Nanoteknologi untuk COVID-19: Terapi

dan Penelitian Vaksin

ABSTRAK: Ancaman kesehatan global saat ini oleh penyakit coronavirus baru 2019 (COVID-
19) membutuhkan penerapan terapi lanjutan yang mendesak pilihan yang tersedia. Peran
nanoteknologi sangat relevan untuk melawan hal ini "virus" musuh nano. Intervensi nano
dibahas dalam hal merancang nanocarriers efektif untuk melawan keterbatasan konvensional
antivirus dan terapi biologis. Strategi ini mengarahkan pengiriman yang aman dan efektif dari
pilihan terapi yang tersedia menggunakan nanocarrier yang direkayasa, menghalangi awal
interaksi glikoprotein lonjakan virus dengan reseptor permukaan sel inang, dan gangguan
konstruksi virion. Mengontrol dan menghilangkan penyebaran dan terulangnya pandemi ini
menuntut strategi vaksin yang aman dan efektif. Nanocarrier memiliki potensi untuk merancang
imunisasi yang bebas risiko dan efektif strategi untuk kandidat vaksin coronavirus 2 sindrom
pernapasan akut seperti konstruksi protein dan asam nukleat. Kami membahas baru-baru ini serta
yang sedang berlangsung strategi terapeutik dan profilaksis berbasis nanoteknologi untuk
melawan pandemi ini, menguraikan bidang-bidang utama untuk nanoscientist untuk turun
tangan.
KATA KUNCI: penyakit coronavirus 2019, struktur coronavirus 2 sindrom pernafasan akut
parah, imunopatologi, nanomedicine, terapi yang ditargetkan, pengiriman obat kombinasi,
nanocarrier vaksin, nanopartikel ajuvan vaksin, nanoteknologi yang digunakan kembali

Novel coronavirus sekarang secara resmi disebut sindrom parah pernafasan akut
coronavirus 2 (SARSCoV-2) adalah agen penyebab COVID-1 wabah penyakit. Wuhan (Cina)
adalah pusat gempa pertama pandemi ini, dan sekarang dengan lebih dari 8,3 juta dilaporkan
infeksi dan lebih dari 449.099 kematian pada 17 Juni 2020, itu dianggap sebagai krisis terburuk
sejak Perang Dunia II. The dampak global dari pandemi ini menakutkan, dan mungkin belum
mencapai puncak. Ras manusia juga mmenghadapi situasi krisis karena karantina wajib dan
penguncian. Ekonomi dunia sudah menghadapi penyok yang berkepanjangan, dan situasinya
pasti akan memburuk jika penyebaran virus tidak terkontrol.
Alpha, beta, gamma dan delta adalah empat kelas dari keluarga coronavirus (CoV),
semuanya menampilkan untai tunggal genom RNA sense positif. Membran menyelubungi
enkapsulasi genom virus dihiasi dengan glikoprotein lonjakan protein transmembran. Kata "virus
corona" adalah dinamai berdasarkan paku protein berbentuk tongkat di permukaannya bila
dilihat di bawah mikroskop elektron transmisi (TEM). Agen penyebab di balik pandemi COVID-
19 milik kelas beta. Kelas coronavirus yang sama adalah bertanggung jawab untuk sindrom
pernafasan akut yang parah (SARS) dan sindrom pernapasan Timur Tengah (MERS). Demam,
batuk kering, kelelahan, dan kesulitan bernafas termasuk di antara gejala awal pasien yang
terinfeksi SARS-CoV-2. Ini adalah virus yang lebih menular di kelasnya dan sangat
mempengaruhi sistem pernapasan bawah yang memicu pneumonia virus. Vital organ termasuk
jantung, hati, ginjal, saluran pencernaan (GIT), dan sistem saraf pusat (SSP) mungkin juga
terpengaruh, menyebabkan banyak komplikasi organ.
SIKLUS HIDUP, PATOFISIOLOGI, DAN STRUKTUR
SARS-CoV-2 memiliki genom RNA untai tunggal sekitar 34 kilobase dan nukleokapsid
simetri heliks. Genom SARS-CoV-2 adalah 80% identik dengan SARS-CoV dan 96% pada
BatCoV RaTG13. Integritas partikel SARSCoV dipertahankan oleh empat protein: (i) Protein S
(Spike glycoprotein) yang memungkinkan perlekatan virus ke sel inang diikuti oleh fusi
membran, karenanya, mendorong masuknya SARS-CoV ke dalam sel inang; (ii) M. yang
melimpah protein (membran) yang menjaga integritas membran partikel virus; (iii) protein E
(amplop) adalah yang terkecil protein dan memainkan peran struktural dan membantu dalam
perakitan dan pemula; dan (iv) protein N (nukleokapsid) secara dominan mengikat RNA SARS-
CoV dan mendukung nukleokapsid formasi. Enzim pengubah angiotensin 2 (ACE2) merupakan
reseptor kunci untuk masuknya SARS-CoV-2 ke dalam sel tuan rumah. Protease seluler
[protease mirip tripsin saluran napas manusia dan cathepsins dan transmembran protease serin 2
(TMPRSS2)] mengontrol mekanisme masuknya virus dengan membelah protein lonjakan dan
memulai mekanisme penetrasi lebih lanjut.28 Setidaknya enam kerangka baca terbuka hadir
dalam genom CoV khas yang mengkode untuk produksi RNA subgenomik, 16 protein
nonstruktural (nsps), dan protein struktural (spike, membran, envelope, dan protein
nukleokapsid).29−31 Siklus hidup SARS-CoV-2 menjelaskan seluruh mekanisme patofisiologi
dirinci dalam (Gambar 1, I).
Protein Coronavirus S mendorong masuknya virus ke dalam sel inang dan merupakan
area fokus untuk berbagai antibodi. Protein S permukaan (spike glycoprotein) dari virion adalah
tempat untuk pengenalan dan fusi membran.Protein S (a trimer) dibelah menjadi subunit S1 dan
S2. Subunit S1 mengandung receptor binding domain (RBD) dan dilepaskan dalam konformasi
pasca-transfusi. S1 langsung mengikat ke domain peptidase (PD) dari ACE2, sedangkan subunit
S2 membantu dalam fusi membran yang sangat penting untuk infeksi virus. S2 berisi situs
pembelahan dan diiris oleh protease inang.
ACE2 adalah dimer dari dua unit dan mengakomodasi RBD dalam domain peptidasenya.
Kontak antara ACE2 dan SARS-CoV-2 difasilitasi oleh interaksi kutub. Sebuah heliks berbentuk
lengkung dari domain peptidase dari ACE2 berinteraksi dengan daerah loop RBD protein S
(Gambar 1, II). Heliks dan loop lainnya menghubungkan untai antiparalel dan
mengkoordinasikan domain peptidase ke RBD. Asam amino interaksi yang diamati pada RBD
SARS-CoV-2 dan domain peptidase dari ACE2 dianggap sebagai aspek penting untuk desain
inhibitor. Diamati bahwa asam amino GLN498 dari SARS-CoV-2 berinteraksi dengan ACE2 di
ASP38, TYR41, GLN42, LEU45, dan LYS353 asam amino, sedangkan LEU455 virus
berinteraksi dengan ASP30, LYS31, dan HIS34. Lebih banyak interaksi termasuk SARS-CoV-2,
PHE486 dengan GLN24, LEU79, MET82, TYR83, dan LEU472. GLN493 menunjukkan
interaksi dengan ACE2 LYS31 dan HIS34 dan bentuk ikatan H dengan GLU35. Asam amino
ASN501 memiliki kesamaan jenis interaksi dengan ACE2 LYS353, GLY354, dan ASP355,
sedangkan interaksi ikatan-H diamati dengan TYR41.44 The afinitas pengikatan domain RBD
dari SARS-CoV-2 dan PD of ACE2 lebih tinggi jika dibandingkan dengan SARS-CoV.43 Itu
melaporkan bahwa pada SARS-CoV-2 asam amino LYS417 menunjukkaninteraksi jembatan
garam dengan ASP30 dari ACE2. Yang positif patch bermuatan berkontribusi terhadap potensi
elektrostatik pada permukaan RBD yang ditambahkan oleh LYS417 di SARS-CoV-2 dan tidak
ada di SARS-CoV.
Pemeriksaan arsitektur virion SARS-CoV-2 menggunakan TEM mengungkapkan
pleiomorfik yang kira-kira bulat atau sedang morfologi. Diameter virion diamati memiliki lebar
distribusi 80−160 nm dan massa nukleat yang terkondensasi asam dan protein nukleokapsid di
bawah lipid yang terdefinisi dengan baik bilayer envelop. TEM juga mengungkapkan bentuk
seperti paku dari SARS-CoV-2 spike dengan lebar kepala 7 nm dan panjang 23 nm tubuh.
Setelah pemisahan subunit S1 dari protein S, perubahan konformasi diamati pada S2 subunit.
Perubahan ini dari bentuk terkompresi menjadi seperti paku bentuk dikonfirmasi oleh peneliti
yang berbeda dan disebut a keadaan pascafusi. Peta tiga dimensi (3D) dan gambar proyeksi dua
dimensi protein S2 pada pascafusi negara disediakan oleh Song et al. dengan pewarnaan negatif
EM. Itu juga dikonfirmasi dari tes biofisik dan Cryo-EM analisis struktur yang mengikat protein
SARS-CoV-2 S setidaknya 10 kali lebih erat dengan reseptor sel inang ACE2 bila dibandingkan
protein lonjakan SARS-CoV.

IMUNOPATOLOGI (BAWAAN DAN ADAPTIF RESPON IMUN)

Respon imun bawaan dan adaptif diprakarsai oleh infeksi SARS-CoV-2. Humor dan
diperantarai respons sel imun selanjutnya dilaporkan memainkan peran protektif berperan
melawan infeksi. Sedangkan inflamasi dan respon imun yang tidak berfungsi mengakibatkan
baik lokal maupun sistemik kerusakan jaringan. Pola molekul terkait patogen (PAMPs)
pengenalan memicu respon imun bawaan, lebih lanjut mengaktifkan jalur pensinyalan dan
translokasi nuklir faktor transkripsi [seperti faktor inti B (NF-κB), faktor respons interferon
(IRF3 dan IRF7), dan aktivator protein 1 (AP-1). Faktor transkripsi ini lebih lanjut
mengakibatkan inisiasi faktor nekrosis tumor (TNF), respons inflamasi yang bergantung pada
kemokin (melalui ekspresi terstimulasi NF B dan AP-1), dan interferon tipe-I (IFN-α dan ) yang
bergantung pada respon imun bawaan antivirus untuk menekan infeksi virus. Di sisi lain, adaptif
respons imun spesifik (untuk virus atau sel yang terinfeksi) dengan virus) dan menjadi terlihat
setelah 1 minggu timbulnya penyakit. Peran protektif imun humoral (sel B) Respon terutama
disampaikan oleh sekresi antibodi ke menetralisir virus SARS-CoV-2 setelah secara khusus
memblokir interaksi virus-inang.46,57 Respon sel T terhadap virus infeksi signifikan untuk
pembunuhan langsung sel yang terinfeksi (oleh sel T CD8+), sedangkan sel T CD4+ membantu
dalam sitokin produksi dan priming sel B dan sel T CD8+.58-60 Lisa dan rekan kerja
menyajikan deskripsi kronologis berbagai peristiwa yang terjadi selama infeksi SARS-CoV-2.

SISTEM ORGAN YANG TERLIBAT

SARS-CoV-2 terutama mempengaruhi sistem pernapasan terlebih dahulu dan kemudian
menyebar secara sistemik ke jantung, hati, dan ginjal, meskipun masih belum pasti apakah
infeksi virus secara langsung mengakibatkan cedera organ atau jaringan seperti yang diamati
pada COVID-19 pasien. Penting untuk disebutkan bahwa ACE2 sangat diekspresikan dalam
saluran pernapasan dan organ serta jaringan lain, meliputi sistem kardiovaskular (CVS), SSP,
GIT, dan sistem reproduksi wanita.63,64 Pada sistem paru, ada ekspresi tinggi ACE2 di paru-
paru dan bronkial sel cabang, dan berfungsi sebagai tempat masuk utama dan situs pengikatan
untuk SARS-CoV-2.65 Ekspresi ACE2 yang lebih tinggi ini membuat sel-sel epitel alveolar
lebih mudah diakses untuk SARS CoV-2 dan secara klinis digambarkan oleh perkembangan
pesat dari pneumonia, berkembang menjadi distres pernapasan akut sindrom (ARDS) dan
kegagalan organ multipel pada kasus.10 Dalam CVS, sel (jantung, sel endotel, dll.) diketahui
menunjukkan ekspresi ACE2 yang tinggi, yang bertindak untuk mengatur tekanan darah dan
kontraktilitas miokard.66 Pengikatan SARS CoV-2 ke ACE2 dapat mengakibatkan aktivasi dan
upregulasi cara jalur transduksi sinyal hilir ACE2. Ini termasuk aktivasi Ras-ERK-AP-1 jalur,
yang selanjutnya dapat mengaktifkan motif C−C chemo kine ligand 2 (CCL2), yang merupakan
faktor pro-fibrosis, menghasilkan dalam pengembangan peradangan jantung dan fibrosis. An
peningkatan kadar penanda miokard, spesifik (seperti hs cTnI) dan nonspesifik (creatine kinase,
creatine kinase MB isoenzim dan laktat dehidrogenase), telah dilaporkan dalam pasien dan dapat
bertindak sebagai alat penting untuk menentukan tingkat perkembangan COV-2 ke jantung serta
organ vital lainnya organ. Di SSP, COV-2 dapat menginfeksi SSP di empat cara yang berbeda:
(i) Cedera infeksi langsung: Ini melibatkan (a) jalur peredaran darah: virus melewati peningkatan
permeabilitas sawar darah otak (BBB) karena badai sitokin; (b) jalur saraf: ujung saraf sensorik
adalah target utama untuk infeksi virus, yang dapat mengakibatkan transpor aksonal anterograde
atau retrograde oleh kinesin motorik dan dynein. (ii) Cedera hipoksia: Akibat infeksi virus dari
jaringan paru-paru, peradangan eksudatif (baik di alveolus maupun interstisial), edema paru, dan
gangguan terkait. Peningkatan gangguan pertukaran gas alveolus menyebabkan hipoksia di SSP,
yang menyebabkan peningkatan metabolisme anaerobik di mitokondria sel otak.
Hipoksia ini menyebabkan CNS hipertensi (sakit kepala), edema (mengantuk),
pembengkakan umbi olfaktorius (kehilangan rasa) dan dapat menyebabkan kerusakan parah pada
SSP. (iii) Sistem kekebalan: Infeksi makrofag, mikroglia, dan astrosit dapat mengaktifkan sel
imun di otak, dan badai sitokin yang diakibatkannya dapat mengakibatkan kerusakan otak. (iv)
ACE2: interaksi SARS-CoV-2 dengan ACE2 yang diekspresikan dalam endotel kapiler dapat
merusak BBB dan memudahkan masuknya virus dengan menyerang pembuluh darah system.
GIT: Ekspresi tinggi ACE2 dan TMPRSS2 dalam sel epitel usus termasuk setiap organ
(duodenum,usus kecil, pankreas, dan hati) dari saluran pencernaan membuat sel dan organ ini
menjadi target potensial COV-2. A studi terbaru oleh Xiao F et al. mendeteksi RNA virus dan
protein nukleokapsid di lambung, duodenum, dan dubur epitel. Sistem reproduksi: ACE2 juga
sangat diekspresikan di organ reproduksi, terutama di plasenta, rahim, dan antarmuka janin
wanita hamil, untuk melawan preeklamsia. Kehadiran ACE2 di jaringan janin juga dapat
menyediakan situs target untuk pengikatan COV-2, menyebabkan lebih lanjut morbiditas dan
mortalitas.

PENGEMBANGAN TERAPI DAN VAKSIN PERKEMBANGAN

 Pengembangan Terapi. Strategi terapeutik dan profilaksis untuk menghadapi yang ada
dan yang berpotensi akan datang infeksi virus corona sedang dalam pengembangan. Pendekatan
pengobatan simtomatik saat ini diikuti tanpa adanya pengobatan antivirus eksklusif terhadap
SARS-CoV-2. Kecerdasan buatan dan alat komputasi lainnya saat ini digunakan untuk
membantu proses panjang penemuan obat dan pengembangan melawan patogen baru ini.
Menggunakan baru-baru ini informasi genetik yang tersedia dan pemodelan struktur protein,
beberapa strategi terapi berdasarkan repurposing obat adalah: diproyeksikan untuk pengobatan
segera pasien yang terinfeksi.79-82 Identifikasi target untuk menghentikan patogenesis infeksi
virus memegang kunci dalam perkembangan ini. Virus protease (3CLpro dan PLpro), sel inang
menghasilkan protease (TMPRSS2), RNA polimerase (RdRp), dan interaksi situs protein S virus
dengan reseptor host ACE2 adalah di antara target utama yang diidentifikasi untuk penggunaan
kembali yang sudah ada molekul antivirus dan molekul kecil baru yang sedang dikembangkan
(Gambar 3).
Menargetkan protein S permukaan SARS-CoV-2 menggunakan antibodi penetralisir
(nAbs) adalah strategi lain yang diusulkan.46,94,95 Kesamaan dekat SARS-CoV-2 dengan
SARS-CoV memungkinkan para peneliti untuk mengeksplorasi aktivitas penetralan silang nAbs
yang dikembangkan untuk SARS-CoV melawan Infeksi SARS-CoV-2. Pendekatannya sebagian
besar diarahkan memanfaatkan informasi genomik yang tersedia saat ini untuk mensintesis
segmen imunogenik terhadap protein S termasuk RBD-nya. Beberapa penyaringan timah
tradisional dan lanjutan dan metode pengujian laboratorium/hewan dianggap mempercepat
proses ini biasanya lambat dan menantang. Disarankan juga bahwa kombinasi nAbs mungkin
diperlukan untuk menjamin profilaksis. Beberapa target lain yang dipertimbangkan untuk
pengembangan antibodi penetralisir didasarkan pada informasi yang terkait dengan SARS dan
MERS yang sudah dikenal infeksi. Target ini termasuk IL-6/IL-6R, CD16, motif aktivasi
berbasis tirosin imunoreseptor (ITAM), Toll-like receptor 3 (TLR3), interseluler spesifik sel
dendritik adhesion molecule-grabbing nonintegrin (DC-SIGN), interferon -inducible protein 10
(IP-10/CXCL10), interseluler adhesion molecule 3 (ICAM-3), dan monosit chemo attractant
protein-1 (MCP1). Terapi sitokin (terdiri dari kemokin, interferon, dan lain-lain) juga
diusulkan karena potensinya untuk menghentikan replikasi virus dan demikian penggunaannya
dalam mengobati infeksi SARS. Beberapa contoh termasuk interferon rekombinan (rSIFN-co),
rekombinan interferon manusia INF-ω (rhIFN-ω), polimer konjugat varian sistein (MetIL-
29C172S-PEG), interferensi tahan lama pada fusi dengan peptida pengikat albumin serum
manusia (HSA IFN), dan pengobatan IFN-λ1. Pegilasi Interferon-α2b di Pasien COVID-19
mengakibatkan durasi virus yang dipersingkat shedding, terutama pengurangan penanda akut
peradangan seperti protein C-reaktif dan IL6.
Menargetkan genom RNA virus SARS-CoV-2 menggunakan RNA interferensi (RNAi)
atau oligonukleotida antisense adalah yang lain pendekatan yang menarik untuk
dipertimbangkan. Merancang urutan RNA komplementer untuk menargetkan dan menetralisir
RNA SARS-CoV-2 menantang karena domain urutan RNA yang dilestarikan untuk virus ini.
Kabarnya bahwa RNAi seperti RNA pengganggu kecil (siRNA), RNA aptamers, dan
oligonukleotida antisense mungkin berguna dalam mengobati infeksi SARS. Lebih lanjut dalam
siRNA terapi, daerah yang berbeda digambarkan sebagai target untuk menghentikan infeksi.
siRNA-M1 dan M2 dirancang untuk secara tepat menargetkan daerah protein M mRNA SARS
dengan gangguan efisiensi >70% (permohonan paten CN101173275). Demikian pula,
diungkapkan bahwa serangkaian siRNA adalah terungkap untuk menargetkan dan menghambat
ekspresi SARS-CoV M, gen N, dan E. Target siRNA lain yang dilaporkan termasuk RNA daerah
polimerase dan replika dari coronavirus menghambat infeksi dan replikasi. Oligonukleotida dan
RNA antisense aptamers juga dilaporkan menargetkan struktur pseudoknot dan pelepasan RNA
SARS CoV, masing-masing.
Pengembangan Vaksin. Pandemi COVID-19 telah sangat berdampak pada kehidupan
manusia, dan upaya putus asa sedang dipekerjakan di seluruh dunia untuk mengembangkan yang
aman dan efektif vaksin. Kandidat vaksin pertama telah berhasil uji klinis manusia sebagai hasil
dari pengembangan yang dilacak dengan cepat strategi dan platform teknologi vaksin canggih.
Mirip dengan apa yang dijelaskan sebelumnya untuk pengembangan terapeutik, kecocokan
genom yang signifikan dari SARS-CoV-2 dengan virus corona lainnya membantu para
pengembang vaksin untuk memfasilitasi desain menuju vaksin yang paling menjanjikan calon.
Strategi target untuk sebagian besar vaksin kandidat adalah untuk menginduksi nAbs terhadap
protein S virus, mencegah penyerapan host yang dimediasi ACE2. Dalam kasus pengembangan
vaksin SARS CoV, titer nAbs lebih tinggi dan lebih baik perlindungan dilaporkan dengan vaksin
subunit protein S ketika: dibandingkan dengan strategi target lainnya. Vaksin SARS/MERS
penelitian pengembangan menunjukkan subunit protein S, RBD dari Subunit S1, dan protein/gen
S sebagai target yang paling disukai situs. Tapi tetap saja, pengetahuan tentang SARS-CoV-2
spesifik antigen untuk kandidat vaksin yang sedang diuji terbatas. NS pengembangan kandidat
vaksin COVID-19 mengandalkan beberapa platform teknologi tinggi termasuk virus yang
dilemahkan dan tidak aktif, vektor virus yang bereplikasi dan tidak bereplikasi, DNA dan
mRNA, partikel mirip virus, dan berbasis protein rekombinan pendekatan. Beberapa platform
menawarkan keuntungan utama seperti viral vektor dengan respon imun yang kuat, protein
superior ekspresi, dan stabilitas yang berkepanjangan, dan DNA atau mRNA menawarkan
fleksibilitas manipulasi antigen, sedangkan rekombinan pendekatan pengembangan berbasis
protein lebih mudah untuk ditingkatkan menggunakan kemampuan produksi yang ada. Dalam
Tabel 1 kami mencantumkan beberapa kandidat vaksin COVID-19 tercanggih yang memiliki
baru-baru ini pindah ke pengembangan klinis. Meningkatkan imunogenisitas menggunakan
adjuvant vaksin juga di bawah pertimbangan untuk menurunkan dosis yang layak dan untuk
memperluas jendela terapeutik dan keamanan. Kekebalan yang dikompromikan sistem dan risiko
tinggi penyakit pada populasi lanjut usia juga menuntut strategi ajuvan untuk meningkatkan
kemanjuran vaksin dalam kelompok usia ini. Beberapa adjuvant berlisensi dikembangkan khusus
untuk vaksin COVID-19 adalah AS03 (GlaxoSmith Kine), MF59 (Seqirus), dan CpG 1018
(Dynavax).
Peran Nanoteknologi. Krisis COVID-19 juga menuntut analisis mendesak dari semua
nanoteknologi yang tersedia peralatan. Sementara strategi pengobatan nano sedang digunakan
untuk desain pembawa vaksin, tidak ada cukup pendekatan teknologi nano lain yang dieksplorasi
untuk mengatasi saat ini kejadian luar biasa. Naskah ini mencoba menyajikan secara sistematis
status penggunaan nanoteknologi saat ini dalam terapi dan pengembangan vaksin. Perkembangan
dan tantangan terapeutik terhadap infeksi SARS-CoV-2 tidak jauh berbeda dari yang lain
penyakit menular serta penelitian onkologi. Demikian pula, pengembangan vaksin memiliki
kesamaan yang signifikan dengan strategi dieksplorasi melawan SARS yang sebelumnya
dikenal, MERS coronaviruses. Oleh karena itu, ada baiknya meninjau kembali ini dengan cermat
strategi terapi/vaksin terkait dan penggunaan teknologi nano terkait, dan dengan cara ini tujuan
kami adalah merancang "repurposed" nanoteknologi” untuk mempercepat penelitian saat ini.
Pengiriman Antivirus dan Biomolekuler. Berbasis nanocarrier terapi menawarkan
beberapa kesempatan untuk mengatasi keterbatasan terapi antivirus saat ini. Beberapa tantangan
dasar seperti kelarutan air yang buruk dan bioavailabilitas yang rendah dapat diselesaikan dengan
pengiriman obat antivirus berbasis nanocarrier, memodifikasi sifat farmakokinetik/
farmakodinamiknya dan menghasilkan pengurangan dosis, pengurangan toksisitas, dan
peningkatan obat bioavailabilitas dan pemeliharaan penekanan virus sebaran. Meskipun
penekanan virus dalam plasma, jenis lain dari Tantangannya adalah adanya konsentrasi
subterapeutik dari obat antivirus di situs cadangan. Target aktif nanocarrier menawarkan
kesempatan untuk melintasi hambatan biologis dan mencapai konsentrasi terapeutik dalam virus
terlindung reservoir. Lebih lanjut dimungkinkan untuk menargetkan organ tertentu dan situs
seluler dan antar sel yang terlibat dalam patofisiologi SARS-CoV-2 (mungkin sel pengekspresi
ACE2, domain protein S virus, situs pengikatan cathepsin, dll.). Nanocarrier pelepas obat yang
terkontrol/berkelanjutan adalah yang terbaik solusi untuk mengurangi efek risiko dari kepatuhan
pasien yang buruk dan rebound virus selama pengobatan infeksi virus. A strategi nanomedicine
dengan demikian merupakan alat yang ampuh untuk mengubah antivirus yang menggunakan
kembali dan meningkatkan manajemen puncak COVID-19 di sana.
Peran teknologi nanocarrier sangat menentukan dalam pengembangan RNAi, nAbs,
protein, peptida, dan lainnya biologis. Prasyarat penting dengan obat tersebut kandidat adalah
perlindungan terhadap degradasi "kehilangan fungsi" dalam sirkulasi sistemik dan pengiriman
intraseluler. Toksisitas/imunotoksisitas sistemik adalah masalah besar lainnya, lebih banyak lagi
khususnya dengan obat berbasis protein dan peptida. Pengiriman berbasis nanocarrier (termasuk
prodrug biologis) memastikan peningkatan paruh biologis dengan mencegah pelepasan obat
prematur dan degradasi, bersama dengan penghindaran ginjal dan hati clearance. Nanocarrier
yang direkayasa menawarkan karakter siluman untuk menghindari pengenalan kekebalan dan
penyerapan seluler yang lebih baik. Nanopartikel yang ditargetkan memberikan tingkat
peningkatan endositosis yang lebih baik memastikan pengiriman terapi dosis nanopartikel ke sel
target. Kemampuan untuk membawa yang lebih tinggi beban obat memerlukan pengiriman
nanopartikel lebih sedikit dan lebih lanjut didukung dengan pelepasan obat terkontrol dalam sel
memastikan pengurangan efek samping.
Pendekatan Nanomedicine untuk Terapi COVID-19 (Seleksi Rasional Kombinasi Obat-
Nanocarrier). Berbagai bagian aktif termasuk antivirus, biologik, dan asam nukleat dapat dimuat
dan dikirim oleh nanocarrier. Menghubungkan kandidat terapi yang tepat ke kanan nanocarrier,
yang ditujukan untuk kondisi penyakit tertentu, sangat penting untuk keberhasilan komersial
nanomedicine melawan virus SARS CoV-2. Pendekatan nanomedicine ini perlu berurusan
dengan merumuskan ulang kandidat obat yang disetujui maupun yang sedang diuji coba untuk
meningkatkan "indeks terapi" (TI), terutama dengan mengatasi keterbatasan yang terkait dengan
molekul obat dan mengurangi toksisitas konvensional atau efek samping. Perkembangan terapi
yang diusulkan untuk pengobatan COVID-19 memiliki kesamaan dasar dengan penelitian
onkologi. Oleh karena itu, platform nanomedicine yang tersedia saat ini untuk antikanker terapi
harus dipertimbangkan untuk memelihara ini pendekatan. Pemahaman mekanistik yang lebih
baik tentang efek samping spesifik obat adalah "langkah pertama" dalam pengembangan ini
proses. “Langkah kedua” dalam proses ini adalah meneliti dan pilih strategi nano yang sangat
mendasar untuk memaksimalkan dampak dari nano pada obat TI. Nanodelivery biologi juga
membutuhkan desain nanocarrier cerdas yang merangkul strategi seperti pendekatan prodrug.
Perkembangan rasional dan klinis terjemahan nanomedicine akan membutuhkan beberapa jalur
strategis perkembangan (yang serba cepat dan yang lebih lambat) mengatasi tantangan translasi
yang tepat dan mendorong lebih banyak nanomedicine penelitian. Pedoman strategis yang
diusulkan untuk pengembangan nanomedicines antikanker/antivirus sangat penting, menekankan
area yang tepat dan alat yang tepat untuk melacak cepat penelitian nanomedis COVID-19.
Strategi 1. Pemilihan Nanocarrier untuk Melewati Batasan Konvensional dari Kandidat
Obat. Untuk misalnya, konjugat obat antibodi yang relatif aman dari auristatin toksik disetujui
untuk pengobatan kanker hematologi. Batasan utama untuk penggunaan konjugat ini adalah
muatan obat yang dapat ditoleransi sangat rendah. Untuk mengatasi ini masalah, nanopartikel
polimer dikembangkan dengan tinggi muatan auristatin untuk mencapai tumor yang efisien dan
aman supresi. Demikian pula, merumuskan poli(etilena glikol)-nanopartikel berbasis
poli(laktida) yang sarat dengan Aurora B kinase inhibitor mengungkapkan peningkatan
kemanjuran dan mengurangi toksisitas sebagai dibandingkan dengan bentuk bebasnya yang
menghasilkan sisi yang tidak dapat ditoleransi efek dalam uji klinis fase II.150 Keterbatasan
yang terkenal dari kandidat obat asam nukleat (misalnya, RNAi) adalah sistemiknya
ketidakstabilan sirkulasi dan prasyarat intraseluler mereka delivery. Lipid nanopartikel (LNPs)
yang membawa siRNA adalah contoh platform nanoteknologi (Onpattro) yang digunakan untuk
mencegah degradasi sistemik ini bersama dengan manfaat dari penargetan hati. Nanopartikel
silika mesopori berlapis lipid, digunakan untuk menghasilkan senyawa yang sangat hidrofilik
dan tidak stabil molekul antivirus ML336 (penghambat kimia Venezuelan virus ensefalitis kuda),
menunjukkan peningkatan waktu sirkulasi dan biokompatibilitas ML336 in vivo. Sagu dan rekan
kerja melaporkan metode throughput tinggi (bernama FIND) untuk menyaring LNP yang dapat
melewati hati dan memberikan fungsi mRNA ke sel in vivo. Secara garis besar, hubungan antara
struktur nanopartikel dan target pengiriman mRNA in vivo mungkin akan dijelaskan dari
penelitian ini. Nanocarrier digunakan untuk mencegah imunotoksisitas sistemik dari obat
berbasis protein dan mempromosikan terapi imuno-onkologi.
Strategi 2. Merubah/Merekayasa Ulang Narkoba secara Kimiawi. Molekul obat diubah
untuk meningkatkan kompatibilitasnya dengan kelas atau jenis nanocarrier tertentu, menjadikan
ini a pendekatan yang lebih umum untuk kandidat obat dengan kesamaan sifat fisikokimia.
Pembawa nano lipid bilayer (liposom) adalah nanocarrier yang lebih disukai untuk berbasis
gradien pH pemuatan jarak jauh obat amfifilik dan yang dapat terionisasi. Hidrofobisitas
doksorubisin dimodifikasi secara kimia menjadi meningkatkan kompatibilitasnya dengan poli
(asam laktat-co-glikolat) nanopartikel. Pendekatan lain yang menarik di sini adalah sintesis
"prodrugs" untuk memastikan kompatibilitasnya dan penggabungan dalam nanocarrier tertentu
bersama dengan mereka karakteristik pelepasan terkontrol dan terlokalisasi. Prodrug anti-HIV
dari kandidat antiretroviral (ARV) cabotegravir memiliki telah disintesis dengan memfungsikan
ester asam lemak (dengan panjang karbon variabel), diikuti oleh lapisan poloxamer untuk
mendapatkan formulasi nanokristal yang stabil. Farmakokinetik in vivo penelitian pada tikus dan
kera rhesus mengungkapkan secara signifikan peningkatan efektivitas cabotegravir,
menunjukkan perpanjangan pelepasan obat dan parameter farmakokinetik. ARV. Lain strategi
prodrug untuk emtricitabine yang sangat larut dalam air (menggunakan kelompok masking
karbonat dan karbamat bioreversibel) menunjukkan pelepasan prodrug berkelanjutan yang
diprediksi oleh in vitro ke in vivo pemodelan ekstrapolasi. Wei dan rekan kerja telah melaporkan
penggunaan kolesterol-dimodifikasi hydroxychloroquine (Chol HCQ) dimuat liposom yang
menurunkan dosis dan toksisitas hydroxychloroquine dan juga menghambat proliferasi tikus
fibroblas paru, sehingga mengurangi fibrosis paru. Ini strategi dapat diadopsi untuk memiliki
manfaat ganda dalam SAR-COV-2 pasien, yang menunjukkan viral load dan fibrosis paru.
Menggunakan ikatan ester terhidrolisis, irinotecan (hidrofilik) dan obat antikanker chlorambucil
(hidrofobik) konjugat telah disintesis. Nanopartikel disintesis dengan perakitan sendiri obat
amfifilik ini konjugat obat menunjukkan retensi sistemik yang berkepanjangan, akumulasi
jaringan tumor, dan peningkatan serapan seluler. Penghubung ester terhidrolisis terkonjugasi ke
docetaxel memungkinkan pemuatan yang efektif dan pelepasan dari misel polimer inti-silang
untuk memberikan a kemanjuran terapi yang tinggi terhadap kanker payudara dan ovarium.
Prodrug serupa lainnya "asam lemak terkonjugasi ke cabazitaxel" dengan hasil PEG-lipid dalam
nanopartikel rakitan menunjukkan mengurangi toksisitas sistemik dan kemanjuran antikanker
yang unggul.
Strategi 3. Nanomedicine untuk Obat Kombinasi Terapi. Terapi obat kombinasi adalah
hal lain kemungkinan untuk pengobatan COVID-19, menawarkan beberapa keuntungan seperti
dosis yang lebih rendah dari masing-masing obat menyebabkan lebih sedikit efek samping,
mencapai beberapa dan melengkapi target terapeutik, dan mengurangi kemungkinan
perkembangan resistensi. Beberapa kombinasi seperti itu untuk novel pengobatan coronavirus
didokumentasikan dalam lanskap WHO informasi (Tabel 2). Nanocarrier juga secara intrinsik
sangat berguna untuk pengiriman beberapa obat dengan sifat fisikokimia yang menjanjikan
potensi penuh dari terapi kombinasi. Fleksibilitas yang ditawarkan oleh berbagai nanomaterial
dan teknik fabrikasi memungkinkan desain kombinasi obat yang dimuat dalam nanocarrier
dengan sangat baik kontrol dalam menjaga rasio obat sinergis, tumpang tindih farmakokinetik,
dan mengurangi kombinasi efek samping. Berbagai strategi nanocarrier dijelaskan untuk: ko-
enkapsulasi obat hidrofobik dan hidrofilik (Gambar 5), mencapai pelepasan berurutan dari dua
obat pemuatan rasiometrik dan pelepasan terkontrol dari tiga obat kandidat, codelivery
RNAi/plasmid DNA + chemother apeutics, dan codelivery siRNA + micoRNA.
Sebuah nanosuspensi LNP sarat dengan tiga obat ARV (dua hidrofobik: lopinavir dan
ritonavir dan satu hidrofilik: tenofovir) telah diformulasikan untuk mengatasi kelenjar getah
bening insufisiensi obat dari kombinasi oral obat-obatan ini. Ini formulasi nanopartikel
menunjukkan obat plasma tahan lama profil dan tingkat obat kelenjar getah bening yang lebih
baik di kera di vivo model. Sebuah nanoformulasi liposom (Vyxeos) dilengkapi dengan
kombinasi obat antikanker yang tetap daunorubicin dan sitarabin baru-baru ini disetujui oleh
FDA AS untuk mengobati leukemia myeloid akut pada orang dewasa. Multidrug dimuat
(antiretroviral, agen reaktivasi latency, dan obat penyalahgunaan antagonis) nanoformulasi
pegilasi-magneto-liposomal telah menunjukkan transmigrasi BBB in vitro dan in vivo dengan
aktivitas anti-HIV yang signifikan dalam sel SSP primer. Ini strategi nanoterapi multifungsi
dapat diterapkan untuk menargetkan SARS-COV-2 yang telah bermigrasi ke CNS. Namun,
rejimen kombinasi obat adalah standar perawatan untuk berbagai terapi, tetapi mengoptimalkan
nanoformulations adalah tugas berat. Pengoptimalan ini tantangan termasuk menganalisis
interaksi antara dua atau lebih banyak obat, menyeimbangkan antagonisme/sinergi/toksisitas, dan
mengontrol profil pelepasan masing-masing obat. Metode penyaringan throughput tinggi
diperlukan untuk memahami interaksi biologis dan temukan segala jenis sinergi yang hadir.
Metode skrining in vitro untuk menentukan obat yang ideal rasio menuntut peningkatan untuk
meniru lingkungan mikro 3D jaringan manusia target. Model hewan praklinis adalah penting
untuk mempercepat terjemahan klinis, tetapi perbedaan antara model penyakit pada hewan dan
penyakit pada manusia adalah alasan utama kegagalan penelitian. Nanomedicine ilmuwan harus
mengambil keuntungan dari pengembangan obat tingkat lanjut alat, teknologi penyaringan,
bioinformatika, model hewan, dll. untuk menyelidiki dan memvalidasi kombinasi nanopartikel
terapi.
Pengiriman Vaksin. Kesamaan yang tampak dari SARS-CoV-2 dengan virus lain
(terutama SARS-CoV dan MERS-CoV), serta dengan pengetahuan sebelumnya tentang
kekebalan protektif mereka tanggapan, sangat membantu untuk berhasil mengembangkan
COVID-19 vaksin. Nanopartikel dapat dimuat dengan jangkauan yang luas dari bagian antigenik
(oleh jebakan fisik atau kimia) konjugasi), dan tampilan antigenik yang benar membuatnya
sangat alternatif yang relevan dalam vaksinologi jika dibandingkan dengan pendekatan
konvensional. Selain melindungi yang asli struktur antigen, nanopartikel juga meningkatkan
pengiriman dan presentasi antigen ke antigen-presenting sel (APC). Keuntungan utama dari
nanocarrier vaksin adalah berukuran nano, karena banyak sistem biologis seperti virus (termasuk
SARS-CoV-2) dan protein juga berukuran nano. Nanopartikel dapat diberikan secara oral dan
intranasal rute dan injeksi subkutan dan intramuskular, menawarkan keuntungan utama dengan
mengatasi hambatan dan penargetan jaringan lokasi kunci seperti kelenjar getah bening,
menembus mukosa, dan penghalang epitel (saluran napas, hidung, gastrointestinal, dll.). Laporan
sebelumnya telah menyarankan bahwa imunitas humoral dan seluler melakukan peran protektif
dalam infeksi SARS CoV.203.204 Nanopartikel telah menunjukkan kemampuannya untuk
menargetkan baik adaptif (sel T, sel B) dan imun bawaan sistem (makrofag, monosit, neutrofil)
di seluler tingkat. Memodulasi APC menggunakan nanopartikel bisa sangat penting, terutama
untuk strategi vaksin COVID-19. Kemampuan nanopartikel untuk mengirimkan antigen ke sel
dendritik (DC) dengan meningkatkan presentasi antigen dan beberapa mekanisme dapat
mempromosikan imunitas sel T.207 Smith et al. menjelaskan berbagai mekanisme berbasis
nanopartikel untuk mengubah induksi respon imun pada (Gambar 6).208 Untuk meningkatkan
kemanjuran dan keamanan pendekatan vaksin, keuntungan besar disajikan oleh nanopartikel
adalah kemampuannya untuk menghantarkan molekul bahan pembantu, dan, dalam beberapa
kasus, bahan nano itu sendiri memiliki properti adjuvant intrinsik untuk antigen dimuat. Laporan
WHO (tanggal 27 Mei 2020) berbagai praklinis tahap kandidat vaksin berbasis nanopartikel
(Tabel 3).
Pendekatan Nanomedicine untuk Vaksin COVID-19. Sejarah vaksin secara keseluruhan
menunjukkan keberhasilan besar melawan penyakit menular akut, di mana kekebalan
berkembang secara alami (terutama dengan menetralkan antibodi) memberikan ketahanan
perlindungan pada bagian pasien. Salah satu yang lebih besar Tantangan dalam penelitian vaksin
COVID-19 adalah mengidentifikasi pendekatan yang merangsang imunitas sel T dan sel B
terhadap virus ini. Tantangan lainnya adalah perlunya mempercepat pengembangan "generasi
berikutnya" yang tepat strategi vaksin yang juga dapat mengatasi populasi tertentu subkelompok
atau individu dengan kekebalan yang dikompromikan. Strategi cerdas untuk mengembangkan
COVID-19 berbasis nanocarrier vaksin sama pentingnya dan terkadang tumpang tindih ketika
diparalelkan dengan terapi berbasis nanocarrier. Strategi nanovaccine juga membutuhkan fokus
yang kuat pada seluler presentasi antigen yang dipilih, bersama dengan pemilihan
nanocarrier/nanomaterial yang sesuai untuk menginduksi efek imunomodulator. Bagian berikut
menyoroti desain rasional vaksin berbasis nanocarrier dengan: dua strategi.
Strategi 1. Seleksi Nanocarrier Tergantung Antigen. Memuat antigen di dalam atau di
permukaan nanocarrier tergantung pada beberapa faktor termasuk antigen karakteristik
fisikokimia, stabilitas biologis, target situs, dan tingkat pelepasan imunogen yang diperlukan.
Adsorpsi fisik antigen pada nanopartikel didasarkan pada permukaannya muatan dan interaksi
hidrofobik nonkovalen. Antigen dengan sifat amfoter paling cocok untuk adsorpsi atau
imobilisasi permukaan pada nanocarrier seperti kitosan dan nanopartikel polimer berbasis
dekstran sulfat, partikel nano anorganik (seperti AuNPs), dan nanotube karbon. Pelepasan
antigen dalam kasus seperti itu dirancang sebelumnya berdasarkan: sifat lingkungan biologis
seperti pH, ionik kekuatan, suhu, dll. Enkapsulasi dan jebakan matriks antigen dalam nanocarrier
adalah teknik lain digunakan untuk mencegah degradasi biologisnya. Nanopartikel poli(laktida-
co glikolida) (PLGA) ideal untuk enkapsulasi antigen dan menyediakan biologis terkontrol atau
diperpanjang release. Nanopartikel ini efektif secara praklinis dalam membawa antigen seperti
HBsAg, antigen malaria, tetanus toksoid, antigen Listeria monocytogenes, dan Bacillus anthracis
spora, menghasilkan kekebalan seluler dan humoral yang berkepanjangan tanggapan.
Vaksin COVID-19 berbasis mRNA sudah di bawah uji klinis menggunakan LNPs
sebagai pembawa. mRNA telanjang adalah sensitif terhadap degradasi oleh RNase ekstraseluler,
sehingga merumuskan kendaraan pengirimannya sangat penting.217.218 Selanjutnya, ini mRNA
memerlukan pengenalan reseptor spesifik sel dan lipid penetrasi membran. Kehadiran sitosol dari
eksogen mRNA kemudian memicu mesin seluler untuk terjemahannya menjadi protein yang
berfungsi penuh. LNP berukuran virus (80−200 nm) partikel yang disintesis oleh perakitan
sendiri dari partikel yang dapat terionisasi lipid kationik. Mereka memiliki kemampuan untuk
mengirimkan Mrna efisien ke dalam sitoplasma, seperti yang ditunjukkan oleh beberapa studi.
Kinetika pelepasan berkelanjutan dari ekspresi mRNA dan sehingga terjemahan protein dapat
dicapai dengan memilih rute intramuskular dan intradermal, memberikan antibodi yang tinggi
titer, dan respons imun sel B dan sel T. Nanopartikel yang berbeda dari lipid kationik ini (seperti
1,2-dioleoyloxy-3-trimethylammoniumpropane (DOTAP) atau dio
leoylphosphatidylethanolamine (DOPE)) diformulasikan dengan modifikasi halus (seperti lipid
kationik + kolesterol) nanopartikel, lipid kationik + kolesterol + PEG-LNP), di mana kolesterol
digunakan untuk meningkatkan stabilitas dan PEG-lipid untuk meningkatkan waktu paruh
formulasi. Selain LNP, lainnya mRNA nanocarrier termasuk protamine (peptida kationik)
nanoliposom (∼100 nm), PEG-lipid difungsikan nanopartikel den drimer (∼200 nm), bermuatan
positif minyak dalam air (O/W) nanoemulsion kationik (∼120 nm), nanopartikel polietilen nimin
(100−300 nm ), dan polimer kationik (kitosan) nanopartikel (300−600 nm).221−223 Gambar 7,
I−V mewakili metode pengiriman vaksin mRNA dan pembawa nano yang biasa digunakan.
Mirip dengan mRNA, DNA telanjang juga mengalami sistemik degradasi oleh nuklease
dan pengiriman tidak lengkap ke sel imun khusus. Nanocarrier berdasarkan lipid kationik (sangat
mirip dengan pengiriman mRNA), sintetis dan alami polimer, dan partikel anorganik diusulkan
untuk formulasi vaksin berbasis DNA. Nanocarrier polimer yang mengenkapsulasi DNA
mencegah inaktivasi biologis dan memberikan kontrol pelepasan dan pengiriman sel yang
ditargetkan. PLGA nanocarrier adalah platform polimer yang paling banyak dipelajari untuk
pengembangan vaksin DNA, menunjukkan peningkatan antibodi spesifik antigen sistemik
tanggapan. Untuk meningkatkan efisiensi pemuatan DNA dan perlindungan sistemik, PLGA
fungsional atau komposit nanopartikel (seperti kationik glikol-kitosan + PLGA, PLGA+
polyethylenimine (PEI)) dieksplorasi (Gambar 7,VI). Berbasis polimer kationik lainnya yang
terdokumentasi dengan baik nanocarrier untuk desain vaksin DNA adalah partikel nano kitosan
dan nanopartikel/kompleks PEI. Penggunaan PEG fungsionalisasi pada permukaan nanopartikel
cukup umum untuk memperkenalkan karakteristik siluman (itu membuat mereka tidak terdeteksi
mampu memfagosit dan mencegah sistem retikuloendotelial pembersihan), mencegah interaksi
protein nonspesifik, mengurangi toksisitas sistemik, dan meningkatkan stabilitas.228,229 Untuk
meningkatkan pengiriman mRNA/DNA melintasi sel dan nukleus membran, teknologi fisik
seperti senjata gen dan elektroporasi sedang dieksplorasi. Saat ini, pengembangan vaksin
memanfaatkan teknologi elektroporasi untuk menginduksi pori-pori di membran sel untuk
memasukkan DNA (Gambar 7, VII). Elektroporasi permukaan dilapisi DNA-PLGA nanopartikel
telah menunjukkan pengiriman seluler yang efisien untuk memperoleh B respon sel dan sel T
pada babi. Masa depan klinis dari teknologi elektroporasi portabel sekarang terlihat di ras
penelitian vaksin COVID-19. Sebuah klinis yang sedang berlangsung percobaan
(NCT04336410) menggunakan pengkodean plasmid DNA SARS-CoV-2 S-protein sebagai
kandidat vaksin untuk intradermal administrasi menggunakan perangkat elektroporasi
(CELLECTRA 2000)
Strategi 2. Nanopartikel Ajuvan Vaksin. Vaksin adjuvant nanopartikel (VANs) dianggap
meningkatkan efikasi dan keamanan keseluruhan dari respon imun yang dihasilkan. Khususnya
dalam situasi pandemi COVID-19, vaksin adjuvant sangat penting untuk mengurangi dosis
antigen yang diperlukan (penghematan dosis), memungkinkan produksi lebih banyak unit dan
membuatnya tersedia untuk populasi yang lebih besar. Di antara banyak kandidat vaksin
COVID-19 praklinis, lima subunit protein kandidat vaksin dilaporkan menggunakan kombinasi
antigen dan bahan pembantu. NVX-CoV2373, vaksin nanopartikel (berbasis glikoprotein SARS-
CoV-2 kombinan ulang) dengan adjuvant (matriks M) sekarang diharapkan untuk segera beralih
ke uji klinis. Oleh karena itu, penting untuk mendiskusikan kemungkinan strategi dipekerjakan
oleh VAN dalam studi penelitian lain yang dapat membantu untuk meningkatkan desain vaksin
COVID-19 saat ini. Menginformasikan sel imun spesifik untuk memasang respons imun
protektif terhadap antigen spesifik adalah mekanisme dasar dari VANs dirancang untuk
meningkatkan kemanjuran (dengan berfungsi sebagai kekebalan mempromosikan isyarat, juga
disebut sebagai "sinyal bahaya"). Dalam kasus virus, sinyal bahaya ini ditandai sebagai PAMPs
dan pola molekul terkait kerusakan (DAMP) diturunkan dari virus yang sama. PAMP dan
DAMP dikenali oleh reseptor spesifik yang disebut reseptor pengenalan pola (PRR). Contoh
reseptor tersebut adalah reseptor seperti Toll yang diekspresikan oleh sel imun untuk
meningkatkan regulasi sel T dan B yang kuat priming dengan melepaskan sitokin inflamasi.
Ajuvan meningkatkan keamanan memberikan semacam sinyal kontra-regulasi
menginstruksikan sistem kekebalan untuk mengembangkan toleransi terhadap antigen yang
masuk. VAN dapat bertindak sebagai pembawa nano untuk adjuvant molekuler atau memiliki
sifat fisikokimia yang melekat properti untuk merangsang jalur pro atau anti-imunitas. VAN
dirancang untuk mengatasi keterbatasan yang terkait dengan pengiriman konvensional adjuvant
vaksin molekuler seperti: pembersihan aliran darah yang cepat, distribusi sistemik, dan
kurangnya penargetan sel imun serta kurangnya antigen-adjuvant kolokalisasi. Nanopartikel
polimer yang mengenkapsulasi kecil molekul digunakan untuk pengiriman spesifik organ limfoid
dengan paparan terkontrol. Efek hemat dosis dilaporkan dengan antigen dan dinukleotida siklik
(adjuvant; agonis INF stimulator gen) nanopartikel liposomal koload menunjukkan respon imun
yang aman dan tanpa kompromi.239 Kelenjar getah bening penargetan VAN adalah strategi
yang mapan untuk mencapai efek hemat dosis tinggi secara signifikan, sedangkan penargetan
DCVAN dapat meningkatkan adjuvanticity-nya. Hasil studi in vivo terhadap tantangan infeksi
telah menunjukkan PLGA dan kalsium nanopartikel fosfat co-encapsulating baik antigen dan
adjuvant untuk meningkatkan kemanjuran dengan meningkatkan serapan antigen, Aktivasi APC,
dan titer antibodi yang lebih tinggi. Di lain studi, strategi ko-enkapsulasi memungkinkan
kolokalisasi antigen dan adjuvant dalam kompartemen endosom/fagosom mendorong aktivasi
DC dan memicu presentasi silang yang kuat dan priming sel T.243.244 Aktivasi sinergis APC
dan respons antibodi yang berkepanjangan diamati dengan pengiriman kode adjuvant molekul
kecil TLR4 dan TLR7 menggunakan PLGA nanopartikel.245 VAN (termasuk PLGA, AuNPs)
adalah juga digunakan untuk mengkodekan antigen diri atau imunoregulator obat sebagai
adjuvant untuk menginduksi antigen spesifik perifer toleransi sel T autoreaktif dan memblokir
semua respon autoimun.
Nanopartikel karena adjuvanticity intrinsiknya (oleh mengaktifkan sistem komplemen,
menginduksi autophagy dan aktivasi inflammasome) juga dianggap sebagai VANs. Kimia
permukaan dan hidrofobisitas partikel nano bersama dengan sifat fisikokimia lainnya adalah
mampu memilih mekanisme ajuvantisitas ini secara intrinsik. Sistem pujian yang bergantung
pada gugus hidroksil aktivasi diikuti oleh peningkatan imunitas seluler adalah dilaporkan dengan
poli (propilena sulfida) yang distabilkan pluronik nanopartikel. Partikel nano alumina
terkonjugasi antigen telah dilaporkan meningkatkan imunitas seluler dan humoral tanggapan
sebagai akibat dari induksi autophagy di DC, mendorong presentasi silang antigen ke sel T.
Emas dan PLG nanopartikel dilaporkan mengaktifkan NALP3 inflammasome di DC,
menghasilkan adjuvanticity yang lebih baik mirip dengan mekanisme adjuvanticity yang
dimediasi oleh tawas. Peningkatan side-chain hidrofobisitas nanopartikel poli(asam -glutamat)
ditampilkan dengan peningkatan serapan dan aktivasi DC. Demikian pula, Hidrofobisitas
permukaan AuNP dapat meningkatkan ekspresi sitokin inflamasi baik in vitro dan in vivo.
Ajuvan vaksin telah digunakan untuk meningkatkan efisiensi dan respon antibodi vaksin pada
orang tua. Mereka terdiri dari kelompok populasi yang paling rentan dan memiliki tingkat
kematian kasus tertinggi dari COVID-19 penyakit. Penuaan dikaitkan dengan kronis terus
menerus peradangan sistemik subklinis (peradangan-penuaan) dan didapat melemahnya sistem
kekebalan tubuh, yaitu penuaan kekebalan. Penuaan kekebalan ditandai dengan signifikan
penurunan imunoglobulin M, kadar interferon, jumlah sel T, kecepatan pembelahan dan
proliferasi sel, kemotaksis neutrofil, dan fagositosis.
Emulsi O/W, kompleks perangsang imun, liposom kationik dan anionik, virosom, dan
mikropartikel adalah di antara berbagai bahan pembantu teknologi yang dikembangkan untuk
meningkatkan vaksinasi influenza di populasi yang lebih tua. Emulsi O/W berbasis squalene
adjuvant MF59 dan AS03 telah dilisensikan untuk influenza vaksin yang ditujukan untuk orang
tua. Berbasis liposom adjuvant AS01 adalah contoh kunci lain dari teknologi berlisensi
dikembangkan untuk vaksin subunit herpes zoster yang ditujukan untuk usia tua populasi (70
tahun atau lebih). Penambahan adjuvant telah menunjukkan penurunan risiko pneumonia dan
influenza pada uji klinis dan karenanya dapat memainkan peran penting dalam mengatur respons
sistem kekebalan orang tua, yang selanjutnya dapat pantau perkembangan vaksin COVID-19.
RUANG LINGKUP NANOTEKNOLOGI LAIN-LAIN PENDEKATAN
Ruang lingkup nanoteknologi untuk terapi COVID-19 dan penelitian vaksin tidak
terbatas pada terapi konvensional dan desain vaksin. Beberapa pendekatan lain termasuk lanjutan
pendekatan nanomaterial dan biomimetik mewakili baik potensi penggunaan dalam wabah
seperti COVID-19. Szunerit dan rekan kerja menyelidiki prospek karbon yang difungsikan titik
kuantum (CQD) untuk menghambat virus corona manusia (HCoV-229E) infeksi (Gambar 8,
I−III). CQD dari ukuran yang berbeda (<10 nm), potensial permukaan (−7.9 hingga 39.2 mV),
dan fungsionalitas dieksplorasi sebagai penghambat Huh-7 sel (sel inang) infeksi oleh HCoV-
229E, dan mereka menunjukkan a inaktivasi virus yang bergantung pada konsentrasi. CQD yang
dimodifikasi asam boronat menunjukkan kemanjuran maksimum dengan EC50 nilai 5,2 ± 0,7 g
mL−1, menggambarkan pentingnya fungsi asam boronat untuk menghambat interaksi tahap awal
reseptor S-protein virus dengan membran sel inang. Sel membran yang meniru nanodecoy adalah
pilihan yang menarik untuk menipu dan menjebak patogen. Nanodecoy biomimetik ini termasuk
formulasi liposomal, lipoprotein yang dilarutkan, dan struktur nano membran sel. Liposom hasil
rekayasa permukaan yang ditargetkan dengan antibodi antivirus merupakan strategi yang efektif
untuk memberikan perlindungan terhadap infeksi coxsackie A-21 virus. Demikian pula,
nanodecoy terbungkus bran sel inang nyamuk digunakan untuk menjebak virus Zika dan secara
efektif mencegah infeksi sel inang.276 Lauster dan rekan kerja menyajikan pendekatan yang
menarik menggunakan virus influenza A spike-protein (hemeagglutinin, HA) meniru pengikat
multivalen yang dapat mengikat virus dalam mode multivalen dan menghambat infeksinya.
Biasanya acara pengikatan multivalen diamati antara virus trimerik HA dan residu asam
sialic terminal (Sia) dari glikan permukaan sel inang. Presentasi yang didefinisikan secara
struktural dari Ligan Sia difungsikan pada 3D simetris kompak scaffold, yaitu kapsid bakteriofag
yang menyerupai sel inang dan menargetkan ektodomain HA trimerik virus. K16 residu hadir
dalam lapisan protein ikosahedral simetris bakteriofag Qβ kapsid (diameter 25 nm) menyediakan
platform ideal untuk menjangkar ligan Sia dengan panjang yang bervariasi linker untuk meniru
situs pengikatan trimer HA (Gambar 8, IV). Tomografi cryo-elektron menunjukkan kapsid Qβ
ini menutupi virus A/X31 (subtipe H3N2) menyelimuti dan secara signifikan menghalangi
interaksi sel inang (Gambar 8, V). kapsid fag nanopartikel telah menunjukkan potensi untuk
menghambat virus infeksi selama studi in vitro, ex vivo, dan in vivo (Gambar 8, VI).

KESIMPULAN DAN PANDANGAN

Alat nanoteknologi dapat memainkan peran penting dalam memajukan pengobatan
COVID-19 dan pengembangan vaksin. Informasi terkait dengan morfologi struktural virus
SARS-CoV-2, patofisiologinya, dan respons imunologis terkait adalah penting bagi para
ilmuwan nanoteknologi. Dengan tidak adanya spesifik antivirus terhadap SARS-CoV-2, terapi
saat ini menargetkan interaksi molekuler multifaset yang terlibat dalam infeksi virus dan
sebagian besar terdiri dari penggunaan kembali antivirus yang sudah ada molekul yang
digunakan untuk virus RNA lainnya. Sekarang, itu sama penting untuk mencari pengiriman
nanocarrier yang sesuai teknologi untuk membuat terapi repurposed ini lebih aman dan lebih
efektif. Naskah ini memberikan informasi sistematis tentang strategi nanomedicine yang
digunakan untukmolekul, biologi (khususnya RNAi), dan berbagai terapi kombinasi. Beberapa
strategi juga diusulkan untuk pengembangan rasional pendekatan nanomedicine ini dan
terjemahan klinisnya. Perjalanan vaksin COVID-19 pengembangannya sangat mengesankan dan
melibatkan teknologi tinggi platform seperti vektor virus, pembawa antigen, dan pengiriman
teknologi. Vaksin berbasis mRNA yang menggunakan nanopartikel (LNP) pengiriman sudah
dalam uji klinis, sedangkan yang lain kandidat vaksin dalam fase klinis menggunakan
elektroporasi teknologi untuk administrasi intradermal DNA plasmid. Karena sebagian besar
kandidat vaksin COVID-19 adalah bagian biologis yang canggih (DNA, mRNA, rekombinan)
protein, APC yang direkayasa, dll.), ruang lingkup nanocarrier pengiriman menjadi sangat
relevan. Naskah ini merinci peluang yang disajikan oleh nanocarrier ini untuk mempotensiasi
keberhasilan vaksin COVID-19 dalam hal efikasi dan keamanan. Beberapa dari peluang ini
termasuk berbasis nanocarrier pengiriman yang efektif/bertarget, presentasi antigen yang lebih
baik, dan induksi melengkapi efek imunomodulator. Rasional merancang vaksin berbasis
nanocarrier adalah sama penting untuk keberhasilan klinisnya, maka strategi yang terkait dengan
pemilihan nanocarrier untuk pemuatan antigen dan pengiriman yang efektif dibahas dalam
naskah ini. Penekanan khusus diberikan kepada VAN, yang bertindak sebagai pembawa untuk
adjuvant molekuler atau mount efek pro-atau anti-kekebalan dengan mereka sendiri. Beberapa
berbagai teknologi berdasarkan CQD yang difungsikan dan nanoscaffolds biomimicking juga
dibahas untuk menyajikan lingkup terapi yang tidak konvensional. Di era yang maju ini
nanosains, kami memiliki semua alat untuk mengimplementasikannya teknologi dan memainkan
peran garis depan dalam mengatasi wabah ini.