MODUL

KEPANITERAAN KLINIK


DEPARTEMEN
PATOLOGI KLINIK

PROGRAM STUDI PROFESI DOKTER
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UIN ALAUDDIN MAKASSAR
2020

Tim Penyusun :
dr. Suci Aprianti, Sp. PK.
dr. Saraswati W. Hartono, Sp.PK
dr. Andi Irhamnia Sakinah




DAFTAR ISI

I PENDAHULUAN
A. Kompetensi Lulusan Dokter
B. Tujuan Pembelajaran
C. Lingkup Bahasan

II PROSES KEPANITERAAN KLINIK
A. Alur Kegiatan
B. Metode dan Strategi Pembelajaran
C. Sistem Evaluasi

III TATA TERTIB
A. Tata tertib Kepaniteraan Klinik
B. Sanksi Akademik

IV PANDUAN BELAJAR
PUNKSI VENA ...................................................................................................................................... 12
PUNKSI ARTERI .................................................................................................................................. 13
Analisis Gas Darah ........................................................................................................................... 16
FINGER PRICK ..................................................................................................................................... 19
Pemeriksaan Gula Darah Kapiler ............................................................................................... 20
PEMERIKSAAN SPUTUM/DISCHARGE ........................................................................................ 22
Pewarnaan Gram .............................................................................................................................. 24
Pewarnaan Ziehl Nielsen ............................................................................................................... 25
ANALISA FESES ................................................................................................................................... 27
PEMERIKSAAN APUSAN DARAH ................................................................................................... 30
PEWARNAAN SEDIAAN APUS ......................................................................................................... 31
URINALISIS .......................................................................................................................................... 37
Pemeriksaan Glukosa Urin ............................................................................................................ 43
METODE DIP SLIDE (KULTUR URINE) ........................................................................................ 45
PraAnalitik .......................................................................................................................................... 45
Analitik ................................................................................................................................................. 45
PascaAnalitik ..................................................................................................................................... 46
PENILAIAN HASIL PEMERIKSAAN SEMEN ................................................................................. 46
TES KEHAMILAN ................................................................................................................................ 54
TES WIDAL ........................................................................................................................................... 56
TES HEMOGLOBIN CARA SAHLI ................................................................................................... 58
PEMERIKSAAN DARAH RUTIN (KAMAR HITUNG) .................................................................. 60
Hitung Leukosit ................................................................................................................................. 60
Hitung Eritrosit ................................................................................................................................. 64
Hitung Trombosit ............................................................................................................................. 67
Hitung Jenis Leukosit ....................................................................................................................... 71
Cara Pemeriksaan: ................................................................................................................................. 72
Differential Cell Counter ....................................................................................................................... 74
Interpretasi .............................................................................................................................................. 74
Sebab-sebab leukositosis neutrofil .................................................................................................. 75
Sebab-sebab neutropenia ................................................................................................................... 75
Limfositosis .............................................................................................................................................. 77
Penetapan Nilai Hematokrit ......................................................................................................... 78
Indeks Eritrosit .................................................................................................................................. 80
Hitung Retikulosit ............................................................................................................................ 82
PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH ........................................................................................... 84
HEMOSTASIS ....................................................................................................................................... 86
Bleeding Time .................................................................................................................................... 87
CLOTTING TIME ................................................................................................................................. 89
TES RUMPLE LEEDE .......................................................................................................................... 90
PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH ............................................................................................. 90
PEMERIKSAAN INKOMPATIBILITAS ........................................................................................... 92
TRANSFUSI DARAH ........................................................................................................................... 93






BAB I
PENDAHULUAN

A. Kompetensi Lulusan Dokter
Mengacu pada Standar Kompetensi Dokter Indonesia (SKDI) tahun 2012 yang
ditetapkan oleh Konsil Kedokteran Indonesia dan Standar Kompetensi Dokter Muslim
2019 yang ditetapkan oleh Forum Kedokteran Islam Indonesia, maka ditetapkanlah
kompetensi lulusan dokter sebagai berikut :
1. Komunikasi Efektif
2. Ketrampilan Klinis
3. Landasan Ilmiah Ilmu Kedokteran
4. Pengelolaan Masalah Kesehatan
5. Pengelolaan Informasi
6. Mawas Diri dan Pengembangan DIri
7. Etika, Moral, Medikolegal, dan Profesionalisma serta Keselamatan Pasien
8. Menerapkan nilai-nilai Islami dalam kehidupan sehari-hari, yang meliputi
aqidah, ibadah, akhlak mulia, sikap professional dan keluasan berpikir.

B. Tujuan Pembelajaran
1. Mampu melakukan identifikasi masalah terkait bidang patologi klinik dan
mencari solusi terhadap permasalahan tersebut.
2. Mampu melakukan tindakan sesuai prosedur baik secara mandiri maupun di
bawah bimbingan supervisor terkait pemeriksaan di bidangan patologi klinik
3. Melakukan komunikasi yang efektif terkait masalah bidang patologi klinik, baik
kepada pasien, keluarga pasien, teman sejawat, maupun tenaga kesehatan
lainnya.
4. Memecahkan masalah berdasarkan evidence based
5. Berperilaku professional sesuai etika dokter muslim terhadap siapa pun.

C. Lingkup Bahasan
Daftar Ketrampilan
Kemampuan terkait daftar ketrampilan adalah sebagai berikut.

Tingkat kemampuan 1 (Knows)
Mengetahui dan menjelaskan Lulusan dokter mampu menguasai pengetahuan
teoritis termasuk aspek biomedik dan psikososial keterampilan tersebut sehingga
dapat menjelaskan kepada pasien/klien dan keluarganya, teman sejawat, serta profesi
lainnya tentang prinsip, indikasi, dan komplikasi yang mungkin timbul. Keterampilan
ini dapat dicapai mahasiswa melalui perkuliahan, diskusi, penugasan, dan belajar
mandiri, sedangkan penilaiannya dapat menggunakan ujian tulis

Tingkat kemampuan 2 (Knows How)
Pernah melihat atau didemonstrasikan Lulusan dokter menguasai pengetahuan teoritis
dari keterampilan ini dengan penekanan pada clinical reasoning dan problem solving
serta berkesempatan untuk melihat dan mengamati keterampilan tersebut dalam
bentuk demonstrasi atau pelaksanaan langsung pada pasien/masyarakat. Pengujian
keterampilan tingkat kemampuan 2 dengan menggunakan ujian tulis pilihan berganda
atau penyelesaian kasus secara tertulis dan/atau lisan (oral test)

Tingkat kemampuan 3 (Shows)
Pernah melakukan atau pernah menerapkan di bawah supervisi Lulusan dokter
menguasai pengetahuan teori keterampilan ini termasuk latar belakang biomedik dan
dampak psikososial keterampilan tersebut, berkesempatan untuk melihat dan
mengamati keterampilan tersebut dalam bentuk demonstrasi atau pelaksanaan
langsung pada pasien/masyarakat, serta berlatih keterampilan tersebut pada alat
peraga dan/atau standardized patient. Pengujian keterampilan tingkat kemampuan 3
dengan menggunakan Objective Structured Clinical Examination (OSCE).

Tingkat kemampuan 4 (Does)
Mampu melakukan secara mandiri Lulusan dokter dapat memperlihatkan
keterampilannya tersebut dengan menguasai seluruh teori, prinsip, indikasi, langkah-
langkah cara melakukan, komplikasi, dan pengendalian komplikasi. Selain pernah
melakukannya di bawah supervisi, pengujian keterampilan tingkat kemampuan 4
dengan menggunakan Workbased Assessment misalnya mini-CEX, portfolio, logbook,
dsb.
4A. Keterampilan yang dicapai pada saat lulus dokter

Adapun daftar ketrampilan yang ingin dicapai selama melakukan kepaniteraan klinik di
bagian patologi klinik adalah sebagai berikut




BAB II
PROSES KEPANITERAAN KLINIK

A. Alur Kegiatan

Rotasi mahasiswa kepaniteraan klinik pad Bagian Patologi Klinik selama 2 minggu
dengan alur sebagai berikut .
Waktu Aktivitas Tempat
Pekan 1. Pre Test Departemen - RSUD Haji Makassar (RSP
Persiapan 2. Orientasi oleh PJ Utama)
Departemen - Puskesmas Kassi-Kassi
3. Lapor Komkordik dan - Kampus 1 PSPD FKIK UIN
DPK Alauddin Makassar
Pekan 1 1. Orientasi dan Kuliah - RSUD Haji Makassar (RSP
Pendahuluan oleh DPK Utama)
2. Pembagian judul referat - Puskesmas Kassi-Kassi#
3. Mini Lab (Hands-on
laboratory skill)
4. Refleksi Kasus
5. Pembacaan laporan
kasus expertise
Pekan 2 1. Mini Lab (Hands-on - RSUD Haji Makassar (RSP
laboratory skill) Utama)
2. Refleksi Kasus - Kampus 1 PSPD FKIK UIN
3. Pembacaan Referat Alauddin Makassar
4. Ujian CBT
5. Ujian Tatap Muka
NB: OSCE (integrasi siklus)

JADWAL HARIAN

NO WAKTU KEGIATAN PEMBIMBING
1. 07.30 - 08.30 Baca hasil laboratorium hari Mandiri
sebelumnya
2. 08.30 – • Mini Lab (Hands-on laboratory Dokter
16.00 skill) pendidik klinik
• Laboratory Teaching dan Analis
• Konfirmasi hasil laboratorium
dengan klinis pasien
• Refleksi Kasus
• Diskusi bersama DPK
3. 12.00 -13.00 Istirahat
 4. 13.00 - Pembacaan Dokter pendidik
selesai klinik
B. Metode dan Strategi Pembelajaran

Latihan Mini lab (Hands-on
1
Keterampilan Laboratory Skill)
Sampling pasien
Work Based Konfirmasi hasil lab
2
Learning dengan
keterampilan klinis
Refleksi Kasus
Reflective Laporan Kasus
3
Learning Expertise
Referat

C. Sistem Evaluasi
Penilaian Formatif
• Kinerja dalam work based learning
Selama proses WBL, mahasiswa akan mendapatkan umpan balik oleh dosen
pendidik klinik secara periodik.
• Kinerja dalam reflectivelearning
Dalam pelaksanaan setiap kegiatan WBL (Refleksi kasus, laporan kasus
expertise dan referat) mahasiswa akan diberikan umpan balik terhadap
pencapaian pembelajarannya dalam bentuk bimbingan oleh dosen pendidik
klinik sebelum pelaksanaan presentasi ujian sumatif.

Penilaian Sumatif
1. Rekapitulasi kehadiran
Mahasiswa harus menghadiri 100% kegiatan dalam rotasi departemen. Bila
berhalangan dikarenakan alasan sakit, musibah orang tua/ saudara kandung/
suami/istri/anak kandung dan tugas fakultas, mahasiswa diperkenankan tidak
menghadiri kegiatan rotasi selama maksimal 2 hari. Bila tidak memenuhi
prasyarat tersebut, mahasiswa yang bersangkutan tidak diperkenankan
mengikuti evaluasi sumatif.
2. Telah melaksanakan semua tugas dengan kewajiban selama program
pendidikan berlangsung sesuai hasil pemeriksaan log-book.
3. Tidak dapat masalah perilaku (attitude) dan professional behaviour selama masa
kepaniteraan. Jika terdapat masalah akan ditentukan melalui rapat departemen
dan dilaporkan kepada pimpinan program studi (KONDITE).

 BAB III
Tata Tertib Pelaksanaan Kepaniteraan Klinik

A. Tata Tertib Umum
1. Setiap kepaniteraan klinik di tiap departemen dimulai pada hari Senin pekan
pertama dengan mahasiswa membawa surat pengantar dari Dekan ke KPM
pada hari Jumat sebelum pekan pertama kepaniteraan klinik dimulai.
2. Setiap mahasiswa kepaniteraan klinik wajib mengikuti rotasi kepaniteraan
klinik yang telah diatur dan mengikuti seluruh kegiatan kepaniteraan klinik
serta tata tertib yang berlaku di setiap departemen.
3. Setiap mahasiswa yang bertugas di RS Jejaring harus membawa surat
pengantar dari KPM.
4. Setiap mahasiswa wajib menggunakan jas berwarna putih dengan tulisan
bordir ”Dokter Muda” berwarna hijau di dada kiri atas.
5. Laki-laki memakai kemeja dan celana kain, rambut tidak menyentuh kerah
baju, penampilan terawat rapi, memakai sepatu tertutup, dan kuku tidak
panjang.
6. Perempuan memakai jilbab menutupi dada, kemeja/gamis lengan panjang,
rok kain, pakaian tidak ketat atau membentuk lekuk badan, wajah terlihat
jelas, berdandan sewajarnya, rapih dan terawat.
7. Mahasiswa memakai tanda pengenal RS Pendidikan/RS jejaring/PKM/BP
pada saat melapor maupun bertugas.
8. Mengikuti seluruh kegiatan kepaniteraan klinik di RS Pendidikan/RS
jejaring/PKM/BP tempat bertugas.
9. Mengerjakan tugas kepaniteraan klinik yang diberikan sesuai arahan dari
dosen pembimbing klinik.
10. Selama melakukan kegiatan kepaniteraan klinik dilarang meninggalkan tugas
tanpa sepengetahuan dokter pendidik klinik/ residen/ dokter ruangan/
dokter jaga.
11. Kelengkapan logbook merupakan syarat untuk tutup bagian dalam
kepaniteraan klinik.
12. Segala bentuk pelanggaran dari ketentuan yang berlaku akan dikenakan
sanksi.
13. Jam kerja :
• Pagi : Jam 07.30 – 16.00 WITA
• Siang : Jam 14.00 – 21.00 WITA
• Malam : Jam 21.00 – 07.30 WITA
Catatan: Pengaturan jaga ditentukan oleh KPM bagian yang bersangkutan.

B. Tata Tertib Departemen
Setiap mahasiswa yang mengikuti proses pembelajaran rotasi Departemen Patologi
Klinik, wajib mengikuti aturan sebagai berikut.
1. Setelah melapor kepada ketua Bagian/SMF dan diberi petunjuk tentang tugas dan
 kegiatan yang akan dilakukan selama menjalani rotasi Departemen Patologi
Klinik, mahasiswa menyerahkan surat pengantar dari Dekan dengan
menyertakan pasfoto ukuran 3x4 cm sebanyak 2 (dua) buah untuk dicatat
namanya dan ditempel pasfotonya di buku registrasi. Koordinator dokter
pendidik klinik akan :
a. Menentukan judul journal reading/referat yang akan disusun dan dibacakan
nanti pada waktunya
b. Memerintakan kepada ketua grup membuat daftar giliran tugas presentasi
kasus, diskusi kelompok untuk anggotagrupnya.
2. Mahasiswa melakukan kegiatan selama rotasi sesuai dengan yangditetapkan.
a. Jam Kerja : Senin –Sabtu : 07.30-16.00 WIB.
b. Pengisian daftar hadir:
Dilakukan minimal dua kali yaitu pada saat datang dan pulang tepat
pada waktunya
Dilakukan sendiri, tidak boleh diwakilkan.
c. Mahasiswa yang meninggalkan tugas dalam masa kepaniteraan harus
sepengetahuan dan memperoleh izin dari Kepala Departemen
Bila karena suatu sebab tidak dapat mengikuti pembelajaran dalam
rotasi maka mahasiswa harus menyatakan dengan surat
pemberitahuan resmi dan menyebutkan alasan yang dapat diterima
disertai bukti yang sah.
Setiap mahasiswa harus senantiasa bertindak profesional, menjaga
nama baik almamater, menegakkan disiplin dan tata tertib
mahasiswa.
Mahasiswa tidak boleh mengerjakan tugas departemen lain pada saat
kegiatan di Departemen Patologi Klinik.
B. Sanksi Akademik
1. Mahasiswa yang terbukti melanggar norma akademik, norma sosial dan
norma hukum dikenakan sanksi yang akan ditentukan dalam rapat
departemen dan prodi
2. Keterlambatan pengisian daftar hadir:
a. 10-30 menit : membuat tugas
b. lebih dari 30 menit : dianggap tidak hadir pada hari itu.
3. Ketidakhadiran tanpa alasan akan mengikuti terminologi ketidakhadiran***
karena sakit, yakni sebagai berikut.
Lama siklus Ketidakhadiran* Sanks
* i
<2 hari Mengerjakan tugas*
2 minggu > 2 hari Mengundurkan
diri dari
departemen**
1 minggu <1 hari Mengerjakan tugas*
 (remedial > 1 hari Mengulang
) stase
departemen
siklus penuh (2
minggu)

Keterangan:
* Pemberian tugas dapat berupa tugas membaca buku teks atau jurnal ilmiah,
tugas menyusun laporan kegiatan danlain-lain
** Mengundurkan diri dari departemen berdampak pada pembatalan stase dan rotasi
Departemen Patologi Klinik akan diikuti setelah mengikuti seluruh rotasi yang
telah diatur oleh CEU
*** Ketidakhadiran dengan surat keterangan resmi sesuai yang tercantum
dalam buku panduan kepaniteraan klinik. Surat tersebut harus diserahkan
kepada kepala bagian selambatnya saat mahasiswa kembali.
 BAB IV
PANDUAN BELAJAR

PUNKSI VENA
Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Lokasi pengambilan darah yang akan ditusuk harus bersih; jika
perlu cucilah lebih dahulu dengan air dan sabun. Pada orang dewasa dipakai salah
satu vena dalam fossa cubiti; pada bayi vena jugularis superficialis (petugas
terampil ahli)
2. Persiapan Sampel: tidak memerlukan persiapan khusus
3. Prinsip Tes: Pengambilan darah vena melalui akses intravena
4. Alat dan Bahan:
- Tourniquet
- Alkohol swab 70%
- Plester
- Metode semprit:
a. Jarum semprit (21-23 gauge)
b. Penampung (barrel)
c. Penghisap (plunger)
d. Tabung yang telah diisi antikoagulan
- Metode tabung vakum:
a. Jarum khusus (20-22gauge
b. Holder/adapter
c. Tabung vakum (dengan antikoagulan)
- Antikoagulan: EDTA, heparin, Na. Sitrat, NH4-oksalat

Analitik
1. Metode Semprit
a. Keluarkan semprit dari plastiknya, pasang jarum, tarik penghisap untuk
memeriksa kelancarannya
b. Pilih bagian yang akan dilakukan tusukan vena (venipuncture), yaitu:
antecubitus lengan, pilih vena yang besar dan tidak mudah bergerak
c. Desinfektan area venipuncture dengan kapas alkohol dengan gerakan memutar
dari tengah ke tepi, biarkan 30 detik untuk pengeringan alkohol.
d. Pasang tourniquet 7.5 – 10 cm di atas bagian venipuncture disertai pengepalan
tangan pasien membantu penampakan vena.
e. Tusuk jarum ke dalam vena, posisi lubang jarum menghadap ke atas dengan
sudut 15–300.
f. Lepas tourniquet setelah darah mengalir (jangan biarkan tourniquet terpasang
lebih 1 menit).
g. Tarik perlahan-lahan pengisap (plunger) dan biarkan semprit terisi darah
h. Lepaskan jarum perlahan-lahan
 i. Segera tekan dengan kapas selama 3 – 5 menit sambil masukkan darah ke dalam
tabung yang telah diisi antikoagulan.
j. Plester bagian veni puncture dan lepas setelah 15 menit
k. Beri label pada tabung (nama, no.lab, jarum, dan tanggal pengambilan)
2. Metode Tabung Vakum
a. Penusukan vena dilakukan seperti metode semprit
b. Isi tabung sampai kevakumannya habis
c. Lepaskan tabung dari jarum
d. Bolak balik isi tabung 5 – 10 kali
e. Lepaskan jarum perlahan-lahan
f. Segera tekan dengan kapas selama 3 – 5 menit
g. Plester bagian veni puncture dan lepas setelah 15 menit
h. Beri label pada tabung (nama, no.lab, jarum, dan tanggal pengambilan)













Lokasi Pengambilan Darah Vena

SUMBER KESALAHAN
Susunan darah yang diambil untuk pemeriksaan mungkin berubah oleh salah tindakan
waktu mengambil darah itu. Jagalah terhadap kesalahan-kesalahan seperti disebut di bawah ini.
1. Menggunakan semprit dan jarum yang basah.
2. Mengenakan ikatan pembendung terlalu lama atau terlalu keras; akibatnya ialah
hemokonsentrasi.
3. Terjadinya bekuan dalam semprit karena lambatnya bekerja.
4. Terjadinya bekuan dalam botol karena tidak dicampur semestinya dengan oxalat kering
atau antikoagulan lain.

PUNKSI ARTERI
Tujuan pengambilan darah arteri adalah untuk mengukur tekanan oksigen (O2) dan
karbondioksida (CO2), status asam basa, oksigenasi dan kemampuan darah membawa
oksigen (oxygen-carrying capacity of blood). Analisis gas darah penting untuk menilai
oksigenasi pada pasien-pasien dengan pneumonia, pneumonitis dan emboli paru.
Pemeriksaan ini juga penting untuk pemantauan (monitoring) pada pasien yang diberi

13
O2 atau ventilator dalam jangka waktu lama agar tidak terjadi oksigenasi berlebihan
yang dapat menyebabkan anoksia dengan asidosis respiratorik atau keracunan O2.
1. Pemilihan tempat pengambilan sampel
Sampel darah arteri dapat diperoleh dari infus arteri ataupun melalui pungsi arteri.
Ada beberapa pilihan tempat untuk pungsi arteri dengan urutan pemilihan adalah
arteri radialis, arteri brachialis dan arteri femoralis. Pungsi arteri
dikontraindikasikan pada daerah yang mengalami iritasi, edema, dekat luka,
ataupun di daerah shunt arteriovenosa atau fistel.
2. Tes Allen
Tes Allen harus dilakukan sebelum pungsi arteri radialis untuk menilai apakah
arteri ulnaris dapat memberikan sirkulasi kolateral untuk tangan setelah tusukan
arteri radialis.
a. Elevasi sedikit tangan pasien dan minta pasien membuat kepalan tangan.
b. Oklusi kedua arteri radialis dan ulnaris dengan jari.
c. Minta pasien membuka kepalan tangan dan amati perubahan tangan pasien
menjadi pucat.
d. Turunkan tangan pasien dan lepaskan penekanan pada arteri ulnaris dan amati
adanya aliran darah.

Permukaan telapak tangan normalnya akan mendapat perfusi darah. Perfusi yang
adekuat berarti hasil tes Allen positif yang menandakan pungsi arteri dapat
dilakukan. Hasil tes Allen negatif menunjukkan telapak tangan tidak akan
kemerahan yang berarti kolateralnya jelek dan harus dicari tempat tusukan lain.

Prosedur Pungsi Arteri Radialis
1. Persiapkan dan posisikan pasien.
2. Letakkan tumpuan di bawah pergelangan tangan pasien, sehingga tangan pasien
hiperekstensi.
3. Lokalisasi arteri radialis dan lakukan tes Allen untuk menilai sirkulasi kolateral.

14
4. Lakukan hand hygiene dan siapkan alat-alat yang dibutuhkan. Gunakan alat
pelindung diri.
5. Desinfeksi daerah pungsi pada paien dengan alkohol 70% dan biarkan kering.
6. Tarik plunger semprit ke batas pengisian yang diinginkan.
7. Tusuk jarum pada sudut 450- 600 (900 untuk arteri femoralis) sampai terlihat
aliran darah. Pulsasi darah yang masuk ke dalam semprit menandakan pengisian oleh
tekanan arteri.
8. Tekan tempat tusukan dengan kasa untuk menghentikan perdarahan selama kurang
lebih lima menit.
9. Tutup jarum dengan menggunakan satu tangan dan dibuang ke tempat limbah tajam.
10. Keluarkan gelembung udara dan tutup semprit untuk mencegah kontak sampel darah
dengan udara. Lakukan homogenisasi atau pencampuran sampel darah dengan heparin.
Homogenisasi dilakukan dengan cara inversi semprit sebanyak lima kali dan dilanjutkan
dengan me-roll semprit di antara kedua telapak tangan sebanyak lima kali.
11. Beri label identitas pasien pada semprit.
12. Periksa perdarahan di tempat tusukan.
13. Sampel harus segera diperiksakan dalam waktu 15 menit. Bila pemeriksaan akan
ditunda, masukkan sampel ke dalam wadah (container) yang berisi air es.

15


Analisis Gas Darah

Analisa gas darah arteri dilakukan ketika dibutuhkan informasi tentang status
asam-basa klien.
- Kontraindikasi : keadaan fibrinolisis sistemik, seperti pada terapi trombolitik merupakan
keadaan kontraindikasi relatif.
- Tujuan dilakukan analisa gas darah adalah untuk mengetahui
• pH darah
• Tekanan parsial Karbon Dioksida (PCO2)
• Bikarbonat (HCO3 - )
• Base excess/deficit
• Tekanan Oksigen (PO2)
• Kandungan Oksigen (O2)
• Saturasi Oksigen (SO2)

16
- Faktor-faktor yang berkontribusi pada nilai-nilai analisa gas darah yang abnormal
• Obat-obatan dapat meningkatkan pH darah: sodium bikarbonat
• Kegagalan untuk mengeluarkan semua udara dari spuit akan menyebabkan nilai PaCO2
yang rendah dan nilai PaO2 meningkat
• Obat-obatan yang dapat meningkatkan PaCO2 : aldosterone, ethacrynic acid,
hydrocortisone, metolazone, prednisone, sodium bicarbonate, thiazides.
• Obat-obatan yang dapat menurunkan PaCO2 : acetazolamide, dimercaprol, methicillin
sodium, nitrofurantoin, tetracycline, triamterene.
• Obat-obatan yang dapat meningkatkan HCO3 - : alkaline salts, diuretics
• Obat-obatan yang dapat menurunkan HCO3 - : acid salts.
• Saturasi oksigen dipengaruhi oteh tekanan parsial oksigen dalam darah, suhu tubuh, pH
darah, dan struktur hemoglobin.

Nilai Rujukan
- pH : 7, 35-7, 45
- TCO2 : 23-27 mmol/L
- pCO2 : 35-45 mmHg
- BE : 0 ± 2 mEq/L
- pO2 : 80-100 mmHg
- Saturasi O2 : 95 % atau lebih
- HCO3 : 22-26 mEq/L

Interpretasi Hasil Analisa Gas Darah
1. Interpretasi Hasil Pemeriksaan pH
• Serum pH menggambarkan keseimbangan asam basa dalam tubuh. Sumber ion hidrogen
dalam tubuh meliputi asam volatil dan campuran asam seperti asam laktat dan asam
keto.
• Nilai kritis : < 7.25 - 7.55
• Implikasi Klinik
o Umumnya nilai pH akan menurun dalam keadaan asidemia peningkatan
pembentukan asam
o Umumnya nilai pH meningkat dalam keadaan alkalemia kehilangan asam
o Bila melakukan evaluasi nilai pH, sebaiknya PaCO2 dan HCO3 diketahui juga untuk
memperkirakan komponen pernafasan atau metabolik yang mempengaruhi status
asam basa
2. Interpretasi Hasil Tekanan Parsial Karbon Dioksida, (PaCO2)
• PaCO2 menggambarkan tekanan yang dihasilkan oleh CO2 yang terlarut dalam plasma.
Dapat digunakan untuk menentukan efektifitas ventilasi dan keadaan asam basa dalam
darah.
• Nilai Normal : 35 - 45 mmHg
• Implikasi Klinik
o Penurunan nilai PaCO2 dapat terjadi pada hipoksia, anxiety/ nervousness dan
emboli paru. Nilai kurang dari 20 mmHg perlu mendapatkan perhatiaan khusus.
o Peningkatan nilai PaCO2 dapat terjadi pada gangguan paru atau penurunan fungsi
pusat pernafasan. Nilai PaCO2 > 60 mmHg perlu mendapat perhatian khusus.

17
 o Umumnya peningkatan PaCO2 dapat terjadi pada hipoventilasi sedangkan
penurunan nilai menunjukkan hiperventilasi.
o Biasanya penurunan 1 mEq HCO3 akan menurunkan tekanan PaCO2 sebesar 1.3
mmHg.
3. Interpretasi Hasil Tekanan Parsial Oksigen, (PaO2)
• PaO2 adalah ukuran tekanan parsial yang dihasilkan oleh sejumlah oksigen yang
terlarut dalam plasma. Nilai ini menunjukkan kemampuan paru-paru dalam
menyediakan oksigen bagi darah.
• Nilai Normal (suhu kamar, tergantung umur): 75 - 100 mmHg
• Implikasi Klinik
o Penurunan nilai PaO2 dapat terjadi pada penyakit paru obstruksi kronik,
PPOK, penyakit obstruksi paru, anemia, hipoventilasi akibat gangguan
fisik atau neoromuskular dan gangguan fungsi jantung. Nilai PaO2 kurang
dari 40 mmHg perlu mendapatkan perhatian khusus.
o Peningkatan nilai PaO2 dapat terjadi pada peningkatan penghantaran O2
oleh alat bantu, contohnya nasal prongs, alat ventilasi mekanik
hiperventilasi dan polisitemia, peningkatan sel darah merah dan daya
angkut oksigen.
4. Interpretasi Hasil Saturasi Oksigen, (SaO2)
• Jumlah oksigen yang diangkut oleh hemoglobin, ditulis sebagai persentasi total oksigen
yang terikat pada hemoglobin.
• Nilai Normal : 95 - 99 %
• Implikasi Klinik
o Saturasi oksigen digunakan untuk mengevaluasi kadar oksigenasi hemoglobin
dan kecakupan oksigen pada jaringan
o Tekanan parsial oksigen yang terlarut di plasma menggambarkan jumlah
oksigen yang terikat pada hemoglobin sebagai ion bikarbonat
5. Interpretasi Hasil Pemeriksaan Karbon Dioksida, (CO2).
• Dalam plasma normal, 95% dari total CO2 terdapat sebagai ion bikarbonat, 5% sebagai
larutan gas CO2 terlarut dan asam karbonat. Kandungan CO2 plasma terutama adalah
bikarbonat, suatu larutan yang bersifat basa dan diatur oleh ginjal. Gas CO2 yang larut
ini terutama bersifat asam dan diatur oleh paruparu. Oleh karena itu nilai CO2 plasma
menunjukkan konsentrasi bikarbonat.
• Nilai Normal Karbon Dioksida (CO2) : 22 - 32 mEq/L ~ SI : 22 - 32 mmol/L Kandungan
CO2 plasma terutama adalah bikarbonat, suatu larutan yang bersifat basa dan diatur
oleh ginjal. Gas CO2 yang larut ini terutama yang bersifat asam dan diatur oleh paru-
paru. oleh karena itu nilai CO2 plasma menunjukkan konsentrasi bikarbonat.
• Implikasi Klinik
o Peningkatan kadar CO2 dapat terjadi pada muntah yang parah, emfisema, dan
aldosteronisme
o Penurunan kadar CO2 dapat terjadi pada gagal ginjal akut, diabetik asidosis dan
hiperventilasi
o Peningkatan dan penurunan dapat terjadi pada penggunaan nitrofurantoin

18
FINGER PRICK
Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Lokasi pengambilan darah yang akan ditusuk harus bersih; jika
perlu cucilah lebih dahulu dengan air dan sabun. Pada orang dewasa dipakai ujung jari
atau anak daun telinga untuk mengambil darah kapiler; pada bayi dan anak kecil boleh
juga tumit atau ibu jari kaki. Tempat yang dipilih tidak boleh yang memperlihatkan
gangguan peredaran darah seperti sianosis atau pucat.
2. Persiapan Sampel: Tidak memerlukan persiapan khusus
3. Alat dan Bahan:
- Pen lancet
- Alkohol swab 70%
- Lancet steril atau hemolet
- Penampung darah (tabung/ pipa kapiler)

Analitik
a. Tangan diletakkan di atas meja dengan posisi telapak menghadap ke atas
b. Pilih bagian yang akan ditusuk dan dibersihkan
c. Pegang jari pasien dengan ibu jari dan telunjuk kita
d. Bagian kulit dibersihkan dengan kapas alkohol 70%
e. Tusukkan lancet pada kulit
f. Buang lancet pada tempat khusus.
g. Tekan bagian yang darahnya keluar (jangan terlalu keras)
h. Seka tetesan darah pertama dengan kapas steril
i. Tampung darah yang keluar ke dalam tabung/pipa kapiler sesuai permintaan
pemeriksaan dengan menempelkan tabung/pipa kapiler langsung pada bagian kulit
dimana darah keluar.
j. Pipa kapiler ditutup dengan clay
k. Bila diperlukan sediaan apus, ambil porsi pertama sebelum tabung antikoagulan: 1 – 2,5
cm pada ujung kaca obyek, diameter tetesan 1 – 2 mm.

SUMBER KESALAHAN
Susunan darah yang diambil untuk pemeriksaan mungkin berubah oleh salah tindakan
waktu mengambil darah itu. Jagalah terhadap kesalahan-kesalahan seperti disebut di bawah ini.
1. Mengambil darah dari tempat yang menyatakan adanya gangguan peredaran seperti
vasokonstriksi (pucat), vasodilatasi (oleh radang, trauma, dsb), kongesti atau cyanosis
setempat.
2. Tusukan yang kurang dalam; darah harus diperas-peras keluar.
3. Kulit yang ditusuk masih basah alkohol. Bukansaja darah itu diencerkan saja, tetapi
darah juga akan melebar di atas kulit sehingga sukar diusap ke dalam pipet.
4. Tetes darah pertama dipakai untuk pemeriksaan.
5. Terjadi bekuan dalam tetes darah karena terlalu lambat bekerja.

19

Pemeriksaan Gula Darah Kapiler
Glukosa dibentuk dari hasil penguraian karbohidrat dan perubahan glikogen
dalam hati. Pemeriksaan glukosa darah adalah prosedur skrining yang menunjukan
ketidakmampuan sel pankreas memproduksi insulin, ketidakmampuan usus halus
mengabsorpsi glukosa, ketidakmampuan sel mempergunakan glukosa secara efisien,
atau ketidakmampuan hati mengumpulkan dan memecahkan glikogen.

Alat dan Bahan
a. Sarung tangan
b. Alat pemeriksaan kadar gula darah
c. Kapas alkohol
d. Strip pemeriksaan
Teknik Pemeriksaan
a. Jelaskan kepada pasien mengenai prosedur yang akan dilakukan dan minta
informed consent pasien.
b. Siapkan peralatan yang dibutuhkan
c. Cuci tangan sebelum melakukan tindakan dan kenakan sarung tangan
d. Pilih tempat pengambilansampel yang sesuai; ujung-ujung jari pada sisi
telapak tangan atau permukaan plantar lateral atau medial tumit bayi.
e. Bersihkan tempat pemeriksaan dengan kapas alkohol dan biarkan hingga
kering.
f. Lakukan penusukan pada tengah ujung jari atau tumit bayi
g. Lap tetesan darah pertama dengan menggunakan kasa
h. Biarkan setetes kecil darah terbentuk dengan memberikan penekanan
intermiten
i. Sentuhkan ujung strip pemeriksaan pada tetes darah hingga darah mengisi
seluruh bagian kapiler strip pemeriksaan

20
 j. Buang seluruh bahan pemeriksaan yang terkontaminasi pada container
yang sesuai. Buang lancet pada container untuk benda tajam
k. Lepas sarung tangan dan cuci tangan setelah selesai melakukan
pemeriksaan.

Nilai normal : ≥ 7 tahun : 70 - 100 mg/dL SI unit : 3,89 - 5,55 mmol/L
12 bulan - 6 tahun: 60-100 mg/dL SI unit : 3,33 - 5,55 mmol/L

Implikasi klinik:
• Peningkatan gula darah (hiperglikemia) atau intoleransi glukosa (nilai puasa >
120 mg/dL) dapat menyertai penyakit cushing (muka bulan), stress akut,
feokromasitoma, penyakit hati kronik, defi siensi kalium, penyakit yang kronik,
dan sepsis.
• Kadar gula darah menurun (hipoglikemia) dapat disebabkan oleh kadar insulin
yang berlebihan atau penyakit Addison.
• Obat-obat golongan kortikosteroid dan anestetik dapat meningkatkan kadar gula
darah menjadi lebih dari 200 mg/dL.
• Bila konsentrasi glukosa dalam serum berulang-ulang > 140 mg/dL, perlu
dicurigai adanya diabetes mellitus.
• Dengan menghubungkan konsentrasi serum glukosa dan adanya glukosa pada
urin membantu menentukan masalah glukosa dalam ginjal pasien.

Faktor pengganggu
• Merokok meningkatkan kadar glukosa
• Perubahan diet (misalnya penurunan berat badan) sebelum pemeriksaan dapat
menghilangkan toleransi karbohidrat dan terjadi “false diabetes”
• Kadar glukosa normal cenderung meningkat dengan penambahan umur
• Penggunaan kontrasepsi oral jangka panjang dapat menyebabkan glukosa
meningkat secara signifi kan pada jam kedua atau spesimen darah berikutnya
• Penyakit infeksi dan prosedur operasi mempengaruhi toleransi glukosa. Dua
minggu setelah pulih merupakan waktu yang tepat untuk mengukur kadar
glukosa
• Beberapa obat menggangu kadar toleransi glukosa (tidak terbatas pada)
- Insuling
- Hipoglikemi oral
- Salisilat dosis besar
- Diuretik tiazid
- Kortikosteroid
- Estrogen dan kontrasepsi oral
- Asam nikotinat
- Fenotiazin
- Litium

21
 - Propranolol;
Jika memungkinkan, obat tersebut seharusnya dihentikan selama paling kurang
3 hari sebelum pemeriksaan.
• Tirah baring jangka panjang mempengaruhi hasil toleransi glukosa.

PEMERIKSAAN SPUTUM/DISCHARGE
Berbagai organism patogen dapat terdeteksi melalui pemeriksaan mikroskopik
specimen sputum dan swab tenggorokan.
Organisme-organisme ini meliputi:
• Bakteri: basil tahan asam negaitif - Gram atau positif – Gram
• Jamur atau ragi: berupa filamen – filament miselium, dengan atau tanpa pori.
Jamur atau ragi ini mungkin patogen atau mungkin juga hanya saprofit yang
berkembang biak di dalam sampel setelah sampel disimpan dalam wadahnya
(identifikasi secara tepat perlu dilakukan di laboratorium spesialistik)
• Actinomycetes: berupa granula – granula
• Parasit: telur trematoda paru dan sangat jarang telur skistosoma dan cacing
dewasa spesies Mammomonogamus laryngeus

Alat dan Bahan
• Mikroskop
• Kaca objek
• Wadah berleher lebar dan tahan bocor untuk specimen sputum, seperti stoples
atau kardus
• Kristal natrium klorida
• N-setilpirimidinium klorida
• Air suling

Waktu Pengambilan Sputum
Dahak yang diambil ialah dahak yang kental kuning kehijauan sebanyak 3-5 cc,
dengan waktu pengambilan sebagai berikut :
• Dahak sewaktu, penderita datang berobat dengan keluhan apa saja ke poliklinik.
• Dahak pagi, yang diambil besok paginya begitu bangun tidur.
• Dahak sewaktu, yang diambil sewaktu penderita mengantar dahak pagi tersebut.

Metode Pengumpulan Spesimen Sputum
Spesimen sputum sebaiknya ditampung pagi hari sehabis bangun tidur
1. Minta pasien bernapas dalam. Selanjutnya pasien diminta membatukkan dengan
kuat dan menampung air liurnya di dalam wadah. Tutup rapat wadah tersebut
dan tempelkan label bertuliskan nama dan nomor pasien. Pastikan bahwa
jumlah sputum yang ditampung cukup untuk pemeriksaan.

22
 2. Kalau specimen akan dikirim ke laboratorium untuk kultur Mycobacterium
tuberculosis, minta pasien untuk menampung langsung di dalam stoples
bermulut lebar, bertutup ulir, dan berisi 25 ml larutan berikut:
N-setilpiridinium klorida 5 g
Natrium klorida 10 g
Air suling sampai 1000 ml
Tutup rapat stoples dan berikan label bertuliskan nama pasien dan tanggal
pengambilan specimen.
Penting: Saliva yang encer dan berbusa serta secret hidung dan faring tidak
sesuai dipakai sebagai sampel untuk pemeriksaan bakteriologis. Minta pasien
mengirimkan sampel yang lain.

Pembuatan Apusan Sputum
a. Ambil pot sputum dan kaca sediaan yang beridentitas sama dengan pot sputum.
b. Buka pot dengan hati-hati untuk menghindari terjadinya droplet (percikan
sputum).
c. Panaskan ose (sengkelit) di atas nyala api spritus sampai merah dan biarkan
sampai dingin.
d. Ambil sedikit sputum dari bagian yang kental dan kuning kehijau-hijauan
(purulen) menggunakan ose yang telah disterilkan di atas.
e. Oleskan sputum secara merata pada permukaan kaca sediaan.
f. Masukkan ose ke dalam botol (berukuran 300-500cc) yang berisi pasir dan
alcohol 70% atau desinfektan, digoyang-goyangkan untuk melepaskan partikel
yang melekat pada ose.
g. Dekatkan ose pada api spritus sampai kering, bakar sampai membara.
h. Keringkan sediaan di udara terbuka sekitar 15-30 menit, jangan terkena
matahari langsung atau di atas api.
i. Gunakan pinset untuk mengambil sediaan yang sudah kering pada sisi yang
berlabel dengan apusan sputum menghadap ke atas.
j. Lewatkan di atas lampu spritus sebanyak 3 kali (sekitar 3-5 detik) untuk fiksasi
(kalau terlalu lama dapat merubah bentuk bakteri dan membuat sediaan pecah).

Pemeriksaan Mikroskopik
Pemeriksaan sputum dilakukan pertama-tama dengan mata telanjang dan selanjutnya
dengan mikroskop. Sampel sputum yang sebagian besar berisi saliva tidak dapat
dipakai untuk kultur ataupun pemeriksaan langsung.
Sputum pasien dengan infeksi bakteri biasanya berisi:
• Mukus yang tebal, disertai gelembung-gelembung udara
• Benang-benang fibrin
• Kumpulan pus
• Kadang-kadang, noda-noda darah berwarna kecoklatan
Berdasarkan inspeksi visual ini, karakteristik sputum dapat dilaporkan sebagai berikut
• Purulen: berwarna kehijauan, berisi pus dan mukus

23
 • Mukoid: sebagian besar berisi mukus
• Mukosaliva: berisi mukus dan sedikit saliva
• Darah juga harus dilaporkan terlihat pada inspeksi visual ini

Pembacaan Sediaan Sputum
a. Sediaan yang telah diwarnai diperiksa di bawah mikroskop, cari lebih dulu
lapang pandang dengan obyektif 10x.
b. Teteskan minyak emersi di atas apusan, periksa dengan menggunakan lensa
okuler 10x dan obyektif 100x
c. Periksa paling sedikit 100 lapang pandang atau dalam waktu kurang lebih 10
menit.
d. Sediaan yang telah diperiksa direndam dalam xylol selama 15-30 menit, lalu
disimpan dalam kotak sediaan.

Pewarnaan Gram
Pewarnaan Gram adalah suatu metode untuk membedakan spesies bakteri
menjadi dua kelompok besar, yakni Gram positif dan Gram negatif, berdasarkan sifat
kimia dan fisik dinding sel mereka. Pewarnaan Gram bertujuan untuk
mengklasifikasikan kedua tipe bakteri ini berdasarkan perbedaan struktur dinding sel
mereka, selain itu membantu menentukan diagnosis awal, sebagai pedoman awal
memutuskan terapi antibiotik sebelum tersedia bukti definitif bakteri penyebab infeksi
(kultur dan tes kepekaan bakteri terhadap antibiotik).

Pra Analitik
1. Persiapan pasien: Tidak diperlukan persiapan khusus.
2. Persiapan sampel: Sampel ditempatkan dalam tabung steril. Sumber sampel berasal
dari spesimen pasien seperti cairan otak, sputum, cairan aspirasi, eksudat, feses,
pus, urin, biopsi, cairan sendi, koloni dari media padat dan cair seperti kultur kaldu.
3. Prinsip Tes: Bakteri Gram positif dapat mempertahankan zat warna pertama yakni
kristal violet sedangkan bakteri Gram negatif melepaskan zat kristal violet dan
mengikat zat warna kedua yakni safranin.
4. Alat dan bahan
a. Objek gelas
b. Spesimen atau koloni bakteri
c. Kit Larutan Pewarnaan Gram
i. Kristal gentian violet
ii. Iodin/Lugol
iii. Ethanol atau methanol 99,8%
iv. Air destilasi
v. Fuchsin atau safranin

Analitik
Cara kerja

24
1. Preparat yang telah difiksasi, ditetesi dengan Carbol Gentian Violet, biarkan 1 – 2
menit.
2. Carbol Gentian Violet dibuang, cuci dengan air mengalir, lalu ditetesi dengan
lugol selama 1 – menit.
3. Lugol dibuang, kemudian zat warna pada preparat dilunturkan dengan Alkohol
96% selama 10 detik.
4. Preparat dicuci dengan air mengalir sampai bersih.
5. Preparat ditetesi dengan larutan Fuchsin dan dibiarkan 1 – 2 menit.
6. Preparat dicuci dengan air mengalir sampai bersih.
7. Keringkan dan periksa di bawah mikroskop dengan menggunakan lensa minyak
imersi.

Pasca Analitik
Interpretasi:
• Gram Positif (+) : bakteri berwarna ungu, bentuk batang atau kokus
• Gram Negatif (-) : bakteri berwarna merah, bentuk batang atau kokus

Pewarnaan Ziehl Nielsen

Bakteri tahan asam (BTA) seperti Mycobacterium tuberculosis (MTb) memiliki
lapisan lipid yang tebal, hanya dapat diwarnai dengan konsentrasi zat warna yang lebih
tinggi dan lebih lama dibandingkan pewarnaan lainnya, atau dengan pemanasan. Sekali
terwarna, BTA resisten terhadap larutan dekolorisasi yang kuat sekalipun. Apusan
digenangi dengan larutan carbol fuchsin sehingga BTA dan bakteri lain akan berwarna
merah. Langkah selanjutnya, apusan digenangi dengan larutan dekolorisasi, yaitu asam
hidroklorida dalam alkohol, yang menyebabkan BTA mempertahankan zat warna
pertama, tetapi bakteri lain menjadi tidak berwarna. Kemudian apusan diwarnai
dengan methylen blue. Latar pada apusan dan bakteri lain akan berwarna biru, tampak
kontras dengan BTA yang berwarna merah.

25
Pra Analitik
Alat dan Bahan
• Mikroskop
• Lampu spiritus atau pemanas Bunsen
• Rak kaca objek
• Pinset
• Larutan fuksin karbol untuk pewarnaan Ziehl-Neelsen
• Asam etanol untuk pewarnaan Ziehl-Neelsen
• Larutan hijau malasit 1%, diencerkan dengan air suling atau larutan biru metilen

Analitik
1. Fiksasi apusan
2. Teteskan larutan pewarna fuksin karbol yang telah disaring hingga menutupi
keseluruhan apusan. Angkat kaca objek dengan pinset dan panaskan sebentar
dengan lampu spiritus atau pemanas Bunsen sampai larutan peearna tampak
mulai menguap (pada suhu sekitar 60oC-jangan memanaskan berlebihan)
3. Diamkan kaca objek delama 5 menit supaya benar-benar terwarnai
4. Bilas dengan air bersih dan teteskan asam etanol hingga menutupi keseluruhan
apusan, diamkan selama 5 menit atau sampai menjadi pink.
5. Bilas dengan air bersih dan teteskan hijau malsiat atau biru metilen hingga
mentupi keseluruhan apusan selama 1 – 2 menit.
6. Bilas lagi dengan air bersih dan taruh kaca objek dengan posisi tegak di dalam
rak kaca objek, biarkan mengering dengan sendirinya. Jangan mengeringkannya
dengan tisu atau kertas penyerap cairan.
Periksa apusan yang sudah dipulas dengan larutan pewarna Ziehl-Neelsen. Kalau
terlihat basil-basil berwarna merah laporkan dengan menuliskan “ditemukan basil
tahan asam”. Laporkan juga jumlah basil tahan asam yang ditemukan. Kalau tidak ada
basil tahan asam yang terlihat, laporkan dengan menuliskan “tidak ditemukan basil
tahan asam”

Pasca Analitik
Interpretasi
• BTA Positif (+) : akan berwarna merah dengan latar belakang yang berwarna
biru.
• Pelaporan hasil BTA berdasarkan World Health Organization (WHO) dan The
International Union Against Tuberculosis and Lung Disease (IUATLD) sebagai
berikut.

26


ANALISA FESES
Feses merupakan hasil proses pencernaan yang tidak diabsorbsi. Komposisi feses terdiri
dari serat selulosa, epitel usus, sekresi saluran cerna. Pada keadaan normal setiap hari
diekskresi kira-kira 100 – 200 gram feses. Jumlah tersebut 60 – 70 % merupakan air dan
sisanya terdiri dari substansi solid.
Tujuan tes dan interpretasi feses adalah untuk diagnosis adanya kelainan pada sistem
traktus gastrointestinal seperti diare, infeksi parasit, pendarahan gastrointestinal, ulkus
peptikum, karsinoma dan sindrom malabsorbsi.

Pemeriksaan dan tes yang dapat dilakukan pada feses umumnya meliputi tes
makroskopik, tes mikroskopik, tes kimia, dan tes mikrobiologi. Dalam modul ini akan dibahas
tes makroskopik dan tes mikroskopik feses.

A. Metode
1. Tes Makroskopik
a. Pra-Analitik
1) Persiapan pasien: Pasien tidak dibenarkan makan obat pencahar, obat anti diare,
golongan tetrasiklin, barium, bismuth, minyak atau magnesium karena akan
mempengaruhi hasil pemeriksaan.
2) Persiapan sampel: Feses sebaiknya feses segar, defekasi spontan, tidak
tercampur dengan urin atau sekresi tubuh lainnya serta diperiksa di
laboratorium dalam waktu 2-3 jam setelah defekasi.
3) Pengumpulan / pengambilan sampel: Wadah yang dipakai pot plastic yang
bermulut lebar, tertutup rapat dan bersih serta tidak boleh mengenai bagian
luar wadah dan diisi tidak terlalu penuh. Beri label nama, tanggal, nomor pasien,
sex, umur, diagnosis awal.
b. Analitik
1) Alat:
a) Lidi atau spatel kayu
b) Kapas Lidi
2) Cara kerja:
a) Sampel diperiksa di tempat yang terang
b) Perhatikan warna, bau, konsistensi, adanya darah, lendir, nanah, cacing, dll.
c. Pasca Analitik
Hasil dan interpretasi:

27
 1) Warna: normal feses berwarna kuning coklat. Warna feses yang abnormal dapat
disebabkan atau berubah oleh pengaruh jenis makanan, obat-obatan, dan
adanya pendarahan pada saluran pencernaan.
2) Bau: Bau normal feses disebabkan oleh indol, skatol, dan asam butirat. Tinja
yang abnormal mempunyai bau tengik, asam, basi.
3) Konsistensi: Feses normal agak lunak dengan mempunyai bentuk.
4) Lendir: Adanya lendir berarti ada iritasi atau radang dinding usus. Lendir pada
bagian luar feses menunjukkan lokasi iritasi mungkin pada usus besar, dan bila
bercampur dengan feses maka iritasi mungkin pada usus kecil.
5) Darah: normal feses tidak mengandung darah.
6) Parasit: cacing mungkin dapat terlihat.

Tabel 1. Karakteristik Makroskopi Feses

Karakteristik Penyebab
Warna Clay-colored, abu-abu Obstruksi posthepatik
Kuning pucat Barium enema
Merah Darah dari saluran cerna bagian
bawah, zat warna makanan, obat-
obatan
Coklat Normal
Hitam Darah dari saluran cerna bagian atas,
terapi besi, bismuth
Hijau Saluran hijau, biliverdin
Berbentuk Normal
Konsistensi Keras Konstipasi
Lunak Peningkatan cairan dalam tinja
Berair Diare, steatorrhea
Lain-lain Berbusa, floating Peningkatan jumlah gas dalam tinja
Lengket, spongy Steatorrhea
Mukus Konstipasi, colitis, vilous adenoma

2. Tes Mikroskopik
a. Pra Analitik
Persiapan pasien dan persiapan sampel sama dengan tes mikroskopik.
b. Analitik
1) Alat:
a) Lidi / kapas lidi
b) Kaca objek
c) Kaca penutup
d) Mikroskop
2) Reagen:
Larutan eosin 2%
3) Cara kerja:
a) Larutan eosin ditaruh di atas kaca objek yang bersih dan kering.
b) Dengan sebatang lidi, sedikit feses diemulsikan dalam tetes larutan eosin.

28
 c) Tutup dengan kaca penutup.
d) Periksa di bawah mikroskop, mula-mula dengan pembesaran 10 x kemudian
40 x. Amati apakah ada telur cacing, eritrosit, leukosit, sel epitel, kristal, sisa
makanan, dll.

c. Pasca Analitik
Hasil dan interpretasi:
1) Sel epitel: berasal dari dinding usus bagian distal, sel epitel dari bagian
proksimal kadang-kadang rusak.
2) Leukosit: Lebih jelas terlihat kalau feses dicampur dengan beberapa tetes
larutan asam asetat 10%. Jumlah besar ditemukan pada dysentri basiler, colitis
ulcerosa.
3) Eritrosit: Ditemukan bila ada lesi dalam kolon, rectum, atau anus.
4) Kristal: Sebagai kelainan mungkin dijumpai kristal Charcot-Leyden pada
kelainan ulcerative usus, khususnya amubiasis, kristal hematoidin pada
perdarahan usus.
5) Sisa makanan: Sebagian berasal dari makanan daun-daunan dan sebagian hewan
seperti serat otot, serat elastic, dll.
6) Telur cacing: Mungkin didapat telur cacing Ascaris lumbricoides, Necator
americanus, Enterobius vermicularis, dll.

a b Telur
Ascaris lumbricoides (a) yang dibuahi dan (b)
tidak dibuahi Telur Enterobius vermicularis

29


Telur Hookworm
Telur Trichuris trichiura
(Ancylostoma duodenale)

PEMERIKSAAN APUSAN DARAH

Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Darah kapiler segar atau darah EDTA (etilen diamin tetra asetat).
3. Prinsip Tes: Dibuat apusan darah pada kaca objek
4. Alat dan Bahan:
a. Kaca Objek (kering, bebas debu, dan bebas lemak)
b. Kaca Penutup
c. Lancet steril
d. Alkohol swab

Analitik
1. Dipilih kaca objek yang bertepi rata untuk digunakan sebagai ‘kaca penghapus’ sudut kaca
objek yang dipatahkan, menurut garis diagonal untuk dapat menghasilkan sedian apus
darah yang tidak mencapai tepi kaca objek
2. Satu tetes kecil darah diletakkan pada ± 2 –3 mm dari ujung kaca objek. Kaca penghapus
diletakkan dengan sudut 30 – 45 derajat terhadap kaca objek didepan tetes darah.
3. Kaca pengapus ditarik ke belakang sehingga tetes darah, ditunggu sampai darah menyebar
pada sudut tersebut.
4. Dengan gerak yang mantap, kaca penghapus didorong sehingga terbentuk apusan darah
sepanjang 3 – 4 cm pada kaca objek. Darah harus habis sebelum kaca penghapus mencapai
ujung lain dari kaca objek. Apusan darah tidak bolah terlalu tipis atau terlalu tebal,
ketebalan ini dapat diatur dengan mengubah sudut antara kedua kaca objek dan kecepatan
menggeser. Makin besar sudut atau makin cepat menggeser, maka makin tipis apusan
darah yang dihasilkan.
5. Apusan darah dibiarkan mengering di udara. Identitas pasien ditulis pada bagian tebal
apusan dengan pensil kaca.

Catatan:
Kaca penutup yang digunakan harus yang cukup tipis (No.0) sehingga dapat diperiksa dengan
lensa imersi. Selain itu juga harus kering dan bersih.

30


Gambar 1. Cara membuat sediaan apus

Pasca Analitik
Sediaan Yang Baik Mempunyai Ciri – ciri :
1. Tidak melebar sampai tepi kaca objek, panjangnya setengah sampai dua pertiga panjang
kaca
2. Mempunyai bagian yang cukup tipis untuk diperiksa, pada bagian itu eritrosit terletak
berdekatan tanpa bertumpukan.
3. Rata , tidak berlubang-lubang dan tidak bergaris-garis
4. Mempunyai penyebaran leukosit yang baik, tidak berhimpun pada pinggir-pinggir atau
ujung-ujung sediaan

PEWARNAAN SEDIAAN APUS

Sediaan yang akan dipulas hendaknya yang segar; sediaan yang disimpan tanpa difiksasi
tidak dapat dipulas sebaik sediaan segar.
Kebanyakan cara memulas sediaan darah menggunakan psinsip Romanowski. Yang
banyak dipakai ialah pulasan menurut Wright, menurut Giemsa dan pulasan aduan May-
Giunwald dan Giemsa

A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel:
a. Darah kapiler segar akan memberikan morfologi dan hasil pewarnaan yang
optimal pada sediaan apus
b. Darah EDTA (etilen diamin tetra asetat). EDTA dapat dipakai karena tidak
berpengaruh terhadap morfologi eritrosit dan leukosit serta mencegah trombosit
bergumpal. Tes sebaiknya dilakukan dalam waktu kurang dari 2 jam. Tiap 1 ml
EDTA digunakan untuk 1 ml darah vena
3. Prinsip Tes: Prinsip pewarnaan didasarkan pada sifat kimiawi dalam sel. Zat warna
yang bersifat asam akan bereaksi dengan komponen sel yang bersifat alkalis, demikian
pula sebaliknya. Pewarnaan sediaan apus menggunakan prinsip Romanosky yaitu
menggunakan dua zat warna yang berbeda yang terdiri dari Azure B (trimethylthionin)
yang bersifat basa dan eosin Y (tetrabromoflourescein) yang bersifat asam seperti yang
dianjurkan oleh The International Council for Standardization in Hematology, dan

31
 pewarnaan yang dianjurkan adalah Wright-Giemsa dan May Grunwald-Giemsa
(MGG).

4. Alat dan Bahan:
e. Alat:
- Kaca Objek 25x75 mm
- Batang gelas
- Rak kaca objek
- Pipet Pasteur
f. Bahan/reagen :
(1) Metanol absolut dengan kadar air kurang dari 4%, disimpan dalam botol
yang tertutup rapat untuk mencegah masuknya uap air dari udara.
(2) Zat warna Wright
Zat warna Wright 1 gr
Methanol absolut 600 ml
Penambahan alkohol sedikit demi sedikit, sambil dikocok dengan baik
dengan bantuan 10–20 butir gelas. Tutup rapat untuk mencegah
penguapan dan disimpan ditempat yang gelap selama 2 – 3 mg, dengan
sering-sering dikocok, saring sebelum dipakai.
(3) Larutan dapar pH 6,4
Na2HPO4 2,56 g
KH2PO4 6,63 g
Air suling 1 L
Sebagai pengganti larutan dapar, dapat dipakai air suling yang pHnya diatur
dengan penambahan tetes demi tetes larutan Kalium bikarbonat 1% atau
larutan HCl 1% sampai indikator Brom Thymol Blue ( larutan 0,04 % dalam
air suling ) yang ditambahkan mencapai warna biru.
(4) Zat warna Giemsa
Zat warna giemsa 1g
Methanol absolut 10 ml
Hangatkan campuran ini sampai 50°C dan biarkan selama 15 menit,
kemudian disaring. Sebelum dipakai, campuran ini diencerkan sebanyak 20
x dengan larutan dapar pH 6,6. Untuk mencari parasit malaria, dianjurkan
menggunakan larutan dapar pH 7,2
(5) Zat warna May - Grunwald
Methylene blue dalam methanol
1% eosin dan 1 % methylene blue

B. Analitik
1. Pewarnaan Wright
a. Letakkan sediaan apus di atas bak tempat pewarnaan dengan lapisan darah berada di
atas.
b. Untuk fiksasi apusan, teteskanlah sekian banyak metanol absolut ke atas sediaan itu,
sehingga bagian yang terlapisi darah tertutup seluruhnya, selama 2 – 3 menit. (NB:
Tidak perlu jika sediaan zat pulas Wright berbentuk cair yang telah mengandung
metilalkohol)

32
 c. Genangi sediaan apus dengan zat warna Wright biarkan 3 – 5 menit agar sediaan
merekat zat pewarna.
d. Tambahkan larutan dapar pH 6.4 tercampur rata dengan zat warna. Biarkan selama 5 –
12 menit.
e. Bilas dengan air suling, mula-mula dengan perlahan (untuk membuang zat warna yang
terapung di atas) kemudian lebih kuat dengan tujuan menghilangkan semua kelebihan
zat warna dan membersihkan sediaan dari kotoran. Letakkan sediaan hapus dalam rak
dalam posisi tegak/vertikal dan biarkan mengering.

Perhatian!
Jagalah jangan sampai zat pulas Wright itu mengering di atas kaca, zat pulas yang telah
mengering sangat sukar dibuang dari permukaan kaca dan sangat mengganggu
pemeriksaan.
Larutan penyangga dengan pH 6,4 dapat dibuat sbb: kalium fosfat primer
(KH2PO4.0aq.) 6,63 g; natrium fosfat sekunder (Na2HPO4.0aq.) 2,56 g; aqua dest ad 1.000
ml. Sebagai pengganti penyangga itu, dapat juga dipakai air suling biasa yang pHnya diatur
dengan pemberian lar.kalium karbonat 1% atau lar.asam hidroklorida 1% secara
bertetesan terhadap indikator bromthymolblue (larutan dalam air 0,04%) sampai
mencapai warna hijau. Yang terakhir disebut itu memberikan hasil yang sama bagusnya
dan lebih murah.

2. Pewarnaan Giemsa
a. Letakkan sediaan apus di atas bak tempat pewarnaan dengan lapisan darah berada di
atas.
b. Untuk fiksasi apusan, teteskanlah sekian banyak metanol absolut ke atas sediaan itu,
sehingga bagian yang terlapisi darah tertutup seluruhnya. Biarkan selama 2-3 menit.
Kemudian, buanglah kelebihan metanol dari atas kaca.
c. Genangi sediaan apus dengan zat warna Giemsa yang baru diencerkan. Larutan Giemsa
yang dipakai adalah 5%, diencerkan dulu dengan larutan dapar. Biarkan selama 20 – 30
menit.
d. Bilas dengan air suling, mula-mula dengan perlahan (untuk membuang zat warna yang
terapung di atas) kemudian lebih kuat dengan tujuan menghilangkan semua kelebihan zat
warna dan membersihkan sediaan dari kotoran. Letakkan sediaan hapus dalam rak dalam
posisi tegak/vertikal dan biarkan mengering.

Perhatian!
Lamanya memulas dengan Giemsa ikut ditentukan oleh batch yang dipakai dari oleh
ciri-ciri sediaan; sebaiknya waktu itu diatur sendiri. Saran menghemat zat pulas seperti
ditulis pada pemakaian zat pulas Wright juga dapat diterapkan untuk Giemsa; ingatlah
supaya menggaris batasi sediaan sebelum melakukan fiksasi dengan metilakohol.
Pulasan Giemsa sama baiknya dengan pulasan Wright untuk darah yang tidak banyak
kelainan morfologinya. Perbedaan; dengan pulasan Giemsa granula basofil tidak nampak
karena granula itu akan larut. Selain itu, eritrosit-eritrosit lebih kelabu warnanya.
Sediaan darah yang berisi banyak sel-sel muda dan sediaan sumsum tulang belakang
dipulas Wright karena struktur plasma dan inti lebih jelas terlihat.
Di pihak lain, sediaan darah untuk mempelajari parasit-parasit darah lebih baik dipulas
secara Giemsa, sedangkan pH larutan penyangga dipilih 7,0 untuk maksud itu.

33
 Jika menghendaki aduan pulasan Wright dan Giemsa, dengan maksud supaya kebaikan
kedua macam zat warna didapat bersama-sama dalam satu sediaan, mulailah memulas
secara Wright dan sebagai pengganti buffer dipakai Giemsa yang telah diencerkan, dengan
larutan penyangga.

3. Pewarnaan May Grunwald – Giemsa (MGG) – Apusan Darah Tipis
a. Letakkan sediaan apus yang telah difiksasi diatas rak pewarnaan
b. Genangi sediaan apus dengan zat warna May Grunwald yang telah siap pakai, biarkan 2
menit
c. Tambahkan larutan buffer pH 6.4 sama banyak dengan larutan MGG yang telah
diberikan sebelumnya. Tiup agar larutan dapat tercampur rata dengan zat warna.
Biarkan selama 2 menit
d. Bilas dengan air (buang kelebihan zat warna)
e. Genangi dengan larutan Giemsa 5% (larutan buffer pH 6.4 10 ml + Giemsa 0,5 ml)
biarkan selama 10-15 menit.
f. Bilas dengan air ledeng , mula-mula dengan aliran lambat kemudian lebih kuat dengan
tujuan menghilangkan semua kelebihan zat warna. Letakkan sedian dalam sikap vertikal
dan biarkan mengering sendiri.

Sumber Kesalahan
1. Kesalahan dalam persiapan penderita, pengambilan dan penyimpanan bahan pemeriksaan
2. Sediaan apus terlalu biru memungkinkan disebabkan oleh apusan yang terlampau tebal,
pewarnaan terlalu lama, kurang pencucian, zat warna atau larutan dapar yang alkalis.
3. Sediaan apus terlalu merah mungkin disebabkan oleh sat warna sediaan atau larutan dapar
yang asam. Larutan dapar yang terlalu asam dapat menyebabkan leukosit hancur.
4. Bercak-bercak zat warna pada sediaan apus dapat disebabkan oleh zat warna tidak
disaring sebelum dipakai atau pewarnaan terlalu lama sehingga zat warna mengering pada
sedian.
5. Morfologi sel yang terbaik adalah bila menggunakan darah tepi langsung tanpa anti
koagulan. Bila menggunakan anti koagulan sediaan apus harus dibuat segera, tidak lebih
dari satu jam setelah pengambilan darah. Penggunaan antikogulan heparin akan
menyebabkan latar belakang berwarna biru dan leukosit menggumpal
6. Sediaan hapus yang tidak rata dapat disebabkan oleh kaca pengapus yang tidak bersih atau
pinggirannya tidak rata atau oleh kaca objek yang berdebu, berlemak atau bersidik jari.
7. Fiksasi yang tidak baik menyebabkan perubahan morfologi dan warna sediaan. Ini mungkin
terjadi apabila fiksasi dilakukan menggunakan methanol yang tidak absolut karena telah
menyerap uap air akibat penyimpanan yang tidak baik.
8. Fiksasi yang tidak dilakukan segera setelah sediaan apus kering dapat mengakibatkan
perubahan morfologi leukosit.

34

Pasca Analitik

Nilai Rujukan:
1. Evaluasi Eritrosit
Yang perlu diperhatikan dalam mengevaluasi eritrosit adalah morfologi, perhatikan:

a. Ukuran (size):
Diameter eritrosit yang normal (normositik) adalah 6 – 8 µm atau kurang lebih
sama dengan inti limfosit kecil

b. Bentuk (shape):
Bentuknya bikonkaf bundar dimana bagian tepi lebih merah daripada bagian
sentralnya

c. Warna (staining):
Bagian sentral lebih pucat disebut akromia sentral yang luasnya antara 1/3 -1/2
kali diameter eritrosit

d. Benda-benda inklusi (structure intracel)

e. Distribusi : merata

Kondisi Patologis:
1. Dengan pemeriksaan ini dapat ditemukan berdasarkan morfologi yakni
- Anemia Mikrositik Hipokrom misalnya pada penderita defisiensi Fe.
- Anemia Normositik Normokrom misalnya pada pendarahan akut.
- Anemia Mikrositik misalnya pada defisiensi Vit. B12 dan asam folat.

2. Bentuk eritrosit hemolisis :
Morfologi secara umum adalah polikromatofilik, makrosit, dan sel eritrosit
berinti. Bentuk morfologi khusus bervariasi tergantung etiologi kerusakan eritrosit:
-Akantosit pada abetalipoproteinemia, sirosis, uremia, Haemolytic Uremic
Syndrome (HUS), anemia hemolitik.
-Ekinosit pada abetalipoproteinemia, sirosis, uremia HUS,

35
 -Sel Target pada Hb C atau E, penyakit hati, ikterus obstruktif, talasemia, pasca
splenektomi.
-Sel tetes Air Mata pada mielofibrosis, talasemia, anemia hemolitik, mieloftisis.
-Sickle Cell pada sickle cell anemia.
-Sferosit pada hemolisis didapat maupun herediter.
-Ovalosit pada ovalositosis herediter
- Skistosit pada talasemia, anemia hemolitik, mikroangiopati.

3. Distribusi abnormal eritrosit
-Rouleaux formation pada multipel mieloma, makroglobulinemia Waldenstorm.
-Benda-benda inklusi dalam eritrosit
-Normoblast pada pendarahan akut, hemolisis berat mielofibrosis, asplenia,
leukemia, mieloftsis.
-Basophilic Stippling anemia sindroma Mielodisplasia.
-Howell Jolly Bodies pada anemia megaloblastik, asplenia, hemolisis berat.
-Cabot’s, Ring pada hemolisis berat.
-Heinz Bodies pada talasemia, anemia hemolitik karena obat, leukemia
- Parasit: plasmodium malaria, biasanya disertai dengan tanda-tanda hemolitik.

2. Evaluasi Leukosit
Leukosit adalah sel berinti. Dalam darah tepi yang paling banyak ditemukan adalah sel
polimorfonuklear netrofil (PMN). Jenis leukosit yang normal yang ditemukan dalam
darah tepi adalah eosinofil (1% - 3%), bisafil (0-1%), netrofil batang (2%-6%), netrofil
segmen atau sel PMN (50%-70%), limfosit (20%-40%) dan monosit (2%-8%). Dalam
keadaan normal diperkirakan terdapat 1 leukosit per 500 eritrosit.

Kondisi Patologis: Pada APK ditemukan tanda infeksi seperti persentase jumlah
netrofil, limfosis meningkat, hipersegmentasi, granulasitoksis, dan vakuolisasi
sitoplasma.

3. Evaluasi Trombosit
Diameter trombosit adalah 1-3 µm, tidak berinti, mempunyai granula dan bentuknya
reguler. Perkiraan jumlah trombosit dalam keadaan normal diperkirakan terdapat 1
trombosit per 15 – 20 eritrosit atau 5 – 15 per lapangan pandang imersie

Kondisi Patologis:
a. Trombositosis dapat ditemukan pada :
Mieloproliferatif, pendarahan akut, infeksi, penyakit inflamasi, Hodgkin, trombosis
vena, post splenektomi.
b. Trombositopenia dapat ditemukan pada :
Radiasi eritroleukimia, anemia megaloblastik, giant hemangioma,Thrombotic
Purpura (TTP), Disseminated Intravasucular Coagulation (DIC), purpura
trombositopenia karena obat, pasca tranfusi, SLE, Immunologic,
Thrombocytopenia Purpura (ITP)
c. Trombosit besar dapat ditemukan pada: May Hegglin anomaly, Sindroma
Mielodisplasia, AML.

36
URINALISIS
Deskripsi
Urinalisis dapat digunakan untuk evaluasi gangguan fungsi ginjal, gangguan fungsi hati,
gangguan hematologi, infeksi saluran kemih dan diabetes mellitus.
Parameter Nilai Normal
Berat Jenis 1,001-1,035
Deskripsi Kekuning-kuningan, kuning
pH 45-8,5
Protein 0-terlacak (Tr); < 50 mg/dL atau <0,5 mg/L
Glukosa Negatif
Keton Negatif
Darah Negatif
Sedimen urin RBC, WBC, sel epitel, bakteri, Kristal
Pewarnaan Gram Negatif

Berat jenis spesifik (Specific gravity)
Urinalisis dapat dilakukan sewaktu atau pada pagi hari. Pemeriksaan berat jenis
urin dapat digunakan untuk mengevaluasi penyakit ginjal pasien. Berat jenis normal
adalah 1,001-1,030 dan menunjukkan kemampuan pemekatan yang baik, hal ini
dipengaruhi oleh status hidrasi pasien dan konsentrasi urin. Berat jenis meningkat pada
diabetes (glukosuria), proteinuria > 2g/24 jam), radio kontras, manitol, dekstran,
diuretik. Nilai berat jenis menurun dengan meningkatnya umur (seiring dengan
menurunnya kemampuan ginjal memekatkan urin) dan preginjal azotemia.

Warna urin
Warna urin dipengaruhi oleh konsentrasi, adanya obat, senyawa eksogen dan
endogen, dan pH
• Warna merah coklat menunjukkan urin mengandung hemoglobin, myoglobin,
pigmen empedu, darah atau pewarna. Dapat juga karena pemakaian
klorpromazin, haloperidol, rifampisin, doksorubisin, fenitoin, ibuprofen. Warna
merah coklat dapat berarti urin bersifat asam (karena metronidazol) atau alkali
(karena laksatif, metildopa)
• Warna kuning merah (pink) menunjukkan adanya sayuran, bit, fenazopiridin
atau katartik fenolftalein, ibuprofen, fenitoin, klorokuin
• Warna biru-hijau menunjukkan pasien mengkonsumsi bit, bakteri Pseudomonas,
pigmen empedu, amitriptilin,
• Warna hitam menunjukkan adanya, alkaptouria
• Warna gelap menunjukkan porfi ria, malignant melanoma (sangat jarang)
• Urin yang keruh merupakan tanda adanya urat, fosfat atau sel darah putih
(pyuria), polymorphonuclear (PMNs), bakteriuria, obat kontras radiografi .
• Urin yang berbusa mengandung protein atau asam empedu
• Kuning kecoklatan menunjukkan primakuin, sulfametoksazol, bilirubin, urobilin

37
 WARNA IMPLIKASI KLINIK
Merah Cokelat Hemoglobin, myoglobin, pigmen empedu,
darah klorpromazin, haloperidol,
rifampisin, doksorubisin, fenitoin,
ibuprofen, urin bersifat asam (karena
metronidazol) atau alkali (karena laksatif,
metildopa)

Kuning merah (merah muda)
Sayuran, bit.fenazopiridin atau katartik
fenolftalein, ibuprofen, fenitoin, klorokuin
Biru-hijau
Pasien mengkonsumsi bit, bakteri
Pseudomonas, pigmen empedu,
amitriptilin
Kuning kecokletan

Primakuin, sulfametoksazol, bilirubin,
Hitam urobilin

Gelap Alkaptonuria

Porfiria, malignant melanoma (sangat
Keruh jarang)

Urat, fosfat atau sel darah putih (pyuria),
Berbubsa polymorphonuclear (PMNs), bakterinuria,
obat kontras radiografi

Protein atau asam empedu

pH urin (normal 5,0-7,5)
Deskripsi
Dipengaruhi oleh diet dan vegetarian dimana asupan asam sangat rendah
sehingga membuat urin menjadi alkali. pH urin mempengaruhi terbentuknya Kristal.
Misalnya pada pH urin asam dan peningkatan specifi c gravity akan mempermudah
terbentuknya kristal asam urat .
pH alkalin disebabkan:
• adanya organisme pengurai yang memproduksi protease seperti proteus,
Klebsiella atau E. coli
• ginjal tubular asidosis akibat terapi amfoterisin
• Penyakit ginjal kronik
• Intoksikasi salisilat

38
pH asam disebabkan karena :
• emfisema pulmonal
• diare, dehidrasi
• kelaparan (starvation)
• asidosis diabetic

Protein
Jumlah protein dapat dilacak pada pasien yang berdiri dalam periode waktu
yang panjang. Protein urin dihitung dari urin yang dikumpulkan selama 24 jam.
Proteinuria (dengan metode dipstick) : +1 = 100 mg/dL, +2 = 300 mg/dL, +4 = 1000
mg/dL. Dikatakan proteinuria bila lebih dari 300 mg/hari. Hasil positif palsu dapat
terjadi pada pemakaian obat berikut:
• penisilin dosis tinggi,
• klorpromazin,
• tolbutamid
• golongan sulfa
Dapat memberikan hasil positif palsu bagi pasien dengan urin alkali. Protein dalam urin
dapat: (i) normal, menunjukkan peningkatan permeabilitas glomerular atau gangguan
tubular ginjal, atau (ii) abnormal, disebabkan multiple mieloma dan protein Bence-
Jones.

Glukosa
Korelasi antara urin glukosa dengan glukosa serum berguna dalam memonitor dan
penyesuaian terapi antidiabetik.

Keton
Dapat ditemukan pada urin malnutrisi, pasien DM yang tidak terkontrol, dan pecandu
alkohol. Terjadi pada :
• gangguan kondisi metabolik seperti: diabetes mellitus, ginjal
• glikosuria,
• peningkatan kondisi metabolik seperti: hipertiroidism, demam, kehamilan dan
menyusui
• malnutrisi, diet kaya lemak

Sedimen
Deskripsi :
Tes ini memberikan gambaran adanya infeksi saluran kemih, batu ginjal atau
saluran kemih, nefritis, keganasan atau penyakit hati. Tidak ada tipe urin cast tertentu
yang patognomonik bagi gangguan penyakit ginjal yang khusus, walaupun terdapat cast
sel darah cast sel darah putih. Sedimen urin dapat normal pada kondisi preginjal atau
postginjal dengan minimal atau tanpa proteinuria.

39
 Sedimen Urin Nilai normal
Cell cast Negatif
White cell cast 0-5/hpf
RBC 0-3/hpf
Epitel 0-2/hpf
Bakteri <2/hpf atau 1000/mL
Kristal Negatif

Implikasi klinik :
Cell cast : Menunjukkan acute tubular necrosis.
White cell cast biasanya terjadi pada acute pyelonephritis atau interstitial nephritis
Red cell cast timbul pada glomerulonefritis akut
RBC : Peningkatan nilai menunjukkan glomerulonefritis, vaskulitis, obstruksi ginjal atau
penyakit mikroemboli, atau proteinuria
WBC : peningkatan nilai menunjukkan penyakit ginjal dengan infl amasi
Bakteri : jumlah bakteri > 105/mL menunjukkan adanya infeksi saluran kemih.
Kristal : meliputi kristal kalsium oksalat, asam urat, amorf, triple fosfat. Adanya
kristal menunjukkan peningkatan asam urat dan asam amino.

Metode Carik Celup
Pemeriksaan urine merupakan pemeriksaan dasar pada pasien yang dicurigai
mengalami gangguan ginjal atau infeksi saluran kemih. Selain itu, banyak pasie yang
tidak menunjukkan gejala klinis sama sekali; pada kasus-kasus seperti ini, infeksi
saluran kemih, yang sebelumnya tidak terdeteksi, dapat didiagnosis melalui
pemeriksaan urine.
Urinalisis sebagai salah satu jenis pemeriksaan urine, dapat digunakan untuk
evaluasi gangguan fungsi ginjal, gangguan fungsi hati, gangguan hematologi, infeksi
saluran kemih dan diabetes mellitus, serta screening test pada tes kesehatan, kondisi
patologis, atau operasi. Urinalisis ini dapat dilakukan secara makroskopis dan kimiawi
serta mikroskopis untuk mengevaluasi sedimen urine. Analisis kimiawi meliputi
glukosa, bilirubin, urobilinogen, keton, protein, nitrit, leukosit, pH, kandungan darah,
berat jenis, dan asam askorbat.
PraAnalitik
a. Persiapan Pasien: Tidak perlu persiapan khusus
b. Persiapan Sampel:
i. Sampel (urine) harus terhindar dari kontaminasi. Wadah penampung
hendaknya bersih dan kering
ii. Identifikasi sampel: nama, nomor, alamat, umur dan penggunaan
pengawet urine
iii. Sampel urine yang dipakai untuk urinalisis adalah: urine sewaktu, urine
pagi dan urine postprandial
c. Alat dan Bahan
i. Tabung reaksi

40
 ii. Rak tabung reaksi
iii. Strip urinalisis (disertai skala warna rujukan pada botol strip)
iv. Sampel urine
d. Prinsip Pemeriksaan: Kandungan zat-zat biokimiawi dalam urine akan
menimbulkan perubahan warna pada kertas strip urinalisis yang telah
mengandung reagen khusus.

Analitik
a. Masukkan sampel urine dalam tabung reaksi
b. Celupkan selembar kertas strip urinalisis ke dalam tabung reaksi selama ±1
detik hingga seluruh permukan strip basah.
c. Sentuhkan satu sisi strip urinalisis ke permukaan kertas tissue untuk
menghilangkan sisa urine.
d. Letakkan strip di atas permukaan kertas tissue
e. Tunggu hingga 1-2 menit dan bacalah hasilnya.

Pasca Analitik
Amati perubahan warna pada strip urinalisis dengan membandingkannya pada skala
warna rujukan.
Interpretasi:
a. Glukosa
i. Perubahan warna: Biru muda, hijau, hingga coklat.
ii. Negatif palsu: Vitamin C, benda keton, asam homogentisat, aspirin.
iii. Nilai rujukan <30mg/dl
b. Bilirubin
i. Perubahan warna: Coklat muda hingga merah coklat
ii. Nitrit.
iii. Untuk mengetahui ada tidaknya bakteriuri: merah muda. Negatif : warna
tidak berubah
iv. Nilai rujukan adalah negatif. Positif palsu: Rifampicin, Chlorpromazine
v. Negatif palsu: Vitamin C dan asam salisilat
vi. Nilai rujukan: Negatif
c. Urobilinogen
i. Perubahan warna: Jingga sampai merah tua
ii. Negatif palsu: Kadar nitrit tinggi
iii. Nilai rujukan:
Laki-laki 0,3 – 2,1 mg/2 hours
Perempuan 0,1 – 1,1 mg/2 hours
d. Keton
i. Perubahan warna: Ungu
ii. Positif palsu: Pigmen atau metabolit levodopa serta phenylketones
iii. Nilai rujukan: Negatif.

41
 e. Protein
i. Perubahan warna: Hijau muda
ii. Nilai rujukan < 20 mg/dl
f. Nitrit
i. Perubahan warna: Merah muda, penanda adanya bakteriuri
ii. Nilai rujukan: Negatif.

g. Leukosit
i. Perubahan warna: Coklat muda hingga warna ungu
ii. Nilai rujukan: Negatif
h. pH
i. Perubahan warna: Jingga - kuning kehijauan - hijau kebiruan
ii. Nilai rujukan 5-8
i. Blood
i. Perubahan warna: Kuning kehijau-hijauan hingga hijau kebiru-biruan dan
biru tua
ii. Negatif palsu: Protein kadar tinggi dan vitamin C
iii. Positif palsu: bakteri.
iv. Nilai rujukan: Negatif
j. Berat jenis
i. Perubahan warna
(1) Berat jenis rendah: Biru tua à hijau
(2) Berat jenis tinggi: berwarna hijau kekuning-kuningan
ii. Nilai rujukan 1,016 – 1,022
k. Asam Askorbat
Perubahan warna: Ungu à Kandungan asam askorbat >25mg/dl

Pemeriksaan Mikroskopik (sedimen)
Metode Pemeriksaan
Pemeriksaan sedimen urin secara mikroskopik
Alat dan bahan pemeriksaan
Alat:
• Sentrifus
• Tabung urin dengan volume 15 ml
• Pipet Pasteur
• Kaca objek
• Kaca penutup
• Mikroskop
Bahan Pemeriksaan: Urin segar
Teknik Pemeriksaan
a. Masukkan 10 - 15 mL urin homogen ke dalam tabung sentrifus. Biasanya
digunakan urin sebanyak 12 ml, Sentrifugasi dengan kecepatan 1500-2000 rpm
selama 5 menit.

42
 b. Buang supernatan dengan hati-hati, sisakan kira-kira 0,5 -1 mL.
c. Sedimen yang tersisa langsung diresuspensi. Ambil 1 tetes dengan pipet Pasteur
lalu teteskan pada kaca objek, tutup dengan kaca penutup.
d. Amati sediaan dengan pembesaran kecil (lensa objektif 10x), hitung minimal 10
lapang pandang dan pembesaran besar (lensa objektif 40x) amati 10-20 lapang
pandang.
Pelaporan Hasil
• Epitel : ......... /LPK, jenis : ......... (skuamosa/transisional/renal)
• Leukosit : ......... /LPB
• Eritrosit : ......... /LPB normal eritrosit ditemukan 0-2/LPB, lekosit 0-5/LPB
• Kristal : ......... (+/_), jenis : ........
• Silinder :.......... /LPB
• Lain lain :......... (sel ragi/bakteri/protozoa/sperma)
Normal ditemukan silinder hialin 0-2/LPK.

Pemeriksaan Glukosa Urin

Pemeriksaan Glukosa Urine Metode Fehling A dan Fehling B
Pra Analitik
1. Tujuan: Untuk memeriksa adanya kandungan glukosa dalam sampel urine
2. Metode: Tes glukosa urine dilakukan dengan menggunakan metode fehling
3. Prinsip Pemeriksaan: Dalam suasana alkali, glukosa mereduksi kupri menjadi
kupro kemudian membentuk Cu2O yang mengendap dan berwarna merah.
Intensitas warna merah dari ini secara kasar menunjukkan kadar glukosa dalam
urine yang diperiksa
4. Alat dan bahan:
• Tabung reaksi
• Api Bunsen
• Pipet ukur
• Ball filler
• Reagen Fehling A dan Fehling B
• Sampel urine
Analitik
Cara Kerja:
1. Diambil 2 mL larutan Fehling A dan 2 mL larutan Fehling B
2. Larutan dihomogenkan
3. Dilakukan uji terhadap masing-masing urin dimana 1 mL campuran Fehling A
dan Fehling B dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan
sampel urin sebanyak 0,5 mL
4. Larutan dicampur
5. Dipanaskan dengan api bunsen hingga mendidih
6. Perubahan warna yang terjadi diamati.

43

Pasca Analitik
Nilai normal dan Interpretasi:
( - ) : biru / hijau keruh
( + ) : keruh dan warna hijau agak kuning
( ++ ) : kuning kehijauan dengan endapan kuning
( +++ ) : kuning kemerahan dengan endapan kuning merah
( ++++ ) : larutan merah bata / merah jingga

Pemeriksaan Glukosa Urine Metode Benedict
Pra Analitik
1. Tujuan: Untuk memeriksa adanya kandungan glukosa dalam sampel urine
2. Metode: Tes glukosa urine dilakukan dengan menggunakan metode benedict
3. Prinsip Pemeriksaan: Dalam suasana alkali, glukosa mereduksi kupri menjadi
kupro kemudian membentuk Cu2O yang mengendap dan berwarna merah.
Intensitas warna merah dari ini secara kasar menunjukkan kadar glukosa dalam
urine yang diperiksa
4. Alat dan bahan:
• Tabung reaksi
• Api Bunsen
• Reagen Benedict dengan komposisi:
CuSO4 17,3
Na Citrate 173
Na Carbonat 100
Aquadest ad 1.000 ml
• Sampel urine

Analitik
Cara Kerja
1. Masukkan 5 ml reagen Benedict dan 8 tetes urine (2,5 ml reagen
Benedict dengan 4 tetes urine) ke dlam tabung reaksi
2. Kocok, kemudian dipanaskan sampai mendidih di atas api Bunsen
3. Atau dapat dimasukkan ke dalam penangas air dengan air yang telah
mendidih selama 5 menit
4. Biarkan dingin, amati perubahan warna yang terjadi

Pasca Analitik
Nilai normal dan Interpretasi
( - ) : Tetap biru atau hijau keruh
( + ) : Keruh, warna hijau agak kuning
( ++ ) : Kuning kehijauan dengan endapan kuning
( +++ ) : Kuning kemerahan, dengan endapan kuning merah
( ++++ ) : Merah jingga sampai merah bata

44


METODE DIP SLIDE (KULTUR URINE)

Kultur urine diindikasikan sewaktu ditemukan banyak sekali bakteri pada
pemeriksaaan mikroskopis atau metode carik celup urine. Pada kasus-kasus seperti ini,
specimen urine harus segera dikirim (tidak boleh ditunda-tunda) ke laboratorium
bakteriologi untuk kultur organisme patogen semi-kuantitatif dan menilai
sensitivitasnya terhadap antimikroba.
Untuk memudahkan kultur bakteri dalam urine, dikeluarkan biakan buatan yang
berupa lempeng plastik bertangkai di mana pada kedua sisi permukaannya dilapisi
perbenihan padat khusus. Lempeng tersebut dicelupkan ke dalam urine pasien atau
dengan digenangi urine setelah itu lempeng dimasukkan kembali ke dalam tabung
plastik tempat penyimpanan semula, lalu dilakukan pengeraman semalam pada suhu
37°C. Penentuan jumlah kuman/mL dilakukan dengan membandingkan pola
pertumbuhan pada lempeng perbenihan dengan serangkaian gambar yang
memperlihatkan keadaan kepadatan koloni yang sesuai dengan jumlah kuman antara
1000 dan 10.000.000 dalam tiap mL urine yang diperiksa. Cara ini mudah dilakukan,
murah dan cukup akurat. Kekurangannya adalah jenis kuman dan kepekaannya tidak
dapat diketahui walaupun demikian plat celup ini dapat dikirim ke laboratorium yang
mempunyai fasilitas pembiakan dan tes kepekaanyang diperlukan. Adanya bakteri
dalam urine akan tumbuh pada medium agar dalam slide ketika kondisi lingkungan
sesuai.
PraAnalitik
a. Tujuan Pemeriksaan: Mengukur kadar urea dalam urine secara kuantitatif
b. Persiapan Pasien: Tidak perlu persiapan khusus
c. Persiapan Sampel:
i. Sampel (urine) harus terhindar dari kontaminasi. Wadah penampung
hendaknya bersih dan kering
ii. Identifikasi sampel: nama, nomor, alamat, dan umur
iii. Sampel yang digunakan adalah urine sewaktu dengan metode
pemgambilan urine porsi tengah.
d. Alat dan Bahan
i. Gelas Ukur
ii. Dip Slide ®

Analitik
a. Dip-slide dibuka dari wadahnya kemudian dicelupkan dalam urine lalu diangkat.
b. Bila ada urine yang berlebihan, bersihkan dengan menggunakan kertas tissue
pada bagian tepi.
c. Kembalikan dip-slide ke dalam wadah yang telah diberikan label identitas.
d. Inkubasi dip-slide pada ruangan dengan suhuh 20-24OC selama 18-24 jam.

45

PascaAnalitik
Nilai rujukan: Negatif

PENILAIAN HASIL PEMERIKSAAN SEMEN

Pemeriksaan sperma (lebih tepatnya analisis semen) adalah pemeriksaan yang
dilakukan untuk mengukur jumlah serta kualitas semen dan sperma seorang pria. Pengertian
semen berbeda dengan sperma. Secara keseluruhan, cairan putih dan kental yang keluar dari
alat kelamin pria saat ejakulasi disebut semen. Sedangkan sel kecil yang berenang-renang di
dalam semen disebut sperma.
Analisis semen merupakan salah satu pemeriksaan tahap pertama untuk menentukan
kesuburan pria. Pemeriksaan ini dapat membantu menentukan apakah ada masalah pada
sistem produksi sperma atau pada kualitas sperma, yang menjadi penyebab ketidaksuburan.

PraAnalitik
a. Tujuan Pemeriksaan: Pemeriksaan specimen semen dilakukan terhadap pasien untuk
menyingkirkan kemungkinan infertilitas.
b. Metode: Pemeriksaan ini dilakukan melalui penilaian berbagai karakteristik fungsional
spermatozoa dalam cairan semen (cairan vesica seminalis).
c. Persiapan Pasien
Sebelum melakukan analisis sperma perlu terlebih dahulu untuk memberikan
penerangan sejelas-jelasnya kepada pria yang akan diperiksa tersebut mengenai maksud
dan tujuan analisis sperma dan juga untuk menjelaskan cara pengeluaran dan
penampungan sperma tersebut. Penerangan mengenai cara pengeluaran, penampungan
dan pengiriman sperma ke laboratorium. Sebelum pemeriksaan dilakukan sebaiknya
pasien dianjurkan untuk memenuhi persyaratan sebagai berikut.
i. Melakukan abstinensia selama 3 – 5 hari, paling lama selama 7 hari. Pengeluaran
ejakulat sebaiknya dilakukan pada pagi hari dan harus dikeluarkan di
laboratorium. Bila tidak mungkin, harus tiba di laboratorium paling lambat 2 jam
dari saat dikeluarkan.

46
 ii.Ejakulat ditampung dalam wadah / botol gelas bemulut besar yang bersih dan
steril ( jangan sampai tumpah ), kemudian botol ditutup rapat-rapat dan diberi
nama yang bersangkutan.
iii. Pasien mencatat waktu pengeluaran mani, setelah itu langsung diserahkan pada
petugas laboraturium untuk pemeriksaan dan harus diperiksa sekurang-
kurangnya 2 kali dengan jarak antara waktu 1-2 minggu. Analisis sperma sekali
saja tidak cukup karena sering didapati variasi antara produksi sperma dalam
satu individu.
iv. Sperma dikeluarkan dengan cara rangsangan tangan (onani/masturbasi), bila
tidak mungkin dapat dengan cara rangsangan senggama terputus (koitus
interuptus) dan jangan ada yang tumpah.
v. Untuk menampung sperma dengan ukuran tempat penampung sperma 50-
100ml, maka digunakan tempat penampung:
(1) Tidak terbuat dari plastik atau kondom (mengandung gugus fenol-C6H5OH)
sehingga sperma rusak)
(2) Tidak mengandung spermatoksik
(3) Terbuat dari bahan yang tidak bereaksi apa-apa
(4) Bermulut lebar supaya muat pada penis
(5) Memiliki penutup agar tidak terkontaminasi.

Adapun cara untuk memperoleh sperma yakni sebagai berikut.
i. Masturbasi / Onani, merupakan metode yang paling dianjurkan untuk
memperoleh sperma, biasanya dengan tangan (baik tangan sendiri maupun
tangan istrinya) atau dengan suatu alat tertentu. Kebaikan cara ini menghindari
kemungkinan tumpah ketika menampung sperma, menghindari dari
pencemaran sperma dengan zat-zat yang lain.
ii. Coitus Interuptus (CI), adalah melakukan persetubuhan secara terputus, hal ini
kurang baik dianjurkan sebab memungkinkan sperma dapat tercampur dengan
cairan vagina, sehingga banyak mengandung epitel, leukosit, eritosit, bakteri,
parasit, jamur dll. Dalam jumlah penampungannya kurang, karena sperma
sebagian dapat mesuk ke vagina. Disamping itu terjadi kesalahan pada
pemeriksaan pH dan konsentrasi.
iii. Coitus Condomatosus, tetapi pengeluaran sperma dangan cara ini dilarang dan
sangat tidak diperkenankan. Karena sebagian besar karet kondom mengandung
bahan spermicidal, yaitu bahan yang dapat mematikan sperma
iv. Reflux poscital, adalah suatu cara coitus dimana setelah sperma keluar dan
masuk ke vagina, sperma tersebut dibilas dengan pz atau cairan lainnya. Hal ini
akan timbul kekeliruan dalam volume konsentrasi dan viskositas.
v. Massage prostat, adalah suatu cara pengeluaran dengan cara memijat kelenjar
prostat lewat rectum, di sini jelas akan timbul kekeliruan dalam penafsiran pH,
konsentrasi dan sebagainya yang keluar adalah cairan prostat. Jadi cara
memperoleh sperma yang paling baik adalah dengan onani meskipun faktor
psikis ada pengaruhnya. Hal ini dapat terjadi pada orang desa, orang tertentu
yang tidak bisa melakukan onani atau orang yang tidak mengerti tentang onani.

d. Persiapan Sampel

47
 • Pengambilan spesimen semen dilakukan sendiri oleh pasien memasukkan cairan
semen yang ke dalam suatu botol yang bersih dan kering; selanjutnya, botol
berisi semen tersebut dikirimkan ke laboratorium sesegera mungkin, paling baik
dalam 30 menit atau kurang setelah pengambilan sampel.
• Spesimen ini tidak langsung diperiksa karena semen merupakan cairan
berviskositas tinggi sehingga harus “mencair” dahulu.
• Waktu yang diperlukan untuk pencairan ini sekitar 15-30 menit dan harus
diperiksa sesegera mungkin setelahnya.
• Untuk pemeriksaan pergerakan sperma, Pemeriksaan sebaiknya dilakukan pada
suhu kamar (200C – 250C). Dalam memeriksa pergerakan spermatozoa
sebaiknya diperiksa setelah 20 menit karena dalam waktu 20 menit sperma
tidak kental sehingga spermatozoamudah bergerak akan tetapi jangan lebih dari
60 menit setelah ejakulasi sebab dengan bertambahnya waktu maka
spermatozoa akan memburuk pergerakannya serta pH dan bau mungkin akan
berubah.
e. Alat dan Bahan
i. Mikroskop
ii. Kaca objek
iii. Penutup kaca objek
iv. Pipet sahli
v. Pipet elliason
vi. Gelas ukur 10 ml
vii. Kertas indicator pH
viii. Kamar hitung Improved Neubauer
ix. Stopwatch
x. Natrium bikarbonat
xi. Larutan fenol atau formalin (formaldehid 37%)
xii. Air suling
xiii. Vaselin
xiv. Pengencer semen (Natrium bikarbonat 5gr, Fenol/formalin 1ml, Air suling
100ml)

Analitik
a. Pemeriksaan Makroskopis
i. Volume
(1) Tunggu hingga cairan semen mencair
(2) Tampung seluruh cairan semen dalam gelas ukur dengan skala volume
0.1ml
(3) Baca hasilnya
ii. Warna
(1) Pasanglah latar belakang putih di belakang tabung reaksi yang mengandung
cairan semen
(2) Dengan penerangan yang cukup, amati warna dan kekeruhan dalam tabung.
iii. Bau
(1) Sperma yang baru keluar pada botol penampung dicium baunya
(2) Dalam laporan bau dilaporkan: khas/ tidak khas

48
 iv. pH
(1) Celupkan kertas pH dalam cairan semen yang homogeny dalam tempat
penampungnya
(2) Bacalah hasilnya pada skala rujukan warna
v. Liquefaction
Liquefaction diperiksa 20 menit setelah ejakulasi (setelah dikeluarkan). Dapat
dilihat dengan jalan melihat coagulumnya.
vi. Viskositas (Kekentalan)
Cara Subjektif
(1) Sentuhlah permukaan cairan semen dengan pipet atau batang pengaduk
(2) Tariklah ke atas dan perhatikan adanya benang yang terlihat.
Cara Pipet Elliason
(1) Pastikan cairan semen homogeny dan gunakan pipet yang kering
(2) Pipetlah cairan semen sampai angka 0.1
(3) Tutup bagian atas pipet dengan jari
(4) Arahkan pipet tegak lurus
(5) Jalankan stopwatch
(6) Jika terjadi tetesan pertama stopwath dimatikan dan hitung waktunya
dengan detik
vii. Fruktosa Kualitatif
(1) Pipetkan 0.05ml cairan semen ditambah 2ml larutan resolsinol (0.5% dalam
alcohol 96%) ke dalam tabung reaksi
(2) Campurkan hingga rata
(3) Panaskan dalam air mendidih selama 5 menit
(4) Amati perubahan warna yang terjadi
b. Pemeriksaan Mikroskopis
i. Jumlah sperma per-lapangan pandang
(1) Aduklah cairan semen hingga homogeny sebelum pemeriksaan mikroskopis
Sebelum menentukan atau menghitung konsentrasi sperma perlu dilakukan
perkiraan kasar jumlah sperma agar dapat menentukan prosedur pengenceran
yang akan digunakan dan untuk mempersiapkan sediaan apus untuk analisis
morfologi.
(2) Diambil 1 – 3 tetes cairan sperma ditaruh diatas obyek glass lalu ditutup
dengan cover glass
(3) Lihat di bawah mikroskop dengan perbesaran 40X
(4) Hitunglah berapa banyak spermatozoa pada beberapa lapang pandang.
Misalnya, dihitung berturut-turut lapang pandang:
I = 6 spermatozoa
II = 5 spermatozoa
III = 7 spermatozoa
IV = 8 spermatozoa
(5) Dalam laporan dituliskan terdapat 5 – 10 spermatozoa per-lapangan
pandang. Perkiraan konsentrasi spermatozoa dikalikan dengan 106 berarti
perkiraan konsentrasi spermatozoa adalah 5 – 10 juta/ml. Jika jumlah
spermatozoa banyak dihitung perkuadran (1/4 lapang pandang).
ii. Motilitas sperma
(1) Pipetkan setetes semen ke kaca objek

49
 (2) Tutup tetesan tersebut dengan penutup kaca objek
(3) Oleskan vaselin di sekeliling penutup kaca objek untuk mencegah terjadinya
evaporasi
(4) Amati di bawah mikroskop dengan perbesaran 40x
(5) Gerak spermatozoa yang baik adalah gerak kedepan dan arahnya lurus,
gerak yang kurang baik adalah gerak zig-zag, berputar-putar dan lain-lain.
(6) Estimasikan persentasi spermatozoa motil dan non-motil pada beberapa
lapangan pandang mikroskop
(a) Dihitung dulu spermatozoa yang tidak bergerak kemudian dihitung
yang bergerak kurang baik, lalu yang bargerak baik misal:
• yang tidak bergerak = 25%
• yang bergerak kurang baik = 50%
• yang bergerak baik = 100% - 25% - 50% = 25%
(b) Persentase pergerakan cukup ditulis dengan angka bulat (umumnya
kelipatan 5 misalnya: 10%,15%, 20%).
(c) Jika sperma yang tidak bergerak > 50% maka perlu dilakukan
pemeriksaan lebih lanjut guna mengetahui viabilitas sperma
(banyaknya sperma yang hidup) sebab spermatozoa yang tidak
bergerakpun kemungkinan masih hidup.
iii. Perhitungan Jumlah Sperma
Jumlah spermatozoa total ialah jumlah spermatozoa dalam ejakulat.
Sedangkan konsentrasi sperma adalah jumlah spermatozoa/ml sperma.
Perhitungan konsentrasi spermatozoa dapat ditentukan dengan mengunakan
metode hemositometer atau ”electronic coulter counter”.
Metode hemositometer lebih sering digunakan untuk sperma
yang mempunyai perkiraan spermatozoa yang sangat rendah (misalnya
10juta/ml) atau pemeriksaan sperma yang memerlukan penentuan jumlah
dengan segera.
(1) Siapkan pengencer yang berisi NaHCO3 50gr, Formalin 35% 10ml, Gentian
Violet pekat 5ml, Aquadestilata 1L
(2) Ambil semen dengan pipet leukosit hingga tanda batas 0.6uL selanjutnya
ambil larutan pengencer semen memakai pipet yang sama hingga tanda
batas 11uL.
(3) Masukkan pipet tersebut ke dalam rotator atau bolak-balikkan pipet dengan
menutup kedua ujungnya untuk menghasilkan campuran yang benar-benar
homogeny.
(4) Segera pindahkan ke hemositometer (kamar hitung Neubauer) yang telah
ditutup dengan gelas penutup.
(5) Biarkan hemositometer selama 15 menit sampai 20 menit agar semua sel
mengendap
(6) Hitung dibawah mikroskop pembesaran 40X untuk spermatozoa (sel benih
yang matang yang mempunyai ekor yang dihitung).

Cara perhitungan
Hitung jumlah sperma dengan objek 40x pada daerah leukosit pada 4 bidang.
Luas = 1 mm2
Tinggi = 0,1 mm

50
 Vol = 0,1 mm3
Jumlah sperma/ml =
dengan n = jumlah total spermatozoa dalam keempat persegi pada bilik hitung.
iv. Morfologi Sperma
Perhatikan bentuk spermatozoa dengan memperhatikan:
(1) Panjang spermatozoa
(2) Bentuk, ukuran, dan jumlah kepala spermatozoa
(3) Panjang leher
(4) Bentuk ekor
(5) Rasio panjang ekor terhadap panjang spermatozoa
(6) Laporkan pula adanya sel darah, sel epitel, sel imatur testis, kristal-kristal
urine.

PascaAnalitik
a. Pemeriksaan Makroskopis
i. Volume
• Volume normal sperma, tergantung ras. Bagi orang indonesia volume yang
normal 2 – 3 ml.
• Volume yang lebih dari 8 ml disebut Hyperspermia. Kondisi ini dapat
disebabkan oleh
(1) Kerja kelenjar prostat dan vesika seminalis terlalu giat
(2) Obat perangsang hormon laki – laki
• Volume yang kurang dari 1 ml disebut Hypospermia. Kondisi ini dapat
disebabkan oleh
(1) Ejakulasi yang berturut-turut
(2) Vesica seminalis kecil
(3) Penampung sperma tidak sempurna
ii. Warna
• Sperma yang normal biasanya berwarna putih keruh seperti air kanji
kadang-kadang agak keabu-abuan.
• Adanya lekosit yang disebabkan oleh infeksi traktus genitalia dapat
menyebabkan warna sperma menjadi putih kekuningan.
iii. Bau
• Spermatozoa yang baru keluar mempunyai bau yang khas atau spesifik
• Untuk mengenal bau sperma, seseorang harus telah mempunyai
pengalaman untuk membaui sperma.
• Baunya sperma yang khas tersebut disebabkan oleh oksidasi spermin (suatu
poliamin alifatik) yang dikeluarkan oleh kelenjar prostat.
• Dalam keadaan infeksi, sperma berbau busuk/ amis.
• Secara biokimia sperma mempunyai bau seperti klor/ kaporit.
iv. pH
• Sperma yang normal tidak banyak berbeda dengan pH darah, untuk
mengukur pH cukup dengan menggunakan kertas pH kecuali dalam satu
penelitian dapat digunakan pH meter.
• Sperma yang normal pH menunjukan sifat yang agak basa yaitu 7.2 – 7.8

51
 • Pengukuran sperma harus segera dilakukan segera setelah sperma mencair
karena akan mempengaruhi pH sperma. Juga bisa karena sperma terlalu
lama disimpan dan tidak segera diperiksa sehingga tidak dihasilkan
amoniak (terinfeksi oleh kuman gram negatif (-), mungkin juga karena
kelenjar prostat kecil, buntu, dan sebagainya.
• pH yang rendah terjadi karena keradangan yang kronis dari kelenjar
prostat, Epididimis, vesika seminalis atau kelenjar vesika seminalis kecil,
buntu dan rusak.
v. Liquefaction
• Bila setelah 20 menit belum homogen berarti kelenjar prostat ada gangguan
(semininnya jelek).
• Bila sperma yang baru diterima langsung encer mungkin tak mempunyai
coagulum oleh karena saluran pada kelenjar vesica seminalis buntu atau
memang tak mempunyai vesika seminalis.
vi. Viskositas
• Kekentalan atau viskositas sperma dapat diukur setelah likuifaksi sperma
sempurna.
• Cara Subjektif: Panjang benang 3-5 cm. Makin panjang benang terlihat
maka makin tinggi viskositasnya.
• Cara Pipet Elliason
o Nilai rujukan <2 detik
o Semakin kental sperma tersebut semakin besar viskositasnya. Hal ini
mungkin disebabkan karena
§ Spermatozoa terlalu banyak
§ Cairannya sedikit
§ Gangguan liquedaction
§ Perubahan komposisi plasma sperma
§ Pengaruh obat-obatan tertentu
vii. Fruktosa Kualitatif
Pemeriksaan fruktosa kualitatif ini harus merupakan pemeriksaan rutin pada
sperma azoospermia. Fruktosa sperma diproduksi oleh vesica seminalis.
• Bila tidak didapati fruktosa dalam sperma, hal ini dapat disebabkan karena:
(1) Azospermia yang disebabkan oleh agenesis vas deferens
(2) Kedua duktus ejakulatorius tersumbat
(3) Kelainan pada kelenjar vesika seminalis
• Bila sperma mengandung fruktosa maka campuran diatas menjadi merah
coklat atau merah jingga
• Bila tidak ada fruktosa maka tidak menjadi perubahan warna
b. Pemeriksaan Mikroskopis
i. Jumlah sperma per-lapangan pandang
• Misalnya ¼ Lapang pandang = 50 spermatozoa, jadi per-lapangan pandang
200 spermatozoa. Perkiraan konsentrasi spermatozoa dikalikan dengan 106
berarti perkiraan konsentrasi spermatozoa adalah 200 juta/ml.
• Jika perlapang pandang didapatkan nol spermatozoa maka tidak usah
dilakukan pemeriksaan konsentrasi disebut Azoospermia.
ii. Motilitas sperma

52
 • Gerak spermatozoa yang baik adalah gerak kedepan dan arahnya lurus,
gerak yang kurang baik adalah gerak zig-zag, berputar-putar dan lain-lain.
• Catatan: Jangan sekali-kali menyebut spermatozoa mati, yang
benar adalah spermatozoa tidak bergerak
• Nilai rujukan: 80% spermatozoa bergerak aktif, 20% spermatozoa bergerak
lambat/tidak bergerak sama sekali.
• Pada pemeriksaan setelah 3 jam pertama, motilitas spermatozoa seharusnya
sedikit berkurang atau tidak berkurang sama sekali.
• Pada pemeriksaan berikutnya, motilitas spermatozoa biasanya akan
berkurang terus dan pada suhu kamar menjadi benar-benar non-motil
setelah 12 jam.
• Berkurangnya motilitas spermatozoa mungkin merupakan salah satu
penyebab infertilitas.
• Sebab menurunnya motilitas spermatozoa:
(1) Dilakukan pemeriksaan yang terlalu lama sejak sperma dikeluarkan
(2) Cara penyimpanan sampel yang kurang baik
iii. Perhitungan Jumlah Sperma
• Jumlah spermatozoa yang normal adalah 60-150 juta/ml (menurut
beberapa sumber, 100-500 juta/ml).
• Pada pasien-pasien yang jumlah spermatozoanya di bawah 60 juta/ml,
hitung spermatozoanya (jumlah spermatozoa pada bilik hitung) pasti
rendah; meskipun begitu, pasien-pasien ini mungkin masih tetap fertil.
iv. Morfologi Sperma
Nilai rujukan
• Spermatozoa normal memiliki panjang 50-70um
• Bentuk kepala spermatozoa normal besar dan oval
o Kepala spermatozoa berukuran 3-6um x 2-3um
• Leher spermatozoa pendek
• Ekor spermatozoa panjang dan langsing
• Panjang ekor mencapai kira-kira 90% panjang total spermatozoa
• Tidak ditemukan >20% spermatozoa bentuk abnormal
Bentuk abnormal
• Bentuk Pir (seperti buah pir)
• Bentuk Terato (tidak beraturan dan berukuran besar)
• Bentuk Lepto (ceking)
• Bentuk Mikro (kepala seperti jarum pentul)
• Bentuk Strongyle (seperti larva stongyloides)
• Bentuk Lose Hezel (tanpa kepala)
• Bentuk Immature (spermatozoa belum dewasa, terdapat cytoplasmic)

53


TES KEHAMILAN
HCG (Human Chorionic Gonadotropin) merupakan suatu hormon glikoprotein
yang dihasilkan oleh jaringan plasenta segera setelah pembuahan dan dikeluarkan
lewat urin. Hormon ini juga dihasilkan bila terdapat proliferasi yang abnormal dari
jaringan epitel korion seperti molahidatidosa atau suatu chorio carsinoma.
Kehamilan akan ditandai dengan meningkatnya kadar HCG dalam urin pada
trimester I, dapat dideteksi dalam serum setelah 7 hari setelah ovulasi. Konsentrasi HCG
terus meningkat pesat, dan memuncak pada 10-12 minggu dalam kehamilan dengan
kisaran 30-200,000 mIU / ml. HCG dalam urine akan terdeteksi pada kadar di atas 25
mIU/ml
Munculnya HCG segera setelah konsepsi dan selama pertumbuhan awal
kehamilan menjadikannya penanda yang sangat baik untuk deteksi awal kehamilan.
Pemeriksaan HCG dengan metode immunokromatografi merupakan cara yang paling
efektif untuk mendeteksi kehamilan dini.

Pra Analitik
1. Persiapan Sampel: Urine yang digunakan sebaiknya urine pagi karena lebih
konsentrat sehingga mengandung lebih banyak HCG per satuan volume.
2. Persiapan Pasien: Tidak ada persiapan khusus
3. Prinsip Tes: Reaksi pembentukan kompleks antigen antibodi antara HCG sebagai
antigen dan anti HCG sebagai antibodi bersifat spesifik. Garis warna merah yang
terjadi pada test line (T) dapat terjadi karena pada test telah disensitisasi antigen
dan konjugat ditambah urine sehingga kromogen berikatan dengan antibodi maka
akan terbentuk reaksi garis warna merah.
4. Alat dan Bahan
-Gelas Ukur

54
 -Strip planotest

Analitik
5. Tampunglah urine sampel pada gelas ukur yang kering dan bersih.
6. Celupkan strip ke dalam gelas sesuai dengan batas yang telah ditentukan,
diamkan selama 30 detik.
7. Angkat strip dari wadah air seni dan letakkan pada tabel komparasi. Diamkan
dan tunggu hasilnya kurang lebih 3 menit.
8. Lihat dan baca hasilnya serta catat.

Pasca Analitik
Interpretasi:
Garis merah pada zona T dan C : Positif
Garis merah pada zona C saja : Negatif
Garis merah pada zona T saja/ Tidak ada garis merah : Invalid

Beberapa penyebab terjadinya hasil negatif palsu adalah akibat kesalahan teknik
pemeriksaan, terlalu lama mencelupkan strip, atau apabila kadar hormon B- hCG dalam urin
belum mencukupi atau karena pemakaian obat obatan seperti Pemakaian b-hCG untuk terapi
kesuburan dan diet. Obat diuretik dan obat anti Parkinson, Bahan kimia atau sabun yang
terkontaminasi pada urin, Vitamin C dosis tinggi juga dikatakan bisa mempengaruhi hasil tes,
ataupun adanya tumor dalam tubuh yang menghasilkan b-hCG seperti tumor jaringan plasenta
(trofoblastik), tumor indung telur yang menghasilkan b-hCG dll, atau kehamilan anggur (mola)
yang juga dapat menyebabkan hasil positif akibat hormon b- hCG yang dihasilkan.
Dalam keadaan tersebut, ulang pemeriksaan 1 - 2 minggu kemudian, atau langsung melakukan
pemeriksaan kadar hormon B-hCG dalam darah untuk hasil yang lebih akurat, jika memang
masih belum menstruasi.

55
TES WIDAL
Salmonella typhi dan Salmonella paratyphi A, B, dan C manyebabkan demam
enteric pada manusia. Sebagai respon terhadap stimulus antigen Salmonella (O dan H),
tubuh memproduksi antibodi terhadap antigen O dan H. titer antibodi-antibodi ini
meningkat pelan-pelan dalam fase awal/dini penyakit, mencapai maksimumnya,
kemudian pelan-pelan menurun sampai tidak lagi terdeteksi. Pada pasien typhoid,
antibodi terhadap Salmonella dapat dideteksi dalam serum pada minggu kedua setelah
infeksi.
Tes Widal dapat dilakukan dengan metode slide atau metode tabung. Metode
slide merupakan cara yang cepat tetapi tidak/kurang teapt untuk menunjukkan titer
antibodi. Oleh sebab itu, untuk menentukan titer antibodi dianjurkan melakukan
metode tabung karena lebih teliti menunjukkan besaran titer.

A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak ada persiapan khusus
2. Persiapan Sampel:
a. Diambil darah vena sesuai prosedur baku, dibiarkan membeku, kemudian
disentrifus untuk memperoleh serum segar.
b. Bila tes akan ditunda, simpanlah serum dalam lemari pendingin pada
suhu 2-80C, serum ini bisa bertahan sampai 48 jam. Bila menunda lebih
dari 48 jam, serum harus disimpan dalam keadaan beku (di bawah 00C)
c. Serum yang lipemik (mengandung lemak), hematic (mengandung darah),
atau tercemar tidak boleh dipakai untuk tes.
3. Prinsip Tes:
a. Suspensi yang mengandung antigen Salmonella direaksikan dengan
serum pasien (yang diduga menderita typhoid). Secara kualitatif, bila
ada reaksi antigen-antibodi maka akan timbul aglutinasi
b. Jumlah antibodi diketahui dengan melakukan titrasi pada serum yang
diperiksa, artinya suspense antigen direaksikan dengan serum yang
diencerkan bertahap.
4. Alat dan Bahan:
a. Kit Plasmatec berisi:
- Suspensi antigen Salmonella Typhi H
- Suspensi antigen Salmonella H paratyphi A
- Suspensi antigen Salmonella H paratyphi B
- Suspensi antigen Salmonella H paratyphi C
- Suspensi antigen Salmonella Typhi O
- Suspensi antigen Salmonella O paratyphi A
- Suspensi antigen Salmonella O paratyphi B
- Suspensi antigen Salmonella O paratyphi C
b. Lempeng pereaksi (tile slide)
c. Pipet 0,08 ml; 0,04 ml; 0,02 ml; 0,01 ml; 0,005 ml; 1,0 ml dan 1,9 ml

56
 d. Larutan NaCl fisiologis (0,9%)
e. Sentrifus
f. Inkubator

B. Analitik
1. Metode Slide (Semikualitatiff)
a. Siapkan serum yang akan dites. Jika serum simpan yang akan dipakai, biarkan
dulu serum beberapa saat untuk menyesuaikan suhu ruangan (18-300C)
b. Siapkan lempeng-reaksi, buatkan 5 buah lingkaran dengan diameter 3 cm
c. Pipetkan serum sesuai pola di bawah ini:

d. Kocok baik isi botol suspensi antigen kemudian pipet 1 tetes pada setiap
lingkaran
e. Serum dan antigen dalam setiap lingkaran dicampur baik kemudian goyang
memutar lempeng pereaksi agar campuran reaksi merata
f. Setelah 1 menit. Baca hasil reaksi (agglutinasi)


2. Metode Tabung (Semikuantitatif)
a. Siapkan 8 tabung reaksi kecil, beri nomor 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, dan 8.
b. Pipetkan NaCl 0,9% sebanyak 1,9 mL ke tabung 1, dan 1 mL masing-masing ke
tabung 2 s/d 8
c. Tambahkan 0,1 mL serum ke tabung 1 dan campur baik isi tabung
d. Pindahkan 1,0 mL isi tabung 1 ke tabung 2 dan campur baik isi tabung 2 dan
seterusnya ke tabung 3 sampai tabung 7. Dari tabung 7, buang 1,0 mL. tabung 8
hanya akan berisi NaCl 0,9% dan akan dipakai sebagai control. (Perhatikan
prinsip pengenceran berseri pada lampiran!)
e. Botol reagen dikocok baik kemudian pipetkan 1,0 mL ke setiap tabung. Campur
baik isi setiap tabung.
f. Inkubasikan pada suhu 500C selama 4 jam atau 370C semalam
g. Baca hasil reaksi dan laporkan tabung terakhir yang masih menunjukkan
agglutinasi.
Tabung 1 2 3 4 5 6 7 8
Pengenceran 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 kontrol

57
C. Pasca Analitik
Nilai rujukan: Umumnya dipakai titer 1:80 ~ 1:160
Interpretasi Hasil:
1. Negatif: Tidak ada agglutinasi
2. Positif: ada agglutinasi dan menunjukkan adanya antibodi terhadap antigen
yang sesuai
3. Agglutinasi pada tabung dengan pengenceran tertinggi menunjukkan titer
tes.
4. Titer yang tinggi (lebih dari nilai rujukan) bisa berarti:
• Mengidap typhoid (menunjang diagnosis)
• Sebelumnya ada infeksi lain dengan demam
• Penyakit hati kronik
5. Untuk kepentigan diagnosis, lebih penting mengamati kenaikan titer (artinya
dilakukan tes berulang) daripada mengamati hanya pada satu titer yang
tinggi.
Untuk diagnosis final: observasi/gambaran klinik harus sesuai dengan hasil tes
(biasanya diikutkan tes kultur/biakan).

TES HEMOGLOBIN CARA SAHLI

A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Darah kapiler, EDTA, Oksalat
3. Prinsip Tes: Hemoglobin diubah menjadi hematin asam, kemudian warna yang terjadi
dibandingkan secara visual dengan standar dalam alat itu
4. Alat dan Bahan:
a. Pen lancet
b. Hemolet/lancet
c. Hemoglobinometer (hemometer):
- tabung pengencer
- pipet Hb
- pipet tetes
- selang pengisap
- batang pengaduk
d. HCl 0.1 N
e. Aquades

B. Analitik
1. Masukkan HCl 0.1 N ke dalam tabung pengencer sampai tanda 2
2. Isap darah kapiler dengan pipet Hb sampai tanda 20 ul
3. Hapuslah darah yang melekat pada sebelah luar ujung pipet
4. Segera alirkan darah dari pipet ke dalam dasar tabung pengencer. Catat waktu /saat
darah dicampurkan ke dalam HCl.
5. Isap kembali isi tabung ke dalam pipet kemudian tiupkan kembali isi pipet ke dalam
tabung, lakukan hal ini 2 sampai 3 kali agar sisa-sisa darah terbilas ke dalam tabung.

58
 6. Tambahkan aquadest, tetes demi tetes, sambil mengaduk isi tabung sampai
diperoleh warna isi tabung sama dengan warna standar yang ada di komparator.
Tepat 3 menit setelah darah tercampur dengan HCl, warna larutan dibaca pada jarak
sepanjang lengan atas dengan latar belakang cahaya matahari, warna larutan
disamakan dengan warna gelas standar. Tinggi larutan sesuai dengan skala yang
menunjukkan kadar Hb dalam g% (lihat pada dasar meniskus). Laporkan nilainya
dalam gr% (=gr/100 ml = gr/dl).

C. Pasca Analitik
Nilai rujukan:
Perempuan 12 – 16 gr/dl
Laki-laki 14 – 18 gr/dl

Sumber Kesalahan

1. Tidak semua hemoglobin berubah menjadi hematin asam seperti karboksihemoglobin,

methemoglobin dan sulfhemoglobin
2. Cara visual mempunyai kesalahan inheren sebesar 15-30%, sehingga tidak dapat
menghitung indeks eritrosit.
3. Sumber kesalahan yang sering terjadi :
a. Tidak tepat mengambil 20 µl darah.
b. Darah dalam pipet tidak sempurna dikeluarkan ke dalam HCl karena tidak bilas.
c. Kehilangan cairan dari tabung karena untuk mencampur isinya, tabung itu
dibolakbalikkan dengan menutupnya memakai ujung jari.
d. Tidak baik mengaduk campuran darah dan asam pada waktu mengencerkan.
e. Tidak memperhatikan waktu yang seharusnya berlalu untuk mengadakan
pembandingan warna
f. Ada gelembung udara di permukaan pada waktu membaca
g. Kemampuan untuk membedakan warna tidak sama
h. Sumber cahaya kurang baik
i. Kelelahan mata
j. Alat-alat kurang bersih
k. Ukuran pipet kurang tepat, perlu kalibrasi.
l. Warna gelas standar pucat/kotor dan lain sebagainya
m. Penyesuaian warna larutan yang diperiksa dalam komparator kurang akurat.
n. Menggunakan tabung pengencer yang tidak diperuntukkan alat yang dipakai

59


PEMERIKSAAN DARAH RUTIN (KAMAR HITUNG)

Hitung Leukosit
A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: tidak memerlukan persipan khusus
2. Persiapan Sampel: darah kapiler, EDTA
3. Prinsip Tes: Darah diencerkan dengan larutan asam lemak, sel-sel eritrosit akan
mengalami hemolisis serta darah menjadi lebih encer sehingga sel-sel leukosit
lebih mudah dihitung.
4. Alat dan Bahan
- Alat:
a. Pipet leukosit atau clinipet 20 µl, pipet volumetrik 0,5 ml
b. Tabung ukuran 75 x 10 mm
c. Kamar hitung improved neubauer dan kaca penutup
d. Pipet Pasteur
e. Mikroskop
- Bahan atau Reagens.
Larutan pengencer dapat menggunakan salah satu dari larutan berikut:
a. Turk: asam asetat glasial 1 ml
gentian violet 1% dalam air 1 ml
akuades 100 ml
Penambahan gentian violet bertujuan memberi warna pada inti dan
granula leukosit. Larutan ini melisiskan eritrosit dan trombosit tetapi
tidak melisiskan leukosit maupun eritrosit berinti.
b. HCl 1%
c. Asam asetat 2%

B. Analitik
1. Membuat pengenceran.

60
 a. Cara pipet leukosit.
Dengan pipet leukosit darah diisap sampai tanda 0.5, bila lebih letakkan
ujung pipet pada bahan yang tidak meresap misal plastik, sampai darah tepat
pada tanda 0,5. Bersihkan bagian luar pipet tersebut dari darah dengan
tissue. Kemudian isaplah larutan pengencer Turk sampai tanda 11.
(pengencer 1: 20). Peganglah pipet leukosit tersebut sedemikian rupa
sehingga kedua ujung pipet terletak diantara ibu jari dan telunjuk tangan
kanan. Homogenkan selama 3 menit agar semua eritrosit hemolisis

b. Cara tabung,
Dengan menggunakan clinipet 20 µl, pipet volumetris 0,5 ml (sistem
tabung)
(1) Larutan pengencer sebanyak 0,38 ml dimasukkan dengan menggunakan
pipet 0,5 ml ke dalam tabung ukuran 75 x 10 mm
(2) Tambahkan 20 µl darah EDTA, darah kapiler ke dalam tabung tersebut
(pengencer 1: 20). Pada waktu mengambil darah EDTA jangan lupa
menghomogenkan darah dengan baik. Sebelum memasukkan 20 µl
darah ke dalam larutan pengencer, hapuslah kelebihan darah yang ada
di dalam pipet. Hati-hati agar darah di dalam pipet tidak ikut terserap.
(3) Darah yang tersisa di dalam pipet dibilas dengan mengisap dan
mengeluarkan larutan pengencer sebanyak 3 kali.
(4) Tabung tersebut ditutup dengan parafilm dan dicampur hingga
homogen. Pencampuran dilakukan selama 1 menit

2. Mengisi Kamar Hitung (KH)
a. Kaca penutup KH diletakkan pada tempatnya. KH harus dalam keadaan
bersih dan kering.
b. Isilah KH dengan darah yang sudah diencerkan tadi dengan menggunakan
pipet Pasteur. Pengisian KH harus diulang bila terjadi hal-hal di bawah ini :
Ø Terlalu banyak cairan yang masuk sehingga mengisi parit KH.
Ø KH tidak sepenuhnya terisi.
Ø Terdapat gelombang udara dalam KH.
c. Bila menggunakan pipet leukosit sebelum pengisian KH buanglah 4 tetes
pertama dan letakkan ujung pipet pada KH tepat batas kaca penutup . Isikan
ke dalam KH tersebut pada tetesan yang ke-lima.
d. Kamar hitung setelah diisi dibiarkan selama 3 menit. Bila penghitungan
jumlah sel di dalam KH ditunda, sebaiknya KH dimasukan ke dalam cairan
putih yang berisi kapas atau kertas saring basah.

3. Menghitung Jumlah Leukosit.
a. Letakkan KH dengan hati-hati di bawah mikroskop dalam keadaan rata air.
Turunkan kondensor atau kecilkan diafragma. Gunakanlah pembesaran kecil

61
 untuk mencari daerah yang akan di hitung. Setelah itu penghitungan sel
dilakukan dengan menggunakan lensa objektif 10x dan lensa okuler 10x.
b. Pada hitung leukosit minimal sel yang dihitung 100 sel dengan menghitung
semua leukosit yang ada pada kempat bidang 1,2,3 dan 4 (gbr.1) diharapkan
syarat minimal sel yang harus dihitung dapat dicapai. Volume yang dihitung
sebesar 4 ( 1 x 1 x 0,1 ) = 0,4 ul (mmk). Bila jumlah leukosit dalam 2 buah
bidang 1 dan 3 telah melebihi jumlah 100 sel dengan catatan bahwa volume
yang dihitung sebesar 2 ( 1 x 1 x 0,1 ) = 0,2 ul (mmk).
c. Cara menghitung leukosit dalam KH dapat dilihat pada gbr. 2. Mulailah
menghitung dari sudut kiri atas, terus kekanan, kemudian turun kebawah
dan dair kanan kekiri ; lalu turun lagi kebawah dan dimulai lagi dari kiri ke
kanan. Cara seperti ini dilakukan pada ke-empat bidang besar.
d. Kadang-kadang ada sel-sel yang letaknya menyinggung garis batas suatu
bidang. Sel-sel yang menyinggung garis batas sebelah kiri atau garis atas
harus dihitung. Sebaliknya sel-sel yang menyinggung garis batas selah kanan
atau bawah tidak turut dihitung.

C. Pasca Analitik
1. Penghitungan.

Jumlah leukosit yang dihitung = jumlah leukosit x faktor pengencer
Volume yang dihitung (ul)

Bila jumlah leukosit dalam ke 4 bidang besar (1,2,3,4) adalah N, maka:

N x 20 µl
Jumlah leukosit = = 50 N / µl darah atau 0,05 N x10 g / l
0,4

Nilai rujukan = 4.000 – 10.000/ µl

2. Koreksi terhadap eritrosit berinti.

Bila di dalam sediaan darah tepi terdapat eritrosit berinti yang melebihi 10
dalam 100 leukosit, maka harus dilakukan koreksi terhadap leukosit. Hal ini
disebabkan eritrosit berinti tidak hancur oleh larutan Turk dan akan ikut
terhitung sebagai leukosit.
Contoh: bila didalam sediaan apus darah tepi terdapat eritrosit sebanyak 25 sel
/100 leukosit dan jumlah leukosit 12.500/ul,
Jumlah leukosit yang sebenarnya adalah =
100 Jumlah leukosit
x
125
= 100 x 12.5000
125
= 10.000 / ml

62


Catatan : Bila jumlah sel sangat banyak, faktor pengencer ditingkatkan.

Sebaliknya bila jumlah sel sedikit, jumlah sel yang dihitung harus ditingkatkan.

63




: tidak terhitung

: dihitung









Gambar 2. Cara menghitung leukosit di dalam kamar hitung

3. Sumber Kesalahan
a. Jumlah darah yang diisap ke dalam pipet tidak lepas jika:
(1) Bekerja terlalu lambat sehingg ada kebekuan darah
(2) Tidak mencapai garis tanda 0,5
(3) Membaca dengan paralaks
(4) Memakai pipet basah
(5) Mengeluarkan lagi sebagian darah yang telah diisap karena melewati garis tanda
0,5.
b. Pengenceran dalam pipet salah jika:
(1) Kehilangan cairan dari pipet, karena mengalir kembali ke dalam botol berisi
larutan Tϋrk
(2) Tidak mengisap cairan Tϋrk tepat sampai garis 11
(3) Terjadi gelembung udara di dalam pipet pada waktu mengisap larutan Tϋrk
(4) Terbuang sedikit cairan pada waktu mengocok pipet atau pada waktu mencabut
karet pengisap dari pipet.
c. Tidak mengocok pipet segera setelah mengambil larutan Tϋrk.
d. Tidak mengocok pipet sebentar sebelum mengisi kamar hitung.
e. Tidak membuang beberapa tetes dari isi pipet sebelum mengisi kamar hitung.
f. Yang bertalian dengan kamar hitung dan teknik menghitung:
(1) Kamar hitung atau kaca penutup kotor.
(2) Ada gelembung udara termasuk bersama dengan cairan.
(3) Letaknya kaca penutup salah.
(4) Meja mikroskop tidak rata air.
(5) Salah menghitung sel yang menyinggung garis-garis batas.
(6) Kaca penutup tergeser karena disentuh dengan lensa mikroskop.

Hitung Eritrosit
A. Pra Analitik

64
 1. Persiapan Pasien: tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: darah kapiler, EDTA
3. Prinsip Tes: Darah diencerkan dengan larutan pengencer isotonis agar
mencegah hemolisis eritrosit dan memudahkan menghitung eritrosit.
4. Alat dan Bahan
- Alat:
a. Pipet eritrosit atau clinipet 20 µl, pipet volumetrik 4 ml
b. Tabung ukuran 75 x 10 mm
c. KH Improved Neubauer dan kaca penutup
d. Pipet Pasteur
e. Mikroskop
- Bahan/ Reagens
Larutan pengencer dapat digunakan salah satu dari larutan berikut :
a. Larutan hayem
Natrium – sulfat ………………….......... 2,50 g
Natrium – chlorida …………………...... 0,50 g
Merkuri – chlorida …………………...... 0,25 g
Akuades ………………………….......... ad 100ml
Pada keadaan hiperglobulinemia, larutan ini tak dapat dipergunakan karena
akan mengakibatkan presipitasi protein, rouleoux, aglutinasi.

b. Larutan Gower

Natrium – sulfat ………………….......... 12,5 g

Asam asetat glasial ………………. ........ 33,3 ml
Akuades ………………………….......... ad 200 ml
Larutan ini mencegah aglutinasi dan rouleoux sel-sel erirosit

c. Larutan Formal Sitrat.

Formalin 40 % ……………………........... 10 ml
Larutan sodium sitrat 0,109 M …..... 1000 ml
Larutan ini mudah dibuat dan tidak berubah dalam jangka lama. Bentuk
diskoid eritrosit tetap dipertahankan dan tidak menyebabkan terjadinya
aglutinasi

B. Analitik
B.

1. Membuat Pengenceran
a. Cara pipet
Dengan pipet eritrosit, pipetlah darah sampai tanda 0,5 serta encerkan dengan
larutan pengencer sampai tanda 101 ( pengencer 1 : 200 ). Homogenkan selama 3
menit.


b. Cara tabung
(1) Larutan pengencer sebanyak 4 ml dimasukkan ke dalam tabung ukuran 75 x 10
mm.
(2) Dibuat pengencer darah 1 : 200 dengan menambahkan 20 µl darah EDTA /
darah kapiler ke dalam tabung yang telah berisi larutan pengencer.

65
 Tindakan selanjutnya sama seperti seperti yang telah diterangkan pada hitung
leukosit

2. Mengisi Kamar Hitung ( KH )
Prosedur sama dengan leukosit, tetapi untuk eritrosit KH dibiarkan selama 2 menit agar
eritrosit mengendap, tetapi tidak lebih lama dari 2 menit sebab mengeringnya larutan
pada tepi kamar hitung akan menimbulkan arus yang dapat menyebabkan pergerakan
eritrosit yang telah mengendap. Bila penghitungan jumlah sel di dalam kamar hitung
ditunda, sebaiknya kamar hitung dimasukkan ke dalam cawan petri yang berisi kapas
atau kertas saring basah.

3. Menghitung Jumlah Eritrosit
Sebaiknya jumlah sel yang dihitung minimal 200 eritrosit. Untuk hitung eritrosit,
dihitung semua eritrosit yang ada pada kelima bidang sedang yaitu A, B, C, D, dan E pada
gambar 1, luas masing-masing bidang adalah 1/5 x 1/5 mm2 atau 0,2 x 0,2 mm2.
Volumenya (0,2 x 0,2 x 0,1) x 5 = 0,02 mmk atau 0,02 µl.

C. Pasca Analitik
1. Perhitungan

Jumlah eritrosit yang dihutung
Jumlah eritrosit = x faktor pengenceran
Volume yang dihitung (ml)

Bila jumlah eritrosit yang dihitung dalam bidang sebesar A, B, C, D, E adalah N, maka :

N x 200
Jumlah eritrosit = =10.000 N/μ/
5 (0,2 x 0,2 x 0,1)

Nilai rujukan :
• Laki-laki : 4.5 – 6.0 juta / µl
• Perempuan : 4.0 – 5.5 juta / µl

2. Kesalahan dalam Penghitungan Eritrosit

Pada umumnya sama seperti pada tindakan menghitung leukosit. Suatu kesalahan
khusus yang sering dibuat ialah menghitung jumlah eritrosit dengan menggunakan
lensa objektif kecil, yaitu objektif 10x, sehingga sangat tidak teliti hasilnya.

66


Hitung Trombosit
A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Darah kapiler atau EDTA
3. Prinsip Tes
Darah diencerkan dengan larutan pengencer (ammonium oksalat 1 %) sehingga semua
eritrosit dihemolisis.
Jika menggunakan Rees ecker trombosit akan tercat biru muda, karena larutan pengencer
mengandung brilliart cresyl blue. Trombosit dihitung dengan KH dibawah mikroskop.
Hasilnya diperiksa ulang dengan sediaan apus yang diwarnai dengan MGG.
4. Alat dan Bahan
- Alat:
a. Pipet eritrosit atau clinipet 20 ml dengan pipet volumetrik 2 ml
b. Tabung ukuran 75 x 10 m
c. Kamar hitung improved Neubauer dan kaca penutup
d. Pipet pasteur
e. Cawan petri + kertas saring (kapas) basah
f. Mikroskop
- Reagen:
Larutan pengencer dapat menggunakan salah satu dari larutan berikut
a. Rees ecker

67
 Natrium – sitrat …………………..…........ 3,8 g atau ( 3,8 g)
Brilliant cresyl blue ………………......... 0,1 g ( 30 mg )
Farmaldehid 40 % …………………........ 0,2 ml ( 2 ml )
Akuades ………………………….................. 100 ml (ad 100 ml )
Saringlah sebelum digunakan.
b. Ammonium Oksalat 1 % ( 40C )
Simpan dalam lemari es dan saringlah sebelum digunakan.

B. Analitik.
1. Cara Langsung
a. Membuat Pengenceran
(1) Cara pipet
Dengan pipet eritrosit darah diisap sampai tanda 1 dan encerkan dengan larutan
pengencer sampai tanda 101 ( pengenceran 1 : 100 ). Mulai saat ini trombosit
harus dihitung dalam waktu 30 menit agar tidak terjadi disintegrasi sel-sel
trombosit. Homogenkan selama 3-5 menit jika menggunakan Rees Ecker dan
selama 10-15 menit jika menggunakan ammonium oksalat 1% (dapat digunakan
rotator)
(2) Cara Tabung
Dibuat pengenceran 1 : 100 dengan memasukkan darah 20 µl ke dalam larutan
pengencer sebanyak 1.98 ml dalam tabung suspensi di campur selama 10-15
menit, dapat menggunakan rotator dengan menutup tabung memakai parafilm
terlebih dahulu.

b. Mengisi Kamar Hitung (KH)
Perlakuan sama seperti pada leukosit ( B 1, 2, 3 ). Untuk hitung trombosit, KH yang
telah diisi dimasukkan ke dalam cawan petri tertutup yang telah terisi kapas atau
kertas saring basah dan dibiarkan selama 15-20 menit agar trombosit dalam KH
mengendap dan tidak terjadi penguapan.

c. Menghitung Jumlah Trombosit
Untuk hitung trombosit, dihitung semua trombosit yang ada pada bidang besar di
tengah kamar hitung. Luas bidang yang dihitung adalah 1 x 1 mm2, sehingga
volumenya 1 x 1 x 0,1 = 0,1 mmk atau µl. Dengan perbesaran objektif 10 kali dan
okuler 40 kali.
Trombosit tampak refraktil dan mengkilat berwarna biru muda / bila lebih kecil dari
eritrosit serta berbentuk bulat, lonjong atau koma, tersebar atau bergerombol bila
menggunakan larutan Rees Ecker. Bila menggunakan larutan ammonium oksalat,
trombosit tampak bulat, bulat telur dan berwarna lila terang. Bila fokus dinaikkan –
diturunkan tampak perubahan yang bagus, mudah dibedakan dengan kotoran karena
sifat refraktilnya.

d. Perhitungan

jumlah trombosit yang dihitung
Jumlah trombosit = x faktor pengenceran
volume yang dihitung

68

Bila jumlah trombosit dalam bidang besar di tengah adalah N maka :
N
Jumlah trombosit = x 100
0,1 µl
= 1000 N / µl atau N x 109 / L

2. Cara Tak Langsung
Yaitu jumlah trombosit pada sediaan apus dibandingkan dengan 1000 eritrosit
kemudian jumlah mutlaknya dapat diperhitungkan dari jumlah mutlak eritrosit. Cara ini
lebih mudah dari cara lain.

a. Penghitungan jumlah trombosit berdasar pada perhitungan :

jumlah eritrosit
Jumlah trombosit = x N ..........( /µ l)
1000

Ø Dilakukan hitung eritrosit
Ø Dibuat sediaan darah apus, diwarnai MGG, wright Giemsa, dihitung jumlah
trombosit dalam 1.000 eritrosit.

b. Jumlah trombosit = jumlah trombosit pada 40 LPB x 1.000 (… / µl)
c. Jumlah trombosit = jumlah trombosit pada 10 LPB x 2.000 ( … / µl )

C. Pasca Analitik
Nilai rujukan :
Laki-laki = Perempuan = 150.000 – 400.000 / ul

69

Sumber Kesalahan
1. Pra Analitik.
a. Persiapan sampel :
(1) Perbandingan antara darah dengan antikoagulan tidak sesuai
(2) Tidak menghomogenkan dengan benar antara darah dengan antikoagulan
(3) Pembendungan yang terlalu lama
(4) Untuk darah kapiler tidak boleh menekan-nekan jari
(5) Sampel tertukar karena identitas sampel tidak jelas

b. Persiapan alat :
1. Volume yang tidak tepat karena pipet tidak dikalibrasi
2. Penggunaan KH yang kotor, basah dan tidak menggunakan kaca penutup khusus

2. Analitik.
a. Kesalahan Teknik :
(1) Volume darah, volume reagensia tidak tepat
(2) Tidak terjadi percampuran yang homogen waktu darah diencerkan dengan larutan
pengencer.
(3) Mengisi KH secara tidak benar.

b. Kesalahan Iheren :

70
 Kesalahan ini disebabkan jumlah sel yang dihitung dari KH terlalu sedikit. Sebaiknya
jumlah sel yang dihitung minimal 100 untuk hitung leukosit dan 200 untuk hitung
eritrosit.
Kesalahan cara manual eritrosit 20% (11-30%), leukosit 15%, trombosit 15-25%.

3. Pasca Analitik
Kesalahan pada tahap ini sifatnya kesalahan administrasi.

Hitung Jenis Leukosit

Menghitung jenis leukosit sebenarnya menghitung jumlah relatif masing –masing jenis leukosit
; dalam hal ini jumlah suatu jenis leukosit dinyatakan dalam (%) dari 100 buah leukosit (semua
jenis)
Hitung jenis leukosit pada garis besarnya ada 2 macam yaitu :
1. Cara otomatis
2. Cara visual

A. Cara Otomatis
1. Berdasarkan ukuran sel
Dibedakan menurut ukuran sel limfosit dan mielosit setelah dilisiskan dengan saponin.
Leukosit dikelompokkan dengan 3 kelompok menjadi:
Sel kecil : 30 – 60 fl (limfosit)
Sel sedang : 61 – 150 fl (monosit, eosinofil, basofil)
Sel besar : > 150 fl (netrofil, mielosit, metamielosit, limfosit
besar)
Di BLK Makassar dengan alat sel Dyn 1600, leukosit dikelompokkan menjadi 2, yaitu
PMN dan Limfosit.

2. Flow Cytometri
Sel leukosit diwarnai dan dikelompokkan menjadi netrofil, eosinofil, basofil,
monosit, limfosit. Jika ada sel-sel muda, alat akan memberikan tanda yang harus
dikonfirmasikan dengan sediaan apus darah (Technicon). Alat yang menggunakan
prinsip flow-cytometri dalam waktu 1 menit dapat menghitung 10.000 sel dengan
presisi yang tinggi dan dalam waktu yang singkat.

3. Pattern Recognation
Adaptasi dari hitungan jenis visual dengan menggunakan mikroskop yang dilengkapi
dengan photosensor dan komputer. Gambaran sel yang ditemukan: ukuran, bentuk,
granula, rasio inti dengan sitoplasma dll dibandingkan dengan gambaran sel yang
tersimpan di memori komputer. Alat dengan prinsip ini (Heitz Hematrat, Hitachi 8200 )
dalam waktu 2 – 6 menit mampu menghitung 500 sel.

B. Cara Visual

71
 Hitung jenis leukosit biasanya dilakukan pada sediaan apus yang dibuat pada kaca objek
dengan pewarnaan tertentu. Sediaan apus yang dibuat dan dipulas dengan baik merupakan
mutlak untuk mendapatkan hasil pemeriksaan yang baik

Cara Pemeriksaan:
1. Sediaan apus diletakkan di mikroskop
2. Diperiksa dengan pembesaran lemah (lensa obyektif 10x dan lensa okuler 10x) untuk
mendapatkan gambaran menyeluruh.
3. Pada daerah yang eritrositnya saling berdekatan adalah daerah yang paling baik untuk
melakukan hitungan jenis leukosit. Dengan pembesaran sedang (lensa obyektif 40x dan
lensa okuler 10x) dilakukan hitung jenis leukosit. Bila diperlukan dapat dilakukan
penilaian lebih lanjut dari sediaan apus menggunakan lensa objektif 100 x
menggunakan minyak imersi.

Gambar 1 . Lokasi dan arah pergerakan lapang pandang pada pemeriksaan sediaan apus
darah tepi

Dalam keadaan normal leukosit yang dapat dijumpai menurut ukuran yang telah
dibakukan adalah Basofil, Eosinofil, Netrofil batang, dan Netrofil segmen, Limfosit, Monosit.
Keenam jenis sel tersebut berbeda dalam ukuran, bentuk, inti, warna sitoplasma serta granula
di dalamnya. Proporsi jumlah masing-masing jenis leukosit tersebut dapat mempunyai arti
klinik yang penting.


1. Basofil
Sel ini tidak selalu dapat dijumpai, bentuk dan ukurannya menyerupai neutrofil,
sitoplasmanya mengandung granula bulat besar tidak sama besar, berwarna biru tua,
granula dapat menutupi inti. Kadang-kadang dapat dijumpai adanya vakuol kecil di
sitoplasma.

2. Eosinofil
Bentuk dan ukurannya sama dengan netrofil, akan tetapi sitoplasmanya dipenuhi oleh
granula yang besar, bulat, ukurannya sama besar dan berwarna kemerahan

3. Neutrofil
Berukuran lebih besar dari limfosit kecil, berbentuk bulat dengan sitoplasma yang banyak
agak kemerahan. Inti berwarna ungu, berbentuk batang atau segmen. Dikatakan berbentuk
batang apabila lekukan inti melebihi setengah diameter inti; berbentuk segmen bila inti

72
 terbagi menjadi beberapa bagian yang saling dihubungkan dengan benang kromatin.
Sitoplasma bergranula warna keunguan.

4. Limfosit
Dikenal beberapa macam limfosit yang antara lain limfosit kecil dan limfosit besar.
a. Limfosit kecil berukuran 8-10 um , berbentuk bulat, berinti kira-kira sebesar ukuran
eritrosit normal, inti limfosit mengisi sebagian besar dari ukuran sel dengan kromatin
yang padat bergumpal berwarna biru ungu tua, dan sitoplasmanya tidak mengandung
granula.
b. Limfosit besar berukuran 12 – 16 um, berbentuk bulat atau agak tak beraturan; berinti
oval atau bulat, terletak di tepi sel. Sitoplasmasnya relatif lebih banyak dibandingkan
limfosit kecil, biru muda atau dapat mengandung granula azurofil yang berwarna
merah.

5. Monosit
Merupakan sel yang paling besar dibandingkan yang lain, berukuran 14 – 20 um, berbentuk
tak beraturan, mempunyai inti yang bentuknya macam-macam, umumnya berbentuk
seperti ginjal berwarna biru ungu dengan kromatin seperti girus otak. Sitoplasma
berwarna keabu-abuan, mengandung granula halus kemerahan dan kadang – kadang
bervakuol. Dibawah ini adalah morfologi leukosit normal yang dapat dijumpai pada sediaan
apus darah

a



b
N. Segmen N. Batang Eosinofil


a. Eritrosit b. Trombosit
Limfosit Monosit Basofil

Selain sel-sel di atas, pada keadaan abnormal mungkin pula dijumpai sel muda. Pada
keadaan demikian, urutan hitung jenis leukosit harus disusun menurut urutan maturasi seri
granulosit, yaitu mieloblast, promielosit, mielosit, metamielosit, batang, segmen, basofil,
eosinofil, limfosit, dan monosit. Perlu diingat bahwa kebenaran perhitungan jenis sel
dipengaruhi oleh jumlah sel yang dihitung, yang mengikuti hukum distribusi Poisson.
Makin banyak leukosit yang dihitung, makin kecil kesalahan yang terjadi. Hasil hitung
jenis berdasarkan 100 sel sebenarnya hanya bermakna jika dalam keadaan normal, yaiitu
normal jumlah leukosit dan normal morfologinya. Pada keadaan leukositosis jumlah leukosit
yang dihitung harus lebih banyak; pada leukositosis antara 10.000 – 20.000 hitung jenis
berdasarkan 200 sel, leukositosis antara 20.000 – 50.000 hitung jenis berdasarkan pada 300 sel
dan leukositosis lebih dari 50.000 hitung jenis didasarkan pada 400 sel.
Untuk melakukan hitung jenis, sediaan digerakkan sedemikian rupa satu lapangan
pandangan tidak dinilai lebih satu kali. Catatlah semua jenis leukosit yang dijumpai, seperti

73
terlihat pada gambar 1, gunakan alat differential cell counter, apabila tidak tersedia buatlah
kolom-kolom seperti gambar .

Differential Cell Counter
Bila alat differential cell counter tidak tersedia buatlah kolom-kolom berikut:

Macam sel jumlah
Basofil -
Eosinofil 4
Batang 4
Segmen 65
Limfosit 34
Monosit 3
Jumlah 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 100
Gambar 3. Kolom – kolom pada perhitungan hitung jenis leukosit

Interpretasi
Pada berbagai keadaan klinik dapat terjadi kelainan jumlah pada masing-masing jenis
leukosit, baik berupa peninggian jumlah atau penurunan jumlah nilai dari normalnya.
Peninggian jumlah jenis leukosit dapat disertai atau tanpa disertai peninggian jumlah leukosit
secara keseluruhan. Peninggian yang relatif adalah peninggian jumlah suatu jenis leukosit tanpa
disertai kenaikan jumlah leukosit secara keseluruhan .

Nilai rujukan hasil hitung jenis leukosit
Eosinofil : 1 – 3 %
Basofil : 0 – 1 %
Netrofil Batang : 2 – 6 %
Segmen : 50 - 70 %
Limfosit : 20 – 40 %
Monosit : 2 – 8 %

Untuk mendapatkan informasi yang akurat mengenai komposisi sel darah putih per
mm darah harus diperhitungkan dengan jumlah absolut.
3

Kondisi Patologis
Neutrofilia Relatif
Hitung jenis neutrofil = 80%
Total leukosit = 4000 / ul
Limfositosis Absolut
Hitung jenis neutrofil = 80%
Total leukosit = 13.000 / ul
Neutrofilia Relatif
Hitung jenis neutrofil = 80%
Total leukosit = 2000 / ul
Neutrofilia relatif menjadi neutropenia jika diperhitungkan dengan jumlah absolut

80 x 2000 /ul = 1600/ ul
100

74

Tabel 1. Nilai rujukan hitung jenis leukosit relatif dan absolut pada orang dewasa per ul
darah

Absolute number
Type of cell Per cent Average Minimum Maximum
Total Leukocytes 7,000 5,000 10,000
Myelocytes 0 0 0 0
Juvenile neutrophils 3-5 300 150 400
Segmented neutrophils 54-62 4,000 3,000 5,800
Eosinophils 1-3 200 50 250
Basophils 0-0,75 25 15 50
Lymphocytes 25-33 2,100 1,500 3,000
Monocytes 3-7 375 285 500

Sebab-sebab leukositosis neutrofil
1. Infeksi bakteri (terutama bakteri piogenik, setempat atau generalisata)
2. Peradangan dan nekrosis jaringan (misalnya miositis, vaskulitis, infark miokard,
trauma)
3. Penyakit metabolik (misalnya uraemia, eklampsia, asidosis, gout )
4. Neoplasma semua jenis (misalnya karsinoma, limfoma, melanoma)
5. Perdarahan atau hemolisis akut
6. Terapi kortikosteroid
7. Penyakit mieloproliferatif (misalnya leukemia granulositik kronis, polisitemia vera,
mielosklerosis)

Sebab-sebab neutropenia
NEUTROPENIA SELEKTIF
1. Karena obat drug-incuded)
- Obat anti-radang (aminopirin, fenilbutazon)
- Obat anti bakteri ( khloramfenikol, ko-trimoksazol)
- Antikonvulsi (fenitoin)
- Obat hipoglikemik ( tolbutamid)
- Fenotiazin (khlorpromazin, prometazin)
- Macam-macam (mepakrin, fenindion dan banyak lainnya)
- Anti tiroid (karbimazol)
2. Benigna (ras atau familia)
3. Siklikal
4. Macam-macam
- Infeksi virus, misalnya hepatitis, influenza
- Infeksi bakteri ganas (fulminant), misalnya tifus abdominalis, tuberkulosis milier
- Hipersensitivitas dan anafilaksis
- Neutropenia otoimun
- Sindroma Felty
- Systemic lupus erythematosis

75
BAGIAN DARI PANSITOPENIA UMUM
1. Kegagalan sumsum tulang
2. Splenomegali
3. Gambar dibawah ini adalah makna deferensial diagnosis dari pergeseran neutrofil di
dalam daerah darah perifer :

Pada keadaan normal tidak ditemukan sel-sel muda dari mieloblas, promielosit, metamielosit,
metamielosit. Ditemukan neutrofil batang 3-5%, neutrofil segmen 60% dan neutrofil
hipersegmentasi sampai 3%
Pada keadaan pergeseran kiri fisiologis ditandai dengan peningkatan neutrofil batang,
metamielosit dan mungkin sedikit mielosit. Gambaran yang ditemukan mielosit 3%,
metamielosit 6%, neutrofil batang 25% dan neutrofil segmen 40%. Keadaan ini didapatkan
pada infeksi akut dan penyakit menular, status asidosis dan koma, stress fisik.
Pada keadaan pergeseran kiri patologis ditandai dengan ditemukannya semua bentuk
prekursor granulopoetik termasuk mieloblas dan promielosit. Persentasenya kurang lebih

76
sebagai berikut mieloblas 5%, mielosit 25%, metamielosit 30%, batang 20% dan segmen 5%.
Keadaan ini didapatkan pada CML, eritroleukemia kronik, osteo-mielosklerosis, metastase
tulang dari tumor ganas.

Eosinofilia
Peningkatan eosinofilia darah di atas 0,4 x 109/L terjadi pada:
1. Penyakit alergi teristimewa hipersensitivitas jenis atopik, misalnya asma bronchial, “hay
fever”, urtikaria dan alergi terhadap makanan.
2. Penyakit parasit, misalnya, amubiasis, cacing tambang, askariasis, infestasi, cacing pita,
filariasis, skistosomiasis dan trikinosis
3. Pemulihan dari infeksi akut
4. Penyakit kulit tertentu, misalnya psoriasis, pemfigus dan dermatitis herpetiformis
5. Eosinopilia pulmoner dan sindroma hipereosinofilik
6. Sensitivitas terhadap obat
7. Poliarteritisnodosa
8. Penyakit Hodgkin dan beberapa tumor lain
9. Leukemia eosinofilik ( jarang )

Eosinopenia
1. Pemberian hormon / obat (kortikosteroid, adrenalin, efedrin, insulin)
2. Stress: emosi, operasi, trauma, dingin
3. Cushing Syndrom

Basofilia
Peningkatan basofil darah diatas 0,1 x 109/L tidak umum. Penyebab biasa adalah
kelainan mieloproliferatif seperti leukemia granulositik kronis atau polisitemia vera.
Peningkatan basofil reaktif kadang-kadang terlihat pada myxedema, selama infeksi cacar atau
cacar air, dan pada kolitis ulserativa.

Basofilopenia
1. Alergi
2. Hipertiroidisme
3. Infark miokard
4. Terapi kortikosteroid
5. Jangka panjang
6. Cushing’s Syndrom

Limfositosis
• Infeksi akut :
1. Mononukleosis infeksiosa
2. Rubella
3. Pertusis
4. Limfositosis infeksiosa akut
5. Hepatitis (infeksiosa, virus sitomegalik)
• Infeksi kronik :
1. Tuberkulosis

77
 2. Toksoplasmosis
3. Bruselosis
• Tirotoksikosis
• Leukemia limfositik kronis (dan beberapa limfoma)

Limfopenia
Limfopenia tidak umum, dapat tidak terjadi pada kegagalan sumsum tulang berat,
dengan terapi kortikosteroid dan imunosupresif lain, pada penyakit Hodgkin dan dengan
penyinaran luas.

Monositosis
1. Infeksi bakteri kronis: tuberkulosis, bruselosis, endokarditis bakterialis, tifus
abdominalis.
2. Penyakit protozoa
3. Neutropenia kronis
4. Penyakit Hodgkin
5. Leukemia mielomonositik dan monositik

Penetapan Nilai Hematokrit

Penetapan nilai hematokrit merupakan salah satu pemeriksaan hematologi untuk
mengetahui volume eritrosit dalam 100 ml darah, yang dinyatakan dalam %.
Nilai hematokrit digunakan untuk mengetahui ada tidaknya anemia dan digunakan juga
untuk menghitung nilai eritrosit rata-rata. Penetapan nilai hematokrit dapat dilakukan dengan
cara makro atau cara mikro. Pada cara makro digunakan tabung Wintrobe yang mempunyai
diameter dalam 2,5 – 3 mm, panjang 110 mm dengan skala interval 1 mm sepanjang 100 mm.
Volume tabung ini adalah 1 ml. Pada cara mikro digunakan pipet kapiler yang panjangnya 75
mm dan diameter dalam 1 mm. Pipet ini ada 2 jenis, ada yang dilapisi antikoagulan Na2EDTA
atau heparin di bagian dalamnya dan ada yang tanpa antikoagulan seperti darah kapiler. Pipet
kapiler tanpa antikoagulan dipakai bila menggunakan darah dengan antikoagulan seperti darah
vena.

CARA MIKRO
A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel:
Darah EDTA dengan kadar 1 mg Na2EDTA / K2EDTA untuk 1 ml darah atau darah
heparin dengan kadar heparin 15-20 IU /ml. Pemeriksaan tidak boleh ditunda lebih
dari 6 jam, bila disimpan pada suhu 40C.
3. Prinsip Tes:
Darah yang disentrifuse sel-sel eritrositnya akan dimampatkan. Tingginya kolom
eritrosit diukur dinyatakan dalam % dari darah tersebut
4. Alat dan Bahan
a. Tabung kapiler hematokrit ukuran 75 mm. Diameter 1 mm. Ada yang berisi heparin
(khusus untuk darh kapiler). Dan ada yang tidak berisi antikoagulan (untuk darah
antikoagulan mis. Darah EDTA)
b. Dempul untuk menutup salah satu ujung tabung hematokrit

78
 c. Alat sentrifus khusus untuk mikrohematokrit yang berkapasitas putar 11.500-
15.000 ppm
d. Reader/Alat baca mikro-hematokrit

B. Analitik
a. Isilah pipet kapiler dengan darah yang langsung mengalir (darah kapiler) atau darah
dengan antikoagulan
b. Salah satu dari ujung pipet disumbat dengan dempul.
c. Tabung kapiler dimasukkan kedalam alat mikro sentrifuge dengan bagian yang
disumbat mengarah keluar.
d. Tabung kapiler dipusingkan selama 5 menit dengan kecepatan 16.000 rpm
e. Hematokrit dibaca dengan memakai alat baca yang telah tersedia
f. Bila nilai hematokrit melebihi 50%, pemusingan ditambah 5 menit lagi.

C. Pasca Analitik
Nilai rujukan
Laki-laki : 42% – 52%
Perempuan : 36% – 46%

Kesalahan yang mungkin terjadi:
1. Bila memakai darah kapiler, tetes pertama harus dibuang karena mengandung cairan
interstisial
2. Penggunaan antikoagulan Na2EDTA/K2EDTA lebih dari kadar 1,5 mg/ml darah
mengakibatkan eritrosit mengerut sehingga nilai hematokrit akan rendah.
3. Bahan pemeriksaan yang ditunda lebih dari 6 jam akan meningkatkan nilai hemaktokrit.
4. Bahan pemeriksaan tidak dicampur hingga homogen sebelum pemeriksaan dilakukan.
5. Darah yang digunakan untuk pemeriksaan tidak boleh mengandung bekuan.
6. Di daerah dengan iklim tropis, pipet kapiler yang mengandung heparin cepat rusak karena
itu harus disimpan dalam lemari es.
7. Kecepatan dan lama pemusingan harus sesuai.
8. Pemakaian mikro sentrifuge dalam waktu yang lama mengakibatkan alat menjadi panas
sehingga dapat megakibatkan hemolisis.
9. Lapisan Buffy coat tidak turut dibaca tetapi hal ini sulit diawasi. Selain ini pembacaan juga
harus menghindari paralaks.
10. Endapan atau lisis dari eritrosit dapat terjadi bila salah satu ujung pipet kapiler disumbat
dengan cara dibakar.
11. Penguapan plasma dapat terjadi selama pemusingan atau bila pipet kapiler yang akan
dibaca dibiarkan terlalu lama.
12. Pembacaan yang salah.

CARA MAKRO
A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Darah EDTA, darah heparin
3. Prinsip Tes:
Darah antikoagulansia disentrifus, perbandingan volume sel-sel eritrosit terhadap
volume spesimen darah dinyatakan dalam %

79
 4. Alat dan Bahan:
a. Tabung Wintrobe dengan diameter 2.5 – 3.0 mm panjang 110 mm dan berskala 0-
100 mm dengan skala terkecil 1 mm. Volumenya 1 ml darah
b. Alat sentrifus

B. Analitik
1. Darah dicampur dengan seksama sehingga homogen.
2. Dengan menggunakan pipet Pasteur atau pipet Wintrobe darah dimasukkan ke dalam
tabung Wintrobe hingga mencapai garis tanda 100, mulai dari dasar tabung dan hindari
terjadinya gelembung udara di dalam tabung.
3. Tabung yang telah berisi darah dipusing selama 30 menit pada kecepatan 2.000-2.300 g.
Untuk mengkonversikan kecepatan pemusingan dari satuan g ke satuan RPM.
4. Hasil penetapan hematokrit dibaca dengan memperhatikan:
a. Tinggi kolom eritrosit yang dibaca sebagai nilai hematokrit yang dinyatakan dalam
%.
b. Tebalnya lapisan putih di atas eritrosit yang tersusun dari leukosit dan trombosit.
Lapisan ini disebut sebagai buffy coat dan dinyatakan dalam mm.
c. Warna kuning dari lapisan plasma yang disebut indeks ikterus. Warna kuning
tersebut dibandingkan dengan warna larutan kalium bikromat yang intensitas
warnanya dinyatakan dalam satuan (S). Satu satuan dengan warna larutan 1 g
kalium bikromat dalam 10.000 ml air.
5. Bila nilai hematokrit melebihi 50%, pusinglah tabung tersebut 30 menit lagi.

C. Pasca Analitik
Nilai rujukan
Laki-laki : 42% – 52 %
Perempuan : 36% – 46%

Kesalahan yang mungkin terjadi
1. Konsentrasi antikoagulan yang digunakan tidak sesuai
2. Bahan pemeriksaan tidak dikocok hingga homogen
3. Bahan pemeriksaan tidak mengandung bekuan
4. Pemeriksaan ditunda lebih dari 6 jam
5. Pada waktu pengisian tabung Wintrobe terjadi gelembung udara di dalam tabung
6. Pengisian tabung Wintrobe tidak mencapai tanda 100
7. Kecepatan dan lama pemusingan tidak sesuai
8. Terjadi hemolisis waktu pemusingan
9. Pembacaan yang salah.

Indeks Eritrosit
Indeks eritrosit adalah batasan untuk ukuran dan isi hemoglobin eritriosit. Indeks
eritrosit terdiri atas Mean Corpuscular Volume (MCV), Mean Corpuscular Hemoglobin (MCH),
dan Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC).
Indeks tersebut dihitung dari hasil pemeriksaan hitung eritrosit, kadar hemoglobin dan
nilai hemaktorit.

80
 Indeks eritrosit digunakan secara luas dalam mengklasifikasikan anemia atau sebagai
penunjang dalam membedakan berbagai macam anemia. Bila dipergunakan bersama dengan
pemeriksaan eritrosit dalam sediaan apus maka gambaran morfologi eritrosit menjadi lebih
jelas.

1. Perhitungan Mean Corpuscular Volume (MCV)
= Volume Eritrosit Rata-rata (VER)
= Isi Eritrosit Rata-rata (IER)


Hematokrit
MCV = VER = IER = x 10 ……. femtoliter (fl)
Jumlah eritrosit dalam juta

2. Perhitungan Mean Corpuscular Hemoglobin (MCH)
= Hemoglobin Eritrosit Rata-rata (HER)


Hemaglobin
MCH = HER = x 10 …… (uug) /pikogram/pg
Jumlah eritrosit dalam juta

3. Perhitungan Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC)

= Konsentrasi Hemoglobin Rata-rata (KHER)

MCHC = KHER =
Hemaglobin x 100 … (%)
Hematokrit


Nilai Rujukan :
MCV = 82 – 92 fl
MCH = 27 – 32 pg
MCHC = 32 – 37 %
MCV 82 – 92 = normositik
<82 = mikrositik
>92 = makrositik

MCH 27 – 32 = normokromik
<27 = hipokromik

MCHC <32 = hipokromik

>32 = normokromik

Berikut adalah tabel yang menunjukkan manfaat indeks eritrosit yang digunakan untuk
klasifikasi anemia.

Tabel 1. Klasifikasi anemia menurut morfologi
Anemia MCV (fl) MCH (pg) MCHC

81
 NR : 82 – 92 NR : 27 - 32 NR : 32 – 37
Anemia Mikrositik Rendah Rendah Rendah / Normal
Anemia Normositik Normal Normal Normal
Anemia Makrositik Meningkat Normal Normal

Pada kasus patologis

Anemia Makrositik: MCV = 150 fl

MCH = 50 pg
MCHC = normal atau menurun

Anemia Mikrositik hipokromik: MCV = 50 fl
MCH = 15 pg
MCHC = 22 %

Hitung Retikulosit
Retikulosit adalah eritrosit muda yang sitoplasmanya mengandung sisa-sisa ribosom
dan RNA yang berasal dari sisa inti. Ribosom mempunyai kemampuan untuk bereaksi dengan
cat tertentu seperti Brilliant Cresyl Blue atau New Methylene Blue untuk membentuk endapan
granula atau filamen yang berwarna biru. Reaksi ini hanya terjadi pada pewarnaan terhadap sel
yang masih hidup dan tidak difiksasi, oleh karena itu disebut pewarnaan Supravital. Retikulosit
paling muda (imature) mengandung ribosome terbanyak, sebaliknya retikulosit tua hanya
mempunyai beberapa titik ribosom.
Banyaknya retikulosit dalam darah tepi menggambarkan aktivitas eritropoesis yang hampir
akurat. Hitung retikulosit dinyatakan sebagai persentasi jumlah retikulosit per 100 eritrosit.

A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Tidak memerlukan persiapan khusus
3. Prinsip Tes:
Darah dicampur dengan larutan, Brilliant Crecyl Blue atau larutan New Methylene Blue,
lalu dibuat sediaan. Dan jumlah retikulositnya dihitung dibawah mikroskop. Jumlah
retikulosit dihitung per 1000 eritrosit dan dinyatakan dalam %
4. Alat dan Bahan
a. ALAT
- Tabung reaksi kecil
- Kaca obyek dan kaca penggeser
- Pipet Pasteur
- Penangas air
- Mikroskop.
b. REAGENS
(1) Brilliant Cresyl Blue (BCB)
Larutan ini dalam bentuk larutan 1% dalam metilakohol atau sebagai larutan
1% dalam NaCl 0.9%. Untuk membuat larutan dalam NaCl ini diperlukan
pemanasan sendikit.
(2) New Methylene Blue (Colour Index 52030)

82
 New Methylenenblue ........ 0.5gr
NaCl .......................................... 0.8gr
K-Oksalat ............................... 1.4gr
Aquades .................................. 100ml
Larutan ini digunakan seperti larutan BCB dalam air garam.
Saringlah larutan-larutan tersebut di atas sebelum memakainya



B. Analitik
1. SEDIAAN KERING

a. Kedalam tabung reaksi kecil teteskan 3 tetes larutan Brilliant Cresyl Blue atau New
Methylene Blue.
b. Tambahkan 3 tetes darah, campurkan baik-baik dan biarkan pada suhu ruangan
selama 15 menit agar pewarnaan sempurna.
Cara yang lain :
(1) Setelah ditambahakan 3 tetes darah, campurkan baik-baik, tabung ditutup
dengan parafilm dan diinkubasi pada 37°c selam 30-60 menit.
(2) Setelah inkubasi, tabung dihomogenkan lagi dan ambil 1 tetes untuk
membuat sediaan apus. Keringkan di udara dan diperiksa di bawah
mikroskop.
c. Periksalah dengan perbesaran obyektif 100 kali.
d. Dicari daerah yang baik yaitu eritrosit tidak tumpang tindih. Retikulosit tampak
sebagai sel yang lebih besar dari eritrosit. Dan mengandung filamen atau granula.
Dengan BCB, eritrosit berwarna biru keunguan dengan filamen atau granula
berwarna ungu.
e. Bila menggunakan NMB, retikulosit berwarna biru dengan filamen atau granula
berwarna biru tua.
f. Hitunglah jumlah retikulosit per 1000 eritrosit dengan lensa emersi
g. Jumlah retikulosit dapat dinyatakan persen / per mil terhadap jumlah eritrosit total
atau dilaporkan dalam jumlah mutlak.
Misal : dalam 10 lapangan pandang dijumpai 2000 eritrosit dan retikulosit 76.

Jumlah retikulosit (%) :

100 x 76 3,8 % atau
=
2000

1000 x 76 = 38 permil
2000

Bila diketahui jumlah eritrosit 3,5 juta/µl maka

Jumlah retikulosit =
38 x 3.500.000 /ul = 133.000 / µl
1000

2. SEDIAAN BASAH
a. Taruh 1 tetes larutan BCB ditengah-tengah kaca obyek.
b. Tambahkan 2 tetes darah dilarutan BCB, homogenkan darah dengan larutan BCB
dengan menggunakan sudut kaca obyek.

83
 c. Tutup dengan kaca penutup
d. Periksa dengan minyak emersi
e. Cara penghitungan sama dengan sediaan kering

Jika didapatkan jumlah retikulosit yang tinggi atau disertai dengan nilai hematokrit
rendah maka dilakukan koreksi terhadap nilai retikulosit.
Nilai koreksi ini disebut indeks retikulosit (Reticulocyte Production Indeks)


RPI = % Retikulosit x Hmt penderita x faktor koreksi
Hmt normal

Tabel . Faktor Koreksi Hemaktokrit

Hematokrit Penderita Faktor Koreksi

40-45 1,0
35-40 1,5
25-34 2,0
15-24 2,5
< 15 3,0


C. Pasca Analitik
Nilai rujukan = 0,5 – 1,5%
Hitung retikulosit meningkat pada : perdarahan akut, hemolisis,
RP I <2% = kegagalan sum-sum tulang membentuk eritrosit.
RP I 2 – 3% = respons baik terhadap anemia hemolitik
RP I >3% = Hiperproliferasi

Sumber Kesalahan
1. Volume darah yang digunakan tidak sesuai dengan volume zat warna
2. Zat warna tidak disaring akan mengendap di eritrosit sehingga tampak seperti retikulosit
3. Waktu inkubasi campuran darah dan zat warna kurang lama
4. Tidak menghomogenkan campuran zat warna dengan darah sebelum membuat sediaan
apus
Retikulosit mempunyai berat jenis yang lebih rendah dari eritrosit sehingga berada
dibagian atas dari campuran.
5. Menghitung di daerah yang terlalu padat
6. Jumlah eritrosit yang dihitung tidak mencapai 1000.

PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH

Laju endap darah adalah mengukur kecepatan sendimentasi sel eritrosit di dalam
plasma. Satuannya mm/jam. Cara pemeriksaan yang mendapat rekomendasi dari International
Commitee for Standardization in Hematology (ICSH) adalah cara Westergren

I. CARA WESTERGREN

84
A. Pra Analitik
1. Persiapan Penderita: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel:
Darah vena dicampur dengan antikoagulan larutan Natrium Sitrat 0,109 M dengan
perbandingan 4 : 1. Dapat juga dipakai darah EDTA yang diencerkan dengan larutan
sodium sitrat 0,109 M atau NaCl 0,9% dengan perbandingan 4:1.
3. Prinsip Tes: Mengukur kecepatan sendimentasi sel eritrosit di dalam plasma.
Satuannya mm/jam
4. Alat dan Bahan:
a. Pipet Westergren
b. Rak untuk pipet Westergren
c. Natrium sitrat 0,109 M

B. Analitik
1. Isi pipet Westergren dengan darah yang telah diencerkan sampai garis tanda 0. Pipet
harus bersih dan kering.
2. Letakkan pipet pada rak dan perhatikan supaya posisinya betul-betul tegak lurus pada
suhu 18-250C. Jauhkan dari cahaya matahari dan getaran.
3. Setelah tepat 1 jam, baca hasilnya dalam mm/jam.

D. Pasca Analitik
Nilai rujukan
Laki-laki : 0 – 20 mm/jam
Perempuan : 0 – 15 mm/jam

Sumber Kesalahan
1. Kesalahan dalam persiapan penderita, pengambilan dan penyiapan bahan pemeriksaan
(lihat bahan pemeriksaan hematologi).
2. Dalam suhu kamar pemeriksaan harus dilakukan dalam 2 jam pertama, apabila darah
EDTA disimpan pada suhu 4 oC pemeriksaan dapat ditunda selama 6 jam.
3. Perhatikan agar pengenceran dan pencampuran darah dengan larutan antikoagulan
dikerjakan dengan baik.
4. Mencuci pipa Westergren yang kotor dapat dilakukan dengan cara membersihkannya
dengan air, kemudian alkohol dan terakhir aseton. Cara lain adalah dengan
membersihkan dengan air dan biarkan kering satu malam dalam posisi vertikal. Tidak
dianjurkan memakai larutan bichromat atau deterjen.
5. Nilai normal pada umumnya berlaku untuk 18-25O C.
6. Pada pemeriksaan pipet harus diletakkan benar-benar posisi vertikal.

II. CARA WINTROBE
B. Pra Analitik
1. Persiapan Penderita: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Darah EDTA
3. Prinsip Tes: Mengukur kecepatan sendimentasi sel eritrosit di dalam plasma.
Satuannya mm/jam
4. Alat dan Bahan:

85
 b. Tabung Wintrobe
c. Pipet Kapiler

C. Analitik
1. Campur isi spesimen baik-baik supaya homogen
2. Isilah tabung Wintrobe dengan pipet kapiler
sampai tanda 0
3. Letakkan tabung pada rak dengan posisi tepat
tegak lurus
4. Biarkan selama 1 jam. Setelah tepat 1 jam, catatlah
penurunan eritrosit dalam mm/jam

D. Pasca Analitik
Nilai rujukan
Laki-laki : 0 – 20 mm/jam
Perempuan : 0 – 15 mm/jam

HEMOSTASIS
Hemostasis adalah istilah umum untuk menyatakan seluruh mekanisme yang
digunakan oleh tubuh untuk melindungi diri terhadap kemungkinan perdarahan atau
kehilangan darah.
Pendarahan ialah keluarnya darah dari salurannya yang normal (arteri, vena atau
kapiler) ke dalam ruangan ekstravaskuler oleh karena hilangnya kontinuitas pembuluh darah.
Perdarahan dapat berhenti melalui 3 mekanisme yaitu kontraksi pembuluh darah,
pembentukan gumpalan trombosit dan pembentukan trombin serta fibrin yang memperkuat
gumpalan trombosit.
Bila terdapat gangguan atau kelainan pada salah satu atau lebih dari ketiganya
mekanisme tersebut terjadilah pendarahan yang abnormal yang seringkali tidak dapat berhenti
sendiri.
Gangguan atau kelainan dapat terjadi pada
- Pembuluh darah (vaskuler)
- Trombosit (jumlah maupun fungsinya)
- Mekanisme pembekuan

86
 Dengan pemeriksaan sederhana yaitu hitung trombosit masa pendarahan, masa
pembekuan, Rumple leede dapat dibedakan secara garis besar penyebab perdarahan.
Tes masa pendarahan dan hitung trombosit juga dapat dilakukan sebagai tes
penyaring pada pasien yang akan dilakukan tindakan bedah, obstetri atau pencabutan gigi
setelah tes masa protrombin dan masa tromboplastin parsial.

Bleeding Time (Waktu Perdarahan)
Terjadinya perdarahan berkepanjangan setelah trauma superfisal yang terkontrol,
merupakan petunjuk bahwa ada defisiensi trombosit. Masa perdarahan memanjang pada
kedaan trombositopenia (<100.000/mm3 ada yang mengatakan < 75.000 mm3), penyakit von
willebrand, sebagian besar kelainan fungsi trombosit dan setelah minum obat aspirin.
Pembuluh kapiler yang tertusuk akan mengeluarkan darah sampai luka itu tersumbat
oleh trombosit yang menggumpal. Bila darah keluar dan menutupi luka, terjadilah pembekuan
dan fibrin yang terbentuk akan mencegah perdarahan yang lebih lanjut . Pada tes ini darah yang
keluar harus dihapus secara perlahan-lahan sedemikian rupa sehingga tidak merusak
trombosit. Setelah trombosit menumpuk pada luka, perdarahan berkurang dan tetesan darah
makin lama makin kecil.
Tes masa perdarahan ada 2 cara yaitu metode Duke dan metode Ivy . Kepekaan metode
Ivy lebih baik, dengan nilai rujukan 1 - 7 menit dan metode Duke dengan nilai rujukan 1 – 3
menit.

METODE DUKE
Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlulakan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: darah kapiler
3. Prinsip Tes:
Dibuat perlukaan standar pada daun telinga, lamanya perdarahan sampai berhenti
dicatat.
4. Alat dan Bahan
- Disposable Lancet steril
- Kertas saring bulat
- Stopwatch
- Alkohol swab 70%
Analitik
1. Bersihkan daun telinga dengan kapas alkohol, biarkan mengering.
2. Buat luka dengan disposable lanset steril panjang 2 mm dalam 3 mm. sebagai pegangan
pakailah kaca objek dibalik daun telinga dan tepat pada saat darah keluar jalankan stop
watch.
3. Setiap 30 detik darah yang keluar diisap dengan kertas saring bulat tetapi jangan sampai
menyentuh luka.
Bila perdarahan berhenti, hentikan stopwatch dan catatlah waktu perdarahan.

Catatan :
Ø Bila perdarahan 10 menit, hentikan perdarahan dengan menekan luka dengan kapas
alkohol . Dianjurkan untuk diulang dengan cara yang sama atau dengan metode Ivy.
Ø Digunakan untuk bayi dan anak – anak
Ø Kepekaannya kurang.

87

C. Pasca Analitik
Nilai rujukan : 1 – 3 menit

METODE IVY
A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel : Darah kapiler
3. Prinsip Tes:
Dibuat perlukaan standar pada permukaan volar lengan bawah, lamanya perdarahan
diukur.
4. Alat dan Bahan:
a. Tensimeter
b. Disposable lanset steril dengan ukuran lebar 2 mm dan 3 mm
c. Stop watch
d. Kertas saring bulat
e. Kapas alcohol

B. Analitik
1. Pasang manset tensimeter pada lengan atas dan pompakan tensimeter sampai 40 mm
Hg selama pemeriksaan. Bersihkan permukaan volar lengan bawah dengan kapas
alkohol 70 %. Pilih daerah kulit yang tidak ada vena superfisial, kira - kira 3 jari dari
lipatan siku.
2. Rentangkan kulit dan lukailah dengan lebar 2 mm dalam 3mm.
3. Tepat pada saat terjadi perdarahan stop watch dijalankan
4. Setiap 30 detik hapuslah bintik darah yang keluar dari luka. Hindari jangan sampai
menutup luka.
5. Bila perdarahan berhenti (diameter <1mm) hentikan stop watch dan lepaskan manset
tensimeter. Catat waktu perdarahan dengan pembulatan 0,5 menit.

Catatan :
Ø Bila perdarahan sampai 15 menit belum berhenti, tekanlah lukanya . Tes diulangi lagi
terhadap lengan lainnya . Bila hasilnya sama, hasil dilaporkan bahwa masa perdarahan > 15
menit
Ø Kesulitan dalam membuat luka yang standar. Jika hasil <2 menit tes diulang.

C. Pasca Analitik
Nilai rujukan :
1 – 7 menit

Berikut adalah gambar tes perdarahan metode Duke, Ivy, dan Template Ivy.

88
CLOTTING TIME (Waktu Pembekuan)
Tes masa masa pembekuan menurut Lee - White merupakan tes yang paling tua yang
paling dan kurang ketelitiannya. Tes ini mengukur waktu yang diperlukan oleh darah lengkap
untuk membeku di dalam tabung..
Metode Lee - White menggunakan 4 tabung masing-masing terisi 1 ml darah lengkap,
diinkubasi dalam suhu 370C. Tabung perlahan-lahan dimiringkan setiap 30 detik supaya darah
bersentuhan dengan dinding tabung sekaligus melihat sudah terjadinya pembekuan. Darah
normal membeku 4 - 10 menit dalam suhu 370C.
Defisiensi faktor pembekuan dari ringan sampai sedang belum dapat dideteksi dengan
metode ini, defisiensi faktor pembekuan yang berat baru dapat.dideteksi. Heparin
memperpanjang masa pembekuan sehingga dapat digunakan untuk memantau terapi dengan
heparin.

A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Darah vena
3. Prinsip Tes:
Diambil darah vena dan dimasukkan kedalam tabung kemudian dibiarkan membeku .
Selang waktu dari saat pengambilan darah sampai saat darah membeku dicatat sebagai
masa pembekuan
4. Alat dan Bahan
a. Tabung reaksi 10 X 100 mm = 4 buah
b. Stopwatch
c. Waterbath

B. Analitik
1. Tempatkan ke 4 tabung reaksi ke dalam water bath (370C)
2. Ambil darah vena 4 ml, segera jalankan stop watch pada saat darah tampak di dalam
jarum . Tuangkan 1 ml kedalam setiap tabung.
3. Setelah 3 menit mulailah mengamati tabung 1 . Angkat tabung keluar dari water bath
dalam posisi tegak lurus, lalu miringkan, perhatikan apakah darah masih bergerak atau
tidak (membeku). Lakukan hal ini pada tabung 1 setiap selang waktu 30 detik sampai
terlihat darah dalam tabung sudah tidak bergerak (darah sudah membeku).
4. Catat selang waktu dari saat pengambilan darah sampai darah membeku sebagai masa
pembekuan.

Rumus : Rata - rata dari tabung 2, 3, dan 4, hasil dibulatkan 0,5 menit.

: waktu
2 + 3 + 4
3
Catatan : Nilai rujukan 4-10 menit (370C). Tes dapat dilakukan tanpa menggunakan
waterbath, masa pembekuan pada suhu kamar lebih panjang. Disarankan tiap laboratorium
untuk membuat nilai rujukan masing - masing.

Pasca Analitik
Nilai rujukan : 4 – 10 menit (37oC)


TES RUMPLE LEEDE

Tes Rumple Leede merupakan tes yang sederhana untuk melihat gangguan pada
vaskuler maupun trombosit. Tes Rumple Leede akan positif bila ada gangguan pada vaskuler
maupun trombosit.

A. Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: -
3. Prinsip Tes:
Terhadap kapiler diciptakan suasana anoksia dengan jalan membendung aliran darah
vena. Terhadap anoksia dan penambahan tekanan internal akan terlihat kemampuan
kapiler bertahan . Jika ketahanan kapiler turun akan timbul "Petechiae” di kulit.
4. Alat dan Bahan:
- Tensimeter dan Stetoskop
- Timer
- Spidol

B. Analitik
2. Pasang manset tensimeter pada lengan atas. Carilah tekanan sistolik (TS) dan tekanan
diastolik (TD).
3. Buat lingkaran pada bagian volar lengan bawah, dengan syarat:
i. Radius 3 cm
ii. Titik pusat terletak 2 cm di bawah garis lipatan siku.
4. Pasang lagi tensimeter dan buatlah tekanan sebesar 1/2 X (TS+TD) pertahankan
tekanan ini selama 5 menit.
5. Longgarkan manset lalu perhatikan ada tidaknya petechieae dalam lingkaran yang telah
dibuat

C. Pasca Analitik
Nilai Rujukan
< 10 : Normal (Negatif)
10 - 20 : Dubia (Ragu–ragu)
> 20 : Abnormal (Positif)

PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH

Sejak penemuan Landsteiner (1901) sampai sekarang, telah ditemukan lebih
dari 100 antigen golongan darah dalam eritrosit. Tapi untuk kegunaan praktek, klinis
yang terpenting hanya sistem golongan darah ABO dan Rh. Pada sistem golongan darah
ABO hanya ada 4 golongan darah yaitu. A, B, AB dan O. Golongan tersebut. berdasarkan
atas ada atau tidak adanya antigen dan antigen B. Disamping itu juga ada 2 sub
golongan dari golongan A1 dan AlB serta - A2 dan A2B. Dalam serum golongan O normal
mengandung anti-A dan anti-B, serta golongan A hanya mengandung anti-B, golongan B
mengandung anti-A dan golongan AB tidak mengandung baik anti-A maupun anti.-B.
Antibodi yang hanya reaktif terhadap Al dan A1B adalah anti-Al kadang
terdapat pada seseorang golongan A2. Antibodi yang paling kuat yang reaktif terhadap
golongan A2. Antibodi yang paling kuat yang reaktif terhadap golongan O dan A2
disebut anti-H, kadang juga terdapat pada seseorang dengan golongan darah Al, atau
AlB atau B. Tetapi untungnya bahwa kedua antibodi ini termasuk cold-agglutinin atau
aglutinin dingin yang jarang sekali reaktif terhadap antigen eritrosit pada suhu >30°C.
Pada sistem Rh untuk kepentingan klinik cukup menentukan apakah seseorang
negatif. Biasanya dengan memeriksa reaksi sel eritrosit seseorang penderita terhadap
antigen Rh yang dikenal dengan nama anti-D. Oleh karena reaksi yang terjadi antara
antigen – antibodi adalah aglutinasi maka antigen (Ag) disebut juga aglutinasi &
antibodi (Ab) disebut agglutinin.

Indikasi
Untuk menentukan golongan darah ABO dan rhesus pasien

Pra Analitik
1. Persiapan Pasien: Tidak ada persiapan khusus
2. Persiapan Sampel: Sampel yang digunakan dapat berupa darah EDTA atau
darah kapiler
3. Alat dan Bahan
a. Suatu panel serum yang terdiri atas:
(1) serum anti-A
(2) serum anti-B
(3) serum inti-AB
b. Slide
c. Batang pengaduk

Analitik
1. Prinsip kerja: Terjadi ikatan antara antigen dan antibodi golongan darah
membentuk aglutinasi.
2. Cara kerja
a. Ambil darah kapiler atau setetes darah EDTA
b. Teteskan pada tiga tempat di atas slide
c. Tambahkan Anti-A pada tetes pertama dan Anti-B pada tetes kedua serta
Anti-D pada tetes ketiga
d. Aduk masing-masing campuran
e. Perhatikan hasilnya apakah ada aglutinasi atau tidak

Pasca Analitik
Interpretasi


PEMERIKSAAN INKOMPATIBILITAS
Transfusi darah adalah tindakan yang dapat menjadi penyelamat jiwa tetapi
dapat juga berbahaya dengan berbagai komplikasi yang dapat terjadi, serta
mengandung risiko. Untuk mendapatkan manfaat yang optimal, komponen darah yang
ditransfusikan harus dipilih secara tepat. Eritrosit yang ditransfusikan tidak boleh
mengandung antigen yang dapat bereaksi dengan antibodi yang terdapat dalam plasma
resipien.
Salah satu langkah yang perlu dilakukan adalah pemeriksaan laboratorium.
Pemeriksaan serologis yang biasa dilakukan secara rutin di Bank Darah berguna untuk
memastikan bahwa penerima transfusi mendapat darah yang sesuai serta untuk
mencegah reaksi transfusi. Pemeriksaan sebelum dilakukan transfusi meliputi
pemeriksaan golongan darah, ABO, Rhesus, dan pemeriksaan silang (crossmatch) antara
resipien dengan darah donor.
Pemeriksaan silang adalah pemeriksaan cocok serasi antara darah dan donor.
pemeriksaan ini dilakukan untuk mengetahui apakah sel darah merah donor bisa hidup
dalam tubuh pasien, dan untuk mengetahui ada tidaknya antibody IgM maupun
antibody IgG dalam serum pasien (mayor) yang melawan sel pasien(minor).
Pemeriksan cocok serasi dapat dilakukan degnan menggunakan metode tabung
dan metode Diemed Gel. Pemeriksan cocok serasi ini dilakukan bila pemeriksaan
golongan darah dan rhesus telah dilakukan. Dalam modul ini akan dibahas tentang
pemeriksaan cocok serasi dengan metode tabung.

Pra Analitik
1. Persiapan pasien: Tidak memerlukan persiapan khusus
2. Persiapaan sampel: Sampel berupa serum penderita.
3. Alat dan Bahan
§ Tabung reaksi
§ PipetPasteur
§ Sentrifuge
§ Inkubator
§ Bahan:
• Serum penderita (resipien)
• Suspensi sel eritrosit donor 5% dalam saline
• Bovine albumin 22%
• Serum Coombs

Analitik
Cara Kerja:
1. Dengan pipet Pasteur masukkan 2 tetes serum penderita dan 1 tetes
suspensi sel eritrosit donor 5% ke dalam tabung.
2. Fase I
a. Sentrifuge dengan kecepatan 3400rpm selama 15 detik.
b. Lihat ada tidaknya reaksi aglutinasi/hemolisis, jika ada darah maka tidak cocok.
c. Jika tidak ada reaksi, tambahkan 2 tetes bovine albumin 22%, kocok.
3. Fase II
a. Inkubasi pada suhu 37oC selama 15 menit
b. Sentrifuge dengan kecepatan 3400rpm selama 15 detik.
c. Lihat ada tidaknya reaksi aglutinasi / hemolisis, jika tidak ada, cuci eritrosit dengan
saline 3 x, buang supernatant.
4. Fase III
a. Tambahkan 2 tetes serum Coombs pada sedimen sel, kocok, sentrifuge dengan
kecepatan 3400 rpm selama 15 detik.
b. Lihat ada tidaknya reaksi aglutinasi / hemolisis dengan mikroskop di atas kaca
objek. Bila ada reaksi berarti darah tidak cocok. Bila tidak ada reaksi, tambahkan 1
tetes sel uji Coombs lalu sentrifuge dengan kecepatan 3400 rpm selama 15 detik.
Lihat reaksi yang terjadi, bila terjadi aglutinasi maka reaksi silang cocok. Bila tidak
terjadi aglutinasi maka pemeriksaan harus diulang.

TRANSFUSI DARAH
Tindakan medic yang bertujuan mengganti komponen darah yang berkurang
Macam-macam Komponen Darah
• Darah utuh (WB)
• Darah endap (PRC)
• Darah merah cuci (WASHED RED CELLS)
• Trombosit konsentrat (TC)
• Fresh Frozen Plasma (FFP)
• Cryoprecipitate

Darah Utuh (Whole Blood)

Deskripsi:
Volume 350 ml WB mengandung:
- 350 ml darah donor
- 63 ml larutan pengawet antikoagulan
- Hb ±12 g/dl; Hct 35-45%
- Tidak terdapat faktor koagulasi labil (f.V dan VIII)
Indikasi:
- Perdarahan akut dengan hipovolemia
- Transfusi Tukar (Exchange transfusion)
 - Pengganti darah merah endap (packed red cell) saat memerlukan tranfusi sel
darah merah
Kontraindikasi:
- Resiko overload cairan misalnya pada anemia kronik dan gagal jantung
Resiko Infeksi:
- Tidak steril
- Dapat menularkan infeksi pada eritrosit atau plasma yang tidak terdeteksi
pemeriksaan rutin (HIV-1 dan HIV-2, hepatitis B dan C, virus hepatitis lain,
syphilis, malaria, TORCH dan Chagas disease)
Penyimpanan:
- Suhu +2° hingga +6°C, dapat terjadi perubahan komposisi akibat metabolism sel
darah merah
- Maksimal penyimpanan WB di Bank Darah 3 minggu
- Harus segera ditransfusikan 30 menit setelah keluar dari tempat penyimpanan
Perhatian:
- Golongan darah harus sesuai (ABO dan RhD compatible)
- Dilarang memasukkan obat-obatan ke dalam kantong darah
- Waktu transfusi maksimal 4 jam

Darah Endap (Packed Red Cells)

Deskripsi:
- Volume 150-250 ml eritrosit dengan jumlah plasma yang minimal
- Hb ± 20 g/dl (≥ 45 g/unit)
- Hct 55-75%
Indikasi
- Pengganti sel darah merah pada anemia
- Anemia karena perdarahan akut (setelah resusitasi cairan kristaloid atau koloid)
Perhatian:
- Resiko infeksi dan cara penyimpanan sama ddengan WB
- Pemberian sama dengan WB
- Penambahan infuse cairan NS 50-100 ml dengan infuse set-Y memperbaiki aliran
transfuse
- Waktu transfuse maksimal 4 jam kecuali pasien dengan Congestive Heart Failure,
AKI (Acute Kidney Injury dan Chronic Kidney Disease)

Darah Merah Cuci (Washed Erythrocyte)

Deskripsi :
 - Volume 260 ml ; Hct 0,57 L/L; leukosit < 1x108 ; plasma < 0,2 ml
Indikasi :
- Transfusi masif pada neonatus sampai usia < 1 tahun
- Transfusi intrauteri
- Penderita dengan anti-IgA atau defisiensi IgA dengan riwayat alergi transfusi
berat
- Riwayat reaksi transfusi berat yang tidak membaik dengan pemberian
premedikasi
Kontraindikasi:
- Defisiensi IgA yang belum pernah mendapat transfusi komponen darah
(eritrosit, plasma, trombosit)
- Defisiensi IgA yang tidak pernah mengalami reaksi alergi terhadap komponen
darah sebelumnya
- Belum diketahui mempunyai antibodi anti-IgA
- Tidak pernah mengalami reaksi transfusi berat terhadap eritrosit

TC (Trombocyte Concentrates)

Deskripsi :
- Setiap 50-60 ml plasma yang dipisahkan dari WB mengandung :
- Trombosit minimal 55 x 109
- Eritrosit < 1,2 x 109
- Leukosit < 0,12 x 109
Indikasi :
- Perdarahan akibat trombositopenia atau gangguan fungsi trombosit
- Pencegahan perdarahan karena trombositopenia (gangguan sumsum tulang)
kurang dari 10.000 /micro liter
- Profilaksis perdarahan pada pre operatif dengan trombosit kurang atau sama
dengan 50.000 /microliter, kecuali operasi trepanasi dan cardiovaskuler kurang
atau sama dengan 100.000 micro liter
Kontraindikasi :
- ITP tanpa perdarahan
- TTP tanpa perdarahan
- DIC yang tidak diterapi
- Trombositopenia terkait sepsis, hingga terapi definitif dimulai atau pada
hipersplenisme
Dosis : 1 unit TC/ 10 kgBB
- Pada dewasa 60-70 kg, 1 unit platelet (dari 4-6 donor) mengandung 240 x 109
trombosit meningkatkan tormbosit 20-40 x 109/L
- Peningkatan trombosit kurang efektif bila terdapat kondisi-kondisi
sepertinsplenomegali, DIC dan sepsis
Komplikasi :
- FNHTR (febrile non haemolytic) dan reaksi alergi urtikaria jarang terjadi

FFP (Fresh Frozen Plasma)

Deskripsi :
- Plasma dipisahkan dari satu kantong WB (maksimal 6 jam) dibekukan pada 25°C
atau lebih
- Terdiri dari faktor pembekuan stabil, albumin dan imunoglobulin; F VIII minimal
70% dari kadar plasma segar normal
- Volume 60-180 ml
Indikasi :
- Defisiensi faktor koagulasi (penyakit hati, overdosis antikoagulan-warfarin,
kehilangan faktor koagulasi pada penerima transfusi dalam jumlah besar)
- DIC
- TTP
Dosis :awal 10 -15 ml/kgBB
Perhatian :
- Reaksi alergi akut dapat terjadi dengan pemberian cepat
- Jarang terjadi reaksi anafilatik berat
- Hipovolemia bukan suatu indikasi
- ABO kompatibel untuk menghindari resiko hemolisis
- Diberikan segera setelah thawing dengan alat transfusi darah standar
- Faktor koagulasi labil, cepat terdegradasi, berikan maksimal 30 menit setelah
thawing
Penyimpanan :
- Pada -25°C atau lebih bertahan hingga 1 tahun
- Sebelum digunakan harus di thawing dalam air 30-37°C di bank darah, suhu
yang lebih tinggi akan merusak faktor pembekuan dan protein
- Sekali thawing harus disimpan pada suhu +2°C hingga +6°C

Cryoprecipitate

Deskripsi :
- Presepitasi dari FFP saat thawing 4°C dan dicampur 10-20 ml plasma
- Berisi setengah F VIII dan fibrinogen darah utuh ( F VIII 80-100 iu/kantong;
fibrinogen 150-300 mg/kantong)
Indikasi :
- Alternatif terapi F VIII konsentrat pada defisiensi :
• Faktor von Willebrand (von Willebrand’s disease)
 • Faktor VIII (hemofilia A)
• Faktor XIII
- Sumber fibrinogen pada gangguan koagulopati dapatan misalnya DIC
Perhatian :
- Berikan segera setelah thawing, dengan set transfusi darah standar, maksimal 30
menit setelah thawing (pencairan)

TRALI ( Transfusion Related Acute-Lung Injury)

Gejala :
- 6 jam setelah transfusi timbul sesak nafas dan batuk non produktif
- Hipotensi dan hilangnya volume sirkulasi, dapat timbul demam atau tidak atau
disertai menggigil
- Monositopenia atau neutropenia
- Infiltrat nodular bilateral (batwing), sesuai gambaran ARDS pada rö thorax
Diagnosa Banding :
- ALO karena gagal jantung ataupun ALO non kardiogenik
Terapi :
- Rawat ICU bila perlu
- Terapi sama seperti ARDS dengan berbagai penyebab
- Hindari DIURETIK
- Steroid masih diragukan penggunaannya
- Melaporkan kasus TRALI di bank darah

TACO (Transfusion Associated Circulatory Overload )

- ≈ fluid overload
- Transfusi terlalu cepat à gagal ventrikel kiri akut (acute left ventricular failure,
LVF) à dispneu, takipneu, batuk non produktif, peningkatan JVP, crackles pada
paru basal, frothy pink sputum, hipertensi dan takikardia
Terapi :
- STOP transfuse
- Terapi medis standar (oksigen, diuretik)

CATATAN PENTING
Setiap transfusi satu kantong darah dapat diberikan diuretik (misalnya furosemide
20-40 mg) pada kondisi anemia (dimana normovolemik atau hipervolemik, kadang
dengan gejala gangguan jantung)
Pembatasan transfusi satu kantong darah dalam 12 jam mengurangi resiko LVF