Journal reading

EVALUASI KLINIS, HISTOLOGIS

DAN IMUNOHISTOKIMIA
KANKER LARING
 PENGANTAR

• Jumlah insiden kanker rongga mulut, faring dan laring merupakan jenis kanker ketujuh
yang paling sering terjadi di dunia
• Sekitar 600.000 kasus baru pada tahun 2012 (5% dari insiden kasus kanker)
• Kanker laring -> kanker di bidang THT yang paling umum
• Insiden 10 / 100.000 (Eropa)
• Angka kematian 4,3 / 100.000 (2010-2011) -> kedua setelah kanker paru-paru
Pria > Wanita(Kadar estrogen alami • Studi ini menyoroti kebutuhan
yang lebih tinggi pada wanita) dan pentingnya pendekatan
Faktor resiko : multidisiplin untuk tumor
• Alkohol ganas laring, dengan fokus
pada korelasi informasi klinis
• Merokok
dan morfologi dengan analisis
• infeksi virus tertentu (seperti HPV)
histologis dan
imunohistokimia protein
Survival rates tergantung pada : tumor p53, PCNA dan antigen
proliferasi nuklir Ki-67, dan
• Lokasi tumor
reseptor faktor pertumbuhan
• Ukuran epidermal (EGFR) dan antigen
• jenis histopatologi CD44.
• stadium tumor
• adanya metastasis
• keakuratan diagnosis
• pengobatan
BAHAN DAN METODE

• Penelitian ini meneliti pasien kanker laring, antara tahun 2010 dan 2016, dibagi dalam
kelompok retrospektif (2010-2014) dan kelompok analisis prospektif (2014-2016)
• Perbedaan antara kedua kelompok ini adalah : tindak lanjut/follow up yang lebih lama
untuk kelompok retrospektif, dan bahwa spesimen kelompok prospektif juga menjalani
analisis genetik sampel darah secara menyeluruh, biopsi tumor, batas onkologi dan
jaringan sehat yang tepat.
• Karena studi genetik bukan subjek dari laporan ini, tidak mempengaruhi inklusi,
pemeriksaan diagnostik atau pengobatan terapan, kami menganggap semua pasien
sebagai satu kelompok homogen.
 •Pendokumentasian, penyusunan kelompok studi dilakukan dengan membuat model
eksperimental, mengelaborasi protokol kerja dan membuat database elektronik, kriteria
inklusi dan eksklusi.
•Persetujuan tertulis diperoleh dari pasien untuk studi inklusi, pengumpulan sampel,
publikasi data dan gambar. Untuk kelompok analisis retrospektif, jaringan tumor dan
sampel biologis lainnya diambil dari departemen patologi anatomi (bio-arsip).
Bentuk pita suara dinilai lebih tepat dengan menggunakan stroboscope, dan
pembatasan gerakan, imobilitas figuratif atau imobilitas total dicatat sebagai
tanda proses neoplastik.

Mikro-laringoskopi  lebih akurat mengenai permukaan dan perluasan tumor

laring-kepala untuk menilai kedalaman dan infiltrasi jaringan di sekitarnya. Untuk
biopsi yang ditargetkan dan tepat, menggunakan beberapa filter dalam narrow
band imaging (NBI) dengan endoskopi pembesar.

CT Scan evaluasi perluasan tumor: mengevaluasi ruang preepiglotis dan

paraglotis dengan tepat, tetapi juga dapat mendeteksi metastasis jauh.
Setelah pemeriksaan klinis dan paraklinis lengkap, berbagai jenis operasi dilakukan:
kordektomi, kordektomi fronto-lateral diperluas, laringektomi horizontal supraglotis parsial,
laringektomi total. Jenis pembedahan telah dipilih sesuai dengan rekomendasi UICC (Union
for International Cancer Control).

Semua spesimen yang direseksi menjadi sasaran studi mikroskopis menggunakan teknik
histopatologi klasik (digunakan pewarnaan hematoksilin-eosin) dan pewarnaan
imunohistokimia.
 Untuk studi imunohistokimia, bahan
yang termasuk dalam potongan
serial histologis parafin dipotong
Bahan biologi dimasukkan dalam
dan dikumpulkan ke slide yang
parafin kemudian dipotong dengan
dilapisi dengan poli-L-lisin dan
mikrotom, diperoleh potongan
kemudian disimpan dalam termostat
dengan ketebalan 3 mikron.
pada suhu 37˚C selama 24 jam
untuk meningkatkan adhesi bahan
biologis ke slide.
 Setelah dewaxing dan hidrasi
potongan histologis, bahan biologis
diinkubasi selama 30 menit dalam
larutan hidrogen peroksida 1% .
Kemudian potongan-potongan
tersebut dicuci dengan air ledeng
sebelum di microwave dalam
larutan citrate pH 6 selama 20 menit
untuk pengambilan antigen.
Setelah mendidih, irisan-irisan
tersebut didinginkan kemudian
dicuci dalam larutan phosphate
buffer saline (PBS), dilanjutkan
dengan pemblokiran fase
peroksidase endogen dalam susu
skim 2% selama 30 menit
Kemudian, potongan diinkubasi dengan
antibodi primer semalaman (16 jam)
Setelah mendidih, irisan-irisan tersebut
pada suhu 4˚C, dan keesokan harinya,
didinginkan kemudian dicuci dalam
sinyal diamplifikasi selama 30 menit
larutan phosphate buffer saline (PBS),
menggunakan antibodi sekunder
dilanjutkan dengan pemblokiran fase
dengan peroksidase pada polymeric
peroksidase endogen dalam susu skim
backbone (EnVision, Dako). Sinyal
2% selama 30 menit
terdeteksi dengan 3,3'-
diaminobenzidine (DAB) (Dako).
Penanda imunohistokimia yang digunakan :
p53, PCNA, EGFR, CD44, EMA, dan Ki-67.

Variasi ekspresi sitokin ini dianalisis, dengan mempertimbangkan jumlah sel

imuno-positif dan intensitasnya - dengan pemrosesan statistik selanjutnya.
HASIL

 Studi terdiri dari 490 pasien yang didiagnosis di Klinik THT dengan kanker laring, antara
tahun 2010 dan 2016.
 Kelompok analisis retrospektif mencakup 382 pasien yang didiagnosis dengan kanker
laring, antara tahun 2010 dan 2014, data disimpan dalam database elektronik yang berisi
data klinis dan investigasi , protokol operasi dan onkologis diikuti.
 Tindak lanjut jangka panjang dilakukan untuk sebagian besar pasien dalam kelompok ini.
Sampel biologis dan fragmen tumor telah diproses secara histologis dan imunohistokimia
dan datanya telah diambil dari bioarchive patologi anatomis.
 5-year survival rate lebih dari 80% untuk pasien yang menerima operasi radikal dan
mengikuti protokol onkologi adjuvan penuh.
Kelompok prospektif termasuk 108 pasien lainnya yang didiagnosis antara 2015 dan
2016.
Pasien-pasien ini telah diperiksa secara menyeluruh : pemeriksaan klinis, fibroskopi,
pencitraan (CT / RMN, ekografi), dan tes darah. Setelah menyelesaikan pemeriksaan ini,
mikro-laringoskopi dilakukan, dengan anestesi umum, dengan biopsi tumor.
HASIL

 Pasien yang berasal dari daerah pedesaan (66,5%),Pasien berasal dari perkotaan (33,5%),
Laki-laki sekitar 97%, Sebagian besar berusia antara 51 hingga 70 tahun (sekitar 71%
pasien dalam penelitian).

Pasien didiagnosis pada stadium lanjut stadium IV (75%), stadium III (23%) Ini menyiratkan
metastasis kelenjar getah bening, (berkorelasi dengan pola pertumbuhan tumor) tetapi
juga nekrosis tumor terinfeksi.

Untuk alasan ini sebagian besar pasien menerima pembedahan radikal atau paliatif
sebagai langkah terapeutik pertama dalam protokol pengobatan onkologi.
TABEL 2. JENIS HISTOLOGIS YANG
DITEMUKAN DALAM STUDI
 KARSINOMA IN
SITU

 Karsinoma in situ terdiri dari

lesi neoplastik yang belum
menembus membran basal.
 Terdapat 35 kasus
 KARSINOMA
BERDIFERENSI
ASI BURUK

 Ditemukan 202 kasus

(yang paling sering)
 Terlihat dari bawah
mikroskop : area sel
tumor epitel yang luas,
dengan berbagai
dimensi , terkadang
dengan area nekrosis
dan inflamasi
peritumoral
 KARSINOMA
BERDIFERENSIASI
BAIK DENGAN
KERATIN

 Terdapat 68 kasus
epidermoid yang
berdiferensiasi baik.
 Berkembang di
permukaan dengan cara
menyerang dan
mengganti epitel normal
dan juga menyerang
jaringan dengan
memecahkan membran
basal.
 KARSINOMA
BERDIFERENSIASI
SEDANG

 Terdapat 144 kasus

 Jarang ditemukan
manik-manik epitel,
sketsa samar, mitosis
atipikal lebih umum
dan stroma lebih
buruk.
KARSINOMA VERUKOSA

 Varian yang tidak

umum dari karsinoma
sel skuamosa
 Tampak sebagai polip
eksofilik, regangan,
dengan ekstensi
filiform di salah satu
dari tiga area laring,
terutama di glotis.
KARSINOMA BASALOID

 Merupakan jenis
karsinoma skuamosa
agresif.
 Dijumpai ada 8 kasus
 Varian bifasik dari
karsinoma skuamosa,
terdiri dari tipe
basalloid dan skuamosa
konvensional.
CHONDROSARCOMA

 Secara makroskopis,
terlihat seperti massa
tumor dengan ulserasi
sentral dan infiltrasi
submukosa yang luas.
 MELANOMA MALIGNA

Terdapat pasien dengan

metastasis laryngotracheo-
bronchial dari melanoma
maligna.
 E ks p re si EGF R te lah d ip e la j a r i p a d a 4 5 ka su s ka n ke r la r in g
d a r i p en eliti a n ka m i, ta n p a m e n e m u ka n ko rela si a p a p u n
m e n gen ai lo kasi t u m o r, inva si, m eta sta sis ata u u sia p a sie n .
Ke b e rad a an nya, b aga im a n a p u n , te la h d ika it ka n d e n ga n
d e ra j at d ife ren siasi, EGF R d ie ksp re s ika n d a la m ka rsin o m a
b e rd ife ren siasi b aik d a n se d a n g ( g b r.9 , 1 0 ) .
 K A R S I N O M A S K UA M O S L A R I N G

 PCNA ditemukan memiliki hubungan langsung dengan

agresivitas tumor. Kami telah memperhatikan konsistensi antara
derajat diferensiasi tumor dan PCNA, selama penelitian
berlangsung.
 Hasil menunjukkan indeks PCNA yang lebih tinggi secara
signifikan dalam kasus-kasus dengan evolusi yang tidak
menguntungkan. Oleh karena itu, pengujian PCNA dapat
dianggap sebagai penanda untuk predisposisi tumor ganas atau
untuk perkembangan metastasis leher yang lebih mungkin.
(Gbr. 11,12)
 LARYNGEAL SQUAMOS
CARCINOMA

Selama kami studi, kami menemukan

bahwa protein p53 (Gbr. 13) lebih
jarang bertemu daripada PCNA,
meskipun ada korelasi positif antara
ekspresi dua penanda tumor-baik
p53 dan PCNA telah diekspresikan
lebih baik pada tumor keganasan
tinggi. dan pada pasien stadium
lanjut. Dalam penelitian kami, CD 44
berhubungan dengan ekspresi p53,
ekspresi PCNA dan derajat keganasan
kanker laring.
DISKUSI
 Karsinoma sel skuamosa laring terus menjadi kanker kepala dan leher yang paling sering
terjadi di banyak negara .
 Secara signifikan lebih banyak terjadi pada pria (97% dalam penelitian ini, sebagian besar
pasien berusia di atas 40 tahun) sebagian besar karena kebiasaan penyalahgunaan
tembakau dan alkohol, merokok dan konsumsi alkohol menjadi faktor risiko utama untuk
kanker laring
 Insiden yang lebih tinggi di daerah pedesaan (66,5%) dibandingkan perkotaan (33,5%).
 Faktor-faktor yang menentukan pendekatan terapeutik dan sangat mempengaruhi hasil
yang berkaitan dengan tumor, pasien dan sumber daya / pilihan terapeutik (efek
samping, komplikasi, operasi parsial / total dengan rekonstruksi)
 Saat ini, protokol pengobatan kanker laring sangat kompleks, termasuk pembedahan,
radioterapi, kemoterapi, dan imunoterapi.
 Pilihan bedah saat ini termasuk bedah endoskopi laser, bedah konservatif, laringektomi
parsial, dan laringektomi total. Teknik pembedahan bergantung pada lokasi dan
perluasan tumor primer, serta keberadaan kelenjar getah bening atau metastasis jauh.
 Dalam penelitian ini menyimpulkan bahwa urutan terapeutik terbaik (dan paling sesuai
dalam penelitian ini) adalah operasi primer diikuti dengan radioterapi adjuvan.
• Studi histopatologi penelitian ini tentang kanker laring menunjukkan peningkatan jumlah
karsinoma epidermoid (lebih dari 95%) dan sejumlah tipe histopatologi khusus.
Tergantung pada derajat diferensiasinya, karsinoma G3 berdiferensiasi buruk paling
sering ditemui.
• Perubahan stroma dievaluasi, stroma yang banyak akan infiltrat limfoplasmositik, dengan
adanya sel Langerhans raksasa, menunjukkan prognosis yang baik.
• Sebaliknya, adanya nekrosis pada tumor dan area peritumoral merupakan faktor
prognostik yang tidak baik
 Imunohistokimia berperan penting pada kanker laring menargetkan faktor prognostik-
PCNA, p53, Ki67 yang berkorelasi dengan derajat histopatologi lesi dan evolusi. CD44-
molekul adhesi yang ada di epitel normal dan displasia dapat memainkan peran penting
dalam prognosis kanker laring.
 EGFR (reseptor faktor pertumbuhan epidermal) ditemukan meningkat secara signifikan
pada sel tumor dibandingkan dengan mukosa normal.
 Adanya ekspresi EGFR dapat dikorelasikan dengan derajat diferensiasi tumor.
 Tingginya EGFR ditandai dengan pasien dengan kekambuhan tumor dengan prognosis
buruk.
 PCNA ditemukan positif baik dalam ketebalan epitel displastik dan di kasus
karsinoma.
 Didapati korelasi antara derajat diferensiasi tumor dan indeks PCNA. Pengujian
PCNA dapat dianggap sebagai penanda potensi keganasan dalam pemilihan
perilaku terapeutik .
 Mutasi yang terjadi pada gen p53 adalah perubahan paling umum pada kanker
manusia.
 Didapati ada korelasi positif antara ekspresi dua penanda tumor: p53 dan PCNA
lebih baik diekspresikan pada keganasan tinggi kanker laring
 CD44 merupakan membran glikoprotein yang tidak efektif dengan berbagai
fungsi dalam interaksi sel-sel dan substrat sel, menjadi molekul adhesi. Telah
disarankan bahwa itu bisa menjadi penentu metastasis kanker dan kemampuan
invasi Implikasinya
 Adanya gangguan kekebalan imunitas telah dikaitkan dengan pola karsinoma yang
berdiferensiasi buruk, peningkatan indeks mitosis dan frekuensi tinggi invasi dan
metastasis kelenjar getah bening.
 EMA (epithelial membrane antigen) memiliki nilai yang kecil dalam mendiagnosis kanker
laring dikarenakan reaksi difusi yang tidak spesifik.
 Untuk deteksi proliferasi, Ki-67 adalah penanda yang lebih tepat .
KESIMPULAN

 Pengobatan tumor laring dan kelenjar getah bening servikal saat ini terdiri
dari protokol yang kompleks: pembedahan, radioterapi, kemoterapi dan
imunoterapi.

 Studi histopatologi kami tentang kanker laring mengidentifikasi sejumlah

besar karsinoma epidermoid dibandingkan dengan sejumlah kecil tipe
hisptopatologi khusus.

 Mengenai derajat diferensiasinya, karsinoma tipe G3 yang berdiferensiasi

buruk adalah yang paling umum.

 Semua perubahan tingkat stroma peritumoral telah dievaluasi, prognosis

yang baik telah dikaitkan dengan stroma yang banyak akan infiltrat
limfoplasmositik, dengan adanya sel Langerhans raksasa. Nekrosis tumor dan
peritumoral merupakan faktor prognosis yang tidak baik.
 Pemeriksaan histopatologi tumor primer harus spesifik, selain tipe histopatologis,
semua hal berikut ini: derajat diferensiasi tumor, invasi vaskular di stroma tumor dan
status invasi perineural.

 Pentingnya imunohistokimia pada kanker laring berkaitan dengan faktor prognosis

yang berhubungan dengan evolusi dan derajat histopatologi lesi. Analisis dapat
mengarah pada pengembangan dan modulasi perilaku terapeutik.
TERIMA KASIH