SPEKTROSKOPY UV-VIS

Analisis Data Hasil Percobaan

Tinjauan Umum Spektrofotometer UV-Vis
• Merupakan salah satu instrument analisis yang disebut sebagai spektrofotometer.
• Sumber energi yang biasa digunakan adalah lampu hydrogen atau lampu deuterium.
• Untuk UV-Vis sampel yang akan dianalisis berupa larutan atau gas yang diletakkan peda
sel/cuvet kedua sedangkan sel/cuvet pertama adalah untuk menempatkan larutan
pembanding. Sel/cuvet yang digunakan berasal dari silika yang dilebur. Sel/cuvet yang
digunakan untuk sampel yang berupa gas menpunyai panjang lintasan 0,1 hingga 100 cm,
sedangkan sel untuk larutan mempunyai panjang lintasan tertentu dari 1 hingga 10 cm.
• Untuk UV-Vis sampel yang akan dianalisis biasanya berupa gas atau larutan. Dengan
demikian hendaknya pelarut yang digunakan dapat melarutkan sampel, meneruskan
radiasi dalam daerah panjang gelombang yang sedang dipelajari. Dan pelarut yang
biasanya digunakan adalah aseton, bensena, karbon tetraklorida, kloroform, dioksan,
diklorometan, 95% etanol, etil eter, metanol, air dan sebagainya. Konsentrasi dari larutan
standar yang biasa digunakan sekitar 0,1 %.
Lanjutan Tinjauan Umum Spektrofotometer
UV-Vis
• Untuk UV-Vis absorpsi berlangsung dalam dua tahap yakni yang pertama
M + hv = M*, merupakan eksitasi spesies akibat foton (hv) dengan waktu
hidup terbatas M* menjadi spesies baru dengan reaksi fotokimia.
Absorpsi dalam daerah ulatraviolet dan daerah tampak menyebabkan
eksitasi elektron ikatan. Puncak absopsi dihubungkan dengan jenis-jenis
ikatan yang ada dalam suatu molekul dan yang ada dalam spesies.
• Untuk UV-Vis, spektra yang dihasilkan berada pada panjang gelombang λ
190-400 nm dan 400 -800 nm, dimana efek terhadap molekul yakni
perubahan-perubahan terhadap tingkat tenaga elektronik dalam
molekul (adanya sistem elektron – π, sistem tak jenuh terkonjugasi dan
terkonjugasi dengan elektron elektron tak berikatan).
Skema instrument UV-Vis
Gambar instrument UV-Vis
Skema kerja UV Vis
Contoh penggunaan spektrofotometer UV
VIS dalam analisis di laboratorium
• Tujuan : Uji Nitrit dengan Spektofotometer UV VIS
• 1. Siapkan larutan nitrit 50 ppm
• 2. Siapkan juga larutan sampel yang mengandung nitrit
• 3. Membuat larutan nitrit standar 0,1; 0,2; 0,3;0,4 dan 0,5 PPM
(menggunakan rumus pengenceran)
• 4. setelah larutan standar dibuat, ditambahkan1 mL asam sulfanilat
padasetiap larutan standar, dan didiamkan selama 5 menit,
• 5. tambahkan 1 mL NED dihidroklorida pada setiap larutan standar
dan didiamkan selama 10 menit,
• 7. bandingkan warna sampel dengan larutan standar kira-kira
warnanya mendekati yang mana,
• 8. tuangkan sampel dan masing-masing larutan tandar ke dalam
Cuvet sebanyak ¾ ukuran cuvet (tempat sampael UV VIS)
• 9. Ukur dengan menggunakan spektrofotometer UV VIS pada Panjang
gelombang 543 nm
Gambar cuvet
Lanjut perhitungan exel
• Jika data yang diperoleh seperti dibawah ini
C. std abs std
0.1 0.129
0.2 0.215
0.3 0.306
0.4 0.388
0.5 0.472
Selanjutnya kita buatkan kurva baku dengan
menggunakan exel
abs std
0.5

0.45 f(x) = 0.859 x + 0.0443

R² = 0.999703292236824

0.4

0.35

0.3
Axis Title

0.25 abs std

Linear (abs std)
0.2

0.15

0.1

0.05

0
0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55

Axis Title
jadi untuk menghitung konsentrasi sampel kita bisa menggunakan persamaan garis tersebut
Uji Nitrit secara spektrofotometri