BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat banyak, mereka berasal dari Air,
Tanah dan Atmosfer. Masing-masing mikroorganisme memiliki cara tersendiri utnuk
hidup mulai dari lingkungan maupun cara untuk hidup.
Kehidupan mikroorganisme pada umumnya sangat tergantung pada faktor
lingkungan. Faktor lingkungan ini meliputi faktor biotik dan faktor abiotik.
Faktor abiotik adalah faktor luar seperti pada pengaruh suhu, pengaruh pH,
pengaruh tekanan osmose dan lain-lain. Sedangkan pengaruh faktor biotik adalah dari
mikrooganisme itu sendiri.
Faktor-faktor biotik tersebut meliputi faktor fisik (suhu, pH, tekanan osmose)
faktor kimia (senyawa racun), dan faktor biologi (interaksi dengan mikroorganisme
lainnya). Faktor inilah yang sering terjadi dan dialami didalam pertumbuhan suatu
mikroorganisme yang banyak dari organisme tersebut suatu senyawaan dapat berlaku
sebagai sumber energi.
Oleh karena itu dilakukan percobaan ini, untuk mengetahui bagaimana pengaruh
lingkungan sehingga mikroorganisme tersebut dapat hidup dan berkembang biak untuk
melangsungkan kehidupannya.
B. Rumusan Masalah
Adapun rumusan masalah pada praktikum ini adalah Bagaimana pengaruh
lingkungan terhadap pertumbuhan suatu mikroba ?
C. Maksud Praktium
Maksud dari praktikum ini adalah mengetahui dan memahami pengaruh
lingkungan terhadap pertumbuhan mikroba seperti pengaruh suhu, pH, cahaya
matahari, zat-zat kimia dan logam berat.
D. Tujuan Praktikum
Adapun Tujuan dari praktikum ini adalah untuk menentukan pengaruh suhu, pH,
cahaya matahari, zat-zat kimia dan logam terhadap pertumbuhan Bacillus subtilis.
E. Manfaat Praktikum
Dengan melakukan percobaan ini kita dapat mengetahui pengaruh lingkungan
yang mempengaruhi pertumbuhan suatu mikroorganisme.
BAB II
KAJIAN PUSTAKA
A. Teori Umum
Dalam kehidupan sehari-hari kita selalu berhubungan dengan berbagai macam
mikroorganisme yang dapat menginfeksi yang dapat membahayakan atau merusak
inang. Akan tetapi, agar dapat memahami lebih banyak masalah dalam mendiagnosis
dan pencegahan infeksi, maka perlu diketahui bahwa mikroorganisme yang telah
menemukan tempat yang tetap pada bagian-bagian tubuh manusia disebut flora normal
kita (M. Natsir Djide, 2004).
Mikroorganisme mempunyai penyebaran yang sangat luas, ada di dalam air, di
udara, bahan makanan, minuman, dalam sediaan farmasi, dalam tubuh manusia,
bahkan mikroorganisme masih dapat ditemukan di atmosfer sampai ketinggian 10 km
(M. Natsir Djide, 2004).
Adapun Pengaruh lingkungan pada pertumbuhan dan perkembangan bakteri
(Entjang, 2003);
a. Pengaruh suhu
1) Pengaruh suhu rendah
Suhu rendah sampai di bawah suhu minimumnya, menyebabkan bakteri tidak dapat
berkembang biak, pada umumnya tidak segera mematikan bkteri, bahkan ada yang
tahan bertahun-tahun pada suhu minus 70C (tujuh puluh derajat Celcius). Bakteri yang
pathogen pada manusia umumnya cepat mati pada suhu 0C (nol derajat Celcius).
2). Pengaruh suhu tinggi
Suhu tinggi lebih membahayakan kehidupan bakteri dibandingkan dengan suhu rendah.
Bila bakteri dipanaskan pada suhu di atas maksimumnya, akan segera mati. Semua
bakteri, baik yang pathogen maupun tidak, dalam bentuk vegetatifnya mati dalam waktu
30 (tiga puluh) menit pada suhu 60 - 65C. Kenyataan ini merupakan dasar tindakan
pasteurisasi.
b. Cahaya
Sebagian besar bakteri adalah chemotrophe, karena itu pertumbuhannya tidak
bergantung pada adanya cahaya matahari. Pada beberapa species, cahaya matahari
dapat membunuhnya karena pengaruh sinar ultraviolet.
c. Pengeringan (kelembaban)
Air sangat penting untuk kehidupan bakteri terutama karena bakteri hanya dapat
mengambil makanan dari luar dalam bentuk larutan (holophytis). Semua bakteri tumbuh
baik pada media yang basah dan udara yang lembab., dan tidak dapat tumbuh pada
media dan udara yang kering.
d. Keasaman (pH)
Umumnya asam mempunyai
pengaruh buruk terhadap pertumbuhan bakteri.
Kebanyakan bakteri lebih baik hidup dalam suasana netral (pH 7,0) atau sedikit basa
(pH 7,2 - 7,4), tetapi pada umumnya dapat hidup pada pH 6,5 7,5.
Bakteri-bakteri yang pathogen pada manusia tumbuh baik pada pH 6,8 7,4 yaitu sama
dengan pH darah.
e. Pengaruh O2 dari udara
Untuk melangsungkan hidupnya, manusia dan binatang membutuhkan O2 (oxygen)
yang diambil dari udara melalui pernapasan. Fungsi O2 ini sudah jelas, yaitu untuk
pembakaran zat-zat makanan didalam sel-sel jaringan, sehingga dihasilkan panas dan
tenaga.
meriaan
mikroorganisme.
Karena
diketahui
bahwa
zat-zat
kimia
dapat
B. Uraian Bahan
1. Air suling (Dirjen POM,1979)
Nama resmi
: Aqua destillata
Nama lain
: Aquadest, air suling.
RM / BM
: H2O / 18,02
: Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, tidak berasa.
Penyimpanan
: Dalam wadah tertutup rapat.
Kegunaan
: Sebagai pelarut.
: Agar
Sinonim
: Agar-Agar
Pemerian
keping, serpih atau butiran, jingga lemah kekuningan sampai kuning pucat atau
berwarna, tidak berbau atau lemah, rasa berlendir.
:
Praktis tidak larut dalam air , dan larut dalam air mendidih.
Penyimpanan
Kegunaan
erian
rutan
: Asam sitrat
: C6H8O7. H2O / 210,34
: Hablur tidak berwarna atau serbuk putih, tidak berbau, rasa sangat asam, agak
higroskopik, merapuh dalam udara kering dan panas
: Larut dalam kurang dari 1 bagian air dan dalam 1,5 bagian etanol (95%) P, sukar larut
dalam eter P.
nyimpanan
gunaan
Nama resmi
: Beef extrak
Sinonim
Pemerian
Kelarutan
Penyimpanan
Kegunaan
: Komposisi NA dan NB
: Acidum Hydrochloridum
Nama lain
: Asam klorida
RM/BM
: HCl / 36,46
eriaan
rutan
yimpanan
unaan
: Pepton
: Pepeton Kering
Kegunaan
osisi
: Firmicutes
Class
: Bacilli
Order
: Bacillales
Family
: Bacillaceae
Genus
: Bacillus
Species
: Bacillus cereus
spora.
Selnya
berbentuk
batang
besar
dan
sporanya
tidak
naan
BAB III
KAJIAN PRAKTIKUM
A. Alat
Adapun Alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah Autoklaf, Cawan petri,
Inkubator, Lampu spiritus, Tabung reaksi, Rak tabung, Spoit, Labu Erlenmeyer, Pinset,
Pipet tetes dan Peper disk.
B. Bahan
Adapun Bahan yang digunakan adalah Aquadest steril, Alkohol 70%, Asam
Sitrat, Bacillus subtilis,
C. Cara Kerja
1). Pengaruh suhu
1. Disuspensikan Bacillus subtilis pada tabung.
2. Diambil Bacillus subtilis dengan menggunakan spoit, kemudian dipindahkan ke tabung
reaksi yang telah berisi medium PDB sebanyak 9 ml.
3. Ditutup, kemudian disimpan pada suhu 5C (kulkas), 27C (enkas), dan 37C (inkubator).
2). Pengaruh pH
1. Disuspensikan Bacillus subtilis pada tabung.
2. Diambil Bacillus subtilis dengan menggunakan spoit, kemudian dipindahkan ke tabung
reaksi yang telah berisi medium PDB sebanyak 9 ml.
3. Disimpan pada pH 3, 7, 9.
3). Pengaruh Zat Kimia
1. Diambil suspensi Bacillus subtilis, dan dipindahkan ke dalam cawan petri.
2. Ditambahkan dengan medium PDA, biarkan memadat.
3. Dimasukkan piperdisk yang telah dicampur dengan bahan-bahan kimia (antibiotik,
antiseptik, desinfektan), yang sebelumnya cawan petri telah dibagi menjadi 3 bagian.
4. Disimpan ke dalam inkubator.
4). Pengaruh Cahaya.
1. Diambil suspensi Bacillus subtilis, dipindahkan ke dalam 3 cawan petri.
2. Ditambah dengan 5 ml medium PDA, biarkan memadat.
3. Cawan petri yang pertama dibungkus dengan kertas karbon, dan dipaparkan pada sinar
matahari, cawan petri yang kedua dibungkus dengan kertas karbon tetapi tidak
dipaparkan pada sinar matahari, cawan petri yang ketiga tidak dibungkus dengan kertas
karbon dan dipaparkan pada sinar matahari dan cawan petri ketiga tidak dibungkus
dengan kertas karbon dan tidak di paparkan pada sinar matahari.
5). Pengaruh uang logam.
BAB IV
KAJIAN HASIL PRAKTIKUM
A. Hasil Pengamatan
1. Tabel Hasil Pengamatan
1. Pengaruh Suhu & pH
Pengaruh pH
Suhu
0
0
Mikroba Uji
3
7
9 Kontrol 5
25 370 Kontrol
Bacillus
+
+
+
+
+ ++
+
subtilis
Keterangan :
+
= ditumbuhi sedikit Mikroorganisme
++
= ditumbuhi banyak Mikroorganisme
= tidak ditumbuhi mikroorganisme
2. Pengaruh Logam dan Zat Kimia
Nama Sample
Ciprofloksasin
Wipol
Carex
Uang Koin Taiwan
Diameter Zona
Hambatan (mm)
36,7
23,3
25
24,3
3. Pengaruh Cahaya
Mikroba Uji
Bacillus
Perlakuan
Dibungkus, Dibungkus,
Tdk
dipaparkan
tdk
dibungkus,
dipaparkan dipaparkan
TBUD
TBUD
988
Tdk
dibungkus,
tdk
dipaparkan
TBUD
subtilis
B. Pembahasan
Banyak faktor yang dapat mempengaruhi aktivitas kehidupan mikroba antara lain
faktor abiotik yang meliputi temperatur, kelembaban, tekanan osmosis, pengaruh pH,
pengaruh logam berat serta pengaruh zat-zat kimia. Sedangkan faktor biotik meliputi
bebas hama serta asosiasi. Berdasarkan faktor-faktor tersebut, maka dilakukanlah
pengamatan tentang pengaruh suhu, pH, cahaya, zat kimia dan logam berat terhadap
pertumbuhan bakteri. Perlu diketahui bahwa aktivitas kehidupan suatu jasad
memerlukan keadaan sekitar yang sesuai, yang dapat mempengaruhi sifat morfologi
dan fisiologi dari jasad akan menyesuaikan dengan keadaan sekitar yang ada pada
waktu itu.
Pada percobaan ini dilakukan pengamatan terhadap mikroba akibat pengaruh
faktor lingkungan yang meliputi faktor abiotik. Faktor abiotik adalah faktor luar yang
dapat berupa faktor kimia dan faktor fisika. Dalam percobaan ini dilihat faktor fisika
meliputi pengaruh suhu, pengaruh pH dan pengaruh cahaya (sinar matahari). Adapun
faktor kimia digunakan zat-zat kimia untuk melihat bagaimana penghambatan
pertumbuhan mikroba yang bersangkutan.
Dalam mengamati pertumbuhan mikroba, digunakan sampel mikroba uji Bacillus
subtilis Dan medium yang digunakan untuk menginokulasikannya adalah PDA dan
PDB. Metode yang digunakan adalah metode agar tuang yakni salah satu metode
penginokulasian mikroba dengan cara menuangkan medium padat kedalam cawan
petri yang sebelumnya telah dimasukkan mikroba uji. Selanjutnya medium dengan
mikroba uji langsung dihomogenkan dan dibiarkan memadat. Setelah memadat, maka
dapat dilakukan pengerjaan selanjutnya. Sementara untuk medium cair, sebaliknya
dimana kedalamtabung reaksi dimasukkan terlebih dahulu medium yang selanjutnya
diambil biakan mikroba untuk dimasukkan dalam medium tersebut.
1. Pengaruh Suhu
Pada percobaan dengan pengaruh suhu, dilakukan perlakuan pengamatan
pertumbuhan mikroba Bacillus subtilis dengan variasai suhu yakni 5 oC, 27oC dan 37oC.
Mikroba dapat bertahan hidup dalam suatu batas-batas temperatur tertentu, jadi
dengan variasi tersebut dapat diketahui ketahanan tubuh suatu mikroba. Batas-batas
tersebut dinamakan suhu minimum dan suhu maksimum, sementara suhu yang paling
baik bagi mikroba untuk tumbuh disebut suhu optimum.
2. Pengaruh pH
Perubahan pH dalam lingkungan mikroba dpat mempengaruhi proses pertumbuhan
mikroba tersebut. Pada waktu pertumbuhan suatu mikroba, konsentrasi ion hidrogen
(pH) didalam media tempat tumbuhnya mempengaruhi protein (baik enzim dan sistem
pengangkutannya) yang terdapat pada membran selnya. Struktur protein itu akan
berubah bila pH dalam media juga berubah. Mikroba memiliki enzim yang berfungsi
sempurna pada kisaran pH tertentu, yang jika terjadi penyimpanan pH maka
pertumbuhan maupun metabolismenya dapat terhenti. Biasanya, mikroba tumbuh pada
pH sekitar 7,0 namun adapula yang dapat tumbuh pada pH 2,0 dan pH 10,0. bakteri
tumbuh pada kisaran pH agak basa yaitu 5,8 sampai 6. karena pada pH 5,7 bakteri
dapat terhambat pertumbuhannya,
Dari hasil percobaan mikroba uji diinokulasaikan dalam medium PDB pada 3 variasi
pH yaitu pH asam (3,0), pH netral (7,0) dan pH basa (9,0). Untuk pH 3, media
ditambahkan larutan asam klorida dengan tujuan untuk mengasamkan media yang berpH netral sekitar (7,0). Dengan menambahkan beberapa tetes HCl maka pH media
akan berubah menjadi pH asam sampai pada pH yang diinginkan. Sementara untuk pH
9,0 maka media ditambahkan reagen basa yaitu NaOH beberapa tetes untuk
menaikkan pH media ke pH 9,0. Setelah inkubasi, diamati pertumbuhannya dan
hasilnya yaitu pada Bacillus subtilis, ada pertumbuhan pada pH 3 dan 7 namun untuk
pH basa tidak terdapat pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan jenihnya medium
PDB. Artinya bakteri ini tidak mengalami pertumbuhan optimum pada suasana basa.
3. Pengaruh cahaya
Pada daerah atau tempat yang kurang mendapatkan cahaya (sinar matahari)
biasanya pertumbuhan mikroorganismenya lebih baik dibandingkan dengan daerah
yang terkena langsung dengan sinar matahari. Karena cahaya umumnya dapat
merusak mikroba yang tidak mempunyai pigmen fotosintesis. Cahaya mempunyai
pengaruh germisida, terutama cahaya bergelombang pendek dan bergelombang
panjang. Pengaruh germisida dari sinar bergelombang panjang disebabkan oleh panas
yang ditimbulkannya, misalnya sinar inframerah. Sinar x (0,005- 1,0 Ao), sinar ultra
violet (4000-2950 Ao), dan sinar radiasi lain dapat membunuh mikroba. Apabila tingkat
radiasi yang diterima sel mikroba rendah, maka dapat menyebabkan terjadinya mutasi
pada mikroba.
Pada dasarnya,
rangkaian
reaksi
dapat
dibagi
menjadi
dua
bagian
utama: reaksi terang (karena memerlukan cahaya) dan reaksi gelap (tidak memerlukan
cahaya tetapi memerlukan karbon dioksida). Reaksi terang terjadi pada grana (tunggal:
granum), sedangkan reaksi gelap terjadi di dalam stroma. Dalam reaksi terang, terjadi
konversi energi cahaya
menjadi
energi
kimia
dan
Sedangkan dalam reaksi gelap terjadi seri reaksi siklik yang membentuk gula dari
bahan dasar CO2 dan energi (ATP dan NADPH) Energi yang digunakan dalam reaksi
gelap ini diperoleh dari reaksi terang. Pada proses reaksi gelap tidak dibutuhkan
cahaya Matahari. Reaksi gelap bertujuan untuk mengubah senyawa yang mengandung
atom karbon menjadi molekul gula.
Pada percobaan ini dilakukan 4 perlakuan yang berbeda pada suspensi biakanbiakan mikroba. Pada cawan petri I dipaparkan pada sinar matahari dan dibungkus
karbon. Pada cawan petri II tidak dipaparkan di bawah sinar matahari dan dibungkus
dengan karbon. Cawan petri III dipaparkan pada sinar matahari selama 15 menit tanpa
dibungkus karbon. Cawan petri IV tidak dipaparkan pada sinar matahari dan tidak
dibungkus
karbon.
menghambat
Kertas
pencahayaan
karbon
merupakan
langsung
sinar
bahan
matahari
yang
digunakan
sehingga
untuk
menghambat
pertumbuhan mikroba.
Berdasarkan data pengamatan yang diperoleh, Basillus subtilis banyak yang
tumbuh pada semua cawan sehingga termasuk golongan bakteri autotrof, Bakteri
autotrof adalah bakteri yang memperoleh energinya umumnya dari proses fotosintetis
dengan kata lain membutuhkan karbondioksida sebagai sumber karbonnya..
4. Pengaruh Zat kimia
Pengamatan pengaruh zat-zat kimia dilakukan dengan mengukur zona hambatan
terhadap masing-masing zat kimia. Pada percobaan ini digunakan antibiotika,
desinfektan maupun antiseptik. Antiseptik adalah zat-zat yang digunakan untuk
mematikan / menghentikan pertumbuhan kuman pada jaringan hidup, khususnya diatas
kulit atau selaput mukosa. Desinfektan adalah zat-zat yang digunakan untuk mencegah
infeksi dengan jalan pemusnahan hama patogen pada benda-benda tak hidup.
Sementara antibiotik adalah zat-zat kimia yang dihasilkan oleh mikroba, terutama
bakteri dan fungi, yang berkhasiat mematikan atau menghambat pertumbuhan mikroba
lain yang toksisitasnya bagi manusi relatif kecil. Pada percobaan ini di peroleh data
bahwa Ciprofloksasin menpunyai zona hambat 36,7mm, Wipol 23,3mm, Carex 25mm.
Disini kita dapat menarik kesimpulan bahwa Ciprofloksasin lebih ampuh membunuh
mikroba.
5. Pengaruh Logam
Untuk pengaruh logam sampel yang digunakan adalah uang logam dari negara
Taiwan. Sebelum dimasukkan dalam cawan petri uang logam terlebih dahulu dicuci
dengan asam sitrat untuk menghilangkan sifat alkali dari uang logam tersebut dan agar
BAB V
KESIMPULAN dan SARAN
A. Kesimpulan
B. Saran
DAFTAR PUSTAKA
Anonim.2012.Penuntun Praktikum Mikrobilogi Farmasi Dasar. Fakultas Farmasi UMI :
Makassar.
Dirjen POM 1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Depkes RI : Jakarta.
Dirjen POM 19. Farmakope Indonesia Edisi IV. Depkes RI : Jakarta.
Entjang, Indan.2003.Mikrobiologi dan Parasitologi.PT.Citra Aditya Bakti : Bandung.
Natsir Djide, M, .Drs .2003. Bakteriologi. Fakultas MIPA Universitas Hasanuddin : Makassar.
Suriawiria (1986). Pengantar Mikrobiologi Umum. Angkasa : Bandung.