DIAGNOSA MIKROBIOLOGI

diagnosa penyakit infeksi

anamnese
gejala dan tanda
( sign and symptom )
pemeriksaan penunjang
kimia darah
radiolologik - usg - ekg - CT-Scan
mencari penyebab infeksi
pemeriksaan mikrobiologik
POSTULAT KOCH
april 2005

POSTULAT KOCH
kuman terdapat ditempat infeksi
kuman dapat disolasi dan dimurnikan
kuman murni bila diinfeksi pada hewan peka timbul gejala sama
dari kasus ini dapat diisolasi kuman yang sama
didapatkan adanya anti bodi spesifik yang makin meningkat
SAMPEL DARI PASIEN INFEKSI
ORGAN TERINFEKSI
jaringan-epitel-mukosa
pus-urin-sputum
lcs-cairan sendi dll

DARAH

SERUM

morfologi-cat

kultur

antibodi

april 2005

SAMPEL UNTUK DIAGNOSA PENYAKIT INFEKSI

ditentukan berdasar diagnosa infeksi klinik
FORMULIR PERMINTAAN-KONSULTASI
macam-jenis material
waktu pengambilan
cara pengambilan
penampungan
penyimpanan
pengiriman

PEMERIKSAAN MIKROBIOLOGI
april 2005

MACAM SAMPEL - MATERIAL

INF.SYST.PERNAFASAN
Sputum : sewaktu-pagi-tampung
( jangan salah dengan air liur )
Hapusan-swab : tenggorok-tonsil-mulut-hidung
Pungksi sinus
Bilasan bronkus
INF.SYST.PENCERNAAN

april 2005

faeses
rectal
swab
biopsi usus

INF.SYST.SALUARAN KEMIH
Urine : mid stream-kateter-pungksi supra pubis
INF.SYST.GENETALIA
Sekret genital - hapusan fornik posterior
sekret uretra - sekret masase prostat
sekret ulkus genital
INF.KULIT
Kerokan kulit - biopsi kulit
pus - sekret ulkus

april 2005

INF.SYST.SARAF
Pungsi lumbal - LCS
INF.SENDI
Pungsi sendi : cairan sendi
INF.MATA
Sekret mata - kerokan mukasa
INF.KELENJAR
Biopsi kelenjar - FNB
PANAS TINGGI - SEPSIS
darah
april 2005

WAKTU PENGAMBILAN SAMPEL

Sebelum pemberian terapi antibiotika
atau
beberapa saat sebelum pemberian antibiotika berikutnya
Pemeriksaan serologi perlu diulang
dengan selang waktu 2 minggu
Penderita sepsis - febris diambil darahnya saat panas tinggi

april 2005

CARA PENGAMBILAN
ASEPTIK
LEGEARTIS

PENAMPUNGAN
tempat steril
label lengkap
hindari kontaminasi
kontrol kesesuaian dengan formulir permintaan

KIRIM SECEPATNYA
ke laboratorium

april 2005

SIMPAN :
almari es - udara kamar
8

GERAK

DIAGNOSA MIKROBIOLOGI

PENGECATAN
sederhana
Methylen Blue
Air Fuchsin
pembeda-deferensial
Gram
Ziehl-Neelsen
khusus
Neisser
Saefer Fulton
negatip
Burri
april 2005

DNA-PCR

PENANAMAN

SEROLOGI

isolasi

aglutinasi
Tes widal

Gram positip-negatip
an aerob - jamur - virus
identifikasi
Tes biokimia
antigen-antibodi

haem aglutinasi
presipitasi

tes kepekaan
flokulasi
hitung kuman
urin - air - udara
makanan - minuman
9

PEMERIKSAAN GERAK KUMAN

GERAK KUMAN
gerak pasif

gerak sejati

Gerak palsu - gerak Brown

gerak tak teratur
arah tak tertentu
ikut aliran media cair
adanya beda potensial elektrik
antara muatan kuman
dan molekul cairan

cara gerak tertentu

arah tertentu
tak terpangaruh aliran
media cair

april 2005

disebabkan oleh
alat gerak/flagel kuman
10

PEMERIKSAAN GERAK KUMAN

BAHAN DAN ALAT

CARA KERJA

kaman yang akan diperiksa

ose bulat / pipet Pasteur
lampu Bunzen / spiritus
obyek gelas cekung / biasa
gelas penutup / deck glass
vaselin
mikroskop medan gelap

Oleskan vaselin
sekeliling pinggir gelas penutup
Teteskan larutan kuman
tepat ditengah gelas penutup

periksa dengan
PREPARAT GANTUNG
april 2005

Tutupkan obyek gelas cekung shg

cekungan tepat ditetesan kuman
Tekan pelahan-sehingga
gelas obyek dan penutup melekat
Obyek gelas dibalik sehingga
gelas penutup berada diatas
tetesan kuman menggantung
11

PENGECATAN KUMAN
TUJUAN PENGECATAN
mempelajari :
morfologi
bentuk dan susunan kuman
sifat kuman terhadap cat

DASAR PENGECATAN
perataan - perekatan
pewarnaan - pencucian
pengeringan

ANALIASA HASIL
morfologi : bulat-kokus, batang-basil, koma-vibrio, spiral-spirokaeta
spora, kapsul, granula, benda inklusi
susunan : berdua-diplo, bergerombol-stapilo, berderet-strepto
sifat terhadap cat : gram positf-negatif, tahan asam alkohol-BTA
april 2005

12

PENGGOLONGAN PENGECATAN
POSITIF

NEGATIF

ada ikatan antara cat-kuman

tidak ada ikatan dg cat

sederhana : satu bahan cat

methylen blue-air fuchsin

kuman tidak berwarna

Burri - tinta cina

konpleks : bahan cat > 1

pembeda : Gram - Z.N.
khusus : Neisser-Safer Fulton
warna / chromatic
mono - meta - poli
april 2005

13

PENGECATAN NEGATIF - BURRI

BAHAN DAN ALAT
Larutan kuman
larutan tinta cina
Ose - pipet Pasteur
dua buah Gelas obyek
Lampu spiritus
Mikrosokop

april 2005

CARA KERJA
Teteskan tinta cina diujung gelas obyek
tetskan lart.kuman disebelah tetesan tin.cin
dengan ose campur keduanya sampai rata
letakan obyek gelas kedua menyentuh
campuran larutan dengan posisi
miring membentuk sudut 45 drajat
setelah lartan melebar diujung gelas kedua
geser dengan arah kesamping
sehingga terjadi suatu hapusan larutan
keringkan diudara terbuka
setelah kering tetesi minyak emersi
periksa dengan
mikroskop perbesaran 1000 X
14

PENGECATAN SEDERHANA - METHYLEN BLUE

CARA KERJA
Ratakan
rekatkan
genangi dengan M.B. - 3 menit
sisa cat dibuang
cucui dengan air mengalir
keringkan
periksa dengan mikroskop
perbesaran 1000 X

april 2005

ANALISA HASIL

Kuman warna biru

latar belakang biru
Bentuk - susunan kuman :
batang-bulat-koma
menyebar-gerombol-berdua
berderet
Sel - bangunan lain :
epitel-lekosit

15

PENGECATAN GRAM
BAHAN - CARA KERJA

Ratakan - Rekatkan
Genangi C..G.V 3 menit
Sisa cat buang
Genangi dg Lugol 1 menit
Cuci alkohol 95%
sampai cat larut
Genangi Fuchsin 3 menit
Cuci air
Keringkan
Periksa

april 2005

ANALISA HASIL
Kuman Gram positif :
Tahan pencucian Alkohol
MERAH UNGU
Stapilokokus-Streptokokus
Clostridia-Anthraks
Kuman Gram Negatif :
Tidak tahan pencucian Alkohol
tercat dg Air Fuchsin
MERAH MUDA
Escherechia coli-Klebsiella
Pseudomonas-Vibrio
Salmonella-Enterobakter
16

PENGECATAN ZIEHL-NEELSEN
BAHAN DAN CARA KERJA
CARBOL FUCHSIN
ALKOHOL - ASAM
METHYLEN BLUE
RATAKAN-REKATKAN
GENANGI CARBOL FUCHSIN
SAMBIL PANASKAN 5 MENIT
MENGUAP-TIDAK MENDIDIH

ANALISA HASIL
TAHAN ASAM ALKOHOL
WARNA MERAH

Mycaobacterium tuberculosis
Mycobacterium leprae
TIDAK TAHAN
WARNA BIRU

CUCI ALKOHOL ASAM

CUCI AIR
GENANGI MET.BLUE 1-3 MNT
CUCI AIR
KERINGKAN
april 2005

17

april 2005

18