pada
alat analisa otomatis dibandingkan dengan jumlah trombosit pada pemeriksaan darah tepi. Hasil
pada olesan lebih tinggi daripada mesin. Dari 60 pasien, 25 menderita trombositopenia semu. Hal
ini sebagian besar disebabkan oleh adanya gumpalan trombosit dan trombosit raksasa. Dalm
sebuat penelitian oleh Silvestri F hasil serupa terlihat.
Pseudotrombositopenia terlihat pada 25% pasien. Pseudotrombositopenia merupakan dengan

7
trombositopenia. Temuan yang relatif umum di laboratorium klinis, dapat menyebabkan kesalahan
diagnostik, pengobatan belebihan, dan pengajuan lebih lanjut (bahkan invasif) yang diperlukan.
Konsekuensi klinis dengan potensi kejadian yang mengancam jiwa (misalnya, tranfusi trombosit
yang tidak perlu, termasuk pengobatan yang tidak tepat splenektomi atau kortikosteroid masih
diamati ketika pseudotrombositopenia tidak mudah terdeteksi.
Selain itu, keputusan klinis untuk melanjutkan tranfusi trombosit profilaksis secara luas
didasarkan pada titik pemicu jumlah trombosit yang sama dengan 20, 10, atau bahkan 5x10 9/L.
Masalah ketidaktepatan penghitungan pada kisaran trombositopenik rendah pada alat analisa
otomatis dapat diminimalkan dengan meninjau apusan sebagai beriku : ini tetap menjadi “Gold
Standard” untuk penghitungan trombosit.

Kesimpulan

Pada trombositopenia, penting untuk melakukan pemeriksaan perifer untuk memastikan

jumlah trombosit sebelum pengobatan. Ini dapat menyelamatkan pasien dari penyelidikan yang
tidak perlu. Dengan demikian pemeriksaan darah tepi menjadi standar emas untuk menghitung
trombosit secara akurat.

8
 Daftar Pustaka

Jain DK. Comparison of platelet count by a manual and automated method. 2020.

Hartwing HJ. Platelet Morphology. In; Loscalzo J, Schafer IA, editors. Thrombosis and Hemorrhage.
2nd Ed, Baltimore, Williams & Wilkins; 1998, p. 207.

Bajpai R, Rajak C, Poonia M. Platelet estimation by peripheral smear: Reliable, rapid, cost-effective
method to assess degree of thrombocytopenia. International Journal of Medical Science Research
and Practice. 2015;2(2):90-3.

Nurden AT, Nurden D, Sanchez M, Andre I, Anituo E. Platelets and wound healing. Front Biosci
2008;13:3532-48

Briggs C, Harrison P, Machin S. Continuing developments with the automated platelet count 1.
International journal of laboratory hematology. 2007;29(2):77-91.

Anchinmane VT, Sankhe SV. Utility of peripheral blood smear in platelet count estimation. 2019.

Rate IRfMoES. International Council for Standardization in Haematology (Expert Panel on Blood
Rheology). J Clin Pathol. 1993;46(3):198-203.

Zandecki M, Genevieve F, Gerard J, Godon A. Spurious counts and spurious results on haematology
analysers: A review. Part I: Platelets. Int J Lab Hematol 2007;29:4-20

Wyrick-Glatzel J, Hugues VC, Harmening D. Routine Hematology Methods. Philadelphia: FA Davis.

2002. p. 580

Mohamed-Rachid B, Raya AF, Sulaiman AH, Salam AK. Comparative analysis of four methods for
enumeration of platelet counts in thrombocytopenic patients. Journal of Applied Hematology.
2015;6(3):119.

De la Salle BJ, McTaggart PN, Briggs C, Harrison P, Doré CJ, Longair I, et al. The accuracy of platelet
counting in thrombocytopenic blood samples distributed by the UK National External Quality
Assessment Scheme for GeneralHaematology. American journal of clinical pathology.
2012;137(1):65-74.

International Council for Standardization in Haematology Expert Panel on Cytometry; International

Society of Laboratory Hematology Task Force on Platelet Counting. Platelet counting by the
RBC/platelet ratio method. A reference method. Am J Clin Pathol 2001;115:460-4.

Briggs C. Quality counts: New parameters in blood cell counting. Int J Lab Hematol 2009;31:277-97

WBC DBU. Platelet determination for manual methods. Rutherford, NJ Becton, Dickinsion and
Company. 1996.

Leeta JB, Mrudula, Devaraju S, Saldhana C, Veronica. A Comparative study of platelet count by manual
and automated method in platelet poor plasma. Int J Recent Trends Sci Technol.2014;12(2):262-265.

Adewoyin AS, Nwogh B. Peripheral Blood film- A review. Ann of Ib Postgrad Med. 2014;12(2):71-79.

Gulati G, Song J, Florea AD, Gong J. Purpose and criteria for blood smear scan, blood smear
examination, and blood smear review. Ann Lab Med. 2013;33(1): 1-7.
Webb DI, Parker L, Webb K. Platelet count assessment from peripheral blood smear (PBS). Alaska
Med. 2004 Oct- Dec;46(4):92-5. PMID: 15999911.

Zandecki M, Genevieve F, Gerard J, Godon A. Spurious counts and spurio analysers: A review. Part
I: Platelets. Int J Lab Hematol 2007;29:4-20.

9
Afzal MM, Indira V, Duraiswami CR. Role of peripheral blood smear examination and manual platelet
counts as an adjunct to automated platelet counts. MRIMS Journal of Health Sciences.
2019;7(3):81.

Castromayor J, Agreda-Cadete L. PB2242 COMPARISON BETWEEN MANUAL AND

AUTOMATED PLATELET COUNTS OF ADULT PATIENTS WITH
THROMBOCYTOPENIA AT ST. PAUL'S HOSPITAL ILOILO (SPHI), PHILIPPINES.
HemaSphere. 2019;3(S1):1005.

Berkman N, Michaeli Y, Or R, Eldor A. EDTAÿdependent pseudothrombocytopenia: a clinical study

of 18 patients and a review of the literature. American journal of hematology. 1991
Mar;36(3):195-201.

Silvestri F, Virgolini L, Savignano C, Zaja F, Velisig M, Baccarani M. Incidence and diagnosis of

EDTAÿdependent pseudothrombocytopenia in a consecutive outpatient population referred for
isolated thrombocytopenia. Vox Sanguinis. 1995 Jan;68(1):35-