Laporan Praktikum Hari,Tanggal : Senin, 4 November 2019

Penyakit Bakterial dan Mikal Dosen : Drh. Titiek Sunartatie, MS

DERMATOPYTA

Kelompok 8
Gina Nuryustika R B04160076
Arif Yahya B04160079
Ruly Fadli Syavira B04160080

DIVISI MIKROBIOLOGI MEDIK

DEPARTEMEN ILMU PENYAKIT HEWAN DAN
KESEHATAN MASYARAKAT VETERINER
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
2019
 BAB I
PENDAHULUAN
Jamur dikategorikan sebagai jamur atau ragi didasarkan pada penampilan
mikroskopis dalam jaringan atau pada media kultur (tahap aseksual). Jika diamati struktur
hifanya, jamur disebut kapang. Jika diamati struktur sel tunas bersel tunggalnya, jamur
disebut ragi. Pada media kultur, jamur akan memiliki penampilan yang “berbulu”, dan ragi
akan seperti bakteri dalam morfologi dan konsistensi kolonialnya. Beberapa jamur patogen
akan menghasilkan struktur seperti hifa atau struktur seperti ragi, tergantung pada kondisi di
mana mereka tumbuh. Jamur semacam itu disebut jamur dimorfik. Dermatofita adalah jamur
yang hanya dapat memparasitisasi struktur epidermis keratin: kulit superfisial, rambut, bulu,
tanduk, dan kuku. Mereka yang memiliki fase reproduksi seksual milik ascomycetes. Infeksi
dermatofit disebut kurap atau dermatofitosis. Kadang-kadang, khamir dan fungi saprophytic
menyebabkan infeksi kulit yang meniru infeksi yang disebabkan oleh dermatofita; karenanya,
istilah generik dermatomycosis digunakan untuk mewakili semua infeksi jamur pada kulit.

TINJAUAN PUSTAKA
Morfologi
Dalam keadaan nonparasitic, termasuk kultur, dermatofita menghasilkan septate, hifa
bercabang secara kolektif disebut miselium. Unit reproduksi aseksual (konidia) ditemukan di
miselium udara. Unit-unit ini dapat berupa makrokonidia: struktur pluricellular, seperti pod
hingga panjang 100 μm; atau mikrokonidia: kokus atau batang uniseluler kurang dari 10 μm
dalam dimensi apa pun. Bentuk, ukuran, struktur, pengaturan, dan kelimpahan konidia adalah
kriteria diagnostik. Keunikan hifa — spiral, nodul, raket, lampu gantung, dan klamidokonidia
(klamidospora) - lebih sering terjadi pada beberapa spesies daripada yang lain, tetapi jarang
diagnostik. Karakteristik koloni dan pigmentasi bermanfaat dalam diferensiasi dermatofit.
Dalam keadaan parasit, hanya hifa dan artrokonidia (artrospora), unit reproduksi
aseksual lainnya, yang terlihat. Kecuali dalam kisaran ukuran, yang tumpang tindih di antara
spesies dermatofit, arthroconidia tidak dapat dibedakan dari spesies ke spesies. Spora seksual
(askospora) tidak ada pada fase parasit. Hanya Microsporum danrichophyton yang
mempengaruhi hewan secara konsisten. Epidermophyton terlihat terutama pada manusia.

Reservoir
Dermatofit hewan dapat menginfeksi manusia melalui kontak langsung, sedangkan
dermatofit manusia jarang menginfeksi hewan. Penularan Dermatofit disebarkan secara
langsung dan, pada fomites dan, kontak tidak langsung.

PATOGENESIS
Mekanisme
Enzim proteolitik (elastase, collagenase, keratinase) dapat menentukan virulensi,
terutama pada penyakit radang parah. Lokalisasi dalam epidermis keratin telah dikaitkan
dengan kurangnya zat besi yang tersedia di tempat lain. Ini mungkin menjelaskan mengapa
sering dari dermatofitosis menyebabkan respon inflamasi (melalui masuknya protein pengikat
besi) dan oleh inhibitor enzim. Unit infeksius, konidium, masuk melalui defek pada stratum
korneum. Perkecambahan dipicu oleh sebab yang tidak diketahui. Germ tube berkembang
menjadi hifa yang bercabang di antara epitel cornified. Bagian hifa berdiferensiasi menjadi
artrokonidia. Pola pertumbuhan pada kulit yang tidak berambut ini mendominasi dengan
beberapa dermatofita (Microsporum nanum dan Trichophyton rubrum). Invasi rambut, yang
berupa kurap pada hewan paling menonjol, dimulai dengan perkecambahan spora di dekat
lubang folikel. Helai hyphal tumbuh menjadi folikel rambut di sepanjang selubung akar luar
dan menyerang rambut yang tumbuh di dekat sel-sel akar yang hidup. Hifa tumbuh di dalam
korteks rambut, di bagian luarnya terbentuk arthroconidia dan menumpuk di permukaan
rambut. Pola akumulasi arthroconida di luar batang rambut disebut ectothrix, sedangkan,
akumulasi arthroconida di dalam batang rambut disebut pembentukan endothrix.

Patologi

Proses patogenik dimulai dengan kolonisasi, sedikit membangkitkan respons inang.

Mungkin ada hipertrofi stratum korneum dengan keratinisasi dan pengelupasan kulit yang
dipercepat, menghasilkan penampilan yang buram dan kerontokan rambut. Pada anjing
dengan infeksi M. canis, ini sering merupakan efek utama. Pada kucing dewasa mungkin
tidak ada tanda-tanda. Kucing dewasa diketahui membawa spora M. canis pada kulitnya
tanpa menunjukkan tanda-tanda klinis atau lesi kurap. Fase kedua dimulai pada sekitar
minggu kedua dengan peradangan pada batas area parasit. Manifestasi berkisar dari eritema
hingga reaksi dan supurasi vesiculopustular. Bentuk-bentuk ringan terlihat pada infeksi betis
Trichophyto verrucosum. Reaksi yang parah biasanya terjadi pada infeksi T. mentagrophytes
anjing dan infeksi Microsporum gypseum pada kuda. Plak lokal ("kerion") dapat menyerupai
tumor kulit tertentu, terutama pada anjing. Reaksi inflamasi dapat menahan infeksi mikotik
tetapi menjadi masalah utama melalui infeksi bakteri supuratif sekunder. Pola melingkar dari
lesi dan margin yang meradang dikenal dengan istilah kurap dan tinea (bahasa Latin untuk
cacing).

Pola Penyakit

Kurap umumnya mulai membaik secara spontan dalam beberapa minggu atau bulan,
kecuali diperparah oleh infeksi bakteri sekunder atau faktor konstitusional. Agen dapat
bertahan setelah penyembuhan klinis.

Epidemiologi

Dermatofitosis sering menyerang hewan muda. Luas dan tingkat keparahan

dipengaruhi oleh faktor lingkungan. Berkerumunnya hewan atau berkumpul dalam jumlah
besar sering dikaitkan dengan peningkatan prevalensi. Agen utama kurap hewan
didistribusikan secara global.

DIAGNOSA LABORATORIUM

Pemeriksaan langsung
 Dalam 50-70% kasus, sisik rambut dan kulit yang terinfeksi M. canis atau M.
audouinii dapat memancarkan fluoresensi kuning kehijauan terang di bawah sinar ultraviolet,
misalnya, lampu Wood (λ = 366 nm).

Pemeriksaan mikroskopis

Kerokan kulit dan rambut diperiksa secara mikroskopis untuk mengetahui adanya hifa
dan artrokonidia. Pengikisan harus mencakup bahan dari tepi lesi dan ketebalan penuh
epidermis keratin. Rambut dicabut, sehingga termasuk bagian intrafollicular. Sampel
ditempatkan pada slide, diberi 10-20% kalium hidroksida, ditutupi dengan kaca penutup, dan
dipanaskan. Pemeriksaan mikroskopis harus dimulai dengan daya rendah (100 ×) dan cahaya
redup. Pada perbesaran yang lebih tinggi (400 ×) dari rambut seperti itu, individu,
artrokonidia bola dapat dikenali. Pewarna (tinta permanen, lactophenol cotton blue,
dimethylsulfoxide) meningkatkan visualisasi. Calcofluor white reagent memberikan
fluoresensi pada struktur jamur dan memfasilitasi diagnosis di mana mikroskop fluoresen
tersedia.

Kultur

Keroka ditanam ke permukaan media selektif (agar Sabouraud dengan kloramfenikol

dan sikloheksimida, Media Uji Dermatofit (DTM), Media Sporulasi Cepat (RSM)), yang
diinkubasi pada suhu 25 ◦C (suhu kamar) hingga 4 minggu . Sampel yang diduga
mengandung T. verrucosum diinkubasi pada suhu 37◦C. Pada DTM dan RSM, reaksi alkali
menunjukkan adanya dermatofit. (Dermatofit, jika diberi pilihan antara glukosa dan protein,
biasanya akan mencerna protein terlebih dahulu, yang mengarah ke produk alkali; jamur
saprofit paling sering menggunakan glukosa, yang mengarah ke produk sampingan asam.
Perhatikan: Setelah substrat yang disukai dicerna, mikroorganisme akan membuat
penggunaan substrat yang lain, sehingga menggeser pH ke arah lain.) Pertumbuhan yang
cukup berbeda dapat diperiksa secara mikroskopis. Sisi perekat strip pita plastik bening
ditekan dengan lembut pada koloni yang dicurigai (diambil dari RSM, atau agar Sabouraud
dengan kloramfenikol dan sikloheksimida - dermatofita tidak bersporulasi dengan baik pada
DTM) dan dipasang dalam setetes kapas laktofenol biru pada slide dan diperiksa secara
mikroskopis. Warna koloni (depan dan belakang), tekstur, dan laju pertumbuhan penting
untuk identifikasi dermatofita. Juga penting adalah ukuran dan bentuk makro dan
mikrokonidia dermatofita. Dengan Trichophyton spp., Dengan tidak adanya konidia
diagnostik, tes auxotrophic digunakan untuk spesiasi. Pengetahuan tentang sumber (spesies
inang dan jenis lesi) membantu secara signifikan dalam identifikasi sementara dermatofit
hewan.

Tujuan

Praktikum ini bertujuan mengidentifikasi kapang penyebab dermatofitosis dari hasil

isolasi kerokan kulit hewan yang diduga mengalami infeksi jamur.
 BAB II
METODOLOGI PRAKTIKUM
2.1 Waktu dan Tempat
Praktikum dilaksanakan pada Senin, 04 November 2019 pukul 13.30 sampai 16.00
WIB. Tempat dilaksanakan praktikum yaitu Ruang Praktikum Kitwan.

2.2 Bahan dan Alat

Bahan yang diperluka dalam praktikum ini meliputi sampel kerokan kulit dari kucing
yang diduga terinfeksi dermatopytosis, KOH 10%, perwarna lactophenol cotton blue,alcohol
70%, agar sabouraud dextrose agar. Sedangkan alat yang digunakan adalah cawan petri berisi
(potongan kertas saring, pipa U, gelas objek dan gelas penutup yang steril), ose, scalpel,
pinset steril, kaca objek dan kaca penutup.

2.3 Prosedur Kerja

A. Pengamatan Mikroskopis
Pembentuakan preparat natif, kerokan kulit diletakkan diatas gelas objek dan ditetesi
KOH 10% dan didiamkan 5-10 menit. Hasil kemudian diamati di mikroskop dengan
perbesaran perbesaran 100 dan 400 kali untuk melihat adanya elemen fungi seperti arthrospora atau
hifa.
B. Isolasi Dermatofita
Kerokan kulit diisolasi kedalam sabouraud dextrose agar untuk dilakukkan pengamatan
tekstur. Ose terlebih dahulu dicelupkan ke dalam alkohol dan dibakar pada api Bunsen,
kemudian didiamkan sesaat. Ose selanjutnya digunakan untuk mengambil kerokan kulit dan
rambut dan diusapkan pada media Sabauroud’s Dextrose Agar (SDA) (Oxoid, United
Kingdom). Media SDA diinkubasikan pada suhu kamar (25-30°C) selama 1-3 minggu (Ellis,
2015).
C. Identifikasi Spesies Dermatofita
Identifikasi terhadap pertumbuhan fungi dermatofita dilakukan secara makroskopis
dan mikroskopis. Pengamatan secara makroskopis dilakukan terhadap lama waktu terjadinya
pertumbuhan, morfologi koloni dan warna, bentuk, dan permukaan bawah koloni.
Pemeriksaan mikroskopis dilakukan terhadap media SDA yang teramati positif (tumbuh
koloni fungi) menggunakan Lactophenol Cotton Blue (LPCB). Ose dicelupkan di dalam
alkohol dan dibakar pada api bunsen kemudian didiamkan sesaat. Selanjutnya ose digoreskan
pada koloni fungi dermatofita yang tumbuh pada media SDA kemudian diusapkan pada gelas
objek yang sebelumnya telah ditetesi LPCB dan ditutup dengan gelas penutup, kemudian
diperiksa menggunakan mikroskop cahaya terhadap adanya hifa, makrokonidia, dan
mikrokonidia (Nasimuddin et al., 2014; El-ashmawy et al., 2015).
D. Pembuatan Slide Culture menurut Riddele
Disiapkan sebuah cawan Petri steril yang di dalamnya diberi kertas saring steril yang
dipotong bundar dan telah dilembabkan dengan menggunakan akuades steril untuk menjaga
kelembaban kultur dalam cawan Petri. Pada cawan Petri tersebut disimpan batang penahan
berbentuk pipa U dan di atas batang penahan tersebut diletakkan sebuah objek gelas steril
beserta penutupnya. Blok agar steril kira-kira berikiran satu sentimeter kuadrat dipotong dari
medium PDA dalam cawan Petri steril lain dan diletakkan di atas gelas objek dengan
menggunakan pisau atau alat pemotong steril. Kemudian, fungi diinkubasi pada keempat blok
agar dan ditutup oleh gelas penutup steril. Setelah beberapa hari kurang lebih 7 hari
diinkubasi dalam suhu kamar (25-30°C), sllide dapat diamati dengan menggunakan
mikroskop pada perbesaran rendah sampai tinggi, lalu diidentifikasi dan dilakukan
perwarnaan LCB (Sisyawati Putriningsih, et al 2018).

BAB III
PEMBAHASAN

Pemeriksaan dilakukan pada kerokan kulit yang diambil dari kucing yang diduga
mengalami infeksi jamur yang memiliki gejala klinis berupa alopesia berbentuk melingkar di
beberapa tempat di tubuh kucing dengan kulit yang mengalami hiperkeratinisasi dan
berketombe. Menurut Outerbridge (2006) gejala klinis hewan penderita dermatophytosis
meliputi alopesia, eritema, papula, pustula, bersisik dan berkerak. Pengujian pertama yang
dilakukan adalah pengujian secara langsung dengan menggunakan larutan KOH 10% pada
sampel kerokan kulit yang didapat dari kucing. Pemeriksaan sampel yang dilakukan dengan
larutan KOH 10% merupakan uji langsung dan bersifat sebagai uji screening untuk
pemeriksaan infeksi kapang (Widiati et al. 2016).
Hasil yang didapatkan dari pemeriksaan langsung ini adalah negatif karena tidak
ditemukannya hifa maupun komponen kapang lain yang dapat digunakan untuk identifikasi
jenis kapang penginfeksi. Hal ini dapat disebabkan karena spora pada saat pengambilan
sampel tidak terambil secara sempurna. Selain itu pemeriksaan langsung dengan KOH
merupakan pemeriksaan yang memiliki tingkat sensitifitas dan spesifitas yang rendah untuk
pemeriksaan jamur atau kapang pada kerokan kulit. Meskipun demikian tahapan kedua tetap
dilanjutkan dengan penanaman sampel pada media Sabouraud Dextrosa Agar (SDA) yang
merupakan metode gold standard dalam pemeriksaan jamur (Widiati et al. 2016).

Gambar 1. Gejala klinis kucing

Pertumbuhan sampel pada media SDA diperiksa seminggu dan dua minggu setelah
penanaman sampel pada media. Pengamatan pada sampel dilakukan secara makroskopis dan
mikroskopis. Pengamatan makroskopis pada sampel yang tumbuh di media dilakukan dengan
cara melihat kecepatan pertumbuhan, bentuk koloni, tekstur koloni serta warna atau
pigmentasi dari koloni yang tumbuh (Arunmozhi et al. 2007). Kecepatan pertumbuhan
kapang dari sampel yang didapat termasuk lambat dengan koloni berwarna putih, flat dengan
tekstur velvety. Warna dari sisi lain koloni kapang ini adalah kekuningan.

(a) (b) (c)

Gambar 2. (a) Koloni pada SDA (Hari ke-7); (b) Koloni pada SDA (Hari ke-14); (c) pigmen
sisi lain koloni.

Sementara itu pemeriksaan mikroskopis dilakukan terhadap media SDA yang teramati
positif (tumbuh koloni fungi) menggunakan Lactophenol Cotton Blue (LPCB) dan dilakukan
pemeriksaan terhadap adanya hifa, makrokonidia serta mikrokonidia (Putriningsih dan
Arjentinia 2018). Hasil pengamatan mikroskopis yang didapat adalah ditemukan
makrokonidia berbentuk memanjang dengan ujung tumpul dan morfologi multicellular,
berdinding tipis dengan dinding halus. Selain itu ditemukan juga hifa bersekat dengan bagian
yang membentuk klamidospora.

Gambar 3. Morfologi mikroskopis dari sampel yang diuji.

Berdasarkan hasil pengamatan makroskopis dan mikroskopis yang didapat. Kapang

pada sampel uji yang menyebabkan dermatophytosis pada kucing merupakan kapang
Trichophyton sp. Hal ini dikarenakan karakteristik dari makrokonidia yang ditemukan adalah
makrokonidia dengan dinding tipis dengan permukaan yang halus dengan ujung yang tumpul.
Dinding makrokonidia yang halus menjadi pembeda kapang ini dengan kapang Microsporum
sp. Trichophyton sp. dapat menjadi penyebab dermatofitosis pada kucing, namun frekuensi
kejadiannya tidak sebanyak frekuensi kejadian dari Microsporum canis yang mencapai 82%
dari 89 kasus pada kucing (Indarjulianto et al. 2017). Spesies yang dapat menginfeksi kucing
salah satunya adalah T. Quenckeanum (Gholib dan Rachmawati 2010). Selain itu, Abdalla
(2018) menyebutkan bahwa kucing dapat terinfeksi oleh T. mentagrophytes ataupun T.
quinckeanum melalui kontak dengan rodensia kecil. Selain itu, kucing juga dapat terinfeksi
oleh T. verrucosum lewat kontak dengan sapi.

BAB IV
SIMPULAN

Menurut hasil pengamatan dalam praktikum fungi dermatofita yang berhasil diisolasi
dan diidentifikasi dari kucing adalah genus Trichophyton sp. Hasil ini didapat dari bentuk
makrokonidia yang didapat yaitu makrokonidia berdinding halus, ujung tumpul, multiseluler,
serta berdinding tipis.

DAFTAR PUSTAKA

Abdalla WG. 2018. An overview of feline dermatophytosis. South Asian Journal of Research
in Microbiology. 1(4): 1-14.
Arunmozhi BS, Sigler L, Brandt ME. 2007. DNA and the classical way: identification of
medically important molds in the 21st century. Med Mycol. 45:475-90.
El-Ashmawy WR, El Hafez EA, El Saeed HA. 2015. Clinical study on dermatophytosis in
calves with in vitro evaluation of antifungal activity of bergamot oil. Advances in
Animal and Veterinary Sciences. 3(1): 34-39.
Ellis D. 2015. Dermatophytosis. https:// mycology.adelaide.edu.au/ Diakses pada tanggal 10
November 2019.
Gholib D, Rachmawati S. 2010. Kapang dermatofit Trichophyton verrucosum penyebab
penyakit ringworm pada sapi. WARTAZOA. 20(1): 43-53.
Indarjulianto S, Yanuartono, Widyarini S, Raharjo S, Purnamaningsih H, Nururrozi A,
Haribowo N, Jainudin HA. 2017. Infeksi Microsporum canis pada kucing penderita
dermatitis. Jurnal Veteriner. 18(2): 207-210.
Nasimuddin S, Appalaraju B, Surendran P, Srinivas CR. 2014. Isolation, identification and
comparatative analysis of SDA and DTM for dermatophytes from clinical samples in a
tertiary care hospital. IOSR Journal of Dental and Medical Sciences. 13(11): 68-73.
Outerbridge CA. 2006. Mycologic disorders of the skin. Clinical Technic Small Animal
Practice. 21: 128-134.
Putriningsih PAS, Arjentinia IPGY. 2018. Identifikasi spesies fungi Microsporum gypseum
dan Microsporum nanum penyebab ringworm pada sapi bali. Jurnal Veteriner. 19(2):
177-182.
Widiati M, Nurmalasari A, Andani RG. 2016. Pemeriksaan jamur dermatofita kuku kaki
petani di Desa Bunter Blok Cileudug Kecamatan Sukadana Kabupaten Ciamis. CDN
Stikes Mucis. 3(1): 27-34.