PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

METODE INDIKATOR STABILITAS PADA PENETAPAN

KADAR ASETOSAL MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETRI UV DENGAN DEGRADASI PAKSA
BERUPA FOTOLISIS

OLEH
MAHISA KAMPALA PUTERA MAHKOTA
NIM : 1351810253

PROGRAM STUDI D-III FARMASI

AKADEMI FARMASI SURABAYA
SURABAYA
2020
 PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

METODE INDIKATOR STABILITAS PADA PENETAPAN

KADAR ASETOSAL MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETRI UV DENGAN DEGRADASI PAKSA
BERUPA FOTOLISIS

Diajukan Untuk Memperoleh Gelar

Ahli Madya Farmasi
Dalam Program Pendidikan D-III Farmasi
Akademi Farmasi Surabaya

OLEH
MAHISA KAMPALA PUTERA MAHKOTA
NIM : 1351810253

PROGRAM STUDI D-III FARMASI

AKADEMI FARMASI SURABAYA
SURABAYA
2020

ii
 LEMBAR PENGESAHAN

METODE INDIKATOR STABILITAS PADA PENETAPAN

KADAR ASETOSAL MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETRI UV DENGAN DEGRADASI PAKSA
BERUPA FOTOLISIS

MAHISA KAMPALA PUTERA MAHKOTA

NIM : 1351810253

Proposal Karya Tulis Ilmiah ini telah diperiksa dan disetujui isi serta
susunannya untuk dapat diuji dan dipertahankan dihadapan Tim Penguji
Proposal Karya Tulis Ilmiah Jenjang Pendidikan Diploma III Akademi
Farmasi Surabaya

Surabaya, 26 April 2021

Disetujui Oleh :
Pembimbing 1 Pembimbing 2

apt. M.A. Hanny Ferry F., M.Farm Vika Ayu Devianti, M. Si

NIDN. 0726018802 NIDN. 0730059001

Penguji,

Ratih Kusuma Wardani, S.Si, M.Si.

NIDN. 0719049001

iii
 KATA PENGANTAR

Puji syukur ke hadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan

hidayah-Nya sehingga naskah Proposal Karya Tulis Ilmiah yang berjudul

METODE INDIKATOR STABILITAS PADA PENETAPAN KADAR

ASETOSAL MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETRI UV DENGAN

DEGRADASI PAKSA BERUPA FOTOLISIS terselesaikan tepat waktu.

Ucapan terima kasih dengan tulus disampaikan kepada pihak-pihak yang telah

membimbing, memberikan inspirasi, bantuan, dan dukungan, kepada antara lain :

1. Direktur Akademi Farmasi Surabaya yang telah menerima dan memberikan

kesempatan untuk studi di lembaga yang beliau pimpin

2. Bapak M.A Hanny Ferry F, M.farm,Apt. selaku Wakil Direktur I Bidang

Akademik dan Bapak Umarudin, S.Si., M.Si. selaku Wakil Direktur II

Bidang Umum, Humas dan Kerja sama.

3. Bapak M.A Hanny Ferry F, M.Farm,Apt. selaku dosen pembimbing I yang

telah memberikan bimbingan dan arahan selama penyelesaian proposal

karya tulis ilmiah ini.

4. Ibu Vika Ayu Devianti, S.Si., M.Si.selaku dosen pembimbing II yang telah

memberikan bimbingan dan arahan selama penyelesaian Proposal Karya

Tulis Ilmiah ini.

5. Ibu Ria Lusiyani, S.Pd.,M.A. selaku dosen wali yang telah memberikan

dukungan sehingga dapat menyelesaikan proposal karya tulis ilmiah ini.

6. Bapak dan Ibu dosen di Akademi Farmasi Surabaya yang turut membantu

dan mendukung penyelesaian karya tulis ilmiah ini.

iv
 7. Kepada kedua Orang tua serta keluarga yang senantiasa memberikan doa,

motivasi dan dukungan moral maupun materil kepada penulis dalam

penyelesaian karya tulis ilmiah ini.

8. Teman-teman saya yang memberikan motivasi, bantuan, dan arahan kepada

penulis sehingga dapat menyelesaikan karya tulis ilmiah ini.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa proposal karya tulis ilmiah ini masih

mempunyai beberapa kekurangan. Oleh karena itu, kritik dan saran sangat

diharapkan. Semoga proposal karya tulis ilmiah ini dapat berguna dan bermanfaat.

Semoga Allah SWT senantiasa memberikan balasan yang lebih baik kepada

pihak-pihak yang telah membantu kelancaran dalam penelitian ini.

Surabaya, Maret 2021

Penulis

v
 DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN..................................................................................iii
KATA PENGANTAR...........................................................................................iv
DAFTAR ISI..........................................................................................................vi
DAFTAR GAMBAR..........................................................................................viii
DAFTAR TABEL.................................................................................................ix
DAFTAR LAMPIRAN..........................................................................................x
BAB I PENDAHULUAN.......................................................................................1
1.1 Latar Belakang Masalah.................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah..........................................................................................3
1.3 Tujuan Penelitian............................................................................................3
1.4 Manfaat Penelitian..........................................................................................3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................4
2.1 Asetosal..........................................................................................................4
2.2 Karakteristik Asetosal....................................................................................5
2.3 Degradasi........................................................................................................5
2.4 Fotolisis..........................................................................................................6
2.5 Metode Penetapan Kadar................................................................................6
2.6 Spektrofotometri UV-Vis...............................................................................7
2.6.1 Pengertian Spektrofotometri UV-Vis......................................................7
2.6.2 Syarat Pengukuran Spektrofotometri UV-Vis.........................................7
2.6.3 Tipe-tipe Spektrofotometri UV-Vis.........................................................8
2.6.4 Hukum Lambert Beer............................................................................10
2.7 Teknik Analisis Data....................................................................................12
2.7.1 Ripitabilitas............................................................................................12
2.7.2 Presisi Antara.........................................................................................12
2.7.3 Akurasi...................................................................................................12
2.8 Kerangka Konseptual...................................................................................13
2.9 Hipotesis.......................................................................................................14
BAB III METODE PENELITIAN.....................................................................16

vi
 3.1 Rancangan Penelitian...................................................................................16
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian........................................................................16
3.3 Sampel, Besar Sampel, dan Cara Pengambilan Sampel...............................16
3.4 Variabel Penelitian.......................................................................................16
3.4.1 Variabel Terikat.....................................................................................16
3.4.2 Variabel Bebas.......................................................................................16
3.5Kerangka Operasional...................................................................................17
3.5.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi...................................................................17
3.5.2 Degradasi Asetosal................................................................................18
3.6 Alat dan Bahan / Instrumen Penelitian.........................................................18
3.6.1 Alat........................................................................................................18
3.6.2 Bahan.....................................................................................................18
3.7 Definisi Operasional.....................................................................................19
3.7.1 Asetosal..................................................................................................19
3.7.2 Analisa Kuantitatif.................................................................................19
3.7.3 Larutan Induk.........................................................................................19
3.7.4 Larutan Baku Kerja................................................................................19
3.8 Teknik Pengumpulan Data...........................................................................19
3.8.1 Pembuatan Larutan Induk Asetosal 1000 ppm......................................19
3.8.2 Pembuatan Larutan Standar Asetosal 100 ppm.....................................19
3.8.3 Degradasi Paksa Asetosal......................................................................20
3.8.4 Penentuan Panjang Gelombang Maksimal............................................20
3.8.5 Pembuatan Kurva Kalibrasi...................................................................20
3.8.6 Analisis Kuantitatif Asetosal.................................................................20
3.9 Teknik Pengolahan Data..............................................................................21
3.10 Rancangan Hasil Penelitian........................................................................22
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................24
LAMPIRAN..........................................................................................................25

vii
 DAFTAR GAMBAR

4
9
10
12
14
17
18

viii
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1Absorpsi sinar UV pada maks. dari beberapa pelarut................8

Tabel 3.1 Data Absorbansi Standar.............................................................21

ix
Tabel 3.2Kadar Asetosal.............................................................................21

DAFTAR LAMPIRAN

x
Lampiran 1. Perhitungan Pembuatan Larutan Induk Asetosal...................25

xi
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Asetosal atau Asam Asetilsalisilat merupakan bahan obat yang memiliki

khasiat sebagai analgesik, antipiretik, dan antiinflamasi. Asetosal memiliki rumus

molekul C9H8O4 dengan berat molekul 180,16 g/mol, kelarutan dalam air 3 mg/ml

dengan suhu 20oC. Asetosal juga memiliki ciri fisik atau pemerian sebagai serbuk

hablur putih dan tidak memiliki bau khas yang kuat. Asetosal memiliki sifat stabil

dalam udara yang kering, namun dalam keadaan lembab asetosal dapat secara

bertahap terhidrolisa menjadi asam salisilat dan asam asetat(1).

Dalam masyarakat luas, asetosal lebih dikenal dengan sebutan aspirin yang

merupakan nama dagang dari asetosal. Asetosal atau aspirin dikenal masyarakat

luas karena dapat mengurangi gejala nyeri ringan hingga sedang dan dapat pula

meringankan gejala demam secara efektif. Hal tersebut menjadikan asetosal atau

aspirin sebagai obat pilihan masyarakat dalam mengatasi gejala nyeri ringan dan

demam. Karena asetosal atau aspirin begitu populer dikalangan masyarakat, perlu

adanya perhatian lebih dalam penggunaan obat asetosal dan terutama dalam

penyimpanannya.

Penyimpanan merupakan hal yang cukup krusial dalam penggunaan obat

tertentu, karena dapat dikhawatirkan obat akan rusak secara berkala bila

penyimpanan obat tersebut tidak sesuai. Dalam hal ini juga berlaku terhadap obat

asetosal yang juga dapat rusak secara berkala bila penyimpanan obat asetosal

1
 2

tidak baik dan benar. Asetosal dalam literatur tertulis bahwa wadah dan

penyimpanan asetosal yakni dalam wadah tertutup rapat. Memang dalam

penyimpanan asetosal perlu dilakukan dalam wadah yang tertutup rapat, agar

udara yang berada di dalam wadah tetap dalam kondisi yang kering sehingga

asetosal tidak terhidrolisa menjadi asam salisilat dan asam asetat(2). Dalam hal

tersebut, yang menjadi indikator stabilitas fisik asetosal adalah udara

penyimpanan yang mana apabila dalam kondisi kering maka asetosal bersifat

stabil.

Dalam penyimpanan, ada beberapa faktor yang dapat mengganggu stabilitas

obat asetosal, salah satunya adalah faktor lingkungan. Kondisi lingkungan sekitar

terhadap penyimpanan dapat mempengaruhi kondisi dari asetosal yang dapat

mengakibatkan terurainya atau terdegradasinya obat asetosal secara fisika maupun

kimia. Hal-hal yang dapat menyebabkan terurainya unsur fisika maupun kimia

dari asetosal antara lain Oksidasi, Hidrolisis, Thermolisis, dan Fotolisis. Dalam

keadaan terurai atau terdegradasi, obat asetosal perlu adanya metode indikator

yang dapat menetapkan kadar asetosal secara valid dan terpercaya.

Dari hal tersebut, penulis ingin mengetahui lebih lanjut terkait indikator

stabilitas fisik yang dapat diterapkan terhadap bahan obat asetosal. Dalam hal ini

penulis ingin menguji stabilitas bahan obat asetosal dengan adanya pengaruh

pengurai cahaya atau degradasi secara fotolisis yang kemudian ditetapkan

kadarnya menggunakan metode Spektrofotometri UV. Cahaya yang dimaksud

adalah cahaya matahari, namun penulis menggunakan metode dengan penyinaran

sinar lampu uv yang panjang gelombangnya disesuaikan agar variabel penelitian

 3

tidak terganggu dengan adanya variabel tak terduga lainnya seperti angin, kotoran,

debu, dan lain lain.

1.2 Rumusan Masalah

Rumusan masalah dari penelitian ini adalah apakah metode

Spektrofotometri UV dapat memberikan hasil perhitungan yang sesuai dan dapat

digunakan sebagai indikator stabilitas asetosal dengan degradasi paksa berupa

fotolisis?

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui metode Spektrofotometri UV

dapat memberikan hasil perhitungan yang dapat digunakan sebagai indikator

stabilitas asetosal dengan degradasi paksa berupa fotolisis.

1.4 Manfaat Penelitian

Memberikan informasi dan menambah referensi mengenai metode indikator

stabilitas pada penetapan kadar asetosal menggunakan Spektrofotometri UV

dengan degradasi paksa berupa fotolisis

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Asetosal

Gambar 2.1 Struktur Molekul Asetosal

Asetosal atau asam asetilsalisilat memiliki nama yang lebih dikenal

masyarakat luas sebagai aspirin. Serbuk asetosal memiliki penampakan

dari tidak berwarna atau kristal putih, atau serbuk granul kristal yang

berwarna putih. Asetosal stabil dalam udara kering, namun dapat

terdegradasi secara perlahan bila dalam suasana lembab menjadi asam

asetat dan asam salisilat(3).

Asetosal yang sering dikenal sebagai aspirin digunakan oleh

masyarakat luas sebagai analgesik atau penahan rasa sakit atau nyeri

minor, antipiterik atau penurun demam dan anti-inflamasi atau

peradangan. Penggunaan aspirin dalam dosis yang terlalu tinggi dapat

menyebabkan beberapa indikasi dan dampak negatif seperti iritasi

lambung, perdarahan, perforasi atau kebocoran lambung serta

menghambat aktivitas trombosit(1). Penggunaan aspirin yang terlalu

rendah dapat menghilangkan khasiat utamanya dan hanya akan berfungsi

sebagai antiplatelet pada dosis 150 mg hingga 300 mg(4).

4
 5

2.2 Karakteristik Asetosal

Asetosal memiliki karakteristik berwarna putih atau hampir putih,

serbuk kristal atau kristal tidak berwarna, serbuk kristal putih, umumnya

berbentuk silindris atau seperti jarum, tidak berbau atau berbau lemah.

Sedikit larut dalam air dengan perbandingan 1:300, mudah larut dalam

alkohol dengan perbandingan 1:5, cukup mudah larut dalam kloroform dan

eter dengan perbandingan 1:15-17(4).Asetosal stabil dalam udara

kering, namun dapat terdegradasi secara perlahan bila dalam suasana

lembab menjadi asam asetat dan asam salisilat(3).

2.3 Degradasi

Dalam penyimpanan terutama dalam jangka waktu yang panjang,

kemungkinan akan terjadi penguraian atau terdegradasinya unsur bahan bila

penyimpanannya kurang tepat. Penguraian unsur bahan tersebut bisa disebabkan

karena kondisi lingkungan yang mempengaruhi unsur bahan obat secara fisika

maupun kimia.

Dalam hal ini, bila degradasi terjadi, maka dapat dikatakan stabilitas bahan

obat tersebut rendah karena penyimpanannya kurang tepat. Perubahan unsur

bahan obat secara fisika akibat terjadinya penguraian atau degradasi antara lain

perubahan fisik yang terlihat seperti warna, perubahan bentuk hablur,

penggumpalan serbuk. Sedangkan dalam degradasi secara kimia, terdapat

beberapa macam penguraian yang terjadi seperti hidrolisis, oksidasi-reduksi, dan

fotolisis(5).
 6

Dari berbagai macam jalur penguraian yang dapat terjadi, perlu adanya

pengawasan yang lebih agar kemungkinan terjadinya penguraian dalam

penyimpanan sangat rendah. Dengan rendahnya kemungkinan terjadinya

penguraian atau degradasi suatu bahan obat, maka dapat dinilai bahwa stabilitas

bahan obat tersebut tinggi.

2.4 Fotolisis

Fotolisis adalah salah satu dari beberapa macam degradasi suatu unsur

bahan obat secara kimia. Fotolisis dapat dikatakan sebagai penguraian atau

degradasi terhadap suatu unsur bahan obat akibat serapan energi radiasi dalam

bentuk cahaya. Reaksi fotolisis yaitu suatu sistem fotolisisakan menghasilkan

radikal bebas yang mengalami reaksi lebih lanjut, apabila molekul yang menyerap

radiasi maka akan terlibat dalam reaksi utama. Apabila molekul penyerapan

radiasi tidak langsung ikut bereaksi melainkan dapat meneruskan energi pada

molekul lain yang bereaksi maka zat penyerapan itu disebut dengan

photosensitizer(5).

2.5 Metode Penetapan Kadar

Dalam penggunaan obat, perlu diketahui secara pasti kandungan atau

kadar suatu bahan obat di dalam sebuah sediaan obat. Namun terlepas dari

penggunaannya, produsen obat juga harus memiliki sebuah prosedur untuk

menetapkan dan mengetahui kadar suatu bahan obat dalam rangka memproduksi

sediaan obat dengan baik. Dalam hal ini, yang menjadi perhatian adalah pengujian

bahan obat untuk menetapkan kadar bahan obat terkait setelah dilakukan

perlakuan seperti pencampuran bahan dan penyimpanan. Hal tersebut dilakukan

agar kualitas sediaan obat yang telah diproduksi bisa terjamin khasiatnya karena
 7

telah diketahui kadar suatu bahan obat di dalam sediaan tersebut yang memiliki

efek farmakologi tertentu.

Terdapat banyak metode penetapan kadar yang dapat digunakan, dalam

hal ini untuk menetapkan kadar asetosal. Metode penetapan kadar yang dimaksud

antara lain seperti Spektrofotometri dan Kromatografi, Spektrofotometri UV,

Kromatografi Cair, Spektrofluorometri, Kromatografi Cair Kinerja Tinggi, dan

Spektrofotometri Raman. Namun dari banyak metode yang bisa dilakukan, dalam

hal ini digunakan metode Spektrofotometri UV. Metode tersebut dikenal memiliki

tingkat kesulitan yang rendah, cepat, selektif, sensitif dan murah(1).

2.6 Spektrofotometri UV-Vis

2.6.1 Pengertian Spektrofotometri UV-Vis

Spektrofotometer UV-Vis adalah pengukuran panjang gelombang dan

intensitas sinar ultraviolet dan cahaya tampak yang diabsorbsi oleh sampel. Sinar

ultraviolet dan cahaya tampak memiliki energi yang cukup untuk mempromosikan

elektron pada kulit terluar ketingkat energi yang lebih tinggi. Sinar ultraviolet

berada pada panjang gelombang 200-400 nm sedangkan sinar tampak berada pada

panjang gelombang 400-800 nm(6).

2.6.2 Syarat Pengukuran Spektrofotometri UV-Vis

Spektrofotometri UV-Vis dapat digunakan untuk penentuan terhadap

sampel yang berupa larutan, gas, atau uap. Pada umumnya sampel harus diubah

menjadi suatu larutan yang jernih, untuk sampel yang berupa larutan perlu

diperhatikan beberapa persyaratan pelarut yang dipakai antara lain:

1. Harus melarutkan sampel dengan sempurna.

 8

2. Pelarut yang dipakai tidak mengandung ikatan rangkap terkonjungsi pada

struktur molekulnya dan tidak berwarna (tidak boleh mengabsorpsi sinar yang

dipakai oleh sampel).

3. Tidak terjadi interaksi dengan molekul senyawa yang dianalisis.

4. Kemurniannya harus tinggi.

Tabel 2.1Absorpsi sinar UV pada maks. dari beberapa pelarut(7)

Pelarut maks., nm Pelarut maks., nm
Asetronitril 190 n– heksana 201
Kloroform 240 Metanol 205
Sikloheksana 195 195
1-4 dioksa 215 Isooktana 190
Etanol 95% 205 Air 330
Benzana 285 Aseton 305
Piridina

Pelarut yang sering digunakan adalah air, etanol, metanol, dan n– heksana

karena pelarut ini transparan pada daerah UV. Untuk mendapatkan spektrum UV-

Vis yang baik perlu diperhatikan pula konsentrasi sampel. Hubungan antara

absorbansi terhadap konsentrasi akan linier (A≈C) apabila nilai absorbansi larutan

antara 0,2-0,8 (0,2 ≤ A < 0,8) atau sering disebut sebagai daerah berlakunya

hukum Lambert-Beer dengan lebar sel 1 cm, dan besarnya absorbansi ini untuk

senyawa yang memiliki ikatan rangkap terkonjungsi yang mengalami eksitasi

elektron π → π*, dengan ↋8.000 – 20.000; konsentrasi larutan sekitar 4 x 10-5

mol/L. Bila senyawa yang akan diukur tidak diketahui Mr-nya, konsentrasi larutan

dengan absorbansi tersebut biasanya digunakan 10 ppm, bila absorbansi yang

diperoleh masih terlalu tinggi, larutan sampel tersebut harus diencerkan;

sebaliknya bila terlalu rendah, maka jumlah sampel harus ditambah(6).

 9

2.6.3 Tipe-tipe Spektrofotometri UV-Vis

Pada umumnya terdapat dua tipe instrumen Spektrofotometer, yaitu

single-beam dan double-beam. Single-beam instrument dapat digunakan untuk

kuantitatif dengan mengukur absorbansi pada panjang gelombang tunggal. Single-

beam instrument mempunyai beberapa keuntungan yaitu sederhana, harganya

murah, daan mengurangi biaya yang ada merupakan keuntungan yang nyata.

Beberapa instrumen menghasilkan single-beam instrument untuk pengukuran

sinar ultra violet dan sinar tampak. Panjang gelombang plaing rendah adalah 190

sampai 210 nm dan paling tinggi adalah 800 sampai 1000 nm.

Gambar 2.2 Diagram alat Spektrofotometer UV-Vis (single beam)

Double-beam instrument mempunyai dua sinar yang dibentuk oleh

potongan cermin yang berbentuk V yang disebut pemecah sinar. Sinar pertama

melewati larutan blanko dan sinar kedua secara serentak melewati sampel.

Sumber sinar polikromatis, untuk sinar UV adalah lampu dueterium, sedangkan

sinar Visibel atau sinar tampak adalah lampu wolfram. Monokromator pada

Spektrofotometer UV-Vis digunakan lensa prisma dan filter optik. Sel sampel

berupa kuvet yang terbuat dari kuarsa atau gelas dengan lebar yang bervariasi.
 10

Detektor berupa detektor foto atau detektor panas atau detektor dioda foto,

berfungsi menangkap cahaya yang diteruskan dari sampel dan mengubahnya

menjadi arus listrrik. Diagram Spektrofotometer UV-Vis (Double-beam) dapat

dilihat pada Gambar 2.3.

Gambar 2.3 Diagram Spektrofotometer UV-Vis (Double-beam)

2.6.4 Hukum Lambert Beer

Hukum Lambert-Beer adalah hubungan linearitas antara absorban dengan

konsentrasi larutan analit(6). Hukum Lambert-Beer ditulis dengan rumus :

A=.b.C

Atau

A = E. b. C

A = absorban (serapan)

 = koefisien ekstingsi molar (M-1 cm-1)

E = koefisien ekstingsi spesifik (ml g-1 cm-1)

b = tebal kuvet (cm)

C = konsentrasi (mol/L)

Hubungan antara E dan adalah :

 11

10 .
E=
massamolar

Nilai  (ekstingsi molar) penting dalam penentuan struktur, karena terkait

dengan transisi elektron yang dibolehkan atau transisi elektron terlarang. Dari

nilai tersebut akan dapat diperkirakan kromofor dari senyawa yang dianalisis.

Pada percobaan yang terukur adalah transmitan, dirumuskan sebagai berikut :

T = I / Io

Gambar 2.4 Absorbsi cahaya oleh sampel

Pada gambar 2.4 perbandingan logaritma Io dengan I menyatakan seberapa

besar sinar tersebut diabsorbsi oleh sampel. Dirumuskan dengan sebagai berikut :

A = log Io / I

A = absorban

T = transmitan

Io = intensitas sinar sebelum melalui sampel

I = intensitas sinar setelah melalui sampel

Hubungan antara A dan T adalah :

A = -log T = -log (I / Io)

Untuk menentukan konsentrasi analit, dapat dilakukan dengan mengukur

banyaknya cahaya yang diabsorbsi sampel dengan menggunakan hukum Lambert-

 12

Beer. Bila koefisien ekstingsi molar tidak diketahui, maka konsentrasi dapat

diukur dengan menggunakan kurva kalibrasi absorban vs konsentrasi dari larutan

standar yang dibuat.

2.7 Teknik Analisis Data

Absorbansi yang didapatkan dari sampel asetosal yang telah diberi

perlakuan secara fotolisis dan telah diukur dengan Spektrofotometer dimasukkan

ke dalam persamaan. Data yang didapatkan dari penetapan kadar asetosal

menggunakan Spektrofotometri UV persamaan dianalisis dari beberapa parameter

validasi yaitu presisi antara, ripitabilitas, dan akurasidengan membandingkan nilai

RSD(8).

2.7.1 Ripitabilitas

Pengujian dilakukan pada sampel yang telah diberi perlakuan dengan 3

konsentrasi yang berbeda dan masing-masing dilakukan pada hari yang sama, dan

dihitung nilai RSD.

2.7.2 Presisi Antara

Pengujian dilakukan pada sampel yang telah diberi perlakuan dengan 3

konsentrasi yang berbeda dan masing-masing dilakukan pada hari yang berbeda,

dan dihitung nilai RSD.

2.7.3 Akurasi

Pengujian dilakukan pada sampel yang telah diberi perlakuan dengan 3

konsentrasi yang berbeda dan masing-masing dilakukan pengulangan sebanyak 3

kali. Hasil yang diperoleh dibandingkan dengan rentang kesalahan yang diijinkan

yakni 90%-107%(9).
 13

2.8 Kerangka Konseptual

Bahan Aktif/Sediaan Farmasi

(Asetosal)

Asetosal dapat mengurai secara fotolisis akibat paparan cahaya secara

konstan dan dalam waktu yang cukup lama, baik dalam masa produksi
atau penyimpanan

Mempengaruhi efektifitas Asetosal dalam sediaan/bahan baku oleh

karena itu diperlukan analisis stabilitas Asetosal/Bahan Aktif

Studi degradasi Studi degradasi Studi degradasi Studi degradasi

paksa paksa: paksa: paksa:
Hidrolisis asam Oksidasi Fotolitik Paparan panas
dan basa

Diperlukan metode analisis yang dapat menentukan kadar

Asetosal/Bahan Aktif dalam sampel yang terurai akibat Degradasi Paksa
Berupa Fotolisis

Pengembangan dan validasi metode Spektrofotometri UV VIS untuk

indikasi stabilitas Asetosal dengan Degradasi Paksa Berupa Fotolisis

Metode Spektrofotometri yang valid untuk analisis indikasi stabilitas

Asetosal dengan Degradasi Paksa Berupa Fotolisis

Gambar 2.5 Konsep analisis asetosal

 14

2.9 Hipotesis

Hipotesis pada penelitian ini adalah metode Spektrofotometri UV dapat

digunakan untuk metode stabilitas penetapan kadar Asetosal dengan degradasi

paksa berupa fotolisis.

15
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian

Penelitian yang akan dilakukan merupakan penelitian eksperimental

terhadap asetosal yang diberi perlakuan degradasi secara fotolisis dan dilakukan

pengukuran kadar dengan metode Spektrofotometri UV

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian

Lokasi penelitian bertempat di Laboratium kimia farmasi Akademi

Farmasi Surabaya, Jalan Ketintang Madya No. 81. Waktu penelitian akan

dilakukan selama rentang Januari – Juni 2021.

3.3 Sampel, Besar Sampel, dan Cara Pengambilan Sampel

Sampel yang digunakan adalah bahan obat serbuk asetosal dan besar

sampel yang digunakan memiliki 3 varian berat yakni 40, 50, dan 60 mg asetosal.

Cara pengambilan sampel adalah dengan menimbang asetosal sebanyak 40, 50,

dan 60 mg menggunakan neraca analitik.

3.4 Variabel Penelitian

3.4.1 Variabel Terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah stabilitas dan kadar dari asetosal

3.4.2 Variabel Bebas

Variabel bebas pada penelitian ini adalah sinar uv dari lampu uv dalam

degradasi fotolisis

16
 17

3.5Kerangka Operasional

3.5.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi

Asetosal

Dibuat larutan induk Asetosal 1000 ppm

Diencerkan menjadi larutan standar 100 ppm

Dibuat larutan baku kerja dengan konsentrasi yang berbeda

(ppm) :

2 4 6 8 1

Dipilih salah satu konsentrasi untuk menentukan panjang

gelombang Maximum

Mengukur absorbansi

Kurva kalibrasi

Gambar 3.1 Kurva kalibrasi

3.5.2 Degradasi Asetosal

 18

Asetosal

Ditimbang dengan konsentrasi

yang berbeda-beda :

80% 100% 120%

Didegradasi secara fotolisis

Dikenakan sinar ultraviolet dengan

lampu uv selama 2 jam di tempat
tertutup

Asetosalhasil degradasi

Gambar 3.2 Degradasi asetosal

3.6 Alat dan Bahan / Instrumen Penelitian

3.6.1 Alat

Alat yang akan digunakan dalam penelitian ini antara lain Pipet tetes, Pipet

volume, Corong, Kuvet, Neraca analit, Labu ukur, Gelas ukur, Mortir, Tabung

reaksi, Stamper dan, Spektrofotometri UV.

3.6.2 Bahan

Bahan yang akan digunakan dalam penelitian ini antara lain Asetosal

Serbuk, Metanol, Etanol dan, Aquadest.

3.7 Definisi Operasional

3.7.1 Asetosal
 19

Serbuk atau serbuk kristal silindris atau seperti jarum berwarna putih atau

tidak berwarna yang sukar larut dalam air, mudah larut dalam etanol, larut dalam

kloroform dan dalam eter

3.7.2 Analisa Kuantitatif

Metode kimia analisis yang digunakan untuk mengetahui kadar suatu

senyawa dalam sampel.

3.7.3 Larutan Induk

Larutan baku kimia yang dibuat dengan kadar tinggi dan akan digunakan

untuk membuat larutan dengan konsentrasi yang lebih rendah

3.7.4 Larutan Baku Kerja

Larutan yang digunakan dalam penelitian ini adalah larutan baku kerja

konsentrasi 100 ppm dan kemudian akan diencerkan menjadi 2, 4, 6, 8, dan 10

ppm

3.8 Teknik Pengumpulan Data

3.8.1 Pembuatan Larutan Induk Asetosal 1000 ppm

Asetosal ditimbang sebanyak 100 mg lalu masukkan kedalam labu ukur

100,0 ml kemudian dilarutkan menggunakan kombinasi etanol dan metanol (1:1)

hingga tanda batas

3.8.2 Pembuatan Larutan Standar Asetosal 100 ppm

Larutan baku induk konsentrasi 1000 ppm dipipet sebanyak 10 ml

kemudian masukkan ke dalam labu ukur 100,0 ml lalu tambahkan pelarut

kombinasi etanol dan metanol (1:1) hingga tanda batas.

3.8.3 Degradasi Paksa Asetosal

 20

Larutan asetosal dibuat dengan varian konsentrasi 80, 100,dan 120%

dengan cara menimbang 80 mg untuk konsentrasi 80%, 100 mg untuk konsentrasi

100% dan 120 mg untuk konsentrasi 120% kemudian masing - masing masukkan

ke dalam erlenmeyer dan dilarutkan dengan pelarut kombinasi etanol dan metanol

(1:1) sebanyak 100 ml lalu ditutup rapat dengan plastik wrap dan dikenakan sinar

ultraviolet dengan lampu uv di tempat yang tertutup dan gelap selama 2 jam

3.8.4 Penentuan Panjang Gelombang Maksimal

Dipipet 3 ml larutan induk 100 ppm kemudian masukkan kedalam labu

ukur 50 ml selanjutnya diencerkan menggunakan aquadest hingga tanda batas,

didapat konsentrasi 6 ppm. Kemudian larutan discan menggunakan

spektrofotemeter pada panjang gelombang 200-400 nm dan ditemukan panjang

gelombang maksimum dari asetosal.

3.8.5 Pembuatan Kurva Kalibrasi

Dari larutan baku kerja 100 ppm kemudian dipipet sebanyak 5 kali yaitu 1,

2, 3, 4, 5 ml. Masing-masing kemudian dimasukkan dalam labu ukur 50 ml lalu

tambahkan aquadest hingga tanda batas, diperoleh konsentrasi 2, 4,6,8, dan 10

ppm . Diukur absorbansinya menggunakan Spektrofotometer.

3.8.6 Analisis Kuantitatif Asetosal

Larutan sampel Asetosal yang telah didegradasi paksa dengan dikenakan

sinar uv menggunakan lampu uv selama 2 jam kemudian diambil sebanyak 2 ml

selajutnya dilakukan pengukuran absorbansi menggunakan Spektrofotometer pada

panjang gelombang maksimum yang telah didapat. Absorbansi yang diperoleh

pada layar kemudian dicatat dan dicari konsentrasi pada sampel dengan

menggunakan persamaan garis regresi dari hasil kurva kalibrasi.

 21

3.9 Teknik Pengolahan Data

Data yang ingin diketahui pada penelitian ini adalah berhasilnya metode

indikator stabilitas pada asetosal yang di beri perlakuan dan dianalisis

menggunakan metode Spektrofotomteri UV. Teknik pengolahan data dari

penelitian ini adalah meengetahui adanya perbedaan stabilitas pada asetosal yang

diberi perlakuan secara fotolisis dengan dikenakan sinar ultraviolet dengan lampu

uv. Variasi konsentrasi yang digunakan asetosaladalah 80, 100, dan 120%. Cara

menghitung % Perolehan kembali asetosal dihitung dengan cara :

massa bahan setelah perlakuan

% Perolehan Kembali= x 100%
massa bahanawal

3.10 Rancangan Hasil Penelitian

Tabel 3.1Data Absorbansi Standar

 22

Konsentrasi Asetosal Absorbansi

(ppm) Sebelum fotolisis Sesudah fotolisis
2
4
6
8
10
Y=bx+a
Persamaan regresi :
Y = Absorban

X = kadar/konsentrasi

Tabel 3.2Kadar Asetosal

Konsentrasi
Bahan Asetosal Replikasi Kadar (ppm)
(%)
Sebelum Setelah
Fotolisis Fotolisis
R1
80 R2
R3
Asetosal R1
100 R2
R3
R1
120 R2
R3

1. Kriterian Penerimaan (Ripitabilitas):

Nilai RSD yang didapatkan dari pengujian sampel dengan 3

konsentrasi berbeda pada hari yang sama yang dapat diterima adalah

RSD :<2%

2. Kriterian Penerimaan (Presisi Antara):

 23

Nilai RSD yang didapatkan dari pengujian sampel dengan 3

konsentrasi berbeda pada hari yang berbeda yang dapat diterima adalah

RSD : <2%

3. Kriteria penerimaan (Akurasi):

Nilai perolehan kembali yang didapatkan dari sampel dengan 3

konsentrasi berbeda yang masing-masing dilakukan sebanyak 3 kali harus

berada dalam rentang %Recovery : 90%-107%

 24

DAFTAR PUSTAKA

1. Kuntari K, Aprianto T, Noor RH, Baruji B. Verifikasi Metode Penentuan

Asetosal Dalam Obat Sakit Kepala Dengan Metode Spektrofotometri Uv.
JST (Jurnal Sains dan Teknol. 2017;6(1):31–40.
2. Anonim. Farmakope Indonesia. VI. Jakarta; 2020.
3. Lenggana DT. ( Asetosal ) Dalam Sediaan Tablet Berbagai Merek
Menggunakan Metode Kolorimetri. 2010;
4. Sweetman SC, editor. Martindale Thirty-sixth edition. In: 36th ed. London,
UK ; Chicago, USA: Royal Pharmaceutical Society; 2009.
5. Wardani PM. Uji Stabilitas Fisik Dan Kimia Sediaan Sirup Rekonstitusi
Yang Mengandung Tiamfenikol. 2016;4–15.
6. Dachriyanus. Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi.
Padang, Sumatera Barat: Lembaga Pengembangan Teknologi Informasi
dan Komunikasi (LPTIK); 2004. 158 p.
7. Suhartati T. Dasar-Dasar Spektrofotometri UV-VIS Dan Spektrometri
Massa Untuk Penentuan Struktur Senyawa Organik. Vol. 5, BMC Public
Health. 2017. 1–8 p.
8. Hanwar D, Mutiara P, Utami W. Pengembangan dan Validasi Metode
Penetapan Kadar Asetosal dan Dipiridamol Secara Simultan dengan
Spektrofotometri UV. Surakarta; 2017.
9. Harmita. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode Dan Cara Perhitungannya.
2004;I(3):117–35.
 25

LAMPIRAN

1. Perhitungan Pembuatan Larutan Induk Asetosal

1.1 Larutan Baku Induk Asetosal 1000 ppm

Rumus perhitungan:

1 mg
1 ppm =
1000 ml

1000 mg 100 mg
1000 ppm = =
1000 ml 100 ml

Jadi, untuk membuat larutan induk asetosal 1000 ppm dalam 100 ml, diperlukan

100 mg asetosal

1.2 Larutan Standar Asetosal 2, 4, 6, 8, 10 ppm

Rumus:

C1 x V1 = C2 x V2

C2x V 2
V1 = Keterangan
C1

C1 = Konsentrasilarutanpekat

V1= Volume larutanpekat

C2 = Konsentrasi larutan encer

V2= Volume larutan encer

1. Pembuatan larutan induk 100 ppm dari 1000 ppm

C2x V 2 100 ppm x 100 ml

V1 = V1 =
C1 1000 ppm

V1 = 10 ml

Jadi untuk pembuatan larutan induk 100 ppm sebanyak 100 ml, diambil
10 ml dari larutan 1000 ppm

2. Pembuatan larutan baku 10 ppm dari 100 ppm

 26

C2x V 2 10 ppm x 25 ml
V1 = V1 =
C1 100 ppm

V1 = 2.5 ml

Jadi untuk pembuatan larutan baku 10 ppm sebanyak 25 ml, diambil 2.5
ml dari larutan 100 ppm

3. Pembuatan larutan baku 2 ppm dari 100 ppm

C2x V 2 2 ppm x 50 ml
V1 = V1 =
C1 100 ppm

V1 = 1 ml

Jadi untuk pembuatan larutan baku 2 ppm sebanyak 50 ml, diambil 1 ml

dari larutan 100 ppm

4. Pembuatan larutan baku 4 ppm dari 100 ppm

C2x V 2 4 ppm x 50 ml
V1 = V1 =
C1 100 ppm

V1 = 2 ml

Jadi untuk pembuatan larutan baku 4 ppm sebanyak 50 ml, diambil 2 ml

dari larutan 100 ppm

5. Pembuatan larutan baku 6 ppm dari 100 ppm

C2x V 2 6 ppm x 50 ml
V1 = V1 =
C1 100 ppm

V1 = 3 ml

Jadi untuk pembuatan larutan baku 2 ppm sebanyak 50 ml, diambil 3 ml

dari larutan 100 ppm

6. Pembuatan larutan baku 8 ppm dari 100 ppm

C2x V 2 8 ppm x 50 ml
V1 = V1 =
C1 100 ppm

V1 = 4 ml

Jadi untuk pembuatan larutan baku 8 ppm sebanyak 50 ml, diambil 4 ml

dari larutan 100 ppm

7. Pembuatan larutan baku 10 ppm dari 100 ppm

 27

C2x V 2 10 ppm x 50 ml
V1 = V1 =
C1 100 ppm

V1 = 5 ml

Jadi untuk pembuatan larutan baku 10 ppm sebanyak 50 ml, diambil 5

ml dari larutan 100 ppm