2. Nurkhaliza S. Maseng (711240222049) 3. Djesika Maulina Huda (711240222030) 4. Alivia S. M. Muslimin (711240222028) 5. Putri Fadila Pulukadaang (711240222019) 6. Elmawati Nasrun (711240222046)
Daftar Media Dan Reagensia Pada Laboratorium Mikrobiologi
Nama media Cara Membuat pH Komposisi Fungsi
Mueller Hinton Agar 1. Formula MHA adalah 38 pH medium Komposisi Media Medium Mueller Hinton Agar (MHA) gram / liter akuades. hingga Mueller Hinton mengandung sulfoamida, mencapai 7.3 ± Agar Bahan Jumlah trimethoprim, dan inhibitor tetrasiklin 2.Jadi untuk membuat 1 liter / 0.2 Beef Extract 2 gram yang rendah sehingga mendukung 1000 ml medium dibutuhkan Acid Hydrolysate of pertumbuhan bakteri non-fastidious sebanyak 38 gram serbuk Casein 17,5 gram yang bersifat patogen. medium MHA yang dilarutkan Starch 1,5 gram Medium Mueller Hinton Agar (MHA) kedalam 1 liter akuades. Agar 17 gram bersifat padat karena mengandung agar Aquadest 1 liter pH Medium ini sering digunakan dalam uji 3. Timbang medium akhir pada media sensitivitas antibiotik, dan menggunanakan timbangan Mueller Hinton direkomendasikan oleh CLSI (Clinical analitik agar lebih presisi. Agar : 7,3 ± 0,1 and Laboratory Standard Institute) pada suhu 25°C sebagai medium standar dalam 4. Larutkan 38 gram medium Cara pembuatan pengujian sensitivitas antibiotik. kedalam 1 liter akuades dengan Media Mueller Uji sensitifitas antibiotik dilakukan cara dipanaskan pada suhu 80°C Hinton Agar berdasarkan metode Kirby-Bauer sambil diaduk menggunakan Timbang 38 gram menggunakan kertas cakram (paper alat hot plate and magnetic media, tambahkan 1 disc) atau Epsilometer test (E-test). stirrer. Pastikan medium larut liter aquadest. Medium Mueller Hinton Agar (MHA) dengan sempurna dan tidak Panaskan sampai dapat dimodifikasi dengan terjadi penggumpalan. mendidih untuk penambahan darah domba atau serum 5. Atur pH medium hingga melarutkan media. darah sebanyak 5% dan nicotinamide mencapai 7.3 ± 0.2 Sterilkan dengan adenine dinucleotide untuk uji autoklaf pada suhu sensitibilitas tes bakteri Streptococcus 6. Mengatur pH medium dapat 121°C selama 15 sp. menggunakan alat pH meter menit. Tunggu suhu agar hasilnya lebih akurat. sampai hangat- Apabila saat pengukuran awal hangat kuku (45°C- medium mempunyai pH diatas 50°C). Tuang ke 7.3 maka dapat ditambah dalam cawan petri larutan HCL sedikit demi steril. Simpan pada sedikit. Dan sebaliknya apabila suhu 2-8ºC. pH medium lebih rendah dari 7.3 dapat ditambah larutan NaOH.
7. Medium yang telah jadi
dimasukkan kedalam erlenmeyer, tabung reaksi / tabung vial atau sesuai kebutuhan kemudian ditutup dengan tidak rapat / renggang.
8. Sterilisasi medium menggunakan autoklaf pada suhu 121°C dan tekanan 2 Atm selama 15 menit.
9. Setelah disterilisasi dan
medium masih bersifat cair, medium dalam tabung reaksi dimiringkan hingga 45- 50°C. Medium dalam erlenmeyer dituang dalam cawan steril secara aseptis. 10. Tunggu medium hingga memadat dan simpan pada suhu 2-8°C apabila tidak digunakan. Plate Count Agar 1.Formula PCA adalah 17,5 pH medium Tryptone 5 gram Medium Plate Count Agar (PCA) gram / liter akuades. hingga Yeast extract 2.5 merupakan medium yang digunakan mencapai 7.0 ± gram dalam metode standar perhitungan 2.Jadi untuk membuat 1 liter / 0.2. Agar 9 gram jumlah bakteri dalam berbagai sampel 1000 ml medium dibutuhkan Distilled water 1 uji seperti air, air limbah, makanan dan sebanyak 17,5 gram serbuk liter produk dairy. medium PCA yang dilarutkan Final pH 7,0 ± 0.2 Medium Plate Count Agar (PCA) juga kedalam 1 liter akuades. @ 25°C disebut sebagai Standard Medium agar (SMA) yang bersifat tidak selektif atau 3.Timbang medium dapat digunakan untuk menumbuhkan menggunanakan timbangan berbagai jenis mikroorganisme. analitik agar lebih presisi. Medium Plate Count Agar (PCA) tidak cocok digunakan untuk diagnosis 4.Larutkan 17,5 gram medium penyakit atau kondisi lain pada kedalam 1 liter akuades dengan manusia. cara dipanaskan pada suhu 80°C Medium Plate Count Agar (PCA) tidak sambil diaduk menggunakan mengandung bahan selektif sehingga alat hot plate and magnetic baik digunakan untuk perhitungan stirrer. Pastikan medium larut mikroorganisme. dengan sempurna dan tidak Medium Plate Count Agar (PCA) terjadi penggumpalan. dapat digunakan untuk metode pour plate atau surface plate. 5.Atur pH medium hingga Medium Plate Count Agar (PCA) mencapai 7.0 ± 0.2. dapat dipanaskan hingga 3 kali, pemanasan berulang lebih dari 3 kali 6.Mengatur pH medium dapat akan megurangi menggunakan alat pH meter agar hasilnya lebih akurat. Apabila saat pengukuran awal medium mempunyai pH diatas 7.0 maka dapat ditambah larutan HCL sedikit demi sedikit. Dan sebaliknya apabila pH medium lebih rendah dari 7.0 dapat ditambah larutan NaOH.
7.Medium yang telah jadi
dimasukkan kedalam tabung reaksi / tabung vial sesuai kebutuhan dan ditutup dengan tidak rapat / renggang.
8.Setelah disterilisasi dan
medium masih bersifat cair, medium dalam tabung reaksi dimiringkan hingga 45 - 50°C. Medium dalam erlenmeyer dituang dalam cawan steril secara aseptis.
9.Tunggu medium hingga
memadat dan simpan pada suhu 2-8°C apabila tidak digunakan.