Histopatologi

Biopsi kulit tidak sering digunakan dalam pemeriksaan dermatofitosis khas. Erupsi kulit lokal yang diduga
mewakili dermatofitosis dengan pemeriksaan KOH samar sering diobati meskipun kurangnya konfirmasi.
Biopsi dapat mengkonfirmasi diagnosis ketika agen sistemik sedang dipertimbangkan untuk pengobatan
erupsi bandel atau lebih luas. Biopsi dapat digunakan untuk membantu dalam diagnosis Majocchi
granuloma di mana pemeriksaan KOH pada permukaan lebih sering mungkin negatif. Biopsi juga kadang-
kadang berguna dalam mengkonfirmasi keberadaan hifa yang melibatkan poros rambut di kulit kepala
pada tinea capitis, meskipun kultur diperlukan untuk memungkinkan spesiasi patogen. Ketika ada, hifa
dapat dihargai dalam stratum korneum pada pewarnaan hematoxylin-dan-eosin (H&E). Namun
pewarnaan khusus, paling sering asam periodik-Schiff (PAS) dan methenamine silver stain, menyoroti
hifa yang mungkin terlihat halus pada pewarnaan rutin. Sedangkan kultur adalah tes yang paling spesifik
untuk onikomikosis, pemeriksaan PAS pada kliping kuku adalah yang paling sensitif dan menghilangkan
kebutuhan untuk menunggu beberapa minggu untuk hasilnya.35 Kliping kuku dengan ketebalan penuh
untuk H&E atau kultur harus melibatkan bagian distrofi, karena proksimal dari ujung distal mungkin
tanpa injury.

Mikroskopik

Meskipun evaluasi mikroskopis dari skala sampel yang diolah dengan kalium hidroksida (KOH) tidak
memungkinkan untuk spesiasi atau karakterisasi profil kerentanan, dapat digunakan sebagai alat
samping tempat tidur yang cepat dan murah untuk memberikan bukti dermatofitosis. Pada
dermatofitosis yang melibatkan kulit, rambut, atau kuku, hifa septate dan bercabang tanpa
penyempitan (Gbr. 160-1) dapat divisualisasikan dengan pemeriksaan mikroskopis dengan persiapan
KOH 10% hingga 20%. Semua dermatofit superfisial tampak identik ketika divisualisasikan dengan cara
ini. Karena pemeriksaan KOH dapat menghasilkan hasil negatif-palsu hingga 15% dari kasus, pasien yang
diduga memiliki dermatofitosis pada kesan klinis harus dirawat.34 Konfirmasi kultur harus
dipertimbangkan setiap kali perawatan sistemik dibenarkan, seperti dalam kasus onikomikosis. Untuk
melakukan pemeriksaan KOH pada kulit, kumpulkan sisik dengan menggores area yang terlibat dengan
tepi kusam (mis. Pisau no. 15 atau tepi slide) keluar dari margin yang maju. Teknik yang sama ini dapat
digunakan untuk mengikis di bawah kuku yang terkena (tetapi diagnosis onikomikosis paling baik
dikonfirmasi dengan histopatologi atau kultur sebagaimana dibahas lebih lanjut). Memo kemudian
ditempatkan pada slide kaca, ditutupi dengan penutup, dan disiapkan dengan 10% hingga 20% KOH.
Tempatkan beberapa tetes KOH pada slide yang bersebelahan dengan tepi penutup, memungkinkan aksi
kapiler untuk mengayunkan cairan di bawah tutup pelindung. Handuk kertas kemudian dapat digunakan
untuk menghilangkan kelebihan

Solusi KOH dari sekitar penutup. Penetrasi KOH ke dalam keratin dapat dibantu dengan sedikit
menghangatkan slide dengan nyala intensitas rendah atau dengan penambahan dimetilsulfoksida
(DMSO) dalam larutan KOH. Beberapa juga mungkin menemukan penambahan setetes noda biru atau
hitam seperti klorazol hitam (dengan cara yang sama seperti larutan KOH di atas) membantu untuk
mengidentifikasi elemen jamur dengan lebih baik (seperti terlihat pada Gambar 160-1). Rambut harus
dipetik (tidak dipotong), ditempatkan pada kaca slide, disiapkan dengan KOH 10% hingga 20%, dan
ditutup dengan kaca penutup. Sedikit menghangatkan slide dengan nyala intensitas rendah
memungkinkan penetrasi yang lebih baik dari solusi KOH ke dalam keratin. Mikroskopi berdaya rendah
akan mengungkapkan 3 kemungkinan pola infeksi (Gbr. 160-2): (a) ectothrix — arthroconidia kecil atau
besar membentuk selubung di sekitar batang rambut; (B) endothrix — arthroconidia di dalam batang
rambut; atau (c) favus — hifa dan ruang udara di dalam batang rambut.

Biakan

Spesiasi jamur superfisial didasarkan pada karakteristik makroskopik, mikroskopis, dan metabolisme
organisme. Meskipun beberapa dermatofit mudah diidentifikasi berdasarkan kultur isolasi primer
mereka, sebagian besar memerlukan diferensiasi lebih lanjut melalui subkultur pada media tertentu
(kultur identifikasi) atau melalui tes biokimia spesifik. Sabouraud dextrose agar (SDA) adalah media
isolasi yang paling umum digunakan untuk dermatofita dan berfungsi sebagai media yang menjadi dasar
sebagian besar deskripsi morfologis. Penghapusan jamur kontaminan, ragi, dan bakteri dicapai dengan
penambahan cycloheximide dan chloramphenicol (± gentamicin) ke media sehingga sangat selektif
untuk isolasi dermatofita. Perkembangan koloni dapat memakan waktu 5 hingga 7 hari dalam kasus
Epidermophyton floccosum dan hingga 4 minggu untuk Trichophyton verrucosum. Kultur diinkubasi
pada suhu kamar (20 ° C hingga 25 ° C [68 ° F hingga 77 ° F]) selama setidaknya 4 minggu sebelum
diselesaikan karena tidak ada pertumbuhan. Media uji dermatofita adalah media isolasi alternatif yang
mengandung indikator pH fenol merah. Media berubah merah ketika aktivitas proteolitik dermatofit
meningkatkan pH hingga 8 atau lebih, dan tetap kuning dengan pertumbuhan sebagian besar saprofit.
Produk sampingan asam nondermatofit mengubah media menjadi kuning. Meskipun media uji
dermatofit berfungsi sebagai alternatif yang baik untuk isolasi dermatofita, media ini mungkin tidak
memungkinkan identifikasi langsung karena pertumbuhan yang berubah, dan dengan demikian
morfologi, dermatofit dalam media uji dermatofit. Tabel 160-5 menjelaskan fitur mikroskopis umum
mikrokonidia dan makrokonidia dari 3 genera dermatofita, dan Tabel 160-6 menggambarkan fitur koloni
dan mikroskopis dari spesies dermatofit yang paling umum. Identifikasi jamur terisolasi difasilitasi oleh
subkultur pada media tertentu seperti agar kentang dekstrosa atau agar Borelli lactritmel yang
merangsang sporulasi, produksi pigmen dan pengembangan morfologi khas. Akhirnya, dermatofita
dapat dibedakan lebih jauh dengan kemampuan mereka untuk tumbuh pada beras dipoles yang
diautoklaf, melubangi helai rambut pendek secara in vitro, menghidrolisis urea (tes urease), atau
membutuhkan suplemen nutrisi untuk pertumbuhan.

Wood light fluorescence

Pemeriksaan pada area penempelan rambut yang terlibat, seperti kulit kepala atau janggut, dengan
lampu Wood (365 nm) mungkin mengungkapkan fluoresensi rambut pteridine yang terinfeksi dengan
patogen jamur tertentu. Rambut yang berfluoresensi harus dipilih untuk pemeriksaan lebih lanjut,
termasuk kultur. Meskipun organisme ectothrix M. canis dan M. audouinii akan berfluoresensi pada
pemeriksaan cahaya Wood, organisme endothrix T. tonsuran tidak akan berfluoresensi. T. tonsurans,
yang sekarang menjadi penyebab paling umum dari tinea capitis di Amerika Serikat, dengan demikian
membatasi penggunaan pemeriksaan cahaya Wood. Tabel 160-8 mencantumkan pola umum
keterlibatan rambut dan fluoresensi rambut dermatofita.