TEKNIK ISOLASI

KULTUR STARTER
By : Group 5
Tujuan Praktikum

Mampu melakukan isolasi bakteri

sebagai kandidat starter fermentasi ikan
 ISOLASI
kegiatan pemisahan suatu
kultur mikroba dari campuran KULTUR STARTER
Suatu populasi mikrooorganisme
biakan mikroba di alam sel
dalam jumlah dan kondisi fisiologis
individu terpisah
yang dapat diinokulasikan pada
media fermentasi.

TEKNIK ISOLASI KULTUR MURNI

Penggoresan (Streak-plate)
 ALAT :
tabung reaksi,
drigalski, Petri dish,
inkubator

BAHAN:
ikan asap, Medium casein agar
(skim milk 0.5%, agar 1.5%), NaCl,
larutan garam fisiologis (0.78%
NaCl), medium NA
CARA KERJA
Menimbang satu gram sampel ikan tambahkan NaCl fisiologis + Vortex
hingga homogen

Membuat seri Pengenceran

Mengambil 0.1 mL larutan teteskan di atas permukaan media SMA dan ratakan
dengan menggunakan drigalski

Inkubasi plate pada inkubator dengan suhu 37oC selama 1x24 jam

Melakukan pengamatan, hitung bakteri yang menghasilkan enzim protease

(ditandai dengan zona jernih di sekitar koloni)

Mengambil koloni yang menghasilkan zona jernih dengan diameter terbesar

dengan menggunakan loop steril dan pindahkan pada media NA
Pengenceran

Penggoresan (Streak-plate)
 Tabel 1 Perhitungan Jumlah Mikrobia pada Sampel Ikan Asap
JUMLAH KOLONI
NO MEDIA CFU
100 10-1 10-2
SKIMMILK 5,0 x 103
1. TBUD TBUD 10
AGAR CFU/Gram
Tabel 2 Penghitungan Diameter Zona Bening dan Diameter Koloni Mikrobia
Diameter Zona Bening (cm) Diameter Koloni (cm)
Mikroba Rata- Rata-
1 2 3 4 1 2 3 4
rata rata
1 0,2 0,1 0,2 0,2 0,75 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
2 0.2 0,1 0,1 0,1 0,125 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
3 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
4 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
5 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0.025 0.025 0.025 0.025 0.025
6 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0.075 0.075 0.075 0.075 0.075
7 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
8 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
9 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,1 0,1 0.075
10 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05