Pengaruh Cimetidine dan Phenobarbital pada Kinetika Metabolit

Omeprazol Pada Tikus

PENDAHULUAN
Omeprazole (OMP) adalah obat penghambat pompa proton yang
digunakan untuk gangguan gastrointestinal terkait dengan asam. Dimetabolisme
di hati oleh sitokrom P-450 (CYP450) isoenzim seperti CYP2C19 dan CYP3A4.
5-Hyroxyomeprazole (5-OHOMP) dan omeprazole sulfone (OMP-SFN) adalah
dua metabolit utama OMP pada manusia. Simetidin (CMT) menghambat
pemecahan obat yang dimetabolisme oleh CYP450 dan mengurangi pembersihan
obat coadministered yang dihasilkan dari kedua CMT yang mengikat CYP450 dan
penurunan aliran darah hepatik karena CMT. Phenobarbital (PB) menginduksi
metabolisme obat pada hewan uji dan manusia. Induksi PB terutama melibatkan
bentuk CYP mamalia dalam keluarga gen 2B dan 3A. PB telah banyak digunakan
sebagai inducer prototipe untuk penyelidikan biokimia terhadap metabolisme obat
dan enzim yang mengkatalisis metabolisme ini, juga untuk penyelidikan genetik,
farmakologis, dan toksikologi.

DASAR TEORI
Omeprazol (OMP, 5-methoxy-2 - [[4-metoksi-3,5-dimetil-c2 piridinil)
metil] sulfinil] -1H-benzimidazol, Gambar 1) adalah kelas yang disebut sebagai
inhibitor pompa proton; Ini bertindak untuk mengatur produksi asam di perut dan
digunakan untuk mengobati berbagai gangguan gastrointestinal terkait asam
(Howden, 1991; Wilde dan McTavish, 1994). Di hati, itu dimetabolisme dengan
berbagai tingkat oleh beberapa isoenzim CYP450, yang selanjutnya dikategorikan
ke dalam subfamili produk gen polimorfik terkait (Petersen, 1994). Metabolisme
OMP sangat bergantung pada CYP3A4 dan CYP2C19. OMP dimetabolisme
menjadi dua metabolit utama, 5-hydroxyomeprazole (5-OHOMP) dan omeprazole
sulfone (OMP-SFN), pada manusia. (Regardh et al., 1985; Andersson et al., 1993,
1994).

Cimetidine (CMT, N-cyano-N'-methyI-N "- [2 - [[5-methyl-1H-imidazol-

4-yl) methyl] thio] etil] guanidin) adalah antagonis reseptor H2 histamin yang
Banyak digunakan untuk mengobati lambung dan duodenum ulkus (Black, 1976).
Efek CMT yang paling banyak dikenal adalah penghambatan metabolisme hati
yang dimediasi oleh isozim CYP450 seperti CYP3A4, 2D6, 1A2, 2C9, dan 2C19,
pengurangan darah hati. aliran, dan penghambatan sekresi tubular proksimal
kation organik (Shiga et al., 2000; Badyal dan Dadhich, 2001; Yamano et al.,
2001; Szutowski et al., 2002).

Phenobarbital (PB, 5-etil-5-fenil-2,4,6 (1H, 3H, 5H) - pyrimidinetrione)

telah dikenal untuk menginduksi metabolisme obat pada hewan laboratorium dan
manusia (Carlie et al., 1997). Induksi PB terutama melibatkan bentuk CYP
mamalia dalam keluarga gen 2B dan 3A, namun ekspresi enzim metabolisme obat
lain dan gen fungsi yang tidak diketahui juga dimodulasi (Sudjana-Sugiaman et
al., 1994).

Interaksi Omeprazol dengan Cimetidine dan Phenobarbital

BAHAN DAN METODE
Bahan kimia dan instrumen
OMP, 5-OHOMP dan OMP-SFN,CMT, PB, Phenacetin dan diklorometana,
Asetonitril dan metanol, AST14, ALT14, protein total, dan bilirubin,Normal
saline dan heparin diperoleh dari sumber komersial yang umum. Air, Sistem
HPLC terdiri dari dua pompa (Model LC-10ADvp), dengan sebuah degasser
(Model DGU-12A) dan sebuah detektor UV (Model SPD-10Avp) pada 302 nm.
Kolomnya (250x4.6 mm, dengan ukuran partikel 5 pm, Phenomenex, Torrance,
CA, A..S.A.).

Hewan Uji
Tikus Sprague-Dawley jantan (220-250 g).Hewan ditempatkan terpisah di
kandang di tempat yang berventilasi ruang hewan dengan suhu terkendali (19 + 1
~ dan kelembaban relatif (50 + 5%) dan disimpan pada siklus terang / gelap 12 h.
Selama periode ini, hewan memiliki akses terhadap makanan dan air ad libitum
kecuali saat berpuasa semalam sebelum melakukan administrasi OMP. Hewan-
hewan tersebut disesuaikan dengan kondisi di atas paling sedikit 2 minggu
sebelum digunakan dalam percobaan.

Perlakuan Hewan Uji

Tiga kelompok tikus Sprague-Dawley jantan (n = 6 per kelompok), dalam
rancangan paralel, menerima CMT (100 mg / kg, sekali sehari), PB (75 mg / kg,
sekali sehari) dan volume yang sama. masing-masing diberi injeksi intraperitoneal
selama empat hari berturut-turut.

Setelah akhir pengambilan sampel darah, hati dilarutkan dengan larutan

garam isotonik melalui vena porta, dilepas dan ditimbang. Nilai SGOT, SGPT,
protein total, dan bilirubin diukur dengan analisis kimia klinis (SBA300, Gilford,
Oberlin, OH, A..S.A.).

Darah dikumpulkan tepat sebelum pemberian OMP dan dipindahkan ke

tabung mikrokapiler. Sampel disentrifugasi (2 menit, 12.000 rpm) dan hematokrit
persen yang ditentukan (persen sel darah merah dalam volume darah total)
menggunakan pembaca tabung mikrokapilator melingkar (Superior ~, 1.1 ~
1.2x75 mm, Paul Marienfield KG, Bad Mergenthim, W- Jerman) untuk setiap
hewan (Wintrobe, 1974).

Dosis dan pengumpulan sampel

Hewan diberi anestesi dengan dietil eter, dan vena femoralis kiri dan arteri
diberi kateter dengan tabung polietilen PE-50 (Intramedic | Clay Adams Co.,
Parasippany, N J, A..S.A.). Setiap tikus menerima OMP (30 mg / kg / 3 mL dalam
2% polyethylene glycol 400) melalui vena femoralis kiri. Darah (0.3 mL)
dikumpulkan dari cannula arteri femoralis kiri pada 2, 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90,
120, dan 240 menit setelah pemberian OMP. Antara setiap pengumpulan sampel
darah, 0,3 mL larutan garam normal diberikan melalui kanula kanalis femoralis
kiri sebagai pengganti cairan. Sampel darah langsung disentrifugasi dan plasma
(100 pL) dipisahkan dan segera dibekukan pada suhu -70 ~ sampai dianalisis.

Uji OMP dan metabolit dalam plasma tikus

Plasma yang beku dibiarkan mencair pada suhu kamar. Standar internal
(IS, phenacetin, 100 ~ L larutan stok 250 pg / mL dalam metanol), diklorometana
(5 mL), dan penyangga borat 0,2 M (400 pL, pH 9,0) ditambahkan ke 100 pL
plasma dalam tabung kaca. Setelah di mixer vortex selama 1 menit dan di
sentrifugasi pada 2.500 rpm selama 10 menit, lapisan atas berair disedot dan
dibuang. Fasa organik yang tersisa dipindahkan ke dalam tabung gelas baru dan
diuapkan sampai kering di bawah aliran nitrogen dalam evaporator sentrifugal
pada suhu 40 ~ (CVE-200D, Tokyo Rikakikai, Tokyo, Jepang). Residu akhirnya
dilarutkan dalam 150 I ~ L fase gerak melalui vorteksmixing, dimana 50 pL
kemudian disuntikkan ke dalam sistem HPLC (Kobayashi et aL, 1992; Cheng et
al., 2002).

Uji Validasi
Analisis dilakukan dengan sistem HPLC dengan menggunakan fase gerak
adalah buffer fosfat asetonitril-0,05 M (pH 8,5) (30:70, v / v) pada laju alir 0,5 mL
/ menit. Eluate dipantau pada panjang gelombang UV 302 nm. Untuk menguji
linearitas pengujian, disiiapkan kurva kalibrasi untuk OMP, 5-OHOMP, dan
OMP-SFN pada konsentrasi berkisar antara 50 sampai 2000 ng / mL dalam
plasma. Sampel standar disiapkan dengan menambahkan analit ke plasma bebas
obat dan diekstraksi dan dianalisis. Rasio puncak masing-masing analit terhadap
I.S. diukur dan kurva kalibrasi diperoleh dari regresi linier leastsquares. Garis
regresi digunakan untuk menghitung konsentrasi analit masing-masing pada
sampel yang tidak diketahui.

Untuk menilai analit yang diambil dari plasma, dibandingkan tinggi

puncak sampel plasma yang diekstrak yang mengandung jumlah yang diketahui
dari masing-masing analit dengan tinggi puncak sampel air yang diekstraksi yang
mengandung jumlah masing-masing analit. Konsentrasi QC akhir OMP, OMP-
SFN, dan 5-OHOMP dalam plasma adalah 100, 500, dan 1000 ng / mL.

Ketepatan pengujian dinilai oleh CVs intra dan inter-assay dan kesalahan
relatif dengan menentukan masing-masing dari ketiga analit pada plasma 100, 500
dan 1000 ng / mL. Untuk menguji stabilitas jangka pendek dan jangka panjang
dari OMP, 5- OHOMP, dan OMP-SFN, sampel QC disimpan dalam kondisi yang
berbeda; pada suhu kamar untuk 0, 4, dan 24 jam pada -70 ~ selama 1 bulan. Dan
juga, tiga siklus pencairan pembekuan (suhu -70 ~) diterapkan pada sampel QC
dalam tiga hari berturut-turut. Senyawa dianggap stabil jika variasi uji (n = 5)
kurang dari 10% dari respons waktu awal.
HASIL DAN DISKUSI
Profil waktu konsentrasi plasma OMP dan metabolitnya
Profil waktu konsentrasi plasma OMP dan 5-OMP dalam kontrol, tikus
dengan pretreatment CMT dan PB setelah pemberian OMP secara intravena (30
mg / kg) ditunjukkan pada Gambar 4.

Gambar 4. Kurva waktu konsentrasi plasma spesifik OMP (-0-) dan 5-OHOMP (-
O-) setelah pemberian OMP secara intravena (30 mg / kg) ke kontrol, tikus CMT
dan PB-pretreated. Garis padat mewakili nilai pas model. Galat kesalahan berarti
standar deviasi rata-rata.

Cle pada tikus PB-dan CMT-pretreated secara signifikan (P <0,05)

meningkat. Hasil ini berarti bahwa PB meningkatkan baik metabolisme dan
eliminasi OMP dan 5-OHOMP dan CMT menurunkan metabolisme OMP, namun
meningkatkan eliminasi OMP karena mekanisme kompensasi CMT, yang
mengkompensasi penurunan metabolisme OMP menjadi 5 -OHOMP (Levy et al.,
2003).

Tabel II menunjukkan parameter farmakokinetik OMP dan 5-OHOMP

berdasarkan analisis non-kompartemen. Konsentrasi plasma OMP dan 5 OHOMP
secara signifikan (P <0,05) meningkat setelah perlakuan awal CMT. Daerah di
bawah kurva (AUCo. ~.) OMP dan 5-OHOMP secara signifikan (P <O.05)
meningkat pada tikus yang diobati dengan CMT daripada tikus kontrol. Oleh
karena itu, hasil ini menunjukkan bahwa CMT menghambat CYP2C19 pada tikus,
terutama OMP ke 5-OHOMP, bukan untuk OMP ke OMP-SFN dengan CYP3A4.
Sedangkan konsentrasi plasma OMP dan 5-OHOMP secara signifikan (P <0,05)
menurun setelah pengobatan PB. Daerah di bawah kurva (AUCo_ ~) dari OMP
dan 5-OHOMP secara signifikan (P <0,05) menurun pada tikus PB-pretreated
dibandingkan tikus kontrol. Oleh karena itu, hasil ini menunjukkan bahwa PB
meningkatkan eliminasi OMP dan 5-OHOMP karena peningkatan aliran darah
hati dan / atau aliran empedu, karena tidak menginduksi enzim CYP3A4 (Branch
et al., 1974).
KESIMPULAN
Pada tikus CMT-pretreated, AUCo_ ~ OMP secara signifikan (P <0,05)
meningkat dan CLt secara signifikan (P <0,05) menurun dibandingkan dengan
tikus kontrol. Sebaliknya, pada tikus PB, CLt OMP meningkat secara signifikan
(P <0,05) dan MRT OMP secara signifikan (P <0,05) menurun dibandingkan
dengan tikus kontrol. Hasil ini menunjukkan bahwa CMT menghambat
metabolisme OMP karena keduanya menurunkan aliran darah hati dan
menghambat aktivitas enzim CYP2C19 dan 3A4 dan PB meningkatkan
metabolisme OMP karena stimulasi aliran darah hati dan / atau aliran empedu,
karena tidak menginduksi aktivitas enzim CYP3A4.
 MAKALAH FARMAKOLOGI TOKSIKOLOGI

Review Jurnal ” Effect of Cimetidine and Phenobarbital on

Metabolite Kinetics of Omeprazole in Rats”

DISUSUN OLEH:

1. AMA BARLINTI (1041611015)

2. ANGGA PAMUNGKAS (1041611019)
3. ANISA ASFURIDA (1041611020)
4. ANISATUL ANIYAH (1041611021)
5. NINIK (1041611042)
SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI “YAYASAN PHARMASI”
SEMARANG
2018