BIDANG KEGIATAN:
PKM PENELITIAN EKSAKTA
Diusulkan oleh:
Nehemia Roito Hutajulu 31S16022 2016
Novi Wulandari 31S18003 2018
Febri Chatarina Sianipar 31S19009 2019
(Dr. Arlinta Christy Barus, ST, M.Infotech) (Adelina Manurung, S.Si, M.Sc.)
NIDN. 0117027901 NIDN. 0105038304
ii
DAFTAR ISI
DAFTAR ISI ......................................................................................................iii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... iv
DAFTAR TABEL ............................................................................................... v
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang .......................................................................................... 1
1.2 Tujuan ....................................................................................................... 1
1.3 Urgensi Penelitian ..................................................................................... 1
1.4 Luaran yang diharapkan ............................................................................. 2
1.5 Manfaat Program ....................................................................................... 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 3
2.1. Limbah Kulit Pisang .................................................................................. 3
2.2. Senyawa Fenolik ....................................................................................... 3
2.3. Rhizopus oryzae ......................................................................................... 3
2.4. Submerged Fermentation ........................................................................... 3
2.5. Turbidimetri .............................................................................................. 3
2.6. DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) ............................................................ 4
2.7. Metode Asam 3,5-dinitrosalisilat (DNS) .................................................... 4
2.8. Reagen Folin-Ciocalteu ............................................................................. 4
BAB III METODE PENELITIAN ....................................................................... 5
3.1 Tahapan Penelitian ..................................................................................... 5
3.1.1 Persiapan Medium Kulit Pisang Toba ................................................... 5
3.1.2 Fermentasi ........................................................................................... 5
3.1.3 Analisa Sampel .................................................................................... 5
Analisa biomassa ................................................................................... 6
Analisis glukosa ..................................................................................... 6
Analisis TPC.......................................................................................... 6
Analisis TAC ......................................................................................... 7
3.2 Luaran ....................................................................................................... 7
3.3 Indikator Pencapaian .................................................................................. 7
3.4 Teknik Pengumpulan dan Analisis Data ...................................................... 7
3.5 Cara Penafsiran.......................................................................................... 7
3.6 Kesimpulan Hasil Penelitian ...................................................................... 8
BAB IV BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN ................................................... 9
4.1 Anggaran Biaya .......................................................................................... 9
4.2 Jadwal Kegiatan ......................................................................................... 9
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 10
Lampiran 1. Biodata Ketua dan Anggota, Biodata Dosen Pembimbing .............. 11
Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan ........................................................ 16
Lampiran 3.Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas .................. 17
Lampiran 4. Surat Pernyataan Ketua Peneliti ..................................................... 18
iii
DAFTAR GAMBAR
iv
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Rekapitulasi Anggaran Biaya PKM-PE ................................................ 9
Tabel 4.2 Jadwal Kegiatan PKM-PE .................................................................... 9
v
1
BAB I PENDAHULUAN
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Produksi buah pisang terus meningkat setiap tahunnya sebesar 4,16% dan
pada tahun 2015 mencapai 7,3 juta ton (Kementrian Pertanian Indonesia, 2016).
Produksi pisang yang tinggi ini mendorong peningkatan limbah kulit pisang. Hal
tersebut dikarenakan masyarakat pada umumnya hanya memanfaatkan buah
pisang saja.
Kulit buah pisang kaya akan senyawa flavonoid maupun senyawa fenolik
lainnya. Flavonoid dan senyawa fenolik merupakan senyawa bioaktif yang
menunjukkan berbagai aktivitas yang berguna, seperti antioksidan, antidermatosis,
kemopreventif, antikanker, maupun antiviral (Atun dkk., 2007). Senyawa fenolik
dari bahan alam dapat ditingkatkan melalui fermentasi. Proses fermentasi
menghasilkan senyawa baru dan juga peningkatan senyawa tertentu seperti
fenolik. Meningkatnya aktivitas antioksidan disebabkan karena adanya fenolik
bebas yang dihasilkan selama proses fermentasi sehingga kadar fenolik yang
dihasilkan semakin tinggi (Bhanja dkk., 2009)
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka dalam penelitian ini akan
dilakukan produksi senyawa fenolik melalui fermentasi ekstrak kulit pisang Toba
oleh Rhizopus oryzae. Variasi yang digunakan adalah konsentrasi ekstrak kulit
pisang Toba dan konsentrasi ammonium sulfat serta diamati pengaruhnya
terhadap sisa glukosa, total fenolik, aktivitas antioksidan, dan jumlah biomassa
yang dihasilkan.
1.2 Tujuan
1. Mengetahui pengaruh variasi konsentrasi substrat kulit pisang Toba
terhadap sisa glukosa, total fenolik, aktivitas antioksidan dan jumlah
biomassa yang dihasilkan.
2. Mengetahui pengaruh variasi konsentrasi (NH4)2SO4 terhadap sisa glukosa,
total fenolik, aktivitas antioksidan dan biomassa yang dihasilkan.
3. Mengetahui pengaruh lama waktu fermentasi terhadap sisa glukosa, total
fenolik, aktivitas antioksidan dan jumlah biomassa yang dihasilkan.
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Limbah Kulit Pisang
Limbah kulit pisang mengandung vitamin B, karbohidrat , mineral seperti
kalium dan natrium, dan senyawa antioksidan yang tinggi (Harbone, J.B., 1987).
Kulit pisang masak yang berwarna kuning kaya akan senyawa kimia yang bersifat
antioksidan, baik senyawa flavonoid maupun senyawa fenolik. Aktivitas
antioksidan pada kulit pisang mencapai 94,25% pada konsentrasi 125 mg/ml
(Fatemeh et all,.2012).
2.5. Turbidimetri
Turbidimetri adalah metode pengukuran konsentrasi partikulat dalam
suspensi yang didasarkan pada hamburan elastis cahaya oleh partikel.
4
Turbidimeter merupakan sifat optik akibat dispersi sinar dan dapat dinyatakan
sebagai perbandingan cahaya yang dipantulkan terhadap cahaya yang datang.
Intensitas cahaya yang dipantulkan oleh suatu suspensi adalah fungsi konsentrasi
jika kondisi-kondisi lainnya konstan (Khopkar, 2003). Sel mikroorganisme dapat
diperkirakan kuantitasnya dengan panjang gelombang 600 nm.
METODE PENELITIAN
Penelitian produksi senyawa fenolik melalui fermentasi kulit pisang Toba
dilakukan dengan menggunakan variasi konsentrasi kulit pisang toba dan
konsentrasi amonium sulfat . Dengan menggunakan mikroorganisme Rhizopus
oryzae dan jenis fermentasinya adalah submerged fermentation.
3.1.2 Fermentasi
Rhizopus oryzae diremajakan pada media potato dextrose agar. Dalam
pembuatan inokulum biakan Rhizopus oryzae berumur 72 jam pada media
PDA diinokulasikan sebanyak 1 ooseke dalam 50 mL ekstrak kulit pisang Toba
di dalam erlenmeyer 250 mL, lalu diinkubasi pada suhu 30 oC. Saat berada pada
fasa eksponensial, inokulum ditambahkan kedalam 450 mL ekstrak kulit pisang
Toba sehingga volume substrat akhir menjadi 500 mL. Substrat difermentasi
oleh Rhizopus oryzae pada suhu 30oC selama 168 jam dan dilakukan
pengambilan sampel pada jam ke-0 dan setiap 24 jam. Pengambilan dan
pengujian sampel dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan untuk memperoleh
data yang akurat.
Analisa biomassa
Sebanyak 1 mL sampel yang belum disentrifugasi dianalisis menggunakan
spektrofotometer UV-VIS (GenesysTM 10UV) pada panjang gelombang 600
nm untuk memperoleh nilai absorbansi. Absorbansi tersebut dimasukkan ke
kurva baku sel sehingga diperoleh konsentrasi sel.
Analisis glukosa
Sisa glukosa yang terkandung dalam supernatan hasil fermentasi
ditentukan dengan metode dinitrosalicylic acid . Sebanyak 1 mL sampel
ditambahkan dengan 3 mL reagen dinitrosalicylic acid dipanaskan dalam air
mendidih selama 5 menit. Setelah dingin, diukur absorbansi dengan
menggunakan spektrofotometer UV-VIS (GenesysTM 10UV) pada panjang
gelombang 511 nm. Nilai absorbansi tersebut dimasukkan ke kurva baku
sehingga diperoleh konsentrasi glukosa.
Untuk kurva baku glukosa ditentukan dengan membuat 4 variasi
konsentrasi larutan standar glukosayaitu 6,66 mg/mL; 5 mg/mL; 3,33 mg/mL;
2 mg/mL. Larutan induk glukosa dibuat dengan mengambil 10 mg kemudian
ditambahkan aquades sampai tanda batas labu ukur 10 mL. Setelah dilakukan
pengenceran, masing-masing larutan diinkubasi dalam penangas air pada
temperatur 50oC selama 5 menit. Setelah panas dilakukan pendinginan dan
ditambahkan DNS sebanyak 3 mL. Dilakukan pemanasan kembali pada
penangas air temperatur 100oC selama 5 menit kemudian didinginkan dengan
air mengalir selama 15 menit. Absorbansi larutan diukur menggunakan
spektrofotometer pada panjang gelombang 600 nm. Nilai absorbansi dan
konsentrasi glukosa kemudian diplot untuk menghasilkan kurva baku glukosa.
Analisis TPC
Penentuan kandungan total fenol dilakukan berdasarkan metode hasil
modifikasi Juan & Chou. Aliquot ekstrak sebanyak 0,1 mL dicampur dengan 1
mL reagen fenol Folin-Ciocalteau dan dibiarkan bereaksi selama 3 menit.
Kemudian 300 µL Na2CO3 1N ditambahkan dan dibiarkan bereaksi selama 90
menit pada temperatur 25oC. Absorbansi diukur pada panjang gelombang (λ)
725 nm menggunakan spektrofotometer. Nilai absorbansi sampel disubstitusi
kedalam persamaan kurva standar asam galat sebagai variabel „y‟, sehingga
diperoleh „x‟ sebagai konsentrasi total fenol (µg asam galat/mg ekstrak).
Untuk kurva standar asam galat ditentukan dengan membuat 8 konsentrasi
larutan standar asam galat dengan rentang konsentrasi 0 – 100 ppm. Sebanyak
0,01 g asam galat dalam labu ukur 100 mL ditambahkan 1 mL etanol,
kemudian etanol kembali ditambahkan sampai tanda batas. Larutan stok 100
ppm diencerkan menjadi 8 konsentrasi larutan kemudian masing-masing
diambil 1 mL dan ditambahkan 1 mL reagen Folin-Ciocalteu dalam Tabung
Falcon 15 mL. Larutan tersebut dihomogenkan dan didiamkan selama beberapa
7
Analisis TAC
Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode 2,2-difenil-1-
pikrilhidrazil (DPPH). Setiap 10 mg sampel yang akan diukur aktivitas
antioksidan dilarutkan kedalam50 mL etanol. Sampel yang telah dilarutkan
diencerkan kedalam 5 konsentrasi, yaitu 5 ppm, 6 ppm, 7 ppm, 8 ppm, dan 9
ppm, kemudian diambil 2 ml dari setiap konsentrasi larutan sampel dan
dicampurkan dengan 2 mL DPPH 50 ppm sedangkan sebagai blanko, 2 mL
etanol dicampur dengan 2 mL larutan DPPH 50 ppm. Seluruh larutan tersebut
diinkubasi pada temperatur 25oC selama 30 menit. Kemudian, absorbansi
diukur pada panjang gelombang 517 nm menggunakan spektrofotometer UV-
Vis. Persentase inhibisi DPPH dihitung berdasarkan persamaan berikut ini:
Persentase inhibisi %
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
= 𝑥 100%
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜
3.2 Luaran
Luaran penelitian ini adalah data sisa glukosa, total fenolik, aktivitas
antioksidan dan biomassa serta analisis pengaruh variasi konsentrasi kulit pisang
Toba dan konsentrasi amonium sulfat terhadap terbentuknya data ini.
DAFTAR PUSTAKA
Alegre, dkk . 2009. Production of thermostable Invertase By Aspergiluss
Caespitosus Under Submerged or Solid State Fermentation Using
Argoindustrial Residues As Carbon Source. Jurnal Mikrobiologi. 40:612-622.
Atun, S., dkk. 2007. Identification and Antioxidant Activity Test of some
Compounds From Methanol Extract Peel of Banana (Musa paradisiaca
Linn.). Jurnal Kimia. 7(1): 83-87.
Bhanja T, Kumari A, Banerjee R. 2009. Enrichment of Phenolics and Free
Radical Scavenging Property of Wheat Koji Prepared with Two Filamentous
Fungi. Jurnal Teknologi Sumber Biologi. 100(11): 2861-2866.
Correia, R.T.P., McCue, P., Magalhaes, M.M.A., Macedo, G.R., and Shetty, K.
2004. Production of phenolic antioxidants by the solid-state bioconversion of
pineapple waste mixed with soy flour using Rhizopus oligosporus. Jurnal
Proses Biokimia. 39(12): 2167-2172.
Fatemeh, dkk. 2012. “Total Phenolics, Favonoids and Antioxidant Activity of
Banana Pulp and Peel Fours: Infuence of Variety and Stage of Ripeness”.
Jurnal internasional penelitian pangan. 19 (3): 1041-1046.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan Edisi ke-2. Bandung: ITB Press.
Hasanah, N. dan Iwan, S. 2015. Aktivitas Selulase Isolat Jamur dari Limbah
Media Tanam Jamur Merang. Prosiding Seminar Nasional Masy Biodiv
Indon, Bogor :24 Mei 2015. Hal.1110-1115.
Khopkar, S.M. 2003. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : UI Press.
Nurhayati, Siadi, K., dan Herjono. 2012. Pengaruh Konsentrasi Natrium Benzoat
dan Lama Penyimpanan pada Kadar Fenolat Total Pasta Tomat, Indo. Jurnal
Ilmu Kimia. 1(2): 158-163.
Oliveira, M. S., Eliane, P. C., Eliana, B. F., dan Leonor, S. S. 2012. Phenolic
Compound and Antioxidant Activity in Fermented Rice (Oryza sativa) Bran.
Jurnal Sains Teknologi. 32(3): 531-537.
Prior, R. L., Wu, X., dan Schaich, K. 2005. Standardized Methods for the
Determination of Antioxidant Capacity and Phenolics in Food and Dietary
Supplements. Jurnal Kimia Pertanian dan Pangan .53(1): 4290-4302.
Proestos, C., Sereli, D., dan Komaitis, M. 2006. Determination of phenolic
compounds in aromatic plant by RP-HPLC and GC-MS. Jurnal Ilmu Pangan.
95(1): 44–52.
Rahmawati, Diania. 2011. Penentuan pH dan Suhu Optimum Aktivitas Kitinase
Bacillus cereus 1.5 dan Pengujian Kitinase Dalam Mendegradasi
Eksoskeleton Kutu Bertepung Putih (Ferrisa virgiata). [Skripsi]. FMIPA,
Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Reynertson, K. A. 2007. Phytochemical Analysis of Bioactive Constituens from
Edible Myrtaceae Fruit. [Dissertation]. The City University of New York,
New York.
Rohman dan Riyanto. 2004. Aktivitas antioksidan ekstrak buah mengkudu
(Morinda citrifolia, L). Jurnal Teknologi Pertanian . 25(3): 131-136.
Subramaniyam, dan J. Vimala, R. 2012. Solid Stage and Submarged
Fermentation for The Production of Bioactive Substance : A Comparative
Study. Jurnal Biosains dan Teknologi. 3(3): 480–486.
11
B. Riwayat Pendidikan
SD SMP SMA
SDN 175833 SMPN 1 SMAS Unggul
Nama Institusi
Pardomuan 1 Pangururan Del
Jurusan - - IPA
Tahun Masuk-Lulus 2004-2010 2010-2013 2013-2016
Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan PKM-P: Produksi senyawa fenolik melalui fermentasi
limbah kulit pisang Toba oleh Rhizopus oryzae dengan metode submerged fermentation.
B. Riwayat Pendidikan
SD SMP SMA
SD Negeri
SMP Negeri 02 SMA Negeri 02
Nama Institusi 173105
Tarutung Tarutung
Tarutung
Jurusan IPA
Tahun Masuk-Lulus 2006-2012 2012-2015 2015-2018
Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan PKM-P: Produksi senyawa fenolik melalui fermentasi
limbah kulit pisang Toba oleh Rhizopus oryzae dengan metode submerged fermentation.
Novi Wulandari
13
B. Riwayat Pendidikan
SD SMP SMA
SD Negeri SMP Negeri 1 SMAK Negeri 1
Nama Institusi
173395 Doloksanggul Doloksanggul
Jurusan IPA
Tahun Masuk-Lulus 2007-2013 2013-2016 2016-2019
Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan PKM-P: Produksi senyawa fenolik melalui fermentasi
limbah kulit pisang Toba oleh Rhizopus oryzae dengan metode submerged fermentation.
B. Riwayat Pendidikan
Gelar Akademik Sarjana S2/Magister S3/Doktor
Hochschule
Universitas Bmerhaven
Nama Institusi Negeri Medan (Jerman) -
Biologi Non Biotechnology-
Jurusan/Prodi Kependidikan Bioanalytic -
Tahun Masuk-Lulus 2001-2005 2010-2013 -
C.2 Penelitian
No Judul Penelitian Penyandang Dana Tahun
Perbandingan Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Kasar Buah Andaliman (Zanthoxylum
acanthopodium), yang di Ekstraksi
Menggunakan Metode Ultrasonic-Assisted
Extraction (UAE) dan Metode Microwave
Assisted Extraction (MAE), terhadap
Escherichia coli dan Staphylococcus
1 aureus. LPPM IT DEL 2015
Pengaruh Fermentasi Menggunakan
Aspergillus niger, Saccaromyces
cereviseae, dan Rhizopus oryzae Terhadap
Karakteristik MOCAF (Modified Cassava
2 Flour) DIKTI 2016
15
Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan PKM-P: Produksi senyawa fenolik melalui fermentasi
limbah kulit pisang Toba oleh Rhizopus oryzae dengan metode submerged fermentation.
- Menyusun
proposal
- Mencari
daftar
pustaka
Novi Wulandari/ Teknik Teknik - Pembelian
2 12
31S18003 Bioproses Bioproses bahan baku
- Analisis
parameter
- Penyiapan
Bahan
Penelitian
- Pembelian
alat-
- bahan baku
Pembelian
Febri Chatarina - bahan
Teknik Teknik
3 sianipar/ 12 penunjang
Bioproses Bioproses
31S19009 Peminjaman
laboratorium
- Menyiapkan
bahan baku
18
Dengan ini menyatakan bahwa proposal PKM-PE saya dengan judul “Produksi
senyawa fenolik melalui fermentasi limbah kulit pisang Toba oleh Rhizopus
oryzae dengan metode submerged fermentation” yang diusulkan untuk tahun
anggaran 2020 adalah asli karya kami dan belum pernah dibiayai oleh lembaga
atau sumber dana lain.