Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016

HITUNG JUMLAH KOLONI JAMUR DAN IDENTIFIKASI JAMUR PADA

SPUTUM PENDERITA TUBERKULOSIS PARU DARI RUMAH SAKIT X DAN Y
DI JAKARTA
Lenggo Geni1, Zuraida2,Vivi Violita3

1
Prodi D III Analis Kesehatan Universitas MH Thamrin
Alamat Korespondensi
Prodi D III Analis Kesehatan Universitas MH Thamrin
Jl.Raya Pondok Gede no.23-25 Kramat Jati, Jakarta Timur

ABSTRAK

Infeksi jamur pada penderita TB paru merupakan infeksi sekunder yang disebabkan karena terdapatnya kelainan atau
kerusakan jaringan paru pada penderita TB paru berupa kavitas, bronkiektasis, destroyed lung dan sebagainya. Selain
itu, pemakaian antibiotik secara luas juga akan menekan flora normal sehingga pertumbuhan jamur oportunistik tidak
terhambat. Tujuan umum penelitian ini adalah mengetahui keberadaan jamur pada sampel sputum penderita TB paru.
Sedangkan tujuan khusus dari penelitian ini adalah mengetahui prosentase jamur, jumlah koloni jamur dan jenis jamur
yang terdapat pada sampel sputum penderita TB paru.

Sampel yang digunakan yaitu sputum penderita TB paru (BTA +) dengan jumlah seluruh sampel ada 84 sampel.
Kemudian dilakukan pemeriksaan langsung dan biakan dengan media Sabouraud Dextrose Agar (SDA +), untuk
melihat jumlah koloni jamur dan spesies jamur yang terdapat dalam sampel.

Hasil pemeriksaan dari 84 sampel sputum penderita TB paru (BTA +) didapatkan sebanyak 79 sampel (94%) positif
tumbuh jamur pada biakan. Hasil hitung jumlah koloni jamur terbanyak yang ditemukan yaitu jamur khamir dengan
jumlah koloni <100 koloni/ml sebanyak 52 sampel (69,3%), sedangkan jumlah koloni jamur kapang dengan jumah
koloni <2 koloni/ml sebanyak 19 sampel (48,7%). Adapun hasil identifikasi jamur yang terdapat pada sampel yaitu
Non Candida albicans sebesar 37 (29,3%), Candida albicans sebesar 39 (30,9%), Aspergillus fumigatus sebesar 19
(15,2%), Aspergillus flavus sebesar 18 (14,2%), Aspergillus niger sebesar 9 (7,2%) dan Rhizopus sp sebesar 4 (3,2%).

Kata Kunci : TB Paru, Koloni Jamur

PENDAHULUAN jamur paru dari berbagai cara pengambilan spesimen

Tuberkulosis (TB) paru adalah penyakit radang
parenkim paru karena infeksi Mycobacterium
tuberculosis. Tuberkulosis paru mencakup 80% dari
keseluruhan kejadian penyakit tuberkulosis, sedangkan
20% selebihnya merupakan tuberkulosis ekstrapulmonar
(Djojodibroto, 2007 : 151).
World Health Organization (WHO) memperkirakan
bahwa sepertiga dari penduduk dunia (lebih dari 2 miliar
orang) terinfeksi TB. Setiap tahun, delapan juta orang
menderita TB dan 95% dari mereka berada di negara
berkembang, India, Cina dan Indonesia mencapai
setengah dari kasus (Narain, Pontali, dan Tripathy, 2002 :
3).
Di Indonesia, TB merupakan masalah utama
kesehatan masyarakat. Jumlah pasien TB di Indonesia
merupakan ke-3 terbanyak di dunia setelah India dan
Cina dengan jumlah pasien sekitar 10% dari total jumlah
pasien TB di dunia. Diperkirakan pada tahun 2004, setiap
tahun ada 539.000 kasus baru dan kematian 101.000
orang. Insidensi kasus TB Basil Tahan Asam (BTA)
positif sekitar 110 per 100.000 penduduk (Depkes RI,
2007 : 4), masih tingginya kekerapan tuberkulosis paru di
Indonesia merupakan salah satu penyebab tingginya
infeksi jamur paru di Indonesia.Penelitian yang dilakukan
di Unit Pelayanan Fungsional (UPF) Paru RS
Persahabatan Jakarta dengan melakukan pemeriksaan
terhadap penderita penyakit paru yang dicurigai
terinfeksi jamur paru didapatkan 82,1% positif jamur.
Kebanyakan yang positif adalah penderita TB paru
(67,8%) baik TB yang masih aktif maupun sudah tidak
aktif lagi (Sukamto, 2004 : 15).
Penelitian konfirmasi TB di sepuluh laboratorium
kabupaten Washim, Maharashtra, India, sampel yang
digunakan untuk analisis jamur adalah sampel sputum
penderita TB kronis dan penderita bergejala (non TB).
Hasilnya penderita tuberkulosis paru yaitu 500 penderita
dan 203 diantaranya menderita infeksi mikotik.
Persentase infeksi mikotik pada penderita TB paru adalah
46% (Bansod dan Rai, 2008 : 74).
Infeksi mikotik dari 200 sampel sputum positif
penderita TB paru ditemukan 160 Aspergillus fumigatus,
55 Aspergillus niger, 182 Cryptococcus neoformans, dan
163 Histoplasma capsulatum. Sedangkan infeksi mikotik
dalam 50 sampel sputum penderita gejala TB paru
ditemukan 8 Aspergillus fumigatus, 5 Aspergillus niger, 6
Cryptococcus neoformans, dan 4 Histoplasma
capsulatum (Bansod dan Rai, 2008 : 78).
Di Indonesia data angka kejadian penyakit jamur
paru belum ada hanya beberapa laporan mengenai infeksi
jamur paru telah dilaporkan. Namun demikian adanya
kecenderungan peningkatan kekerapan penyakit jamur
paru akibat berbagai situasi di Indonesia harus
37
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
diantisipasi berdasarkan masih tingginya kekerapan TB
paru yang dengan obat anti tuberkulosa dapat
disembuhkan namun meninggalkan lesi sisa seperti
kavitas, bronkiektasis, destroyed lung, dan sebagainya
(Sukamto, 2004 : 5).
Jamur terdapat dimana-mana dan pajanan terhadap
saluran nafas sulit dihindarkan sehingga paru merupakan
salah satu target infeksi oleh jamur. Kelompok jamur
oportunistik hanya menginfeksi pejamu dengan gangguan
pada sistem imun atau terdapat faktor predisposisi. Pada
keadaan normal spora jamur oportunistik sulit
menginvasi mukosa saluran nafas. Pada pasien dengan
immunocompromissed, spora yang terinhalasi dan
berkolonisasi akan menginvasi jaringan paru dan
berkembang sehingga mengakibatkan kerusakan jaringan
paru dan menimbulkan gejala klinis
(http://www.klikparu. com/2013/02/ jamur-paru.html).
Gejala umum infeksi jamur paru sama dengan
infeksi mikroba lainnya, antara lain batuk-batuk, batuk
darah, banyak dahak, sesak, demam, nyeri dada dan bisa
juga tanpa gejala. Pada penderita TB paru dengan defek
anatomi paru disertai pemberian obat anti tuberkulosa
dalam waktu lama akan menekan flora normal sehingga
pertumbuhan jamur oportunistik tidak terhambat
(Sukamto, 2004 : 1 dan 7).
Infeksi jamur paru sering menyertai penyakit lain dan
tidak ada gejala yang khas sehingga infeksi jamur sering
tidak terdiagnosa dan keberadaan jamur dalam paru pun
tidak diketahui, untuk itu pemeriksaan laboratorium
sangat penting dengan mengidentifikasi adanya jamur
pada sampel sputum dan hitung jumlah koloni jamur
untuk melihat apakah jamur hanya merupakan flora
normal ataukah penyebab terjadinya infeksi pada paru.
Adapun Tujuan Penelitian untuk Mengetahui
keberadaan jamur pada sampel sputum penderita
tuberkulosis paru.
TINJAUAN TEORITIS
1. Dahak
Dahak yang mungkin disertai lendir, nanah atau
mengandung darah.
2. Sakit dada
Kadang-kadang hanya berupa nyeri yang ringan,
kadang-kadang lebih sakit sewaktu menarik napas
dalam.
3. Sesak napas
Disebabkan oleh penyakit yang luas pada paru atau
oleh pengumpulan cairan di rongga pleura sebagai
komplikasi tuberkulosis paru.
4. Mengi (Wheezing) lokal
Kadang-kadang terdengar mengi (wheeze) setempat
pada pasien. Ini disebabkan bronkitis TB atau akibat
tekanan kelenjar getah bening pada bronkus.
Diagnosis sementara tuberkulosis dapat dilakukan
dengan mengamati adanya batang tahan asam pada
olesan dahak, cairan pleura, air seni, atau fluida tulang
belakang. Namun diagnosis yang pasti bergantung
kepada terisolasinya dan teridentifikasinya basilus yang
bersangkutan dari penderita. Ini dapat dilakukan dengan
menginokulasikan bahan sampel pada media biakan yang
sesuai (Pelczar dan Chan, 2009 : 661).
Tingginya penularan dan infeksi TB paru berkaitan
dengan beberapa faktor determinan, diantaranya faktor
lingkungan (tempat tinggal dan pekerjaan), karakteristik
individu (umur, jenis kelamin, status gizi), perilaku
(kebiasaan merokok, pengetahuan, pendidikan), dan
adanya riwayat penyakit Diabetes Melitus (DM) dan
penyakit Acquired Immuno Deficiency Syndrome (AIDS)
(Misnadiarly dan Sunarno, 2009 : 57 dan 62).
Mikosis Sistemik
Mikosis sistemik atau mikosis dalam merupakan
penyakit yang terutama disebabkan oleh jamur seringkali
parah atau mematikan, organisme penyebabnya
menyerang jaringan di bawah kulit atau paru-paru, dari
situ lalu dapat menyebar ke organ-organ lain dalam
tubuh, kemudian menetap dan menimbulkan penyakit
(Pelczar dan Chan, 2009 : 674).
Penyebab mikosis dalam ialah jamur patogen atau
jamur saprofit yang menjadi patogen karena adanya
faktor predisposisi atau terdapat gangguan sistem imun
(pasien dalam keadaan immunocompromissed)
(Sjarifuddin dan Susilo dalam Gandahusada, Ilahude, dan
Pribadi, 1998 : 296).
Menurut Pelczar dan Chan (2009:674), faktor-faktor
yang mempengaruhi seseorang menjadi lebih rentan
terhadap infeksi jamur sistemik ialah :
1. Adanya penyakit kronis yang melemahkan seperti
kanker, diabetes, leukemia, dan TBC.
2. Penggunaan obat-obatan baru seperti antibiotik dan
hormon, yang menyebabkan perubahan metabolisme
tubuh atau mengganggu hubungan normal di antara
organisme pada atau dalam tubuh.
3. Luka setempat yang disebabkan oleh kekurangan
vitamin, iradiasi, atau faktor lain yang memungkinkan
masuknya jamur ke jaringan sebelah dalam.
Jamur Penyebab Mikosis Paru
1. Jamur patogen sistemik
Jamur ini dapat menginvasi dan berkembang pada
jaringan host normal tanpa adanya predisposisi.
Prevalensi infeksi jamur patogen sistemik ini lebih
rendah dibandingkan infeksi jamur oportunistik.
Menurut Sukamto (2004 : 2), beberapa jamur
patogen yang dapat menginfeksi paru adalah
Histoplasmosis, Koksidioidomikosis,
Parakoksidioidomikosis, Blastomikosis, dan
Kriptokokosis.
2. Jamur oportunistik
Organisme oportunistik artinya dalam keadaan
normal sifatnya non pathogen tetapi dapat berubah
menjadi patogen bila keadaan tubuh melemah, dimana
mekanisme pertahanan tubuh terganggu. Menurut
Sukamto (2004:2), infeksi jamur paru yang disebabkan
jamur oportunistik adalah kandidiasis dan aspergilosis.
Edward Ringel (2012 : 314) juga menyebutkan bahwa
mukormikosis juga termasuk infeksi jamur yang
disebabkan jamur oportunistik.
38
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
Keberadaan Jamur pada Penderita TB Paru 3. Berdasarkan buku Besar Sampel dan Cara
Infeksi jamur paru dapat sebagai infeksi primer Pengambilan Sampel dalam Penelitian Kedokteran
maupun sekunder. Timbulnya infeksi sekunder pada paru dan Kesehatan (Dahlan, 2009 : 39), cara perhitungan
disebabkan terdapatnya kelainan atau kerusakan jaringan besar sampel yang dipakai dalam penelitian ini
paru seperti pada penderita TB paru berupa kavitas, adalah:
bronkiektasis, destroyed lung, dan sebagainya (Sukamto,
2004:1). 𝑍 ∝2 × 𝑃 × 𝑄
𝑁=
Selain itu, pemakaian antibiotik dalam pengobatan 𝑑2
2
TB paru di satu sisi bermanfaat dalam terapi namun juga 1,96 × 0,678 × 0,322
menimbulkan pertumbuhan jamur saprofit dalam tubuh 𝑁= = 84
0,102
manusia. Faktor predisposisi yang lain adalah dengan
pemakaian kortikosteroid lama, TB paru dengan lesi Keterangan : N : Besar sampel
kavitas, meningkatnya angka harapan hidup, Zα2 :Derajat kepercayaan 95% (1,96)
penggunaan obat imunosupresif dan sitostatika serta P : Prevalensi (67,8%)
meningkatnya jumlah pasien HIV/AIDS Q : 1-P
(http://www.klikparu.com/2013/02/ jamur-paru.html). d : Presisi (10%)
Diagnosis Laboratorium Teknik Pengumpulan Data
Pemeriksaan laboratorium untuk diagnostik jamur Teknik pengumpulan data dilakukan dengan cara
paru dapat pula dilakukan dengan pemeriksaan spesimen pengumpulan data primer, dengan langkah-langkah
dahak. Dahak dikeluarkan oleh penderita setelah sebagai berikut :
sebelumnya berkumur-kumur dengan air bersih berkali- 1) Mendapatkan sampel sputum penderita TB paru
kali untuk menyingkirkan kontaminan Candida yang dengan hasil BTA +/positif dari Rumah Sakit X dan Y
hidup komensal di mulut dan rongga pipi. Tanpa di Jakarta dalam kurun waktu 14 hari kerja.
pengawet dahak dikirim secepatnya untuk pemeriksaan. 2) Setelah sampel sputum didapatkan, kemudian
Dengan pemeriksaan langsung di bawah mikroskop diperiksa secara langsung dengan KOH 10% dan
biasanya dapat dikenali dan nampak spora, hifa dan dibiakkan dalam media SDA (+).
blastospora. Pengenalan akan lebih mudah dan jelas bila 3) Koloni jamur yang tumbuh dihitung dan
dilakukan penetesan sediaan dengan KOH 20%, ataupun diidentifikasi.
dibuat sediaan apus dengan pewarnaan Giemsa 4) Hasil pemeriksaan mikroskopis dan biakan ditabulasi
(Sukamto, 2004). dan dihitung prosentasenya.
Mengisolasi jamur dapat dilakukan dengan membuat
biakan pada medium agar Sabouraud Dekstrosa dengan Instrumen Penelitian
ditambahkan antibiotik untuk menekan pertumbuhan 1. Alat-alat :
kuman (Susilo, 1998 : 317). a. Cawan petri
Menurut Sukamto (2004 : 12), secara umum diagnosis b. Kaca objek
jamur paru ditegakkan melalui : c. Kaca penutup
1. Kecurigaan yang tinggi terhadap kemungkinan infeksi d. Ose jarum
jamur di paru. e. Batang pengaduk Pipet tetes
2. Pemeriksaan diagnostik yang lazim terhadap penyakit f. Api bunsen
paru : g. Korek api
a. Foto toraks Postero Anterior (PA) dan lateral, h. Kompor listrik
Computerised Tomography (CT) Scan toraks i. Labu Erlenmeyer
b. Sputum: mikroskopis jamur dan kultur j. Kapas
c. Bronkoskopi: sekret bronkus, bilasan bronkus k. Mikroskop
3. Pemeriksaan kultur darah dan pemeriksaan serologi. l. Autoclave
m. Inkubator
METODE 2. Bahan :
Tempat dan Waktu Penelitian a. Alkohol 70%
1. Penelitian dilakukan di laboratorium Mikrobiologi b. KOH 10%
Rumah Sakit X dan laboratorium Mikrobiologi Prodi c. Akuades steril
Analis Kesehatan MH. Thamrin. d. Putih telur ayam
2. Waktu penelitian dilaksanakan pada tanggal 27 Mei e. NaCl 0,9%
sampai 20 Juni 2015. f. Lactophenol cotton blue (LPCB)
Populasi dan Sampel g. Medium Sabouraud Dextrose Agar (SDA (+))
1. Populasi dalam penelitian ini adalah sputum BTA dari h. Sputum BTA +/positif
Rumah Sakit X dan Y di Jakarta.
2. Sampel untuk penelitian ini adalah sputum BTA 3. Persiapan alat dan bahan
+/positif dari Rumah Sakit X dan Y di Jakarta sebanyak a. Pembuatan media Sabouraud Dextrose Agar (SDA
84 sampel. (+))

39
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
Menurut Mulyati dalam Buku Penuntun Praktikum
Mikologi, media yang digunakan untuk mengisolasi
jamur pada sputum adalah medium Sabouraud Dextrose
Agar (SDA) dengan antibiotik kloramfenikol (SDA (+))
dengan komposisi sebagai berikut :
1) Desktrosa atau glukosa: 40 gram
2) Pepton : 10 gram
3) Agar : 12 gram
4) Akuades : 1000 ml
5) Kloramfenikol : 500 mg
Bubuk SDA ditimbang sebanyak 62 gram,
dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer 1 liter dan
dilarutkan dengan 1 liter aquadest. Larutan kemudian
didihkan, setelah itu ke dalam labu ditambahkan 500 mg
antibiotik kloramfenikol dan diaduk hingga merata.
Kemudian media yang sudah jadi ditutup dengan kapas
dan disterilkan dalam autoclave selama 15 menit pada
suhu 121oC dengan tekanan 1 atmosfer (atm). Medium
SDA (+) yang sudah disterilkan dimasukkan ke dalam
cawan petri bersih dan steril sebanyak 15 ml lalu ditutup
dan dibiarkan sampai membeku sehingga terbentuk
media agar plate.
b. Pembuatan KOH 10%
1) Kristal Kalium Hidroksida : 10 gram
2) Akuades : 100 ml
Ditimbang 10 gram kristal kalium hidroksida dan
dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer 500 ml, kemudian
ditambahkan 100 ml aquadest, dicampur hingga merata.
c. Pembuatan Lactophenol cotton blue (LPCB)
Menurut Mulyati (2010 : 45) dalam buku Penuntun
Praktikum Mikologi, pembuatan Lactophenol cotton blue
(LPCB) adalah sebagai berikut :
Kristal fenol : 20 gram, dilarutkan dalam
penangas
Asam laktat : 20 ml
Gliserol : 40 ml
Akuades : 20 ml
Bubuk cotton blue : 0,05 gram
Semua bahan dicampurkan di atas uap air panas dengan
hati-hati, kemudian ditambahkan 0,05 gram bubuk cotton
blue, dicampur hingga merata.
4. Cara mengisolasi jamur dari sampel sputum
penderita TB paru
a. Pemeriksaan langsung
1) Diambil spesimen sputum secukupnya dengan ose
yang telah dipanaskan dan diletakkan di atas kaca
objek.
2) Ditambahkan 1 tetes KOH 10% dan ditutup dengan
kaca penutup.
3) Diperiksa sediaan di bawah mikroskop dengan
pembesaran 10x40 untuk melihat adanya elemen
jamur.
b. Biakan/kultur
1) Dimasukkan 2 ml sputum ke dalam tabung dan
ditambahkan 4 ml NaCl 0,9%, dihomogenkan.
2) Dipipet 0,1 ml bahan pemeriksaan yang sudah
diencerkan tadi ke dalam media SDA (+), diratakan
pada permukaan media.
3) Diinkubasi pada suhu kamar selama 2-7 hari.
4) Diamati pertumbuhan jamur setiap hari dan dihitung
koloni jamur yang tumbuh disetiap cawan petri.
5) Diperiksa koloni jamur yang tumbuh secara
makroskopis dan mikroskopis.
c. Identifikasi koloni jamur khamir
Koloni khamir yang tumbuh pada media SDA (+)
kemudian diperiksa dengan cara langsung
menggunakan larutan LPCB untuk memberikan
warna dan dilakukan identifikasi Candida sp dengan
teknik tes Germ tube.
1) Pemeriksaan langsung
a) Disiapkan kaca objek yang bersih kemudian diberi 1
tetes larutan Lactophenol cotton blue (LPCB).
b) Kemudian diambil sedikit koloni jamur dengan ose
dan diletakkan pada kaca objek yang telah berisi
LPCB.
c) Dibuat suspensi jamur sampai koloni hancur
kemudian ditutup dengan kaca penutup.
d) Diperiksa sediaan di bawah mikroskop dengan
pembesaran 10x10 untuk mencari lokasi jamur dan
dengan pembesaran 10x40 untuk mengidentifikasi
sporulasi yang terbentuk.
2) Tes Germ tube
a) Diisi tabung dengan putih telur sebanyak 1-2 ml,
dimasukkan ke dalam inkubator pada suhu 37 oC
selama 15-30 menit.
b) Dikeluarkan media dari inkubator dan siap
digunakan.
c) Diambil sedikit koloni Candida dengan ose jarum
yang sudah dipanaskan di api bunsen kemudian
dimasukkan ke dalam media cair dan diinkubasi
pada suhu 37oC selama 2-3 jam.
d) Dikeluarkan media tersebut dari inkubator.
e) Diambil larutan media dengan pipet atau ose dan
diletakkan di atas kaca objek kemudian ditutup
dengan kaca penutup.
f) Diperiksa sediaan di bawah mikroskop dengan
pembesaran 10x10 dan 10x40.
d. Identifikasi koloni jamur kapang
1) Koloni kapang yang tumbuh pada media SDA (+)
kemudian diperiksa dengan cara langsung
menggunakan larutan LPCB untuk memberikan
warna dan dengan penambahan alkohol 70% untuk
menghilangkan gelembung udara. Pemeriksaan
langsung
2) Diambil koloni jamur kapang dengan ose jarum
yang telah dipanaskan kemudian diletakkan di atas
kaca objek.
3) Ditambahkan 1 tetes alkohol 70% kemudian koloni
diuraikan menggunakan ose jarum sampai
penghancuran setipis mungkin. Kemudian
ditambahkan 1 tetes larutan LPCB dan ditutup
dengan kaca penutup.
4) Diperiksa sediaan di bawah mikroskop dengan
pembesaran 10x10 dan 10x40.
e. Pemeriksaan dengan Slide Culture
40
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
Pemeriksaan dibuat apabila morfologi pada biakan
Sabouraud Dextrose Agar (SDA) kurang jelas atau
meragukan sehingga sulit dalam menentukan
jamurnya. Biakan ini dapat dipakai untuk membuat
sporulasi yang baik sehingga jelas morfologinya.
Cara membuat Slide Culture yaitu :
a) Disiapkan ruang biakan steril : diisi cawan petri
dengan 2 buah kaca objek dan kaca objek yang
teratas diletakkan menyilang.
b) Di atas kaca objek tersebut diletakkan Sabouraud
Dexstrose Agar (SDA) berukuran 5 x 3 x 2 mm.
c) Diambil koloni dengan jarum inokulasi (jarum telah
dibakar dan didinginkan) lalu ditanam di keempat
sisi potongan kecil Sabouraud Dexstrose Agar
(SDA) tadi.
d) Ditutup biakan tersebut dengan kaca penutup steril
dan bagian dasar dituangi akuades steril.
e) Didiamkan pada suhu kamar, setelah biakan
berumur 7-14 hari dibuat sediaan langsung dengan
lactophenol cotton blue.
f) Diambil miselium yang menempel pada kaca
penutup menggunakan pinset, kemudian diletakkan
di atas kaca objek yang telah ditetesi alkohol 70%
dan larutan lactophenol cotton blue. Sediaan siap
untuk diperiksa di bawah mikroskop.
g) Untuk kaca objek yang mengandung lempeng agar
diangkat dari cawan petri steril dan dibuang
lempeng agarnya. Kaca objek yang telah
mengandung miselium kemudian diberi 1 tetes
alkohol 70% untuk menghilangkan gelembung
udara, sebelum alkohol menguap tambahkan 1-2
tetes larutan lactophenol cotton blue, kemudian
ditutup dengan kaca penutup dengan hati-hati.
h) Diperiksa sediaan di bawah mikroskop dengan
pembesaran 10x10 dan dengan pembesaran 10x40
untuk melihat susunan morfologinya.
Pembacaan hasil
Pembacaan hasil pemeriksaan biakan jamur secara
makroskopis dan mikroskopis pada koloni khamir dan
kapang :
1) Candida sp
Koloni ragi mempunyai permukaan koloni halus,
menimbul, licin. Sedangkan koloni seperti ragi
mempunyai permukaan koloni berlipat-lipat atau
berserabut di bagian tepi koloni. Secara mikroskopis
ditemukan sel ragi (tunggal) atau blastospora (sel
ragi bertunas) dan atau tanpa hifa semu.
2) Tes Germ tube berdasarkan pembentukan kecambah
Germ tube (+) : C. albicans, C. dubliniensis, dan C.
tropicalis
Germ tube (-) : spesies Candida lainnya
3) Aspergillus sp
Koloni Aspergillus sp berwarna hitam atau kehijauan
dengan permukaan koloni velvety sampai powdery. Jamur
ini mempunyai konidiofor (hifa khusus pembentuk spora)
yang diujungnya membesar (vesikel), dan di atasnya
terdapat sterigma berbentuk fialid tersusun seperti kepala
penari Bali atau kipas. Pada ujungnya sterigma
ditemukan 1-2 lapis konidia serta terdapat sel kaki.
Sedangkan sporulasi dari masing-masing spesies sebagai
berikut :
a) Aspergillus fumigatus memiliki sporulasi konidia
atas berbentuk kolumnar (memanjang), berwarna
hijau sampai hijau kotor. Vesikel berbentuk
kepala, konidiofor berdinding halus dan
umumnya berwarna hijau. Konidia bulat hingga
semi bulat, berwarna hijau dan berdinding kasar
hingga berduri.
b) Aspergillus niger memiliki sporulasi konidia atas
berwarna hitam kecoklatan, konidiofor halus,
tidak berwarna atau agak berwarna cokelat
kekuningan. Konidia kasar menunjukkan
lembaran atau pita berwarna hitam kecokelatan.
c) Aspergillus flavus memiliki sporulasi kepala
konidia khas berbentuk bulat dan berwarna hijau
kekuningan hingga hijau tua kekuningan.
Konidia bulat hingga semi bulat berwarna hijau
pucat dan berduri.
4). Rhizopus sp
Koloni Rhizopus sp berwarna putih abu-abu dengan
permukaan cottony. Rhizopus sp mempunyai
sporangiofor yang tidak bercabang, ujung
sporangiofor menggelembung membentuk
sporangium, sporangium muda berisi protoplasma,
sporangium matang berisi sporangiospora, bagian
ujung konidiofor dibatasi oleh kolumela, dan
terdapat rhizoid (akar semu).
5). Mucor sp
Koloni Mucor sp berwarna putih dengan permukaan
cottony dan dapat menutupi seluruh ruang biakan.
Susunan tubuh Mucor sp mirip dengan Rhizopus sp,
sporangiofor panjang bercabang, tidak teratur,
kolumela masuk ke dalam sporangium, dan tidak
memiliki rhizoid.
6). Absidia sp
Koloni Absidia sp berwarna putih dengan permukaan
cottony. Mempunyai sporangiofor yang tidak
bercabang, sporangium berukuran kecil, dan
kolumela berbentuk runcing.
Teknik Analisa Data
Data yang diperoleh dalam penelitian ini dianalisa
dengan prosentase kumulatif dari jumlah sampel yang
diperiksa. Perhitungan dilakukan dengan
membandingkan antara jumlah yang positif jamur dengan
banyaknya sampel yang diperiksa. Prosentase tersebut
secara singkat dapat diketahui dengan rumus sebagai
berikut :
Nilai (%) 
 x 100 %
n
Keterangan :
∑ x = Jumlah sampel yang positif
∑n = Jumlah seluruh sampel
41
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
HASIL Terhadap 84 sampel sputum penderita TB paru tersebut
Berdasarkan pemeriksaan hitung jumlah koloni jamur terlebih dahulu dilakukan pemeriksaan langsung dan
dan identifikasi jamur pada sputum penderita TB paru biakan pada medium agar plate SDA (+)dengan hasil
dari Rumah Sakit X dan Y di Jakarta didapatkan 84 pemeriksaannya dapat dilihat pada tabel 2.
sampel sputum penderita TB paru dengan BTA +/positif.
Tabel 2
Hasil Pemeriksaan Langsung Dan Kultur Jamur Pada Medium SDA (+)
Dari Sampel Sputum Penderita TB Paru Dari Rumah Sakit X Dan Y Di Jakarta

Derajat Kepositifan BTA

Jenis Pemeriksaan Scanty
+1 (%) +2 (%) +3 (%)
<10 (%)
Langsung
Negatif (%) 3 (21,4%) 5 (11,6%) 2 (10,5%) 1 (12,5%) 11 (13,1%)
Positif (%) 11 (78,6%) 38 (88,4%) 17 (89,5%) 7 (87,5%) 73 (86,9%)
Jumlah (%) 14 (100%) 43 (100%) 19 (100%) 8 (100%) 84 (100%)

Biakan
Negatif (%) 2 (14,3%) 2 (4,7%) 0 (0%) 1 (12,5%) 5 (6%)
Positif (%) 12 (85,7%) 41 (95.3%) 19 (100%) 7 (87,5%) 79 (94%)
14
Jumlah (%) 43 (100%) 19 (100%) 8 (100%) 84 (100%)
(100%)
Sumber : Data Primer, 2013

Berdasarkan data tabel 2, dari 84 sampel sputum Penelitian juga dilanjutkan terhadap 79 sampel yang
penderita TB paru yang diperiksa secara langsung positif jamur pada biakan tersebut dengan mengamati
dengan KOH 10% didapatkan 73 sampel (86,9%) positif jenis jamur yang tumbuh dan dihitung jumlah koloni
ditemukannya elemen jamur dan secara biakan dalam jamur. Adapun hasil hitung jumlah koloni jamur dapat
medium agar plate SDA (+) didapatkan 79 sampel (94%) dilihat pada tabel 3.
yang positif jamur.
Tabel 3
Hasil Hitung Jumlah Koloni Jamur Pada Medium SDA (+)
Dari Sampel Sputum Penderita TB Paru (BTA +) Dari Rumah Sakit X Dan Y Di Jakarta

Jumlah Derajat kepositifan BTA Jumlah (%)

Jenis Jamur koloni Scanty <10
+1 (%) +2 (%) +3 (%)
(CFU/ml) (%)
Khamira) <100 6 (50%) 28 (71,8%) 15 (83,3%) 3 (50%) 52 (69,3%)
101-200 3 (25%) 6 (15,4%) 1 (5,6%) 3 (50%) 13 (17,3%)
201-300 0 (0%) 1 (2,6%) 2 (11,1%) 0 (0%) 3 (4%)
301-400 1 (8,3%) 1 (2,6%) 0 (0%) 0 (0%) 2 (2,7%)
401-500 1 (8,3%) 2 (5,1%) 0 (0%) 0 (0%) 3 (4%)
>500 1 (8,3%) 1 (2,6%) 0 (0%) 0 (0%) 2 (2,7%)
Jumlah (%) 12 (100%) 39 (100%) 18 (100%) 6 (100%) 75 (100%)
Kapangb) <2 2 (100%) 9 (56,2%) 6 (40%) 2 (33,3%) 19 (48,7%)
2-4 0 (0%) 6 (37,5%) 8 (53,3%) 4 (66,7%) 18 (46,2%)
>4 0 (0%) 1 (6,3%) 1 (6,7%) 0 (0%) 2 (5,1%)
Jumlah (%) 2 (100%) 16 (100%) 15 (100%) 6 (100%) 39 (100%)
Sumber : Data Primer

Keterangan : banyak ditemukan yaitu dengan jumlah koloni jamur <2

a) Non Candida albicans dan Candida albicans
b) Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Aspergillus
niger, Rhizopus sp
Berdasarkan data tabel 3, dari hasil hitung jumlah
koloni jamur khamir dan kapang didapatkan jumlah
koloni jamur khamir yang paling banyak ditemukan yaitu
dengan jumlah koloni jamur <100 Colony Forming Unit
per mililiter (CFU/ml) sebesar 52 sampel (69,3%),
sedangkan jumlah koloni jamur kapang yang paling
CFU/ml sebesar 19 sampel (48,7%).
Identifikasi spesies jamur terhadap jamur yang tumbuh
pada biakan juga dilakukan berdasarkan pemeriksaan
makroskopis dengan mengamati warna dan permukaan
koloni, serta pemeriksaan mikroskopis untuk melihat
sporulasi yang terbentuk dengan menggunakan larutan
LPCB. Hasil identifikasi tersebut dapat dilihat pada tabel
4 dibawah ini.

42
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
Tabel 4
Hasil Identifikasi Spesies Jamur Dari Sampel Sputum Penderita TB Paru (BTA +)
Dari Rumah Sakit X Dan Y Di Jakarta
Derajat Kepositifan BTA
Spesies jamur Scanty <10
+1 (%)
(%)
Non Candida albicans 11 (78,6%) 24 (38,7%)
Candida albicans 1 (7,1%) 16 (25,8%)
Aspergillus fumigatus 1 (7,1%) 9 (14,5%)
Aspergillus flavus 1 (7,1%) 7 (11,3%)
Aspergillus niger 0 (0%) 5 (8,1%)
Rhizopus sp 0 (0%) 1 (1,6%)
Jumlah (%) 14 (100%) 62 (100%)
Sumber : Data Primer
Berdasarkan data tabel 4, hasil identifikasi dari 79 sampel
yang positif jamur secara biakan diketahui prosentase
jenis jamur yang paling banyak ditemukan dari genus
Candida sp yaitu Candida albicans sebesar 39 sampel
(30,9%), sedangkan dari genus Aspergillus sp yang
paling banyak ditemukan yaitu Aspergillus fumigatus
sebesar 19 sampel (15,2%), diikuti oleh ordo Mucorales
yang hanya ditemukan jamur Rhizopus sp sebesar 4
sampel (3,2%).
PEMBAHASAN
Hasil pemeriksaan langsung dan biakan dari 84
sampel sputum penderita TB paru dari Rumah Sakit X
dan Y di Jakarta didapatkan hasil pemeriksaan langsung
positif ditemukan elemen jamur sebanyak 73 sampel
(86,9%), sedangkan hasil biakan yang positif ditemukan
koloni jamur sebanyak 79 sampel (94%). Tingginya hasil
pemeriksaan biakan jamur pada medium agar plate SDA
(+) ini dikarenakan pemeriksaan biakan lebih sensitif
dibandingkan pemeriksaan mikroskopik sediaan
langsung (Kumala, 2006 : 30).
Positif adanya jamur pada sampel kemungkinan juga
sebagai akibat meningkatnya penderita TB paru yang
dengan pemakaian obat antibiotik spektrum luas,
penggunaan obat steroid, serta penggunaan obat sitostatik
maupun radioterapi, disamping penderita TB paru yang
merupakan pasien immunocompromissed (Djojodibroto,
2007 : 144 dan 145), pada keadaan tersebut mekanisme
pertahanan tubuh yang dalam keadaan normal mampu
mengontrol pertumbuhan dan patogenitas jamur, tetapi
dalam hal seperti ini jamur yang tadinya bersifat saprofit
menjadi patogen dan terjadi suatu infeksi oportunistik
(Sukamto, 2004 : 3).
Dalam penelitian ini, penulis mendapatkan 84
sampel sputum penderita TB paru dengan derajat
kepositifan BTA yang beragam. Setelah dilakukan
pemeriksaan biakan terhadap sampel, kebanyakan sampel
yang positif yaitu sampel dengan kuman TB (+1) dari 43
sampel ada 41 (95,3%) yang positif. Sampel dengan
kuman TB (scanty <10), (+2), dan (+3) juga ditemukan
Total
+2 (%) +3 (%) Jumlah (%)
2 (5,4%) 0 (0%) 37 (29,3%)
16 (43,2%) 6 (46,1%) 39 (30,9%)
7 (18,9%) 2 (15,4%) 19 (15,2%)
9 (24,3%) 1 (7,7%) 18 (14,2%)
2 (5,4%) 2 (15,4%) 9 (7,2%)
1 (2,7%) 2 (15,4%) 4 (3,2%)
37 (100%) 13 (100%) 126 (100%)
jamur tetapi tidak sebanyak pada sampel BTA +1, hal ini
dikarenakan jumlah sampel yang didapatkan dari Rumah
Sakit X dan Y kebanyakan sampel sputum penderita TB
paru dengan BTA +1. Bila dibandingkan dengan
penelitian yang dilakukan di Unit Pelayanan Fungsional
(UPF) Paru RS Persahabatan Jakarta mendapatkan 67,8%
positif jamur pada penderita TB paru (Sukamto, 2004 :
15). Tingginya prosentase jamur positif pada penderita
TB paru dalam penelitian ini kemungkinan karena belum
berhasilnya pengobatan terhadap infeksi jamur pada paru.
Pemeriksaan hitung jumlah koloni jamur khamir dan
kapang juga dilakukan untuk melihat apakah keberadaan
jamur pada penderita TB paru sebagai flora normal atau
penyebab infeksi jamur paru. Namun belum pernah ada
penelitian mengenai jumlah koloni jamur pada sputum
penderita TB paru, jadi belum ada batasan untuk
mendiagnosa lebih lanjut.
Hasil hitung jumlah koloni jamur khamir (Non
Candida albicans dan Candida albicans) yang paling
banyak diisolasi dari sampel sputum penderita TB paru
adalah dengan jumlah koloni jamur <100 CFU/ml
sebesar 52 sampel (69,3%). Menurut Department of
Surgical Education (2004 : 2) kultur jamur Candida sp
bermakna jika jumlah koloni jamur >100 CFU/ml untuk
sputum, itu artinya 52 sampel sputum (69,3%) yang
mengandung koloni jamur khamir (Non Candida
albicans dan Candida albicans) <100 CFU/ml
kemungkinan hanya sebagai flora normal, sedangkan
selebihnya yaitu 23 sampel sputum (30,7%) yang
mengandung koloni jamur khamir (Non Candida
albicans dan tertekan atau menjalani pembedahan. Pada
sekitar 50% penderita TB paru bisa dijumpai Candida
albicans dalam dahak penderita. Pasien yang menderita
kandidiasis paru biasanya tampak lebih sakit, mengeluh
demam dengan pernapasan dan nadi yang cepat, batuk,
hemaptoe, sesak dan nyeri dada (Sukamto, 2004 : 8).
Berdasarkan sampel yang paling banyak
mengandung jamur Aspergillus sp yaitu dari sampel
sputum BTA +1 sebesar 21 (23,9%) dan spesies yang
paling banyak ditemukan yaitu Aspergillus fumigatus
44
Artikel Ilmu Kesehatan, 8(1); Januari 2016
sebesar 19 (15,2%). Selain karena sampel yang paling
banyak diperoleh, hal ini mungkin juga dikarenakan
penderita TB paru dengan BTA +1 mengalami kasus
kambuh yang sebelumnya pernah mendapat pengobatan
tuberkulosis dan telah dinyatakan sembuh atau
pengobatan lengkap, kemudian kembali lagi berobat
dengan hasil pemeriksaan dahak BTA positif atau biakan
positif.
Kavitas tuberkulosis yang sudah diobati dengan baik
dan sudah ‘sembuh’ kadang-kadang tinggal terbuka dan
dapat terinfeksi dengan jamur Aspergillus fumigatus.
Pada sinar rontgen dapat dilihat semacam bola terdiri
atas fungus yang berada dalam kavitas, keadaan ini
kadang-kadang menyebabkan hemoptisis yang berat
bahkan fatal (Crofton, Horne, dan Miller, 2002 : 110).
Aspergilosis paru biasanya adalah suatu secondary
disease pada penderita dengan kelainan menahun seperti
tuberkulosis. Penyakit ini disebabkan oleh jamur
Aspergillus, terutama spesies Aspergillus fumigatus.
Jamur ini banyak berhamburan di udara sehingga
gampang dihirup melalui saluran napas. Spora jamur
yang terhirup, kemudian mengadakan kolonisasi di
permukaan mukosa. Jamur dapat menembus jaringan
hanya bila ada gangguan sistem imun, baik lokal atau
sistemik (Prabata, dkk, 2012 : 4).
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pemeriksaan hitung jumlah koloni
jamur dan identifikasi jamur yang telah dilakukan di
laboratorium Mikrobiologi Rumah Sakit X dan
laboratorium Mikrobiologi Universitas MH. Thamrin,
Jakarta terhadap 84 sampel sputum penderita
tuberkulosis paru (BTA +) dapat diambil
kesimpulannnya sebagai berikut :
a. Hasil pemeriksaan langsung dan biakan dari sampel
sputum penderita TB paru (BTA +) didapatkan 79 (94%)
sampel positif mengandung jamur.
b. Jumlah koloni yang dihitung dari 79 biakan jamur
didapatkan jumlah koloni paling banyak dari jamur
khamir dengan jumlah koloni <100 CFU/ml sebesar 52
(69,3%), sedangkan jumlah koloni dari jamur kapang
dengan jumlah koloni <2 CFU/ml sebesar 19 (48,7%)
a. Prosentase jenis jamur yang ditemukan dari 79 sampel
positif jamur pada biakan yaitu Non Candida albicans
sebesar 37 (29,3%), Candida albicans sebesar 39
(30,9%), Aspergillus fumigatus sebesar 19 (15,2%),
Aspergillus flavus sebesar 18 (14,2%), Aspergillus niger
sebesar 9 (7,2%) dan Rhizopus sp sebesar 4 (3,2%). Perlu
dilakukan penelitian lebih lanjut apakah jamur tersebut
penyebab infeksi paru atau hanya sebagai kontaminan.
b. Perlu diperhatikan juga prosedur pengambilan sampel
serta kualitas dan kuantitas sampel sputum, karena
banyaknya jamur sebagai flora normal yang terdapat
dalam saluran napas atas dan kemungkinan telah
terkontaminasi dengan jamur yang berasal dari luar.
DAFTAR PUSTAKA
Bansod,S., Rai,M., Emerging of Mycotic Infection in
Patients Infected with Mycobacterium tuberculosis,
World Journal of Medical Sciences, India, 2008
(www.idosi.org, 17 Maret 2013).
Crofton,J., Horne,N., dan Miller,H., Tuberkulosis
Klinis, Penerbit Widya Medika, Edisi 2, Jakarta, 2002.
Dahlan,M.S., Besar Sampel dan Cara Pengambilan
Sampel dalam Penelitian Kedokteran dan Kesehatan,
Edisi 2, Penerbit Salemba Medika, Jakarta, 2009.
Department of Surgical Education, Management of
Candida Infectios in Surgical Patients, Orlando Regional
Medical Center, 2004 (www.surgicalcriticalcare.net, 4
Juli 2013).
Depkes RI, Buku Pedoman Nasional Penanggulan
Tuberkulosis, Edisi 2, Jakarta, 2007.
Djojodibroto,D., Respiratory Medicine, Penerbit
Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 2007.
Gandahusada,S., Ilahude,H.D., dan Pribadi,W.,
Buku Parasitologi Kedokteran, Edisi 3, FKUI, Jakarta,
1998.
Kumala,W., Mikosis Sistemik dan Mikosis
Oportunistik, Buku Mikologi Dasar Kedokteran, Penerbit
Universitas Trisakti, 2006.
Misnadiarly., dan Sunarno., Tuberkulosis Paru dan
Analisis Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Tingginya
Angka Kejadiannya di Indonesia tahun 2007, Puslitbang
Biomedis dan Farmasi Badan Penelitian dan
Pengembangan Kesehatan, Vol 37, Jakarta, 2009.
Mulyati., Pemeriksaan Bahan Klinik lain, Buku
Penuntun Praktikum Mikologi, Jakarta 2012.
Narain,J.P., Pontali,M., dan Tripathy,S.,
Epidemiology and Control Strategies, The Indian Journal
of Tuberkulosis, Vol 49 No.1, India, 2002
(http://lrsitbrd.nic.in, 17 Maret 2013).
Pelczar, dan E.C.S Chan, Dasar-Dasar
Mikrobiologi, Jilid 2, Penerbit UI Press, Jakarta, 2009.
Prabata, dkk., Makalah Diskusi Kasus Mikosis Paru,
FKUI Rumah Sakit Persahabatan, 2012.
Simatupang,M.M., Makalah Candida albicans,
Departemen Mikrobiologi FK USU, Sumatera, 2009
Sukamto., Pemeriksaan Jamur Bilasan pada
Penderita Bekas Tuberkulosis Paru, Hasil Penelitian
Universitas Sumatera, 2004 (www.Depkes.go.id, 13
Maret 2013).
http://www.cosmosbiomedical.com/education/mycol
ogy/mycology2, 8/072013
http://www.klikparu.com/2013/02/jamur-paru.html,
16/02/2013
http://www.mycology.adelaide.edu.au/Mycoses/,
16/02/2013
http://www,tuberkulosis.org/cara-penularan-tbc/,
16/02/2013
45