PENGGUNAAN APTAMER OLIGONUKLEOTIDA UNTUK IMMUNOSTAINING JARINGAN

PARAFFIN YANG DI FIKSASI DENGAN FORMALIN

Published on Pubmed 2010
Zihua Zeng, Peng Zhang, Nianxi Zhao, Andrea M Sheehan, Ching-Hsuan Tung,
Chung-Che Chang, and Youli Zu

AWALUDDIN
P1506214002

2/27/15

JURUSAN MIKROBIOLOGI
PROGRAM PASCA SARJANA
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR

Latar Belakang
Biomarker
Immunostaining
oleh antibodi
Aptamers
Aptamer
CD30
Aptamer CD30
cocok untuk
immunostaining
2/27/15

TUJUAN
Mengetahui apakah aptamer CD30
oligonukleotida dapat digunakan untuk
immunostaining jaringan yang di fiksasi
dengan formalin

2/27/15

Metode Kerja
Bahan
Aptamer CD30 dan Antibodi CD30
Larutan PBS (Posfat Buffer Saline),
Larutan DAB ( Diaminobensidin)
Larutan H2O2 (Hidroksi Peroxida)
Larutan HRP (Horse Radish Peroxide)
SC buffer (Sodium Citrate)

Sel Tumor CHL (Classical hodgkin

lymphoma) dan sel tumor ALCL
(Anaplastic large cell lymphoma)
2/27/15

Bagan Kerja

Proses Immunostaining
jaringan

CHL

Larutan Xylen

ALCL

Etanol + akuades

Pemeriksaan
antigen

Inkubasi 30 menit SC
Dibilas PBS

H2O2 +Biotin

Inkubasi 20 menit

200 l
Aptamer
CD30
2/27/15

Inkubasi 20 menit dan

dicuci PBS

200 l
HRP
streptavi
din

Inkubasi 20 Menit

200 l
DAB
Hematoxil
yn

Pewarnaan antibodi CD30

CHL

Larutan Xylen

ALCL

HRP anti
mouse IgG

Etanol +
akuades
Pemeriksaan
antigen

Inkubasi 30 menit SC
Dibilas PBS

H2O2 +
Horse serum

Inkubasi 30 menit

Antibodi
CD30

Inkubasi 90 menit
Dicuci PBS

2/27/15

Inkubasi 30 Menit

200 l
DAB
Hematoxil
yn

Hasil
Immunostaining sel limfoma CHL yang tertanam paraffin dengan
pemeriksaan pada suhu 96o C

2/27/15

Hasil (lanjutan)
Immunostaining sel limfoma CHL yang tertanam paraffin dengan
pemeriksaan pada suhu 37o C

2/27/15

Hasil (lanjutan)
Immunostaining sel limfoma ALCL yang tertanam paraffin

2/27/15

Hasil Uji terhadap tumor nekrotik

2/27/15

10

Pembahasan

aptamer CD30 dan antibodi CD30 berbeda dalam hasil pola

pewarnaan, namun kegunaannya sama dalam mengekspresikan
sel limfoma.

Pewarnaan antibodi CD30 terkonsentrasi pada membran sel dan

sel-sel zona Golgi di CHL dan ALCL. Sebaliknya, pewarnaan
aptamer CD30 pada membran sel dan sitoplasma sel limfoma.

Perbedaan ini di pengaruhi oleh (1) penetrasi yang aptamer CD30

lebih baik dan lebih efisien dalam pemeriksaan jaringan (2)
pemeriksaan dengan aptamer dan antibodi mengenali bagian yang
berbeda dari sel.

2/27/15

11

Lanjutan
Aptamer CD30 dan antibodi CD30 dapat bereaksi dengan
sel limfoma, namun aptamer CD30 memiliki afinitas lebih
tinggi dalam mendeteksi jaringan sel tumor.
Aptamer CD30 lebih sedikit menyerap pewarnaan dari sel
pada jaringan tumor nekrotik.

2/27/15

12

Komentar
Pada jurnal ini, tidak dijelaskan dasar penentuan
suhu yang digunakan untuk proses paraffin.
Tidak di jelaskan mengapa pada aptamer CD30
tidak di lakukan pemeriksaan pada suhu 96o C

2/27/15

13

SEKIAN DAN TERIMA KASIH

2/27/15

14