PROPOSAL PRAKTIKUM

TEKNOLOGI FARMASI SEDIAAN STERIL

INJEKSI DIFENHIDRAMIN HCl DALAM AMPUL
SEBAGAI ANTIHISTAMIN

Disusun oleh:
Kelompok E1-4

Shareeva Putri A.M

2013210228

Shella Yolanda S.

2013210230

Siti Fatimah

2013210235

Tri Kumala N

2013210250

Vincent Pratama

2013210259

Wildah Zakiah Nasution

2013210265

Ruri Handayani

2014212194

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS PANCASILA
JAKARTA
2016

JUDUL PRAKTIKUM
Larutan Injeksi Difenhidramin HCl dalam Ampul
I.

PENDAHULUAN
Histamin adalah sebuah protein yang menggunakan sistem kekebalan tubuh
untuk membantu melindungi sel-sel tubuh terhadap infeksi. Sistem kekebalan
tubuh adalah pertahanan alami tubuh terhadap penyakit dan infeksi.
Histamin dihasilkan oleh bakteri yang mengkontaminasi ergot.
Dihistamin juga ditemukan pada berbagai jaringan tubuh, oleh karena itu
diberi nama histamin (histos= jarigan)
Antihistamin adalah zat-zat yang dapat mengurangi atau menghalangi
efek histamin terhadap tubuh dengan jalan memblok reseptor histamin
(penghambatan saingan). Secara farmakologi reseptor histamin dapat dibagi
dalam dua tipe , yaitu reseptor-H1 da reseptor-H2.
Berdasarkan penemuan ini, antihistamin juga dapat dibagi dalam dua
kelompok, yakni antagonis reseptor-H1 (singkatnya disebut H1-blockers atau
antihistaminika) dan antagonis reseptor H2 (H2-blockers atau zat
penghambat-asam)
Difenhidaramin

adalah

turunan

etanolamin,

generasi

pertama

antihistamin. Difenhidramin memiliki aktivitas dan kegunaan sebagai

antihistamin, juga digunakan sebagai antitusive untuk meredakan batuk
sementara (Drug Information 2010 hal 17). Difenhidramin digunakan untuk
meringankan gejala dari kondisi alergi termasuk kondisi urtikaria dan
angioedema, rhinitis, dan konjungtivitis, dan pada gangguan kulit pruritic.
Difenhidramin Hidroklorida adalah turunun piperidin, merupkan antihistamin
sedatif, diberikan untuk meringankan gejala pada kondisi alergi (Martindale
edisi 36 hal. 577-578).
Diphenhidramin HCl dibuat dalam bentuk dosis tunggal dengan
wadah berupa ampul, dikarenakan

dimana zat aktif ini diharapkan

memberikan efek yang cepat pada pasien yang mengalami alergi dengan
diberikan melalui jalur parenteral. Dengan jalur parenteral, difenhidramin
HCl langsung masuk ke dalam sirkulasi sistermik, dimana melalui jalur ini
obat tidak memerlukan waktu untuk melalui sistem pencernaan (jalur oral)
sehingga obat dapat langsung memberikan efek.

Setelah pemberian parenteral, Difenhidramin HCl diabsorpsi secara

baik. Untuk mengatasi reaksi alergi, maka diharapkan obat tersebut langsung
dapat memberikan efek sehingga rasa gatal, sakit, bercak merah, dan udem
dapat langsung diatasi. Untuk dapat memberikan efek yang cepat biasanya
Difenhidramin

HCl

diberikan

secara

parenteral/injeksi.

Injeksi

Difenhidramin HCl dapat diberikan secara intravena maupun intramuskular.

Difenhidramin HCl dijadikan sediaan ampul karena ditujukan untuk
dosis tunggal hanya satu kali pakai. Difenhidramin HCl memiliki kelarutan
yang mudah larut di dalam air, sehingga dapat diformulasikan dengan zat
aditif yaitu aqua pro injeksi yang juga bersifat inert. Maka lebih baik jika
diformulasikan dengan dosis tunggal (wadah berupa ampul) agar terjaga
kestabilan dari zat aktif tersebut.
Khasiat Difenhidramin HCl selain sebagai antihistamin juga berkhasiat
sebagai :
1. Antitusif
2. Mual
3. Vertigo
4. Sindrom parkinson
Yang dipilih untuk pembuatan formula adalah Difenhidramin HCl yang
berkhasiat sebagai antihistamin. Alasan dipilih Difenhidramin HCl sebagai
antihistamin karena Difenhidramin HCl merupakan anhistaminika klasik
yang mengantagonis histamin dengan jalan memblok reseptor H1 diotot dari
dinding pembuluh, bronkus dan saluran cerna serta kandung kemih dan
rahim.

II.
DATA PREFORMULASI
a. Zat aktif
Nama

Sifat fisika kimia

Cara

Khasiat/dosis

Cara

zat aktif
Difenhidramin

Stabilitas
Pemerian:

sterilisasi
Autoklaf atau Khasiat :

penggunaan
Injeksi IV

HCl

Serbuk hablur, putih,

filtrasi

Antihistamin

atau IM

Rumus Molekul

tidak berbau

Martindale

Dosis:

C17H21NO.HCl

Kelarutan:

28 hal 131

10-50 mg

Bobot Molekul

Larut dalam air (1:1),

meskipun

291,82

dalam etanol (1:2),

dapat diberikan

Pustaka :

dalam acetone (1:50)

100 mg dan

FI V hal. 315,

dan dalam kloroform,

maksimum 400

Martindale 28th

(1:2)( Martindale

mg diberikan

hal 131,

28th hal 131)

dalam 24 jam.

USP 37 2014

pH zat aktif: 4-6,5

(Drug

hal.2655

(USP 37 2014

Information 88

hal.2655)

hal 17)

pH sediaan : 5-6
(Drug Information 88
hal 16)
Stabilitas:
Difenhidramin

HCl

harus terlindung dari

cahaya,

di

ruang

dalam
yang

temperaturnya terjaga
(25-30OC)
(Drug Information 88
hal 16)
OTT
Amphotericin,

cephalotion sodium,
pentobarbitone
sodium,
phenobarbitone
sodium,
quinalbarbitone
sodium, thiopentone
sodium dan
hydrocortisone
sodium succinate.
Penyimpanan
Dalam wadah dosis
tunggal terlindung
dari cahaya
b. Zat aditif
Fungsi zat

Nama zat

aditif
Zat pembawa

Aqua pro

injeksi

injeksi

Sifat fisika
kimia
Pemerian:

Konsentra

Cara

si
-

sterilisasi
-

Alasan
pemilihan
Bersifat inert

Cairan jernih

sehingga tidak

tidak berwarna,

akan

Pustaka :

tidak berbau,

mempengaruhi

(FI III hal.97,

tidak berasa

zat lain.

FI IV hal 112

c. Teknologi Sediaan Farmasi

Produk steril adalah sediaan terapetis dalam bentuk terbagi-bagi yang
bebas dari mikroorganisme hidup. Sediaan parenteral merupakan sediaan
diantara bentuk obat terbagi-bagi, sediaan ini disuntikkan melalui kulit atau
membran mukosa ke bagian dalam tubuh maka sediaan tersebut harus bebas

dari kontaminasi mikroba dan dari komponen toksik serta harus mempunyai
tingkat kemurnian tinggi. Semua komponen dan proses yang terlibat dalam
penyediaan produk ini harus dipilih dan dirancang untuk menghilangkan
semua jenis kontaminasi secara fisik, kimia atau mikrobiologi. (lachman, hal
1292).
Sterilisasi adalah proses yang dirancang untuk menciptakan keadaan
steril. Secara tradisional keadaan steril adalah kondisi mutlak yang tercipta
sebagai akibat penghancuran dan penghilangan semua mikroorganisme hidup.
Produk steril adalah sediaan terapetis dalam bentuk terbagi-bagi yang bebas
dari mikroorganisme hidup. Pada prinsipnya ini termasuk sediaan parenteral,
mata dan irigasi. (Lachman ed 3 hal 1292)
Injeksi merupakan terapi parenteral. Terapi parenteral memiliki beberapa
keuntungan

penting

dibandingkan

enteral.

Sejak

pemilihan

tempat

pemakaiannya, dapat ditetapkan saat muncul dan lamanya efek. Pada

umumnya pemberian dengan cara parenteral dilakukan bila diinginkan kerja
obat yang cepat seperti pada keadaan gawat dan bila penderita tidak dapat
diajak bekerja sama dengan baik, tidak sadar, tidak dapat atau tidak tahan
menerima pengobatan melalui mulut (oral) atau bila obat itu sendiri tidak
efektif terhadap pemberian dengan cara lain. Injeksi diracik dengan
melarutkan, mengemulsikan atau mensuspensikan sejumlah obat kedalam
wadah dosis tunggal atau wadah dosis ganda. (Farmakope Indonesia Edisi III
hal. 13)
Persyaratan bagi larutan injeksi :
-

Sesuainya kandungan bahan obat yang dinyatakan di dalam etiket dan

yang ada dalam sediaan, tidak terjadi penggunaan efek selama
penyimpanan akibat perusakan obat secara kimia dan sebagainya.

Penggunaan wadah yang cocok, yang tidak hanya memungkinkan

sediaan tetap steril tetapi juga mencegah terjadinya antar aksi antar
bahan obat dan material dinding wadah.

Tersatukan tanpa terjadinya reaksi. Untuk itu beberapa faktor yang

paling menentukan: bebas kuman, bebas pirogen, bebas pelarut yang
secara fisiologis, isotonis, dan bebas bahan melayang.

Penggunaan injeksi intravena tidak boleh mengandung bakterisida dan

jika lebih dari 10 mL harus bebas pirogen.
Ampul adalah wadah berbentuk silindris yang terbuat dari gelas yang

memiliki ujung runcing (leher) dan bidang dasar datar. Ukuran nominalnya
adalah 1, 2, 5, 10, 20, kadang-kadang juga 25 atau 30 ml. Ampul adalah
wadah takaran tunggal oleh karena total jumlah cairannya ditentukan oleh
pemakaiaannya yaitu untuk 1 kali injeksi. (R.Voight hal 464).
Dipilih rute pemberian secara intravena dikarenakan pemberian secara
intravena menghasilkan efek yang lebih cepat dibandingkan dengan
pemberian secara intramuskular. Hal tersebut diharapkan memberikan respon
yang cepat mengingat gejala yang ditimbulkan alergi sangat tidak
menyenangkan, sehingga diperlukan efek yang cepat. Selain itu, rute
pemberian melalui intravena tidak mengalami first pass metabolisme di hati.
Dipilih

volume

ampul

sebanyak

ml

dikarenakan

kelarutan

Difenhidramin HCl yang sangat mudah larut dalam air (1 g larut dalam 1 ml
air) sehingga tidak diperlukan jumlah pelarut yang terlalu banyak.
Dipilih dosis Difenhidramin HCl sebesar 10 mg yang merupakan dosis
terendah dari Difenhidramin HCl dalam penggunaan parenteral (Dosis untuk
parenteral 10-50 mg) dikarenakan dengan dosis yang terendah pun
Difenhidramin sudah dapat memberikan efek sebagai antihistamin.

1. Formula Dasar Ampul

Keuntungan sediaan parenteral: (Sediaaan Farmasi Seril Goeswin Agoes
hal 12)

a. Terapi parenteral diperlukan untuk obat yang tidak efektif idak secara
oral atau akan rusak oleh sekresi saluran cerna seperti insulin, hormon
lain dan antibiotika.
b. Pengobatan untuk pasien yang tidak koperatif atau tidak sadar harus
diberikan melalui injeksi.
c. Permberian obat secara parental dapat pula memberikan efek local jika
diperlukan.
Syarat-syarat sediaan parental: (Sediaan Farmasi Steril Goeswin Agoes
hal 15)
a. Aman secara toksikologi.
b. Steril, bebas dari kontaminasi mikroorganisme, baik bentuk
vegetatif, patogen, spora dan non patogen
c. Bebas dari kontaminasi pirogen.
d. Bebas dari partikel partikulat asing.
e. Stabil, tidak hanya secara fisika dan kimia, tapi juga secara
mikrobiologi.
Pemberian obat secara intravena menghasilkan kerja obat yang cepat
dibandingkan dengan cara-cara pemberian lain dan karena absopsi obat
tidak menjadi masalah, maka tingkatan darah optimum dapat dicapai
dengan ketetapan dan kesegaran yang tidak mungkin didapat dengan caracara lain. Pada keadaan gawat, pemberian obat-obat ntravena dapat
menjad cara yang menyelamtkan hidup karena penempatan obat langsung
kesirkulasi darah dan kerja obat yang cepat terjadi. Sebaliknya, sekali obat
diberikan leat intravena maka obat itu tidak dapat ditarik lagi, ini
merupakan keburukan obat lewat intravena.

2. Latar Belakang Penetapan Formula

Difenhidramin HCl merupakan antihistamin yang bekerja menekan
system depresi saraf pusat, banyak digunakan dalam keadaan darurat
yang membutuhkan respon farmakologis yang lebih cepat. Pemilihan
bentuk sediaan difenhidramin sebagai injeksi dikarenakan dengan bentuk
injeksi, obat akan lebih cepat memberikan respon farmakologis, karena

obat langsung masuk ke dalam aliran darah dan tidak melalui proses
metabolisme di saluran pencernaan.
Difenhidramin memiliki kelarutan mudah larut dalam air, sehingga
cukup dengan menggunakan air difenhidramin dapat larut dengan baik.
Pada formula tidak digunakan bahan tambahan berupa pengawet karena
sediaan injeksi dalam ampul merupakan dosis tunggal yang digunakan
sekali pakai. Difenhiframin stabil pada pH yang netral dan menggunakan
pelarut air yang memiliki Ph netral, sehingga tidak membutuhkan dapar
dalam formulasinya.
3. Farmakologi
Difenhidramin HCl termasuk antihistamin golongan etanolamin
yang mempunyai khasiat antara lain dapat berefek sebagai antihistamin
yaitu dapat mengatasi reaksi alergi, berefek sedatif yang dapat
menguntungkan bagi pasien yang dirawat di Rumah Sakit ataupun pasien
yang perlu banyak tidur, berefek sebagai antikolinergik dan juga
antiemetik. Disamping itu difenhidramin HCl dapat mengatasi paralisis
agitans, mengurangi rigiditas dan memperbaiki kelainan pergerakan.
Setelah pemberian oral atau parenteral, difenhidramin HCl
diabsorpsi secara baik. Untuk mengatasi reaksi alergi, maka diharapkan
obat tersebut langsung dapat memberikan efek sehingga rasa gatal, sakit,
bercak merah, dan udem dapat langsung diatasi. Untuk dapat memberikan
efek yang cepat biasanya diphenhidramin HCl diberikan secara
parenteral/injeksi. Injeksi diphenhidramin HCl dapat diberikan secara
intravena maupun intramuskular.

a. Farmakodinamik
Difenhidramin ini memblokir aksi histamin, yaitu suatu zat dalam tubuh
yang menyebabkan gejala alergi. Difenhidramin menghambat pelepasan
histamin (H1) dan asetilkolin (menghilangkan ingus saat flu). Hal ini
memberi efek seperti peningkatan kontraksi otot polos vaskular, sehingga
mengurangi kemerahan, hipertermia dan edema yang terjadi selama reaksi

peradangan. Difenhidramin menghalangi reseptor H1 pada perifer

nociceptors sehingga mengurangi sensitisasi dan akibatnya dapat
mengurangi gatal yang berhubungan dengan reaksi alergi. Memberikan
respon yang menyebabkan efek fisiologis primer atau sekunder atau
kedua-duanya. Efek primer untuk mengatasi gejala-gejala alergi dan
penekanan susunan saraf pusat (efek sekunder).
b. Farmakokinetik (Drug Information 88 hal. 16 dan Martindale 36th
hal 577)
Adsorpsi
Difenhidramin diabsorbsi baik pada saluran pencernaan meskipun
first pass effeknya tinggi yang mempengaruhi sistem availabilitasnya.
Konsentrasi peak plasma pada dosis oral mencapai 1 sampai 4
jam.Injeksi iv dari 50 mg dosis mg dosis tunggal lebih dari 1 menit pada
orang dewasa yang sehat, konsentrasi plasma 1 jam setelah injeksi antara
dari 99-196 ng/mL. Pada efek antihistamin sebagaimana ditentukan dari
tekanan yang diinduksi oleh hisamin injeksi transdermal tampak efek
maksimal sekitar 1-3 jam dan mungkin setelah 7 jam admistrasi dari
dosis tunggal obat dan tampak selaras dengan hubungan dengan dosis
obat tunggal. Pada efek sedatif memberikan efek 1-3 jam setelah
admistrasi dan konsentasi dalam plasma 70 ng/mL atau lebih.
Distribusi
Distribusi dari difenhidramin HCl ke jaringan manusia dan cairan
tidak semuanya telah dikarakterisasi. Difenhidramin terdistribusi
menyeluruh ke dalam tubuh termasuk pada sistem saraf pusat. Zat ini
juga mampu melewati membran plasenta dan dideteksi di dalam ASI.
Pada iv administrasi konsentrasi tinggi obat didapat pada paru-paru,
limpa dan otak sedangakan pada konsentrasi rendah ada pada jantung,
otot dan hati. Pada iv difenhidramin HCl volume distribusi pada orang
dewasa sekitar 188-336 L.
Metabolisme
Difenhidramin HCl pada prinsipnya dimetabolisme menjadi asam
diphenylmethoxyacetic yang lebih lanjut mengalami konjugasi. Obat
juga dialkilasi dari N-dimethyl dan N,N-didemethyl derivative.
Difenhidramin juga dikeluarkan di urin. Sekitar 50-75% dari dosis

dikeluarkan oleh urin setelah 4 hari dan metabolismenya komplit.

Kebanyakkan urin dikeluarkan pertama antara 24-48 jam hanya sekitar
1% dari dosis tunggal oral tidak dikeluarkan di urin.
Eliminasi
Waktu paruh dari eliminasi difenhidramin HCl sekitar 2,4-9,3 jam
pada orang dewasa. Waktu paruh eliminasi diperpanjang pada orang
dewasa pada sirosis hati.
III.

FORMULA
1. Formula Dasar (Handbook of Injectable Drugs 10th Edition hal.
399)
Tiap mL mengandung:
Difenhidramin HCl
50 mg/ml
Aqua pro injection
ad 1 mL
2. Rencana Formula (Drug Information 88 hal.17)
Tiap mL mengandung:
Difenhidramin HCl
10 mg
Aqua pro injection
ad 1 mL
RANCANGAN FORMULA (Drug Information 88 hal.17)
Latar belakang penetapan formula
1) Difenhidramin HCl
Difenhidramin HCl berfungsi sebagai penekan batuk dan mempunyai
efek antihistamin (antialergi) dan mempunyai manfaat mengurangi
batuk kronik pada bronkitis. Memiliki efek samping yaitu pengaruh
pada kardiovaskular dan SSP seperti sedasi, sakit kepala, gangguan
psikomotor, gangguan darah, gangguan saluran cerna, reaksi alergi,
efek antimuskarinik seperti retensi urin, mulut kering, pandangan
kabur dan gangguan saluran cerna, palpitasi dan aritmia, hipotensi,
reaksi hipersensitivitas, ruam kulit, reaksifotosensitivitas, efek
ekstrapiramidal,

bingung,

depresi,

gangguan

tidur,

tremor,

konvulsi,berkeringat dingin, mialgia, paraestesia, kelainan darah,

disfungsi hepar, dan rambut rontok.
3. Formula Jadi
Tiap mg mengandung:
Difendhidramin HCl
Aqua pro injectio
IV.

ALAT dan BAHAN

10 mg
ad 1 ml

a. Alat:

b. Bahan:

1. Beaker glass

1. Difenhidramin HCl

2. Erlenmayer

2. Aqua Pro Injection

3. Corong glass
4. Ampul 1 mL
5. Kertas saring
6. Gelas ukur
7. Batang pengaduk
8. Spatula
9. Pinset
10. Kaca arloji
11. Pipet tetes
12. Penjepit besi
V.

PEMBUATAN
a. Perhitungan
Rumus Perhitungan volume
V = ((n+2) v + (2x3)) mL
Keterangan n
v

= jumlah ampul
= volume ampul + kelebihan volume

2x3 ml = untuk pembilasan

Volume

= ((n+2) v + (2x3)) mL
= [(10+2) x(1+ 0,1 mL) + (2x3)] mL

= [12 x 1,10 + 6] mL
= 19,2 ml 19,5 ml
Total Difenhidramin HCl = 19,5 mL
1 mL
= 195 mg
a. Penimbangan
Difenhidramin HCl = 19,5 mL x 10 mg
1 ml
= 195 mg

x 10 mg

Aqua p.i ad 19,5 mL

Data Penimbangan Teoritis
Bahan
Difenhidramin HCl
Aqua p.i

Bobot Teoritis
195 mg
Ad 19,5 mL

b. Cara Kerja
Prinsip: sterilisasi akhir dengan autoklaf
1.
2.

Disiapkan alat-alat yang akan digunakan lalu cuci bersih

Disterilkan alat dan wadah dengan cara sterilisasi yang sesuai untuk

3.
4.

masing-masing alat.
Dikalibrasi beaker glass ad 19,5 mL dan ampul 1,1 mL
Buat aqua pi dengan cara :
- Aquadest disaring dengan kertas saring lalu masukkan ke dalam
erlenmeyer
- Tutup erlenmeyer dengan sumbat kasa lalu didihkan selama 30

menit dihitung setelah mendidih

- Didinginkan
5. Ditimbang Difenhidramin HCl sebanyak 195 mg menggunakan kaca
6.

arloji
Dilarutkan Difenhidramin HCl dengan aqua pi, sampai mendekati

7.

tanda kalibrasi, diaduk ad homogen.

Dilakukan evaluasi IPC yaitu cek pH larutan {sekitar 5-6 (Drug

8.
9.

Information 88 hal 16)}, uji kejernihan dan uji keseragamn volume.

Ditambahkan aqua pi ad tanda kalibrasi, diaduk ad homogen.
Dimasukkan larutan tersebut masing-masing 1,1 ml ke dalam ampul
dengan menggunakan buret yang telah dibilas terlebih dahulu.

(dispensasi syring)
10. Ditutup ampul dengan menggunakan alat Rotary Sealing Ampoule
Cara tarikan yang merupakan cara terbaik yaitu dengan semburan
nyala api, diarahkan pada bagian tengah leher ampul. Setelah gelas
melunak, bagian atas leher dijepit dengan menggunakan sebuah pinset
(pada kerja manual) atau dilakukan dengan alat khusus (masinel)
kemudian ditarik keatas sehingga ampul dapat ditutup. (Voight hal
460-470).
11. Dilakukan sterilisasi dengan menggunakan autoklaf 121oC selama 15
menit.

12. Dilakukan

evaluasi

QC

yaitu

uji

sterilitas,

uji

kejernihan,

keseragaman volume, dan uji kebocoran.

13. Diberi etiket dan dimasukkan ampul ke dalam kemasan.
c. Sterilisasi
Alat yang digunakan
Erlenmeyer,

Cara Sterilisasi

gelas Oven 150C

Waktu

Literatur

1 jam

FI III hal 18

15 menit

FI III hal 18

30 menit

Disinfection

piala, corong, ampul,

pipet tetes
Gelas ukur,

kertas Autoklaf 121C

saring
Batang pengaduk, kaca Alkohol
arloji, pinset, spatula,

sterilitation

penjepit besi

and
preseruation
vol

Karet pipet tetes

Didihkan

dalam 15 menit

hal

225
FI III hal 18

aquadest
Sediaan akhir ampul

Autoklaf 121C

15 menit

Martindle
28 hal 1311

VIII. EVALUASI
a.

In Process Control
1. Uji Kejernihan ( Lachman III, hal 1356 )
Pengamatan secara visual dengan menggunakan latar hitam-putih, harus
bebas dari partikel kecil yang dapat dilihat dengan mata, yaitu partikel
yang berukuran 30-40 m
2. Uji pH ( FI ed IV, hal 1039-1040)
Cara :
Penetapan pH sediaan menggunkan alat pH meter. Sebelum digunakan
pH meter dibakukan dahulu dengan larutan dapar air, kemudian
digunakan untuk mengukur pH larutan. Keasaman dapat diukur

saksama menggunkaan elektroda dan instrumen yang dibakukan

menggunakan pH universal.
Syarat : pH 5 6 (injectable drugs 14th ed hal 535)
b. Quality Control
1.Uji Kejernihan ( Lachman III, hal 1356 )
Pengamatan secara visual dengan menggunakan latar hitam-putih, harus
bebas dari partikel kecil yang dapat dilihat dengan mata, yaitu partikel
yang berukuran 30-40 m.
2. Uji Keseragaman Volume ( FI IV hal.1044 )
Pilih 1 atau lebih wadah bila volume 10 ml. Ambil isi tiap wadah
dengan alat suntik hipodemik kering berukuran tidak lebih dari 3 kali
volume yang akan diukur dan dilengkapi dengan jarum suntik No.21,
panjang tidak kurang dari 2,5m.

Keluarkan gelembung udara dari jarum dan alat suntik.

Pindahkan isi dalam alat suntik tanpa mengosongkan bagian jarum
kedalam gelas ukur kering volume tertentu yang telah dibakukan
sehingga volume yang diukur memenuhi sekurang-kurangnya 40 %
volume dari kapasitas yang tertera.
Cara II :
Isi alat suntik dapat dipindahkan kedalam gelas piala yang telah
ditara, volume dalam ml diperoleh dari hasil perhitungan berat dalam
gram dibagi bobot jenis cairan. Isi dari 2/3 wadah 1 ml/ 2 ml dapat
digabungkan untuk pengukuran dengan menggunakan jarum suntik
kering terpisah untuk mengambil isi tiap wadah.
Isi dari wadah 10 ml dapat ditentukan dengan membuka wadah,
memindahkan isi secara langsung ke dalam gelas ukur/ gelas piala
yang telah ditara.
3. Uji Kebocoran ( Lachman III hal.1354 )

Ampul dimasukkan ke dalam larutan zat warna, jika terjadi

kontaminasi warna maka membuktikan terjadinya kebocoran pada
ampul

Masukkan ampul dengan posisi terbalik pada beaker glass yang

beralaskan kapas, kemudian lakukan sterilisasi. Jika kapasnya basah
atau volume ampul berkurang, maka terjadi kebocoran pada ampul

4. Uji Sterilitas Langsung (FI IV hal 856)

Menggunakan media tioglikolat cair dengan cara campur dan panaskan
hingga larut. Atur pH larutan hingga setelah sterilisasi 7,10,2
menggunakan NaOH 1N. Jika perlu saring selagi panas menggunakan
kertas saring. Tempatkan media dalam tabung yang sesuai, yang
memberikan

perbandingan

permukaan

dengan

kedalaman

media

sedemikian rupa sehingga tidak lebih dari setengah bagian atas media yang
mengalami perubahan warna sebagai indikasi masuknya oksigen pada
akhir masa inkubasi. Sterilisasi dalam autoklaf. Jika lebih dari sepertiga
bagian atas terjadi warna merah muda, media dapat diperbaiki satu kali
dengan pemanasan di atas tangas air atau dalam uap yang mengalir bebas
hingga warna merah muda hilang. Media siap digunakan jika tidak lebih
dari sepersepuluh bagian atas media berwarna merah muda. Gunakan
media tioglikolat cair untuk inkubasi dalam kondisi aerob.