LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

MODUL FUNGSI NORMAL DIGESTI DAN METABOLIK ENDOKRIN

“UJI KARBOHIDRAT”

Dosen Pengampu :
dr. Septi Handayani, M. Si
Silvani Permatasari, S.Pd., M.Biomed

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS PALANGKARAYA
2020
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Judul Praktikum
UJI KARBOHIDRAT

B. Tanggal Praktikum
Selasa, 10 Maret 2020

C. Latar Belakang
Karbohidrat mempunyai rumus umum Cn(H2O)n. Berdasarkan rumus umumnya, karbohidrat
terdiri dari unsur karbon (C) dan hidrat (air/H2O). Karbohidrat merupakan derivat senyawa
karbonil (aldehid atau keton) yang juga memiliki beberapa gugus hidroksi (polihidroksil).
Karbohidrat dikenal juga dengan nama sakarida. Karbohidrat tersebar luas dalam tumbuhan serta
hewan. Dalam tumbuh-tumbuhan, karbohidrat dihasilkan oleh fotosintesis dan mencakup
selulosa dan pati. Pada jaringan hewan, karbohidrat terdapat dalam bentuk glukosa dan glikogen.

Karbohidrat dapat berupa sakarida tunggal (monosakarida) atau dalam bentuk polimernya
(oligosakarida dan polisakarida). Berdasarkan jumLah sakarida, maka karbohidrat dapat dibagi
menjadi tiga golongan, yaitu monosakarida, oligosakarida, dan. polisakarida.

Monosakarida merupakan karbohidrat dengan sakarida tunggal yang tidak dapat dihidrolisis
menjadi bentuk yang lebih sederhana. Monosakarida dapat dibedakan berdasarkan banyaknya
atom C pada molekulnya, misalnya triosa dengan 3 atom C, tetrosa dengan 4 atom C, pentosa
dengan 5 atom C, dan heksosa dengan 6 atom C. Monosakarida juga dapat dibedakan atas gugus
karbonil yang dikandungnya, yaitu monosakarida dengan gugus aldehid (aldosa) dan
monosakarida dengan gugus keton (ketosa). Contoh monosakarida adalah gliseraldehid,
arabinosa, glukosa, fruktosa, dan galaktosa.

Oligosakarida merupakan karbohidrat yang tersusun dari beberapa monosakarida.

Oligosakarida dapat dihidrolisis menjadi 2 sampai 10 monosakarida. Oligosakarida yang paling
sederhana adalah disakarida. Contoh disakarida yang paling umum adalah maltose, sukrosa,
laktosa.

Polisakarida merupakan polimer yang mempunyai unit monosakarida yang lebih banyak.
Polisakarida jika dihidrolisis menghasilkan lebih dari 10 molekul monosakrida. Glikogen dan
amilum (pati) merupakan polimer glukosa.
 Adapun fungsi dari karbohidrat diantaranya :

1. Sumber energi : fungsi utama karbohidrat adalah menyediakan energi bagi tubuh.
Karbohidrat merupakan sumber utama energi bagi penduduk di seluruh dunia, karena banyak
didapat alam dan harganya relatif murah. Karbohidrat di dalam tubuh berada dalam sirkulasi
darah sebagai glukosa untuk keperluan energi segera;sebagian disimpan sebagai glikogen dalam
hati dan jaringan otot, dan sebagian diubah menjadi lemak untuk kemudian disimpan sebagai
cadangan energi di dalam jaringan lemak.
2. Pemberi rasa manis pada makanan : karbohidrat memberi rasa manis pada makanan,
khususnya mono dan disakarida. Sejak lahir manusia menyukai rasa manis. Alat kecapan pada
ujung lidah merasakan rasa manis tersebut. Gula tidak mempunyai rasa manis yang sama.
Fruktosa adalah gula paling manis.
3. Penghemat protein : bila karbohidrat makanan tidak mencukupi, maka protein akan
digunakan untuk memenuhi kebutuhan energi, dengan mengalahkan fungsi utamanya sebagai zat
pembangun. Sebaliknya, bila karbohidrat makanan mencukupi, protein terutama akan digunakan
sebagai zat pembangun.
4. Pengatur metabolisme lemak : karbohidrat mencegah terjadinya oksidasi lemak yang
tidak sempurna, sehingga menghasilkan bahan-bahan keton berupa asam asetoasetat,aseton, dan
asam beta-hidroksi-butirat.
5. Membantu pengeluaran feses : karbohidrat membantu pengeluaran feses dengan cara
peristaltik usus dan memberi bentuk pada feses. Selulosa dalam serat makanan mengatur
peristaltik usus,sedangkan hemiselulosa dan pektin mampu menyerap banyak air dalam usus
besar sehingga memberi bentuk pada sisa makanan yang akan dikeluarkan.

D. Tujuan Praktikum
Mahasiswa dapat mengetahui atau mengidentifikasi ada atau tidaknya karbohidrat pada suatu
bahan dengan menggunakan metode tes molish, tes benedict, tes barfoed, tes seliwanoff, tes
iodium, tes hidrolisis sukrosa, dan tes hidrolisis amilum.
E. Manfaat Praktikum

Dengan melakukan praktikum ini, diharapkan dapat mengetahui sampel mengandung

karbohidrat atau tidak serta mengetahui sampel termasuk pada golongan karbohidrat tertentu.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. Dasar Teori
UJI MOLISH – AMILUM 2%
Tes Molisch tes ini khusus untuk mukoprotein (glikoprotein) yaitu protein majemuk yang gugus
protetisnya karbohidrat. Tes Molisch ini sebenarnya adalah tes umum terhadap keberadaan
karbohidrat, tetapi dapat juga digunakan untuk menunjukkan adanya protein yang memiliki
gugus prostetis gula.
Dalam hal ini, protein majemuk oleh pengaruh asam sulfat akan terhidrolisa menjadi protein
sederhana dan karbohidrat. Karbohidrat yang terjadi ini juga mengubah hidrolisa menjadi
monosakarida-monosakarida. Monosakarida yang terbentuk ini akan mengalami dehidrasi
menjadi furfural hidroksi metil furfural, yang kemudian terkondensasi dengan a-naftol
membentuk persenyawaan yang berwarna ungu. Dari hal ini dapat disimpulkan bahwa yang
memberikan warna ungu bukan protein tetapi adalah karbohidrat.

UJI BENEDICT – GLUKOSA 0,5%

Uji benedict adalah untuk membuktikan adanya gula pereduksi. Gula pereduksi adalah gula yang
mengalami reaksi hidrolisis dan bisa diurai menjadi sedikitnya dua buah monosakarida.
Karateristiknya tidak bisa larut atau bereaksi secara langsung dengan benedict. Misalnya semua
golongan monosakarida, sedangkan gula non pereduksi struktur gulanya berbentuk siklik yang
berarti bahwa hemiasetal dan hemiketalnya tidak berada dalam kesetimbangannya, contohnya
fruktosa dan sukrosa. Dengan prinsip berdasarkan reduksi Cu2+ menjadi Cu+ yang mengendap
sebagai Cu2O berwarna merah bata. Untuk menghindari pengendapan CuCO 3 pada larutan
natrium karbonat (reagen benedict), maka ditambahkan asam sitrat. Larutan tembaga alkalis
dapat direduksi oleh karbohidrat yang mempunyai gugus aldehid atau monoketon bebas,
sehingga sukrosa yang tidak mengandung aldehid atau keton bebas tidak dapat mereduksi larutan
benedict.
UJI BENEDICT – SUKROSA 2%
Uji benedict untuk membuktikan adanya gula pereduksi. Gula pereduksi adalah gula yang
mengalami reaksi hidrolisis dan bisa diurai menjadi sedikitnya dua buah monosakarida.
Karateristiknya tidak bisa larut atau bereaksi secara langsung dengan benedict. Misalnya semua
golongan monosakarida, sedangkan gula non pereduksi struktur gulanya berbentuk siklik yang
berarti bahwa hemiasetal dan hemiketalnya tidak berada dalam kesetimbangannya, contohnya
fruktosa dan sukrosa. Dengan prinsip berdasarkan reduksi Cu2+ menjadi Cu+ yang mengendap
sebagai Cu2O berwarna merah bata. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya endapan
berwarna biru kehijauan, merah, atau kuning tergantung kadar gula pereduksi yang ada.
Gula reduksi dapat dibuktikan dengan terbentuknya endapan yang berwana merah bata. Akan
tetapi tidak selamanya warna larutan atau endapan yang tebentuk berwarna merah bata, hal ini
bergantung pada konsentrasi atau kadar gula reduksi yang dikandung oleh tiap-tiap larutan uji.
Terbentuknya endapan merah bata ini sebagai hasil reduksi ion Cu2+ menjadi ion Cu+ oleh
suatu gugus akleid atau keton bebas yang teradung dalam gula reduksi yang berlangsung dalam
suasana basa. Sifat basa yang dimiliki oleh pereduksi Benedict ini dikarenakan adanya senyawa
Natrium Karbonat.

UJI BARFOED – GLUKOSA 2%

Pada uji Barfoed untuk memisahkan antara monosakarida dengan disakarida yang dapat
memproduksi ion kupri. Reagen barfoed bereaksi dengan monosakarida untuk menghasilkan
kupri oksida lebih cepat dibandingkan disakarida. Dalam uji barfoed Cu2+ tereduksi menjadi
Cu2O pada larutan asam lemah. Secara praktek,dapat dilihat bahwa monosakarida mengurangi
lebih cepat pada larutan asam lemah disakarida.

UJI BARFOED – SUKROSA 2%

Mekanisme uji Barfoed yaitu larutan Barfoed akan bereaksi dengan gula reduksi (monosakarida)
sehingga dihasilkan endapan merah kuprioksida. Dalam suasana asam ini gula reduksi yang
termasuk dalam golongan disakarida memberikan reaksi yang sangat lambat dengan larutan
Barfoed sehingga tidak memberikan endapan merah kecuali pada waktu percobaan yang cukup
lama. Uji ini bertujuan untuk menunjukkan gula pereduksi monosakarida.
Pereaksi ini terdiri atas larutan kupriasetat dan asam asetat dalam air, dan digunakan untuk
membedakan antara monosakarida dengan disakarida. Monosakarida dapat mereduksi lebih
cepat daripada disakarida. Jadi Cu2O terbentuk lebih cepat oleh monosakarida daripada oleh
disakarida, dengan anggapan bahwa konsentrasi monosakarida dan disakarida dalam larutan
tidak berbeda banyak, Tauber dan Kleiner membuat modifikasi atas pereaksi ini, yaitu dengan
cara mengganti asam asetat dengan asam laktat dan ion Cu2+ yang dihasilkan direaksikan
dengan pereaksi warna fosfomolibdat hingga menghasilkan warna biru yang menunjukkan
adanya monosakarida. Disakarida dengan konsentrasi rendah tidak memberikan hasil positif.

UJI SELIWANOFF – GLUKOSA 2%

Pada uji seliwanoff, jika gula tersebut mempunyai gugus keton disebut ketosa. Sebaliknya jika ia
mengandung gugus aldehida, ia adalah aldosa. Uji seliwanoff adalah uji yang membedakan dari
aldosa dan ketosa. Ketosa dibedakan dari aldosa via gugus fungsi keton/aldehida gula tersebut.
Jika gula tersebut mempunyai gugus keton, ia adalah ketosa. Sebaliknya jika ia mengandung
gugus aldehida, ia adalah aldosa. Uji ini didasarkan pada fakta bahwa ketika dipanaskan, ketosa
lebih cepat terhidrasi dari pada aldosa. Reagen iji seliwanoff terdiri dari resorsianol dan asam
klorida pekat : Asam reagen ini menghidrolisis polisakarida dan oligoskarida menjadi gula
sederhana ; Ketosa yang terhidrasi kemudian bereaksi dengan resorsinol, menghasilkan zat
warna merah.

UJI IODIUM – AMILUM 2%

Amilum merupakan karbohidrat dalam bentuk simpanan bagi tumbuh-tumbuhan dlm bentuk
granul yang dijumpai pada umbi & akarnya. Menurut sumber umbi-umbian,serealia dan biji-
bijian merupakan sumber amilum yang berlimpah ruah oleh karena mudah didapat untuk di
konsumsi. Jagung, beras dan gandum kandunan amilumnya lebih dari 70 %, sedangkan pada
kacang-kacangan sekitar 40%.
Iodin merupakan salah satu anggota halogen yang berupa padatan pada temperatur kamar
hingga untuk keperluan percobaan mudah ditangani. Iodin mempunyai karakteristik antara lain
sifat polaritas yang signifikan dalam golongannya hingga kelarutannya dalam pelarut dengan
berbagai tingkat kepolaran dapat di identifikasi. Sifat lain yang sangat dramatik yaitu
interaksinya dengan amilum menghasilkan warna biru dan ini merupakan indikator untuk
membedakan dengan ionnya iodida ; dengan demikian sifat sebagai oksidator dalam sistem I2 –
I- sangat informatif dalam proses redoks. Karakteristik lain yang berbeda dari golongannya yaitu
kemampuannya membentuk senyawa komplek sebagai ion I3- ( I2 dalam I- ).
Iodin terdapat di air laut hanya sampai kadar 6.10-7 %, tetapi senyawa ini terkonsentrasi dalam
spesies rumput laut tertentu, dimana abunya dapat dijadikan sebagai sumber iodin yang layak
untuk diperjualbelikan. Iodin terkandung dalam hormon pengatur pertumbuhan tiroksin, yang
dihasilkan oleh kelenjar tiroid. Kebanyakan garam dapur yang dijual mengandung 0,01 %. NaI
tambahan untuk mencegah penyakit gondong, yaitu pembengkakan kelenjar tiroid. Perak iodida
digunakan dalam film fotografik berkecepatan tinggi. Karbohidrat yang tidak bisa dihrolisis ke
susunan yang lebih simpel dinamakan monosakarida, karbohidrat yang dapat dihidrolisis
menjadi dua molekul monosakarida dinamakan disakarida. Sedangkan karbohidrat yang dapat
dihidrolisis menjadi banyak molekul monosakarida dinamakan polisakarida. Monosakarida bisa
diklasifikasikan lebih jauh, jika mengandung grup aldehid maka disebut aldosa, jika
mengandung grup keton maka disebut ketosa. Glukosa punya struktur molekul C6H12O6,
tersusun atas enam karbon, rantai lurus, dan pentahidroksil aldehid maka glukosa adalah aldosa.
Contoh ketosa yang penting adalah fruktosa, yang banyak ditemui pada buah dan berkombinasi
dengan glukosa pada sukrosa disakarida.

UJI IODIUM – SUKROSA 2%

Uji Iodium digunakan untuk memisahkan amilum atau pati yang terkandung dalam larutan.
Reaksi positifnya ditandai dengan adanya perubahan warna menjadi biru. Warna biru yang
dihasilkan diperkirakan adalah hasil dari ikatan kompleks antara amilum dengan Iodin. Sewaktu
amilum yang telah ditetesi Iodin kemudian dipanaskan, warna yang dihasilkan sebagai hasil
darireaksi yang positif akan menghilang. Dan sewaktu didinginkan warna biru akan muncul
kembali.
Uji iodium digunakan untuk membuktikan adanya polisakarida. Polisakarida dengan
penambahan iodium akan membentuk kompleks adsorbsi berwarna yang spesifik. Larutan uji
dicampurkan dengan larutan iodium. Hasil positif ditandai dengan amilum dengan iodium
berwarna biru, dan dekstrin dengan iodium berwarna merah anggur.

UJI HIDROLISIS SUKROSA – BENEDICT

Uji Benedict dilakukan untuk membuktikan adanya gula pereduksi. Larutan uji dicampurkan
dengan pereaksi Benedict kemudian dipanaskan. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya
endapan berwarna biru kehijauan, merah, atau kuning tergantung kadar gula pereduksi yang ada.
Dalam uji ini, suatu gula reduksi dapat dibuktikan dengan terbentuknya endapan yang berwarna
merah bata. Akan tetapi tidak selamanya warna larutan atau endapan yang terbentuk berwarna
merah bata, hal ini bergantung pada konsentrasi atau kadar gula reduksi yang dikandung oleh
tiap-tiap larutan uji. Terbentuknya endapan merah bata ini sebagai hasil reduksi ion Cu2+
menjadi ion Cu+ oleh suatu gugus aldehid atau keton bebas yang terkandung dalam gula reduksi
yang berlangsung dalam suasana alkalis (basa). Sifat basa yang dimilki oleh pereaksi Benedict
ini dikarenakan adanya senyawa natrium karbonat.
UJI HIDROLISIS AMILUM – BARFOED
Uji Barfoed adalah uji untuk membedakan monosakarida dan disakarida dengan mengontrol
kondisi pH serta waktu pemanasan. Untuk melakukan uji barfoed, terlebih dahulu harus di
siapkan reagennya. Reagent Barfoed terdiri dari larutan 0,33 molar tembaga asetat netral dalam
1% larutan asam asetat. Prinsipnya berdasarkan reduksi Cu2+ menjadi Cu+. Mekanisme uji
barfoed yaitu larutan Barfoed akan bereaksi dengan gula reduksi (monosakarida) sehingga
dihasilkan endapan merah kuprioksida. Disakarida juga dapat memberikan hasil yang positif
pada reaksi ini, yaitu sekitar 10 menit, lebih lambat dibandingkan monosakarida yang hanya
membutuhkan waktu 2-3 menit.
 BAB III
METODOLOGI PRAKTIKUM

UJI MOLISH – GLUKOSA 2%

A. Alat dan Bahan

1. Tabung reaksi

2. Pipet tetes pengukuran

3. Glukosa 2%

4. Pereaksi molish

5. H2SO4 pekat

B. Langkah Kerja

1. Masukkan 1 ML larutan sampel ke dalam tabung reaksi (beri label 3.1.1dst)

2. Tambahkan 1 ML Pereaksi Molish, campur secara sempurna
3. Miringkan tabung dan alirkan 1 ML aam sulfat pekat melalui dinding tabung sehingga
tercampur
4. Reaksi positif ditandai dengan pembentukan cincin ungu pda perbatasan kedua lapisan
cairan.

UJI MOLISH – SUKROSA 2%

A. Alat dan Bahan

1. Tabung Reaksi
2. Gelas Kimia
 3. Pipet tetes
4. Label
5. Sukrosa 2 %
6. Pereaksi Molish ( Larutan 25 g α-naftol dalam 500 mL alcohol 95 % )
7. H2SO4 Pekat

B. Langkah Kerja
1. Masukin 1 mL larutan sampel ke dalam tabung reaksi ( beri label 3.1.3 )
2. Tambahkan 1 mL pereaksi molish,campur secara sempurna.
3. Miringkan tabung dan alirkan 1 mL asam sulfat pekat melalui dinding tabung sehingga
tercampur.
4. Reaksi positif ditandai dengan pembentukan cincin ungu pada perbatasan kedua lapisan
cairan.

UJI MOLISH – AMILUM 2%

A. Alat dan Bahan
1. Tabung Reaksi
2. Penangas Air
3. Gelas Kimia
4. Pipet Tetes
5. Tisu
6. Amilum 2% 1 Ml
7. Asam sulfat pekat (H2SO4) 1 ml
8. Pereaksi Molish 1 ml

B. Langkah Kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2. Memasukkan 1 ml amilum 2% ke dalam tabung reaksi.
3. Memasukkan 1 ml pereaksi Molish ke dalam tabung reaksi yang sudah berisikan amilum
2%.
4. Mencampurkan secara sempurna tabung reaksi tersebut.
 5. Lalu menambahkan 1 ml asam sulfat pekat (H2SO4) dengan cara memiringkan tabung
reaksi kemudian alirkan melalui dinding tabung sehingga tercampur.
6. Mengamati perubahan reaksi (warna) yang terjadi.
7. Mencatat hasil pengamatan.

UJI BENEDICT – GLUKOSA 0,5%

A. Alat dan Bahan
1. Tabung reaksi
2. Pipet tetes
3. Tissue
4. Label
5. Pipet volume
6. Alat tulis (pulpen dan kertas folio bergaris)
7. Buku panduan praktikum
8. 1 mL larutan glukosa 2% : sampel
9. 1 mL larutan pereaksi molish : larutan 25g α-naftol dalam 500 mL alkohol 95%
10. 1 mL larutan asam sulfat

B. Langkah Kerja
1. Masukkan 1 mL larutan sampel ke dalam tabung reaksi
2. Tambahkan 1 mL pereaksi molish, campur secara sempurna
3. Miringkan tabung dan alirkan 1 mL asam sulfat pekat melalui dinding tabung sehingga
tercampur
4. Reaksi positif ditandai dengan pembentukan cincin ungu pada perbatasan kedua lapisan
cairan.
UJI BENEDICT – GLUKOSA 2%

A. Alat dan Bahan

 Larutan Benedict
 Larutan Glukosa 2%
 Pipet Tetes
 Tabung Reaksi

B. Langkah Kerja

 Masukkan 1 ml larutan Benedict kedalam tabung reaksi (beri label 3,2,1 dst).
 Tambahkan 4 tetes larutan sampel.
 Campur dan didihkan selama 2 menit atau dimasukkan kedalam penangas air mendidih
selama 5 menit.
 Dinginkan perlahan-lahan. Perhatikan warna yang terbentuk. Endapan berwarna hijau,
kuning, atau merah menandakan reaksi positif.

UJI BENEDICT – SUKROSA 2%

A. Alat dan Bahan
1. Tabung reaksi
2. Penangas air
3. Gelas kimia
4. Indikator universal
5. Larutan sukrosa 2%
6. Pereaksi Benedict
7. Pipet tetes
8. Penjepit tabung
B. Langkah Kerja
1. Masukkan 1 mL larutan Benedict kedalam tabung reaksi (beri label 3.2.1 dst)
2. Tambahkan 4 tetes larutan sampel yaitu sukrosa 2%.
3. Panaskan dalam penangas air mendidih selama 5 menit.
4. Dinginkan perlahan-lahan.
5. Perhatikan warna yang terbentuk.
6. Perhatikan warna endapan jika berwarna hijau, kuning, atau merah menandakan reaksi
positif
UJI BARFOED - GLUKOSA 2%

A. Alat dan Bahan

1. Tabung reaksi
2. Penangas air
3. Gelas kimia
4. Indikator universal
5. Glukosa 2%
6. Pereaksi Barfoed
7. Pipet tetes
8. Akuades
9. Penjepit tabung

B. Langkah Kerja
1. Masukkan 1mL larutan Barfoed kedalam tabung reaksi dan 1mL larutan sampel yaitu
glukosa 2% (di beri label 3.3.1).
2. Panaskan dalam penangas air mendidih selama 3 menit.
3. Dinginkan dalam air dingin.
4. Tambahkan 1mL pereaksi molibdat.
5. Perhatikan perbedaan warnanya.

UJI BARFOED – SUKROSA 0,5%

A. Alat dan Bahan
1. Tabung Reaksi
2. Penangas air
3. Gelas Kimia
4. Indikator universal
5. Kapas
6. Sukrosa 0,5%
7. Pereaksi Barfoed
B. Langkah Kerja
1. Masukan 1 ml larutan barfoed kedalam tabung reaksi.
2. Larutkan sampel 1 Ml (sukrosa 0,5%)
3. Panaskan dipemanas air medidih selama 3 menit
4. Dinginkan dalam air dingin
5. Tambahkan 1 ml reaksi moblidat

UJI BARFOED - SUKROSA 2%

A. Alat dan Bahan

1. Tabung Reaksi
2. Pipet Tetes
3. Rak Tabung Reaksi
4. Kertas Label
5. Penjepit Tabung
6. Penangas Air
7. Larutan Barfoed
8. Larutan Pereaksi Molibdat
9. Larutan Sukrosa 2%

B. Langkah Kerja
1. Alat dan bahan untuk melakukan uji disiapkan.
2. Reagen Barfoed dimasukkan kedalam tabung reaksi masing - masing 1 ml.
3. Kemudian ditambahkan masing-masing 1 ml larutan karbohidrat (sukrosa 2%) yang akan
diuji.
4. Selanjutnya larutan dipanaskan dalam penangas air selama 3 menit.
5. Dinginkan dalam air.
6. Tambahkan 1 ml pereaksi Molibdat.
7. Setelah itu diamati perubahan yang terjadi kemudian hasilnya dicatat dan
didokumentasikan.
UJI SELIWANOFF – GLUKOSA 2%
A. Alat dan Bahan
1. Tabung reaksi
2. Gelas ukur 25 ml
3. Penjepit tabung reaksi
4. Pipet tetes
5. Reagen seliwanoff 5 ml
6. Glukosa 2% 0,5 ml
7. Pembakar spritus

B. Langkah Kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan;
2. Mengisi tabung reaksi dengan reagen uji seliwanoff sebanyak 5 ml;
3. Tambahkan 0,5 ml larutan glukosa 2% kedalam tabung reaksi;
4. Panaskan dalam pembakar spritus selama 30 detik;
5. Mengamati perubahan yang terjadi;
6. Mencatat hasil pengamatan;
7. Membersihkan peralatan dan menyimpannya pada tempatnya.

UJI SELIWANOFF - SUKROSA 2%

A. Alat dan Bahan

1. Tabung reaksi 2 buah
2. Pipet Tetes 2 buah
3. Pembakar spirtus
4. Penjepit kayu
5. 5 ml pereaksi seliwanoff
6. 0,5 ml sukrosa 2%
B. Langkah Kerja
1. Siapkan alat dan bahan
2. Beri label pada tabung sampel dan tabung pereaki seliwanoff
3. Masukkan 0,5ml sukrosa 2% pada tabung sampel dengan pipet
4. Masukkan 5ml pereaksi seliwanoff padad tabung pereaksi
5. Campurkan 5ml pereaksi seliwanoff pada tabung sampel
6. Didihkan campuran tersebut pada pembalar spirtus selama 30 detik
7. Amati perubahan yang terjadi

UJI IODIUM – AMILUM 2%

A. Alat dan Bahan

1. Plat Tetes

2. Pipet Tetes

3. Tisu

4. Handscoon

5. Iodium 0,1 N

6. Amilum 2 %

B. Langkah Kerja

1. Menggunakan Handscoon

2. Menyiapkan alat dan bahan

3. Mengambil plat tetes 1 buah

4. Meneteskan 1 tetes amilum 2% ke plat tetes

5. Setelah itu, meneteskan larutan iodium 0,1 N ke dalam plat tetes yang berisi amilum 2%
 6. Mengamati perubahan warna

7. Ambil gambar hasil percobaan

8. Lakukan percobaan tersebut sebanyak 3 kali

9. Membersihkan alat dan merapikan bahan

UJI IODIUM - GOM ARAB

A.Alat dan Bahan

1. Plat Tetes
2. Pipet Tetes
3. Larutan Iodium Cair
4. Larutan Gom Arab Cair

B.Langkah Kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2. Masukkan 1 tetes larutan gom arab ke dalam plat tetes.
3. Masukkan 1 tetes larutan iodium ke dalam plat tetes yang sudah berisi larutan gom arab.
4. Amati perubahan warna dan wujud yang terjadi.
5. Ulangi percobaan beberapa kali untuk memastikan perubahan yang terjadi.
6. Catat hasil praktikum

UJI IODIUM – SUKROSA 2%

A. Alat dan Bahan
1. Plat tetes
2. Pipet tetes
3. Tisu
4. Larutan Sukrosa 2%
5. Larutan Iodium encer
B. Langkah Kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2. Meneteskan satu tetes larutan sukrosa 2% di plat tetes menggunakan pipet tetes.
3. Meneteskan satu tetes larutan iodium encer di plat tetes yang sudah tersedia larutan sukrosa
2%.
4. Meggoyangkan larutan supaya tercampur rata, lalu melihat perubahan warna yang terjadi.
5. Membersihkan alat dan bahan yang telah digunakan.
6. Mengulangi langkah 1 – 5 sebanyak tiga kali.

UJI HIDROLISIS SUKROSA – BENEDICT

A. Alat dan Bahan
1. Tabung Reaksi
2. Penangas Air
3. Gelas Kimia
4. Indikator Universal
5. Kapas
6. Penjepit tabung reaksi
7. Pipet
8. Sukrosa 2%
9. Amilum 2%
10. Pereaksi Benedict
11. HCL Pekat

B. Langkah Kerja

1. Masukkan 10 mL larutan sukrosa 2% dimasukkan ke dalam gelas kimia 100 mL.

2. Tambahkan 5 tetes HCl pekat dan panaskan dalam air mendidih selama 3 menit.
3. Dinginkan dan netralkan pHnya, lalu encerkan sampai 20 mL.
4. Periksa larutan yang telah dihidrolisis dengan tes Benedict, Barfoed, dan Seliwanoff
5. Masukkan 1 mL larutan Benedict ke dalam tabung reaksi.
6. Tambahkan 4 tetes larutan sampel.
7. Campur dan panaskan selama 2 menit.
 8. Dinginkan perlahan-lahan.
9. Perhatikan warna yang terbentuk. Endapan berwarna hijau, kuning, atau merah
menandakan reaksi positif.

UJI HIDROLISIS SUKROSA - BARFOED

A. Alat dan Bahan

1. Tabung Reaksi
2. Penangas Air
3. Gelas Kimia
4. Indikator Universal
5. Penjepit tabung reaksi
6. Pipet
7. Sukrosa 2%
8. Pereaksi Barfoed
9. HCL Pekat

B. Langkah Kerja
1. Masukkan 10 mL larutan sukrosa 2% dimasukkan ke dalam gelas kimia 100 mL.
2. Tambahkan 5 tetes HCl pekat dan panaskan dalam air mendidih selama 3 menit.
3. Dinginkan dan netralkan pHnya, lalu encerkan sampai 20 mL.
4. Periksa larutan yang telah dihidrolisis dengan tes Barfoed.

UJI HIDROLISIS SUKROSA – SELIWANOFF

A. Alat dan Bahan
1. Tabung reaksi
2. Gelas kimia
3. Pipet tetes
4. Pipet ukur
5. Pemanas/ kompor listrik
6. Penjepit
7. Stopwatch
 8. Pereaksi seliwanof
9. Aquades
10. Larutan sukrosa 2%
11. Larutan HCl

B. Langkah Kerja
1. Masukkan 10 mL larutan sukrosa 2% dimasukkan ke dalam gelas kimia 100 mL.
2. Tambahkan 5 tetes HCl pekat dan panaskan dalam air mendidih selama 30 menit.
3. Dinginkan dan netralkan pHnya, lalu encerkan sampai 20 mL.
4. Periksa larutan yang telah dihidrolisis dengan tes Benedict, Barfoed, dan Seliwanoff
(tabung reaksi beri label 3.7.2, 3.7.3, dan 3.7.4 yang sudah disediakan).
1. Masukkan 0,5 mL larutan sampel ke dalam tabung reaksi.
2. Tambahkan 5 mL pereaksi Seliwanoff.
3. Didihkan selama 30 detik atau panskan dalam penangas air mendidih selama 1 menit.
4. Perhatikan warna merah yang terjadi.

UJI HIDROLISIS AMILUM - BENEDICT

A. Alat dan Bahan

1. Tabung Reaksi
2. Penangas Air
3. Gelas Kimia
4. Indikator universal
5. Tissue
6. Pipet
7. Plat tetes
8. Air Liur (Saliva)
9. Amilum 2%
10. Larutan Iodium
11. Pereaksi Benedict
B. Langkah Kerja

1. Mempersiapkan alat dan bahan.

2. Memasukkan air liur (saliva) sebanyak 2 ml ke dalam 10 ml larutan Amilum 2% dan
aduklah.
3. Meletakkan larutan tersebut ke dalam penangas air 37⁰C.
4. Mengambil beberapa tetes larutan setiap 0,5 menit dan menempatkan pada plat tetes.
5. Mencampur larutan tersebut dengan beberapa tetesan iodium dengan perbandingan 1:1.
6. Mengulangi cara 4 & 5 sampai larutan tidak menimbukan warna (titik akromik) dan
menentukan berapa waktunya.
7. Pada Tes Benedict mencampur 4 tetes larutan sampel dengan 1 ml larutan benedict lalu
didihkan selama 2 menit dan amati perubahannya.

UJI HIDROLISIS AMILUM - BARFOED

A. Alat dan Bahan

1. Tabung Reaksi
2. Penangas Air
3. Gelas Kimia
4. Indikator universal
5. Tissue
6. Pipet
7. Plat tetes
8. Air Liur (Saliva)
9. Amilum 2%
10. Larutan Iodium
11. Pereaksi Barfoed
B. Langkah Kerja

1. Mempersiapkan alat dan bahan.

2. Memasukkan air liur (saliva) sebanyak 2 ml ke dalam 10 ml larutan Amilum 2% dan
mengaduknya.
3. Meletakkan larutan tersebut ke dalam penangas air 37⁰C.
4. Mengambil beberapa tetes larutan mulai menit ke 3 dan setiap 1 menit menempatkan pada
plat tetes.
5. Mencampur larutan tersebut dengan beberapa tetesan iodium dengan perbandingan 1:1.
6. Mengulangi cara 4 & 5 sampai larutan tidak menimbukan warna (titik akromik) dan
menentukan berapa waktunya.
7. Pada Tes Barfoed mencampur 1 ml larutan sampel dengan 1 ml larutan barfoed lalu
dididihkan dalam penangas air mendidih selama 3 menit lalu mengamati perubahannya.

UJI HIDROLISIS AMILUM – SELIWANOFF

A.Alat dan Bahan
1. Tabung Reaksi
2. Penangas Air
3. Gelas Kimia
4. Indikator universal
5. Tissue
6. Pipet
7. Plat tetes
8. Air Liur (Saliva)
9. Amilum 2%
10. Larutan Iodium
11. Pereaksi Seliwanoff
B. Langkah Kerja
1. Mempersiapkan alat dan bahan.
2. Memasukkan air liur (saliva) sebanyak 2 ml ke dalam 10 ml larutan Amilum 2% dan
mengaduknya.
3. Meletakkan larutan tersebut ke dalam penangas air 37⁰C.
4. Mengambil beberapa tetes larutan mulai menit ke 3 dan setiap 1 menit menempatkan pada
plat tetes.
5. Mencampur larutan tersebut dengan beberapa tetesan iodium dengan perbandingan 1:1.
6. Mengulangi cara 4 & 5 sampai larutan tidak menimbukan warna (titik akromik) dan
menentukan berapa waktunya.
7. Pada Tes Seliwanoff mencampur 0,5 larutan sampel dengan 5 ml larutan seliwanoff lalu
dididihkan selama 30 detik lalu mengamati perubahannya.
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pengamatan
UJI MOLISH – GLUKOSA 2%

Kelompok 4
Aulia Ramadhani Ansar 193010801005
Angelica kristiana Juliagnes 193010801009

Sampel Pereaksi Warna sebelum Warna setelah Hasil Hasil 2

pemberian larutan pemberian larutan H2SO4 1
H2SO4
Glukosa Larutan Bening Terbentuk cincin ungu pada + +
2% molish pada perbatasan larutan

UJI MOLISH – GLUKOSA 2%

Kelompok 1
Keshia Abigail (193010801001)
Tasya Salsabila Putri (193030801101 )

Uji 1
Jenis Tes Sampel Hasil Positif, Apabila positif,
sebutkan warna dan bentuk
larutan atau endapannya
Molish Glukosa 2% Membentuk cincin
 Gambar 1 perlakuan asam sulfat

Uji 2
Jenis Tes Sampel Hasil Positif, Apabila
positif, sebutkan warna dan
bentuk larutan atau
endapannya
Molish Glukosa 2% Hasil dari uji molish (glukosa
2%) positif karena larutan
berwarna ungu

Gambar 2 perlakuan terbentuk menjadi cincin

ungu pada endapan glukosa
UJI MOLISH – SUKROSA 2%

Kelompok 4
Desi Rahma Maulia (193010801002)
Elma Pransiska (193010801015)

1. Sampel 1 mL ( sukrosa 2 % ) masuk ke dalam tabung reaksi

Reaksinya :
- Belum berubah warna atau bentuk
- Warna larutan tetap bening
2. Sampel 1 mL ( Sukrosa 2 % ) tadi di tambahkan dengan 1 mL Pereaksi molish
Reaksinya :
- Ukuran cairan bertambah
- Warna larutan belum berubah tetap bening
3. 1 mL sukrosa 2 % di campur dengan 1 mL Pereaksi molish dengan sempurna lalu tabung
dalam kondisi di miringkan.
4. 1 mL Asam sulfat pekat ( H2SO4 ) di masukkin ke dalam tabung yang dalam posisi miring
kemudian campur secara merata.
Reaksinya :
- Ukuran cairan bertambah
- Warna larutan berubah dengan ditandai adanya cincin ungu pada perbatasan lapisan cairan

Hasil Akhir :
UJI MOLISH – AMILUM 2%
Kelompok 7
Ditta Zuchrifahnur Capandri 193020801049
Natasha Amelia Putri 193020801050

Jenis Tes : Molish

Sampel : Amilum 2%
Hasil : Positif (+), terdapat cincin berwarna ungu pada perbatasan kedua lapisan cairan.

UJI BENEDICT – GLUKOSA 0,5%

Dipo Nusantara Aidit (193020801075) – Kelompok 6
Harry Kusuma Atmaja (193020801042) – Kelompok 6

Jenis Tes Sampel Hasil Positif

Tes Benedict Glukosa 0,5% Terbentuk Sedikit Endapan berwarna

merah.
Warna Larutan berubah menjadi hijau
sedikit gelap
Hasil Positif
Perubahan Endapan terlihat di waktu 2
menit 20 detik.

UJI BENEDICT – SUKROSA 2%

Kelompok 9
Ivana Miranda Hutabarat ( 193030801057 )
Friska Regita Anggraeni ( 193030801076 )

JENIS TES SAMPEL HASIL

Tes Benedict Sukrosa 2%

 Hasil
positif(+)

Warna :
orange

Endapan:
berwarna
merah bata

a. Warna sebelum dipanaskan b. Warna sesudah dipanaskan

UJI BARFOED – GLUKOSA 2%

Annisa Rahmadita ( 193020801022 - Kelompok 3 )
Greis Febiany Talent ( 193010801011 - Kelompok 3 )

JENIS TES SAMPEL HASIL

Tes Barfoed Glukosa 2% Hasil (+) biru muda, tetapi
endapan (-)

UJI BARFOED – SUKROSA 2%

Mardiyanti Sarampang (193030801048 – Kelompok 4)

Rachel Sarita Saloh (193020801017 – Kelompok 5)

 (Sebelum) (Sesudah)

UJI SELIWANOFF – GLUKOSA 2%

Kelompok 5

Natasya Dhaniang 193020801033

Tasya Agatha Asi Lambung 193030801069

Perlakuan Hasil Lampiran

Masukan glukosa 2% Warna bening

sebanyak 0,5 ml kedalam
tabung reaksi

Ambil larutan Seliwanoff ke Warna bening

gelas ukur sebanyak 5ml
Campurkan larutan Warna bening
Seliwanoff ke dalam tabung
reaksi yang berisi glukosa
2%

Panaskan tabung reaksi Warna mulai berubah

tersebut di pembakar spiritus
selama 30 detik

Setelah 30 detik dipanaskan, Warna merah

warna berubah total

Jenis Tes Sampel Hasil Positif

Seliwanoff Glukosa 2% Warna: Merah

Endapan: tidak ada
 Bentuk Larutan: cair

UJI SELIWANOFF – SUKROSA 2%

Kelompok 7

Oberson Nainggolan (193020801046)

Parameswara Bentang Cakrawala (193020801051)

Jenis tes : Tes Seliwanoff

Sampel : Sukrosa 2%
Hasil Positif (+): Ada
Warna : Jingga-Merah bata
Bentuk larutan : Encer
Endapan :-

UJI IODIUM – AMILUM 2%

Kelompok 8
Sherina Natalia Christin (193030801052)
Nadia Putri Cahyani (193030801061)

Uji Gambar Bahan Uji Reaksi Warna

Ke- + -
1. Amilum 2%  Larutan
kuning,
endapan coklat
 2. Amilum 2%  Larutan
kuning,
endapan coklat
pekat

3 Amilum 2%  Larutan
kuning coklat
dan tidak ada
enapan

UJI IODIUM – GOM ARAB

BOSKA BENDITTO (193030801086 - KELOMPOK 10)

NOVIKO CHRISTOFFER (193030801080 – KELOMPOK 10)

Uji 1

Hasil Uji Iodium pertama negative (-), berwarna kuning, cair, dan tidak ada endapan.
Uji 2

Hasil Uji Iodium kedua negative (-), berwarna kuning, cair, dan tidak ada endapan.

UJI IODIUM – SUKROSA 2%

Kelompok 7

Clarissa Ester Diana Putri (193020801040)

Juan Deo Illva (193030801095)

PERCOBAAN PERTAMA

Larutan Sukrosa 2% + larutan Iodium encer menghasilkan warna kuning kecokelatan dan
 terdapat endapan

PERCOBAAN KEDUA

Larutan Sukrosa 2% + larutan Iodium encer menghasilkan warna kuning kecokelatan

sedikit lebih muda dan terdapat endapan

PERCOBAAN KETIGA
 Larutan Sukrosa 2% + larutan Iodium encer menghasilkan warna kuning kecoklatan
sangat muda dan terdapat endapan

UJI HIDROLISIS SUKROSA – BENEDICT

Muhammad Fachrizal Manta (193030801089)
Dwi Risviranti (193020801063)

JENIS TES SAMPEL HASIL

Hidrolisis Sukrosa Benedict +

UJI HIDROLISIS SUKROSA – BARFOED

Annisa Rahmadita ( 193020801022 - Kelompok 3 )

Greis Febiany Talent ( 193010801011 - Kelompok 3 )
JENIS TES SAMPEL HASIL
Hidrolisis Sukrosa Barfoed +

UJI HIDROLISIS SUKROSA – SELIWANOFF

Mouldy Tasya Zahrawana (193030801077)

Jovanka Mangium W.P (193020801032)

JENIS TES SAMPEL HASIL

Hidrolisis Sukrosa Seliwanof +

( Endapan merah bata )
UJI HIDROLISIS AMILUM- BENEDICT
Ryan Ferdinand Sihotang (193030801082)
Anggie Larasaty (193030801081)

Jenis Tes Waktu dan Gambar

Keterangan
Tes Iodium 0.5 menit

Berwarna coklat
kuning pekat dan
banyak titik akromik

1 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi sedikit berkurang
titik akromik
 1,5 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi sedikit berkurang
titik akromik

2 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi pada tepi larutan
titik akromik
berkurang

2,5 menit

Berwarna coklat
kuning tapi titik
akromik tinggal
sedikit di tengah
larutan
3 menit

Berwarna coklat
kuning dan sudah
tidak ada titik
akromiknya

Jenis Tes Sampel Hasil

 Hidrolisis Benedict Reaksi positif
Amilum karena
menghasilkan
warna hijau
dengan endapan
berwarna merah
bata

Barfoed
Reaksi positif
karena
menghasilkan
warna biru
muda

Seliwanoff Reaksi Positif karena

menghasilkan warna
merah pada sampel dan
tidak ada endapan.

UJI HIDROLISIS AMILUM - BARFOED

Arifia Pratiwi Nugraheni (193020801045 - Kelompok 6)

Riska Aprilliana (193020801041 - Kelompok 6)
Jenis Tes Waktu dan Gambar
Keterangan
Tes Iodium 1 menit

Berwarna coklat
kuning pekat

2 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi sedikit berkurang

3 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi sedikit berkurang

4 menit

Masih berwarna
coklat kuning tapi
agak muda pada tepi
larutan
 5 menit

Berwarna coklat
kuning muda

6 menit

Berwarna kuning
muda, mendekati titik
akromiknya

Jenis Tes Sampel Hasil

Hidrolisis Benedict Reaksi positif karena

Amilum menghasilkan warna hijau
dengan endapan berwarna
merah bata

Barfoed Reaksi positif karena

menghasilkan warna biru
muda
 Seliwanoff Reaksi Positif karena
menghasilkan warna
merah pada sampel dan
tidak ada endapan.

UJI HIDROLISIS AMILUM – SELIWANOFF

Diajeng Akbar Haryono (193030801090 - Kelompok 6)
Windy Magnollia (193020801036 - Kelompok 5)
Jenis Tes Waktu dan Gambar
Keterangan
Tes Iodium 0,5 menit

Berwarna coklat
kuning pekat

1 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi sedikit berkurang

1,5 menit

Masih berwarna
coklat kuning pekat
tapi sedikit berkurang
 2 menit

Masih berwarna
coklat kuning tapi
agak muda pada tepi
larutan

2,5 menit

Berwarna coklat
kuning muda

3 menit

Berwarna kuning
muda, mendekati titik
akromiknya

Jenis Tes Sampel Hasil

Hidrolisis Benedict Reaksi positif karena menghasilkan warna

Amilum hijau dengan endapan berwarna merah bata
 Barfoed Reaksi positif karena
menghasilkan warna biru
muda

Seliwanoff Reaksi Positif karena

menghasilkan warna
merah pada sampel dan
tidak ada endapan.

B. Pembahasan
UJI MOLISH – GLUKOSA 2%

Reagen adalah zat kimia dengan kemurnian yang cukup untuk sebuah analisis atau percobaan.
Reaksi kimia yaitu proses perubahan kimia antara zat-zat pereaksi (reaktan) yang
berubahmenjadi zat-zat hasil reaksi (produk). Pada reaksi kimia, suatu zat berubah menjadi satu
ataulebih zat lain, yang jenisnya baru. Uji molish adalah reaksi yang paling umum untuk
mengidentifikasi adanya karbohidrat. Uji ini efektif untuk senyawa – senyawa yang dapat
didehidrasi oleh asam pekat menjadi senyawa furfural atau senyawa furfural yang tersubstitusi,
seperti Hidroksimetil furfural. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa semua karbohidrat
menghasilkan cincin berwarna ungu. Dalam larutan asam yang encer, walaupun dipanaskan,
monosakarida umumnya stabil. Tetapi apabila dipanaskan dengan asam kuat yang pekat dalam
hal ini uji karbohidrat diatas, monosakarida menghasilkan furfural atau derifatnya. Reaksi
pembentukan furfural ini adalah reaksi dehidrasi atau pelepasan molekul air dari suatu senyawa.
Pada percobaan ini asam sulfat pekat menghidrolisis ikatan glikosidik (ikatan yang
menghubungkan monosakarida satu dengan monosakarida yang lain) menghasilkan
monosakarida yang selanjutnya didehidrasi menjadi fultural dan turunannya (Sumardjo, Damin.
2009: 235).

Pada percobaan uji molish dengan menguji kesembilan larutan karbohidrat yang telah ditetesi
dengan pereaksi molish selanjutnya dihidrolisis dengan asam sulfat pekat (H 2SO4) maka terjadi
pemutusan ikatan glikosidik dari rantai karbohidrat polisakarida menjadi disakarida dan
monosakarida. Dimana berdasarkan hasil yang didapatkan menunjukkan bahwa semua larutan
yang diuji (glukosa, fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa, sukrosa, amilum, arabinosa, dan
akuades) adalah karbohidrat.

Larutan uji yang telah dicampurkan dengan pereaksi Molisch, dialirkan dengan larutan H2SO4
pekat dengan cara memiringkan tabung reaksi. Hal ini dilakukan agar larutan H 2SO4 tidak
bercampur dengan larutan yang ada dalam tabung, sehingga pada akhir reaksi diperoleh suatu
pembentukan cincin berwarna ungu pada batas antara kedua lapisan larutan dalam tabung.
Terbentuknya kompleks berwarna ungu ini karena pengaruh hasil dehidrasi monosakarida
(furfural) dengan α-naftol dari pereaksi Molisch. Oleh karena H2SO4 dapat menghidrolisis
oligosakarida dan polisakarida.

UJI MOLISH – GLUKOSA 2%

Berdasarkan percobaan uji 1 mencampurkan glukosa, pereaksi molish dan asam sulfat kedalam
tabung reaksi maka mulai terbentuk cincin sedangkan uji 2 pencampuran antara setelah selesai
dimasukan bahan tersebut makaterbentuklah cincin ungu pada endapan larutan tersebut hal ini di
sebabkan karena adanya pencampuran dari asam sulfat.

UJI MOLISH – AMILUM 2%

Berdasarkan percobaan yang telah dilakukan diperoleh data bahwa bahan yang diujikan yaitu
amilum 2% menunjukkan hasil yang positif. Hal ini membuktikan adanya suatu karbohidrat
dalam larutan tersebut. Dimana pada akhir reaksi diperoleh suatu pembentukkan cincin berwarna
ungu yang membatasi antara kedua lapisan cairan.
Dalam proses hidrolisis rantai 6 polisakarida (pati atau amilum) tersebut dipecah menjadi
monosakarida-monosakarida. Hidrolisis adalah pemecahan suatu senyawa menggunakan air.
Hidrolisis dengan larutan asam biasanya menggunakan larutan asam encer, dimana kecepatan
reaksinya sebanding dengan konsentrasi asam.

Maka dari itu, uji coba ini harus menambahkan asam sulfat pekat yang digunakan untuk
menghidrasi turunan-turunan pinjaman atau membuat furfural warna yang terjadi pada reaksi
yang positif adalah warna ungu. Mekanisme dari reaksi ini adalah karbohidrat dihidrolisis
menjadi monosakarida, selanjutnya monosakarida jenis pentosa akan mengalami dehidrasi
dengan asam tersebut menjadi furfural, sementara golongan heksosa menjadi hidroksi-
multiurfural mengunakan asam organik pekat. Pereaksi Molish yang terdiri dari alfa-naflol
dalam akohol akan bereaksi dengan furfural tersebut membentuk senyawa kompleks berwarna
ungu. Dimana monosakarida akan meminta lebih cepat dari disakarida dan polisakarida karena
pada monosakarida hngsung dapat meningkatkan dehidrasi dengan asam sulfat membuat furfural
sementara pada disakarida harus diubah menjadi monosakarida. Jika warna larutan berwarna
merah keunguan yang terbentuk saat reaksi, maka semakin sederhana penyusun Karbohidratnya
(Monosakarida). Sedangkan warna larutan yang didapat adalah ungu yang menandakan
karbohidrat penyusunnya masih belum sederhana.

UJI BENEDICT – GLUKOSA 0,5%

Karbohidrat sangat beranekaragam sifatnya, gula reduksi dengan larutan benedict campuran
garam kupri, sulfat, natrium sitrat, natrium karbonat, akan terjadi reaksi reduksi oksidasi dan
menghasilkan endapan berwarna merah dan kupro oksidasi. Jika tidak ada zat yang mereduksi
maka larutan benedict ini tetap jernih sesudah percobaan. Tetapi apabila jumlah karbonhidrat
yang mereduksi banyak sekali maka reaksi terlihat sebelum dipanaskan.
UJI BENEDICT – GLUKOSA 2%

Beberapa gula seperti glukosa disebut gula pereduksi karena mereka mampu mentransfer
hidrogen (elektron) kesenyawa lain, proses yang disebut reduksi. Ketika gula pereduksi
dicampur dengan larutan Benedict dan dipanaskan, reaksi reduksi menyebabkan larutan berubah
warna menjadi merah bata.

Warna yang berubah menjadi merah, artinya 1,5-2,0 persen gula ada didalam larutan.
Terbentuknya endapan merah bata ini sebagai hasil reduksi ion Cu2+ menjadi ion Cu+ oleh
suatu gugus aldehid atau keton bebas yang terkandung dalam gula reduksi yang berlangsung
dalam suasana alkalis (basa). Sifat basa yang dimiliki oleh pereaksi Benedict ini dikarenakan
adanya senyawa natrium karbonat.

Uji Benedict didasarkan pada reduksi dari Cu2+ menjadi Cu+ oleh karbohidrat yang memiliki
gugus aldehid atau keton dimana monosakarida yang memiliki gugus aldosa akan bersifat
mereduksi dan memiliki gugus ketosa tidak akan memiliki daya reduksi. Adanya Natrium
Karbonat dan Natrium Sitrat, membuat pereaksi Benedict bersifat basa lemah. Endapan yang
terbentuk dapat berwarna hijau, kuning, atau merah bata. Warna endapan ini tergantung
konsentrasi karbohidrat yang diperiksa.

Uji Benedict dilakukan dalam suasana basa yang menyebabkan terjadinya transformasi isomerik.
Pada suasana basa, reduksi ion Cu2- dari CuSO4 oleh gula pereduksi akan berlangsung dengan
cepat dan membentuk Cu2O yang merupakan endapan warna merah bata.

UJI BENEDICT – SUKROSA 2%

Berdasarkan hasil pengamatan sampel positif (+) mengandung karbohidrat dengan mengalami
perubahan warna setelah di tambahkan pereaksi dan dipanaskan. Sampel yang digunakan pada
percobaan ini adalah sukrosa 2%. Saat larutan belum dipanaskan, belum terjadi perubahan warna
ataupun endapan. Pada saat dipanaskan pada air mendidih selama 5 menit, terdapat endapan
berwarna merah bata yang membuktikan bahwa mengandung karbohidrat. Perubahan warna ini
disebabkan oleh terjadinya pemecahan molekul karbohidrat dari yang lebih kompleks
(polisakarida) menjadi lebih sederhana (monosakarida). Dimana larutan yang mengandung
karbohidrat akan berwarna kemerahan, sedangkan gula reduksi dengan larutan benedict
(campuran garam kupri sulfat, natrium sitrat, dan natrium karbonat) akan terjadi reaksi reduksi
oksidasi dan akan menghasilkan endapan merah dan kupro oksida. Hal ini terjadi karena, sukrosa
terbuat dari gabungan dua monosakarida yaitu glukosa dan fruktosa dan sukrosa tidak
mempunyai sifat dapat mereduksi ion – ion Cu2+ atau Ag+ serta sekelompok zat yang
mengandung sepuluh unit monosakarida. Jika diperhatikan berdasarkan strukturnya, karbon
anomeric (karbon karbonil dalam monosakarida) dari glukosa maupun fruktosa di dalam air tidak
digunakan untuk berikatan sehingga keduanya tidak memiliki gugus hemiasetal. Akibatnya
sukrosa dalam air tidak berada dalam ketidakseimbangan dengan bentuk aldehid atau keton
sehingga sukrosa tidak dapat dioksidasi.

UJI BARFOED – GLUKOSA 2%

Berdasarkan hasil pengamatan sample positif (+) mengandung karbohidrat dengan mengalami
perubahan warna setelah di panaskan dan di tambahkan pereaksi. Tetapi di sample tidak
didapatkan endapan (-) yang berarti sample tidak mengandung gula monosakarida.

Pereaksi yang digunakan pada percobaan ini adalah larutan Barfoed. Larutan Barfoed merupakan
campuran dari kupri asetat dan asam asetat dalam air. Larutan ini akan bereaksi dengan gula-gula
pereduksi (monosakarida) sehingga dihasilkan endapan merah kuprooksida. Dalam suasana asam
ini, gula reduksi yang termasuk dalam golongan disakarida memberikan reaksi yang sangat
lambat dengan larutan Barfoed sehikngga tidak terdapat endapan merah kecuali pada waktu
percobaan yang diperlama (Sudarmadji, 2007 halaman 37).

Pereaksi Barfoed digunakan untuk membedakan monosakarida dan disakarida. Barfoed

merupakan pereaksi yang bersifat asam lemah. Disakarida akan dapat dihrolisis sehingga
bereaksi positif dengan pemanasan yang lebih lama. Disakarida akan memberikan hasil positif
berwarna biru tua bila didihkan cukup lama hingga terjadi hidrolisis. Reaksi ini positif untuk
monosakarida. Dengan kata lain untuk membedakan monosakarida, dengan disakarida
tergantung berapa lama pemanasan sampai terbentuk endapan.

Pada uji Barfoed ini yang bertujuan untuk membedakan monosakarida dan disakarida atau dalam
kata lain untuk mengetahui adanya gula monosakarida pereduksi. Dilihat dari uji Barfoed, positif
(+) itu bila adanya perubahan warna endapan menjadi merah bata pada sample tersebut
mengandung monosakarida pereduksi. Namun bila tidak ada perubahan warna atau negatif (-)
maka dikarenakan tidak adanya gula monosakarida pada sample.

UJI BARFOED – SUKROSA 0,5%

Pereaksi barfoed terdiri atas larutan kupriasetat dan asam asetat dalam air, dan digunakan untuk
membedakan antara monosakarida dengan disakarida. Monosakarida dapat mereduksi lebih
cepat daripada disakarida. Jadi Cu2O terbentuk lebih cepat oleh monosakarida dari pada oleh
disakarida, dengan anggapan bahwa konsentrasi monosakarida dan disakarida dalam larutan
tidak berbeda banyak (Poedjiadi, hal: 41, 2005).Apabila karbohidrat mereduksi suatu ion logam,
karbohidrat ini akan teroksidasi. Gugus aldehida pada karbohidrat akan teroksidasi menjadi
gugus karboksilat dan terbentuklah asam monokarboksilat. Sebagai contoh galaktosa akan
teroksidasi menjadi asam galaktonat, sedangkan glukosa akan menjadi asam. Larutan barfoed
(campuran kupri asetat dan asam asetat) akan bereaksi dengan gula reduksi (monosakarida)
sehingga dihasilkan endapan merah bata kuprooksida. Dalam suasana asam ini gula reduksi yang
termasuk dalam golongan disakarida memberikan reaksi yang sangat lambat dengan larutan
barfoed sehingga tidak memberikan endapan merah kecuali pada waktu percobaan yang
diperlama.

Berdasarkan hasil pengamatan, jika dalam segi warna larutan yang dihasilkan, untuk glukosa dan
fruktosa membentuk warna biru yang lebih pekat dari pada larutan amilum, sukrosa, maltosa dan
laktosa. Karbohidrat yang di tambah dengan larutan Barfoed menghasilkan warna biru. Dalam
asam, polisakarida dan disakarida akan terhidrolisis parsial menjadi sebagian kecil monomernya.
Hal inilah yang menjadi dasar untuk membedakan antara disakarida, polisakarida dan
monosakarida. Monomer gula dalam hal ini bereaksi dengan asam asetat glacial dan Cuasetat
membentuk senyawa berwarna biru. Dibanding dengan monosakarida, disakarida dan
polisakarida yang terhidrolisis oleh asam mempunyai kadar yang lebih kecil, sehingga intensitas
warna biru yang dihasilkan lebih kecil dibandingkan dengan larutan monosakarida. Tetapi
perbedaan warna yang dihasilkan antara kerbohdrat jenis monosakarida, disakarida dan
polisakarida, tidak memberikan perbedaan warna yang terlalu signifikan. Karbohidrat yang
termasuk monosakarida adalah 9 glukosa dan fruktosa, sedangkan maltosa, laktosa, dan sukrosa
termasuk disakarida, kemudian amilum adalah jenis polisakarida (Barus Pina 2005). Jika
berkaitan warna yang dihasilkan data dari percobaan bahwa semua reaksi positif berwarna biru
gelap, kecuali amilum yang berwarna biru terang. Hasil negatif menunjukkan bahwa sampel
yang diuji merupakan bagian dari polisakarida. Amilum setelah hidrolisis Pada uji barfoed pada
amilum sebelum hidrolisis secara teori, pada amilum sekalipun terdapat glukosa rantai terbuka
pada ujung rantai polimer, namun konsentrasinya sangatlah kecil, sehingga warna hasil uji
barfoed tidak tampak terlalu pekat oleh penglihatan. Sebenarnya untuk larutan maltosa, laktosa,
dan sukrosa harusnya bereaksi negatif terkait dengan hal warna, karena larutan tersebut termasuk
disakarida yang tidak akan bereaksi dengan pereaksi Barfoed. Pemanasan yang tidak merata
dimungkinkan menjadi penyebab hasil reaksi tidak sesuai dengan literatur yang ada. Selain
pemanasan yang tidak merata, penggunaan waktu pemanasan waktu yang trlalu lama,
menyebabkan reaksi tidak sesuai dengan literatur yang ada. Di mana yang cepat mereduksi atau
bereaksi adalah monosakarida. Sementara yang membutuhkan waktu lama dalam pemanasannya
sampai bisa bereaksi adalah disakarida dan polisakarida. Waktu yang digunakan tidak sesuai
dengan teori, menurut Winarno (2004) dalam pengujian monosakarida mengunakan perekaksi
Barfoed, setelah dipanaskan selama 1 menit, didiamkan beberapa saat sehingga dapat dilihat
perubahan yang terjadi pada larutan uji tersebut, sehingga tidak membutuhkan waktu pemanasan
yang terlalu lama.

UJI BARFOED – SUKROSA 2%

Berdasarkan hasil pengamatan yang kami dapat dari uji Barfeod terhadap jenis larutan
karbohidrat tersebut, terlihat bahwa larutan karbohidrat merupakan golongan disakarida. Karena
dari golongan disakarida memberikan reaksi yang sangat lambat dengan larutan barfoed
sehingga tidak memberikan endapan merah kecuali pada waktu percobaan yang diperlama. Hal
ini dapat diketahui dari larutan karbohidrat (sukrosa 2%) tersebut memberikan reaksi negatif
sehingga tidak menghasilkan endapan.

Pereaksi barfoed adalah larutan barfoed yang terdiri atas 13.3 g Cu-asetat dalam 200 ml air,
ditambah 1,9 ml asam asetat glacial. Penambahan Cu-asetat dilakukan untuk dapat mereduksi
karbohidrat karena karbohidrat dapat mereduksi sutu ion logam (Poedjiadi,2005). Dan
penambahan asam asetat glacial adalah untuk membuat reaksi bersifat asam.
Reaksi uji barfoed terjadi karena adanya gugus karbonil bebas yaitu monosakarida pereduksi
yang bereaksi dengan larutan selliwanof yang mengandung Cu2+ yang direduksi oleh
monosakarida pereduksi yang dalam suasana asam akan membentuk Cu2O atau endapan merah
bata. Reaksi yang terjadi adalah

Dilihat dari uji Barfoed, positif (+) itu bila adanya perubahan warna endapan menjadi merah bata
pada sampel yang artinya sampel tersebut mengandung monosakarida pereduksi. Namun bila
tidak adanya perubahan warna endapan atau hasilnya negatif (-) maka hal itu dikarenakan tidak
adanya gula monosakarida pereduksi yang terkandung pada sampel.

UJI SELIWANOFF – GLUKOSA 2%

Uji seliwanoff adalah uji yang membedakan antara aldosa dan ketosa. Ketosa dibedakan dari
aldosa via gugus fungsi keton/ aldehida gula tersebut. Jika gula tersebut mempunyai gugus
keton, ia adalah ketosa. Sebaliknya jika ia mengandung gugus aldehida, ia adalah aldosa. Uji ini
didasarkan pada fakta bahwa ketika dipanaskan, ketosa lebih cepat terhidrasi dari pada aldosa.
Reagen uji seliwanoff terdiri dari resorsianol dan asam klorida pekat :

 Asam reagen ini menghidrolisis polisakarida dan oligosakarida menjadi gula sederhana;
 Ketosa yang terhidrasi kemudian bereaksi dengan resorsinol, menghasilkan zat berwarna
merah.

Berdasarkan hasil percobaan ini dapat diperoleh hasil yang membuktikan bahwa glukosa
2% menghasilkan warna merah yang megidentifikasi adanya kandungan ketosa dalam
karbohidrat jenis monosakarida ini. Karena pada glukosa tergolong karbohidrat, jika dipanaskan
terlalu lama akan terhidrolisis sehingga terbentuk gugus keton di dalamnya. Reagen uji
seliwanoff terdiri dari resorsianol dan asam klorida pekat. Asam reagen ini menghidrolisis
polisakarida dan oligoskarida menjadi gula sederhana Ketosa yang terhidrasi kemudian bereaksi
dengan resorsinol, menghasilkan zat warna merah. Uji ini didasarkan pada fakta bahwa ketika
dipanaskan, ketosa lebih cepat terdehidrasi daripada aldosa. 

UJI SELIWANOFF – SUKROSA 2%

Uji seliwanoff yang berisi sukrosa membuat warna larutan berubah menjadi jingga kemerahan
ketika dipanaskan, hal ini terjadi karena ketika sukrosa dipanaskan terlalu lama akan terhidrolisis
menjadi glukosa dan fruktosa.

UJI IODIUM – AMILUM 2%

Uji iod merupakan pengujian yang dilakukan untuk mengetahui bahan-bahan yang digunakan
dalam pengujian mengandung iodium dan pati yang dapat membentuk ikatan kompleks biru.

Berdasarkan hasil pengamatan, didapatkan amilum 2% dicampurkan dengan larutan Iodium

0,1N menghasilkan warna larutan kuning dengan endapan coklat. Dalam hal ini reaksi negatif(-)
karena tidak menimbulkan warna biru. Jika menunjukan warna biru menunjukan reaksi positif
(+).

Uji ketiga percobaan dilakukan dengan perlakuan yang sama seperti amilum 2% sebanyak 2 tetes
dan Iodium 0,1N sebanyak 2 tetes menunjukan hasil warna yang sama yaitu dengan larutan
bewarna kuning dengan endapan coklat. Hal ini tidak sesuai dengan teori dimana prinsip dari uji
iodium dapat menunjukkan dapat membentuk ikatan kompleks yang bewarna biru. Warna biru
pada larutan menunjukan adanya karbohidrat dalam kandungan. Kemungkinan hal ini terjadi
karena kondisi larutan yang tidak memungkin kan atau dikarenakan mahasiswi kurang teliti.

UJI IODIUM – GOM ARAB

Pada uji iodium dengan gom arab pertama dan kedua menghasilkan hasil yang sama yaitu warna
kuning, tidak mengandung amilase/ reaksi negatif, bentuk larutan cair, dan tidak terdapat
endapan.
UJI IODIUM – SUKROSA 2%
Menurut percobaan yang sudah dilaksanakan terhadap larutan sukrosa 2% terlihat semua reaksi
perubahan pada uji iodium menunjukkan reaksi negatif karena tidak terjadi perubahan warna
hasil yang terlihat hanya warna kuning kecoklatan. Hal ini tidak sesuai dengan teori dimana
prinsip dari uji iodium dapat membentuk ikatan kompleks yang berwarna biru, kemungkinan hal
ini terjadi karena kondisi larutan yang tidak memungkinkan atau dikarenkan praktikan yang
kurang teliti dalam melakukan percobaan ini. Kemudian pada percobaan ini, suatu polisakarida
dapat dibuktikan dengan terbentuknya kompleks adsorbsi yang spesifik pada setiap jenis
polisakarida ini. Dimana amilum dengan iodium menghasilkan larutan berwarna biru pekat yang
menandakan hasil positif terhadap kandungan polisakarida tetapi untuk uji monosakarida,
disakarida, dan polisakarida seperti larutan sukrosa 2% tidak menghasilkan warna larutan yang
spesifik, oleh karena itu hasil yang ditunjukkan negatif. Terbentuknya warna biru disebabkan
molekul amilosa dan amilopektin yang membentuk suatu molekul dengan molekul dari larutan
iodium. Oleh karena itu, monosakarida, disakarida, dan polisakarida tidak menghasilkan warna
larutan spesifik karena tidak mengandung amilosa dan amilopeketin.

UJI HIDROLISIS SUKROSA – BENEDICT

Sukrosa oleh HCI dalam keadaan panas akan terhirolisis, lalu menghasilkan glukosan dan
fruktosa. Hal ini menyebabkan uji Benedict dan uji Seliwanoff yang sebelum hidrolisis
memberikan hasil negatif menjadi positif. Uji Barfoed menjadi positif pula dan menunjukkan
bahwa hidrolisis sukrosa menghasilakn monosakarida.

+HCI

Sukrosa -------- Glukosa + Fruktosa

Monosakarida dan beberapa disakarida mempunyai sifat dapat mereduksi terutama dalam suasan
basa. Sifat sebagai reduktor ini dapat digunakan untuk keperluan identifikasi karbohidrat maupun
anali sis kuantitatif. Sifat mereduksi ini di sebabkan oleh adanya gugus aldehida atau keton bebas
dalam molekul karbohidrat. Sifat ini tampak pada reaksi reduksi ion-ion logam misalnya ion
Cu2+¿ ¿ dan ion Ag yang terdapat pada pereaksi-pereaksi tertentu.
+¿¿
Beberapa contoh diberikan sebagai berikut:

Pereaksi Benedict

Pereaksi benedict berupa larutan yang mengandung kuprisulfat, natrium karbonat dan natrium
sitrat. Glukosa dapat mereduksi ion Cu2+¿ ¿ dari kuprisulfat menjadi ion Cu +¿¿ yang kemudian
mengendap sebagai Cu 2 O . Adanya natrium karbonat dan natrium sitrat membuat peraksi
benedict bersifat basa lemah. Endapat yang terbentuk dapat berwarna hijau, kuning atau merah
bata. Pada saat pratikum kami mendapatkan hasil dari penyampuran larutan hidrolisis sukrosa
dengan larutan benedict yaitu endapan berwarna merah bata. Endapat berwarna merah ini
menandakan reaksi positif.

UJI HIDROLISIS SUKROSA - BARFOED

Sukrosa oleh HCI dalam keadaan panas akan terhirolisis, lalu menghasilkan glukosan dan
fruktosa. Hal ini menyebabkan uji Benedict dan uji Seliwanoff yang sebelum hidrolisis
memberikan hasil negatif menjadi positif. Uji Barfoed menjadi positif pula dan menunjukkan
bahwa hidrolisis sukrosa menghasilakn monosakarida.

+HCI

Sukrosa -------- Glukosa + Fruktosa

1. Monosakarida dan beberapa disakarida mempunyai sifat dapat mereduksi terutama dalam
suasan basa. Sifat sebagai reduktor ini dapat digunakan untuk keperluan identifikasi
karbohidrat maupun anali sis kuantitatif. Sifat mereduksi ini di sebabkan oleh adanya gugus
aldehida atau keton bebas dalam molekul karbohidrat. Sifat ini tampak pada reaksi reduksi
ion-ion logam misalnya ion Cu2+¿ ¿ dan ion Ag+¿¿ yang terdapat pada pereaksi-pereaksi
tertentu.

Uji ini memiliki prinsip yang sama seperti uji Benedict, yaitu reduksi Cu 2+ menjadi Cu+ oleh
karbohidrat yang memiliki gugus aldehida dan keton bebas. Masukkan 1 mL larutan Barfoed ke
dalam tabung reaksi dan 1 mL larutan sampel. Panaskan dalam penangas air mendidih selama 3
menit. Dinginkan dalam air dingin. Tambahkan 1 mL pereaksi molibdat.
Hasil yang kami dapatkan dari percobaan ini adalah larutan berwarna biru menunjukan adanya
monosakarida atau disakarida. Disakarida dalam konsentrasi rendah tidak memberikan hasil
positif. Perbedaan pereaksi barfoed dengan preaksi fehling atau benedict ialah bahwa pereaksi
barfoed digunakan dalam situasi asam.

UJI HIDROLISIS SUKROSA – SELIWANOFF

Sukrosa oleh HCI dalam keadaan panas akan terhirolisis, lalu menghasilkan glukosan dan
fruktosa. Hal ini menyebabkan uji Benedict dan uji Seliwanoff yang sebelum hidrolisis
memberikan hasil negatif menjadi positif.

Monosakarida dan beberapa disakarida mempunyai sifat dapat mereduksi terutama dalam suasan
basa. Sifat sebagai reduktor ini dapat digunakan untuk keperluan identifikasi karbohidrat maupun
anali sis kuantitatif. Sifat mereduksi ini di sebabkan oleh adanya gugus aldehida atau keton bebas
dalam molekul karbohidrat. Sifat ini tampak pada reaksi reduksi
ion-ion logam misalnya ion Cu2+¿ ¿ dan ion Ag+¿¿ yang terdapat pada pereaksi-pereaksi tertentu.

Uji Seliwanoff

Uji ini didasarkan atas dehidrasi fruktosa oleh HCl pekat menghasilkan hidroksi metilfurfural

dengan penambahan resorsinol akan mengalami kondensasi membentuk senyawa kompleks
berwarna merah jingga.

Pada uji ini Masukkan 0,5 mL larutan sampel ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 5 mL pereaksi
Seliwanoff. Campur dan didihkan selama 30 detik atau panskan dalam penangas air mendidih
selama 1 menit. Perhatikan warnanya. . Hasil yang didapatkan praktikan yaitu terdapat larutan
berwarna merah, di mana warna ini menunjukkan reaksi positif adanya karbohidrat di dalam
larutan tersebut.
UJI HIDROLISIS AMILUM - BENEDICT

Hidrolisis adalah mekanisme reaksi pengaturan suatu senyawa oleh air atau asam dan basa. Pati
atau amilum tergolong kedalam polisakarida sehingga pati atau amilum tersebut bisa dihidrolisis
menjadi glukosa yang monosakarida. Pada percobaan ini akan menguji kerja enzim amilase yang
bekerja untuk memecahkan atau merombak pati menjadi glukosa, dengan sampel saliva.
Kemudian memanaskan dengan penangas air 37℃. Hal tersebut dilakukan karena semua enzim
mempunyai aktivitas optimal pada suhu 30℃-40℃, dan akan mengalami denaturasi pada suhu
45℃. Umumnya semakin laju reaksi semakin cepat karena energi semakin besar dan melampaui
energi aktivitasnya. Namun, enzim merupakan suatu protein sehingga semakin tinggi suhu
proses aktivasi enzim akan meningkat.

Uji benedict adalah uji kimia untuk mengetahui kandungan gula (karbohidrat) pereduksi. Gula
Pereduksi meliputi semua jenis monosakarida dan beberapa disakarida seperti laktosa dan
maltosa. Pada uji Benedict, pereaksi ini akan bereaksi dengan gugus aldehid, kecuali aldehid
dalam gugus aromatik, dan alpha hidroksi keton. Benedict dapat dibuat dengan menimbang
sebanyak 100 gram sodium carbonate anhydrous, 173 gram sodium citrate, dan 17,3 gram copper
(II) sulphate pentahydrate, kemudian dilarutkan dengan akuades sebanyak 1 liter.

Untuk mengetahui adanya pereduksi gula dalam sampel karbohidrat (sukrosa, laktosa, fruktosa,
maltosa, dan galaktosa) sampel karbohidrat yang telah ada, ditambahkan 1 ml larutan benedict.
Setelah itu, dipanaskan selama 2 menit atau diletakkan di dalam penangas air selama 5 menit.
Selama proses ini larutan akan berubah menjadi warna biru kehijau-hijauan dengan adanya
endapan berwarna merah yang menandakan bahwa larutan positif memiliki pereduksi gula
didalamnya.

Dari hasil pengamatan, laktosa, fruktosa, dan maltosa mengalami perubahan menjadi endapan
berwana merah yang disebabakn oleh larutan benedict yang terdiri dari tembaga sulfat ( C u S O 4 ¿
.
UJI HIDROLISIS AMILUM - BARFOED

Hidrolisis adalah mekanisme reaksi pengaturan suatu senyawa oleh air atau asam dan basa. Pati
atau amilum tergolong kedalam polisakarida sehingga pati atau amilum tersebut bisa dihidrolisis.
Pada sampel saliva, terdapat enzim amilase yang dapat memecahkan atau merombak pati.
Pemanasan dengan penangas air 37℃ dilakukan untuk mengoptimalkan kerja enzim. Hal ini
disebabkan enzim mempunyai aktivitas optimal pada suhu 30℃-40℃, dan akan mengalami
denaturasi pada suhu 45℃. Enzim merupakan suatu protein sehingga semakin tinggi suhu
(hingga suhu optimal) proses aktivasi enzim akan meningkat.

Berdasarkan uji hidrolisis dengan larutan iodium, dari menit ke 3 hingga 7 belum terlihat
perubahan yang signifikan terhadap warna iodium. Ini berarti amilum belum sepenuhnya
terhidrolisis oleh saliva. Pada menit ke 8, warna berubah menjadi kuning-bening, yang berarti
telah banyak amilum yang terhidrolisis. Peningkatan aktivitas ini mungkin juga dikarenakan
pemanasan telah mencapai suhu optimum enzim.

Uji karbohidrat barfoed merupakan uji untuk membedakan karbohidrat golongan monosakarida
dan disakarida. Prinsipnya adalah reduksi Cu2+ yang terdapat dalam pereaksi barfoed oleh gugus
pereduksi pada monosakarida dalam suasana asam. Reaksi positif ditunjukkan dengan
munculnya endapan merah orange atau merah bata. Tes ini digunakan untuk membedakan
reduksi monosakarida dengan mengendalikan pH dan waktu pemanasan. Monosakarida bereaksi
sangat cepat sedangkan disakarida bereaksi sangat lambat. Reaksi positif menunjukkan adanya
reduksi monosakarida. Pada pemanasan yang berkepanjangan, disakarida juga dapat memberikan
tes ini positif.

Berdasarkan hasil uji karbohidrat dengan Barfoed yaitu setelah sampel diberi pereaksi barfoed
dan dipanaskan selama 3 menit lalu ditambahkan molibdat, didapatkan larutan berwarna biru
muda yang berarti hidrolisis oleh saliva telah terjadi pada amilum, tetapi hanya sampai tahap
disakarida. Ini dikarenakan amilase saliva dapat menghidrolisis polisakarida menjadi disakarida.
Sedangkan untuk proses selanjutnya sampai terbentuk monosakarida dilakukan oleh amilase
pancreas. Jika larutan dibiarkan hingga 10 menit, akan didapatkan endapan berwarna merah bata,
karena reaksi disakarida pada percobaan ini relative lambat.
UJI HIDROLISIS AMILUM – SELIWANOFF

Hidrolisis adalah mekanisme reaksi pengaturan suatu senyawa oleh air atau asam dan basa. Pati
atau amilum tergolong kedalam polisakarida sehingga pati atau amilum tersebut bisa dihidrolisis.
Pada sampel saliva, terdapat enzim amilase yang dapat memecahkan atau merombak pati.
Pemanasan dengan penangas air 37℃ dilakukan untuk mengoptimalkan kerja enzim. Hal ini
disebabkan enzim mempunyai aktivitas optimal pada suhu 30℃-40℃, dan akan mengalami
denaturasi pada suhu 45℃. Enzim merupakan suatu protein sehingga semakin tinggi suhu
(hingga suhu optimal) proses aktivasi enzim akan meningkat.
Berdasarkan uji hidrolisis dengan larutan iodium, dari menit ke 3 hingga 7 belum terlihat
perubahan yang signifikan terhadap warna iodium. Ini berarti amilum belum sepenuhnya
terhidrolisis oleh saliva. Pada menit ke 8, warna berubah menjadi kuning-bening, yang berarti
telah banyak amilum yang terhidrolisis. Peningkatan aktivitas ini mungkin juga dikarenakan
pemanasan telah mencapai suhu optimum enzim.
Pada uji karbohidrat menggunakan pereaksi seliwanoff beberapa karbohidrat memiliki gugus
keton. Adanya gugus keton dapat dibuktikan melalui uji seliwanoff. Fruktosa dan sukrosa adalah
karbohidrat yang memiliki gugus keton Jika karbohidrat yang mengandung gugus keton
direaksikan dengan seliwanoff akan menunjukkan warna merah sebagai reaksi positifnya.
Adanya warna merah merupakan hasil kondensasi dari resorsinol yang sebelumnya didahului
dengan pembentukan hidroksi metil furfural. Proses pembentukan hidroksi metil furfural berasal
dari konversi dari fruktosa oleh asam klorida panas yang kemudian menghasilkan asam levulinic
dan hidroksi metal furfural. Fruktosa dan sukrosa cepat bereaksi karena merupakan jenis
karbohidrat yang memiliki gugus keton (ketosa). Ketosa bila di dehidrasi oleh pereaksi
seliwanoff memberikan turunan fulfural ynag selanjutnya berkondensasi dengan resosinol
memberikan warna merah kompleks.
Hal tersebut diatas menunjukkan bahwa uji saliwanof digunakan untuk membedakan antara
karbohidrat yang mengandung aldehid dan keton. Dimana pada percobaan terbukti bahwa
fruktosa dan sukrosa adalah karbohidrat yang mengandung gugus fungsi keton. Karena hanya
gugus fungsi keton yang bias cepat bereaksi dengan saliwanof. Pada uji seliwanoff, hasil positif
didapat pada fruktosa, maltose, laktosa, amilum dan sukrosa.
Uji seliwanoff merupakan uji spesifik untuk karbohidrat yang mengandung gugus keton, seperti
fruktosa. Ketika semua larutan ditambahkan larutan seliwanoff, terjadi perubahan warna dari
tidak berwarna menjadi kuning. Kemudian ketika dipanaskan, yang terjadi perubahan warna
menjadi merah orange yang menunjukan bahwa sempel termasuk ketosa dan peristiwa
monosakarida ketosa menjadi fufural lebih cepat dibandingkan dengan aldehid karena aldehid
mengalami trasformasi menjadi ketosa sebelum dehidrasi.
 BAB V
KESIMPULAN

a. Pereaksi molish digunakan untuk mengidentifikasi ada tidaknya karbohidrat(pada larutan

glukosa, maltose,laktosa,sukrosa, fruktosa, dan amilum)

b. Reaksi kondensasi antara α-naftol dan derivate larutan karbohidrat dapat membentuk cincin
yang terlihat berwarna merah keunguan.

c. Bahwa pada amilum setelah ditetesi dengan iodine warnanya berubah menjadi biru pekat. Hal
tersebut membuktikan bahwa pada amilum mengandung polisakarida.

d. Pada glukosa, fruktosa dan laktosa setelah dipanaskan terbentuk endapan berwarna merah
bata. Hal ini membuktikan bahwa pada larutan-larutan tersebut merupakan gula pereduksi. Pada
sukrosa bukan merupakan gula pereduksi.

e. Pereaksi seliwanoff digunakan untuk menentukan adanya gugus laktosa dengan adanya
indikator terbentuknya warna merah (orange kekuningan).

f. Dari pengujian diatas pada fruktosa dan sukrosa terbentuk warna kuning keorangean. Hal
tersebut menunjukkan bahwa fruktosa dan sukrosa mempunyai gugus laktosa.

g. Pada glukosa, maltosa dan laktosa tidak terbentuk warna kuning keorangean, warna yang
terbentuk hanya jernih kekuningan . hal ini menunjukkan bahwa karbohidrat tersebut tidak
memiliki gugus laktosa.
 DAFTAR PUSTAKA

Ratnasari, Evi. Sri Rahayu, Y. Isnawati. Petunjuk Praktikum Biokimia. Surabaya. Laboratorium
Biokimia: University Press

https://himka1polban.wordpress.com/laporan/kimia-organik/laporan-identifikasi-karbohidrat/

http://blogs.unpad.ac.id/fajar/2014/03/21/laporan-akhir-uji-karbohidrat/

https://www.academia.edu/9299023/LAPORAN_PRAKTIKUM_BIOKIMIA_IDENTIFIKA
SI_KARBOHIDRAT

https://www.academia.edu/12151567/Laporan_Praktikum_Biokimia_Karbohidrat_I

https://vinaoktap2015.wordpress.com/uji-kualitatif-karbohidrat/

Murray, R. K. dkk. 2009. Biokimia Herper. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC.

Rahayu, Sri Yuni, dkk. 2018. Petunjuk Praktikum Biokimia. Surabaya: Laboratorium Biokimia-
Jurusan Biologi-FMIPA-UNESA.

Sumardjo, Darmin. 2006. Penagantar Kimia : Buku Panduan Kuliah Mahasiswa Kedokteran dan
Program Strata I Fakultas Bioeksakta. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.