PENDAHULUAN • Volume otak manusia sekitar 1350 cc dan tdd sekitar 100 juta neuron, berat 2,5 persen dari BB • Otak dan sumsum tulang belakang dibungkus selaput meningeal yang melindungi substansi syaraf yang halus, beserta pembuluh darah dan mensekresi sejenis cairan: cairan serebrospinal (CSS/ LCS) yang diproduksi oleh sel ependimal dan pleksus koroideus 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 2 Anatomi selaput meningeal 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 3 • Fungsi utama LCS: – Sumber nutrisi untuk Sistem Saraf Pusat (SSP) – Barier mekanik otak dan SST
Selaput meningen tersusun 3 lapisan:
1. Duramater: terluar, tebal, melindungi otak 2. Arachnoid : lapisan yang terdiri dari fibrosit berbentuk pipih dan serabut kolagen. berfungsi untuk bantalan sistem saraf pusat. 3. Piamater: membran tipis, tersusun atas sel fibrosit dan kolagen serta pembuluh darah yang menembus otak. Fungsi : penyuplai 11/1/2022 nutrisi bagi jaringan saraf. Copyright of dr. Rany, SpPK 4 Anatomi selaput otak 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 5 Fisiologi Cairan Otak • kecepatan produksi : 550 ml/hari • Komposisi LCS pada dasarnya = komposisi CES otak (pada manusia membentuk 15% dari volume otak). • Tekanan LCS lumbal 70-180 mmHg
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 6
• Sawar otak (Blood Brain Barrier/BBB ): merupakan endotel pleksus koroideus yang terjalin kuat sehingga tidak dapat dilewati molekul • Kerusakan BBB karena meningitis lekosit, protein dan zat kimia masuk ke cairan otak
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 7
Pengumpulan sampel • Cara: punksi lumbal • Lokasi pengambilan : Lumbal III, IV, V • Volume yang diambil: – Tekanan intrakranial normal 20 ml (15% cairan otak total) – Tekanan intrakranial tinggi/rendah: 1-2 ml
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 8
• Lokasi pengambilan: Dewasa Lumbal III-IV Anak Lumbal IV-V
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 9
INDIKASI dan KONTRA INDIKASI PUNKSI LUMBAL INDIKASI KONTRA INDIKASI 1. Indikasi diagnostik: 1. Peningkatan tekanan intrakranial: Infeksi: meningitis, ensefalitis Herniasi serebri Peradangan: multipel sklerosis, SGB TIK meningkat dengan gejala syaraf Keganasan lokal
bahan kontras untuk ensefalopati, myelografi 4 Osteoartritis vertebra berat 5 penurunan kardiorespiratori 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 10 • Syarat Pemeriksaan Punksi Lumbal: – Puasa – Pengambilan secara aseptik – Sebelum pemberian antimikrobial
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 11
Alat dan Bahan • Jarum punksi lumbal steril 20-22 G • Tiga tabung bertutup ulir : – Tabung I: pemeriksaan mikrobiologi – Tabung II: pemeriksaan kimia klinik dan serologi – Tabung III: hitung sel (jumlah eritrosit, leukosit, hitung jenis leuko, sitologi) • Desinfektan 70% alkohol dan Povidone iodine 10 % • Anestesi lokal : lidocain/novocaine 0.5-1%
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 12
PENGIRIMAN SAMPEL LCS • Segera dikirim ke lab untuk diperiksa secepatnya (maksimal 1 jam setelah pengambilan) • Ditunda: LCS diinkubasi suhu 35⁰C, 5% CO2 (dalamcandle-jar ) daya hidup bakteri ↑ • Pengiriman > 1 hari: LCS diinokulasi secara aseptik ke dalam media Transisolat dengan menggunakan syringe dan didiamkan selama semalam • Media Transisolat: media bifasik untuk kultur primermeningococcus dan bakteri lain. 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 13 PENANGANAN AWAL
• Pemeriksaan bakterial, jamur atau parasit:
sentrifugasi spesimen dengan volume > 1 ml, 15 menit, kecepatan 1500 g • Supernatan dipindah ke tabung steril dengan menyisakan 0, 5 ml sedimen Campur sedimen dengan vortex selama 30 detik. Jangan meggunakan pipet karena bakteri dan sel dapat melekat pada sisi tabung negatif palsu • Supernatan: pemeriksaan kimia (protein, glukosa, laktat, CRP) 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 14 • Bila banyak bekuan: –Tuang sedimen yang mengandung bekuan dalamsterile tissue grinder tambah kaldu nutrien steril ke dalam pencacah campur larutan –menggunakan stik steril: saat bekuan menyentuh stik putar dan angkat bekuan
Sterile tissue grinder
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 15
Penanganan sampel...
• Hapusan yang positif palsu: akibat
gelas objek yang tercemar • Solusi: – Gunakan gelas objek yang sudah disterilkan menggunakan alkohol lalu dipanaskan – Gelas objek yang telah di-autoclave
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 16
PEMERIKSAAN LABORATORIUM
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 17
Normal: LCS jernih 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 18 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 19 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 20 PEMERIKSAAN KIMIA
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 21
Pemeriksaan Protein Kualitatif
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 22
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 23 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 24 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 25 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 26 Pemeriksaan Protein Kuantitatif
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 27
Pemeriksaan Glukosa • Glukosa masuk ke dalam cairan otak mll sawar otak • N = 50-80 mg/dl atau 60-70% dari kadar glukosa plasma • Perlu pemeriksaan glukosa darah 1-2 jam sebelum punksi lumbal • Harus segera glikolisis
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 28
KULTUR LCS • Pemeriksaan rutin: media agar coklat 5% dansheep blood agar • Media agar coklat untuk organisme yang sulit tumbuh:H. influenza dan isolatN. meningitides • Media agar darah : identifikasiS. pneumoniae
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 29
• sedimen dicampur Kultur LCS... dengan vortex hapusan dibuat beberapa tetes sedimen diinokulasikan di tiap media diinkubasi pada suhu 37⁰ C dalam 5-10% karbon dioksida minimal 72 jam • jika inkubator karbon dioksida tidak ada candle-jar . 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 30 • Interpretasi kultur : – Pemeriksaan dengan Media Agar Darah, McConkey, Agar Coklat dan Media Anaerobik dilakukan pengecekan setiap hari selama 72 jam.
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 31
Organisme penyebab pada berbagai usia UMUR / KONDISI ORGANISME Neonatus < 30 hari E.coli, Grup B Streptococcus, Listeria monocytogenes, Bacili Gram negative, S.aureus 1-3 bulan Streptococcus group B, Neisseria meningitides, E. coli, Streptococcus pneumoniae,Haemophilus influenza, L. meningitides 3 bulan – 18 tahun Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides, Haemophilus influenza Dewasa muda Neisseria meningitides Dewasa Streptococcus pneumonia, Neisseria meningitides Orang Tua Streptococcus pneumonia, Neisseria meningitides, Gram negative Bacili,L. monocytogenes Pasien AIDS Cryptococcus neoformans(fungi) Shunts 11/1/2022 Coagulase negative Copyright of dr. Rany,Staphylococci, SpPK corynebacterium 32 Pemeriksaan Jamur
• Spesimen yang dicurigai mengandung jamur:
kultur dan pemeriksaan mikroskopis langsung. • Penemuan jamur patogen di kultur: – memastikan diagnosis dari penyakit karena jamur – mengidentifikasi penyebab infeksi – mengevaluasi kepekaan terhadap obat anti jamur.
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 33
• Spesimen harus ditempatkan dalam wadah tertutup tanpa pengawet. • Media Secara umum, terdapat 2 kategori media, media umum sepertiSabouraud Dextrose Agar (SDA) dan Brain Heart Infusion (BHI) Agar
11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 34
• Inokulasi Media – Sentrifus spesimen – sebagian sedimen diambil untuk pemeriksaan mikroskopis langsung dan pewarnaan Gram. – 0,5 ml diinokulasikan dan distreak pada tiap media yang bebas dari cycloheximide (menghambat Cryptococcus neoformans ). – Supernatan dipindahkan secara aseptik 11/1/2022 Copyright of dr. Rany, SpPK 35 Pemeriksaan imunologi • Dugaan neurosifilis • Pemeriksaan VDRL di dalam cairan otak dan darah
Pembuatan bahan untuk latihan pemeriksaan
cairan otak: Nacl 0,9%+ buffy coat (makros, jumlah sel, hitung jenis, kadar protein dan glukosa) Stabil 48 jam dalam lemari es