Laboratorium Farmasi
2020
Alat-alat Pemeriksaan
2. Alat-alat untuk pemeriksaan
1. Alat-alat untuk pemeriksaan laboratorium/farmasi
klinis
– Neraca/timbangan (digital)
– Haemocytometer
– pHmeter digital
– Hb-meter
– Stirer
– Blood Sedimentation
Apparatus – Incubator Laboratorium
– Blood Bank – Water Bath
– Microscope – Hot plate
– Alat cek urin tmasuk – Refractometer
Flowcytometri, Urine – Centrifuge
Analyzer, Urinometer – Spektrofotometer
– (Blood) Chemistry Analizer
dan Alat cek darah Peralatan lab ini diperlukan untuk
– pH meter, pH/blood gas menunjang kegiatan penelitian di
analyzer laboratorium, misalnya seperti
pencampuran suatu larutan,
– Sodium/Potassium Analyzer memanaskan cairan, melihat obyek
dengan ukuran mikro, penyimpanan
darah, diagnosa suatu cairan atau
stnurfitria-2020 larutan, dsb.
Chemistry Analizer
• Fungsi: menganalisa
otomatis sampel darah
• Jenis tes:
– kadar enzim seperti tes
fungsi hati,
– tingkat ion (misalnya
natrium dan kalium) dan
– lainnya seperti glukosa,
albumin serum,
kreatinin, dll
stnurfitria-2020
Teori Dasar Autoanalyzer
(Chemistry Analyzer)
• Autoanalyzer adalah analisa otomatis yang pada awalnya menggunakan
teknik aliran khusus bernama “analisis aliran kontinu” (CFA), diciptakan
pada tahun 1957 oleh Leonard Skeggs, PhD dan pertama dibuat oleh
Corporation Technicon. Aplikasi pertama adalah untuk klinis (medis)
analisis.
• Sangat mengubah karakter laboratorium pengujian kimia dengan
memungkinkan peningkatan yang signifikan jumlah sampel yang dapat
diolah dengan mengurangi waktu dan tingkat kesalahan yg tjd
dibandingkan dgn metode manual
• Dilengkapi dengan sistem sequensial multiple analysis
– mempunyai kemampuan pemeriksaan yang lebih banyak berfungsi untuk
analisa kimia secara otomatis
– mampu menggantikan prosedur-prosedur analisis manual dalam
laboratorium, rumah sakit, dan industri.
– dapat digunakan untuk menganalisa kandungan air, gas, mineral, logam, dan
material biologis dari suatu larutan.
stnurfitria-2020
• Jenis-jenis tes yang dibutuhkan:
– tingkat enzim (seperti tes fungsi hati), Enzim dapat diukur dengan mengubah
salah satu zat warna yang lain/kolorimetri
– tingkat ion (misalnya natrium dan kalium). Ion sederhana dapat diukur dengan
elektroda selektif ion (yang memungkinkan satu jenis ion) dan perbedaan
tegangan
– Tes lainnya (seperti glukosa, albumin serum, atau kreatinin) dapat
menggunakan kolorimetri dan kekeruhan untuk menentukan konsentrasi
bahan kimia yang bersangkutan.
• Autoanalyzer digunakan terutama untuk analisis laboratorium rutin dalam
bidang medis: tingkat albumin, alkali fosfatase, aspartate transaminase
(AST), nitrogen urea darah, bilirubin, kalsium, kolesterol, kreatinin,
glukosa, fosfor anorganik, protein, dan asam urat dalam sampel darah
tubuh serum atau lainnya.
• Autoanalyzer mengotomatisasi langkah analisis sampel berulang yang
seharusnya dapat dilakukan secara manual oleh seorang teknisi shg dapat
menganalisis ratusan sampel setiap hari dengan satu teknisi operasi saja
stnurfitria-2020
Beberapa contoh dari autoanalyzer :
stnurfitria-2020
Cara Kerja Blok Diagram
stnurfitria-2020
Cara Kerja Blok Diagram
• Lampu halogen sebagai sumber cahaya merupakan cahaya Polychromatic
yang mempunyai panjang gelombang 400-800 nm memancarkan
cahayanya masuk ke Monochomator.
• Monochomator menguraikan spektrum warna dari cahaya Polychromatic
menjadi Monochromatic.
• Dari Monochromator, cahaya masuk ke Filter. Filter ini berfungsi memilih
atau melewatkan hanya 1 spectrum cahaya saja sesuai dengan unsur yang
akan di ukur (setiap atom hanya akan menyerap spectrum yang sesuai
dengan energi atom itu sendiri).
• Cahaya yang keluar dari Filter (I0) menyinari kuvet, sehingga molekul di
dalam kuvet akan mengabsorbsi sebuah energi cahaya (foton) dengan pjg
gelombang tertentu dan menghasilkan It.
• Cahaya yang keluar dari cuvette (It) ditangkap oleh detektor yang merubah
energi cahaya menjadi bentuk energi (sinyal-sinyal) listrik yang selanjutnya
dikuatkan oleh Amplifier menjadi data analog yang kemudian dikonversi
menjadi data digital oleh Analog to Digital Converter (ADC) kemudian
diolah oleh Microcontroller dan ditampilkan ke display.
stnurfitria-2020
Macam-macam Autoanalyzer
1. Autoanaliser untuk pemeriksaan hematologi
untuk memeriksa darah lengkap dengan cara menghitung dan
mengukur sel-sel darah secara otomatis berdasarkan variasi
impedansi aliran listrik atau berkas cahaya terhadap sel-sel yang
dilewatkan.
Alat ini bekerja berdasarkan prinsip flowcytometer: metode
pengukuran jumlah dan sifat-sifat sel yang terbungkus oleh aliran
cairan melalui celah sempit. Ribuan sel dialirkan melalui celah
tersebut sedemikian rupa sehingga sel dapat lewat satu per satu,
kemudian dilakukan penghitungan jumlah sel dan ukurannya. Alat
ini juga dapat memberikan informasi intraseluler, termasuk inti sel.
Pemeriksaan yang bisa dilakukan oleh autoanaliser jenis ini adalah
kadar Hb, Jumlah sel-sel darah (eritrosit, leukosit, trombosit), jenis
leukosit, hematokrit, dsb.
stnurfitria-2020
2. Autoanaliser untuk pemeriksaan kimia klinik
mengukur kadar zat-zat yang terkandung dalam darah,
contohnya adalah glukosa, asam urat, SGOT, SGPT,
kolesterol, trigliserida, gamma GT, albumin, dsb.
Prinsip dari alat ini adalah melakukan prosedur
pemeriksaan kimia klinik mulai dari pemipetan sampel,
penambahan reagen, inkubasi, serta pembacaan
serapan cahayanya secara otomatis
Kelebihan autoanaliser adalah bahwa tahapan analitik
dapat dilakukan dengan cepat dan bisa digunakan
untuk memeriksa sampel dengan jumlah banyak secara
bersamaan.
stnurfitria-2020
Kalibrasi
• Untuk autoanaliser kimia klinik, cara kalibrasinya adalah dengan
menggunakan serum control (serum yang sudah diketahui
komposisi dan kadarnya diperiksa dengan menggunakan
autoanaliser seperti halnya memeriksa sampel). Hasil uji sampel
dibandingkan dengan kadar serum control. Jika masih dalam range,
maka autoanaliser masih memberikan hasil yang valid sehingga
dapat digunakan untuk memeriksa sampel.
• Begitu juga untuk autoanaliser hematologi, digunakan darah yang
konsentrasinya sudah diketahui dengan pasti. Darah kontrol
tersebut dilakukan pemeriksaan sama seperti pemeriksaan sampel
lalu hasilnya dibandingkan dengan kadar darah baku/standar
sebenarnya.
• Kalibrasi yang seperti dijelaskan di atas dilakukan setiap hari
sebelum melakukan pemeriksaan pada sampel sehingga hasil yang
didapatkan akurat.
stnurfitria-2020
Alat Cek Darah Otomatis
• Misalnya glucose analyzer
• Bisa juga memiliki tiga
fungsi dalam satu alat:
mengecek kadar gula
darah, asam urat dan
kolesterol dalam darah.
• Dipergunakan pada
pemeriksaan penyakit
kolesterol, asam urat,
diabetes, dan lain
sebagainya.
stnurfitria-2020
URINE ANALYZER
• Fungsi: menganalisa zat-zat kimia
yang terkandung dalam urine,
yang dilengkapi dengan optik,
dan komputer
• Prinsip kerja : mengevaluasi carik
celup/strip test dengan cara
Reflectance Photometry
menggunakan lampu LED
waktu pengukuran dibuat secara
tepat untuk reaksi kimia dan
perubahan warna dari bantalan
pemeriksaan yang diamati.
stnurfitria-2020
PRINSIP KERJA
• Urine analyzer adalah alat semi-otomatis untuk pengecekan yang
dilakukan diluar tubuh untuk mendapatkan hasil pengecekan urine dengan
hasil yang lebih tepat.
digunakan untuk membaca dan mengevaluasi hasil dari Urine Test Strip.
(Contoh: Chemstrip 10MD*, Chemstrip 7, dan Chemstrip 5 OB): strip
multiparameter penentuan berat jenis, pH, leukosit, nitrit, protein,
glukosa, keton, urobilinogen,bilirubin dan darah dalam urin.
stnurfitria-2020
CARA KERJA
1. Strip uji ditempatkan pada baki geser, lalu motor penggerak bergerak ke dalam
alat pembaca. Analisa pad membaca referensi, diikuti oleh masing-masing bagian
uji pada strip. Alat pembaca berisi LED yang memancarkan cahaya pada berbagai
macam panjang gelombang.
2. Pembacaan dilakukan secara ‘electro-optically’ yang dilakukan sebagai berikut:
• Uji pH: pad pengujian berisi indikator metil merah dan bromthymolbiru. Indikator-
indikator ini memberikan perbedaan warna yang jelas pada rentang pH dari 5 sampai
9.1, Dua warna berkisar dari oranye ke kuning dan hijau ke biru.
• Uji Nitrit: Nitrit, jika ada, akan bereaksi dengan amina aromatik untuk memberikan
garam diazonium, lelu terangkai dengan senyawa lebih lanjut, menghasilkan pewarna
merah-ungu azo
• Uji Protein: Tes ini didasarkan pada perubahan warna indikator 3 ', 3 ",5', 5"-
tetrachlorophenol-3, 4, 5, 6-tetrabromosulfophthalein dengan adanya protein. Reaksi
positif ditunjukkan dengan perubahan warna dari kuning ke hijau muda atau hijau
stnurfitria-2020
• Uji Glukosa: deteksi Glukosa didasarkan pada metode enzymatic glucose oxidase/peroxidase
(GOD/POD) atau oksidasi /peroksidasi glukosa enzimatik Reaksi oksidasi glukosa memanfaatkan
enzim untuk mengkatalisis pembentukan asam gluconic dan peroksida hidrogen dari oksidasi
glukosa. Selanjutnya, enzim kedua, peroksidasi,mengkatalisis reaksi hidrogen peroksida dengan
chromogen tetramethylbenzidine untuk membentuk kompleks pewarna hijau. Reaksi positif
ditunjukkan dengan perubahan warna dari kuning ke hijau
• Uji Keton: Berdasarkan prinsip Legal’s Test, natrium nitroprussidedan glisin bereaksi dengan
asetoasetat dan aseton dalam media alkali untuk membentuk kompleks pewarna ungu.Hasil positif
ditunjukkan dengan perubahan warna dari krem ke ungu
• Uji Bilirubin: Deteksi bilirubin berdasarkan pada reaksi penggabungan dari garam diazonium dengan
bilirubin dalam suatu asam menengah. Reaksi menghasilkan warna merah muda menjadi merah-
ungu sebanding dengan konsentrasi totalbilirubin (Beberapa pengguna dapat menggambarkan ini
sebagai krem pada warna persik.)
• Uji Darah: Hemoglobin dan mioglobin, jika ada, mengkatalisisoksidasi indikator dengan peroksida
organik terkandung dalam tes pad. Eritrosit hemolisis utuh pada tes pad dan hemoglobin
membebaskan hemoglobin yang menghasilkan suatu titik hijau. Karena test pad menyerap
beberapa microliter urin, eritrosit akan lebih terlihat. Pada set yang terpisah dari blok warna yang
mewakili eritrosit dan hemoglobin. Titik hijau tersebar atau dipadatkan pada pad tes kuning adalah
indikasi dari eritrosit utuh, atau mioglobin.
stnurfitria-2020
Parameter dan panjang gelombang
yang diukur oleh Urine Analyzer pada
Strip Test
• Berat Jenis: 620 nm
• pH: 620 nm / 557 nm
• Leukosit: 557 nm
• Nitrit: 557 nm
• Darah (eritrosit): 620 nm / 557 nm
• Glukosa: 557 nm
• Keton: 557 nm
• Urobilinogen: 557 nm
• Bilirubin: 557 nm
• Protein: 557 nm
stnurfitria-2020
Timbangan (digital)
• Timbangan Analis Digital (00,0000 mg)
Menimbang bahan dengan kebutuhan < 0,000 mg.
• Timbangan Presisi Digital (0000,00 mg)
Menimbang bahan dengan kebutuhan >0,00 mg.
• Cara kerja:
1. Timbangan dihubungkan dengan listrik
2. Ditekan tombol on
3. Ditekan tombol pengatur nol agar timbangan dalam posisi nol, dan alat
jangan digeser agar keadaan tetap stabil
4. Dimasukkan bahan yang akan ditimbang pada kotak timbangan dan ditutup
kembali
5. Ditunggu beberapa saat agar hasil timbangan stabil dan dicatat hasil yang
didapat.
6. Bila sudah selesai digunakan, ditekan tombol 0ff atau dimatikan
stnurfitria-2020
pHmeter digital
Mengukur derajat keasaman media/larutan
• Cara Kerja:
1. Alat dihubungkan dengan listrik
2. Ditekan tombol on
3. Ditekan tombol menu untuk memilih pH
4. Ditekan tombol setup dua kali, kemudian ditekan tombol
enter untuk bersihkan standardisasi yang ada
5. Ditekan tombol STD untuk memulai kalibrasi yang baru.
6. Dipindahkan electroda dari botol penyimpanan, dibilas
dengan air suling.
7. Larutan buffer dengan pH 4, dengan warna merah muda
diaduk hingga homogen sehingga memenuhi electroda
8. Ditekan tombol STD lagi hingga pembacaan stabil. Ditekanlah
tombol STD lagi untuk mengkalibrasi dengan larutan penyangga
kedua
9. Elektroda dipindahkan dari larutan buffer solution pH 4 dan
dibilas electrode
10. Masukkan electroda dalam penyangga pH 10 dan diaduk
hingga homogen. Ditekan tombol STD lagi untuk mengkalibrasi.
Meter akan tampil hingga nilai stabil
11. Sekarang meter harus dikalibrasi dan siap untuk digunakan
untuk mengukur larutan uji dengan berbagai pH
stnurfitria-2020
pH/blood gas analyzer Sodium/Potassium Analyzer
stnurfitria-2020
BGA
Tujuan Indikasi
• 1. Menilai tingkat 1. Pasien dengan penyakit obstruksi
paru kronik.
keseimbangan asam dan 2. Pasien dengan edema pulmo .
basa 3. Pasien akut respiratori distress
sindrom (ARDS).
• 2. Mengetahui kondisi 4. Infark miokard
fungsi pernafasan dan 5. Pneumonia
kardiovaskuler 6. Klien syok
7. Post pembedahan coronary arteri
• 3. Menilai kondisi fungsi baypass.
metabolisme tubuh 8. Resusitasi cardiac arrest
9. Klien dengan perubahan status
respiratori
10. Anestesi yang terlalu lama.
stnurfitria-2020
• Prinsip Analisis: Gas sampel yang diambil melalui probe
akan masuk ke setiap sampel secara bergiliran dimana
gas sampel akan dibandingkan dengan gas standar
melalui pemencaran system infra red dimana akan
menghasilkan perbedaan panjang gelombang yang
akan dikonversi receiver menjadi signal analog.
stnurfitria-2020
Hot Plate dan Magnetic Stirrer
• Fungsi : Untuk mengaduk,
memanaskan, atau
menghomogenkan agar suatu
campuran cepat merata secara
mekanik dan magnetik
• Prinsip kerja : Pengaduk
elektrik digerakkan oleh
sebuah motor listrik
(elektromotor) dengan
kecepatan 100-1500 rpm
• alat ini menggunakan elektrik
motor sebagai pengaduk dan
filamen pemanas (heater)
sebagai pemanas.
stnurfitria-2020
Hot plate
• Fungsi : Memanaskan
larutan/ sampel
• Prinsip kerja : Menggunakan
elemen panas (plate) untuk
memanaskan suatu larutan
untuk tujuan homogenisasi
• Komponen dalam stirrer:
– Power supply
– Rangkaian sensor suhu
– Rangkaian motor
– Mikrokontroler
– Pemanas
stnurfitria-2020
Hot Plate dan Magnetic Stirrer
(1) Hot Plate – Homogenasi media
Cara Kerja:
1. Alat dihubungkan dengan lisrik
2. Ditaruh tempat yang tahan panas (mis. gelas piala) pada hot plate
3. Diatur suhu dengan memutar alat pengatur suhu dan untuk mengaduk
dengan mengatur putaran stir yang di dalam wadahnya dimasukan magnetik
stirrer
4. Setelah selesai, pengatur suhu dan stir diposisikan dalam kondisi off dan
alat dimatikan
Proses kalibrasi
• gunakan tachometer untuk mengukur kecepatan motor
• termometer untuk mengukur suhu
• stopwatch untuk pengaturan waktunya
stnurfitria-2020
Jenis-jenis Stirrer
stnurfitria-2020
Refractometer
• Fungsi : Untuk mengukur
kadar/konsentrasi dalam
larutan misalnya gula, garam,
protein
• Prinsip kerja : Menggunakan
refraksi cahaya untuk
membandingkan indeks bias
suatu zat dengan indeks bias
bahan yang nilainya sudah
diketahui.
stnurfitria-2020
Pembiasan Cahaya
peristiwa penyimpangan atau pembelokan cahaya karena melalui dua
medium yang berbeda kerapatan optiknya. Arah pembiasan cahaya
dibedakan menjadi dua macam yaitu :
- Mendekati Garis Normal
Cahaya dibiakan mendekati garis normal jika cahaya merambat dari
medium optic kurang rapat kemedium optic lebih rapat, contohnya cahaya
merambat dari .udara kedalam air.
- Menjauhi Garis Normal
Cahaya dibiaskan menjauhi garis normal jika cahaya merambat dari
medium optic lebih rapat kedalam optic kurang rapat, contoh cahaya
merambat dari dalam air ke udara.
stnurfitria-2020
PENGERTIAN REFRAKTOMETER
alat ukur untuk menentukan indeks bias cairan atau padat, bahan
transparan dan refractometry. Misalnya gula, garam, protein, dsb.
ditemukan oleh Dr. Ernest Abbe seorang ilmuan dari German pada
awal abad 20
• Indeks bias adalah perbandingan kecepatan cahaya dalam udara
dengan kecepatan cahaya dalam zat tersebut. Indeks bias berfungsi
untuk identifikasi zat kemurnian, suhu pengukuran dilakukan pada
suhu 20oC dan suhu tersebut harus benar-benar diatur dan
dipertahankan karena sangat mempengaruhi indeks bias.
• Prinsip Kerja Refraktometer memanfaatkan refraksi cahaya.
Pengukurannya didasarkan atas prinsip bahwa cahaya yang masuk
melalui prisma-cahaya hanya bisa melewati bidang batas antara
cairan dan prisma kerja dengan suatu sudut yang terletak dalam
batas-batas tertentu yang ditentukan oleh sudut batas antara cairan
dan alas
stnurfitria-2020
Jenis-jenis Refractometer
1. Refraktometer
genggam tradisional (traditional handheld
refractometers),
2. Refraktometer genggam digital (digital handheld
refractometers),
3. Laboratorium atau refraktometer Abbe
(Abbe refractometers), dan
4. Proses refraktometer in-line (in-line process
refractometers)
stnurfitria-2020
Aplikasi Refractometer dalam Industri
• Dalam kedokteran: mengukur total protein
plasma dalam sampel darah dan berat jenis urin.
• Dalam diagnostik: mengukur berat jenis urin
manusia.
• Dalam gemmology: membantu mengidentifikasi
bahan permata dengan mengukur indeks bias
mereka.
• Dalam akuarium laut: mengukur salinitas dan
berat jenis air.
stnurfitria-2020
CENTRIFUGE
suatu alat yang digunakan
untuk memisahkan partikel-
partikel dengan berat
molekul yang berbeda
dalam suatu larutan.
• Prinsip Kerja: berdasarkan
gaya centrifugal yang timbul
akibat putaran motor listrik.
Makin tinggi putaran motor
maka makin besar pula daya
centrifugal yang dihasilkan
stnurfitria-2020
Sentrifugasi
metode yang digunakan dalam pencapaian sedimentasi dimana partikel-partikel
yang ada di dalam suatu bahan yang dipisahkan dari fluida oleh gaya sentrifugasi
yang dikenakan pada partikel. Tujuannya agar segala bentuk proses pemisahan zat
dapat dipercepat.
Alat sentrifugasi merupakan alat pemisah yang digunakan untuk memisahkan
campuran padat/ cair eatau cair/ cair yang tidak saling larut akibat gaya sentrifugal
dengan cara diputar dngan kecepatan tinggi. Sabagai contoh adalah alat yang
digunakan untuk pemisahan sel-sel padat, bakteri-bakteri atau isotop-isotop
Prinsip kerja
Objek diputar secara horizontal pada jarak radial dari titik dimana dititik tersebut
dikenakan gaya. Pada saat objek diputar, partikel-partikel yang ada akan berpisah
dan berpencar sesuai berat jenis masing-masing partikel. Dengan gaya yang paling
berperan adalah gaya sentrifugal. Dengan adanya teknik ini, proses pengendapan
suatu bahan akan lebih cepat dan optimum dibandingkan dengan teknik biasa.
Dibanding dengan metode gaya berat, kecepatan pengendapan dengan gaya
sentrifugasi jauh lebih baik, percepatan dengan gaya sentrifugasi bisa 500 hingga
1000 kali percepatan gravitasi bumi (gaya berat) yang bisa meningkatkan
kecepatan pengendapan hingga 30 kali.
stnurfitria-2020
Spektrofotometer/Photometer
• Fungsinya: untuk
mengukur intensitas
atau kekuatan cahaya
suatu larutan.
• Cara kerja:
menggunakan cahaya
untuk mengukur
panjang gelombang
tertentu dengan larutan
atau zat warna yang
dilewatinya.
stnurfitria-2020
Spektrofotometer
alat yang digunakan untuk mengukur absorbansi dengan cara
melewatkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu pada
suatu obyek kaca atau kuarsa yang disebut kuvet. Sebagian dari
cahaya tersebut akan diserap dan sisanya akan dilewatkan. Nilai
absorbansi dari cahaya yang dilewatkan akan sebanding dengan
konsentrasi larutan di dalam kuvet.
• Terdiri dari spektrometer dan fotometer.
– Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang
gelombang tertentu
– fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan
atau yang diabsorpsi.
Spektrofotometer digunakan untuk mengukur energi secara relatif jika
energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai
fungsi dari panjang gelombang.
stnurfitria-2020
Spektrofotometer Fotometer urine analyzer
• Panjang gelombang dari sinar • Sinar dengan panjang
putih lebih dapat terseleksi gelombang yang diinginkan
dan ini diperoleh dengan alat diperoleh dengan berbagai
pengurai seperti prisma, filter dari berbagai warna yang
grating ataupun celah optis. mempunyai spesifikasi
• Terdiri dari sumber spektrum melewatkan trayek panjang
tampak yang kontinyu, gelombang tertentu.
monokromator, sel • Tidak mungkin diperoleh
pengabsorpsi untuk larutan panjang gelombang yang
sampel atau blangko dan suatu benar-benar monokromatis,
alat untuk mengukur melainkan suatu trayek
perbedaan absorpsi antara panjang gelombang sebesar
sampel dan blangko ataupun 30-40 nm.
pembanding.
stnurfitria-2020
stnurfitria-2020
BAGIAN ATAU KOMPONEN
SPEKTROFOTOMETER
a. Sumber Cahaya
harus memiliki pancaran radiasi yang stabil dan
intensitasnya tinggi.
Sumber energi cahaya untuk daerah tampak,
ultraviolet dekat, dan inframerah dekat adalah lampu
pijar dengan kawat rambut terbuat dari wolfram
(tungsten). Lampu ini mirip dengan bola lampu pijar
biasa, daerah panjang gelombang 350 – 2200 nm.
b. Monokromator
berfungsi menguraikan cahaya polikromatis menjadi
beberapa komponen panjang gelombang tertentu
(monokromatis) yang berbeda (terdispersi).
stnurfitria-2020
c. Cuvet
alat yang digunakan sebagai tempat sampel yang akan dianalisis.
Biasanya terbuat dari kwarsa, plexigalass, kaca, plastik dengan bentuk
tabung empat persegi panjang 1 x 1 cm dan tinggi 5 cm.
Pada pengukuran di daerah UV dipakai cuvet kwarsa atau plexiglass,
sedangkan cuvet dari kaca tidak dapat dipakai sebab kaca mengabsorbsi
sinar UV. Semua macam cuvet dapat dipakai untuk pengukuran di daerah
sinar tampak (visible).
d. Detektor
memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang.
Detektor akan mengubah cahaya menjadi sinyal listrik yang selanjutnya
akan ditampilkan oleh penampil data dalam bentuk jarum penunjuk atau
angka digital.
stnurfitria-2020
PRINSIP KERJA
• Prinsip kerja spektrofotometer adalah bila cahaya
(monokromatik maupun campuran) jatuh pada suatu
medium homogen, sebagian dari sinar masuk akan
dipantulkan, sebagian diserap dalam medium itu, dan
sisanya diteruskan. Nilai yang keluar dari cahaya yang
diteruskan dinyatakan dalam nilai absorbansi karena
memiliki hubungan dengan konsentrasi sampel.
• Sinar berasal dari dua lampu yang berbeda, yaitu
lampu wolfram untuk sinar Visible (sinar tampak = 380
– 780nm) dan lampu deuterium untuk sinar Ultra
Violet (180-380nm). Pilih panjang gelombang yang
diinginkan/diperlukan.
stnurfitria-2020
stnurfitria-2020
KALIBRASI ALAT SPEKTROFOTOMETER
Kalibrasi yang dimaksud ini adalah men-setting blank alat
spektrofotometer, sebelum digunakan untuk analisis.
Secara umum sbb:
1. Nyalakan alat spektrofotometer
2. Isi kuvet dengan larutan blanko (aquades)
3. Disetting/diatur panjang gelombang untuk kalibrasi.
->keterangan: 0%T itu diukur saat kuvet dalam keadaan
kosong. 100%T itu diukur saat kuvet dalam keadaan terisi
larutan.
5. Kuvet berisi larutan blangko dimasukkan ke
spektrofotometer
6. lalu tekan tombol 0 ABS 100%T, tunggu sampai keluar
kondisi setting blank (dalam bentuk teks)
stnurfitria-2020
SELAMAT BELAJAR
stnurfitria-2020