Oleh Yuniven Merina Anin PO 530333210867

RADIKAL BEBAS

PERAN ANTIOKSIDAN

TOMAT

Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Buah Tomat (Solanum lycopersicum L) dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil)

Apakah ekstrak metanol buah tomat (Solanum lycopersicum L.) memiliki aktivitas antioksidan?
Berapakah kekuatan antioksidan dari ekstrak metanol buah tomat (Solanum lycopersicum L.) berdasarkan nilai IC50?

TUJUAN UMUM

TUJUAN KHUSUS

Jenis Penelitian Deskriptif kuantitatif

Tempat & Waktu Penelitian

Laboratorium Farmakognosi dan laboratorium Instrumen

Bulan Juni Juli 2013.

Variabel Penelitian
Variabel tunggal, yakni aktivitas antioksidan ekstrak metanol buah tomat (Solanum lycopersicum L.) terhadap 1,1diphenyl-2picrilhidrazil (DPPH).

Populasi & Sampel

Populasi : buah tomat segar berwarna merah yang diambil dari Kelurahan Oesao

Sampel : Ekstrak metanol buah tomat

Ekstrak Metanol Aktivitas Antioksidan

Ekstrak kental yang diperoleh dengan cara maserasi buah tomat dengan menggunakan pelarut metanol dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator hingga diperoleh konstituen yang kental Kemampuan ekstrak metanol buah tomat meredam radikal bebas 1,1-diphenyl-2picrilhidrazil (DPPH).

Metode DPPH
Nilai IC50

Metode yang digunakan untuk pengujian aktivitas antioksidan ekstrak metanol buah tomat berdasarkan nilai IC50

Nilai yang menyatakan besarnya konsentrasi ekstrak tomat (ppm) yang dapat meredam radikal DPPH sebesar 50%.

Alat
Bejana maserasi, Rotavapor (Eyela) Beaker gelas (pyrex) Erlenmeyer 250 mL (pyrex) Spektrofotometer UV-VIS (Shimadsu tipe W-1700) Neraca analitik Kern, type EW 220-3NM Labu ukur (pyrex) Pipet ukur Buret 25 mL (Dien) Oven (WTC Binder) Blender Kertas saring

Bahan Buah tomat asal Kabupaten Kupang Metanol pro analis Metanol tekhnis DPPH pro sintesis Vitamin C.

Dipetik buah tomat yang berwarna merah

Sortasi basah

Pencucian buah tomat

Buah tomat dipotong menggunakan pisau stainless stell

Ditimbang 250 g buah tomat yang telah dipotong

Diblender selama 3 menit

2.

Pembuatan Ekstrak
250 g tomat segar yang telah dihaluskan
Dimasukkan dalam bejana maserasi Dituang 250 ml metanol, ditutup

Dimaserasi selama 15 menit sambil seseka dikocok, disaring dengan kertas saring

Filtrat dipisahkan, ulangi maserasi hingga 3 kali, Filtrat digabung

Dipekatkan dengan rotary evaporator, diperoleh ekstrak kental Dibuat seri konsentrasi ekstrak metanol (1000 ppm, 1500 ppm, 2000 ppm, 2500 ppm, dan 3000 ppm)

1 mg Ekstrak dilarutkan dalam 1 ml etanol

Ditotolkan pada plat KLT, keringkan

Disemprot dengan 0,004% larutan DPPH dalam metanol

Hasil uji dinyatakan positif sebagai antioksidan jika diperoleh bercak kuning berlatar ungu pada kromatogram

3.

Pengujian Aktivitas Antioksidan

Ekstrak metanol buah tomat dengan seri konsentrasi (1000 ppm, 1500 ppm, 2000 ppm, 2500 ppm, dan 3000 ppm )

4 ml sampel + 1 ml DPPH dalam vial

Kocok, diamkan pada suhu kamar selama 30 menit

Pembacaan absorbansi sisa DPPH dengan Spektrofotometer Vis pada panjang gelombang yang sesuai

Analisis Hasil

Daya aktivitas antioksidan peredaman radikal bebas DPPH (% peredaman) ekstrak metanol serta vitamin C dianalisis dan masing-masing dihitung harga IC50 nya melalui analisis probit

Rendemen Pembuatan Ekstrak

12,96%

Uji Pendahuluan Aktivitas Antioksidan

Bercak atau noda berwarna putih kekuningan dengan latar belakang ungu pada pelat KLT Memiliki aktivitas antioksidan

Larutan DPPH 20 mg dalam 100 ml = 0,5 mM

Pengukuran panjang gelombang Maksimum nm Absorbansi 0,987 515,4

Aktivitas (%) No 1 2 3 4 Konsentrasi

Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

1000 ppm 1500 ppm 2000 ppm 2500 ppm 3000 ppm

30,09% 46,50% 50,15% 72,64% 75,38%

26,14% 49,44% 55,93% 71,38% 79,13%

29,79% 44,03% 56,73% 72,04% 82,07%

5 IC50

1.649 ppm

1.633 ppm 1.621 ppm

1.581 pppm

Rata-rata IC50

No

Konsentrasi

Aktivitas (%)

Replikasi 1
26,21% 35,36% 43,87% 62,61% 73,56% 4 ppm

Replikasi 2
21,28% 37,59% 43,57% 62,92% 74,67% 4 ppm 4 ppm

Replikasi 3
26,44% 36,88% 45,29% 62,00% 75,99% 4 ppm

1
2 3 4 5

2 ppm
3 ppm 4 ppm 5 ppm 6 ppm IC50 Rata-rata IC50

Ekstrak Metanol Buah Tomat

IC50 =1.621 ppm Antioksidan Lemah

Vitamin C
IC50 =4 ppm Antioksidan Sangat Kuat

 Melakukan Uji aktivitas Bagi Peneliti Antioksidan Buah Selanjutnya Tomat dengan Metode lain